Presentación de Antígenos

Presentación de Antígenos
Presentación de antígenos
Video 1
PRESENTACION DE ANTIGENOS:
OBJETIVOS PEDAGOGICOS
• Ubicar la presentación antigénica en el marco de una respuesta inmune (activación

y mecanismos efectores).
• Conocer las distintas vías de presentación antigénica y su sentido fisiológico.
• Identificar mecanismos de regulación: pH, ligandos TLR...
• Identificar distintas APCs y comprender su papel en la respuesta inmune.

¿En qué momento de la respuesta inmune se da la
presentación de antígenos y cuál es el objetivo?
CELULAS PRESENTADORAS DE ANTIGENOS
VIAS DE LLEGADA DEL ANTIGENO
DCs: APCs que se especializan en activar linfocitos T vírgenes
DC Inmaduras
•gran capacidad de captura
antigénica
•baja expresión de MHC
•baja expresión de moléculas de
co-estimulación
• pérdida de adhesividad al epitelio

• expresión de CCR 7 (que sigue
gradiente de CCL19 y CCL21)
DC Maduras
•Activación de T vírgenes
•↑MHC
•↑ Co-estimulación
•Citoquinas
MHC II Dendritic cell MHC I
ACTIVACION
CD4 CD8
Extracelular (proteínas de orígen viral y bacteriano, células apoptóticas, Intracelular (péptidos propios o
necróticas, complejos inmunes) de orígen bacteriano/viral que infecten
a la DC)
MECANISMOS EFECTORES
LA PRESENTACION DE ANTIGENOS
EN CONCEPTOS
• Los antígenos endόgenos se presentan a los T CD8 en el MHC I
• Los antígenos exόgenos se presentan a los T CD4 en el MHC II
PERO…..
•Los antígenos exόgenos pueden presentarse en el MHC I

(cross-presentaciόn).
•Los antígenos endόgenos pueden presentarse en el MHC II

(autofagia)
ACTIVACION ROL de la
Célula Dendrítica
CD4 CD8
Extracelular Intracelular
¿Qué tipo de antígeno se forma luego del procesamiento?
Línea de Linfocitos T específica T

para ovoalbúmina
Ovoalbúmina nativa Ovoalbúmina digerida
Ag
APC APC APC APC APC
Viable Fijada Viable Fijada
Respuesta T T T T T T T
de LT T T
T T T T T T
T
EL TCR RECONOCE UN PEPTIDO PROCESADO A
PARTIR DE UNA PROTEINA POR LA APC
p lejo HC
Com tido-M
pép
Las APCs aportan el MHC y la capacidad de procesar el antígeno

El antigeno viral está
pero el TCR no reconoció
al MHC extranjero
RESTRICCION POR EL MHC
EL LINFOCITO T DEBE RECONOCER EL

ANTIGENO EN EL CONTEXTO DEL HAPLOTIPO
DE MHC EN EL QUE SE DESARROLLO
Consecuencia del proceso de maduración y selección que
sufre el linfocito T en el Timo ( ya lo vieron en el video de
Linfopoyesis T y lo volveremos a ver en los videos de regulación
de la respuesta inmune)
Video 2
RESTRICCION POR EL MHC
EL LINFOCITO T DEBE RECONOCER EL

ANTIGENO EN EL CONTEXTO DEL HAPLOTIPO
DE MHC EN EL QUE SE DESARROLLO
Consecuencia del proceso de maduración y selección que
sufre el linfocito T en el Timo (lo vamos a ver en el teórico
de regulación de la respuesta inmune)
EL TCR RECONOCE EL COMPLEJO pMHC
Base molecular de la restricción por el MHC

MOLECULAS DE MHC: ASPECTOS
ESTRUCTURALES
MHC=HLA en el hombre
POLIMORFISMO GENICO
MOLECULAS DE MHC:
REGIONES POLIMORFAS
POLIMORFISMO
GENICO del MHC
Regiones
NO Polimorfas
pMHC I
hélices α hojas β
pMHC II
INTERACCIONES PEPTIDO:MHC
• Especificidad amplia
aa con carga +
aromáticos
• 1 péptido por vez, varios péptidos posibles
aa
•Los péptidos que se unen a un MHC
comparten caracterísitcas estructurales
•Interacción saturable, disociación lenta
• Falta de discriminación de lo propio y no propio
• Un haplotipo se une a un repertorio dado de péptidos antigénicos

MHC
Une péptidos de patógenos (y propios)
Poligénico
Polimórfico
Haplotipo individual
Rango de especificidades
Video 3
ACTIVACION
CD4 CD8
VIAS INTRACELULARES DE PROCESAMIENTO
DE ANTIGENOS
PROCESAMIENTO DE AG EXOGENOS:
Proteínas de orígen viral
METABOLISMO DEL MHC II

Proteínas de orígen bacteriano
Células apoptóticas/necróticas
Complejos inmunes
PROCESAMIENTO DE AG EXOGENOS:
METABOLISMO DEL MHC II
u ina
q
l oro
C
Necesidad de pH endo/fagosomal ácido
ACIDIFICACION ENDO/FAGOSOMAL POR LA
ATPAasa VACUOLAR (V-ATPasa)
El peligro inmunológico madura la DC que mejora su

capacidad de procesar antígenos para los T CD4+
VIAS INTRACELULARES DE PROCESAMIENTO
DE ANTIGENOS
PROCESAMIENTO DE AG ENDOGENOS:
METABOLISMO DEL MHC I
Por ésta vía, todas las células nucleadas del organismo muestran al Sistema
Inmune el estado de su Proteoma (no confundir con Proteasoma!)
PROTEASOMA e INMUNOPROTEASOMA
Unidades inducibles: LMP-2 y LMP-7

que generan péptidos más adecuados
para ser cargados por MHCI
COMPLEJO DE CARGADO DEL MHC I
ESTRATEGIAS VIRALES QUE INTERFIEREN CON
EL COMPLEJO DE CARGADO DEL MHC I
¿Si un paciente tiene alguna de éstas vías alterada,
que tipo de cuadros clínicos piensa que presentaría ?
EN CONCEPTOS
PERO…..


(autofagia)
Video 4
EN CONCEPTOS
PERO…..


(autofagia)
ACTIVACION
CD4 CD8
La cross-presentaciόn permite que una DC pueda activar un
linfocito T CD8 aún sin estar infectada por un virus
LT CD8 LT CD8
DC
CD4+ CD8+
Exogenous Antigens
Endogenous
Antigens
Golgi
EE - LE
Endocytic Proteosome
Route
MHC II
Lys
TAP
MHC I
Endoplasmic
Reticulum
CROSS-PRESENTACION
• Presentación de antígenos exógenos en MHC I
• Las DCs son particularmente eficaces en presentar antígenos

a través de esta vía
• Papel crítico en la inmunidad anti-viral, anti-tumoral y en la

tolerancia a lo propio
Regulación: pH
I
Amigorena and Savina Curr Opin Immunol 2010

Las DC no acidifican sus fagosomas en etapas
precoces
La NADPH oxidasa (NOX2) alcaliniza activamente la luz
fagosomal en DCs
Las DC no acidifican sus fagosomas en etapas
precoces
ACTIVACION
CD4 CD8
pH neutro
pH ácido
EN CONCEPTOS
SI, PERO…..


(autofagia)
AUTOFAGIA
Vía fisiológica que permite el recambio de del contenido citoplasmático
celular
ANTIGENOS CITOSOLICOS SON PRESENTADOS EN MHC II
GRACIAS A LA AUTOFAGIA
Los péptidos se pueden liberar

en el mismo compartimento que
los péptidos derivados
de antígenos extracelulares
(ej proteínas de membrana
virales)
PRESENTACION DE AG POR DIFERENTES APCs
Y SU SIGNIFICADO FISIOLOGICO
EN CONCEPTOS
• Restricción por el MHC
• Todas las células nucleadas presentan su proteoma interno en

moléculas de MHC de clase I a linfocitos T CD8.
• Los linfocitos T CD8 son activados por DC a través de la

cross-presentación (pH neutro)
• Las DC activan linfocitos T CD4 mediante complejos pMHC II

(pH ácido) que en sus fases efectoras activarán macrófagos
y/o LB.
ES NECESARIA PERO NO SUFICIENTE PARA
ACTIVAR LINFOCITOS T
Activación linfocitaria.
¿Dónde? Parte 1.
¿Cómo? Parte 2.
¿Para qué? Parte 3.
Linfocito B. Parte 4.
Activación linfocitaria (Parte 1)
Marcelo Hill
Activación linfocitaria.
Proceso extremadamente regulado por el cual los mediadores de la

inmunidad adaptativa se diferencias a células efectoras o memoria.
Los precursores de células T migran desde
la médula ósea al timo para madurar
EVOLUCION DE LA RESPUESTA
INMUNE CELULAR ADAPTATIVA
ETAPAS DE LA ACTIVACION LINFOCITARIA
ACTIVACION
LINFOCITARIA:
DONDE, COMO, PARA
QUE?
ACTIVACION LINFOCITARIA: DONDE?
R S1P+
LA L-SELECTINA (CD62L) DIRIGE LOS LT VIRGENESAL
GANGLIO LINFATICO
VLA-4 DIRIGE EL LT EFECTOR AL
FOCO INFECCIOSO
DCs: APCs que se especializan en activar
linfocitos T vírgenes
ETAPAS DE LA ACTIVACION LINFOCITARI
Conclusiones.
• Ocurre en los órganos linfoides secundarios (regulación de la migración
de linfocitos y células dendríticas).
• Diferencia linfocitos maduros vírgenes en células efectoras o memoria.
• Solamente la célula dendrítica (madura) es capaz de inducir la activación

de células T vírgenes.
Marcelo Hill
ACTIVACION
LINFOCITARIA:
DONDE, COMO, PARA
QUE?
¿Qué aportan las células
presentadoras para la activación
de los linfocitos T cooperadores?
Asociación con
moléculas MHC II en
superficie celular
Fragmentación de
proteínas en péptidos
Señales de co-
estimulación
ITAM: motivos de
activación del inmuno-
receptor basados en
tirosina
EL «PELIGRO INMUNOLOGICO» FAVORECE
EL DESARROLLO DE INMUNIDAD
LAS CELULAS T ACTIVADAS IMPLICAN
PELIGRO
CD28 ESTIMULA, CTLA4 INHIBE
MOLECULAS DE CO-ESTIMULACION
-CD28 (↓afinidad) y CTLA4 (↑afinidad) son ligandos de B7
-CD28 estimula y CTLA4 inhibe
-CD28 constitutivo, CTLA4 inducido x activación
-El bloqueo de la co-estimulación ofrece una

