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La microbiología es la ciencia que se ocupa del estudio de los microorganismos → estudio de los
organismos cuyo tamaño se sitúa por debajo del límite de resolución del ojo humano.
TIPOS DE MICROORGANISMOS:
• BACTERIA
• HONGO
• PROTOZOO
• VIRUS
HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
Describió los hongos filamentosos. Inició la TEORÍA CELULAR: Las unidades estructurales más
pequeñas de la vida son celdillas pequeñas o células.
La Teoría de la Generación Espontánea defendía que las formas más pequeñas de vida animal se
originaron espontáneamente de materia inanimada o de materia orgánica en descomposición.
LEY DE LA BIOGÉNESIS: Todo ser vivo proviene do otro ser vivo ya existente.
FERMENTACION Y PASTEURIZACIÓN
La acidez y el deterioro son causados por otros microorganismos, las bacterias, que en presencia de
aire modifican el alcohol del vino produciendo ácido acético (vinagre).
La solución de Pasteur fue someter la bebida a calor un tiempo suficiente para eliminar estas bacterias,
proceso denominado PASTEURIZACIÓN.
VACUNAS
Si se inyecta este microorganismo avirulento en un individuo no producirá enfermedad, pero sí que
activará su sistema inmune confiriéndole protección frente a cepas virulentas.
Pasteur utilizó el término “vacuna” para designar los cultivos de microorganismos avirulentos utilizados
para prevenir la enfermedad en honor al trabajo inicial de inoculación de la viruela vacuna de Jenner.
Identificó el agente causal del Carbunco, Tuberculosis y Cólera . Desarrollo la teoría germinal
TEORIA GERMINAL
1. El microorganismo debe estar siempre presente en los animales que sufran la enfermedad y no
en individuos sanos.
2. El microorganismo debe cultivarse en cultivo axénico (puro) fuera del animal.
3. Cuando dicho cultivo se inocula a un animal susceptible, debe iniciar en él los síntomas
característicos de la enfermedad.
4. El microorganismo debe aislarse nuevamente de estos animales experimentales y cultivarse
nuevamente en el laboratorio, tras lo cual debe mostrar las mismas propiedades que el
microorganismo original.
IMPORTANCIA DE LA MICROBIOLOGIA
-Constituyen seguramente la mayor parte de la biomasa de nuestro planeta. Se calcula que sólo
hemos descrito menos del 10% de los microorganismos existentes.
-Solo una minoría de los microorganismos son patógenos o causan deterioro de los alimentos
-Los ciclos del carbono, del nitrógeno, del azufre o del fósforo dependen de modo fundamental de los
microorganismos.
-Estos convierten los elementos en formas que pueden ser utilizadas por plantas y animales. Solo las
bacterias son capaces de transformar el Nitrógeno atmosférico en materia orgánica.
MICROBIOTA
La mayoría de las bacterias de nuestro microbiota son comensales, es decir, se alimentan de nosotros
sin causar perjuicio ni beneficio constatable.
Sin embargo, el conjunto del microbiota sí que desempeña importantes funciones beneficiosas para el
hospedador:
BACTERIOLOGÍA (BACTERIAS)
El organismo humano está habitado por miles de especies bacterianas distintas. También se
encuentran bacterias en el ambiente, como el aire que se respira, el agua que se bebe y los
alimentos. La inmensa mayoría de las especies descritas NO SON PATÓGENAS
MICOLOGIA (HONGOS)
Sólo alrededor de 300 especies se han identificado como patógenas para los seres humanos y los
animales pero en los últimos años ha habido un aumento de la incidencia de infecciones micóticas
graves, fundamentalmente en ámbitos hospitalarios. Algunos hongos intervienen de forma importante
en la descomposición de la materia. Son productores de antibióticos: Ej Penilicina producida por
Penicillium chrysogenum. Tienen interés en la industria alimentaria: Ej. Producción de cerveza
(Saccharomices cervisiae)
VIROLOGIA (VIRUS)
La infección puede ocasionar una replicación rápida y la destrucción celular, o dar lugar a una relación
crónica latente en la que puede ocurrir que la información genética del virus se integre en el genoma del
hospedador.
- Agentes acelulares
Estructura simple: un sólo tipo de ácido nucleico
rodeado de una cubierta proteica con o sin una
cubierta de membrana lipídica.
- Tamaño medio 20-100 nm
- Parásitos celulares obligados
-ESTRUCTURA:
- ÁCIDO NUCLEICO.
- CUBIERTA PROTEICA O CÁPSIDE.
ELEMENTOS FACULTATIVOS:
- MEMBRANA O ENVOLTURA
- ENZIMASVIRALES.
-TIPOS DE VIRUS
Los viriones (virus en fase extracelular) no realizan ninguna actividad fisiológica, por lo que no
requieren sintetizar proteínas ni utilizan energía; son estructuras inertes.
Para replicarse el virus necesita infectar una célula; el ácido nucleico viral se replica a expensas de la
maquinaria y la energía de la célula infectada.
Replicación masiva del virus dentro de la bacteria Integración del DNA vírico en el genoma de la
que conduce a la lisis de la bacteria y liberación bacteria. El virus queda en forma latente
de los bacteriófagos recién formados. (PROFAGO).
Llevada a cabo por bacteriófagos virulentos Llevada a cabo por bacteriófagos atemperados
PARASITOLOGIA (PARASITO)
- Eucariotas. CARECEN de pared celular
- Unicelulares o pluricelulares.
- Su tamaño oscila desde protozoos diminutos (1-200
μm) hasta platelmintos que pueden medir desde 1
mm a 10 metros.
- Microorganismos con mayor grado de complejidad
- Ciclo vital es complejo
-TIPOS DE HOSPEDADOR
1. HOSPEDADOR DEFINITIVO (HD): Hospedador en el que se desarrolla la fase adulta del parásito
(sexualmente madura). Ej. El hombre es el HD de Taenia saginata.
