INGENIERÍA BIOQUÍMICA, BIOQUÍMICA I, PRÁCTICA No.6, 2012.

“EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE GLUCÓGENO

EN ORGANISMOS MARINOS O HÍGADO”
GONZÁLEZ VALENCIA MA. ASUNCIÓN
INSTITUTO TECNOLÓGICO DE LA PAZ
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
FECHA DE ENTREGA: 02 DE MAYO 2012.

Resumen
El glucógeno es la forma de almacenamiento de la glucosa en los tejidos animales. Las
propiedades físicas y químicas de muchos polisacáridos neutros difieren bastante de
las de otras biomoléculas, para permitir su fácil aislamiento. En la presente práctica se
pretendió observar como el glucógeno puede separarse de los monosacáridos por
medio de precipitación con alcohol, así como también, la determinación del porcentaje
de rendimiento de glucógeno en la almeja y la comparación con una solución estándar
de glucógeno.
Palabras clave: extracción,
extracción cuantificación, glucógeno, pureza

Objetivo
 Extraer glucógeno a partir de un organismo marino, en este caso fue almeja, y
se llevó a cabo la cuantificación del mismo.

Introducción
El glucógeno es un polímero de glucosa,
ramificado, está formado por unidades
de glucosa unidas por enlaces α(1-4) y
ramificaciones α(1-6) . Distribuido
fundamentalmente en hígado y
músculo, cuya función es la de ser una
forma de almacenamiento de glucosa
fácilmente movilizable. El glucógeno
actúa como regulador de la glucosa
sanguínea, almacenándola como
glucógeno durante una buena
alimentación (glucogenogénesis) y
liberándola por fosforolisis
(glucogenólisis) durante el ayuno.
Las propiedades físicas y químicas de
muchos polisacáridos neutros difieren
lo bastante de las de otras
biomoléculas, para permitir su fácil
aislamiento. El glucógeno se puede
liberar del hígado por calentamiento
con una base fuerte, hasta la
destrucción total del tejido. [1]
Fundamento
La separación del glucógeno del
tejido se consigue mediante la adición
de etanol (precipita polisacáridos y
elimina los monosacáridos solubles) y
sulfato de sodio (coprecipitante). Así,
se produce un precipitado que contiene
una mezcla de glucógeno, proteínas y
ácidos nucleicos, que han resistido el
calentamiento.
El tratamiento con antrona (que
contiene (H2SO4) es un método rápido
para la determinación de hexosas y
alopentosas constituyentes de un
polisacárido. Mediante este método, el
glucógeno es hidrolizado por un ácido
(H2SO4) hasta sus unidades
elementales (monosacáridos), que
pueden ser luego deshidratadas. El
valor resultante se compara con una
muestra testigo al 1% de glucógeno. [2]
Material y Procedimiento
 Muestra Final 9.72 gr
 DIGESTIÓN
Se llevó a laboratorio, previamente Al realizar la prueba de yodo en la
picado el material a extraer (almeja), y extracción de glucógeno de la muestra
se pesaron 20 gr de la muestra. Se de almeja, se observo:
colocaron esos 20 gramos en un matraz
Erlenmeyer de 250 ml y se añadieron
50 mL de hidróxido de potasio (KOH) a 1 2
3 N; después se calentó en baño maría
a 80 ° C por un lapso de 30 minutos. Al
termino de dicho lapso se enfrió la
solución y acidifico con 50 ml de acido
sulfúrico (H2SO4).

 PRECIPITACIÓN
Se cambio la solución a un vaso de Imagen I. En el tubo 1 se encuentra
precipitados de 500 mL y se añadió la solución estándar que contiene
150 mL de alcohol de 96 ° (etanol), se glucógeno al 1%, y el tubo 2
agito la solución, para luego dejarla contiene la muestra extraída de la
reposar por 10 min. Se separó el almeja.
sobrenadante por filtración y
pasamos el precipitado a un vidrio de
reloj pesado previamente (41.1592 Equipo Tipo Muestra Muestra
gr), luego se dejo en la estufa a 80°C Muestra Estándar de la
durante 90 minutos, se retiro de la Extracción
estufa y se peso, dando 51.9999 gr.
1 camarón Positivo Negativo
 IDENTIFICACIÓN 2 Almeja Positivo Negativo
Se tomo una punta de espátula de la 3 Hígado de Positivo Positivo
muestra del precipitado, antes de pollo
llevar a la estufa y se disolvió en unos 4 Callo Positivo Positivo
cuantos mL de agua destilada, se 5 Almeja Positivo Negativo
colocaron 2 mL de esta mezcla en un
6 Almeja Positivo Negativo
tubo de ensayo. Luego, en otro tubo
de ensayo se colocaron 2 mL de una 7 Pulpo Positivo Positivo
solución de glucógeno al 1 %, se Tabla I. En la tabla se muestran las
añadieron 5 gotas de yodo a los 2 extracciones realizadas por otros
tubos y se observaron los resultados. equipos a diferentes organismos
marinos e hígados , muestran los
Resultados resultados obtenidos por medio de la
Se comparó el peso inicial de la prueba de yodo realizada al material
muestra de almeja picada con el peso extraído en solución, y a la solución
de la muestra después de meter al estándar de glucógeno al 1% .
desecador a una temperatura de 80 ° C