alternativa terapéutica novedosa para inhibir
respuestas inmunes perjudiciales
LA SINAPSIS INMUNOLOGICA
ESTABILIZA LA INTERACCION
T:APC
SMAC: SupraMolecular Adhesion Complex
cSMAC: TCR, CD4/8, CD28

pSMAC: LFA-1: ICAM-1
Interacciones APC –Linfocito T CD4+
B7 (CD80/86) CTLA-4 Activación
B7 (CD80/86) CD28 Activación
Reconocimiento
Linf T
TCR
MHC II
CD4+
APC CD4
CD58 (LFA-3) CD2 Adhesión
Activación
CD40 L
CD40
La activación de un linfocito T requiere de una

larga interacción con la APC (> 2 hs)
La activación de un linfocito T requiere de una larga
interacción con la APC (> 2 hs)
Antígeno Antígeno + LPS
DCs
Linfocitos T
LAS TRES SEÑALES EN LA SINAPSIS INMUNE
EL IL-2Ralpha (CD25) ES UN
MARCADOR DE LT
ACTIVADOS
LA ACTIVACION DE LOS CD8 PUEDE
NECESITAR DE LA AYUDA DE LOS CD4
ACTIVACION LINFOCITARIA E INMUNOSUPRESORES
EL BLOQUEO DE LA CO-ESTIMULACION
IMPIDE EL DESARROLLO DE LA SINAPSIS Y DEL
AUMENTO DEL CALCIO INTRACELULAR
CONTROL ANTI-CD28
CELULAS T EXHAUSTAS
Las células T exhaustas son un linaje

particular que se generan durante infecciones
crónicas y cáncer.
Se caracterizan por una progresiva pérdida de

funciones efectoras, expresión alta y sostenida de
receptores inhibidores, desregulación metabólica,
pobre capacidad proliferativa y de generar memoria
y programas transcripcionales y epigenéticos
específicos
TRES SEÑALES PARA GENERAR CELULAS T EXHAUSTAS
Conclusiones.
• Señal 1 (especificidad), señal 2 (activación), señal 3 (diferenciación).
• La sinapsis inmunológica favorece el proceso de activación.
• Los fármacos inmunosupresores antagonizan el proceso de activación.
• Las células T exhaustas sufren un proceso de activación aberrante que

lleva a un estado disfuncional.
Marcelo Hill
ACTIVACION
LINFOCITARIA:
DONDE, COMO, PARA
QUE?
DIFERENCIACION LINFOCITARIA T
EVOLUCION DE LA RESPUESTA
INMUNE ADAPTATIVA
CELULAR
LOS LT HELPER SON NECESARIOS PARA EL DESARROLLO
DE CTLs MEMORIA
EL IL-7R ES UN BUEN MARCADOR DE LT MEMORIA
EN CELULAS QUE FUERON ACTIVADAS
LOS LT MEMORIA PUEDEN SER CENTRALES (CCR7+) O
EFECTORES (CCR7-)
CELULAS T EXHAUSTAS
Las células T exhaustas son un linaje

particular que se generan durante infecciones
crónicas y cáncer.
Se caracterizan por una progresiva pérdida de

funciones efectoras, expresión alta y sostenida de
receptores inhibidores, desregulación metabólica,
pobre capacidad proliferativa y de generar memoria
y programas transcripcionales y epigenéticos
específicos
TRES SEÑALES PARA GENERAR CELULAS T EXHAUSTAS
Conclusiones.
• La activación linfocitaria diferencia células efectoras y memoria.
• Diferenetes subpoblaciones de células efectoras cumplen funciones

inmunológicas distintas
• Las células memoria expresan IL-7R y se subdividen en memoria

centrales y efectores dependiendo de la expresión de CCR7.
• Las células T exhaustas sufren un proceso de activación aberrante que

lleva a un estado disfuncional.
M
Mecanismos Efectores Humorales
Video 1
Mecanismos efectores mediados por anticuerpos:
Neutralización de toxinas y
microorganismos (MO)
Inhibición de la infectividad de
MO o del efecto biológico de
toxinas producidas por MO
MO= microrganismos patógenos

1- Neutralización de toxinas y microorganismos
La IgG e IgA de alta afinidad pueden neutralizar

toxinas bacterianas
Ejemplos: - toxina del tétanos (inhibe transmisión neuromuscular)

- difteria (inhibe síntesis proteica)
1- Neutralización de toxinas y microorganismos
La IgG e IgA de alta afinidad pueden neutralizar

toxinas bacterianas
Ejemplos: - toxina del tétanos (inhibe transmisión neuromuscular)

- difteria (inhibe síntesis proteica)
Neutralización de toxinas y microorganismos
La IgG e IgA de alta afinidad pueden inhibir la

infectividad de los virus
Ejemplo: virus Influenza (hemaglutinina)

La IgG e IgA de alta afinidad pueden inhibir la

infectividad de los virus

microorganismos
Los anticuerpos pueden

bloquear la adherencia
de las bacterias a las
células huésped
Ejemplo: bacterias Gram – (pili)

microorganismos
Los anticuerpos pueden

bloquear la adherencia
de las bacterias a las
células huésped
Ejemplo: bacterias Gram – (pili)

-Requiere las regiones del anticuerpo que participan en la

unión al antígeno
-Puede ser mediada por anticuerpos de cualquier isotipo

presentes en la circulación (IgG en su mayoría) o en
secreciones mucosas (IgA)
-Los anticuerpos más eficaces en la neutralización son los

que tienen alta afinidad por sus antígenos
-Modo de acción: interferencia estérica y efectos

alostéricos
-Los microorganismos pueden evadir este mecanismo

inmune mutando los antígenos de superficie que son
blanco de los anticuerpos neutralizantes
Para ir
reflexionando….
¿Si anticuerpos que neutralizan un
microorgansimo tienen reactividad
cruzada con otro, piensa que siempre es
beneficioso para resolver la s dos
infecciones?
Muchas vacunas profilácticas actúan estimulando la
producción del sistema inmune de anticuerpos
neutralizadores de alta afinidad:
Ej: IgG contra Ej: IgG contra HSV en

Streptococcus pneumoniae la mucosa cervicovaginal
En el proceso de cambio de clase cambia el isotipo de una Ig, manteniendo sus
regiones variables (idiotipo).
Gracias por su atención!!!
M
Video 2
Los receptores Fc
activan a gran
variedad de células
efectoras:
Los receptores Fc de las células accesorias son
receptores de señalización específicos para diferentes
isotipos de Ig
immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif
immunoreceptor tyrosine-based activation motif
Regulación de la activación del LB por el FcγRIIB
La retroalimentación por el anticuerpo es un mecanismo fisiológico de control de la

respuesta inmune humoral
Opsonización y Fagocitosis
Los receptores Fc de los fagocitos permiten la ingestión

y destrucción de patógenos extracelulares
opsonizados
ROS
ON
✔ Importante en el caso de bacterias recubiertas con cápsulas de

polisacáridos que no son fagocitadas directamente por fagocitos
Los receptores Fc de los fagocitos conducen a su
activación cuando los anticuerpos se encuentran unidos
a la superficie de los patógenos
Opsonización y fagocitosis
-Opsonización: proceso por el cual los anticuerpos

recubren partículas o MO promoviendo la fagocitosis
-Los receptores de Fc en los macrófagos y neutrófilos

reconocen la región constante de las Ig
-La unión de los receptores Fc con muchas moléculas de

Ig-bacteria, produce una interacción (crosslinking) que
resulta en la activación de una cascada de señales lo que
conduce a la fagocitosis de la bacteria opsonizada
Citotoxicidad Celular Dependiente de
Anticuerpos (ADCC)
Los receptores Fc (CD16) activan las células Natural
Killer, las cuales pueden destruir blancos cubiertos de
anticuerpos
El CD16 es de baja afinidad y NO se une a IgG monoméricas circulantes, se une a grupos de

IgG mostradas en las superficies celulares
Anticuerpos (ADCC)
Receptor para el Fc de la IgE de afinidad alta :FcƐRI
Los basófilos , mastocitos y

eosinófilos expresan el receptor
FcƐRI específico de las cadenas
pesadas epsilon (Ɛ) que se une
a la IgE
Activación de Mastocitos
Mastocitos,
basófilos y
eosinófilos
activados unen
IgE con alta
afinidad
Mediadores:
Histamina
Mediadores lipídicos (PGD2, LC4)
Citoquinas (TNF-α)
Activación de Mastocitos
✔Reclutamiento de células en sitio de infección
y activación de basófilos y eosinófilos Mastocitos,
✔ Incremento del flujo linfático y sanguíneo basófilos y
eosinófilos
✔Contracción muscular, que contribuye a la activados unen
expulsión física de patógenos desde los pulmones
o intestino IgE con alta
afinidad
Mediadores:
Histamina
Mediadores lipídicos (PGD2, LC4)
Citoquinas (TNF-α)
Anticuerpos (ADCC)
Eosinófilos con receptor FcεRI atacando una larva de

esquistosoma cubierta de IgE
✔Los eosinófilos activados liberan de sus gránulos la proteína

principal básica (tóxica) que ayuda a eliminar el helminto
Anticuerpos (ADCC)
Eosinófilos con receptor FcεRI atacando una larva de

✔Importante en el caso de parásitos helmintos que son

demasiado grandes para ser fagocitados por macrófagos o
neutrófilos
✔Los eosinófilos expresan FcεR únicamente cuando están

activados y son reclutados al sitio de inflamación
Anticuerpos (ADCC)
Funciones de los receptores
Fc
1. Regulación + / -
» Fagocitosis
» Degranulación (mastocitos, eosinófilos, basófilos)
» Citolisis
» Transcripción de citocinas
» Inhibición de producción de Ac
2. Captura de complejos inmunes (ICs)

