Universidad Politécnica de Tlaxcala

Ingenieria en Biotecnologia

8B

Biotecnología Ambiental

Docente: Alma Rosa Netzahuatl Muñoz

Práctica 7: Proyecto de biorremediación de suelos

contaminados con aceite de motor.

Integrantes:

Rodriguez Salinas Mariel Guadalupe

Vázquez Ramírez Anahí

Morales Luna Natalia Yoselin

Garcia Flores Dagne Yiulisa

14 de abril del 2023

Introducción

Los problemas de contaminación en el ámbito local, nacional e internacional son parte de nuestra vida
cotidiana; es preocupante la manera en cómo se han ido degradando los ecosistemas de nuestro
planeta, y la capa superficial de la corteza terrestre no es la excepción. La actividad industrial ha
ocasionado uno de los problemas más serios en materia de contaminación de suelos, donde el derrame
de hidrocarburos derivados del petróleo ocupa uno de los primeros lugares.

En México, y como consecuencia de varios siglos de actividad minera, la industria de la química básica,
petroquímica y de refinación del petróleo, han producido grandes cantidades de residuos peligrosos
difíciles de cuantificar. Se sabe que en 1999, de acuerdo a cifras publicadas por el INEGI-INE (2000),
los sitios contaminados, aún en las estimaciones más conservadoras, ascendían a varios miles de
lugares y éstos eran equivalentes a 25967 km2 de superficie de suelo degradado.

La restauración de suelos contaminados tiene especial relevancia debido al amplio espectro de

fuentes contaminantes, sus afectaciones a los ecosistemas, los procesos productivos y problemas de
salud de la población que entra en contacto con ellos, aunado al carácter de recurso natural no renovable
del mismo; esta acción se encuentra especificada en el Título Cuarto Protección del Ambiente, Capítulo
IV Prevención y Control de la Contaminación del Suelo, Artículo 134 de la LGEEPA. (LGEEPA, 2012).

Existen numerosas tecnologías de remediación de suelos contaminados y de acuerdo a Volke y

Velasco (2002) se pueden agrupar en 3 tipos:

a) biológicos (biorremediación, bioestimulación, fitorremediación, biolabranza, etc.), en donde las

actividades metabólicas de ciertos organismos permiten la degradación, transformación o remoción de
los contaminantes a productos metabólicos inocuos;
b) fisicoquímicos (electrorremediación, lavado, solidificación/estabilización, etc.), aquí se toma ventaja
de las propiedades físicas y químicas de los contaminantes para destruir, separar o contener la
contaminación; y
c) térmicos (incineración, vitrificación, desorción térmica, etc.), en los cuales se utiliza calor para
promover la volatilización, quemar, descomponer o inmovilizar los contaminantes en un suelo.

La biorremediación de suelos es una técnica que utiliza microorganismos para eliminar, degradar o
transformar contaminantes del suelo en compuestos menos tóxicos o no tóxicos. Esta técnica es una
alternativa sostenible y respetuosa con el medio ambiente a las técnicas tradicionales de remediación
de suelos, como la excavación y eliminación de suelo contaminado, que pueden ser costosas y dañinas
para el ecosistema.

Para seleccionar la tecnología de remediación adecuada se debe tener en consideración: a)

características del sitio, b) tipo de contaminante, concentración y características fisicoquímicas, c)
propiedades fisicoquímicas y tipo de suelo a tratar y d) costo (Volke y Velasco 2002).

La biorremediación de suelos se basa en la capacidad de ciertos microorganismos, como bacterias,

hongos y otros organismos, para utilizar los contaminantes del suelo como fuente de energía y nutrientes
para su crecimiento y supervivencia. Estos microorganismos pueden descomponer o transformar los
contaminantes en productos no tóxicos o menos tóxicos, como dióxido de carbono, agua y sales
minerales.

Hay varios factores que pueden influir en la eficacia de la biorremediación de suelos, como la naturaleza
y la cantidad de los contaminantes, la temperatura, el pH, la humedad, la presencia de nutrientes y la
presencia de otros microorganismos en el suelo. Además, la selección adecuada de los microorganismos
y la optimización de las condiciones ambientales son clave para garantizar una biorremediación eficaz y
eficiente del suelo contaminado.