Muestra Inicial 20.3 gr

Discusión
De acuerdo con los resultados vistos
en el tubo con la muestra de almeja y el
tubo usado como estándar con la
solución de glucógeno al 1 %, en la
muestra se obtuvo una coloración
naranja indicando que no hubo
glucógeno o que hubo un error al
realizar la extracción, ya que como se
mostró en los resultados, los equipos
que realizaron pruebas en almeja,
también tuvieron resultados iguales a
los nuestros, pero otros equipos que no
trabajaron con almeja si obtuvieron
presencia de glucógeno, quizás no fue
tomada de una parte del cuerpo (en
nuestro caso la almeja) que contuviera
gran cantidad de glucógeno.
Conclusión
Se puede concluir que de acuerdo a
procedimientos tales como los que
realizamos es fácil determinar el nivel
de rendimiento que se obtiene del
glucógeno, en diferentes tipos de
muestra, ya sea organismos marinos, o
hígado de pollo o res, tomando en
cuenta las propiedades físicas y
químicas con las que se cuenta, no se
pudo calcular en esta práctica dado que
se obtuvo una nula extracción de
glucógeno, debido a no haber tenido
más control de ciertos factores, como
en nuestro caso no tomamos la
muestra de un lugar adecuado ó el mal
uso de los reactivos (glucógeno al 1 %).
CUESTIONARIO
1. Investigue que pruebas se pueden
usar para identificar y cuantificar
glucógeno.
- P. de Lugol : ila aparición de una
coloración azul indica la presencia del
almidón y una coloración roja, indica el
glucógeno o eritrodextrina.
- También por medio de análisis
histologicos como la reacción de PAS,
donde para realizarla debe de tener
muy poca agua normalmente y
normalmente se emplea con etanol al
80%.
2. Cite las diferencias estructurales y
funcionales entre el almidón y el
glucógeno.
- tanto el almidón como el glucógeno
están formados por largas cadenas de
glucosa.
- su principal diferencia esta en sus
enlaces, el glucógeno formado por α-D-
glucosas unidas con enlaces α(1-4) y
cada 10 glucosas tiene ramificaciones
con enlaces α(1-6), las glucosas de
estas ramificaciones, se unen con
enlaces α(1-6), a diferencia del
almidón.
3. Investigue el significado de
glucogénesis, gluconeogenesis,
glucogenólisis y glucemia.
- Gluconeogenesis es la biosíntesis de
la glucosa a partir de otros metabolitos
ya presentes en el organismo
(aminoácidos, ácidos grasos y otros).
- Glucogénesis: es la formación de
glucosa por hidrólisis del glucógeno y
se realiza en el hígado, músculos y
otras zonas orgánicas
- Glucogenólisis: es la degradación a
glucosa disponible metabólicamente
(G-6-P), es un conjunto de reacciones
para liberar la glucosa que constituye al
glucógeno.
- Glucemia: la glucemia son los niveles
de glucosa que circula por la sangre.
4. Investigue que es la insulina y cuál
es su función en el organismo.
- la insulina es una hormona segregada
por el páncreas, y disminuye la glucosa
sanguínea al favorecer su salida de la
sangre y su paso a través de las
membranas celulares hasta el interior
de la celula, donde la glucosa es
aprovechada. En pocas palabras la
insulina disminuye la glucemia y
aumenta el metabolismo de la glucosa.
5. Ilustre con un diagrama la
formación de acido láctico en la
glucolisis.
La capacidad de metabolización del
ácido pirúvico es mucho más limitada
que su producción y ello supone en la
práctica un cuello de botella en la
continuidad entre ambos procesos.
Como consecuencia de ello hay una
sobreproducción de ácido pirúvico y
este exceso de ácido pirúvico es
convertido en ácido láctico.
Bibliografía
- [1] “Bioquímica”,Lubert Stryer, Ed.
Revertè, 2008, Pág. 612.
- [2]http://www.uco.es/organiza/
departamentos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/22%20AISLAMIENTO
%20GLUC%C3%93GENO.pdf