14.
4 Gluconeogénesis 557
precipiten las proteínas de la leche produciendo la tex-
tura espesa y el sabor amargo del yogur sin azucarar.
Otra bacteria, el Propionibacterium freudenreichi
fermenta la leche produciendo ácido propiónico y CO,;
el ácido propiónico precipita las proteínas de la leche y
las burbujas de CO, dan lugar a los agujeros caracterís-
ticos del queso suizo. Muchos otros productos son el
resultado de fermentaciones: escabeche, chucrut, salsi-
chas, salsa de soja y toda una serie de platos nacionales
favoritos tales como el kimchi (Corea), tempoyak (Indo-
nesia), kéfir (Rusia), dahi (India) y pozol (Méjico). El
descenso del pH asociado con la fermentación también
ayuda a conservar los alimentos, porque la mayoría de
microorganismos causantes del deterioro de los alimen-
tos no pueden crecer a pH bajo. En la agricultura, pro-
ductos vegetales secundarios tales como los tallos del
maíz se conservan para utilizarlos como alimento animal
apilándolos en grandes contenedores (silos) con un
acceso de aire limitado; la fermentación microbiana
produce ácidos que hacen disminuir el pH. El forraje
resultante de esta fermentación se puede guardar como
pienso durante largos períodos sin que se deteriore.
En 1910 Chaim Weizmann (que después se convir-
tió en el primer presidente de Israel) descubrió que una
bacteria, el Clostridiurn ocetobutyricum, fermenta el
almidón a butanol y acetona. Este descubrimiento abrió
el campo de las fermentaciones industriales, en las que
se suministra algún material fácilmente asequible y rico
en glúcidos (almidón de maíz o melazas, por ejemplo) a
un cultivo puro de un microorganismo específico que lo
fermenta dando un producto de mayo) or com: > los organismos necesitan un método para sintetizar glu-
El etanal utilizado para fabricar el “g de
por fermentación microbiana, al ¡gu me los “ác
fórmico, acético, propiónico, butírico y succínico, y el
glicerol, etanol, isopropanol, butanol y butanodiol. Estas
fermentaciones se realizan generalmente en grandes
recipientes cerrados en los que se ajusta la temperatura
y la entrada de aire para favorecer la multiplicación de
los microorganismos deseados al tiempo que se exclu-
yen organismos contaminantes. La belleza de las fer-
mentaciones industriales reside en que complicadas
transformaciones químicas de muchos pasos se llevan a
término con rendimientos elevados y con pocos produc-
tos secundarios por fábricas químicas que se reprodu-
cen a sí mismas: las células microbianas. En algunas
fermentaciones industriales se ha desarrollado tecnolo-
gía que permite inmovilizar las células sobre un soporte
inerte, pasar la matería prima de manera continua a
través del lecho de células inmovilizadas y recoger el
producto deseado en el efluente: ¡el sueño de un inge-
niero!
RESUMEN 14.3 Destinos del piruvato en condiciones
anaeróbicas: Fermentación
M El NADH formado en la glucólisis debe reciclarse
para regenerar el NAD* que se requiere como aceptor
electrónico en el primer paso de la fase de beneficios.
En condiciones aeróbicas los electrones pasan desde el
NADH al O, en la respiración mitocondrial.
MM En condiciones anaeróbicas o hipóxicas rmuchos
organismos regeneran el NAD* transfiriendo los electro-
nes del NADH al piruvato y formando lactato. Otros
organismos, tales como la levadura, regeneran el NAD-*
mediante reducción del piruvato a etanol y CO,. En
estos procesos anaeróbicos, (fermentaciones), no se
produce oxidación o reducción netas de los carbonos
de la glucosa.
MM Una gran variedad de microorganismos pueden fer-
mentar el azúcar de los alimentos frescos, lo que da
lugar a cambios de pH, gusto y textura y a la conserva-
ción del alimento. Las fermentaciones se utilizan en la
industria para producir muchos compuestos orgánicos
de valor comercial a partir de materias primas baratas.
14.4 Gluconeogénesis
El papel central de la glucosa apareció tempranamente
dentro de la evolución y este azúcar continúa siendo el
combustible y bloque estructural casi universal de los
organismos modernos, desde los microbios hasta el
hombre. En los mamíferos, algunos tejidos dependen
casi por completo de la glucosa para la producción de
energía metabólica. Para el cerebro y el sistema nervio-
so humanos, así como para los eritrocitos, testículos,
médula renal y tejidos embrionarios la glucosa de la
sangre es la única, o principal, fuente de combustible.
Solo el cerebro humano requiere más de 120 g de gluco-
sa al día, más de la mitad de toda la glucosa almacenada
como glucógeno en el músculo y en el hígado. Sin
embargo, el suministro de glucosa a partir de estos
depósitos no siempre es suficiente; entre comidas y
durante ayunos prolongados, o después de ejercicio
vigoroso, el glucógeno se ha agotado. En estos períodos,
/ (8 fai hrtir de precursores no glucídicos. Esto se con-
= i20 avés de una ruta denominada gluconeogéne-
sis (“formación de azúcar nuevo”) que convierte el
piruvato y compuestos relacionados de tres y cuatro
carbonos en glucosa.
La gluconeogénesis tiene lugar en todos los anima-
les, plantas, hongos y mieroorganismos. Las reacciones
son, esencialmente, las mismas en todos los tejidos y en
todas las especies. Los precursores importantes de la
glucosa en los animales son compuestos de tres carbo-
nos tales como el lactato, piruvato, y el glicerol así como
ciertos aminoácidos (Fig. 14-16). En los mamíferos la
gluconeogénesis tiene lugar principalmente en el hígado
y en menor extensión en la corteza renal y en las células
epiteliales que recubren el intestino delgado. La glucosa
producida pasa a la sangre para abastecer otros tejidos.
Después de un ejercicio vigoroso, el lactato producido
por la glucólisis anaeróbica en el músculo esquelético
vuelve al hígado y se convierte en glucosa que vuelve de
nuevo al músculo y se convierte en glucógeno en un
circuito denominado ciclo de Cori (Recuadro 14-2;
véase también la Fig. 23-21). En las semillas germinadas
de plantas, las grasas y proteínas almacenadas se con-
vierten, a través de rutas entre las que se encuentra la
gluconeogénesis, en el disacárido sacarosa para su
transporte a partir de la planta en desarrollo. La glucosa
y sus derivados son los precursores en la síntesis de los
componentes de las paredes celulares de las plantas,
nucleótidos y coenzimas y de un gran número de meta-
bolitos esenciales. En muchos microorganismos la glu-
coneogénesis empieza a partir de compuestos orgánicos
sencillos tales como acetato, lactato y propionato pre-
sentes en su medio de cultivo.
558 — Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

TABLA 14-1 — Algunas reacciones dependientes de TPP

Enzima Ruta(s) Enlace roto Enlace formado

Piruvato descarboxilasa Fermentación etanólica REE

2 R a
e
Or H

Piruvato deshidrogenasa Síntesis de acetil-CoA e) Pp Pe Vd

a-Cetoglutarato deshidrogenasa Ciclo del ácido cítrico E S- -CoA

di
Reacciones de asimilación de carbono
Ruta de las pentosas fosfato
PCC
Y ]
PR C—CRE
1)
H

Aunque las reacciones de la gluconeogénesis son las
mismas en todos los organismos, el contexto metabólico
y la regulación de la vía difieren de un organismo a otro
y de tejido a tejido. En esta sección nos fijaremos en la
gluconeogénesis tal corno tiene lugar en el hígado de los
mamíferos. En el Capítulo 20 mostraremos de qué modo
utilizan esta vía los organismos fotosintéticos para con-
vertir los productos primarios de la fotosíntesis en gluco-
sa que será almacenada en forma de sacarosa o almidón.
La gluconeogénesis y la glucólisis no son rutas idén-
ticas que transcurren en direcciones opuestas aunque
comparten varios pasos (Fig. 14-17); 7 de las 10 reac-
ciones enzimáticas de la gluconeogénesis son la inversa
de las reacciones glucolíticas. No obstante
reacciones de la glucólisis que son prácticarnk
versibles in vivo y que no pueden utilizarse e
neogénesis: la conversión de la glucosa en glucosa
6-fosfato por la hexoquinasa, la fosforilación de la fruc-
tosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bisfosfato por la fosfofruc-
toquinasa-1 y la conversión del fosfoenolpiruvato en
piruvato por la piruvato quinasa (Fig. 14-17). En las
células, estas tres reacciones se caracterizan por una
gran variación negativa de energía libre, mientras que
otras reacciones glucolíticas tienen una AG próxima a 0
(Tabla 14-2). En la gluconeogénesis, los tres pasos irre-
versibles se “rodean” mediante un conjunto diferente de
enzimas que catalizan reacciones que son suficiente-
mente exergónicas para ser efectivamente irreversibles
en la dirección de síntesis de la glucosa. De este modo,
tanto la glucólisis como la gluconeogénesis son procesos
irreversibles en las células. En los animales ambas rutas
tienen lugar mayoritariamente en el citosol por lo que
necesitan una regulación recíproca y coordinada. La
regulación independiente de las dos rutas se consigue a
través de controles ejercidos sobre los pasos enzimáti-
cos específicos propios de cada una.
Empezaremos considerando las tres reacciones de
0 oneogénesis. (Recuerde que el término
NE ”) hace referencia a los rodeos de las
reacciones glucolíticas irreversibles.)
La conversión del piruvato en fosfoenolpiruvato requiere
dos reacciones exergónicas
La primera reacción de rodeo en la gluconeogénesis es
la conversión del piruvato en fosfoenolpiruvato (PEP).