La biorremediación de suelos se ha utilizado con éxito en diversos contextos, como la limpieza de sitios
industriales contaminados, la remediación de suelos agrícolas contaminados con pesticidas y la
restauración de suelos forestales y otros ecosistemas naturales afectados por derrames de petróleo u
otros contaminantes.

Los microorganismos son los agentes primarios de la degradación de contaminantes orgánicos en el

suelo, una premisa es que al incrementar la densidad microbiana en un suelo contaminado, se puede
también acelerar la degradación de los contaminantes orgánicos como los hidrocarburos ( Lee et al.
2007).

Este proyecto busca identificar la técnica más eficiente de biorremediación de suelos contaminados de
las cuales se van a experimentar con las siguientes: Atenuación natural, Aireación (bioventeo), Bio-
estimulación, Fitorremediación, Bioacumulación, Bacterias + plantas, Composta
Objetivo.

● Llevar a cabo diferentes técnicas de biorremediación de suelos contaminados con aceite de

motor.
● Identificar las técnicas más efectivas para la biorremediación de suelos contaminados.
● Diagrama de desarrollo experimental
Datos experimentales
Las propiedades fisicoquímicas del suelo al inicio del experimento se describen en la siguiente tabla,
que se clasificó como suelo franco-arenoso con un contenido medio de materia orgánica, alta capacidad
de intercambio catiónico y moderadamente ácido.

El suelo se recolectó, tamizó con una malla y se contaminó con aceite automotriz utilizando.

Resultados tras la aplicación de las distintas técnicas de biorremediación

-Atenuación natural

● ¿Qué es?

La atenuación natural es un método de remediación pasiva que depende de los procesos naturales para
degradar y disminuir los contaminantes en el suelo y el agua subterránea.

● ¿En qué consiste?

Es un proceso que está relacionado con la degradación y con la disipación de los compuestos orgánicos
presentes en el agua subterránea y en los suelos, a través de mecanismos que generan de manera
natural la reducción total de la masa o concentración de algún contaminante presente.

(Gobierno de Chile, ca.)

 Ventajas:
● Menor generación o transferencia de residuos.
● Menos intrusivo y perturbador que otros métodos.
● Puede ser aplicada a un sitio completo o a parte de él, según los objetivos de
remediación que se quieran alcanzar.
● Pueden ser combinados con tratamientos activos de remediación.
● Los costos de remediación son menores a los de una remediación activa. (Gobierno de
Chile, ca.)

Desventajas:
● Requiere tiempos de remediación mayores para alcanzar objetivos de saneamiento,
comparado con los tratamientos activos. Se requiere un monitoreo regular y a largo
plazo.
● Si las tasas de atenuación natural son demasiado bajas, la pluma puede continuar
migrando.
● La biodegradación incompleta puede generar productos secundarios aún más móviles
y tóxicos que el compuesto parental.
● Usualmente es requerido el control de uso de suelo y de aguas subterráneas.(Gobierno
de Chile, ca.)

● Metodología y apliacación

El ensayo se realizó sobre un suelo franco-arenoso, cuyas características ya han sido presentadas
anteriormente, donde el nivel de contaminación fue del 20% del peso del suelo seco y un porcentaje de
agua subterránea del 20%. La marca del contaminante utilizado no será mencionada.

Condiciones:

El suelo contaminado fue colocado en un recipiente de barro con medidas de 40cm de diámetro x 30
de profundidad. El recipiente se dejó a la intemperie durante 30 días, iniciando el día 14 de marzo del
2023 y concluyendo el día 13 de abril del 2023.

No se llevó a cabo la adición de componentes extras como fuentes de carbono, nitrógeno o fósforo al
suelo como auxiliares a la población microbiana existente en la tierra contaminada, llevando a cabo el
ensayo con el suelo sin alguna manipulación extra a la contaminación con el aceite para poder valorar
la actividad microbiana propia del suelo.
 ● Resultados

Para llevar a cabo un análisis de la efectividad de la atenuación natural de nuestro ensayo se requería
llevar a cabo un a serie de estudios tales como la medición de la conductividad eléctrica, carbono
oxidable, fósforo extractable, respiración del suelo e hidrocarburos totales, sin embargo, no se contaba
con los equipos y reactivos necesarios para llevar a cabo dichos análisis por lo que los resultados
presentados son en base a diferentes artículos consultados que llevaron a cabo el mismo procedimiento
con un suelo de características y condiciones de contaminación similares.

