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Artículo original
Departamento de Periodoncia, Instituto Nathajirao G Halgekar de Ciencias Dentales y Centro de Investigación de Maratha Mandal, Universidad de Ciencias de la Salud Rajiv Gandhi
de Belgaum, Karnataka, India
Resumen
Antecedentes: La periodontitis, una enfermedad inflamatoria de etiología multifactorial, tiene bacterias que juegan un papel fundamental en su patogenia.
Prevotella intermedia juega un papel importante en el inicio y la progresión de la enfermedad. Objetivos: El objetivo fue detectar anticuerpos
inmunoglobulina G (IgG) contra P. intermedia en sangre de individuos periodontalmente sanos y pacientes con periodontitis crónica y comparar sus
niveles. Materiales y Metodología: Se incluyeron un total de 72 sujetos, 36 sujetos en el grupo de sanos y 36 sujetos en el grupo de periodontitis
crónica. Se obtuvieron muestras de placa subgingival y muestras de sangre de cada sujeto de estudio. Las muestras fueron procesadas en el
Departamento de Microbiología e Inmunología. P. intermedia se confirmó mediante el método de cultivo y los niveles séricos de IgG se evaluaron
mediante la técnica ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas). La comparación entre los grupos de periodontitis sana y crónica se realizó
mediante la prueba t independiente. Resultados: los niveles de IgG contra P. intermedia fueron mayores en el grupo de periodontitis crónica en
comparación con el grupo sano, y la diferencia fue estadísticamente significativa. Interpretaciones y conclusiones: Los niveles elevados de anticuerpos
IgG contra P. intermedia están asociados con la enfermedad periodontal. Esta elevada actividad de anticuerpos podría ayudar a neutralizar los efectos
de la bacteria. El nivel de anticuerpos IgG contra P. intermedia es un indicador prometedor en el diagnóstico serológico de la enfermedad periodontal. En
la periodontitis crónica, el título de anticuerpos en el suero del paciente contra P. intermedia aumenta y podría utilizarse como ayuda diagnóstica.
Dixitraj, et al.: Detección de anticuerpos contra Prevotella intermedia en pacientes con periodontitis crónica e individuos periodontalmente sanos
La inmunoglobulina G (IgG), el tipo de anticuerpo más abundante, se sujetos con periodontitis, después de que se retiraron cuidadosamente la
encuentra en todos los fluidos corporales. El papel fundamental de las IgG placa supragingival y el cálculo, se insertó una cureta estéril en el sitio
es activar la respuesta inmune humoral, el sistema del complemento y la seleccionado y se obtuvo la muestra de placa subgingival moviendo la cureta
fagocitosis de los microorganismos. IgG reacciona con macrófagos, neutrófilos a lo largo de la superficie de la raíz coronalmente. Las muestras de placa se
y células asesinas naturales y puede activar el sistema del complemento[11] transfirieron inmediatamente en un RTF. Se recogieron aproximadamente 10
y tiene un papel protector en la patogénesis de la enfermedad. En la ml de sangre venosa del paciente. Las muestras de sangre se dejaron
periodontitis crónica se producen anticuerpos contra diversos coagular durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las muestras se
periodontopatógenos y activan células del sistema inmunitario. Los estudios centrifugaron a 3000 RPM durante 15 min. Luego, las muestras de suero se
sobre varios periodontopatógenos y sus principales antígenos han demostrado extrajeron y se mantuvieron en tubos adjuntos.