La mayoría de los estos ciclos presentan dos hospedadores (HD y HI), se denominan ciclos
DIHETEROXENOS. La presencia de un parásito en un área determinada depende de la existencia del HI.
-CLASIFICACION ELEMENTAL DE LOS PARASITOS
PROTOZOOS
HELMINTOS
INMUNOLOGIA
Estudio de las respuestas de defensa que han desarrollado los animales frente a la invasión por
microorganismos o partículas extrañas.
El sistema inmune del individuo produce los El individuo adquiere directamente los
anticuerpos tras el contacto con un determinado anticuerpos sin haber estado en contacto con el
microorganismo. Este contacto puede ser: microorganismo.
- Natural. Estamos continuamente en - Adquisición de anticuerpos a través del
contacto con microorganismos, algunos cordón umbilical de la madre al niño o a
llegan a causar enfermedad y otros son través de la leche materna.
vencidos por el sistema inmune. - Por la administración de
- Artificial, por la administración de Inmunoglobulinas (anticuerpos) como
vacunas. Se administra el fármacos.
microorganismo atenuado. Este no será
capaz de producir enfermedad pero sí
que induce la formación de anticuerpos
-SISTEMA ANTIGENO-ANTICUERPO
Para determinar si un individuo ha estado en contacto con una bacteria se pueden llevar a cabo dos
estrategias en el laboratorio:
Se encarga de agrupar a los seres vivos en categorías o taxones mostrando el grado de similitud que hay
entre ellos. Comprende tres partes independientes pero relacionadas:
NOMENCLATURA CIENTIFICA
A cada ser vivo se le asignan DOS NOMBRES derivados del latín o del griego: GÉNERO y ESPECIE. Estos
nombres se escriben en cursiva (itálica) en escritura impresa o subrayados en escritura manual. La
inicial del GÉNERO se escribe en mayúscula y el resto en minúscula. EJ: Escherichia coli
- DESCRIPTIVOS
- ALUSIÓN AL DESCUBRIDOR
- ALUSIÓN A LA ENFERMEDAD QUE PRODUCEN
- ALUSIÓN A UN ACONTECIMIENTO
Esta clasificación se basa en el estudio de los GENES QUE CODIFICAN LAS MOLÉCULAS DE RNA
RIBOSÓMICO DE LA SUBUNIDAD PEQUEÑA DEL RIBOSOMA (16S EN PROCARIOTAS Y 18S EN
EUCARIOTAS).
Esta clasificación se basa en el estudio de los GENES QUE CODIFICAN LAS MOLÉCULAS DE RNA
RIBOSÓMICO DE LA SUBUNIDAD PEQUEÑA DEL RIBOSOMA (16S EN PROCARIOTAS Y 18S EN
EUCARIOTAS
A partir de esta comparación, se han identificado 3 líneas celulares filogenéticas distintas denominadas
DOMINIOS:
TEORIA ENDOSIMBIOTICA
ESta teoría supone que las mitocondrias y los cloroplastos evolucionaron a partir de bacterias que
fueron fagocitadas por una célula primitiva ancestral.
TEMA 4.- TAXONOMIA I
1. INOCULACIÓN DE LA MUESTRA
2. INCUBACIÓN
3. OBSERVACIÓN DEL CRECIMIENTO
4. IDENTIFICACIÓN
1. Se deposita el inóculo en la parte superior de la placa y se extiende con el asa de siembra (área
1).
2. Se gira la placa ligeramente y se extiende parte del área 1 en la zona perpendicular (área 2)
3. Se gira la placa nuevamente y se introduce el asa una sola vez en el área 2 y se extiende en la
zona restante de la placa (área 3)
En función del microorganismo las colonias presentan un color un tamaño, una forma o un olor
característico.
MORFOLOGIA
DISPOSICION
Algunas bacterias permanecen juntas en grupos o racimos después de la división celular, estas
agrupaciones son característicos de ciertos géneros.
Por ejemplo, algunos cocos forman cadenas largas (Streptococcus viridans), otros se disponen en
parejas (diplococos) como la Neisseria spp. o el Streptococcus pneumoniae, otros conjuntos como
racimos de uvas (estafilococo).
TINCIONES
También existen TINCIONES ESPECIALES que se emplean para visualizar partes de los microorganismos
que no revelan las tinciones convencionales.
TINCION DE GRAM
Nos permite diferenciar a las BACTERIAS en dos grandes grupos dependiendo del grosor de su PARED
BACTERIANA. Colorantes empleados:
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS → Pared bacteriana FINA → no retienen el colorante violeta, lo pierden
en la decoloración. Se tiñen con safranina, que es el colorante de contraste.
El método más exacto para identificar a los microorganismos y por eso es el que actualmente se emplea
para su clasificación.
- ADN que contiene el gen o el fragmento de DNA que me interesa amplificar (el molde)
- Iniciadores o cebadores → fragmento de DNA de 15-30 nucleótidos que
flanquean la región a amplificar y que aportan el extremo 3’ libre para que inicie la
transcripción (la que dice por dónde hay que empezar)
- Enzima polimerasa (la que trabaja)
- Desoxinucleótidos (dNTPs)→ adenina (dATP), guanina (dGTP), citosina
(dCTP) y timina (dTTP) (el material)
- Cloruro de magnesio (MgCl2) u otro co-factor necesario para que trabaje la
enzima polimerasa
- ¿Helicasas? Para separar la doble hélice de ADN
- ¿Primasas? Para unir el primer o cebador al fragmento que se va a amplificar
La PCR consta de 3 etapas que están determinadas por variaciones de la temperatura y que se van
a repetir de manera cíclica. Este cambio de temperatura se consigue la separación de las hebras de
DNA. Etapas de la PCR:
1. Desnaturalización
2. Anillamiento o unión de los cebadores (primers o ininciadores)
3. Extensión del DNA→Actuación de la polimerasa
Los productos generados aumentan su concentración de manera exponencial porque cada nueva copia
sirve de molde en los ciclos siguientes.