3. Transporte de anticuerpos a través de membranas
» Secreción de IgA a través del epitelio hacia el
lumen: Poly-IgR
» Transporte de IgG maternos hacia el feto a través
de la placenta: FcRn
IgA Antibody Transport Across Cell
(Transcytosis=Tanscitosis)
Inmunidad fetal
IgG transportadas a través de la placenta a la circulación

fetal a través de un receptor FcRn (neonatal Fc
receptor)
La inmunidad fetal y neonatal confiere
protección al neonato
Niveles bajos de IgG

M
Video 3
Sistema del Complemento
✔ Grupo de proteínas pre-formadas (proenzimas/cimógenos)

que circulan en la sangre y que están inactivas
✔ Expresión constitutiva, distribuidas por todos los tejidos
✔ Sintetizadas por células hepáticas, macrógfagos,

fibroblastos, células epiteliales y endoteliales.
✔ Una vez que se activan, interaccionan entre sí (proteólisis

secuencial) para generar productos (complejos enzimáticos
con actividad proteolítica) que eliminan microbios.
CH3
CH2
La vía clásica de activación del
complemento es iniciada
por la unión de C1q al anticuerpo.
CASCADA DE ACTIVACIÓN DE
LA VÍA CLÁSICA
Estas proteínas son propias de las células del hospedero, no encontrándose en
las superficies microbianas
Regulación del Sistema del Complemento
1.Antes del ensamblaje de la actividad

convertasa
2.Después del ensamblaje de la convertasa
3.En el ensamblaje del complejo de ataque a
la membrana (MAC)
MCP-CR1
DAF: acelerador de la degradación (decay-accelerating factor)

Producidas por células
MCP: proteína cofactor de membrana (membrane cofactor protein)
de mamíferos!!
CR1: receptor para el complemento de tipo I
Funciones del complemento:
1. Lisis de células, bacterias y virus
1. Opsonización que promueve la fagocitosis de Ag

particulados
1. Unión a receptores de complemento específicos en células

del sistema inmunitario
1. Depuración
✔ICdenocomplejos
removidosinmunes
se depositan en la
membrana basal de vasos sanguíneos
✔ Glomérulonefritis
✔ Daño tisular
✔ Enfermedades autoinmune (SLE)
✔ Inmunodeficiencias (complemento)
Introducción a los mecanismos
efectores celulares
Marcelo Hill
Tipos de Inmunidad adaptativa:
TIMO PERIFERIA
LT CD4+ Reguladoras
LT CD4+ LT CD4+
Reguladora natural Reguladora natural
FOXP3+ FOXP3+ LT CD4+ (iTreg) LT CD4+
Reguladora Inducible Tr1, Th3
FOXP3+ FOXP3-
LT CD4+ LT CD4+
Virgen Virgen
FOXP3- FOXP3-
Th1 Th2 Th17
LT CD4+ Efectoras
LT  LT 
Tfh Th22 Th9
NKT NKT
LT CD8+ Efector
LT CD8+ LT CD8+
Virgen Virgen
FOXP3- FOXP3- LT Citotóxico
La inducción y las fases efectoras de la Inmunidad Mediada por Células
CD4+ CD8+
Linfocitos T efectores CD4+
• Las células T CD4+ pueden diferenciarse en

distintos subgrupos de células efectoras que
difieren en:
- Cómo se inducen
- Qué citoquinas producen
- Cual mecanismo efector se activa
• Las células T CD4+ pueden activar diferentes

mecanismos efectores en respuesta a diferentes
tipos de microbios (plasticidad de respuesta).
Linfocitos T efectores CD4+
En 1986 Mosmann y Coffman describen 2 tipos distintos de células T CD4+
que diferían en su perfil de producción de citoquinas: Th1 y Th2
Plasticidad en la respuesta T CD4+
Mecanismos efectores celulares.
Células cooperadoras.
Marcelo Hill
Plasticidad en la respuesta T CD4+
• Las células dendríticas (y las CPAs) actúan
como “cerebros” de la inmunidad adaptativa.
• A través de sus receptores decodifican la
información proveniente de los PAMPs y
DAMPs, induciendo la producción de conjuntos
de citoquinas que permiten diferenciar a los LT
CD4+ en diferentes perfiles funcionales
(otros tipos celulares: macrófagos, células NK, NKT y mastocitos también

contribuyen a definir el perfil funcional del linfocito T CD4+ activado)
Células Th1: inducción de la diferenciación
• La IL-12 induce la diferenciación de LT CD4+ en un perfil Th1

• Es producida por células dendríticas y macrófagos activados.
• Presenta 2 subunidades p35 y p40.
• Interactúa con un receptor de alta afinidad (IL-12R1 IL-12R2)
Th1 Th17 Th1
Familia “IL-12” de citocinas: IL-12, IL-23 e IL-27

L’hypothèse Th1/Th2
Funciones mediadas por las células Th1
Activación del macrófago por
Células Th1
Mecanismos efectores mediados por las células Th1
• La IL-4 induce la diferenciación de LT

CD4+ en un perfil Th2 promoviendo la
expresión de STAT-6 quien a su vez activa
a GATA-3.
• No es claro qué célula produce IL-4 pero se
ha sugerido a células NKT, basófilos o
mastocitos.
• Además de IL-4 otras citoquinas pueden
ser también activas: TSLP, IL-33 e IL-25
L’hypothèse Th1/Th2
Funciones mediadas por las células Th2
Respuestas Th2 y fenómenos alérgicos
Citotoxicidad celular dependiente de Ac IgE:
Inmunidad frente a las infecciones por parásitos helmintos.

Mastocitos, basófilos y eosinófilos activados
unen IgE con alta afinidad
Eosinófilos con receptor FcRI atacando una larva de

• Son importantes en la inmunidad frente a bacterias

extracelulares e infecciones micóticas.
• Las células Th17 constituyen una primera línea de
defensa operativa en las superficies mucosas y en
la piel.
Mecanismos antimicrobianos mediados por las células Th17
IL-17A e IL-17F activan NF-kB

estimulando la producción de:
• Citoquinas inflamatorias (TNF-
a, IL-1, IL-6, GM-CSF y G-CSF)
• Quimioquinas inflamatorias
(CXCL1, CXCL8 y CXCL10)
• Mucinas.
• Péptidos antimicrobianos (b-
defensinas)
• Metaloproteasas
IL-17A e IL-17F : potente
efecto quimiotáctico sobre los
neutrófilos
IL-22: media efectos
proinflamatorios pero su
receptor se expresa sólo en
queratinocitos, células
epiteliales, endoteliales,
fibroblastos pero no en células
inmunitarias.
Otros papeles de las células Th17
Psoriasis y otras enfermedades autoinmunes

Ateroesclerosis
Inflamación crónica
Inmunoterapia oncológica (Th17reg versus Th17 efectores)

Células Tfh
• Las células Tfh expresan CXCR5,

receptor de CXCL13 (producido
por las células foliculares
dendríticas).
• No expresa CCR7, receptor de
CCL19 y CCL21 (área paracortical
del ganglio).
• Éxpresión alta de CXCR5 y
ausencia de CCR7 determinan
que TFH se localicen en los
folículos.
Diferenciación de las células T CD4+ en un perfil Tfh
Células Tfh
Cambio de Clase
Selección por el Ag
Hipermutación somática
• Los centrocitos que unen el Ag con alta afinidad, lo “arrancarán” de la

superficie de las CD, lo endocitarán y procesarán por la vía exógena,
presentándolo a linfocitos Tfh a través de moléculas de clase II del CMH.
• La colaboración con los linfocitos Tfh induce señales de supervivencia en los
centrocitos, que lo “rescatan” de la apoptosis
Mecanismos efectores celulares.
Linfocitos citotóxicos.
Marcelo Hill
Generación de los Linfocitos T CD8+ efectores
• Los linfocitos T CD8+ vírgenes se

extravasan en los órganos linfoides
secundarios.
• Ingresan al área T e interactúan con

las células dendríticas.
• Si reconocen péptidos antigénicos

unidos a moléculas CMH clase I se
activan, proliferan y diferencian a
Linfocitos T citotóxicos.
• Si no encuentran su Ag específico
salen por vía linfática y retornan a la
circulación sanguínea.
Activación de los Linfocitos T CD8+
La activación del linfocito T CD8+ requiere dos señales:

1)- TCR : Ag-MHC
2)- CD28 : CD80/CD86 (B7.1/B7.2)
Para lograr una activación completa del linfocito T CD8+ vírgen se

requiere además de las 2 señales de activación la colaboración de las
células T CD4+
La colaboración de los linfocitos T CD4+ favorece una activación

completa del linfocito T CD8+ vírgen permitiendo la generación de
linfocitos T CD8+ memoria.
La presencia de citoquinas inflamatorias promueve el desarrollo de una
vigorosa respuesta T CD8+ de memoria.
Mecanismos efectores de los linfocitos T CD8+
• Juegan un rol central en la inmunidad antitumoral, antiviral y

participan en la respuesta inmune generada contra ciertas
bacterias y parásitos.
• Los linfocitos T CD8+ efectores, a diferencia de los vírgenes,
sólo requieren la señal del TCR para activarse.
La inmunidad generada por los linfocitos T CD8+

se ejerce por:
1. Destrucción de las células infectadas (citotoxicidad)

• Mediante liberación de granzimas y perforinas
(mecanismo secretorio).
• A través del sistema FasL / Fas
2. Producción de citoquinas inflamatorias (principalmente

IFN- y TNF-)
Mecanismos citotóxicos mediados por los linfocitos T CD8+
Mecanismo mediado por granzimas y perforinas

• Movilización y liberación de los gránulos del LTc conteniendo
perforina, granzima y serglicina.
• Activación de caspasas y muerte por apoptosis de la célula blanco.
Mecanismo mediado por granzimas y perforinas

