Transferencia de O2

CONCEPTOS BÁSICOS

Los reactores bioquímicos son ampliamente usados en la

industria alimenticia, fermentaciones microbianas, en
sistemas de tratamiento de aguas y en algunos procesos
biomédicos.

En todos estos reactores se involucran diferentes fases y

tanto sustratos como nutrientes deben ser transferidos de
una fase a otra.

Para hacer efectivo el grado de conversión deseado de

reactantes a productos, o el suministro suficiente de
nutrientes para el mantenimiento de un microorganismo, la
transferencia de masa debe realizarse de una forma muy
intensa y eficiente.
En fermentaciones aeróbicas, se considera la transferencia de
oxígeno de la fase gaseosa a la fase líquida como el problema
más importante en comparación con el suministro de cualquier
otro nutriente, ya que el oxígeno es menos soluble en agua
que las fuentes de carbono (generalmente en exceso) y otros
nutrientes.

Por ejemplo el azúcar se disuelve entre 500 – 600 g/L mientras

que la máxima solubilidad del oxígeno a 1 atm de aire y 20 ºC
en agua pura es de solamente 9,2 mg/L. Así, no es posible
proveer inicialmente un cultivo microbiano con todo el oxígeno
necesario para la respiración completa, por lo que éste debe
ser suministrado durante el crecimiento a una velocidad
suficiente para satisfacer la demanda de los organismos.
 TEORÍA DE LA PELÍCULA

De acuerdo con la teoría de la película, aún cuando

el seno de ambos fluidos se encuentre
perfectamente mezclado, la turbulencia en cada
fluido disminuye cerca de la interfase y se forma una
película fina de fluido relativamente en reposo,
estancada o en régimen laminar a cada uno de los
lados de la interfase y de un espesor δ donde se
produce la más alta resistencia a la transferencia de
masa.
La concentración de oxígeno varía en zonas cercanas a la
interfase. Si bien es cierto que en ambas películas hay
resistencia, dado que O2 es muy poco soluble en agua, la
mayor parte de la resistencia a la transferencia de materia
tiene lugar en la película de líquido. En el seno de los fluidos
(al estar perfectamente mezclados) la concentración tiende a
ser constante.

Para efectos prácticos generalmente se supone despreciable

la resistencia al transporte en la interfase, lo que equivale a
suponer que las fases se encuentran en equilibrio en el plano
de contacto.
Resistencia a la transferencia. El oxígeno para ser
metabolizado por el microorganismo debe pasar a través de
una serie de resistencias al transporte, dependiendo de la
hidrodinámica de la burbuja, temperatura, actividad celular y
densidad, composición de la solución y otros factores.

Las resistencias involucradas en el transporte de oxígeno

desde el interior de la burbuja de gas hasta el lugar de
reacción en el interior de la célula son:

1. Difusión desde el seno o núcleo del gas a la interfase

gas – líquido.

2. Movimiento a través de la interfase gas – líquido.

3. Difusión del soluto a través de la región estancada
adyacente a la burbuja.

4. Transporte del soluto a través del seno del fluido líquido.

5. Movimiento a través de la segunda región estancada

asociada con la célula.

6. Transporte difusivo hacia el interior de la célula.

7. Si las células están en un flóculo o agregado, difusión a

través del sólido hasta cada célula individual.

8. Transporte a través del citoplasma hasta el lugar de

reacción.
Características reológicas. Los microorganismos,
sustratos, productos y aire presentes en todas las
fermentaciones hacen que un caldo de cultivo
exhiba una reología compleja, desviándose en
distintas formas del comportamiento newtoniano.

La viscosidad constituye un importante aspecto de

la reología, los parámetros reológicos del medio
(generalmente acuoso) en reactores biológicos,
influencian la magnitud del mezclado entre fases y
consecuentemente las velocidades de transferencia
de masa y calor.
 Solubilidad de gases. La solubilidad de gases en
medio líquido para un gas poco o moderadamente
soluble es descrita por la Ley de Henry:

PA P
CA = = yA
H H

Donde: CA = solubilidad de A en la fase líquida [mol A / m3]

P = presión total en la fase gaseosa [atm]
PA = presión parcial de A en la fase gaseosa [atm]
H = constante de la ley de Henry [atm . m3 / mol A]
yA = fracción molar de A en la fase gaseosa
Solubilidad del oxígeno. Para el caso del oxígeno en el
agua, la Tabla ilustra la variación de la constante de la ley
de Henry con la temperatura
Efecto de los solutos en el cultivo: En presencia
de sales y solutos orgánicos, las solubilidades de
gases poco solubles generalmente decrece.