TABLA 14-2 Variaciones de energía libre de reacciones al=

Paso de la reacción glucolítica A6* (lU/mol) AG* (1J/mol)

O Giucosa + ATP —— glucosa 6-fostato +ADP -16,7 33,4

0 Glucosa 6-fosfato == fructosa 6-fosfato 1,7 Da25
O Fructosa 6-fosfato + ATP —— fructosa 1,6-bisfosfato + ADP -4,2 22,2
O Fructosa 1,6-bisfosfato == dihidroxiacetona fosfato + gliceraldehído 3-fosfato 23,8 Sa)
6 Dinidroxiacetona fosfato —— gliceraldehído 3-fosfato 7,5 Das
O Gliceraldehído 3-fosfato + P, + NAD"——1,3-bisfosfoglicerato + NADH + H: 63 212
9 1, 3-Bisfosfoglicerato + ADP ==> 3-fosfoglicerato + ATP -18,8 0a2
O 3-Fosfoglicerato == 2-fosfoglicerato 44 Da0,8
19) 2-Fosfoglicerato == fosfoenolpiruvato + H,O 7,5 0a33

O Fosfoenolpiruvato + ADP —— -piruvato + ATP 31,4 -16,7 |

Nota: AG” es la variación de energía libre estándar tal como sa define en el Capítulo 13 (pp. 497-498). AG es la variación de energía libre
calculada a partir de las concentraciones reales de los intermediarios glucolíticos, presentes en condiciones fisiológicas en los eritrocitos a pH 7.
Las reacciones glucolíticas rodeadas en la gluconeogénesis se muestran en rojo. Las reacciones bioquímicas no están necesariamente ajustadas
para H o carga.
 14.4 Gluconeogénesis 559

Glucosa Otros
sanguínea Glucoproteinas monosacáridos Sacarosa

Glucógeno dl Aa
Disacáridos
el Almidón

ATP P

hexoquinasa re S
Glucosa l fosfato
Glucosa
ADE 6-fostato HO =

Animales Plantas
Fructosa
Lo 6-fosfato P,
Fosio- irucinsa
tructoquinasa-1 1.G-bisiostaiasa
Fructosa
Fosfoenol-
1,6-bisfosfato
piruvato

Dihidroxiacetona Dihidroxiacetona
j Ciclo del < ya
ácido
citrico y LA
3-fostato

Piruvato Aminoácidos —Glicerol 3-Fosfo- 2P 2P.

1 glucogénicos 1 glicerato
2NAD* 2NAD*

2NADH + 2H* 2NADH + 2H7

Lactato Triacil- Fijación de
gliceroles CO (2)1,3-Bistostoglicerato

2ADP ZADP
FIGURA 14-16 Síntesis de glúcidos a partir de precursores sencillos.
2ATP 2ATP
La ruta desde el fostoenolpiruvato hasta la glucosa 6-fosfato es común
en la conversión biosintética de muchos precursore: e de e (2) 3-Fostoglicerato

ATION 1]
dos tanto en animales como en plantas, La ruta IPN
toenolpiruvato pasa a través del oxalacetato, un
del ácido cítrico que se discute en el Capítulo 16. ca compuesto (2) 2Fostoglicerato
que pueda convertirse en piruvato u oxalacetato puede servir, por tanto,
como material de partida para la gluconeogénesis. Esto incluye la atanina 2GOP
(2) Fostoeno!- PER
y el aspartato que se pueden convertir en piruvato y oxalacetato, respec- 2ADP piruvato ijineat
tivamente, así como otros aminoácidos que pueden dar lugar a fragmen- Piruwato 2GTP
tos con tres o cuatro carbonos, los llamados aminoácidos glucogénicos quinasa
2ATP (2) Oxalacetato
(véase la Tabla 14-4; véase también la Fig. 18-15). Las plantas y las bac-
terias fotosintéticas son los únicos organismos capaces de convertir el 2ADP
Piruvato
CO, en glúcidos, utilizando e! ciclo de Calvin (véase la Sección 20.5). carboxilasa
2ATP

Esta reacción no puede tener lugar por simple inversión

de la reacción de la piruvato quinasa que tiene una gran
variación negativa de energía libre y que es, por tanto,
irreversible en las condiciones existentes en las células
intactas (Tabla 14-2, paso (1). En su lugar, la fosforila-
ción del piruvato se consigue mediante una secuencia
de reacciones de rodeo que, en los eucariotas, requiere
, Capítulo y, con mayor detalle, en el Capítulo 15. La Figura 14-20 muestra
enzimas tanto del citosol como de la mitocondria. Tal
como veremos, la ruta que se muestra en la Figura
14-17 y que se describe en detalle aquí es una de las
dos rutas desde el piruvato al PEP; es la que predomina
cuando el precursor glucogénico es el piruvato o la ala-
nina. Una segunda ruta, que se describe más adelante,
es la que predomina cuando el precursor glucogénico es
el lactato.
En primer lugar se transporta el piruvato desde el
citosol a la mitocondria, o se genera dentro de la mito-
condria a partir de la alanina por transaminación en la
que se transfiere el grupo e-amino de la alanina (que
forma piruvato) a un e-cetoácido carboxílico (las reac-
ciones de transaminación se discuten en detalle en el
FIGURA 14-17 Rutas opuestas de la glucólisis y de la gluconeogéne-
sis en el hígado de rata. Las reacciones de la glucólisis se muestran en
el lado izquierdo en rojo; la ruta opuesta de la gluconeogénesis se Mues-
tra a la derecha en azul. Los puntos principales de regulación de la glu-
coneogénesis que se muestran aquí se discuten posteriormente en este
una ruta alternativa para el oxalacetato producido en la mitocondria.
Capítulo 18). A continuación, la piruvato carboxilasa,
enzima mitocondrial que requiere el coenzima biotina,
convierte el piruvato en oxalacetato (Fig. 14-18):
Piruvato + HCO,” + ATP ——
oxalacetato + ADP + P, (14-4)
La reacción de carboxilación utiliza biotina como trans-
portador de bicarbonato activado tal como se muestra
en la Figura 14-19; el mecanismo de reacción se mues-
tra en la Figura 16-17. (Observe que el HCO; se forma
por ionización del ácido carbónico producido a partir de
560 Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

Bicarbonato Piruvato CO, y H,0). El HCO, se fosforila por acción del ATP
[8] formando una anhírido mixto (un carboxifosfato); a
2 ip 2 continuación la biotina desplaza el fosfato en la forma-
HOC. + CH CC
o o” ción de la carboxibiotina.
La piruvato carboxilasa es el primer enzima regula-
ATP
dor en la ruta de la gluconeogénesis y requiere ace-
piruvato
carboxilasa Biotina til-CoA como efector positivo. (El acetil-CoA se produce
ADP + P, mediante la oxidación de ácidos grasos (Capítulo 17) y
su acumulación indica la disponibilidad de ácidos grasos
Oxatacetato como combustible). Tal como veremos en el Capítulo 16
(a) (véase la Fig. 16-16) la reacción de la piruvato carboxi-
lasa puede reponer intermediarios de otra ruta metabó-
Oxalacetato
lica central, el ciclo del ácido cítrico.
0, Aa
LC CH C—E Debido a que la membrana mitocondrial no tiene
E iz AA ll E RE transportador de oxalacetato, antes de ser exportado al
o o 8)
citosol el oxalacetato formado a partir del pirnvato debe
+
ser reducido a malato mediante la malato deshidroge-
O 10) 18)
== il il Ho nasa mitocondrial a expensas de NADH:
| Guanosina 40 1970-8
o o o Oxalacetato + NADH + H* == ¿-malato + NAD* (145)