Mecanismo mediado por el sistema Fas / FasL

• FasL interactúa con Fas (CD95) e induce su trimerización.
• Este proceso recluta proteínas adaptadoras a su dominio de muerte
(FADD).
• Activación de la caspasa 8 y muerte por apoptosis.
Linfocitos 
Los linfocitos T juegan un rol importante en las respuestas

tempranas a patógenos presentes en mucosas:
1. A diferencia de los T los T expresan un repertorio de TCRs

muy limitado
2. En periferia todos expresan V9 asociado con diferentes V (V2
en sangre, V1 en dermis, V1/V3 en mucosas)
3. Reconocen moléculas que se expresan en células “estresadas”
(DAMP).
4. Salen del timo pre-activadas (respuesta rápida)
5. Presentan tropismo diferencial por epitelios mucosos y de piel.
6. Son efectivos frente a patógenos intra y extracelulares, y en la
inmunidad anti-tumoral.
7. Son potentes moduladores de las respuestas inmunes innata y
adaptativa.
Diferentes mecanismos de activación de las células 
• Para reconocer al Ag los LT no requieren procesamiento
antigénico ni expresión de moléculas del CMH por parte de las CPA.
• Reconocen a través de NKG2D las proteínas MICA y MICB
expresadas en células epiteliales estresadas o infectadas.
• La activación de LT conduce a:
✓ Producción de citoquinas (Th1, Th17 y Th2)
✓ Citotoxicidad
Células NKT
• Las células NKT “clásicas” son células T que expresan un TCR invariante
(V24/V11) que reconocen glicolípidos presentados por CD1d.
• Co-expresan CD56 (NK) y CD3 (T)
• Tienen capacidad citotóxica y pueden secretar diferentes tipos de
citoquinas.
¡GRACIAS!
VIDEO 4
REGULACION DE LA RESPUESTA
INMUNE ADAPTATIV
A
CBCC: Unidad Curricular

VIDEO 1 Hematología-Inmunología
RESPUESTA INMUNE
ADAPTATIVA
✔ Determinada por la naturaleza de la “amenaza”, o sea guiada
en parte por lo que le informa la RI Innata (citokinas etc)
✔ Características: especificidad frente al antígeno

memoria
especialización
✔ Respuestas inmunes efectoras y reguladoras
✔ El rol de “jefe de orquesta” lo tienen las Células Dendríticas

Mecanismos de decline de una
respuesta inmune normal
(homeostasis)
CTLA-4, PD-1, Fas,

FasL
•Tolerancia a lo propio • Rechazo de transplantes •Cáncer
•Tolerancia materno fetal •Autoinmunidad •Infecciones crónicas
•Tolerancia oral • Eliminación de vectores
•Control de hipersensibilidad y/o moléculas terapéuticas Manipulación patológica
•Organos inmunoprivilegiados en
terapia génica
Mecanismos Fisiológicos Intervención terapéutica
REGULACION
✔ naturaleza (lípido-polisacárido-proteico)
✔ carga antigénica
Antigeno ✔ respuesta inmune innata que desencadena
Respuesta Respueta No
Inmunogénica Inmunogénica
Un mismo antígeno proteico puede desencadenar
respuestas inmunógenas o tolerógenas
A favor de los antígenos propios

Mellor and Munn. Nat Rev Immunol 2007
REGULAR
ES….
TOLERAR
LIMITAR
ADAPTAR
TOLERANCIA
Estado fisiológico dado por una protección
durable y sistémica provocada por la
exposicion previa de un antígeno que
evita su destrucción inmunológica.
Relevancia fisiológica : auto-tolerancia
Las RI adaptativas discriminan lo propio de lo no

propio poniendo en juego mecanismos activos de
tolerancia imunológica.
TOLERANCIA
Estado fisiológico dado por una protección
durable y sistémica provocada por la
exposicion previa de un antígeno que
evita su destrucción inmunológica.
La Tolerancia puede ser: natural o adquirida
Según donde se desarrolle : central o periférica

TOLERANCIA CENTRAL Y PERIFERICA
¿Para qué se necesitan mecanismos

de tolerancia a nivel de tejidos
periféricos?
Tipos de
Tolerancia
Central Periférica
▪ El sitio para los ▪ Sitio: cualquier
linfocitos T es el timo parte del
▪ El sitio para los organismo
linfocitos B es la ▪ Células: linfocitos T
médula ósea yB
▪ Mecanismos: ▪ Mecanismos:
Delección clonal (Linf. T Anergia
y B) Edición receptor Delección
(Linf. B) Anergia (Linf B) clonal
TOLERANCIA CENTRAL de
LINFOCITOS T
LA AVIDEZ DEL TCR POR EL MHC DETERMINA EL RESULTADO
DE LA MADURACION DE LA CELULA T
o generación de LT reguladores
Tímicos (tTregs)
PRESENTACION DE ANTIGENOS POR DC
MEDULARES PARA SELECCION
NEGATIVA
AIRE: Auto-Immune REgulator

La ablación in vivo de DCs desencadena autoinmunidad
espontánea
No hubo selección negativa
Ohnmacht et al. J Exp Med 2009

Función de AIRE en la eliminación de
Linfocitos T en el timo
APS1: Sindrome
poliendócrino
autoinmunitario de
tipo 1
El reconocimiento de antígenos propios por los linfocitos T
inmaduros en el timo llevan a la apoptosis (selección
negativa) o a la generación de linfocitos T reguladores
¿POR QUE NO ALCANZA CON LA
TOLERANCIA CENTRAL?
TOLERANCIA TOLERANCIA
CENTRAL CENTRAL
»EXIGENTE » »IMPERFECTA »
Linfocitos auto-reactivos
Linfocitos anti-antígenos extranjeros

VIDEO 4
INMUNE ADAPTATIV
A

¿POR QUE NO ALCANZA CON LA
TOLERANCIA CENTRAL?
TOLERANCIA TOLERANCIA
CENTRAL CENTRAL
»EXIGENTE » »IMPERFECTA »
Linfocitos auto-reactivos
Linfocitos anti-antígenos extranjeros

Mecanismos de Tolerancia Periférica
Proliferación y diferenciación Linfocitos T
Normal
Respuesta
Respuesta
Normal
Response
normal activados
CD28 B7
Reconocimiento de Ag
sin co-estimulación o inmunidad innata
Anergia
Anergy Linfocitos no
Interacción B7 – CTLA-4 respondedores
CTLA4 B7
Fa
s Fas-FasL
Interacción Fas - FasL
Muerte celular
inducida por interaction Apoptosis
Activación
Fas
L Inhibición de la
Supresión por células T reguladoras
Cytokine-mediated
Regulación
Cytokine suppression proliferación y
por células
regulation acciones
Citoquinas efectoras
ANERGIA (Inactivación Funcional) en la TOLERANCIA
PERIFERICA
Bloqueo de señal
Ubiquitinas
CTLA-4
PD-1
APOPTOSIS EN LA TOLERANCIA
PERIFERICA AICD: Activated Induced Cell Death
Antígenos propios
repetidamente
mostrados al LT
Antígenos propios presentados sin coestimulación

LA FASE DE CONTRACCION DEPENDE DE LA
APOPTOSIS
Además: CTLA4
PD-1
IDO
Tregs
VIDEO 4
INMUNE ADAPTATIV
A

Agosto de 2020
Mecanismos de Tolerancia Periférica
Proliferación y diferenciación Linfocitos T
Normal
Respuesta
Respuesta
Normal
Response
normal activados
CD28 B7
Reconocimiento de Ag
sin co-estimulación o inmunidad innata
Anergia
Anergy Linfocitos no
Interacción B7 – CTLA-4 respondedores
CTLA4 B7
Fa
s Fas-FasL
Interacción Fas - FasL
Muerte celular
inducida por interaction Apoptosis
Activación
Fas
L Inhibición de la
Supresión por células T reguladoras
Cytokine-mediated
Regulación
Cytokine suppression proliferación y
por células
regulation acciones
Citoquinas efectoras
Linfocitos
Treg cell T reguladores
(Tregs)
development Linfocitos T
reguladores
pTreg p
t
tTreg
t
t
t Immunity 2009; 30: p626

Linfocitos
(Tregs)
development
p
pTreg
t t
tTreg
t t
Immunity 2009; 30: p626

Linfocitos
(Tregs)
development
p
pTreg
t t
tTreg
t t
Immunity 2009; 30: p626

Linfocitos T reguladores
(Tregs)
p
pTreg
t t
tTreg
t t
IPEX syndrome
Immunodysregulation, Polyendocrinopathy, and Enteropathy,
X-linked)
Características de los Tregs
✔Cantidad: 5-10% de linfocitos T CD4 en periferia son

Tregs.
✔Marcadores: Foxp3,CD25, CD103,CD127low ,

GITR (glucocorticoid-induced TNF receptor),
CTLA-4.
✔ Son dependientes de la IL-2 para su supervivencia

✔ Secreción de citoquinas reguladoras: IL-10,IL-35,
TGF-β.
✔Tienen múltiples mecanismos de supresión en

I-about regulatory T cells
Mice
Foxp3: survival, development and supressive activity
f CD25+++: survival factor (IL-2R αchaine)
CTLA-4: supressive function (↓CD80 CD86 in DC)
GITR: supressive function
Human
Foxp3high and CD127- ( IL-7α chaine)
CD25+++ CTLA-4 GITR
LAG3
HELIOS: Thymic marker
I-about regulatory T cells
CD4+CD25+++Foxp3+
Independent thymic origin and antigen dependent
Tr1
Th3
After antigenic
iTreg35 stimulation
DNT (CD3+CD4-CD8-NKT- )
Células T reguladoras Foxp3+ en el sistema inmune humano
CD45RA
T naive Treg naive
Efectora
Treg activada
activada
FOXP3
Población I Treg naive: CD45RA+, FoxP3+,CD127lowCD25high

Población III T efectora: CD45RA-, FoxP3+ ,CD127lowCD25high
Población II Treg activada: CD45RA-,FoxP3high, CD127low CD25high

Células T reguladoras Foxp3+ en el sistema inmune humano
CD45RA
T naive Treg naive
Efectora
Treg activada
activada
FOXP3
La definición de T reg es funcional, debemos tener la prueba in

vitro
o in vivo que son capaces de inhibir una respuesta inmune efectora
ACTIVACION DE FOXP3: indispensable para la diferenciación
de Tregs tímicos
Papel del antigeno,