IDENTIFICACION BACTERIANA
En bacterias el gen diana universal más ampliamente estudiado es el gen rrs, que codifica el RNA
ribosomal de la subunidad pequeña del ribosoma bacteriano (16S RNAr).
TEMA 5.- ESATRUCTURAS BACTERIANA
ELEMENTOS BACTRERIANOS
CONSATANTES FACULTATIVOS
• Ribosomas • Glicocalix (Cápsula y capa mucosa )
• Membrana citoplasmática • Orgánulos exteriores (Flagelo, fimbrias y pili )
• Pared bacteriana • Inclusiones citoplasmáticas
Membrana externa Gramnegativos • Esporas
• Citoplasma • Plásmidos
• Nucleoide
RIBOSOMA BACTERIANO
- FUNCIONES:
o BARRERA QUE SEPARA EL INTERIOR DEL EXTERIOR DE LA CELULA
o ELEVADA PERMEABILIDAD SELECTIVA
- COMPOSICION: COMPUESTA POR LIPIDOS Y PROTEINAS Y ESTABILIZADA POR MOLECULAS
HAPANOIDES
- DIFERENCIA ENTRE DOMINIOS: DIFERENCIA DE LA ESTRUCTURA PLASMATICA
COMPOSICION BICAPALIPIDICA
Los lípidos de membrana en Arqueas son únicos desde el punto de vista químico. Son diferentes a los
de los dominios de Bacteria y Eukarya.
En Archeas, la estructura hidrofóbica no está constituida por ácidos grasos, sino por unidades
repetidas de isopreno, que es una molécula hidrocarbonada de 5 átomos de carbono.
- Funciones
• Protección frente a la lisis celular.
• Confieren forma y rigidez en la célula.
- Composición
- Principal componente: PEPTIDOGLICANO, también llamado MUREÍNA (una red de
polímeros de azúcar unidos con tetrapéptidos a través de enlaces cruzados).
PEPTIDOGLICANO
Función Proporciona rigidez, por lo que determina la forma de cada célula bacteriana.
Diferencias entre dominios Las células de los dominios Eukaria y Archaea carecen de
peptidoglicano, aunque las arqueobacterias sí que presentan estructuras similares denominadas
seudoglucanos o seudomureínas.
ESTRUCTURA:
Los ácidos teicoicos son polímeros de glicerol fosfato o ribitol fosfato que se unen covalentemente al
NAM del peptidoglicano.
Algunos ácidos teitoicos están unidos a lípidos de la membrana citoplasmática y reciben el nombre de
ácidos lipoteicoicos . Atraviesan el péptidoglicano quedando expuesto el otro extremo al exterior
celular.
Funciones
• Porinas
• Lipopolisacárido
• Lipoproteínas que participan en la unión de la membrana
externa al peptidoglicano.
• Espacio periplásmico: espacio delimitado por la membrana
externa y la membrana citoplasmática
PORINAS
Tipos de porinas:
LIPOPOLISACARIDO
El LPS es el responsable de la toxicidad de las bacterias gramnegativas.
De hecho el LPS también recibe el nombre de ENDOTOXINA y es liberado al medio cuando la célula se
lisa.
TEMA 6.- ESTRUCTURA BACTERIANA II: ELEMENTOS FACULTATIVOS
GLICOCALIX
Material viscoso secretado por algunas bacterias y otros tipos celulares en su superficie.
Estos materiales no se consideran parte de la pared celular porque no aportan ninguna resistencia
estructural significativa. Se componen por proteínas y carbohidratos. Se localiza cubierta más externa,
en contacto con el medio externo. Para describirla se utiliza los términos capsula y capa mucosa o
biofilm.
CAPSULA
Se organiza como matriz gruesa que no deja penetrar pequeñas partículas. Suelen estar firmemente
unidas a la pared celular.
Generalmente tienen composición polisacárida aunque en algunas bacterias puede ser proteica
(Bacillus anthracis).
CAPA MUCOSA
En comparación con la cápsula, en la capa mucosa el material es más fácilmente deformable, no excluye
a las pequeñas partículas y resulta más difícilmente observable.
Se encuentra también por encima de la pared bacteriana pero no está firmemente unida a ella y la
bacterias pueden desprenderse.
Cuando se unen las capas mucosas de varios microorganismos se forman los denominados BIOFILMS.
FIBRAS
PELOS
Los PELOS o PILI son similares a las fimbrias pero son más largos y cada bacteria presenta solo uno o
unos pocos en su superficie.
FUNCION:
FLAGELO
Función: proporcionan motilidad a la bacteria. Permite que se dirija hacia los nutrientes y evite las
sustancias tóxicas (quimiotaxis).
Las especies bacterianas pueden tener uno o varios flagelos en su superficie, los cuales pueden anclarse
en diferentes partes de la célula.
El tipo de movimiento es por rotación del cuerpo basal (tipo hélice de barco) y la dirección del
movimiento depende de la alternancia del movimiento de los flagelos. CE
Existen determinadas constituyentes del flagelo que actúan como antígenos. Son característicos de cada
especie. Incluso permiten diferenciar cepas dentro de una misma especie.
Reciben el nombre ANTÍGENO DE FLAGELAR H y se utilizan para IDENTIFICACIÓN de bacterias
ENDOSPORAS
Las bacterias que forman endosporas se encuentran comúnmente en suelo. Respecto a las bacterias
patógenas humanas destacan dos especies como productoras de esporas
Durante la formación de las endosporas una célula vegetativa se convierte en una estructura inerte y
termorresistente.
Las células no esporulan cuando están en crecimiento sino cuando las condiciones son adversas y cesa el
crecimiento por falta de algún nutriente esencial. Las esporas se dispersan fácilmente
ESTRUCTURA DE LA ENDOSPORA.
La estructura de la endospora es compleja y presenta muchas capas que están ausentes en la estructura
vegetativa:
La célula procariota presenta inclusiones citoplasmáticas que pueden ser de dos tipos según su
contenido:
Función:
Cualquier célula para crecer, para fabricar los componentes celulares, requiere una fuente de
ENERGÍA, una fuente de ELECTRONES y unos SUSTRATOS.