que, en general, la mayoría de los títulos de anticuerpos IgG están Estos apéndices de tubos se almacenaron a –80ºC hasta su análisis en
involucrados en las investigaciones de la reacción inmunitaria humoral.[12] laboratorio.[15]
Dixitraj, et al.: Detección de anticuerpos contra Prevotella intermedia en pacientes con periodontitis crónica e individuos periodontalmente sanos
Tabla 1: Edad y sexo de la población de estudio Tabla 2: Resultados del ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
Muestra Años Sexo Muestra Años Sexo Muestra valores de IgG Muestra valores de IgG
H4 31 Femenino PC 4 31 Femenino H3 4 PC 3 24
H5 32 Femenino PC 5 50 Femenino H4 5 PC 4 2
H 11 38 Femenino PC 11 54 Femenino H 10 9 PC 10 28
H 12 30 Femenino PC 12 32 Femenino H 11 7 PC 11 27
H 15 35 Femenino PC 15 33 Femenino H 14 8 PC 14 6
H 16 30 Masculino PC 16 32 Femenino H 15 9 PC 15 31
H 18 31 Masculino PC 18 40 Femenino H 17 10 PC 17 35
H 21 38 Masculino PC 21 48 Femenino H 20 11 PC 20 42
H 22 33 Masculino PC 22 56 Femenino H 21 13 PC 21 38
29 53 Masculino PC 29 42 Femenino H 28 9 PC 28 39
H 32 36 Femenino PC 32 48 Femenino H 31 13 PC 31 44
H 35 34 Femenino PC 35 40 Femenino H 34 9 PC 34 9
PC=periodontitis crónica H 36 4 PC 36 29
del grupo sano (±desviación estándar) fue de 36,36 ± 7,86. La edad media
del grupo de periodontitis crónica fue de 44,97 ± 11,77. El 77,78% de los 12 eran hombres y 24 mujeres, es decir, el 33,33% de los pacientes con
sujetos del grupo sano se encontraban en el grupo de edad de 30 a 39 años; periodontitis crónica eran hombres y el 66,67% mujeres.
El 13,89% de los sujetos del grupo sano se encontraban en el grupo de edad
La Tabla 5 y el Gráfico 3 muestran la comparación de los grupos de
de 40 a 49 años; El 8,33% de los sujetos del grupo sano estaban en el grupo
periodontitis crónica y sana con niveles de IgG (unidades relativas/ml) frente
de edad >50 años; El 33,33% de los sujetos del grupo de periodontitis crónica
a P. intermedia mediante prueba t independiente . El valor medio de IgG
se encontraban en el grupo de edad de 30 a 39 años; El 33,33% de los
(±DE) frente a P. intermedia en el grupo sano fue de 8,93±2,88 y en el grupo
sujetos del grupo de periodontitis crónica se encontraban en el grupo de
de periodontitis crónica fue de 28,67±13,85. Se obtuvo un valor de P de
edad de 30 a 39 años; y el 33,33% de los sujetos del grupo de periodontitis
crónica estaban en el grupo de edad >50 años. 0,0001, lo que implica que los resultados son estadísticamente significativos
(P < 0,05 - los resultados son estadísticamente significativos).
La Tabla 4 y el Gráfico 2 muestran la distribución de hombres y mujeres en
los grupos de periodontitis crónica y sana. Del total de 36 sujetos del grupo
sano, 23 eran hombres y 13 mujeres, es decir, el 63,89% de los pacientes
Discusión
sanos eran hombres y el 36,11% mujeres. Del total de 36 sujetos en la P. intermedia se ha aislado con frecuencia de abscesos odontogénicos,
periodontitis crónica, saliva, lengua y personas sanas y enfermas.
Dixitraj, et al.: Detección de anticuerpos contra Prevotella intermedia en pacientes con periodontitis crónica e individuos periodontalmente sanos
Dixitraj, et al.: Detección de anticuerpos contra Prevotella intermedia en pacientes con periodontitis crónica e individuos periodontalmente sanos
gozaban de buena salud y tenían al menos 16 dientes sin corona. P. intermedia, F. nucleatum y S. sanguis permanecieron esencialmente
La placa subgingival se recolectó del sitio de sondaje más superficial y más constantes durante el experimento, mientras que los anticuerpos IgG contra
profundo en cada sextante de la dentición. P. gingivalis disminuyeron durante el período inicial de higiene bucal y el
En total, se recolectaron 6030 muestras de placa subgingival de 504 sujetos. período posterior de acumulación de placa a un promedio del 84,5 % del
Las edades de los sujetos oscilaron entre 17 y 64 años con una edad media valor inicial . valor. Esta reducción podría atribuirse a las personas que
de 38,3 ± 10,8 años. Se utilizó un ELISA que utiliza anticuerpos monoclonales desarrollaron una marcada inflamación gingival durante el período de
específicos de patógenos para cuantificar el número de bacterias. A. acumulación de placa, lo que indica que la respuesta sistémica del huésped
actinomycetemcomitans fue el organismo detectado con mayor frecuencia, puede estar asociada con respuestas tisulares locales a variaciones en la
seguido de P. gingivalis y P. intermedia. La presencia de A. higiene bucal.