CD28, IL-2, TGF-beta
animales IL-2-/-
CD25 -/-
Foxp3 -/-
Se mueren de
autoinmunidad
FUNCIONES DE LA IL-2 EN LA INMUNIDAD Y LA
REGULACION
Mecanismos de accion de los linfocitos T reguladores
Los Tregs son estimulados de forma antígeno-específica,

pero una vez activados inhiben tanto respuestas CD4 como CD8
de forma antígeno-inespecífica.
LT - LTreg - LT
efector efector
TGF-β, IL-10, IL35

EFECTO BYSTANDER
MECANISMOS DE ACCION DE Treg
Issa and Wood Curr Op Transplant 2010

En la periferia, a partir de Linfocitos Th0, se originan
LT efectores y LT reguladores de acuerdo al
microambiente de citoquinas
Foxp3
marcador
Treg
Desarrollo de linfocitos Th17 y de linfocitos Treg
pTreg tTreg
PLASTICIDAD FUNCIONAL DE LA Treg
Th17
•Tolerancia a lo propio • Rechazo de transplantes •Cáncer
•Tolerancia materno fetal •Autoinmunidad •Infecciones crónicas
•Tolerancia oral • Eliminación de vectores
•Control de hipersensibilidad y/o moléculas terapéuticas Manipulación patológica
•Organos inmunoprivilegiados en
terapia génica
Mecanismos Fisiológicos Intervención terapéutica
REGULACION
Las células tumorales atraen a los Linfocitos Tregs naturales y
genera un microambiente propicio para la generación “de novo”
Estrategias para modular los Tregs en therapias antiumorales
Las células Tregs son

las que expresan mas
fuertemente CTLA-4
Ipilimumab : doble mecanismo de actividad anti-tumoral.
Ratio
Teff/Tregs
Blank C. Curr Opin Oncol. 2014 Mar;26(2):204-14.

VIDEO 4
INMUNE ADAPTATIV
A

TOLERANCIA CENTRAL EN LOS LINFOCITOS B
EDICION del receptor ANERGIA IGNORANCIA

o APOPTOSIS
TOlERANCIA PERIFERICA EN LOS
LINFOCITOS B
En LB que reconocen
Ag propios sin ayuda T
En LB que
reconocen
Ag propios con
baja afinidad
B10: CELULAS B QUE REGULAN A
TRAVES DE IL-10
Fenotipo: CD5, CD1d
PROPIEDADES INMUNOREGULADORAS
DE LA IL-10
Dendritic cell
Las DCs tolerizan
células T a antígenos
propios
Rôle duel des cellules dendritiques présentatrices
d’antigènes
¡Ambiente citoquínico y
respuesta inmune innata!
Mecanismos utilizados por las DCs tolerogénicas para
regular respuestas inmunes
Domogalla et al.
Frontiers in Immunology 2017
ESTRATEGIAS DE MANIPULACION DE DCs
TOLEROGENICAS CON FINES TERAPEUTICOS
Domogalla et al.
Frontiers in Immunology 2017
Unidad Curricular “Hematología e Inmunología”
Dept. de Inmunobiología
Eduardo Osinaga
Relación immune
materno-fetal
1
Embarazo como dilema inmunológico
Las células fetales son “extrañas” para el Sistema

Inmune materno ya que el 50% de sus antígenos MHC
son de origen paterno.
La madre debe tolerar un transplante semi-alogénico

en útero y mantenerse inmunocompetente a nivel
sistémico.
Las células fetales son toleradas en el

ambiente placentario,
pero no si se injertan en otros tejidos maternos.
¿Cómo se establece la tolerancia
inmune materno – fetal?
1) Durante el embarazo se modifica el equilibrio
entre subpoblaciones de linfocitos con actividad
reguladora y cooperadora (Treg, Th1/Th2) y se
inhiben mecanismos efectores humorales.
2) Las células trofoblásticas fetales,

que interaccionan con las células maternas,
modifican la expresión de moléculas MHC
3) La placenta es un sitio inmunológicamente

privilegiado, con capacidad para destruir e inactivar
células activadas del Sistema Inmune.
Al nacimiento el niño tiene más IgG séricas que su madre
IgG materna
IgG fetal
Malek A et al. Am J Reprod Immunol 1996 36:248
➢ Los anticuerpos maternos anti-antigenos HLA paternos se encuentran en circulación

en 20% de primigrávidas y en 40% de multigrávidas.
➢ Predominan los anticuerpos protectores (“asimétricos”) que bloquean el

reconocimiento de antígenos paternos por parte de linfocitos T.
➢ Los anticuerpos “asimétricos” son IgG con una cadena oligosacarídicas adicional
(rica en manosa) en la cadena liviana. Inducidos por citoquinas Th2.
Proteínas inhibidoras del complemento
(DAF, MCP y CD59) en la placenta
Expresión de inhibidores del complemento asociados a la membrana celular en

placenta (1º trimestre del embarazo). Positividad sobre sincitotrafoblasto.
Decay Accelerating Factor Membrane Cofactor Protein CD59

(DAF) (MCP) (CD46)
Disocia la C3 convertasa C4bC2b y C3bBb cofactor para el corte de C3b y C4b Bloquea la unión de C9 a C7 y a C8
mediado por el factor I
Girardi et al. Mol Immunol 2006 43:68.

Desarrollo de un estado de tolerancia local
El embarazo normal depende del reconocimiento por parte de la

madre de los antígenos paternos incorporados en el embrión/feto.
No del ocultamiento de estos antígenos al sistema inmune.
Los linfocitos Treg que favorecen la tolerancia
fetal pueden ser de origen tímico o periférico
Enfermedades autoinmunes pueden
mejorar o empeorar durante el embarazo...
Arck and Hecher, Nature Medicine 2013

CNS1 La expresión de CNS1 refuerza
(conserved noncoding sequence 1) la tolerancia materno-fetal
• Es esencial para la generación
de pTreg.
• Actúa como potenciador de

Foxp3.
• Sólo se encuentra en placenta

de mamíferos.
• La deficiencia en CNS1 se
acompaña de abortos.
Las respuestas de linfocitos T controladas por
hormonas pueden influir en la autoinmunidad
La relación entre embarazo y

autoinmunidad puede ser bidireccional Piccinni et al., Clin Mol Allergy (2016)
El reconocimiento de un antígeno por un linfocito TH
no es sinónimo de activación
Linf.TH APC Ausencia de

TCR MHC II
2° señal
(Co-estimulación)
Apoptosis Tolerancia (anergia clonal o deleción)
CD28 B7
Linf. TH TCR MHC II

APC 1° + 2° señal
citoquinas
Inflamación
Activación
La muerte apoptótica de las células trofobásticas
favorece la inducción de tolerancia materna hacia el feto
Las células dendríticas uterinas juegan un papel central en dirigir la

respuesta inmune hacia la tolerancia fetal.
La presencia de patógenos favorece la inducción de una fuerte respuesta

inmune contra ellos.
Rol de las células dendríticas maternas en la
inducción de tolerancia fetal
Muerte apoptótica de
células trofoblásticas
Liberación de desechos
solubles del trofoblasto
Taglauer et al., Int. J. Dev. Biol. 54: 421-430 (2010)
En la decidua hay dos tipos de macrófagos,
con funciones opuestas
La función Th2 y Treg favorece el embarazo normal
La polarización Th1/Th2 se modifica
durante el embarazo
La función Th1 puede afectar el desarrollo del embarazo
El TNF-α y el INF-γ inhiben el desarrollo
embriónico-fetal y la proliferación del trofoblasto
A nivel placentario ocurre un profundo cambio
en la expresión de moléculas HLA
Moléculas HLA en células normales
Células normales
Las células trofoblásticas no expresan
HLA-A, ni HLA-B. Tampoco HLA de clase II…
Ausencia de antígenos HLA clase I "clásicos” impide respuestas

inmunes celulares mediadas por LT citotóxicos.
¿Células susceptibles a la muerte por Natural Killer?
Trofoblasto
pero expresan HLA-E y HLA-G…
Trofoblasto
HLA-E y HLA-G se unen a
moléculas inhibitorias de las células NK
Célula Natural Killer
Trofoblasto
Las moléculas HLA-G tienen polimorfismo muy limitado e
interaccionan con receptores de diferentes células del
Sistema Inmune
HLA-G es un factor inmunomodulador principal
para prevenir el rechazo fetal
Carosella et al., Blood 2008

La interación de HLA-G con células del sistema inmune
limita la respuesta contra antígenos paternos…
… e induce a las uNK a producir factores angiogénicos

Le Bouteiller, Biomed J. (2015)
Análisis inmuhistoquímico de la expresión
de moléculas HLA-G en el trofoblasto
Las NK uterinas (uNK) son los leucocitos más
abundantes en el sitio de implantación
Presencia de leucocitos en la decidua humana
durante la gestación
uNK
Gomez-Lopez et al., J Leukoc Biol.

(2010)
Las NK uterinas (uNK) cumplen funciones
importantes para el desarrollo del embarazo
➢ Tienen altos niveles de CD56 pero no expresan CD16.