FACTORES DE CRECIMIENTO son compuestos orgánicos que se requieren en cantidades muy pequeñas.
La mayoría de los microorganismos son capaces de sintetizarlos. Aquel microorganismo que no sea
capaz de sintetizar un determinado factor de crecimiento lo debe captar del medio para poder crecer,
de lo contrario morirá.
SEGÚN LA FUENTE DE
ENERGIA ELECTRONES CARBONO TIPO TROFICO
FOTO // QUIMIO LITO // ORGANO AUTO // HETERO
PLANATA LUZ H2O CO2
ANIMALES C. ORG C.ORG C.ORG
BACTERIAS
La fuente de energía de las bacterias puede ser la luz o compuestos químicos. Pueden utilizar como
fuente de carbono el CO2 o compuestos orgánicos y como fuente de electrones hay algunas bacterias
que utilizan compuestos orgánicos y otras que utilizan compuestos inorgánicos
METABOLISMO BACTERIANO
Para crecer la célula requiere una FUENTE DE ENERGÍA y los SUSTRATOS necesarios para
fabricar los componentes de la célula.
La energía, habitualmente en forma de ATP, se obtiene a partir de la degradación controlada de diversos
sustratos orgánicos, es decir, a través de las reacciones catabólicas.
ENZIMAS Y SUBSTRATO
Las ENZIMAS son proteínas que catalizan (aceleran) las reacciones químicas. Cada enzima tiene un
SUSTRATOS específico.
Durante las reacciones enzimáticas los sustratos son transformados en sustancias nuevas denominadas
PRODUCTOS.
Las enzimas pueden necesitar otras moléculas denominadas COFACTORES para poder actuar. Estos
cofactores pueden ser:
INORGÁNICOS → ej. Iones (como el Mg necesario para que actúe la DNA polimerasa)
ORGÁNICOS=COENZIMAS → ej. FAD (Flavín adenin dinucleótido), NAD+ (Nicotinamida adenina
dinucleótido), NADP+.
2. TRANSPORTADOR DE ELECTRONES
Tiene lugar a través de las reacciones de oxidación-
reducción
REACCIONES DE OXIDACION-REDUCCION
Las moléculas de nutrientes poseen ENERGÍA ASOCIADA CON ELECTRONES presentes en los
ENLACES ENTRE SUS ÁTOMOS.
Para extraer la energía de los compuestos orgánicos (nutrientes) y almacenarla en forma química (ATP)
los organismos transfieren estos electrones de un compuesto a otro mediante una serie de REACCIONES
DE OXIDACIÓN Y REDUCCIÓN.
principales moléculas transportadoras son los coenzimas NAD+, NADP+ y FAD+. Movilizan los
electrones de los enlaces del átomo del hidrógeno.
Las VÍAS METABÓLICAS de una célula están determinadas por las ENZIMAS que sintetiza dicha célula.
Las enzimas son proteínas, por lo tanto, su síntesis está codificada en un gen.
Una célula podrá sintetizar una u otra enzima dependiendo de su composición genética (si tiene el gen
que codifica la enzima o no lo tiene).
• RESPIRACIÓN CELULAR
• FERMENTACIÓN
En estos procesos, la fosforilación del ADP puede producirse por dos mecanismos:
• FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
• FOSFORILACIÓN A NIVEL DE SUSTRATO
TIPOS DE FOSFORILACION
1. FOSFORILACION OXIDATIXA
La principal fuente de energía son los hidratos de carbono, pero las proteínas y los lípidos también son
aportan electrones para la respiración.
Estas moléculas alimenticias ingresan a la glucólisis o al ciclo de Krebs en distintos puntos del ciclo.
FERMENTACION
TIPOS DE FERMENTACION:
• La fermentación alcohólica es llevada a cabo por numerosas bacterias y levaduras. Se
produce etanol y CO2.
• La fermentación del ácido láctico puede conducir a la descomposición de los alimentos,
pero este proceso también permite producir yogur a partir de la leche, chucrut a partir de
repollo fresco y pepinillos en salmuera.
TEMA 8.- CRECIMIENTO BACTERIANO
CRECIMIENTO POBLACIONAL
• Medidas directas:
A) Recuento del número de células totales:
• Cámaras de recuento.
• Contadores automáticos. Tipo Coulter.
B) Recuento de células viablesRecuento de colonias en placa:
• Método de extensión en placa.
• Método de vertido en placa.
• Recuento mediante diluciones.
1. Medidas indirectas:
• Medida de la turbidez.
RECUENTO DE CÉLULAS TOTALES: CÁMARAS DE RECUENTO
• Portas de vidrio excavados que presentan una cuadrícula grabada con cuadrados de área
conocidaconocemos el volumen de muestra que tenemos en la cámara.
• En el microscopio podemos contar el número de células por cada unidad de área de la cuadrícula.
• La conversión de ese valor a numero de células por ml se hace multiplicando por un factor de
conversión que depende del volumen del tipo de cámara.
• Contar el número de células de la muestra que son capaces de formar colonias sobre un medio
sólido adecuado.
• No contabiliza bacterias muertas.
El recuento de células viables se expresa en unidades formadoras de colonias por mL
(UFC/mL)
• Métodos:
• MÉTODO DE EXTENSIÓN EN PLACA.
• MÉTODO DE VERTIDO EN PLACA.
• RECUENTO MEDIANTE DILUCIONES.
MEDIDA DE LA TURBIDEZ:
La actividad de los microorganismos se ven muy afectada por todas las condiciones químicas y físicas del
medio, pero hay cuatro los factores que tienen una función destacada en el control del crecimiento
bacteriano:
• EFECTO DE LA TEMPERATURA
• EFECTO DEL PH
• EFECTO DE LA OSMOLARIDAD
• EFECTO DEL OXÍGENO
EFECTO DE LA TEMPERATURA.
