Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Fisiología celular
Práctica 6. Potencial de acción compuesto
Alumna: Balderas León María del Pilar
Grupo 4FV1
Colocar el módulo MP36 (Biopac) en la
Inicio I. Montaje del equipo de parte superior de la mesa de
estimulación y de registro laboratorio, conéctelo a la corriente y a
la computadora con el cable USB.

Realizar una inspección

Encienda la computadora, No debe haber conexión rápida al módulo MP36, ubicar
pero no encienda el Biopac. alguna en el canal 1 (CH1). el canal 2 (CH2) en la parte
delantera y “Analog out” en la
trasera del equipo.

Conexiones de biopac
Identifique el cable
DB9H y conéctelo a
“Analog out” del Biopac.

Conectar el cable SS2L al

canal 2 (CH2) del Biopac
Conectar el terminal negro St(-) del (MP36).
DB9H al cable negro (GND) del
SS2L y conectar éste a la banda
metálica siguiente de la cámara de Conectar el terminal
nervio aislado. blanco Vin (-) del SS2L a
la penúltima banda
metálica de la cámara.
Conectar el terminal rojo St(+)
del DB9H a la banda metálica
más externa de la cámara de
Conectar el terminal rojo Vin (+)
nervio aislado.
del SS2L a la última banda
metálica de la cámara de nervio
aislado.

c) Prueba de
Encienda el Biopac.
montaje correcto.
Colocar el hilo húmedo en la cámara de
nervio aislado y aplicar un estímulo de
0.050 V (50 mV) dando clic en la pestaña
inicio. Observar el estímulo en el canal 1 y
el artefacto del estímulo en el canal 2.
Si no observa el artefacto,
aumente la intensidad del
estímulo en intervalos de 0.050
V, hasta observarlo.
Un corte a nivel de las
comisuras bucales (que
pase por el borde
anterior de las
membranas timpánicas).
Personal capacitado será encargado de anestesiar decapitar y desmedular a
la rana de acuerdo a la NOM-033-SAG/ZOO-2014.
Separar el músculo gastrocnemio de los otros
músculos y del hueso, colocar un disector de
vidrio entre el tendón de Aquiles y el hueso, pase
un hilo por debajo del tendón y amárrelo
fuertemente, finalmente, corte el tendón de
Aquiles lo más lejos posible del músculo.
Humedecer un
trozo de hilo
grueso en
solución Ringer.
Abrir el archivo PAC-Ciatico-01.gtl. En la parte
superior aparece un rectángulo rojo con
parámetros de estimulación: encendido y
apagado, frecuencia, voltaje, duración y
número de pulsos o estímulos y canal de
referencia. La señal del estimulador se verá en
el canal 1 (CH1) y la señal de registro en el
canal 2 (CH2).
II. Montaje de la preparación de
Retire el hilo de la cámara.
nervio ciático aislado de rana toro.
Tomar con una franela húmeda
Se destruye la médula
espinal introduciendo un
estilete y haciendo
movimientos circulares.
Cortar la piel alrededor de la
parte superior de la pierna
Jálar la piel hacia abajo de la
pierna hasta que quede
expuesta toda la
musculatura.
 Sin tocar el nervio con objetos metálicos,
descúbralo en ambos sentidos hasta la
médula espinal por un lado y hasta el
extremo distal del fémur por el otro.
Cortar los músculos que sea necesario.
III. Determinaciones
prácticas
a) Estímulos
umbral y máximo
b) Velocidad de conducción
Aplicar un estímulo de
intensidad intermedia
entre el umbral y el
máximo. Mida el intervalo
que separa el inicio del
estímulo del inicio del
PAC (latencia).
Aplique estímulos con voltaje
ligeramente menor al del
estímulo umbral y con un
tiempo de retardo de 25 ms.
Observe.
Amarre un trozo de hilo alrededor
del nervio tan cerca de la médula
espinal como sea posible. Con
unas tijeras finas separe el nervio
de la médula, de manera que
quede sujeto con el hilo.
Coloque el nervio extendido sobre Con ayuda de los disectores de
las bandas metálicas de la cámara vidrio, separe cuidadosamente
de nervio aislado y mueva los el nervio, hasta liberar una
electrodos de acuerdo a la longitud porción de 8 a 10 cm.
del nervio.
Aplicar un estímulo inicial de
Abrir el archivo PAC-Ciatico-01.gtl,
0.050 V (50 mV) y observe. Si no
note que la duración del estímulo está
hay PAC, aumente
fija (0.2 mseg) y considere que para
gradualmente la magnitud del
grabar sus registros debe cambiar el
estímulo (a intervalos de 0.050
nombre del archivo cada vez que
V) hasta que se aprecie la más
haga un cambio.
leve respuesta del nervio. Este
es el estímulo umbral.
Encontrar las características del
estímulo (voltaje y duración) en Seguir aumentando el voltaje del
las que el PAC deja de estímulo, observe cómo aumenta
aumentar su amplitud, aunque gradualmente la amplitud del PAC.
se siga incrementando el voltaje
del estímulo. Éste es el estímulo
máximo.
Medir la separación entre el
electrodo de estimulación y el
Repita la operación
electrodo de registro que estén
después de poner unas
más próximos entre sí en la
gotas de Ringer frío sobre
cámara de nervio aislado. Con
el nervio ciático.
estos valores calcule la
velocidad de conducción del
nervio (m/s).
Abra el archivo PAC-Ciatico- c) Suma temporal
02.gtl. En este caso se
aplican dos estímulos
subumbrales con un tiempo de
retardo determinado entre uno y
otro.
 Repita la experiencia reduciendo el
tiempo interestímulo paulatinamente
hasta que observe un PAC. Este Ahora reduzca el tiempo
tiempo es el necesario para que se interestímulo un poco más y d) Período refractario
sumen los potenciale locales observe lo que sucede.
producidos por los estímulos
subumbrales.

Abra nuevamente PAC-Ciatico-

Siga reduciendo el
tiempo interestímulo,
hasta que la
respuesta al segundo
estímulo desaparezca
por completo.
Reduzca gradualmente el tiempo de
02.gtl y aplique estímulos con
retardo del segundo estímulo,
un voltaje ligeramente superior
observando atentamente la respuesta
al umbral y un tiempo
al segundo estímulo, hasta que se
aprecie una leve reducción en este interestímulo de 30 ms. Deben
observarse 2 PACs similares
PAC. Este valor corresponde a uno de
en amplitud y duración.
los límites del periodo refractario
relativo.

Reduzca el voltaje del

Abra la plantilla PAC-Ciatico-03.gtl y ajuste estímulo en una décima
e) Curva intensidad- el voltaje del estímulo ligeramente por parte y aumente su duración
duración arriba del valor umbral, de modo que el hasta que la respuesta del
PAC tenga una forma bien definida. nervio (PAC) tenga
Registre las características del estímulo y características parecidas a
mida la amplitud y duración del PAC. las que midió inicialmente.
Registre nuevamente la
duración y la magnitud del
estímulo.

Repita el proceso hasta que el Reduzca nuevamente el voltaje

Repita el proceso, pero
ahora aumente el
voltaje y reduzca la
duración del estímulo.
estímulo se haya reducido a un
punto en el que no logre generar
un PAC aun aumentando la
duración (o hasta valor máximo
permitido por el equipo).
del estímulo y ajuste la duración
para tener la misma forma
(amplitud y duración) del PAC.
Registre el nuevo par de valores.

Fin

Fin