ANÁLISIS ESPECTROFOTOMÉTRICO DE UNA MUESTRA

PREPARADA PARA TOLUENO

LUIS SANTIAGO BERRÍO REYES

MIGUEL ANGEL FARIAS FUENTES
JUAN MANUEL VERTEL CASTRO
ANA GABRIELA RICARDO HOYOS
ALIX MANUEL JULIO DAVID
EDI MANUEL FUENTES

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA

MSC: EDINELDO LANS

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA QUÍMICA
QUÍMICA ANALITICA II

MONTERIA-CORDOBA

2023-I
Objetivos

Objetivo General

• Analizar a través de la espectrofotometría una muestra preparada de tolueno y a

partir de diferentes estándares conocer la concentración desconocida de una
muestra problema.

Objetivos específicos

• Preparar estándares a partir de la solución madre.

• Obtener la concentración de la muestra desconocida.

• Realizar un buen lavado a los materiales para evitar contaminación de la muestra.

Introducción
El análisis espectrofotométrico en la región del UV es una técnica utilizada para
medir la absorción de luz por las moléculas en una muestra. La luz se hace pasar a
través de la muestra y se mide la cantidad de luz absorbida por la muestra a lo largo
de un rango de longitudes de onda en la región del UV.

La región del UV abarca longitudes de onda de aproximadamente 10 nm a 400 nm.

Esta región de longitud de onda se utiliza para la medición de muestras que tienen
enlaces químicos con doble y triple enlaces conjugados como los ácidos nucleicos
y las proteínas. Además de esto, se utiliza para determinar las concentraciones de
compuestos orgánicos y también se utiliza para determinar la pureza de una
muestra.

La aplicabilidad de esta técnica se basa en el principio de que los compuestos

orgánicos y los compuestos inorgánicos absorben la luz en diferentes longitudes de
onda, lo que permite la identificación y cuantificación de los mismos.

La espectrofotometría UV se utiliza en una variedad de campos, como la química,

la bioquímica, la farmacología y la ciencia de materiales. Es una técnica importante
para la investigación y se utiliza en el desarrollo de medicamentos, la evaluación de
la calidad del agua y la determinación de la concentración de diferentes compuestos
químicos en diferentes muestras.

Marco teórico
El tolueno, es un compuesto orgánico aromático muy utilizado en la industria
química. Es un líquido incoloro de olor característico que se utiliza como disolvente
en muchos procesos industriales y en la producción de productos químicos y
materiales sintéticos. El análisis cuantitativo de tolueno suele utilizar métodos
espectrofotométricos para determinar su concentración en una muestra. La
espectrofotometría se basa en la absorción de radiación electromagnética por
moléculas en solución.

Se toma una alícuota de esta solución madre y se titula con n-heptano, que es un
solvente adecuado porque no interfiere con la señal de absorción del tolueno. Se
prepararon estándares de calibración con diferentes concentraciones conocidas de
tolueno para construir una curva de calibración. Luego, se realizaron mediciones de
absorción de luz a diferentes longitudes de onda usando un espectrofotómetro. Se
encontró que la máxima absorción de tolueno se producía a una longitud de onda
de 220 nm.

Estos datos se usaron para construir una curva de calibración que relacionaba la
absorbancia con la concentración de tolueno. Se utilizó un ajuste lineal utilizando el
método de mínimos cuadrados para obtener la ecuación de la recta que describe la
relación. El tolueno

ecuación de la línea recta. En resumen, la estructura teórica del análisis se basa

en la preparación de soluciones de tolueno, el establecimiento de una curva de
calibración mediante medidas de absorbancia y el uso de esta curva para estimar
la concentración de tolueno en las muestras de prueba. La espectrofotometría se
utiliza como una herramienta cuantitativa para determinar la concentración de un
compuesto en una solución utilizando la capacidad de las moléculas para absorber
la radiación electromagnética de una longitud de onda específica.