actinomycetemcomitans estaba sobrerrepresentada en el grupo de edad más Sin embargo, estas personas también se caracterizaron por respuestas
joven pero subrepresentada en los grupos de mayor edad. Por el contrario, la séricas iniciales más altas de IgG a P. gingivalis que las personas que
presencia de P. gingivalis y P. intermedia estaba subrepresentada en el grupo desarrollaron una inflamación gingival menos pronunciada durante el
de edad más joven pero sobrerrepresentada en los grupos de mayor edad. experimento. La variabilidad y la individualidad observadas en la respuesta
La presencia bacteriana se asoció fuertemente con la profundidad de la bolsa del huésped a los patógenos potenciales tienen implicaciones importantes
tanto para A. actinomycetemcomitans como para P. gingivalis. En nuestro para los intentos de utilizar tales medidas para establecer un diagnóstico o
estudio, se tomaron muestras de pacientes con 30 años o más. La edad pronóstico para el paciente individual. El objetivo de nuestro estudio actual
media (± DE) de los sujetos fue de 36,36 ± 7,86 y 44,97 ± 11,77 en los grupos fue solo evaluar los niveles de anticuerpos previos al tratamiento contra P.
de periodontitis crónica y sana, respectivamente, para nuestro estudio. Todas intermedia tanto en sujetos sanos como en sujetos con periodontitis crónica.
las muestras mostraron la presencia de P. intermedia independientemente de
la edad en ambos grupos de estudio. Aunque los resultados son similares,
Albandar et al., 2001[10] estudiaron las asociaciones entre los niveles de
una evaluación comparativa directa es difícil ya que los grupos de estudio
anticuerpos séricos contra los patógenos periodontales y la periodontitis de
eran de diferentes grupos de edad. Además, en nuestra investigación,
inicio temprano (EOP). La asociación entre los anticuerpos séricos IgG, IgA e
utilizamos ELISA indirecto interno para detectar los anticuerpos.
IgM contra 6 microorganismos periodontales y subtipos clínicos de diversa
gravedad de EOP se estudió mediante ELISA. El estudio se realizó en 159
muestras de 19 a 25 años e incluyó 97 casos con EOP y 62 controles sin
Haffajee et al. en 1995 [23] realizó un estudio para agrupar sujetos con signos clínicos de EOP. Se evaluaron los niveles séricos de A.
periodontitis según sus niveles elevados de anticuerpos séricos contra actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, C. rectus, E. corrodens
especies subgingivales específicas. Se incluyeron un total de 119 sujetos con y F. nucleatum .
evidencia de destrucción periodontal previa. Se obtuvieron muestras de suero
de cada sujeto en cada visita y se determinó el nivel de anticuerpos mediante Niveles séricos de anticuerpos IgG e IgA reactivos a P. gingivalis,
ELISA para 12 especies subgingivales. Se tomaron muestras de placa A. actinomycetemcomitans y P. intermedia fueron significativamente más
subgingival y se determinaron 14 especies subgingivales diferentes. altos en los casos de EOP generalizada en comparación con los controles sanos.
Los niveles de anticuerpos IgM no mostraron asociaciones significativas con
Los sujetos se agruparon mediante análisis de conglomerados de sus niveles EOP para ninguna de las 6 especies bacterianas analizadas. No hubo
elevados de anticuerpos. Los sujetos en diferentes grupos grupales diferían diferencias significativas en los niveles de anticuerpos entre los controles y
con respecto a la edad, el número de sitios activos, los niveles de gingivitis, los 13 sujetos que se clasificaron con EOP localizada.
