SEMANA 4° IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS Y

LÍPIDOS

Identificación de glúcidos y reconocimiento de azucares reductores e

Identificación de lípidos.
La presencia de los azucares reductores donde existen varias pruebas
cualitativas y cuantitativas, como la prueba Benedict, el reactivo de
Fehling, el reactivo de Tollens, encontrados normalmente en laboratorios
y azúcares reductores; son cualquier azúcar que es capaz de actuar como
un agente reductor porque tiene un grupo aldehído libre o un grupo
cetona libre y donde todos los monosacáridos son azúcares reductores,
junto con algunos disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos, los azucares
reductores son carbohidratos con un grupo carbonilo (C=O) en su
estructura.

Reacción de Benedict (detecta la presencia de azúcares

reductores) Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio
básico débil y aunque es similar a la reacción de Fehling, el medio
básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que
este test sea más sensible y estable.
 1.ALMIDON 10% 2. Colocar 4- 5 gotas de
LACTOSA 10% reactivo bendhit a cada
SACAROSA 10 % una de las muestras.
GLUCOSA 10 %
AL 3 MILILITROS 7 2 MILILITROS
-Primero el feling a 1
FELING 1 / FELING 2 BEMEDHIT mililitro a cada muestra.

3. Remover y colocar al baño maría. Si son monosacáridos

serán de color rojo ladrillo a 150 para que cambie de color
rojo ladrillo, entonces es un reactor positivo si es azul cuando
es negativo.

Se muestra un esquema de cómo pueden irse identificando los

azúcares con las diferentes pruebas en ciertos casos es bueno
efectuar varias pruebas similares para asegurar aún más el resultado
positivo a negativo de la prueba, que si no se realiza con precisión
podría dar resultados erróneos.
SEMANA 5° IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
Identificar a las proteínas como moléculas componentes de
la materia viva.
La medición de la concentración de proteína es necesaria en procesos
que abarcan desde la purificación y marcaje de proteínas hasta la
preparación de muestras para electroforesis.

La cuantificación de proteínas es la medición de la concentración de

proteína total en una muestra.

DETERMINACIÓN E IDENTIFICACION DE PROTEINAS:

PASOS A SEGUIR PARA LA PRUEBA

SEMANA 6° ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Determinar la actividad enzimática de la amilasa salival:
SEMANA 7° CUANTIFICAIÓN DE PROTEINAS
Familiarizarse con el espectrofotómetro como instrumento para medir concentraciones de
proteínas.

La muestra se coloca en el equipo y se mide la transmitancia o absorbancia con un

haz de luz que se selecciona mediante un filtro de radiación visible la radiación
que procede de una lámpara atraviesa un filtro de vidrio coloreado, que sólo deja
pasar una banda limitada de radiación y que atraviesa la muestra colocada en una
cubeta transparente esta radiación se transforma luego en una señal eléctrica que
puede observarse en el medidor del equipo mediante una escala que va de 0 a 100
De acuerdo a lo que establece la ley de Lambert-Beer.

• Los pasos para probar la operatividad del equipo son los siguientes:

a) Se enciende el equipo y se deja que caliente por lo menos 15 minutos (sí el aparato es
automático, dará una señal cuando esté listo para funcionar).
b) Se selecciona la longitud de onda deseada (esto depende de la muestra a ser leída y del
reactivo utilizado).
c) Se selecciona la función absorbancia o transmitancia.
d) Se ajusta el aparato a cero con agua destilada. Si el aparato que se va a utilizar tiene las dos
escalas (absorbancia y transmitancia) se ajustan las lecturas a cero de absorbancia y 100%
de transmitancia utilizando los controles grueso y fino en vacío.
e) Se lee un estándar de concentración conocida y se ajusta el aparato a esa concentración. Si
el aparato que se va a utilizar no tiene control estándar, este se utiliza para obtener el factor
de calibración, dividiendo la concentración del estándar entre su lectura.
SEMANA 8° DETERMINACÓN ENSIMÁTICA DE LA
GLUCOSA
Medir la glucosa en suero o plasma mediante un método enzimático.

Se realizó un estudio descriptivo de evaluación de la exactitud de la glucemia por el

método de la o-toluidina, el cual se comparó con el método enzimático, utilizando la
enzima glucosa oxidasa, desde agosto a septiembre de 2006 en el Hospital Amalia
Simona en Camagüey, con el objetivo de utilizarlo como un método alternativo al
faltar el suministro de reactivos enzimáticos se realizó curva de calibración con la
solución de referencia que se encuentra estandarizada en 100mg % (5.5mmol/l) con la
finalidad de plotear los resultados obtenidos en ambos métodos y trazar la pendiente
de 45º (curva de regresión lineal) se procesaron 20 muestras de suero sanguíneo libres
de hemólisis y de ictericia.

La glucosa reacciona con el reactivo enzimático que contiene una mezcla de las enzimas
Glucosa Oxidasa (GOD) y Peroxidasa (POD) en la primera etapa la Glucosa es oxidada a
Ac. Glucónico por la acción de la enzima GOD, liberándose como producto H2O2, el cual
en una reacción mediada por la enzima POD, reacciona con el Ac. p-Hidroxibenzoico y 4-
Aminoantipirina produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de absorción a
505 nm. en cantidad proporcional a la cantidad de Glucosa presente en la muestra.