D La variación de energía libre estándar de esta reacción

PEP cal
carboxiquinasa . es muy elevada pero, en condiciones fisiológicas (que
CO, incluyen una concentración muy baja de oxalacetato)
AG = 0 por lo que la reacción es fácilmente reversible.
Q—PO7 La malato deshidrogenasa mitocondrial funciona tanto
CHn)==E— 0007 en la gluconeogénesis como en el ciclo del ácido cítrico,
Fostoenolpiruvato aun cuando el flujo global de metabolitos en ambos pro-
(b) cesos se da en direcciones opuestas.
El malato abandona la mitocondria vía un transpor-
FIGURA 14-18 Sintesis de fosfoenolpiruvato a partir as (a) or específico de la membrana mitocondrial interna
En la mitocondria, el piruvato se convierte en oxalacetato[dn ul 9-31) y en el citosol el malato se reoxida
ción catalizada por la piruvato carboxilasa que requiere bio UNE £ ó cón producción de NADA citosólico:
citosol, el oxalacetato se convierte en fosfoenolpiruvato por la PEP car-
boxiguinasa. El CO, incorporado en la reacción de la piruvato carboxilasa Malato + NAD*.-—— oxalacetato + NADH + H- (146)
se pierde aquí en forma de CO,. La descarboxilación conduce a un reor-
denamiento de electrones que facilita el ataque del oxigeno carbonílico
El oxalacetato se convierte entonces en PEP por la fos-
del piruvato sobre el fosfato y del GTP,
foenolpiruvato carboxiquinasa (Fig. 14-18). Esta
reacción dependiente de Mg? requiere GTP como
dador de grupo fosforilo:

Oxalacetato + GTP == PEP + CO, + GDP 047

El largo lazo de biotinil-Lys transporta

el CO, desde el sitio l al sitio 2

Y El 7
O. NN 5. O
NH NH a]
HCOz TINY N N CAGA CO + E.
C—C—CHs Aa
pa 2 pe
= a
ATP ADP Pi O da ¿ $ ¿ o Piruvato Oxalacetato
0] )
=0 o

Sitio 1 ma Sitio 2
Lys
Piruvato carboxilasa

FIGURA 14-19 Papel de la biotina en la reacción de la piruvato car- unida transporta entonces el CO, del carboxibiotinil-enzima al sitio catalí-
boxilasa, El cofactor biotina está unido de torma covalente al enzima a tico 2 en la superficie enzimática en donde se libera el CO, que reacciona
través de un enlace amida con el grupo s-arnino de un residuo Lys tor- con el piruvato dando oxalacetato y regenerando el biotinil-enzima. El
mando un biotinil-enzima. La reacción transcurre en dos fases que tienen papel general de los brazos flexibles en el transporte de intermedios de
lugar en dos sitios diferentes del enzima. En el sitio catalítico 1, el ¡ón reacción entre sitios activos del enzima se describe en la Figura 16-18,
bicarbonato se convierte en CO, a expensas del ATP. A continuación el Mecanismos similares se dan en otras reacciones de carboxilación depen-
CO, reacciona con la biotina formando carboxibiatinil-enzima: El targo dientes de biotina tales como la catalizada por la propionil-CoA. carboxi
brazo formado por la biotina y la cadena lateral de la Lys a la que está lasa (véase la Fig. 17-12) y la acetil-CoA carboxilase (véase la Fig. 21-10).
 14,4 Gluconeogénesis 561

La reacción es reversible en las condiciones intracelula- nuación se transporta el PEP fuera de la mitocondria
res; la formación de un compuesto fosfato de alta ener- para continuar en la ruta gluconeogénica. Los isozimas
gía (PEP) se compensa con la hidrólisis de otro (GTP). mitocondrial y citosólico de la PEP carboxiquinasa
La ecuación global para el conjunto de estas reac- están codificados por genes diferentes en los cromoso-
ciones de rodeo, suma de las ecuaciones 14-4 a 14-7, es mas del nucleo siendo otro ejemplo de dos enzimas
distintos que catalizan la misma reacción pero que tie-
Piruvato + ATP + GTP + HCO,.——
PEP + ADP + GDP +P, + 90, (14-8)
nen localizaciones celulares o papeles metabólicos dife-
AG” = 0,9 kJ/mol rentes (recuerde los isozimas de la hexoquinasa).

Para fosforilar una molécula de piruvato a PEP se han La conversión de la fructosa-1,6-bisfosfato en fructosa
de gastar dos equivalentes fosfato de alta energía (uno
6-fosfato constituye el segundo rodeo
del ATP y otro del GTP), cada uno de los cuales cede 50
kJ/mol en condiciones celulares. Por el contrario, cuan- La segunda reacción glucolítica que no puede participar
do el PEP se convierte en piruvato durante la glucólisis en la gluconeogénesis es la fosforilación de la fructosa
sólo se genera un ATP a partir del ADP. Aunque la varia- 6-fosfato por la PFK-1 (Tabla 14-2, Paso 6%). Debido a
ción de energía libre estándar (AG) de la reacción en que esta reacción es muy exergónica y, por tanto, irre-
dos fases desde el piruvato al PEP es de 0,9 kJ/mol, la versible en las células intactas, la generación de la fruc-
variación de energía libre real (AG), calculada a partir tosa 6-fosfato a partir de la fructosa 1,6-bisfosfato (Fig.
de las concentraciones celulares de intermedios, es muy 14-17) está catalizada por un enzima diferente, la frue-
negativa (-25 kJ/ímol); ello es debido al rápido consumo tosa 1,6-bisfosfatasa (FBPasa-1), dependiente de
del PEP en otras reacciones de tal modo que su concen- Mg*, que promueve la hidrólisis prácticamente irre-
tración permanece relativamente baja. De este modo la versible del fosfato en C-1 (no transferencia de grupo
reacción es efectivamente irreversible en la célula. fosforilo al ADP):
Observe que el CO, incorporado al piruvato en la Fructosa 1,6-bisfosfato + H,O ——
reacción de la piruvato carboxilasa es la misma molécu- fructosa 6-fosfato + P,
la que se pierde en la reacción de la PEP carboxiquinasa AG” = -16,3 kJ/mol
(Fig. 14-18b). Esta secuencia de carboxilación-descar-
boxilación representa una forma de “activar” el piruvato
de forma que la descarboxilación del oxalacetato facilita
la formación de PEP. En el Capítulo 21 veremos que se
PEP
utiliza una etapa de carboxilación-dec, xilació
lar para activar el acetil-CoA para la
oro
j (a
rio
DA fer 28 SN
dos grasos (véase la Fig. 21-1). citosólica
Existe una lógica en la ruta de estas reacciones a ER
Oxalacetato
través de la rmitocondria. La razón (NADH|/NAD”] en el
citosol es de 8 x 10*, alrededor de 10% veces menor que
desincragerara >
en la mitocondria. Debido a que el NADH citosólico se testi | NAD*
consume en la gluconeogénesis (en la conversión de
Malato
1,3-bisfosfoglicerato en gliceraldehído 3-fosfato; Fig.
14-17), la biosíntesis de glucosa no puede tener lugar a
menos que se suministre NADH, El transporte del mala- Malato PEP
to desde la mitocondria al citosol y su reconversión allí
en oxalacetato representa una forma efectiva de trans-
a rula! NAD? PE carircarquiriatá
a y co
2
portar equivalentes de reducción en forma de NADH al mitacondeial -NADH + y
citosol, en donde son escasos. Esta ruta desde el piru-
Oxalacetato Oxalacetato
vato al PEP proporciona, por tanto, un equilibrio impor- Ñ

tante entre el NADH producido y consumido en el Prural pruvato

citosol durante la gluconeogénesis. abortar a co, arbosilasa co,
Cuando el lactato es el precursor glucogénico pre-
Piruvato Piruvato
domina un segundo rodeo del piruvato a PEP (Fig. A

14-20). Esta ruta utiliza el lactato producido por la Mitocondria

glucólisis en los eritrocitos o el músculo anaeróbico, por Citosol
ejemplo, siendo especialmente importante en los verte- Piruvato Piruvato
brados de mayor tamaño después de un ejercicio vigo-
roso (Recuadro 14-2). La conversión del lactato en lacizlo |” (NADH + H*
destidrageaas3 e NAD*
piruvato en el citosol de los hepatocitos. produce NADH
por lo que la exportación de equivalentes reductores Lactato
(en forma de malato) desde la mitocoridria ya no es
FIGURA 14-20 Rutas alternativas desde el piruvato al fostoenolpiru-
necesaria. Una vez transportado el piruvato producido
vato, La importancia relativa de las dos rutas depende de la disponibili-
por la reacción de la lactato deshidrogenasa a la mito-
dad de lactato o piruvato y las necesidades citosólicas de NADH para la
condria, se convierte en oxalacetato por la piruvato
gluconeogénesis. La ruta de la derecha predomina cuando el precursor
carboxilasa Lal como ya se ha descrito. No obstante, este
es el lactato, debido a que el NADH citosólico se genera en ta reacción
oxalacetato se convierte directamente en PEP por un
de ia lactato deshidrogenasa y no se ha de transportar fuera de la mito-
isozima mitocondrial de la PEP carboxiquinasa. A conti-
condria (véase texto).
562 Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