Los caldos de fermentación típicamente contienen

sales y azúcares, lo cual requiere hacer una
corrección con respecto a la solubilidad en agua
pura.

La correlación que permite corregir la solubilidad

de oxígeno en agua cuando esta contiene solutos
es:
 c*A0
log = 0,5 Σ Hi zi2 ciL + Σ Kj cjL
c*

* : Solubilidad de oxígeno en agua

cA0
c * : Solubilidad de oxígeno en soluciones acuosas
Hi : Constante para el componente iónico i, Ll mol
zi : Estado de oxidación del componente iónico i
ciL : Concentración de i, mol l L
Kj : Constante para el componente no iónico j, Ll mol
cjL : Concentración de j, mol l L
Algunos valores típicos de Hi en L/mol para oxígeno a 25 ºC son
dados en la Tabla
Parámetros de solubilidad Kj para oxígeno.
 CONSUMO DE OXÍGENO EN CULTIVOS
CELULARES
- Para muchos biorreactores, la resistencia más importante
es la que ocurre en la película líquida que rodea a la
burbuja. En ese caso se dice que es la resistencia que
controla el proceso
- La velocidad a la que las células consumen oxígeno en
los fermentadores determina la velocidad a la que este
debe transferirse desde el gas al líquido.
- Los factores que afectan la demanda son: la especie
celular utilizada y la fase de crecimiento del cultivo.
EN ESTADO ESTACIONARIO:

Película
líquida

BURBUJA
DE O2 O2 CÉLULA

Velocidad de transferencia Velocidad de consumo de

de O2 desde las burbujas = O2 por las células

kL (C * – CA) = q0.x

C*: Solubilidad de O2 en el caldo

q0 : Velocidad específica de consumo de O2 : g O2 / (g célula.s)
x : Concentración de células : g células / L
- kL caracteriza la velocidad de transferencia de O2 de los fermentadores.
Si kL es pequeña entonces la capacidad del reactor es limitada.
- Si la velocidad de agitación aumenta, la película disminuye y kL
aumenta, pero como el metabolismo celular es constante, entonces CA
aumenta.
-Si la velocidad de consumo de O2 aumenta y kL se mantiene constante,
entonces CA disminuye
- Para una serie de condiciones x es máxima cuando CA = 0

kL.C * Representa la concentración máxima de

xmax =
q0 células que puede soportar el fermentador

- Si la cantidad de células requeridas es mayor que xmax entonces kL debe

mejorarse o se debe aumentar C* (inyectando O2 puro o aire enriquecido
con O2 o aire a alta presión)
 EJERCICIO: La bacteria E. coli se va a utilizar en un cultivo
que utiliza un fermentador de 12 litros en estado estacionario.
La velocidad específica de consumo de oxígeno por la E. coli
es 5 mmol/g.h y el coeficiente de transferencia de masa es
0,15 s-1.

Como información adicional se conoce que el caldo de cultivo

tiene 10 g de glucosa y 1,5 g de Na2HPO4 por litro de solución
(más otras sustancias en pequeñas cantidades) y que se
inyecta aire enriquecido con oxígeno (25% molar de O2) a 1
atm de presión total y 25 oC

Calcule la máxima concentración de células que puede

soportar el fermentador.
Agentes antiespumantes: La mayoría de los
cultivos produce una gran variedad de agentes
espumantes.

La formación de espuma en los fermentadores es

muy común, particularmente en los sistemas
aerobios. Ésta se forma porque las células liberan
proteínas, enzimas extracelulares y compuestos
metálicos, y al morir liberan su ADN y proteínas
intracelulares.
La excesiva acumulación de espuma causa infinidad de
problemas de operación:

- Proporciona una vía de acceso a los organismos

contaminantes.

- Produce un bloqueo de la salida de gases.

- Los líquidos y células atrapados en la espuma

representan una pérdida del volumen del biorreactor.

- Las condiciones allí existentes son desfavorables para

la actividad metabólica. Además, las células frágiles
pueden ser dañadas por la espuma retenida.
La espuma puede controlarse:

-Con la adición de detergentes,.

-Con la adición de antiespumantes.
-Reduciendo la velocidad del flujo de aire.
-Incrementando el tamaño de la zona de liberación en la
columna.
-Con el rompimiento mecánico.
Sin embargo, muchos agentes antiespumantes son
sustancias fuertemente reductoras de la tensión
superficial (agentes tensoactivos), estimulan la
coalescencia de las burbujas reduciendo así el área
interfasial y exhibiendo un marcado efecto sobre el
coeficiente de transferencia de masa.