➢ Se diferencian en el útero a partir de las NK periféricas.
➢ Muy baja capacidad citolítica.
➢ Potentes productoras de diferentes tipos de citoquinas.
➢ Promueven angiogénesis (VEGF-C, angiopoietina-2).
➢ La invasión del trofoblasto es dirigida por las uNK
(IL-8 e IP-10)
La modificación en el comportamiento de las células NK
está en la base de la tolerancia materno-fetal
TGF-β, IL-15, IL-18

Las uNK perdieron su
capacidad de matar y
producen sustancias
fundamentales para el
desarrollo del embarazo
Atención:
Ante un estímulo de
citoquinas Th1 (IL-2, INFɣ)
las uNK recuperan la
función de las NK de
sangre periférica y pueden
matar células
trofoblásticas
Jabrane-Ferrat, Front Immunol (2019)

Eduardo Osinaga
Relación immune
materno-fetal
2
¿Cómo se establece la tolerancia
inmune materno – fetal?
El embarazo normal depende del reconocimiento por
parte de la madre de los antígenos paternos y no del
ocultamiento de éstos al sistema inmune.
Participan diversos factores, destacándose:

➢ células dendríticas
➢ los linfocitos Treg
➢ células Natural Killer uterinas (uNK)
➢ las moléculas HLA-G
La respuesta inmune generada por la madre favorece la

progresión del embarazo (por ejemplo, uNK).
¿Por qué se forman las uNK?
El TGF-β (anti-inflamatorio) promueve la diferenciación de uNK
Kalkunte et al., Am. J. Reproduct. Immunol. 2008, 59:425–432

La progesterona induce la formación de uNK
Estrógenos
Dosiou and Giudice, Endocrine Reviews 2005, 26:44–62

La progesterona es indispensable para
la inmuno-tolerancia del embarazo
Progesterona Induce producción de:
- HLA-G
- Galectina-1
- LIF, M-CSF
Progesterone-induced blocking factor

(PIBF)
Glicodelina A
(GdA)
Aumenta uNK Aumenta Ac. asimétricos

Angiogénesis Enmascaran antígenos fetales
Inhibe la activación de LT DC tolerogénicas

Induce expresión de Fas en LT
¿La desregulación del sistema inmune podría estar en la base de
procesos abortivos y nacimientos prematuros?
La infección por algunos patógenos

(C. trachomatis, N. gonorrhoeae y T. vaginalis)
inducen respuestas Th1 con aumento de IFN-γ
TNFα
IL-1β
IL-8
La inducción del parto normal resulta de una

cascada de señales pro-inflamatorias
(“Inflamación estéril”)
Infección y embarazo
Existe fuerte asociación entre complicaciones en el embarazo e
infecciones intrauterinas.
Las infecciones están involucradas en:

- Hasta el 40% de los partos prematuros.
- Hasta el 80% de los nacidos antes de las 30 semanas de edad
gestacional.
- Desarrollo de pre-eclampsia y retardo en el crecimiento fetal.
El estado inmunosupresivo del embarazo podría facilitar nuevas

infecciones y la reactivación de virus latentes.
La respuesta inflamatoria a la infección puede generar

en la placenta activación del sistema inmune, con la
aparición de mediadores de pre-eclampsia, retardo en
el crecimiento fetal y parto prematuro.
Las citoquinas pro-inflamatorias
presentan redundancia funcional
El bloqueo de un único factor es insuficiente para prevenir
el parto prematuro en el contexto de una infección
➢ El parto prematuro puede ocurrir en ratones knockout para el

receptor de IL-1 luego del desarrollo de una infección.
➢ El bloqueo simultáneo de la producción de IL-1 y TNF-α (ratones

doble knockout) se asocia con menor frecuencia de partos prematuros
luego de una infección.
¿Papel de citoquinas anti-inflamatorias?

La IL-10 favorece el desarrollo del embarazo. Inhibe a Cox-2
Células del tracto genital y del trofoblasto también expresan TLR
Cuando los TLR2 del trofoblasto se

unen a una bacteria las células
pueden morir por apoptosis
Cuando los TLR4 del trofoblasto se
unen a LPS se induce la
producción de citoquinas
Ratones con TLR4 mutado son
menos susceptibles al desarrollo
de parto prematuro por LPS o Horne et al., Reproduction 2008
inoculación de bacterias muertas
La regulación de losTLR puede ser central
en la inducción de parto prematuro
TLR2.
Reconoce proteoglicanos de diversos patógenos humanos asociados
con aumento de la incidencia de parto prepaturo: Ureaplasma
ureaticulum, Streptococcus grupo B y Citomegalovirus (CMV).
TLR3.
Localizado en el interior de las células (endosomas), tiene
especificidad por motivos de RNA viral de doble hebra
(Coxsackievirus) y productos de necrosis celular.
TLR4.
Reconoce motivos lipopolisacarídicos (LPS) de bacterias gram
negativas, algunas de ellas asociadas con el parto prematuro
(Mycoplasma hominis y Trachtomonas vaginalis).
En modelos animales el LPS también
puede inducir parto prematuro
Pirianov et al., Endocrinology 150: 699–706, 2009

Es raro que microorganismos
patógenos por sí mismos
induzcan el parto prematuro.
En cambio, la respuesta
inmune inducida por estos
patógenos conduce a la
anormal evolución del
embarazo.
Pre-eclampsia
”enfermedad de las teorías”
➢ 2-7% de los embarazos
➢ A partir de las 20 semanas de gestación
➢ Afectación multisistémica caracterizada por

- Hipertensión
- Proteinuria
➢ Puede haber también afectación fetal

- Retardo en el crecimiento intrauterino
- Bajo peso al nacer
- Prematurez
En la pre-eclampsia se reduce la
invasión uterina por el trofoblasto
Patogénesis:
Diversos mecanismos
contribuyen a generar
disfunción placentaria
Factores liberados por la
placenta generan disfunción
endotelial, vasoconstricción y
activación de la coagulación
Murphy and Cockrell, Physiology (2009)

En la pre-eclampsia está
reducida la expresión de
HLA-G en el trofoblasto y
la función de las uNK
Embarazo normal
Inflamación
Angiogénesis
Preeclampsia
Desarrollo recíproco de linfocitos pTreg y Th17
en el embarazo normal y la pre-eclampsia
En la preeclampsia disminuye el estado de tolerancia
inmune que caracteriza al embarazo normal
citoquinas Th1 y Th17

Proinflamatorias
Predomina la actividad
Anti-inflamatoria
Perez-Sepulveda et al., Frontiers in Immunology (2014)
En la decidua hay dos tipos de macrófagos,
con funciones opuestas
M2 M1 M2 M1
En suma: la disfunción de uNK es un factor
importante en el desarrollo de la pre-eclampsia
Los genotipos KIR-AA en células NK

maternas HLA-C2 fetal y se asocian
con mayor riesgo de preeclampsia
Fukui et al., Am. J. Reproductive Immunology 67:278-286 (2012)

Embarazo como dilema inmunológico
El embarazo normal depende del reconocimiento por parte de la

madre de los antígenos paternos incorporados en el embrión/feto,
y no del ocultamiento de éstos al sistema inmune.
Se genera una tolerancia transitoria que utiliza muchos de los

mecanismos desarrollados para mantener la tolerancia periférica.
Se asocian numerosos factores, destacándose el papel del

trofoblasto, las moléculas HLA-G, los linfocitos Treg, células
dendríticas, uNK y la función inmunoreguladora de la progesterona.
La respuesta inmune generada por la madre frente a la herencia

paterna favorece la progresión del embarazo (por ejemplo, uNK).
Inmunidad y Mucosas
(Video 1)
CBCC6 2020
Departamento de Inmunobiología
Otto Pritsch - Setiembre de 2020
Diferentes tipos de mucosas presentes en el organismo
• Un adulto posee aproximadamente 400 m2 de superficie mucosa.

• Esta superficie está densamente poblada con microorganismos
comensales y también patógenos.
• Las mucosas disponen de mecanismos efectores de la inmunidad
innata y adaptativa diseñados para hacer frente a estos desafíos
Generalidades del Sistema Inmune Mucoso
1. El sistema inmune de las mucosas representa el

componente más complejo y numeroso a nivel celular de
todo el sistema inmune:
• Se enfrenta a un conjunto de antígenos y
microorganismos mayor al encontrado en otros sitios.
• Debe discriminar entre microorganismos patógenos,
la flora comensal y antígenos inócuos presentes en
las proteínas de la dieta.
2. En las mucosas existe una modulación fina de la

respuesta inmune que tiene como objetivos:
• Inducir tolerancia local frente a antígenos inócuos
• Generar una fuerte respuesta frente a
microorganismos patógenos
3. En las mucosas y ganglios linfáticos asociados a ellas

se concentran un gran porcentaje de los linfocitos
totales del organismo.
Muertes anuales a nivel mundial por infecciones de mucosas
Inf. respiratorias agudas (4 millones)
Diarreas (2.2 millones)
HIV/AIDS (2 millones)
Tuberculosis (1.5 millones)
Sarampión (400.000)
Tos convulsa (294.000)
Hepatitis B (103.000)
La mayoría de las enfermedades infecciosas afecta directamente

o son adquiridas a través de las mucosas gastrointestinales,
respiratorias y/o genitourinarias.
El sistema inmune mucoso del intestino es el más estudiado
El epitelio intestinal compuesto de una única capa de células epiteliales
separa el medio interno de la luz densamente poblada de microorganismos
Mecanismos que evitan el acceso de bacterias a la
superficie apical del epitelio
• Flora comensal (microbiota)
• Mucinas
• Péptidos antimicrobianos
• IgA secretoria
• Descamación epitelial
(1011células/día)
• Continuidad del epitelio

Flora comensal:
Actúa como barrera frente a los agentes infecciosos.
• Estrecha relación colaborativa a través de millones de años de coevolución.
• Empieza a adquirirse desde la etapa intra-uterina pero su gran desarrollo se

inicia luego del nacimiento y llega a densidades de 1012 bacterias/mL en el
colon con aprox. 1000 especies diferentes.
Flora comensal:
Principales Funciones.
• Un uso inadecuado de antibióticos puede afectar a la microbiota normal y
alterar la homeostasis intestinal generando complicaciones clínicas
Secreciones mucosas producidas por el epitelio.
• Secreciones mucosas: 10-700 μm.
• Mucinas de alto peso molecular

(MUC1 a MUC8).
• Producidas por células de Goblet
• Presentan permeabilidad selectiva
• Glucocálix (mucinas integradas a la

cara apical del epitelio + enzimas
degradativas)
1. Dificultan el acceso de patógenos a

la célula epitelial
2. Bloquea receptores expresados por
los patógenos
3. “Barre” el patógeno al exterior
Secreciones mucosas producidas por el epitelio.
Dificultan el acceso de patógenos a la célula epitelial

Estrategias de patógenos para evadir la barrera mucosa.
Péptidos antimicrobianos producidos por el epitelio.
1. Los enterocitos y las células de Paneth secretan constitutivamente
péptidos antimicrobianos que quedan embebidos en el mucus.
2. La unión de PAMPs a TLRs epiteliales incrementa notablemente su

producción.
3. Los péptidos antimicrobianos comprenden

• Defensinas
• Catelicidinas
Defensinas
Catelicidinas
Péptidos antimicrobianos producidos por el epitelio.
4. La lisozima es una enzima que hidroliza peptidoglicanos de la

pared celular bacteriana.
5. La lactoferrina se une al hierro privando a los

microorganismos del mismo; tiene también un efecto lítico
directo y activa a neutrófilos, macrófagos y células NK.
Continuidad del epitelio como barrera
Unión estrecha o zónula occludens

(ocludina y claudinas) responsables
de la polaridad del enterocito
Unión adherente o zónula

adherens (E-cadherina y b-
catenina)
Desmosoma o mácula adherens

(desmocolina y desmogleína)
• TNF- e IFN- “relajan” las uniones estrechas incrementando su permeabilidad.