Cada microorganismo presenta una T mínima por debajo de la cual no es posible el crecimiento, una T
óptima a la que se produce el crecimiento más rápido y una T máxima por encima de la cual algunas
proteínas particulares pueden sufrir daños irreversibles y el microorganismo muere. Estas tres
temperaturas se conocen como TEMPERATURAS CARDINALES y son características de cada tipo de
organismo.
EFECTO DEL PH
Los valores de pH por debajo de 7 son ácidos y los mayores de 7 básicos o alcalinos. Distinguimos tres
tipos de microorganismos en función de su pH óptima de crecimiento:
En función de la concentración salina del medio en el que son capaces de crece distinguimos tres tipos
de microorganismos:
EFECTO DEL OXIGENO
Los microorganismos se pueden clasificar dependiendo de sus relación con el oxígeno en:
• MICROAERÓFILOS: Aerobios que pueden usar el oxígeno sólo cuando está presente a
bajas concentraciones.
PRUEBA DE LA CATALASA
Es una prueba muy importante en microbología porque permite distinguir a las dos grandes especies de
cocos grampositivos:
Consiste en proporcionar a los microorganismos los nutrientes y las condiciones físicas, químicas
adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada.
MEDIO DE CULTIVO: Sustrato o solución de nutrientes estéril, en los que crecen y se multiplican los
microorganismos en el laboratorio con el objeto de aislarlos e identificarlos.
COLONIA: conjunto de bacterias que provienen de una misma célula y en los medios de cultivo aparecen
como acúmulos de millones de bacterias que pueden observarse a simple vista.
• Agar: sustancia inerte polisacárida obtenida de las algas rojas. Sirve para dar consistencia a los
medios, no aporta nutrientes. Solo se utiliza en medios sólidos y semisólidos.
• Fuente de carbono: se emplean fundamentalmente hidratos de carbono (glucosa, lactosa, sacarosa)
• Fuente de nitrógeno: se utilizan peptonas, que son productos solubles que se obtienen por
hidrólisis de una o varias proteínas. Las proteínas más empleadas para la producción de peptonas
son habitualmente animales (caseína, gelatina, carne, etc.).
A) SEGÚN SU CONSISTENCIA :
-SOLIDOS: Los cultivos sólidos inmovilizan a las células permitiéndoles crecer y formar colonias.
Podremos detectar los diferentes tipos de bacterias
-LIQUIDOS : Permite que crezcan bacterias que se encuentran en muy poca cantidad.
B) SEGÚN SU COMPOSICION
-MEDIOS NO SELECTIVOS: Diseñados para permitir el crecimiento de la mayor parte de los gérmenes
que NO necesitan unas condiciones exigentes. EJEMPLOS: agar sangre, agar chocolate, agar Mueller-
Hinton
En el genoma encontramos
• regiones codificantes: GENES→ secuencias que proporcionan las instrucciones para formar
un producto funcional (una molécula necesaria para desempeñar un trabajo en la célula). Estos
productos funcionales son fundamentalmente PROTEÍNAS.
• regiones no codificantes → secuencias que intervienen en la regulación genética pero que no
se van a traducir en ningún producto funcional.
Flujo de la información genética: El ADN se transcribe a ARN mensajero (ARNm) y el ARN mensajero se
traduce a PROTEÍNAS
Otros productos funcionales codificados en el ADN: ARN ribosomal (ARNr), ARN de transferencia (ARNt)
En la transcripción, la secuencia de ADN de un gen se copia para obtener una molécula de ARN.
GENOMA BACTERIANO
Los cambios en el DNA causan variaciones genéticas que pueden repercutir en la función microbiana.
MUTACION
-Las bacterias mutantes solo serán seleccionadas y sustituirán a la cepa original cuando la característica
adquirida por mutación represente una ventaja frente a condiciones selectivas del entorno.
TRANSFERENCIA HORIZONTAL DE GENES (RECOMBINACI ÓN GENÉTICA)
- Es el proceso por el que se intercambia información genética entre dos organismos que
comparten un mismo ambiente.
- Existe una célula donante que cede una porción de su DNA total a una célula receptora.
- Si la célula receptora incorpora el DNA donado a su propio DNA recibe el nombre de célula
recombinante.
- La transferencia horizontal de genes se produce sólo en el 1% de la población.
TRANSDUCCION:
TRANSDUCCION GENERALIZADA:
TRANSDUCCION ESPECIALIZADA:
La transducción especializada, aunque es más SELECTIVA, también es mucho más EFICIENTE que la
generalizada ya que todas las partículas víricas portan una pequeña porción de DNA bacteriano.
CONJUGACION:
- La conjugación es la transferencia directa de material genético entre dos bacterias que se unen
de forma temporal.
- Se produce gracias a los
o Pelos o PILI “sexuales” que ayudan a fijar las células generando un puente
intercitoplasmático (en bacterias gram-negativas)
o Puentes de apareamiento (en bacterias gram-positivas)
- Los pili o el puente de apareamiento se genera en la bacteria donadora (F+).
- La receptora (F-) aporta el sitio de reconocimiento para que se establezca el puente de unión.
- Las especies de las bacterias donadora y aceptora pueden ser diferentes.
- La capacidad de formar pili y de donar material genético proviene de la presencia de un factor
F (fertilidad).
OTRAS ESTRUCTURAS GÉNICAS: TRANSPOSONES
- Tipos de transposones:
o Secuencias de inserción (Transposones simples)
o Transposones complejos
Contiene la información genética mínima necesaria para la trasposición → un gen que codifica
transposasa.
Las transposasas reconocen estas secuencias específicas (repeticiones invertidas en ambos extremos del
fragmento) y se encargan de integrar elemento en otro lugar del genoma.
TRANSPOSONES COMPLEJOS
• Transposasa
• Genes extra, que pueden codificar para muy distintas
propiedades fenotípicas.
TEMA 10.- ANTIMICROBIANOS
o Toxicidad selectiva: La toxicidad debe ser elevada para el microorganismo y nula o muy baja
para el hospedador.
o Elevada actividad o potencia biológica: deben ser activos a concentraciones muy bajas.