● Carbono oxidable, fósforo extractable, pH y conductividad eléctrica.

(2007)

- Carbono oxidable (gráfico a): Podemos observar en el día 30, la cantidad de carbono oxidable
en el muestreo con la adición de sólo aceite (A) no mostró una disminución significativa en este
intervalo de tiempo. Por lo que suponemos que nuestro ensayo se encuentra en las mismas
condiciones.
 - Fósforo extractable (gráfico b): No se observan diferencias significativas en los primeros 30
días en comparación a la muestra testigo (T).
- pH (gráfico c): No se mostraron diferencias notables o significativas en los 30 días del ensayo,
por lo que se espera que en el ensayo propio tampoco exista una variación del pH significativa.
- Conductividad eléctrica (gráfico d): Podemos observar que la conductividad eléctrica del
suelo contaminado se elevo un poco en el día número 30 en comparación a su valor del día 0
debido a la adición del contaminante, suponiendo estos datos sean similares en nuestro ensayo
y debido al poco tiempo transcurrido del mismo.

● Respiración del suelo

(2007)

Los resultados no fueron significativos en los primeros 30 días en comparación a las demás muestras
realizadas, sin embargo sí lo fueron en comparación a la muestra testigo por lo que la respiración
disminuyó de manera favorable.

En general no se observan cambios significativos en el ensayo debido a que este no se ha llevado a

cabo por más tiempo, ya que se puede observar en los datos proporcionados por el estudio de referencia
que los datos más significativos se ven a partir del día 60 por lo que se podría decir que la atenuación
natural en nuestro ensayo apenas comienza a avanzar, suponiendo asi que la contaminación de nuestro
suelo muestra aún es alta.
-Aireación (bioventeo).

• ¿Qué es?

Esta tecnología opera mediante la inyección de oxígeno en la zona vadosa para remover los compuestos
no acuosos de la fase líquida. Las consideraciones operacionales más importantes de un sistema de
bioventeo son el volumen de oxígeno y la velocidad de inyección al suelo. Un flujo de bioventeo no debe
ser mayor a 4800L O2/0.45 kg de hidrocarburos y con una baja presión (Metcalf & Eddy, 1996).

● ¿En qué consiste?

Consiste en la inyección de aire y oxígeno al suelo para estimular la biodegradación aeróbica del
contaminante.

Ventajas

• Utiliza equipo viable y fácil de instala

• No crea disturbios en el sitio de operación y puede ser usado en áreas inaccesibles
• Bajos periodos de tratamientos: de 6 meses a 2 años bajo condiciones óptimas.

Desventajas

• Altas concentraciones, pueden ser tóxico para los microorganismos

• No es aplicable para ciertas condiciones de suelo (permeabilidades bajos del suelo, alto
contenido de la arcilla, ).
• No es muy eficiente.

• Metodología y aplicación

El mayor aumento en la densidad aparente se observó en el tratamiento de bioventeo, aunque bioventeo

no mostró una significativa actividad microbiana y remoción de hidrocarburos, si influye de manera
importante en el cambio de las propiedades fisicoquímicas del suelo, lo que favorecerá el establecimiento
de microorganismos. Es importante profundizar en la adición de cosustratos ya que la complejidad del
suelo puede interferir negativa o positivamente en la biodegradación de hidrocarburos.
-Bioestimulación

• ¿Qué es?

El proceso de bioestimulación implica la adición de nutrientes esenciales y agua al suelo contaminado

para incrementar la actividad microbiana nativa, la cual disminuyó al modificarse la morfología de los
microorganismos, por la presencia de los procesos de intemperización, tal es el caso de la actividad
enzimática, reducción del tamaño celular y pérdida del micelio, por lo tanto, se pierde la capacidad de
degradar los compuestos hidrofóbicos

● Metodología y aplicación

Se estimó la actividad microbiana (expresado como mg CO2/kg suelo seco) que fue llevada a cabo por
los microorganismos para los 12 tratamientos. Esta medición es un parámetro indirecto para medir la
capacidad de degradación de los microorganismos hidrocarbonoclastas (Anderson 1982, D‟Annibale et
al. 2004). La figura 28a muestra la producción de CO2 para los 12 tratamientos a los 7, 14 y 28 días de
biodegradación.