Materiales y reactivos
 Pipetas volumétricas de 1, 5, 10, mL y peras de succión
 5 Balones volumétricos de 25 mL
 1 Balón volumétrico de 100 mL
 Balanza analítica
 Espectrofotómetro uv-vis
 Acetona
 n-Heptano
 Tolueno

Diagrama de flujo

se lavaron todos los se eliminaron los rastro de

se preparo 100 mL una
materales con agua agua lavando con acetona y
solucion madre de tolueno
enjabonada y se ejuagaron posteriomenet lavando con
de concentracion 0,870 g/L
con agua n-Heptano

Se obtuvo una incognita

Se prepararon estandares se obtuvo el valor maximo
por parte del instructor a la
de calibracion 25 mL de de absorbancia para cada
cual se le hicieron lecturas
concentracion 0,0435 espectro y se preparo la
de la absorbnacia junto con
0,0870 0,174 y 0,201 g/L curva de calibrado
los estandares y blanco

se registro el los valores de

concentracion de la
muestra
problema,desviacion
estandar,R2 y pendiente.
Cálculos y resultados
Preparación de solución madre y estándares de calibración y blanco.
Solución madre 100 mL de concentración 0,870 g/L
𝑤 𝑠𝑙𝑡 𝑒𝑛 𝑔
P/V= w slt=p/v x L sln w slt=0,870 g/L x 0,1 L = 0,0870g
𝐿 𝑠𝑙𝑛
𝑚 𝑚 0,0879 𝑔
d=0,87 g/mL del tolueno d= 𝑣 v= 𝑑 v=0,87 𝑔/𝑚𝑙 =0,1 mL

Se tomó este volumen y se aforo utilizando n-heptano, luego se prepararon los

estándares de calibración.

C1V1=C2V2
𝑔
0,0453 𝑥 25 mL
𝐿
Estándar 1: 0,0435 g/L V1= 𝑔 =1.25 mL
0,870
𝐿

𝑔
0,0870 𝑥 25 mL
𝐿
Estándar 2: 0,0870 g/L V1= 𝑔 =2.25 Ml
0,870
𝐿

𝑔
0,174 𝑥 25 mL
𝐿
Estándar 3: 0,174 g/L V1= 𝑔 =5 mL
0,870
𝐿

𝑔
0,201 𝑥 25 mL
𝐿
Estándar 4: 0,201 g/L V1= 𝑔 =7.5 mL
0,870
𝐿

Tomando esto volúmenes correspondiente para cada estándar de calibración para

luego aforar utilizando n-heptano hasta la marca, para el blanco se utilizó solamente
el solvente n-heptano debido a que sus bandas de absorción son debidas a
transiciones σ→σ∗ de enlaces C-C y C-H. Estas transiciones son de elevada
energía y tienen lugar a longitudes de onda inferior a los 150 nm, no observable en
espectrofotómetros convencionales. Esta característica permite utilizarlos como
disolventes de la muestra a analizar, ya que no interfieren con sus señales.

Se hizo un barrido de onda de 200 a 350 nm para determinar el λ máximo del

compuesto y obtenemos un valor de absorción máximo en 220 nm por lo que se
calibra el equipo para esta longitud de onda y se procede a realizar las lecturas.
Imagen 1: Barrido 200 a 350 nm

Realizamos 3 lecturas de absorción para cada concentración de tolueno y

calculamos el promedio respectivo, que registramos en la siguiente tabla:

Concentración de C6H5CH3 Absorbancia Absorbancia

(g/L) Promedio
Blanco 0,000 0,000 0,000 0,000

0,0435 0,198 0,200 0,199 0,199

0,0870 0,344 0,342 0,344 0,343

0,685 0,672
0,174 0,686 0,681

0,201 0,785 0,787 0,785 0,785

Muestra problema 0,651 0,646 0,653 0,650

Ahora procedemos a realizar la curva de calibrado con las absorbancias vs la

concentración de tolueno
 Curva de calibrado
0.9

0.8 y = 3.7535x + 0.0277

R² = 0.9991
0.7

0.6
Absorbancia

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
Concentracion de tolueno (g/L)

Utilizando la herramienta de Excel y aplicando una línea de tendencia lineal, que

utiliza el método de los mínimos cuadrados haciendo la curva lo más lineal posible,
obtuvimos que:

y = 3,7535x + 0,0277

m = 3,7535 b = 0,0277 R² = 0,9991

También las distintas incertidumbres para m y b

m ± S = 3,7535 ± 0,07826743

b ± S = 0,0277 ± 0,01107825

Ahora para la muestra problema con una absorbancia de 0,650, despejamos de la

ecuación de la recta X, que corresponde a la concentración estimada de la muestra
problema en g/L