Su eficacia está definida por los estudios de sensibilidad o antibiogramas, concretamente por los
parámetros de:
o Concentración mínima inhibitoria (CMI).
o Índice terapéutico (Dosis tóxica/Dosis terapéutica) A mayor índice terapéutico
mayor seguridad
TIPOS DE RESISTENCIA:
BETALACTAMICOS
Mecanismo de acción: Actúan inhibiendo la última etapa de la síntesis del peptidoglicano. Inhiben el
proceso de transpeptidación (la unión entre los tetrapéptidos de las cadenas de azúcares).
GLICOPEPTIDOS
Mecanismo de acción: inhiben la síntesis del peptidoglicano de la pared celular porque impiden su
elongación
Mecanismo de acción: inhiben la síntesis de DNA por inhibición de la topoisomerasa. Impiden así que se
produzca el superenrollamiento y desenrollamiento del DNA del cromosoma bacteriano.
• Mecanismo de acción: Inhiben la síntesis de ácido fólico, necesario para la síntesis de DNA.
◆En general, si la CMB es similar a la CMI, el antibiótico es bactericida, y si la CMB es muy superior a la
CMI, el antibiótico se considera bacteriostático.
Técnica de Epsilon-Test: es idéntica a la anterior pero, en lugar de usar discos de papel impregnados con
antibiótico con una concentración fija, se emplean tiras de plástico que contienen un gradiente de
concentración de antibiótico. El punto de corte entre el halo de inhibición y al tira de plástico indica la
CMI.
ESTERILIZACIÓN: proceso de destrucción de toda forma de vida microbiana, tanto las formas
vegetativas como las formas de resistencia que son las esporas.
Se puede llevar a cabo empleando sustancias químicas (biocidas) o mediante procesos físicos.
BIOCIDA
• Calor húmedo: más rápida y eficaz que el calor seco debido a que las moleculas
de agua desnaturalizan las proteínas de forma rápida, eficaz e irreversible
mediante rotura de las uniones entre los grupos peptídicos a unas
temperaturas relativamente bajas. Forma de esterelización:
o Autoclave
▪ Diferencias entre autoclave y horno Pasteur:
• Radiaciones: tipos:
o Rayos ultravioletas: laboratorios y quirófanos.
o Rayos gamma: nivel industrial.
• Filtración: esterilizar líquidos termolébiles. Tipos de filtros de membrana:
o EPA
o HEPA
o ULPA
MICROBIOTA:
• Piel
• Tracto respiratorio
• Cavidades vaginal y urinaria
• Cavidad oral
• Tracto gastrointestinal
Funciones:
3. Invasión y diseminación:
INTRACELULARIDAD
RESPUESTA AUTOINMUNITARIA
• Forma esférica
• Grampositivos (tinción violeta)
• Pequeños
• Inmóviles
• Ausencia de esporas
• Aerobios facultativos o anaerobios aerotolerantes
Dos familias:
• Carnes elavoradas
• Crema pastelera
• Ensalada de patata
• Helados
El calentamiento posterior de estos alimentos comporta a la destrucción de las bacterias
pero no inactiva las enterotoxinas. Clínica:
BACILOS GRAMPOSITIVOS:
• Familia bacillaceae: grandes de extremos rectos, comprenden una colección
variada de bacterias por la capacidad de formar endosporas:
o Bacillus spp.: aerobios estrictos y facultativos, catalasa positivos, muy
ubicuos, la mayoría son saprófitos y endosporas centrales no
deformantes.
o Clostridium spp.: anaerobios estrictos, catalasa negativos, la mayoría son
móviles y no capsulados, son ubicuos y forman parte de la flora intestinal,
en su mayoría son saprofitos que pueden producir toxiinfecciónes
alimentarias y endosporas terminales que pueden ser deformantes.
BACILLUS ANTHRACIS:
• Factores de virulencia: cápsula proteica y toxina.
• Epidemiología y clínica: transmisión por contacto, ingestión o inhalación de
esporas.
• Acelulares
• Pequeños 20-10 nm
• Parásitos intracelulares obligados: dependen de la maquinaria bioquímica de la
célula hospedadora para su replicación.
• Estructura simple: molécula de ácido nucleico empaquetada en una cubierta
protectora (cápside) que en algunos casos está rodeada por una membrana
lipídica (envoltura).
Los virus para reproducirse necesitan medios con cultivos celulares. Podemos encontrar
los virus en dos estados:
REPLICACIÓN VÍRICA:
o Reconocimiento y adsorción: la interacción virus-célula hospedadora es altamente
específica. Las proteínas de superficie presentes en la membrana (virus envueltos) o
en la cápside (en virus desnudos) reconocen receptores celulares concretos que van
a determinar su tropismo celular, el tejido diana que es específico de cada virus.
o Pérdida de la cubierta o decapsidación y salida del ácido nucleico viral: las enzimas
lisosomales celulares hidrolizan las proteínas capsulares, liberándose el genoma
vírico en el interior de la célula.
CRECIMIENTO VIRAL:
o Periodo de eclipse (PE): abarca desde que se inicia la infección hasta que se
sintetiza la primera partícula completa del virus. Durante este periodo no se
observan virus dentro de la célula. Comprende las fases de desnudamiento del
genoma, síntesis de ácido nucleico y proteínas virales y ensamblaje.
o Periodo de acumulación intracelular (PAI): tiempo en el cual se acumulan virus
dentro de la célula hospedadora. Abarca desde la síntesis de viriones hasta su
liberación al medio.
o Periodo de latencia: tiempo que transcurre desde que se inicia la infección hasta
que se detectan los virus en el medio. PL= PE + PAI
CLASIFICACIÓN VIRUS:
o Simetría de la cápside:
▪ Icosaédrica
▪ Helicoidal
▪ Complejo
o Presencia o ausencia de envoltura
▪ Desnudo
▪ Envuelto
o Ácido nucleico:
▪ DNA
▪ RNA
o Estructura del genoma:
▪ Monocatenario o bicatenario
▪ Polaridad positiva o negativa
o Mecanismo de producción de RNAm
o RNA monocatenario
o Cápside icosaédrica
o Desnudos
o Muy pequeño
o Muy resistente
SUBCLASIFICACIÓN:
o Poliovirus
o Coxsackievirus:
o Coxackievirus A: faringitis, enfermedad mano-boca-pie (estomatitis
vesiculosa con exantema) y conjuntivitis hemorrágica.
o Coxackievirus B: miocarditis y/o pericarditis.
o Echovirus: principal causa de meningitis en aséptica en niños.
o Enterovirus: conjuntivitis hemorrágica.