La FBPasa-1 se denomina así para distinguirla de otro
enzima similar (FBPasa-2) con una función reguladora
que se discute en el Capítulo 15.
La conversión de la glucosa-6-fosfato en glucosa
constituye el tercer rodeo
El tercer rodeo es la reacción final de la gluconeogéne-
sis, la desfosforilación de la glucosa 6-fosfato para dar
glucosa (Fig. 14-17). La reacción inversa de la hexoqui-
nasa requeriría la transferencia de un grupo fosforilo
desde la glucosa 6-fosfato al ADP para dar ATP, lo que
es una reacción energéticamente desfavorable (Tabla
14-2, paso €)). La reacción catalizada por la glucosa
6-fosfatasa no requiere la síntesis de ATP, sino que es
una simple hidrólisis de un éster fosfato:
Glucosa 6-fosfato + H,O —— glucosa + P,
AG” = -13,8 kJ/mol
Este enzima activado por Mg** se encuentra en la cara de
la luz del retículo endoplasmático de los hepatocitos,
células renales y epiteliales del intestino delgado (véase
la Fig. 15-30), pero no en otros tejidos, que son, por
tanto, incapaces de suministrar glucosa a la sangre. Si
otros tejidos tuviesen glucosa 6-fosfatasa, la actividad
del enzima hidrolizaría la glucosa 6-fosfato que es nece-
saria en estos tejidos para la glucólisis, La glucosa produ-
cida por la gluconeogénesis en el hígado o riñón o inge-
rida con la dieta se envía a estos otros tejidos, incluido el
cerebro y el músculo, a través del torrente circulatorio.
La gluconeogénesis es energéticamente cara, (Co0?
pero es esencial
La suma de las reacciones biosintéticas que llevan del
piruvato a la glucosa libre en la sangre (Tabla 14-3) es
2 Piruvato + 4ATP + 2GTP + 2NADH + 2H" + 4H,0 ——
glucosa + 4ADP + 2GDP + 6P, + 2NAD" (14-9)
Por cada molécula de glucosa formada a partir del piru-
vato, se requieren seis grupos fosfato de alta energía,
cuatro del ATP y dos del GTP. Además, se requieren dos
moléculas de NADH para la reducción de dos moléculas
de 1,3-bisfosfoglicerato. La ecuación 14-9 no es, clara-
mente, el inverso de la ecuación para la conversión de
la glucosa en piruvato por la glucólisis, que sólo requie-
re dos moléculas de ATP:
Glucosa + 2ADP + 2P, + NAD* ——
2 piruvato + 2ATP + 2NADH + 2H* + 2H,0
La síntesis de glucosa a partir del piruvato es un proce-
so relativamente costoso. Gran parte del alto costo
energético es necesario para asegurar que la gluconeo-
génesis sea irreversible, En las condiciones intracelula-
res la variación global de energía libre de la glucólisis es
de al menos -63 kJ/mol. En ias mismas condiciones la
AG global de la gluconeogénesis desde el piruvato es -16
kJ/mol De este modo tanto la glucólisis como la gluco-
neogénesis son procesos esencialmente irreversibles en
las células. Otra ventaja de la inversión en energía para
convertir el piruvato en glucosa es que si se tuviese que
excretar el piruvato, se perdería su considerable poten-
cial de producción de ATP mediante la oxidación aeró-
bica completa (tal como veremos en el Capítulo 16 el
piruvato produce más de 10 ATP).
Los intermediarios del ciclo del ácido cítrico y muchos
aminoácidos son glucogénicos
La ruta biosintética de la glucosa antes descrita permite
la síntesis neta de glucosa no sólo desde el piruvato sino
Pros de los intermediarios de cuatro, cinco y seis
irlo del ácido cítrico (Capítulo 16). Citra-
-cetoglutarato, suecinil-CoA, succinato,
Do y malato son todos ellos intermediarios del
ciclo del ácido cítrico que se pueden oxidar dando
oxalacetato (véase la Fig. 16-7). Algunos átomos de
carbono, o todos, de la mayoría de aminoácidos proce-
dentes de las proteínas se catabolizan en último término
a piruvato o a intermediarios del ciclo del ácido cítrico.
Tales amincácidos pueden, por tanto, experimentar una
conversión neta en glucosa por lo que se denominan

TABLA 14-3 Reacciones secuenciales de la gluconeogénesis empezando a partir del piruvato

| Piruvato + HCO; + ATP —= oxalacetato + ADP +P X2
Oxalacetato y UTP ES fosfoenolpiruvato + 00,, GDP X2
Fostoenolpiruvato + H,0 === 2-fosfoglicerato x2
ES Fosfoglicerato
== 3-fosfoglicerato x2
|3 -Fosfoglicerato + ATP == 1,3-bisfosfoglicerato + ADP x2
| 1,3-Bisfosfoglicerato + NADH + H* == gliceraldehído 3-fosfato + NAD* + P, xXx
|
¡ Gliceraldehído 3-fosfato == dihidroxiacetona fosfato |

¡| Gliceraldehído 3-fosfato + dihidroxiacetona fosfato === fructosa 1,6-bisfosfato |

| Fructosa 1,6-bisfosfato —— fructosa 6-fosfato P
| Fructosa 6-fosfato == glucosa 6-fosfato
Glucosa 6-fosfato + H,O —— glucosa P
Suma: 2 Piruvato + 4ATP + 2GTP + 2NADH + 2H" + 4H,0 —— glucosa + 4ADP + 2GDP + 6P + 2NAD"
Nota: Las reacciones de rodeo están en rojo; todas las demás reacciones son pasos reversibles de la glucólisis. Las cifrasa la derecha indican
que la reacción se ha de contar dos veces debido a que se requieren dos precursores de tras carbonos para producir una molécula de glucosa.
Las reacciones requeridas para reemplazar el NADH citosólico consumido en la reacción de la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa (la
conversión de lactato en piruvato en el citosol o el transporte de equivalentes de reducción desde la mitocondria al citosol en forma de malato) no
se consideran en este resumen. La ecuaciones bioquímicas nc necesariamente están ajustadas para H y carga.