la destrucción periodontal previa y los niveles de 11 de las 14 especies El estudio concluyó que los anticuerpos contra P. gingivalis, P. intermedia y
microbianas analizadas. Los sujetos con múltiples niveles elevados de A. actinomycetemcomitans pueden desempeñar un papel importante en la
anticuerpos tenían significativamente más sitios activos. El estudio concluyó patogenia de la EOP. En el estudio actual, solo se evaluaron los niveles de
que en la periodontitis crónica, los niveles de anticuerpos séricos de diferentes IgG contra P. intermedia en pacientes con periodontitis crónica y se encontró
microorganismos estarán elevados. Nuestro estudio mostró resultados que los niveles de IgG aumentan durante la enfermedad que en la salud.
similares donde los niveles de anticuerpos séricos aumentaron en la
periodontitis crónica. Aunque nuestro estudio tenía una notable similitud con
En el presente estudio, cuando se hizo la cuantificación de anticuerpos IgG
este estudio, se limitó al hecho de que las muestras se recolectaron solo en
contra P. intermedia , ésta varió de 2 a 50,5 unidades relativas/ml en el grupo
la visita inicial y los niveles de IgG en el suero se evaluaron solo en la visita
de periodontitis. Aunque muchos pacientes tenían niveles elevados de
inicial.
anticuerpos, de las 36 muestras, 7 muestras mostraron valores
Danielsen et al. en 1993 [24] realizó un estudio experimental de gingivitis en correspondientes a los de sujetos sanos. Los valores bajos sugieren que,
veintiocho adultos jóvenes y sanos en los que se obtuvieron registros clínicos aunque algunos de los pacientes estaban infectados con P. intermedia, no
y de sangre al inicio del estudio; después de un período de 4 semanas de producían grandes cantidades de anticuerpos contra el organismo. Quizás la
higiene oral completa; después de un período subsiguiente de 3 semanas de producción de anticuerpos se mantuvo baja por la inmunorregulación en
acumulación de placa; y después de otras 2 semanas de higiene oral algunos de los pacientes. Por lo tanto, la diferencia en la respuesta inmune
completa. Anticuerpos séricos IgG contra células enteras de P. gingivalis, P. del huésped individual, el alcance y la duración de la infección podrían ser los
intermedia, F. nucleatum, factores responsables de la falta de correlación observada.
y S. sanguis se determinaron utilizando un ensayo inmunoabsorbente ligado
a enzimas. Niveles medios de anticuerpos IgG séricos contra
Dixitraj, et al.: Detección de anticuerpos contra Prevotella intermedia en pacientes con periodontitis crónica e individuos periodontalmente sanos
J Periodontol 1993;64:195-201.
Conclusiones
8. Gharbia SE, Haapasalo M, Shah HN, Kotiranta A, Lounatmaa K, Pearce MA, et al.
En nuestro presente estudio, los anticuerpos IgG contra P. intermedia se Caracterización de aislamientos de Prevotella intermedia y Prevotella nigrescens de
infecciones periodontales y endodónticas. J Periodontol 1994;65:56-61.
exhibieron más en el grupo de periodontitis crónica en comparación con el grupo
sano, y la diferencia fue estadísticamente significativa. Los diversos estudios
9. Mättö J, Saarela M, von Troil-Lindén B, Könönen E, Jousimies-Somer H, Torkko H, et al.
discutidos aquí apuntan hacia datos variables. Esta diferencia se puede atribuir Distribución y análisis genético de Prevotella intermedia oral y Prevotella nigrescens.
a múltiples factores, como la inmunorregulación, la demografía, el origen étnico, Oral Microbiol Immunol 1996;11:96-102.
comparación con individuos sanos, pueden esclarecer los mecanismos de ISRN Immunol 2014;2014:13.
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inmunorregulación en pacientes con periodontitis crónica. Los ensayos clínicos
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aleatorios de seguimiento a largo plazo son esenciales para poder predecir de ubicaciones geográficas. J Clin Periodontol 1998;25:994-1002.
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de utilizar los niveles de IgG contra periodontopatógenos para evaluar la actividad
de la enfermedad. Habiendo dicho esto, todavía podría ayudar a promover la 15. Vaught JB. Recolección, envío, procesamiento y almacenamiento de sangre.
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