• Eucariotas
• Unicelulares o pluricelulares.
• Su tamaño oscila desde protozoos diminutos (1-200 μm) hasta platelmintos que pueden medir
desde 1 mm a 10 metros.
• Microorganismos con mayor grado de complejidad
• Ciclo vital es complejo
CONCEPTOS
TIPOS DE PARÁSITOS:
Parasito obligado: aquel que necesita parasitar a otro individuo al menos en alguna fase de su ciclo vital.
• Temporales: sólo establecen contacto con el hospedador durante el tiempo necesario para
su nutrición.
• Estacionarios: permanecen en el huésped durante un periodo prolongado de su vida, que
puede cubrir la totalidad de su ciclo biológico.
Parasito extraviado: aquel que se presenta en un hospedador distinto al hospedador natural (se
equivoca de hospedador). Nunca alcanzará el estado adulto.
Parasito errático: aquel que se localiza en tejidos del hospedador que no son los habituales (se
equivoca de órgano)
Endoparásito (aquel que vive dentro del hospedador) vs. ectoparásito (aquel que vive fuera del
hospedador).
TIPOS DE HOSPERADOR
1. Hospedador definitivo (HD): Hospedador en el que se desarrolla la fase adulta del parásito
(sexualmente madura).
3. Hospedador paraténico (HP) o de transporte: HI “potencial” que se sitúa entre otro HI y el HD.
NO ES IMPRESCINDIBLE. Suele ser acumulativo: el parásito se multiplica pero no evoluciona.
OTROS CONCEPTOS:
• RESERVORIO:
o Alberga parásitos comunes al ser humano y a los animales. Suele presentar
sintomatología.
o Puede actuar como foco de diseminación de una enfermedad entre seres de
diferentes especies.
• PORTADOR:
o Alberga el parásito pero no manifiesta síntomas aparentes.
o Actúa como foco de diseminación entre seres de la misma especie.
• VECTOR:
o Vehículo animado que transmite el parásito hacia el huésped.
o La mayoría son artrópodos.
Capaces de multiplicarse en el ser humano, propiedad que contribuye a su supervivencia así como al
desarrollo de infecciones graves a partir de un solo organismo.
Transmisión:
• Los protozoos intestinales pasan a otro humano habitualmente por la vía fecaloral (comida o agua
contaminada) o mediante contacto directo persona- persona.
• Los protozoos que viven en la sangre o tejidos del hombre (hemotisulares) se transmiten a otros
humanos por artrópodos vectores (picadura de mosquito, tábanos, moscas...).
Ciclo biológico monoxeno.
ENTAMOEBA HISTOLYTICA
- Es una ameba.
- Su ciclo de vida comprende dos estadios:
- Trofozoíto: forma vegetativa móvil (pseudópodos).
o Parasita el intestino y el hígado.
- Quiste: forma de vida libre e infectante.
El 90% de infestaciones son asintomáticas. Estos hospedadores actúan como PORTADORES.
Reservorio exclusivamente humano.
- Clínica:
o Amebiasis intestinal: DISENTERÍA AMEBIANA
o Amebiasis hepática: hepatitis y absceso hepático
Distribución cosmopolita.
Tras la ingestión del quiste, la cubierta se reblandece y en el intestino delgado evoluciona a trofozoíto,
que migra hacia el intestino grueso.
• Si las condiciones son propicias, los trofozoítos invaden la mucosa intestinal ocasionando los
síntomas. Por vía hemática pueden acceder a otros órganos, principalmente el hígado.
TOXOPLASMA GONDII
Es un coccidio tisular
HELMINTOS:
• Pluricelulares
• No microscópicos: 1mm a 10m
• Ciclos biológicos heteroxenos: huevos/embriones, larvas y adultos.
• Clasificación:
o Plathelmintosàgusanos: planos. Monoicos.
▪ Trematodos: no segmentados.
• Distomas
• Esquistosomas: dioicos, ¡Son la excepción!
▪ Cestodos: segmentados.
o Nematodosàgusanos redondos, no segmentados y dioicos.
ENTEROBIUS VERMICULARIS:
o Gusano intestinal
o Exclusivo del ser humano
o Afecta sobre todo a niños
o Muy pequeños: hembra 8-12 mm y macho 2-5 mm
o El huevo es la forma infectante y diagnóstica
• Epidemiología: cosmopolita
• Ciclo biológico: monoxeno
• Transmisión: ano-mano-boca
• Clínica: mayoría de veces asintomáticos pero puede causar: picor intenso,
nerviosismo, insomnio, rechinar de dientes y convulsiones.
• Diagnóstico micorbiológico: test de graham
• Tratamiento: mebendazol
ASCARIS LUMBRICOIDES:
o Miden aproximadamente 25 cm
o La hembra puede poner hasta 200.000 huevos al día
• Transmisión: alimentos y agua contaminada
• Distribución: cosmopolita
• Ciclo biológico: monoxeno
ANISAKIS SIMPLEX: anisakidosis es una parasitosis humana del tracto digestivo causada
por larvas de nemátodos de la familia anisakida
• Distribución: cosmopolita
• Reservorio: mamíferos marinos
• Clínica: pueden asintomático o producir nauseas, vómitos, diarrea con sangre y
moco
• Tratamiento:
o Extracción del parásito por endoscopia en caso de localización gástrica
o Tratamiento sintomático en caso de localización intestinal
o La invasión extraintestinal puede requerir cirugía
o En general no se recomienda el tratamiento con fármacos
antiparasitarios
• Prevención:
o Congelación del pescado a -20oC durante más de 72 horas
o Cocción del pescado a 70oC durante más de 2 minutos
TEMA 19.- HONGOS
1. Reino FUNGI.
2. Organismos EUCARIOTAS.
Diferencias con otras células eucariotas:
• Pared celular rígida formada principalmente por QUITINA
(en células vegetales la pared celular está formada por celulosa).