aminoácidos glucogénicos (Tabla 14-4). La alanina y la
glutamina, principales moléculas transportadoras de
grupos amino desde los tejidos extrahepáticos al hígado
(véase la Fig. 18-9) son aminoácidos glucogénicos muy
importantes en los mamíferos. Después de eliminar sus
grupos amino en las mitocondrias hepáticas, los esque-
letos carbonados restantes (piruvato y a-cetoglutarato,
respectivamente) se canalizan rápidamente hacia la
gluconeogénesis.
Los mamiferos no pueden convertir los ácidos grasos
en glucosa
No hay conversión neta de los ácidos grasos en glucosa
en los mamíferos. Tal como veremos en el Capítulo 17 el
catabolismo de la mayoría de ácidos grasos sólo da ace-
til-CoA. Éste no puede ser utilizado como precursor de
la glucosa por los mamíferos porque la reacción de la
piruvato deshidrogenasa es irreversible y las células no
tienen otra ruta para convertir el acetil-CoA en piruva-
to. Las plantas, levaduras y muchas bacterias tienen una
ruta (el ciclo del glioxilato, véase la Fig. 20-55) para
convertir el acetil-CoA en oxalacetato, por lo que estos
organismos pueden utilizar ácidos grasos como material
de partida para la gluconeogénesis. Esto es de impor-
tancia especial, por ejemplo, durante la germinación de
las semillas; antes de que se desarrollen las hojas y la
fotosíntesis pueda proporcionar energía y glúcidos las
semillas utilizan los aceites almacenados en las mismas
para la producción de energía y la biosíntesis de las
paredes celulares.
Aunque los mamiferos no puede Es PE) RO Tn:
dos grasos en glúcidos, pueden ut (SEAMEñAEANdi
tidad de glicerol producido en la degradación de las
grasas (triacilgliceroles) para la gluconeogénesis. La
fosforilación del glicerol por la glicerol quinasa, seguida
de la oxidación del carbono central, da dihidroxiacetona
fosfato que es un intermediario de la gluconeogénesis
en el higado.
Tal como veremos en el Capítulo 21, el glicerol fos-
fato es un intermediario esencial en la síntesis de triacil- ples pasos en el que glucosa se produce a partir del
glicerol en los adipocitos, si bien estas células carecen
de glicerol quinasa y, por tanto, simplernmente no pueden
fosforilar el glicerol. En lugar de ello, los adipocitos lle- que se pueden convertir en uno de estos intermediarios.
van a cabo una versión truncada de la gluconeogénesis
conocida como gliceroneogénesis: la conversión del
piruvato en dihidroxiacetona fosfato a través de las pri-
meras reacciones de la gluconeogénesis, seguida de la
reducción de la dihidroxiacetona fosfato a glicerol fosfa-
Lo (véase la Fig. 21-21).
La glucólisis y la gluconeogénesis están reguladas
de forma recíproca
Si se permitiese que la glucólisis (conversión de glucosa
en piruvato) y la gluconeogénesis (conversión de pinu-
vato en glucosa) tuvieran lugar simultáneamente a velo-
cidad elevada el resultado sería el consumo de ATP y la
producción de calor. Por ejemplo, la PFK-1 y la FBPa-
sa-1 catalizan reacciones opuestas:
ATP + fructosa 6-fosfato A ADP + fructosa 1,6-bisfosfato
Fructosa 1,6-bisfosfato + HO —— fructosa 6-fosfato + P,
14.4 Gluconeogénesis 563
TABLA 14-4 Aminoácidos glucogénicos
agrupados según su sitio
de entrada
| Piruvato Succinil-CoA
| Alanina Isoleucina*
| Cisteína Metionina
Glicina Treonina
Serina Valina
alo ñ aba
Fenilalanina*
| a-Cetoglutarato Tirosina*
Arginina Oxalacetato
Glutamato As |
A paragina
Glutamina Aspartato |
Histidina |
| Prolina |
Nota: Todos estos aminoácidos son precursores de glucosa sanguínea
o de glucógeno hepático debido a que se pueden convertir en piruvato
o intermediarios del ciclo del ácido cítrico. De los 20 aminoácidos
comunes sólo leucina y lisina son incapaces de proporcionar carbono
para la sintesis neta de glucosa.
*Estos aminoácidos también son cetogénicos (véase la Mig. 18-15).
La suma de estas dos reacciones es
ATP + H,0 —— ADP + P, + calor
Estas dos reacciones enzimáticas, y otras varias en las
dos rutas, están reguladas alostéricamente y por modi-
ficación covalente (fosforilación). En el Capítulo 15
los mecanismos de esta regulación
ente. Por el momento, es suficiente decir
que las rutas están reguladas de manera que cuando
aumenta el flujo de glucosa a través de la glucólisis, el
flujo de piruvato hacia glucosa disminuye, y viceversa.
RESUMEN 14,4 Gluconeogénesis
MM La gluconeogénesis es un proceso ubicuo de múlti-
lactato, piruvato u oxalacetato, o cualquier compuesto
(incluidos los intermediarios del ciclo del ácido cítrico)
Siete de los pasos de la gluconeogénesis están cataliza-
dos por los mismos enzimas utilizados en la glucólisis;
son las reacciones reversibles,
Ml Los tres pasos irreversibles de la ruta glucolítica son
rodeados mediante reacciones catalizadas por enzimas
gluconeogénicos: (1) conversión del piruvato en PEP a
través del oxalacetato, catalizada por la piruvato carboxi-
lasa y la PEP-carboxiquinasa; (2) desfosforilación de la
fructosa 1,6-bisfosfato por la FBPasa-1; y (3) desfosfori-
lación de la glucosa 6-fosfato por la glucosa 6-fosfatasa.
MM La formación de una molécula de glucosaa partir
del piruvato requiere 4 ATP, 2 GTP y 2 NADH; es cara.
Mi” En los mamíferos la gluconeogénesis en el hígado,
en el riñón y en el intestino delgado proporciona gluco-
sa para su uso por el cerebro, músculo y eritrocitos.
MM La piruvato carboxilasa es estimulada por el ace-
til-CoA incrementando la velocidad de la gluconeogéne-
sis cuando la célula ya tiene cantidades adecuadas de
otros sustratos (ácidos grasos) para la producción de
energía.
564 — Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

HCOH
Q
HOCH
Glucosa
NADP* HCOH 6-fosfato
He
Ácidos grasos, CH¿0POF
esteroles, etc. NADP*
NADP* glucosa 6-fosioto Mg?
biosintesis
reductora cechidrogenasa
NADPH
+ H*
Precursores

6-Fosfoglucono-
$-lactona

FIGURA 14-21 Esquema general de la ruta de las pentosas fosfato, El

NADPH formado en la fase oxidativa es utilizado para reducir el glutatión,
G5SG (véase el Recuadro 14-4) y para sostener la biosíntesis reductora. El
otro producto de la fase oxidatíva es la ribosa 5-fnsfaio que sirve como
precursor de nucieótidos, coenzimas y ácidos nucleicos. En las células que
no utilizan ribosa 5-fosfato para la biosíntesis, la fase no oxicativa recicla
seis moléculas de la pentosa en cinco moléculas de la hexosa glucosa HCOH
6-fostato lo que permite la producción continua de NADPH y convierte la
HOCH 6-Fosto-
glucomato
glucosa 6-fosfato en CO, (en seis cictos).

Lo sas o pun comer a CORÁSPATION

HCOH
HOR
CH,OPO?”
1

obtenido de la de ácidos grasos en glucosa; las plantas y

los microorganismos sí pueden. NADP?
AM” La glucólisis y la gluconeogénesis están reguladas 6-tostaglucanato | ME"
recíprocamente para impedir el funcionamiento despil- desticagenass NS NADPH
+ H*
farrador de ambas rutas al mismo tiempo.
en
14.5 Ruta de las pentosas fosfato de CH¿0H
la oxidación de la glucosa
¿=o
HCOH o-Ribulosa
En la mayoría de tejidos animales el destino cata-
bálico principal de la glucosa 6-fosfato es la degra-
HCOH 5-fostato

dación glucolítica a pinivato gran parte del cual se oxida CH¿0PO?-

vía ciclo del ácido cítrico lo que lleva en último término a
la generación de ATP. La glucosa 6-fosfato tiene, sin
embargo, otros destinos catabólicos que conducen a pro-
ductos especializados necesarios para la célula. La oxida-
ción de la glucosa 6-fosfato a pentosas fosfato por la ruta
de las pentosas fosfato (también llamada ruta del
fosfogluconato, o ruta de la hexosa monofosíato;
Fig. 14-21) es un caso de especial importancia en algu-
nos tejidos. En esta ruta oxidativa, el NADP* es el acep-
tor electrónico, dando NADPH, Las células en rápida
división, tales como las de la médula ósea, piel y mucosa
intestinal, así como las de los tumores, utilizan la pentosa
ribosa >-fosfato para producir RNA, DNA y coenzimas
tales como el ATP, NADH, FADH, y coenzima A.
En otros tejidos el producto esencial de la ruta de
las pentosas fosfato no son las pentosas sino el dador
electrónico NADPH necesario para la biosíntesis reduc-
tora o para contrarrestar los efectos perniciosos de los
fosfopentosa
isomerasa
y D-Ribosa
5-fostato
FIGURA 14-22. Reacciones oxidativas de la ruta de las pentosas tos-
fato. Los productos finales son la ribosa 5-fosfato, CO, y NADPH.
radicales oxigenados. En los tejidos que llevan a cabo
una síntesis extensiva de ácidos grasos (hígado, adiposo,
glándula mamaria lactante), o la síntesis activa de coles-
terol y hormonas esteroideas (hígado, glándulas adrena-
les, gónadas), requieren el NADPH proporcionado por
esta ruta. Los eritrocitos y las células del cristalino y de
 14.5 Ruta de las pentosas fosfato de la oxidación de la glucosa 565

la córnea están directamente expuestas al oxígeno y, de La fase no oxidativa recicla las pentosas fosfato
este modo, a los dañinos radicales libres generados por
el oxígeno. Al mantener una atmósfera reductora (una
a glucosa 6-fosfato
razón NADPH a NADP* elevada y una razón de glutatión En los tejidos en los que se requiere principalmente
reducido a oxidado alta) pueden prevenir o corregir las NADPH, las pentosas fosfato producidas en la fase oxi-
lesiones oxidativas sobre las proteínas, lípidos y otras dativa de la ruta se reciclan a glucosa 6-fosfato. En esta
moléculas sensibles. En los eritrocitos, el NADPH produ- fase no oxidativa la ribulosa 5-fosfato se epimeriza en
cido por la vía de las pentosas fosfato es tan importante primer lugar a xilulosa 5-fosfato:
en la prevención de las lesiones oxidativas que un defec- rá CH¿0H
to genético en la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, el
a (0
primer enzima de la vía, puede tener consecuencias
médicas graves (Recuadro 14-4), Y .t —OH HO—C—H