(0,650 − 0,0277 ± 0,01107825)

X= = 0,1658 ± 0,08934568 g/L
3,7535 ± 0,07826743
Entonces la concentración aproximada de la muestra problema es 0,1658
± 0,08934568 g/L de tolueno

Absorbancia vs concentracion (con la muestra problema)

0.9

0.8

0.7
0.65
0.6
Absorbancia

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
Concentracion de tolueno (g/L)

ANALISIS DE RESULTADOS

Se llevaron a cabo diversos cálculos y mediciones para determinar la concentración

de tolueno en una muestra problema. En primer lugar, se preparó una solución
madre de tolueno con una concentración de 0,870 g/L. A partir de esta solución, se
tomó un volumen de 0,1 mL, el cual se aforó con n-heptano para obtener la solución
de trabajo.

Posteriormente, se prepararon diferentes estándares de calibración utilizando

volúmenes específicos de la solución madre y n-heptano, obteniendo
concentraciones conocidas de tolueno. Además, se realizó un barrido de longitud
de onda en el rango de 200 a 350 nm, y se identificó que la absorción máxima del
tolueno ocurrió a 220 nm. Con base en esta información, se calibró el equipo para
esta longitud de onda y se procedió a realizar las lecturas.

Se realizaron tres lecturas de absorción para cada concentración de tolueno,

incluyendo el blanco. Los valores obtenidos se promediaron y se registraron en la
tabla de resultados. A partir de estos datos, se construyó una curva de calibrado
Utilizando las absorbancias promedio y las concentraciones conocidas de tolueno.
Aplicando un método de mínimos cuadrados, se obtuvo una línea de tendencia
lineal, cuya ecuación resultante fue: y = 3,7535x + 0,0277, donde y representa la
absorbancia y x representa la concentración de tolueno en g/L. El coeficiente de
determinación (R²) fue de 0,9991.

Se determinaron las incertidumbres asociadas a los coeficientes de la ecuación de

la recta. La pendiente (m) fue calculada como 3,7535 ± 0,07826743 y el intercepto
(b) como 0,0277 ± 0,01107825.

Utilizando la ecuación de la recta, se estimó la concentración de la muestra

problema, la cual presentaba una absorbancia de 0,650. De acuerdo con los
cálculos realizados, se obtuvo una concentración aproximada de 0,1658 ±
0,08934568 g/L de tolueno en la muestra problema.

los resultados indican que la concentración aproximada de tolueno en la muestra

problema es de 0,1658 g/L, con una incertidumbre de ±0,08934568 g/L. Es
importante tener en cuenta estas incertidumbres al interpretar los resultados
obtenidos.

Conclusiones

De acuerdo al análisis de los resultados del experimento se puede concluir que es

posible examinar a través de la espectrofotometría una muestra preparada incolora
de tolueno, y con los resultados obtenidos, realizar los distintos cálculos para poder
hallar la curva de calibrado, teniendo en cuenta que se aplicaron ecuaciones que
ajustaron los datos para realizar el análisis de la muestra empleando el método de
mínimos cuadrados, se cumplieron los objetivos propuestos, y ademas:

• Con la tendencia lineal se pudo verificar que no hubo desviaciones de la ley de

Beer.
• Fue posible obtener la concentración de la muestra desconocida por medio de una

curva de calibrado la cuál fue de 0.1658± 0.089345868 g/L y arrojó una absorbancia

semejante a la de los estándares

• Se pudo verificar que se realizó un buen lavado a los materiales usados pues no
se produjo ninguna contaminación con agua

Bibliografías

http://documentacion.ideam.gov.co/openbiblio/bvirtual/018903/Links/uia25.pdf

https://agqlabs.cl/wp-content/uploads/Analisis-quimico-medir-es-comparar.pdf

Arenas, I. (2004). Métodos de Laboratorio. Espectrofotometría de absorción.

Instituto de Biotecnología. UNAM

CROMTEK. (2019, 7 diciembre). Espectrofotometría UV-VIS