ACTUALIZACIÒN

EN
DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS

Dr. Dennis López Vaca

 Pull clìnico (Mètodo clìnico)
1. Fiebre o sudoración nocturna
2. Pèrdida de peso
3. Tos con o sin espectoraciòn por mas de 15
días
4. Rx sugestiva de TB
5. Bk seriada +
 DIAGNÓSTICO
• CLÍNICO – EPIDEMIOLÓGICO (pull clínico >98%S)
• BK Seriada x 3
• PT (Prueba de tuberculina)
• IGRA (Interferon Gamma Release Assays)
• Rx de tórax ?? TAC.
• PCR Xpert
• Xpert ultra
• LAM (Lipoarabinomanano)
• Cultivo líquido MGIT ( Mycobacteria Growth Indicator Tube)
98% S GOLD STANDARD
• Cultivo Lowenstein Jensen (15-92%)S
– 20, 40, 60 días
NO HAY LAB VALIDADOS PARA SEROLOGÍA EN BOLIVIA
 METODOS BACTERIOLOGICOS
BACILOSCOPIA
• Mètodo màs fácil y accesible: Se realiza el
examen microscòpico directo de una muestra
de espectoraciòn, extendida sobre un
portaobjetos y teñida con la tinción de Ziehl –
Nielsen (BAAR).
CULTIVO
• Mayor sensibilidad para el diagnostico y
seguimiento del tratamiento.
Medios Sòlidos: (a base de huevo)
• Ogawa:
– En Bolivia estandarizado el método Kudoh en
medio de Ogawa acidificado
• Lowenstein Jensen
 Reporte del resultado del cultivo
RESULTADO REPORTE
Contaminado Alteraciòn fisicoquímica del medio
Negativo Sin desarrollo después de 60 días de
incubaciòn
Numero de colonias De 1 a 19 colonias contables
+ De 20 a 100 colonias
++ Mas de 100 colonias (Colonias separadas)
+++ Colonias incontables (Colonias
confluentes)
 Indicaciones del cultivo
• Paciente con resultado de baciloscopia de 1 a 9 BAAR
• Sintomàtico respiratorio con una baciloscopia seriada negativa,
tratado con antibióticos (no quinolonas) y sin mejoría clínica.
• Diagnostico de TB a niños menores y mayores de 5 años. (obtener
la muestra por aspirado gástrico)
• TB presuntiva extrapulmonar
• Para dar condición de egreso como curado en todo caso de TB
sensible al 4to mes. (si se prolongo la fase intensiva deberá
contar con cultivo negativo al 5to mes de tratamiento).
• En el seguimiento de tx TB –RR, TB-MDR y TB –XDR.
• No conversión bacteriológica al 2do mes de tratamiento
supervisado.
• Presencia de un control bacteriológico positivo a partir del 3er
mes de tratamiento supervisado.
 Cultivo en medio líquido:
MGIT (Micobacterium Grow Indicator Tube)
• Metodo automatizado que identifica por cultivo la actividad
metabólica de la bacteria, utilizando la propiedad de los
componentes del medio líquido, mediante fluorescencia.

• Realiza dx, tipificación de especies e identificación de drogo

resistencia a fármacos de 1era y 2da línea.

• Resultados a partir del dìa 14.

• Procesa todo tipo de muestras, excepto sangre y orina.

 BIOLOGÌA MOLECULAR
GeneXpert MTB/RIF
• Reacciòn en cadena de la polimerasa (PCR) en
tiempo real, en un cartucho que puede
detectar M. Tuberculosis y resistencia a la
Rifampicina en menos de 2 horas
INDICACIONES DE GeneXpert MTB/RIF
• Casos de TB bacteriológicamente confirmados con
Baciloscopìa
• Casos de TB BK(-) con signos y síntomas sugestivos de TB
• Tuberculosis presuntiva en privados de libertad
• Tuberculosis presuntiva en personas con VIH/SIDA
• TB con antecedente de recaída, fracaso y perdida en el
seguimiento.
• TB presuntiva en el personal de salud
• Contactos TB MDR/RR
• Dx de TB en niños menores y mayores de 5 años.
RESULTADO
Mycobacterium tuberculosis no
detectado
Mycobacterium Tuberculosis detectado y
resistencia a la Rifampicina no detectada
Mycobacterium Tuberculosis detectado y
resistencia a la Rifampicina detectada
Resistencia a la Rifampicina
indeterminada
Invalidado/error
INTERPRETACIÒN
Muestra negativa para Mycobacterium
Tuberculosis
Muestra positiva para Mycobacterium TB
que no presenta resistencia a Rifampicina
Muestra positiva para Mycobacterium TB
que presenta resistencia a Rifampicina
Carga bacteriana muy baja
Solicitar examinar nueva muestra
 Xpert MTB/RIF Ultra: innovación en el
diagnóstico de la tuberculosis