Con el fin de mantener el carácter no coalescente del

medio y elevados valores del coeficiente de transferencia,
a veces es preferible utilizar métodos mecánicos antes
que químicos, ya que de esta manera no se alteran las
propiedades del líquido
Temperatura: La temperatura en las fermentaciones
aerobias afecta tanto la solubilidad del oxígeno C*AL como
al coeficiente de transferencia de masa kL.

Un aumento de temperatura produce una disminución

drástica de C*AL y, por tanto, de la fuerza impulsora de la
transferencia de materia (C*AL – CAL). Al mismo tiempo
aumenta la difusividad de oxígeno en la película líquida
que rodea a las burbujas, lo que produce un incremento
en kL.
El efecto neto de la temperatura sobre la
transferencia de oxígeno depende del intervalo de
temperatura considerado. Para temperaturas entre
10 y 40 ºC un aumento de la temperatura supone un
aumento en la velocidad de transferencia de
oxígeno. Por encima de los 40 ºC la solubilidad del
oxígeno disminuye de forma apreciable.
pH: Generalmente hay un valor de pH del medio
para el cual la velocidad de un bioproceso es
máxima. Éste varía entre 6,5 y 7,5 para bacterias,
entre 5 y 7 para mohos y entre 4 y 5 para levaduras.
Presión de gas: La presión total del gas y la presión
parcial del oxígeno utilizadas para airear los
fermentadores afectan el valor de la solubilidad.

En algunas fermentaciones para aumentar la

transferencia de materia se utiliza aire enriquecido en
oxígeno o incluso oxígeno puro.

La solubilidad del oxígeno puede aumentar también

inyectando aire comprimido a alta presión. Sin embargo,
todas estas soluciones aumentan los costos de
operación del fermentador y algunas veces es posible
que el cultivo sufra un efecto inhibidor al estar expuesto a
presiones parciales de oxígeno demasiado elevadas.
Agregados de células: La transferencia de oxígeno
se ve afectada por la presencia de células en los
caldos de fermentación. Su efecto sobre la
transferencia de oxígeno dependerá del tipo de
organismo utilizado, de su morfología y de su
concentración.

Las células, proteínas y otras moléculas que se

absorben en la interfase gas – líquido forman una
capa o manto interfasial que disminuye el área de
contacto entre el gas y el líquido dificultando la
transferencia de masa.
Esterilización: Las fermentaciones requieren
condiciones asépticas. El mantenimiento del reactor
libre de organismos indeseados es especialmente
importante en los cultivos de crecimiento lento, los
cuales pueden verse invadidos rápidamente por
contaminantes.

Generalmente, el 3% – 5% de las fermentaciones

industriales se pierde debido a fallos en los procesos
de esterilización. La frecuencia y causas de la
contaminación difiere considerablemente de un
proceso a otro.
Esterilización del equipo: Generalmente el equipo se
esteriliza con vapor de agua a presión. Cuando las
limitaciones de temperatura impiden la utilización de este
método se emplean agentes químicos líquidos y
gaseosos de acuerdo con las circunstancias.

La luz ultravioleta, las radiaciones ionizantes y las

vibraciones ultrasónicas encuentran aplicación como
agentes auxiliares potenciadores de otros procesos
esterilizantes.

El agente o la condición de esterilizante debe actuar

eficientemente durante el proceso de esterilización, pero
una vez finalizado este proceso no debe presentarse una
acción residual.
Esterilización del medio: El objetivo de la esterilización
de un medio es la remoción o eliminación de toda forma
de vida animal o vegetal, macroscópica o microscópica,
existente en el medio.

El grado de esterilización de un medio depende del

proceso. En algunos procesos las condiciones del
medio favorecen la actividad del microorganismo
deseado y afectan la actividad de los contaminantes
como por ejemplo la fermentación alcohólica y la
producción de levadura para panificación.
Esterilización del aire: El número de microbios en el
aire es del orden de 103 a 104 [microorganismos / m3];
todos los métodos de esterilización de medios pueden
ser empleados con aire, sin embargo, la esterilización
de aire mediante calor no sólo es impráctica sino
ineficiente debido a los bajos valores de la capacidad
calorífica y de la conductividad térmica del aire. Uno de
los métodos más eficientes es la esterilización de aire
con filtros fibrosos y filtros membrana.

Por otro lado, el aire debe ser precalentado a la

temperatura de operación del reactor para evitar un
choque térmico que afecte la estabilidad del
microorganismo.