● Resultados

Las barras de error muestran la desviación estándar de la generación de CO2 a partir de dos réplicas.
Se observó un aumento progresivo de la actividad microbiana en los tratamientos 4, 9 y 12 con un valor
de 132 180, 94 246 y 92 107 mg CO2/kg suelo a los 28 días, respectivamente, siendo el tratamiento 9
el de mayor producción de CO2.
Los tratamientos que se encontraron dentro de este rango de pH a los 28 días de biodegradación fueron:
3, 4, 6, 9 y 10 (figura 29a), esto demuestra que el tipo de nutriente y su concentración influyen en los
procesos metabólicos de los microorganismos, lo que influye directamente en el cambio de las
propiedades fisicoquímicas del suelo en tratamiento.

La humedad del suelo es un factor limitante para el éxito de biorremediación, por lo que previamente a
este estudio se evaluaron diferentes porcentajes de humedad en la biodegradación de los hidrocarburos
obteniéndose que una humedad del 30 % tiene mayor influencia en la biodegradación de hidrocarburos
intemperizados, por consiguiente, en el tiempo cero todos los experimentos comenzaron con una
humedad fija del 30 %. Posteriormente durante el periodo de biodegradación de los hidrocarburos, la
humedad presentó aumentos o decrementos lo que se asocia a la biodegradación de los hidrocarburos
y no por efectos abióticos puesto que los experimentos se desarrollaron en la oscuridad, bajo
condiciones herméticas y controladas para evitar pérdidas de subproductos por volatilización o
fotooxidación.

.
-Fitorremediación

● ¿Qué es?

La fitorremediación es un conjunto de tecnologías que reducen in situ o ex situ la concentración de

diversos compuestos a partir de procesos bioquímicos realizados por las plantas y microorganismos
asociados a ellas.

● ¿En qué consiste?

El proceso de la tecnología de fitorremediación consiste en aprovechar la capacidad de ciertas plantas

para absorber, acumular, metabolizar, volatilizar o estabilizar contaminantes presentes en el suelo, aire,
agua o sedimentos como: metales pesados, metales radioactivos, compuestos orgánicos y compuestos
derivados del petróleo.

Ventajas
● Se puede realizar in situ y ex situ.
● Se realiza sin necesidad de trasportar el sustrato contaminado, con lo que se disminuye la
diseminación de contaminantes a través del aire o del agua.
● Es una tecnología sustentable.
● Es eficiente tanto para contaminantes orgánicos como inorgánicos.
● Es de bajo costo.
● No requiere personal especializado para su manejo.
● Sólo requiere de prácticas agronómicas convencionales.
● Actúa positivamente sobre el suelo, mejorando sus propiedades físicas y químicas, debido a la
formación de una cubierta vegetal.

Desventajas
● En especies como los árboles o arbustos, la fitorremediación es un proceso relativamente lento.
● Se restringe a sitios de contaminación superficial dentro de la rizósfera de la planta.
● El crecimiento de las plantas está limitado por concentraciones toxicas de contaminantes, por lo
tanto, es aplicable a ambientes con concentraciones bajas de contaminantes.
● En el caso de la fitovolatilización, los contaminantes acumulados en las hojas pueden ser
liberados nuevamente al ambiente.
● Los contaminantes acumulados en maderas pueden liberarse por procesos de combustión.
● No todas las plantas son tolerantes o acumuladoras.
 ● Metodología y aplicación

Las plantas pueden utilizar tres estrategias en la remediación:

● Degradación (destrucción del contaminante)

● Extracción
● Contención/inmovilización

Múltiples capacidades de las plantas en relación con contaminantes:

● Excluir
● Absorber
● Retener
● Degradar o transformar
● Volatilizar

Papel de las raíces

● Adaptadas específicamente para extracción de agua y minerales del suelo.

● Desarrollan una extensa red que alcanza cada poro accesible.
● Concentran elementos.
● Segregan exudados que promueven la simbiosis con una compleja comunidad de
microorganismos (rizosfera).
● Liberan agentes que pueden solubilizar y quelatar metales.