• Es una prueba que utiliza la misma plataforma tecnológica de GeneXpert

que su predecesor Xpert MTB/RIF.
• Consiste en una PCR anidada, que es una modificación de la PCR
convencional, que amplifica las secuencias del ADN en dos rondas con dos
pares de iniciadores.
• En una primera fase, se hace una PCR con dos iniciadores externos que
amplifica una región extensa del ADN que contiene la secuencia diana;
luego, en una segunda fase de amplificación sirve de molde para una
segunda PCR con dos iniciadores internos que amplifican una región interna
más pequeña.
• Teniendo en cuenta lo anterior, la longitud del producto de amplificación de
la segunda PCR será de menor tamaño que la de la primera; esta forma de
amplificación mejora la sensibilidad y especificidad del examen
 Xpert MTB/MDR
• El ensayo Xpert MTB/MDR permite realizar detecciones
moleculares rápidas.

• Combinada con la prueba de primera línea Xpert

MTB/RIF Ultra, el ensayo Xpert MTB/MDR establece
nuevos marcos de referencia al detectar mutaciones
asociadas a resistencia a isoniazida (INH),
fluoroquinolonas (FLQ), fármacos inyectables de
segunda línea (second-line injectable drug, SLID)
(amikacina, kanamicina, capreomicina) y etionamida
(ETH) en una sola prueba.
• Obtención más rápida de resultados
moleculares
• Resultados en <90 minutos
• La misma facilidad de uso que tenemos con el
ensayo Xpert MTB/RIF Ultra
• Se realiza en las plataformas GeneXpert®
existentes
• Disponible en Nuestro medio (INLASA)
 Interferón gamma (IGRA) en
tuberculosis
• La prueba IGRA (Interferon Gamma Release
Assays) mide la liberación a la sangre por los
glóbulos blancos, de una sustancia, llamada
interferón gamma, cuando las células se
exponen a los antígenos específicos de la
tuberculosis.
• La prueba IGRA no la realizan todos los
laboratorios.
La prueba IGRA no se utiliza como prueba de detección para la
población general, pero se utiliza para detectar a las personas
que tienen un alto riesgo de padecer tuberculosis (TB), como:

• Personas con VIH o el SIDA, lo que las hace más vulnerables

a una infección de tuberculosis.
• Colectivos y personas que viven en espacios reducidos
como residencias de ancianos y centros penitenciarios,
también en escuelas y centros para menores.
• Trabajadores sanitarios y otras personas cuyas ocupaciones
los ponen en contacto cercano con quienes pueden tener
una TB activa.
• Las personas que han estado en contacto cercano con
alguien que tiene un caso activo de TB.
• Aquellas personas que se inyectan drogas.
 LAM en orina
• La prueba de determinación del lipoarabinomanano
mediante inmunocromatografía de flujo lateral (LAMICL) en
orina es un método de inmunocaptura para la detección del
antígeno micobacteriano
• Aunque la sensibilidad de la prueba es baja, se puede usar
como una prueba rápida en la cabecera del paciente para
incluir en el diagnóstico de TB a las personas positivas al VIH
• Alere Determine TB LAM Ag es actualmente la única prueba
comercializada de LAM-ICL en orina avalada por la OMS.
• En pacientes hospitalizados, la OMS recomienda utilizar
la LAM-ICL como ayuda al diagnóstico de la TB activa en
adultos, adolescentes y niños positivos al VIH con signos y
síntomas de TB (pulmonar o extrapulmonar) e infección
avanzada por el VIH o que están gravemente enfermos, o
que tienen conteo de linfocitos CD4 inferiores a 200
células/ml, sin tener en cuenta los signos y los síntomas
de TB.