• IL-10 y TGF- incrementan la resistencia al pasaje de macromoléculas.
Las células epiteliales se activan por contacto con
microorganismos a través de sus TLRs
El patrón de expresión de TLRs por el enterocito presenta
las siguientes características particulares:
• Es baja en condiciones basales (ausencia de infección)
• TNF- e IFN- aumentan expresión de TLR4
• IL-4 e IL-13 la disminuyen
• TLR3, 4 y 5 se expresan preferencialmente en la membrana
basolateral de los enterocitos
Mecanismos inmunitarios innatos que actúan cuando
patógenos llegan a las células epiteliales.
1. Frente a una agresión
infecciosa las células
epiteliales producen citoquinas
y quimioquinas:
• CXCL8 (IL-8): atrae neutrófilos

al sitio de infección
• IL-1 e IL-6: atraen leucocitos,

estimulan fagocitos, activan
mastocitos.
• GM-CSF: prolonga sobrevida de

neutrófilos, eosinófilos,
monocitos y macrófagos
• IL-7 e IL-15, promueve

supervivencia y funcionalidad de
células T presentes en mucosas.
Mecanismos inmunitarios innatos que actúan cuando
patógenos llegan a las células epiteliales.
Macrófagos localizados en
lamina propia en
condiciones de
homeostasis (perfil M2):
• alta capacidad fagocítica

y microbicida
• limitada capacidad de
producir citoquinas y
quimioquinas
inflamatorias
• alta capacidad de
producir factores de
crecimiento usados en la
reparación del epitelio
lesionado.
Células Linfoides Innatas (ILCs)
• Protección frente a patógenos y mantenimiento de la homeostasis.
• Activación inapropiada causa procesos inflamatorios y autoinmunes.
• Se agrupan en un linaje tipo citotóxico (cNK) y otro tipo helper (ILC1s,
ILC2s, ILC3s).
El sistema inmune mucoso del intestino es el más estudiado
Inmunidad y Mucosas
(Video 2)
CBCC6
Departamento de Inmunobiología
Otto Pritsch
Setiembre de 2020
Organización del Sistema Inmune adaptativo en las mucosas
El conjunto de linfocitos y estructuras linfoides en mucosas

recibe el nombre de MALT (Tejido Linfoide Asociado a las
Mucosas)
Comprende a:
• GALT: tejido linfoideo asociado al tracto gastrointestinal

• BALT: tejido linfoideo asociado al árbol bronquial
• NALT: tejido linfoideo asociado al tracto nasofaríngeo
• Tejidos linfoideos asociados a glándula mamaria
• Tejidos linfoideos asociados a glándulas salivares y lagrimales
• Tejidos linfoideos asociados a órganos génito-urinarios
• Tejidos linfoideos asociados al oído interno
Localización de las diferentes poblaciones celulares en los
GALTs
Sitios Inductivos y Efectores en el GALT
Sitios Inductivos: (estructuras donde los LT y B vírgenes se activan)
• Placas de Peyer
• Ganglios Mesentéricos
• Folículos linfoides aislados en la lámina propia
Sitios Efectores: (donde se ubican las células inmunes efectoras)

• Epitelio
• Lámina propia
Sitios Inductivos: placas de Peyer
Las Placas de Peyer son órganos linfoides secundarios que están cubiertas por
un Epitelio Asociado a Folículos (FAE) que contiene células especializadas (M)
Las células M cubren del 10 al 20% de la

superficie de los FAE y su principal función
consiste en la translocación de antígenos
desde la luz intestinal hacia la lámina propia
Las células M y su microentorno celular
Las células M tienen:
• Alta capacidad endocítica
• Escasa actividad degradativa en

el compartimiento endosómico
• Glucocálix escaso
• No expresan receptores de IgA

Estructura de las Placas de Peyer
Ingreso del Antígeno a los Sitios Inductivos y Efectores
Los antígenos pueden ingresar desde la luz intestinal a la lámina

propia por 3 mecanismos diferentes:
• A través de los enterocitos
• A través de las células M
• A través de prolongaciones de las células dendríticas
Ingreso de Microorganismos a través de las células M
• Algunos patógenos utilizan a las células M para establecer una

infección y diseminarse con rapidez
Las Células Dendríticas procesan y presentan los Ag a los
Linfocitos T vírgenes en el GALT
y determinan el perfil efector de las células T CD4+.
La activación de los LT vírgenes en el GALT induce patrones específicos
de migración (homing) caracterizado por la expresión de:
• integrina a4b7 (que une MadCam-1) y CCR9 (receptor de CCL25) lo cual

condiciona retorno a lámina propia de la mucosa intestinal
• Integrina aEb7 (se une a E-cadherina) lo cual condiciona unión a células

epiteliales (linfocitos intraepiteliales, LIE)
Las células dendríticas determinan el perfil de “homing” de
las células T efectoras
Activación de LT vírgenes en el GALT, su diferenciación y
adquisición de patrones de asentamiento diferenciales
Linfocitos Intraepiteliales (LIE): Propiedades funcionales
• Primera línea de defensa en el intestino

• Exhiben actividad citotóxica: destruyen células epiteliales
“estresadas” o dañadas, preservando la integridad del epitelio.
• Modulan la cinética de renovación de células epiteliales
• Secretan citoquinas antiinflamatorias que contribuyen al desarrollo
de mecanismos tolerogénicos
• Juegan un rol regulatorio en la tolerancia a antígenos dietarios
Fenotipo de los LIEs
Tipo a (“inducible”) expresa TCRab y CD8ab
Tipo b (“natural”) expresa TCRab o TCRgd, CD8aa y NKG2D

Las células dendríticas del GALT ponen en marcha
un conjunto de mecanismos tendientes controlar la
respuesta frente a microorganismos comensales y
antígenos dietarios
• inducen la deleción o inactivación

de células T contra estos
microorganismos y antígenos
• Producen citoquinas anti-
inflamatorias: IL-10 y TGF-β
• inducen la expansión de LTreg
naturales
• inducen la diferenciación de
células T CD4+ en LTreg
inducibles
Activación de LB vírgenes en el GALT
TGF-b
Cel. dendrítica
IgA
La activación del LB en el GALT lo condiciona a:

• Cambiar de clase preferencialmente a IgA
• Expresar moléculas de homing específicas para
mucosas
Expresión de integrinas y receptores de quimiocinas que
regulan el “homing” de los plasmoblastos
IgA
Propiedades de la IgA secretoria
Características relevantes de Mecanismos de protección por

la IgA secretoria IgA secretoria en las
mucosas
• Resistencia a proteasas • Neutraliza receptores virales
intestinales y bacterianos previniendo la
infección
• No es efectora de
inflamación • Neutraliza toxinas
• Inhibe la absorción de
• Una fracción significativa antígenos y alergenos
(20-40%) de la IgA
• Inhibe las acciones
secretoria en mucosas inflamatorias de anticuerpos
proviene de células B1 de IgG e IgM
peritoneo • cc >1mg/ml en secreciones
mucosas
Switch a IgA promovido por TGF-b, IL-5 e IL-10

Transporte de la IgA a través del epitelio
IgM
Enfermedad Celíaca
Enfermedad Celíaca
Enfermedad Celíaca
Eduardo Osinaga
Sistema immune
cutáneo
1
Características del Sistema Inmune Cutáneo (SIC)
La piel tiene una fisiología inmunológica particular que la distingue de

otros órganos por lo cual debe estudiarse por separado.
La extensión y la continua exposición hace que su inmunovigilancia tenga

características propias.
La desregulación del SIC en más o en menos lleva a una variedad de patologías.

Por ejemplo:
1- La piel es el sitio con mayor frecuencia de enfermedades inflamatorias mediadas
por linfocitos T.
2- La pérdida de tolerancia lleva al desarrollo de patologías autoinmunes como la
Psoriasis, Lupus Cutáneo.
3- La hiperreactividad hacia alergenos que deberían ser inocuos llevan a
reacciones alérgicas como la Dermatitis Atópica.
4- Existe un linfoma primario de piel originado de los LT CD4+.
Componentes de la barrera cutánea
Eyerich et al., Trends Immunol (2018)

Los queratinocitos son
activos protagonistas de las
respuestas inmunes de la piel
Klicznik et al., Immunol Lett (2018)

Los queratinocitos poseen características de
células de la inmunidad innata del SI cutáneo
➢ Participan en la Inmunidad Innata. Expresan TLR, NLR,

péptidos antimicrobianos.
➢ Producen numerosas citoquinas, quemoquinas y

péptidos antimicrobianos que pueden influir en el
desarrollo de reacciones inflamatorias.
➢ Rol como células presentadoras de antígenos no

profesionales.
Los queratinocitos detectan patógenos
▪ La expresión del TLR7 es inducida

por la activación del TLR3.
▪ La activación de los TLR lleva a la

producción de INF de tipo I (α y β),
y a una respuesta adaptativa tipo Th1.
▪ La activación de los TLR de

queratinocitos induce la producción
de péptidos antimicrobianos
Queratinocito
En los queratinocitos puede activarse el
inflamosoma
Inflamosoma
Los queratinocitos activados

pueden inducir y perpetuar una
respuesta inflamatoria en la piel
Los queratinocitos y péptidos antimicrobianos
➢ En la piel los Kc son una fuente importante de péptidos antimicrobianos.
➢ Actúan como ATB naturales, liberan citoquinas e inducen angiogénesis.
➢ Tienen una estructura con carga catiónica y AA hidrofóbicos que interactúan
con pared celular de microorganismos.
CATELICIDINAS (LL37):
▪ Efecto ATB amplio
Están aumentados en patologías de
▪ Quimiotáctico para neutrófilos,
piel como:
macrófagos, mastocitos y LT.
Psoriasis: su producciónes
DEFENSINAS: inducida por IL-17 e IL-22 .
Efecto ATB amplio
La a defensinas: Heridas: Kc que las rodean tienen
▪ aumentan liberación de IL1 y TNF aumentada la expresión de VitD3
por monocitos. hidroxilasa y de catelicidina.
Las b defensinas humanas:
▪ se une al CCR6 (Rp de La Vit D3 activa, actúa sobre Kc
quemoquina) estimulando la producción de
▪ + liberación de histamina y PGD2 péptidos antimicrobianos.
por mastocitos .
▪ Quimiotaxis de CD inmaduras y
LT memoria.
En los queratinocitos la vitamina D
induce la producción catelicidina LL-37
Antal et al., Dermato-Endocrinology (2011)