Procesos involucrados

● Físicos: Sedimentación, filtración, adsorción, volatilización

● Químicos: Hidrólisis, precipitación, complejación, reacciones redox, fotoquímicas.
● Biológicos: Metabolismo de microorganismos, de plantas.

En esta práctica y aplicación de la técnica se utilizaron semillas de jjmmm, las semillas fueron
desinfectadas, dejándolos remojar durante un periodo de 15 min y enjuagadas con agua destilada.

El sustrato utilizado para el crecimiento de las plantas fue de un suelo franco-arenoso con presencia del
contaminante aceite automotriz usado. Para cada tratamiento se utilizaron 3 semillas en una maceta
conteniendo 2 kg de su respectivo sustrato. Durante todo el proceso y hasta el momento del corte
experimental, el suelo se mantuvo a humedad constante.
 ● Resultado

Después de aplicar la técnica de fitorremediación se mostró que si hubo geminación de la semilla pero
durante el proceso se demostró que el tratamiento tuvo menor porcentaje de germinación al que se
esperaba y que no todas las semillas germinaron. Esto se debe a que la presencia de aceite automotriz
inhibe la germinación en estas especies, ya que en ocasiones las fracciones ligeras de los hidrocarburos
son capaces de moverse a través de las membranas celulares de tal forma que en contacto con la semilla
penetran en la cubierta, matando rápidamente al embrión, provocando una toxicidad aguda, por lo que
hay retardo y reducción del porcentaje de germinación efectiva. El efecto inhibidor se podría atribuir
también a características físicas y químicas del aceite con el que fue contaminado el suelo, el cual tiene
propiedades hidrofóbicas por lo que se llega a generar una película alrededor de las semillas, actuando
como una barrera física tanto para la humectación de la testa como para el intercambio de oxígeno entre
el suelo y la semilla, provocando una fase de latencia prolongada antes de su germinación.

-Bioacumulación

● ¿Qué es?

La bioaumentación es el proceso en el que se inocula al suelo microorganismos nativos o exógenos con

la capacidad comprobada de degradar contaminantes presentes en el suelo, una vez que se multiplican
"in vitro" (Atlas and Bartha 2002).
 ● ¿En qué consiste?

Las especies metálicas se incorporan en el interior de las células de microorganismos; su inconveniencia

radica en la necesidad de preparar cultivos y condiciones especiales para mantener las biomasas.

● Metodología y aplicación

El medio nutritivo con mayor formación de emulsión (observado visualmente en la figura 14) fue Bushnell
Haas, el cual está compuesto por las siguientes sales: KH2PO4, Na2HPO4, KNO3 y FeCl3, este medio
enriquecido tiene un alto contenido de K, Ca, P y N con respecto a los otros medios enriquecidos.

● Resultados

Los resultados del crecimiento bacteriana demostró la existencia de la densidad bacteriana mínima
necesaria para obtener una biodegradación eficiente, la cual debe ser de 1X108 UFC/mL de acuerdo a
lo señalado por Cookson (1995), no obstante la cantidad de microorganismos, así como de las especies
que conformen al consorcio varían de una tecnología de bioremediación a otra aunado a las
características del contaminante. Tal fue el caso de Reda et al., (2009) quienes llevaron a cabo la
biodegradación del 68% de un petróleo crudo ligero con una concentración de 2000mg/L, en un medio
líquido, los cuales emplearon un cultivo bacteriano de 6X105 UFC/mL, dicho resultado indica que entre
menos complejidad química tenga la mezcla favorece el desarrollo de microorganismos.
Discusión de resultados
La biorremediación es una técnica que utiliza organismos vivos para degradar y eliminar contaminantes
del medio ambiente. Hay varias técnicas de bioremediación disponibles, como la bioremediación natural
atenuada, la bioremediación estimulada y la bioaumentación.