H—C--0H Slamiaio H—C—OH

La fase oxidativa produce pentosas fosfato y NADPH CH¿OPOÍ
epuúnerasa j

La primera reacción de la ruta de las pentosas fosfato
(Fig. 14-22) es la oxidación de la glucosa 6-fosfato por
la glucosa fi-fostato deshidrogenasa (G6PD), que
forma 6-fosfoglucono-6-lactona, un éster intramolecu-
lar. El NADP* es el aceptor electrónico y el equilibrio
global está muy desplazado en la dirección de formación
de NADPH. La lactona se hidroliza dando el ácido libre
6-fosfogluconato por una lactonasa específica y en el
paso siguiente el 6-fosfogluconato se oxida y descar-
boxila por la 6-fosfogluconato deshidrogenasa for-
mando la cetopentosa ribulosa 5-fosfato; la reacción
genera una segunda molécula de NADPH. (Esta ribulo-
sa 5-fosfato es importante en la regulación de la glucól-
sis y de la gluconeogénesis tal como veremos en el
Capítulo 15). La fosfopentosa isomerasa convierte la
ríbulosa 5-fosfato en su isómero aldosa, la ribosa 5-f0s-
fato. En algunos tejidos la ruta de
' : pes
acaba en este punto siendo su ecuaci
Glucosa 6-fosfata + 2NADP* + H,O
ribosa 5-fosfato + CO, + 2NADPH + 2H"
El resultado neto es la producción de NADPH, un
reductor para las reacciones biosintéticas y ribosa 5-fos-
fato, precursor de la síntesis de nucleótidos.
reacciones oxidativas de la
ruta de las pentosas fostato
CH¿0PO37
Ribulosa Xilulosa
5-fostato S-fostato
A continuación, en una serie de reordenamientos de los
esqueletos carbonados (Fig. 14-23) seis azúcares fos-
fato de cinco carbonos se convierten en cinco azúcares
fosfato de seis carbonos completando el ciclo y permi-
tiendo la oxidación continua de glucosa 6-fosfato con
producción de NADPH. El reciclado continuo conduce
en último término a la conversión de glucosa 6-fosfato
en seis CO,. Dos enzimas únicos de la ruta de las pento-
sas fosfato actúan en estas interconversiones de azúca-
res: la transcetolasa y la transaldolasa. La transcetola-
sa, cataliza la transferencia de un fragmento de dos
carbonos desde un dador cetosa a un aceptor aldosa
(Fig. 14-244). En su primera aparición en la ruta de las
pentosas fosfato, la transcetolasa transfiere C-1 y C-2 de
IÓ, Te 5-fosfato a la ribosa 5-foslato formando el
MiB E p de siete carbonos sedoheptulosa 7-fosfato
(Fig. 14-24b). El fragmento de tres carbonos restante
de la xilulosa es el gliceraldehído 3-fosfato.
A continuación, la transaldolasa cataliza una reac-
ción similar a la reacción de la aldolasa en la glucólisis:
se elimina un fragmento de tres carbonos de la sedohep-
tulosa 7-fosfato y se condensa con gliceraldehído 3-fos-
fato, formando fructosa 6-fosfato y la tetrosa eritrosa

Ez,
i | Sedoheptulosa Fructosa
7-fosfato 6-fosfato

I5omerasa
EA
fostohexosa

rs tl transcetolasa traemostulasa ii
Xiluiosa Gliceraldheído Eritrosa Fructosa
S-fosfato 3-fosfato 4-fosfato 6-fostato
fructosa 1,6
bistostatasa

aldotasa
transcetolasa 1] triosa fostato
Xilulosa Bomerasa
5-fostato Gliceraldehído
3-fostato

(a) (b)
FIGURA 14-23 Reacciones no oxidativas de la ruta de las pentosas tosas (5C) a cinco hexosas (SC). Observe que intervienen dos juegos de
fosfato. (a) Estas reacciones convierten pentosas fosfato en hexosas las interconversiones mostradas en (a), Cada reacción mostrada aqui es
fosfato, lo que permite que continúen las reacciones oxidativas (véase la reversible; las flechas unidireccionales se utilizan sólo para clarificar la
Fig. 14-22). La transcetolasa y la transaldolasa son especificos de esta dirección de las reacciones durante la oxidación continua de la glucosa
ruta; los otros enzimas también actúan en las rutas glucolítica o gluco- 6-ostato. En las reacciones independientes de la luz en la lotosintesis, la
neogénica. (b) Diagrama esquemático que muestra la ruta de seis pen- dirección de estas reacciones está invertida (véase la Fig, 20-37).
566 Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

RECUADRO 14-4 MEDICINA — ¿Por qué Pitágoras no comía falafel?:

Deficiencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa

Las habas, un ingrediente del falafel, han sido una y muere con un nivel de estrés oxidativo que es tole-
fuente importante de alimentación en el Mediterrá- rable para el huésped humano con déficit de G6PD.
neo y en el Oriente Medio desde la antigúedad. El Debido a la ventaja que proporciona esta resistencia
matemático y filósofo griego Pitágoras prohibió a la malaria se compensa la desventaja de una menor
comer habas a sus seguidores quizás debido a que resistencia al daño oxidativo. La selección natural
hacían que mucha gente sufriese la enfermedad lla- mantiene el genotipo G6PD-deficiente en las pobla-
mada favismo, que podía ser fatal. En el favismo, los ciones humanas donde la malaria es frecuente. Sólo
eritrocitos empiezan a lisarse al cabo de unas 24 a 48 bajo un gran estrés oxidativo, provocado por drogas,
horas de haber comido las habas, liberando hemoglo- herbicidas o divicina, la deficiencia en G6PD provoca
bina en la sangre. Como resultado, se produce icteri- graves problemas médicos.
cia e incluso a veces fallo renal. Pueden observarse Se cree que un medicamento contra la malaria
síntomas similares tras la ingestión del medicamento tal como la primaquina actúa provocando estrés 0xi-
antimalárico primaquina, sulfamidas o tras la exposi- dativo al parásito. Resulta irónico que los fármacos
ción a ciertos herbicidas. Estos síntomas tienen una contra la malaria puedan provocar una enfermedad
base genética: la deficiencia de glucosa 6-fosfato utilizando el mismo mecanismo bioquímico que con-
deshidrogenasa (G6PD) que afecta a unos 400 millo- fiere resistencia a la malaria. La divicina también
nes de personas en todo el mundo. La mayor parte de actúa como un fármaco antimalaria por lo que la
los individuos con déficit de G6PD son asintomáticos: ingestión de habas puede proteger contra la misma,
sólo la combinación de la deficiencia de G6PD con Por lo tanto, muchos discípulos de Pitágoras con
ciertos factores medioambientales producen los sín- actividad normal de la G6PD aumentaron de manera
tomas clínicos. inconsciente el riesgo de contraer malaría ¡al no que-
La glucosa 6-fosfato deshidrogenasa cataliza el rer comer falafel!
primer paso de la ruta de las pentosas fosfato (véase
la Fig. 14-22), que produce NADPH. Este reductor,
esencial para muchas rutas biosintéticas, protege
también a las células de las lesiones oxidatiyas por
peróxido de hidrógeno (H,O,) y por oa
superóxido que son oxidantes muy reactiv SS ATION
dos como subproductos metabólicos y por la acción
Respiración mitocondrial,
de fármacos tales como la primaquina y de productos radiación lonizante sulfamidas,
naturales tales como la divicina (el ingrediente tóxico herbicidas, antipalúdicos, divicina
Radica *p.
de las habas). Durante la destoxificación normal el superóxido
H,O, se convierte en H,O gracias a la acción del glu- Hoyo
tatión reducido y de la glutatión peroxidasa. El gluta-
Peróxido glutatión peroxidasa
tión oxidado se vuelve a convertir a la forma reducida H, —e 2H
de hidrógeno 10; sd
por la acción de la glutatión reductasa y NADPH (Fig.
HL a-
1). El B,0, se puede transformar, también, en H,O y
O, por la acción de la catalasa, que también requiere HO 2G5H GSSG
NADPH. En los individuos deficientes de G6PD, la Radical + /
producción de NADPH está muy disminuida y, por
A
hidroxilo libre Ek a
tanto, la destoxificación del H,O, está inhibida. El reductasa
daño celular resultante consiste en la peroxidación
de lípidos que conducen a la rotura de la membrana Daño oxidativo a NADP* NADPH + H*
lípidos, proteinas, DNA
eritrocitaria y en la oxidación de proteínas y DNA.
La distribución geográfica de la deficiencia de Glucosa 6-fosto-
G6PD es muy indicativa. En el África tropical, zonas 6-fosfato glucosa glucono-3-lactona
6-fosfato
de Oriente Medio y Sudeste asiático las frecuencias deshidrogenasa
(G6PD)
pueden llegar al 25 %. Éstas son, al mismo tiempo,
zonas donde la malaria tiene una gran prevalencia.
FIGURA 1 Papel del NADPH y del glutatión en la protección de las
Además de tales observaciones epidemiológicas, los
células frente a derivados de oxigeno altamente reactivos. El glutatión
estudios in vitro demuestran que el crecimiento de
reducido (GSH) protege a las células destruyendo el peróxido de
un parásito de la malaria, el Plasmodium falcipa-
hidrógeno y los radicales hidroxilo libres. La regeneración del GSH a
rum, está inhibido en los eritrocitos con déficit de
partir de su forma oxidada (GSSG) necesita NADPH producido por la
G6PD. El parásito es muy sensible al daño oxidativo
reacción de la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa.
 14.5 Ruta de las pentosas fosfato de la oxidación de la glucosa 567