• Membrana celularprincipal componente esterólico es el ERGOSTEROL (en células
animales es el colesterol).
2. Presentan un metabolismo HETERÓTROFO (la principal fuente de carbono es la materia
orgánica) y pueden ser saprófitos, simbiontes, comensales o parásitos.
3. LamayoríasonAEROBIOS.
4. CRECIMIENTO LENTO en comparación con las bacterias, con tiempos de duplicación celular del
orden de horas en lugar de minutos.
5. PuedenserUNICELULARES(levaduras)oPLURICELULARES(hongosfilamentosos)
CLASIFICACION
Los seres vivos se clasifican en 3 líneas celulares filogenéticas distintas denominadas DOMINIOS en
función de la secuencia del gen que codifica parte del RNA ribosomal.
1. Zygomycota: Son considerados hongos primitivos en la escala evolutiva. Es un grupo muy grande y
muy heterogéneo.
Hongos filamentosos de HIFAS NO SEPTADAS (no tabicadas).
2. Ascomycota: Producen las esporas en el interior de una estructura denominada “asca”. Es el grupo
de mayor interés en micología médica y contiene géneros de reproducción sexual y asexual.
3. Basidiomycota: Producen las esporas en el interior de una estructura denominada “basidio”. La
mayoría de sus géneros son de reproducción asexual.
En esta división se incluyen las setas comestibles.
4. Chytridiomycota: Son los únicos que producen células móviles en su ciclo de vida, aunque con un
solo flagelo posterior en forma de látigo. Sin importancia médica.
TIPOS DE HONGOS
• Unicelulares LEVADURAS
• PluricelularesHONGOS FILAMENTOSOS O MOHOS
• DIMORFICOS → presenatn las dos formas ( patógenos verdaderos)
LEVADURAS
• Es la más común
o - Todos los hongos la poseen
o - Principal forma de propagación
o - Forma de crecimiento en los tejidos del hospedador
• El estudio de estructuras de reproducción asexual nos permite la identificación de los hongos con
importancia médica.
GEMACIÓN:
• Las células vegetativas somáticas pueden formar yemas para producir nuevos organismos.
FRAGMENTACIÓN:
ESPORULACIÓN:
a) Fialoconidias
b) Macro y microconidias
c) Esporangiosporas
MICOSIS HUMANAS
MicosisEnfermedad infecciosa producida por hongos microscópicos que puede afectar a cualquier
parte del organismo.
MICOSIS SUPERFICIALES
Son infecciones limitadas a las regiones más superficiales de la piel y el cabello. No son destructivas.
Malassezia furfur
Flora normal en la piel de las personas y es la causa de la caspa y de una enfermedad infecciosa y no
contagiosa de la piel llamada Pitiriasis versicolor.
MICOSIS CUTÁNEAS
MICOSIS SUBCUTÁNEAS
• Afectan a las capas profundas de la piel (capa córnea, el músculo y tejido conjuntivo).
• Los hongos entran en los tejidos más profundos habitualmente por inoculación traumática dando
lugar a formación de abscesos o úlceras que no curan.
• Tienden a estar localizadas y raras veces se diseminan por vía sistémica.
• Están producidas por un amplio espectro de hongos diversos.
• Destacan los géneros Acremonium, Fusarium , Alternaria , Cladosporium y Exophiala.
MICOSIS ENDÉMICAS
• También se denominan MICOSIS SISTÉMICAS porque los hongos que las producen son patógenos
verdaderos y pueden producir infecciones en personas sanas.
• Son 5:
Histoplasma capsulatum Blastomyces dermatitidis Coccidioides immitis Paracoccidioides brasiliensis
Penicillium marneffei
• Estos hongos tienen dimorfismo térmico (aparecen como levaduras a 37 °C y como mohos a 25 °C).
• Todos estos patógenos producen una infección primaria del pulmón, con diseminación posterior a
otros órganos y tejidos.
MICOSIS OPORTUNISTAS
• Son infecciones que se pueden atribuir a hongos que se encuentran normalmente como
comensales humanos o en el medio ambiente.
• A excepción de Cryptococcus neoformans, estos hongos tienen una virulencia inherentemente baja
o limitada y producen infección en personas que están debilitadas o inmunodeprimidas.
• Prácticamente todos los hongos pueden actuar como patógenos oportunistas.
MICOSIS OPORTUNISTAS
• Son infecciones que se pueden atribuir a hongos que se encuentran normalmente como
comensales humanos o en el medio ambiente.
• A excepción de Cryptococcus neoformans, estos hongos tienen una virulencia inherentemente baja
o limitada y producen infección en personas que están debilitadas o inmunodeprimidas.
• Prácticamente todos los hongos pueden actuar como patógenos oportunistas.
• La mayoría de las intoxicaciones por micotoxinas es consecuencia de la ingestión de alimentos
contaminados con estas.
• La presencia de micotoxinas en los alimentos suele deberse a la contaminación de las cosechas por
hongos toxigénicos patógenos vegetales. Estos hongos también puede afectar a los vegetales
durante el almacenamiento de los mismos
• Las micotoxinas son más frecuentes en los países en vías de desarrollo en los que los métodos de
manipulación y almacenamiento de alimentos pueden ser inadecuados.
• Micotoxicosis por hongos filamentosos en las que existen indicios considerables sobre la
participación de una micotoxina específica.