• En pacientes ambulatorios, la OMS sugiere utilizar la

LAM-ICL como ayuda al diagnóstico de la TB activa en
adultos, adolescentes y niños positivos al VIH que
presentan signos y síntomas de TB (pulmonar o
extrapulmonar), están gravemente enfermos o tienen
conteo de linfocitos CD4 inferiores a 100 células/ml, sin
tener en cuenta los signos y los síntomas de TB.
 LPA- Genotype MTBDRplus
• Las LPA (Line Probe Assay) son una familia de
análisis de ADN en tiras que detectan
mutaciones asociadas con la
farmacorresistencia por PCR.
• Es un sistema de amplificación de acidos
nucleicos e hibridación reversa en tiras con
sondas inmovilizadas
• Identifica Complejo M. Tuberculosis y mas de
45 micobacterias que producen enfermedad
en el humano
• Tambien detecta la resistencia de M.
Tuberculosis a la H (Isoniazida), detectando
mutaciones en los genes katG e inhA que
condicionan el 85% de las resistencias a H.
• Detección de mutaciones en el gen rapB que
condiciona 95% de resistencia a R
• Mutaciones en el gen rapB que da 95% de
resistencia a FQs
• Mutaciones en los genes gyrA y gyrB que
condicionan 90 a 95% de resistencia a FQs y
FISLs
La OMS recomienda utilizar las LPA-SL en las
siguientes situaciones:
• En los pacientes con TB-RR/MDR confirmada,
puede usarse la LPA SL como prueba inicial en
lugar de la PSF fenotípica a partir del cultivo,
con el fin de detectar la resistencia a las FQ y
la AMK.
• Las LPA-SL también son útiles en la detección
de resistencia a las FQ antes de iniciar el
tratamiento de la TB-rH
 MALDI-TOF
• Se denomina MALDI por sus siglas en inglés Matrix-Assisted Laser
Desorption/Ionization (desorción/ionización láser asistida por matriz) y
TOF por el detector de iones que se acopla al MALDI y cuyo nombre
procede también de sus siglas en inglés Time-Of-Flight
• Consiste en una ionización suave del analito que provoca la
vaporización de intactas moléculas termolábiles, no volátiles tales
como proteínas y lípidos en un rango de peso molecular entre 2 a 20
kDa, a un relativo bajo costo y resultado inmediato.
• La espectrometría de masas basada en Matrix-assisted laser
desorption/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) es una
espectrometría de ionización suave que se basa en la
comparación del espectro proteico producido por una muestra
en particular, respecto al de una base de datos de referencia
• MALDI-TOF ha sido utilizado en la identificación de bacterias y
levaduras y se ha caracterizado por ser un método barato,
rápido y simple que puede ser además ser implementado en
laboratorios de microbiología general
 DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS EXTRAPULMONAR
LOCALIZACIÒN PROCEDIMIANTO
TB ganglionar Biopsia para estudio anatomopatológico y
cultivo para micobacterias
TB meníngea ADA en LCR, TAC, cultivo para
micobacterias en LCR
TB pleural Radiografìa de tórax, ADA en líquido
pleural, biopsia pleural y cultivo para
micobacterias
TB peritoneal Ecografìa abdominal, ADA en líquido
ascìtico, biopsia peritoneal y cultivo de
micobacterias.
TB osteoarticular RX de columna vertebral, TAC/RMN,
Biopsia osteoarticular y cultivo para
micobacterias.
TB pericardica Rx de tórax, ADA en líquido pericárdico,
Biopsia pericárdica y cultivo de
micobacterias
TB renal Examen general de orina, ecografìa renal
y cultivo de micobacterias en orina
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• Arch Bronconeumol 2011;47:521-30 - Vol. 47 Núm.10 DOI:
• American Journal of Health-System Pharmacy November 15, 2013 vol. 70 no. 22 1984-
1994 10.1016/j.arbres.2011.06.018
• https://www.cdc.gov/tb/esp/topic/basics/default.htm
• Copyright 2017. © 2016 Elsevier España, S.L.U. y Sociedad Española de Medicina
Interna (SEMI)
• Determinación del interferón-gamma en tuberculosis - Medigraphic
• Evaluation of the fully automated Bactec MGIT 960 system for the susceptibility testing
of Mycobacterium tuberculosis to first-line drugs: a multicenter study" Fanourios
Kontosa, Maria Maniatia, Christos Costopoulosb, Zoe Gittic, Stavroula Nicolaoub, Efymia
Petinakia, Spyridoula Anagnostoub, Ioannis Tselentisc and Antonios N. Maniatis Journal
of Microbiological Methods Volume 56, Issue 2, February 2004, Pages 291–294
doi:10.1016/j.mimet.2003.10.015
• http://www.paho.org/data/index.php/es/
• http://www.paho.org/salud-en-las-americas-
2012/index.php?option=com_content&view=article&id=24:bolivia&Itemid=135&lang=e
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