CHOH GHOH
C=0 TPP ñ C=0
CHOH
+% al
4 tranaceralasa
A+]
TC GHOH
Ri le bo R2
Cetosa Aldosa
dadora aceptora

(a)

CH¿0H
E=0
9% A |
CH20H í id —H
E=0 H-—C— OH H H—C-—50H
| O, 590 |
HO—E—H , GON Pp (a dnd
H=C—OH H—C—0H transcetalasa H—C—OH dd

CH¿0POj CH¿OPO% CH¿OPO3 CH¿0POj”

Xitulosa Ribosa Gliceraldehído Sedoheptulosa
S-fosfato S5-Hosfato 3-fosfato 7Hosfato ¡

(b)

FIGURA 14-24 Primera reacción catalizada por la transcetolasa. (a) ligado al enzima, desde un dador cetosa a un aceptor aldosa. (b) Con-
La reacción general catalizada por la transcetolasa es la transferencia de versión de dos pentosas fosfato en una triosa fosfato y un azúcar fosfato
un grupo de dos carbonos, transportado de forma temporal sobre TPP de siete carbonos, la sedoheptulosa 7-fosfato.

4-fosfato (Fig. 14-25). Ahora la iranscetolasa vuelve a nos en esta reacción (Fig. 14-274) de la misma forma
actuar formando fructosa 6-fosfato y ec que lo hace en la reacción de la piruvato descarboxilasa
3-fosfato a partir de la eritrosa 4-fosfa (Fig. 14-15). La transaldolasa utiliza la cadena lateral de
5-fosfato (Fig. 14-26). Dos moléc OUR formar una base de Schiff con el grupo
3-fosfato formado por dos repeticiones de'é 6 de su sustrato, una cetosa, estabilizando así
nes pueden convertirse en una molécula de fnstoda un carbanión (Fig. 14-27b) crucial en el mecanismo de
1 6-bisfosfato como en la gluconeogénesis (Fig. 14-17) reacción.
y, finalmente, la FBPasa-1 y la fosfohexosa isomerasa El proceso descrito en la Figura 14-22 se conoce
convierten la fructosa 1,6-bisfosfato en glucosa 6-fosfa- como ruta oxidativa de las pentosas fosfato. El
to. El ciclo está ahora completo: ¡en conjunto seis pen- primer y tercer pasos son oxidaciones con variaciones
tosas fosfato se han convertido en cinco hexosas fosfato de energía libre estándar grandes y negativas y son
(Fig. 14-23b) prácticamente irreversibles en la célula. Las reacciones
La transcetolasa requiere el cofactor tiamina piro- de la parte no oxidativa de la ruta de las pentosas fosfa-
fosfato (TPP), que estabiliza un carbanión de dos carbo- to (Fig. 14-23) son fácilmente reversibles, con lo que

CH,OH FIGURA 14-25 Reacción catalizada por la

transaldolasa.

diA
eela o. A
CH¿OH
E=0D
H—C 0H Cc HO—C—H
H 5 OH
%
E
e
H—<—
!
0H —c—oH
+ ==
HC —OH H—C— 0H transaldolasa. H—C—OH H—C—0H
|
CH¿OPOS” CH,0POj7 CH¿OPO:” cH,OPO2"
Sedoheptulosa Gliceraldehido Eritrosa Fructosa
7-fosfato 3-fosfato d-tosfato 6-Hosfato

puna FIGURA 14-26 Segunda reacción

CH¿0H C=0 catalizada por la transcetolasa.
| % A
|
C=0 C HO—C—H
Oy 2
HO=C—H H-—C—OH Pp Y H—C—OH
| + j LIL II | +

H=E—0H H—C—OH transcetolasa H=C=D0H H—C—OH

| 5
CH¿0POS” CH20PO5” CH,0POÍ CH¿0PO3”
Xilulosa Eritrosa Gliceraldehido Fructosa
S-fostato 4-fosfato 3-fosfato 6-fosfato
568 Glucólisis, gluconeogénesis y ruta de las pentosas fosfato

(a) Transaldolasa (tolerable en individuos con una trancetolasa sin mutar)

ed e puede disminuir el nivel de TPP por debajo del necesa-
rio para saturar el enzima. El resultado es una disminu-
Meno HOH¿C—C
| | ción de la velocidad de la ruta completa de las pentosas
E ds fosfato. En las personas con el síndrome de Wernic-
R=Ñ E estabilización R—N nos
4 por resonancia ke-Korsakoff esto produce un empeoramiento de los
LS R síntomas, que pueden incluir grave pérdida de memoria,
CH CH
confusión mental y parálisis parcial. Y
TPP
(b) Transcetolasa La glucosa 6-fosfato se reparte entre la glucólisis
cae CH¿0H
y la ruta de las pentosas fosfato
A A El que la glucosa 6-fosfato entre en la glucólisis o en la
Lys Ñ í estabilización Lys ' Y
H H por resonancia H A
ruta de las pentosas fosfato depende de las necesidades
momentáneas de la célula y de la concentración de
Base de
Schiff protonada
NADP* en el citosol. Sin este aceptor electrónico, no
puede producirse la primera reacción de la ruta de las
FIGURA 14-27 Intermedios carbanión estabilizados por interaccio- pentosas fosfato (catalizada por la G6PD). Cuando una
nes covalentes con la transcetolasa y la transaldolasa. (a) El anillo del célula está convirtiendo rápidamente NADPH en NADP+
TPP estabiliza el carbanión en el grupo dihidroxietilo transportado por en reducciones biosintéticas, aumenta el nivel de NADP*
la transcetolasa; véase la Fig. 14-15 para la química de la acción de!
lo que estimula alostéricamente la G6PD incrementan-
TPP. (b) En la reacción de la transaldolasa, la base de Schiff protonada
do de este modo el flujo de glucosa 6-fosfato a través de
formada entre el grupo e-amino de la cadena lateral de una Lys y el
la ruta de las pentosas fosfato (Fig. 14-28). Cuando
sustrato estabiliza un carbanión en C-3 formado después de la rotura
disminuye la demanda de NADPH, disminuye el nivel de
aldólica.
NADP*, la ruta de las pentosas fosfato se hace más lenta
y, en su lugar, la glucosa 6-fosfato se utiliza como com-
proporcionan de este modo un medio para convertir bustible para la glucólisis.
hexosas fosfato en pentosas fosfato. Tal como veremos
en el Capítulo 20, un proceso que convierte hexosas
RESUMEN 14.5 Ruta de las pentosas fosfato
fosfato en pentosas fosfato es esencial en la asimilación
fotosintética del CO, por las plantas. Esta la ruta e oxidación de la glucosa
reductora de las pentosas fosfato, es b AAA adativa de las pentosas fosfato (ruta del
el inverso de las reacciones mostradas en osfogluconato o ruta de la hexosa monofosfato) da
14-23 y emplea muchos de los mismos enzimas. lugar a la oxidación y la descarboxilación de la glucosa
Todos los enzimas de la ruta de las pentosas fosfato 6-fosfato en la posición C-1, reduciendo el NADP” a
están localizados en el citosol, al igual que los de la glu- NADPH y formando pentosas fosfato.
cólisis y la mayoría de los de la gluconeogénesis. De Ml El NADPH proporciona poder reductor para las
hecho, estas tres rutas están conectadas a través de reacciones biosintéticas y la ribosa 5-fosfato es un pre-
varios intermediarios y enzimas compartidos. El glice- cursor para la síntesis de nucleótidos y ácidos nucleicos.
raldehído 3-fosfato formado por la acción de la transce- Los tejidos en rápido crecimiento y los tejidos con una
tolasa se convierte rápidamente en dihidroxiacetona biosíntesis activa de ácidos grasos, colesterol u hormo-
fosfato por el enzima glucolítico triosa fosfato isomerasa nas esteroideas envían más glucosa 6-fosfato a través de
y estas dos triosas se pueden unir por la acción de la
aldolasa al igual que en la gluconeogénesis, formando
fructosa 1,6-bisfosfato. De modo alternativo, las triosas
fosfato pueden oxidarse a piruvato por las reacciones
glucolíticas. El destino de las triosas viene determinado
por las necesidades relativas de la célula respecto a ATP
pentosas fosfato, NADPH y ATP.