En general, la bioremediación puede ser una técnica muy efectiva para la limpieza de suelos y aguas
contaminadas. Sin embargo, los resultados pueden variar dependiendo de varios factores, como el tipo
de contaminante, la cantidad de contaminante presente, el tipo de organismo utilizado y las condiciones
ambientales

Por ejemplo, la atenuación natural es un método de remediación pasiva que utiliza procesos naturales
para disminuir los contaminantes en el suelo y el agua subterránea. Este proceso se relaciona con la
degradación y disipación natural de los compuestos orgánicos presentes en el medio ambiente, lo que
genera la reducción total de la masa o concentración de los contaminantes. Este método es una
alternativa viable y económica para la remediación de suelos y aguas subterráneas contaminadas,
siempre que se cumplan las condiciones necesarias para que el proceso de atenuación natural sea
efectivo.
La aireación se utiliza para eliminar contaminantes en suelos y aguas subterráneas mediante el
suministro de oxígeno al medio ambiente. El proceso de aireación aumenta la actividad de los
microorganismos aeróbicos, lo que acelera la degradación de los contaminantes.

La bioestimulación se utiliza para acelerar la degradación de contaminantes mediante la adición de

nutrientes y otros compuestos al suelo o agua subterránea. Estos nutrientes estimulan el crecimiento y
la actividad de microorganismos que pueden degradar los contaminantes, lo que puede resultar en una
disminución de la concentración de los mismos en el medio ambiente.

La fitorremediación utiliza plantas para remover contaminantes del suelo y agua. Las plantas absorben
los contaminantes a través de sus raíces y los acumulan en sus tejidos, donde pueden ser metabolizados
y descompuestos por los microorganismos que viven en sus raíces o en el suelo circundante. Esta
técnica es especialmente útil en la remediación de suelos contaminados con metales pesados,
compuestos orgánicos y otros contaminantes. A comparación de otras técnicas mostradas esta es la
más económica y sustentable.
La bioacumulación también hace uso de plantas, los organismos utilizados en la bioacumulación pueden
ser cosechados y removidos del medio ambiente, lo que resulta en la eliminación del contaminante.
También pueden ser utilizados para la producción de biocombustibles o productos químicos, lo que la
convierte en una técnica sostenible y rentable. Este proceso es tardado y requiere de un cuidadoso
mantenimiento para que llegue a ser efectiva.

Conclusión
En conclusión después de aplicar las diversas técnicas mencionadas a lo largo del proyecto y debido a
los resultados obtenidos la biorremediación de suelos es una técnica eficaz y sostenible para la
eliminación de contaminantes en el suelo. A diferencia de las técnicas tradicionales de remediación del
suelo, que pueden ser costosas y generar grandes cantidades de residuos, la biorremediación utiliza
microorganismos y plantas para degradar y eliminar los contaminantes del suelo de manera natural.
La biorremediación se puede utilizar en una amplia variedad de suelos contaminados, incluidos los que
están contaminados con productos químicos, petróleo, metales pesados y otros contaminantes. Las
diferentes técnicas de biorremediación, como la biorremediación natural, la bioestimulación, la
fitorremediación, etc. se pueden adaptar a las necesidades específicas de cada caso.
Además de ser una técnica efectiva para la eliminación de contaminantes, la biorremediación también
tiene otros beneficios, como la conservación del suelo y la mejora de la calidad del suelo a largo plazo.
La biorremediación también puede ser más rentable que otras técnicas de remediación del suelo a largo
plazo.
Sin embargo, es importante tener en cuenta que la biorremediación no es una solución mágica y puede
tomar tiempo como en el caso de este proyecto a escala pequeña para que los microorganismos y las
plantas eliminen completamente los contaminantes del suelo. También es importante tener en cuenta
los posibles efectos secundarios de la biorremediación, como la liberación de gases tóxicos o la
acumulación de contaminantes en las plantas utilizadas en la fitorremediación.
En resumen, la biorremediación de suelos es una técnica prometedora y efectiva para la eliminación de
contaminantes del suelo, y debe ser considerada como una opción viable para la remediación de suelos
contaminados.
Bibliografía
● (2007, September 11). ATENUACIÓN NATURAL Y REMEDIACIÓN

INDUCIDA EN SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS. Scielo.

Retrieved April 13, 2023.

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contaminados (1st ed., Vol. 5).

● INEGI-INE (2000). Indicadores de Desarrollo Sustentable en México. Instituto

Nacional de Estadística Geografía e Informática e Instituto Nacional de
Ecología. México, DF. 213 pp.
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● Volke T. y Velasco J. (2002). Tecnologías de remediación para suelos
contaminados. Instituto Nacional de Ecología, México, 64 pp.