Un defecto en la transcetolasa agrava el sindrome

de Wernicke-Korsakoff
El síndrome de Wernicke-Korsakoff, es una
enfermedad causada por una carencia grave de
tiamina, un componente del TPP. El síndrome es más
frecuente en los alcohólicos que en la población general;
el consumo crónico del alcohol en grandes cantidades
interfiere con la absorción intestinal de la tiamina. El
sindrome puede agravarse por una mutación en el gen FIGURA 14-28 Papel del NADPH en la regulación del reparto de la glu-
de la transcetolasa que produce un enzima con una afi- cosa 6-fosfato entre glucólisis y ruta de las pentosas fosfato. Cuando se
nidad disminuida hacia el TPP que es una décima parte forma NADPH más rápidamente de lo que se utiliza para la biosíntesis y
de la del enzima normal. Este defecto hace que los indi- reducción del glutatión (véase la Fig. 14-21), aumenta la [NADPH] con lo
viduos sean mucho más sensibles a la carencia de tiami- que inhibe el primer enzima de la ruta de las pentosas fosfato. El resultado
na: incluso una deficiencia moderada de la tiamina es que hay más glucosa 6-fosfato disponible para la glucólisis.
 14.5 Ruta de las pentosas fosfato de la oxidación de la glucosa 569

la ruta de las pentosas fosfato que los tejidos con menos 3. Transportadores GLUT Compare la localización de
demanda de pentosas fosfato y de poder reductor. GLUTA con las de GLUT2 y GLUT3 y explique por qué estas
Al” La primera fase de la ruta de las pentosas fosfato localizaciones son importantes en la respuesta del músculo,
consiste en dos oxidaciones que convierten la glucosa tejido adiposo, cerebro e hígado a la insulina.
6-fosfato en ribulosa 5-fosfato y reducen el NADP* a
4. Producción de etanol en la levadura Cuando crece
NADPH. La segunda fase comprende pasos no oxidati-
anacróbicamente sobre glucosa, la levadura (5. cerevisias)
vos que convierten pentosas fosfato en glucosa 6-fosfa-
convierte el piruvato en acetaldehído y a continuación reduce
to, la cual empieza de nuevo el ciclo. el acetaldehído a etanol utilizando electrones del NADH. Es-
A Enla segunda fase, la transcetolasa (con TPP como
criba la ecuación de la segunda reacción y calcule su constante
cofactor) y la transaldolasa catalizan la interconversión
de equilibrio a 25*C, dados los potenciales de reducción están-
de azúcares de tres, cuatro, cinco, seis y siete carbonos,
dar de la Tabla 13-7.
con la conversión reversible de seis pentosas fosfato en
cinco hexosas fosfato. En las reacciones asimiladoras de 5. Energética de la reacción de la aldolasa La aldolasa
carbono de la fotosíntesis, los mismos enzimas catalizan cataliza la reacción glucolítica
el proceso inverso, denominado ruta reductora de las
pentosas fosfato: la conversión de cinco hexosas fosfato Fructosa 1,6-bisfosfato —
en seis pentosas fosfato, gliceraldehído 3-fosfato + dihidroxiacetona fosfato
MM Un defecto genético de la transcetolasa que dismi-
La variación de energía libre estándar de esta reacción en la
nuye su afinidad hacia el TPP agrava el síndrome de
dirección escrita es +23,8 kJimol. La concentración de los tres
Wermicke-Korsakofí.
intermediarios en el hepatocito de un mamífero sor: fructosa
Ml La entrada de la glucosa 6-fosfato en la glucólisis o
1,6-bisfosfato, 1,4 x 10m; gliceraldehído 3-fosfato, 3 x 10%4 y
en la ruta de las pentosas fosfato está determinada
dihidroxiacetona fosfato, 1,6 x 10%. A temperatura corporal
mayoritariamente por las concentraciones relativas de
(87*C) ¿cuál es la variación real de energía libre de la reacción?
NADP* y NADPH.
6, Ruta de los átomo en la fermentación Se lleva a cabo
22 Términos clave un experimento de “pulso y persecución” en un extracto de
levadura utilizando fuentes de carbono marcadas con *C en
Todos los términos en negrita están definidos en el glosario.
condiciones estrictamente anaeróbicas para producir etanol.
glucólisis 534 glucólisis aeróbica 545 El experimento consiste en incubar una pequeña cantidad de
fermentación 534 mutasas 550 sustrato marcado con *C (el pulso) con el extracto de leva-
lsome 550
fermentación del ácido dura sólo el tiempo justo para que cada intermediario de la
láctico 537 intoleranciá a H 3
antativa quede marcado. Se “persigue” a continua-
hipoxia 537 galactosem 5
ción la marca a través de la ruta mediante la adición de un
fermentación etanólica tiamina pirofosfato exceso de glucosa sin marcar. La persecución impide efectiva-
(alcohólica) 537 CTPP) 555 mente la entrada de más glucosa marcada en la ruta.
isozimas 538 gluconeogénesis 557 (a) Si se utiliza [1-*Ciglucosa (glucosa marcada en el C-1
acil fosfato 540 biotina 559 con GC) como sustrato, ¿cuál es la localización del **C en el
fosforilación a nivel ruta de las pentosas producto etanol? Explíquelo.
de sustrato 543 fosfato 564 (b) ¿En qué parte de la glucosa tendría que estar locali-
fosforilación ligada ruta del zado el '*C de la molécula inicial de glucosa para asegurar que
ala respiración 543 fosfogluconato 564
toda la actividad *C se libera en forma de CO, durante la
fosfoenolpiruvato ruta de la hexosa fermentación a etanol? Explíquelo.
(PEP) 544 monofosfato 564
7. Calor a partir de las fermentaciones Los fermentado-
res industriales a gran escala requieren, generalmente, un en-

2 Problemas friamiento vigoroso. ¿Por qué?

8. Fermentación para producir salsa de soja La salsa de

1. Ecuación de la fase preparatoria de la glucólisis Es-
soja se prepara fermentando una mezcla salada de semillas de
criba ecuaciones bioquímicas igualadas de todas las reacciones
soja y trigo junto con varios microorganismos, entre ellos la
del catabolismo de la glucosa a dos moléculas de gliceraldehído
levadura, durante un período de 8 a 12 meses, La salsa resul-
3-fosfato (fase preparatoria de la glucólisis) incluyendo la va-
tante (después de eliminar los sólidos) es rica en lactato y
riación de energía libre estándar de cada ecuación. A contínua-
etanol. ¿Cómo se forman estos dos productos? Es necesario
ción escriba la ecuación global o neta de la fase preparatoria de
eliminar el oxígeno del tanque de fermentación para que la
la glucólisis con la variación neta de energía libre estándar.
salsa de soja no tenga un fuerte sabor a vinagre (el vinagre es
2. Fase de beneficios de la glucólisis en el músculo es- ácido acético diluido). ¿Por qué?
quelético En el músculo esquelético activo en condiciones
9. Equivalencia de las triosas fosfato A un extracto de le-
anacróbicas, el gliceraldehído 3-fosfato se convierte en piru-
vadura se añadió gliceraldehído 3-fosfato marcado con C, Des-
vato (fase de beneficios de la glucólisis) y el piruvato se re-
pués de un corto período de tiempo, se aisló fructosa 1,6-bisfosftato
duce a lactato. Escriba ecuaciones bioquímicas igualadas de
marcada con 'C en C-3 y C-4. ¿Dónde se localizaba el '*C en el
todas las reacciones de este proceso junto con la variación de
gliceraldheído 3-fosfato inicial? ¿De dónde procede el segundo
energía libre estándar de cada una de ellas. A continuación
MC que se encuentra en la fructosa 1,6-bisfosfato? Explíquelo.
escriba la ecuación global o neta de la fase de beneficios de la
glucólisis (con el lactato como producto final) incluyendo la 10. Cortocircuito de la gincólisis Suponga que descubre
variación neta de energía libre estándar. una levadura mutante cuya ruta glucolítica es más corta de-