Citoquinas, quimioquinas y factores de crecimiento
producidos por los queratinocitos
➢ En piel sana los queratinocitos sintetizan Pro- IL1 α y β pero no la forma activa.
➢ La piel expuesta a RUV: expresa IL1 β por activación del inflamosoma.
Interacciones entre queratinocitos y linfocitos T
Citoquinas
efectoras de
linfocitos T
Activación
de los
queratinocitos
Respuesra
inflamatoria
Mastocitos
Censores de patógenos de la Inmunidad Innata
Mastocitos
Protagonistas de las respuestas inmunes cutáneas
Funciones proinflamatorias:
▪ Libera mediadores que reclutan otras células del SII (neutrófilos): papel esencial en
infecciones bacterianas.
▪ Promueve reclutamiento de LT por liberación de TNF.
▪ Promueve migración de CD a los ganglios linfáticos.
Funciones anti-inflamatorias:
▪ Mediado por liberación de IL10.
Ejemplos de enfermedades cutáneas que involucran la actividad de mastocitos:

▪ Su papel clásico es la Hipersensibilidad tipo I (urticaria).
▪ Son esenciales en las reacciones a venenos (ofidios, abejas) ya que, en vez de
agravar la reacción por la liberación de mediadores, su degranulación inactiva los
venenos peptídicos por las enzimas proteolíticas.
▪ Sus mediadores son importantes para la normal cicatrización.
Células dendríticas en el SIC
¿Cuál es el rol de las células de Langerhans?
West and Bennett, Front Immunol (2018)

Células Dendríticas de la piel
Reposo Inflamación
3 tipos de CD en la piel “en reposo” (sin inflamación):
mieloides
1- CD epidérmicas o Células de Langerhans
2- CD dérmicas
3- CD plasmocitoides
Durante la inflamación aparece un grupo adicional:

Células dendríticas inflamatorias
Se han descrito 2 tipos
• epidérmicas (IDECS) en la Dermatitis Atópica
• dérmicas (Tip) en la Psoriasis.
Las células mieloides de la piel
tienen actividad pro-inflamatorias
y anti-inflamatorias
Pasparakis et al.,
Nat Rev Immunol (2014)
Linfocitos en el Sistema Inmune Cutáneo
Activación de linfocitos T en la piel
• El 95% de los LT residentes de la piel son LT memoria (CD45RO+).
• Un 5% son LT naïve (CD45RA+).
• 5-10% de los linfocitos T residentes en la piel son Treg (Foxp3 +)
• Son CLA+. El 90% de los LT CLA+ esta en la piel, el 10% son

circulantes.
• Aproximadamente el 20% de los LT residentes, expresa también CCR7

y L-selectina, que les permite recircular hacia los ganglios linfáticos.
Los LT generados en una respuesta inmune primaria pueden persistir

por décadas, dando una rápida y especifica respuesta en caso de
segunda exposición (memoria).
Primera exposición al antígeno
Segunda exposición al antígeno
Protagonistas de la
respuesta inmune en la
piel en ausencia de
inflamación
Kupper and Fuhlbrigge, Nat Rev Immunol (2004)

Activación de la
respuesta inmune innata
en la piel

Activación de la
respuesta inmune
adaptativa en la piel

Desarrollo de la inmunidad adaptativa según la inmunidad innata
Duhen T et al., Nature Immunology 2009 10:857-863
IL-22:
➢ No participa en la comunicación entre células linfoides.
➢ Actúa principalmente sobre epitelios y hepatocitos.
➢ Defensa anti-microbiana, proteínas de fase aguda y regeneración tisular
Regulación de la respuesta inmune cutánea por microorganismos
Animales sin gérmenes no desarrollan

respuesta T contra L. major, pero se recuperan
con la colonización microbiana de la piel Pasparakis et al, Nat Rev Immunol (2014)
Linfocitos efectores y su relación con enfermedades cutáneas
Vesely, Yale J Biol Med (2020)

Eduardo Osinaga
Sistema immune
cutáneo
2
Características de la psoriasis
➢ Es una de las dermatosis más prevalente en adultos.
➢ Múltiples formas clínicas.
➢ Amplio espectro. Desde formas leves y localizadas hasta
formas generalizadas que comprometen la vida.
➢ Autoinmune órgano específico.
➢ Susceptibilidad genética. 60% son HLA C 06: 02
➢ Alteraciones en la barrera cutánea.
➢ Rol de células dendríticas y linfocitos T en la activación del
sistema inmune produciendo las lesiones.
➢ La piel funcionaría como un tejido linfoide organizado,
perpetuando la enfermedad.
La mayoría de las
variantes de psoriasis
comparten tres
características clínicas:
eritema, engrosamiento y
descamación de la piel
Inmunopatogenia de la Psoriasis
Principales blancos
terapéuticos
Familia de citoquinas de IL-1 (IL-1F)
Fahey and Doyle, Front Immunol (2019)

Psoriasis pustulosa y lesiones ictiosiformes: deficiencia
en IL-1 Ra que causa autoinflamación potencialmente mortal.
Los queratinocitos en el inicio, mantenimiento
y recaída de la psoriasis
Ni and Lai, J Leukocyte Biol (2020)

Dermatitis Atópica
(eccema atópico)
➢ Se caracteriza clínicamente por piel eccematosa
pruriginosa crónica lesiones y se acompaña de
concentraciones séricas elevadas de inmunoglobulina E
➢ Más frecuente en niños. En 60% de los casos se inicia

antes del primer año. Hay un segundo pico de incidencia
en la tercera década.
➢ Intervienen factores ambientales y constitucionales.
➢ Frecuentemente hay antecedentes de condiciones

alérgicas (asma).
➢ En la piel se presenta una reacción por hipersensibilidad

(similar a la alergia), la cual produce una inflamación
crónica que ocasiona picazón y descamación.
Inmunopatogenia de la Dermatitis Atópica
Dermatitis Atópica:
diferencias entre la etapa aguda y la crónica
Resultados de los ensayos

clínicos de un anticuerpo
contra la IL-22 en la DA
sugieren que la IL-22 tiene un
papel patogénico en casos
severos de DA
Biedermannet et al., Front Immunol (2015)

Circuito vicioso en la inmunopatogenia
de la Dermatitis Atópica
Wollenberg and Feichtner, Allergy (2014)

Características de la Lepra
Enfermedad infecciosa crónica causada por el bacilo Mycobacterium leprae.
Afecta principalmente la piel, los nervios periféricos, la mucosa de las vías

respiratorias altas y los ojos.
Existen dos formas clínicas principales:
Lepra tuberculoide: existe fuerte reacción Lepra lepromatosa: existe importante alteración
celular pero baja humoral. Los tejidos de la inmunidad celular, con buena producción de
infectados típicamente tienen muchos anticuerpos. La evolución es progresiva y maligna.
linfocitos y granulomas, pero relativamente Abundantes bacilos ácido-alcohol resistentes en
pocas bacterias. las lesiones cutáneas.
Lepra:
relevancia clínica de la activación Th1 vs Th2
La infección con Mycobacterium leprae muestra dos formas clínicas
principales asociadas a respuestas Th1 y Th2
Lepra tuberculoide Lepra lepromatosa
Baja infectividad Alta infectividad

Infección localizada Infección diseminada
Nivel normal de Ig en suero Nivel alto de Ig en suero
Respuestas normales de LT Respuestas LT muy bajas
OK
Th1 Th2 OK
Bajo crecimiento de bacterias en Amplio crecimiento de bacterias

macrófagos en macrófagos
Las manifestaciones clínicas de la lepra se relacionan con
la respuesta inmune que se desarrolla frente a M. leprae.
¿Existen fármacos para tratamientos basados en la
inmunopatogenia de estas enfermedades?
➢ Inhibición de TNF
▪ Anticuerpos anti-TNF
▪ Receptor soluble de TNF
➢ Bloqueo de moléculas
coestimuladoras
➢ Inhibición de moléculas
de adhesión
▪ LFA-1
▪ CD2
➢ Bloqueo de activación por
IL-2
Estrategias para el tratamiento de enfermedades autoinmune cutáneas
Psoriasis Penfigus vulgaris

Dermatitis atópíca
Lupus cutáneo
Alopecía areata Psoriasis

Dermatitis atópíca
Vitiligo
Vesely, Yale J Biol Med (2020)

Armstrong and Read, JAMA (2020)
Kim and Krueger, Annu Rev Med (2017)
IL-12 vs IL- 23: semejanzas y diferencias estructurales
La IL-23 regula la diferenciación
hacia Th17 patogénicos
Zúñiga et al., Immunol. Rev. (2013)

Anticuerpo anti-subunidad p40 de IL-12 e IL-23
(Ustekinumab) como agente anti-inflamatorio
 Ustekinumab (Stelara ®): anticuerpo

monoclonal anti subunidad p40 de IL12-IL
23 → podría disminuir el n° de:
 Th17 en DA aguda y
 Th1 y T22 en la crónica
Drogas aprobadas o emergentes para el
tratamiento de la psoriasis
Johnson-Huang et al., Disease Models Mechanisms 2013

El dupilumab es un anticuerpo monoclonal humano
contra la subunidad α del receptor de IL-4.
Bloquea la señalización tanto de la IL-4 como de la IL-13
El bloqueo del IL-4Rα

genera una mejoría muy
superior a inhibidores
de IL-5 y de IgE
IMIQUIMOD (imidoazoquinoline) es un agonista sintético de TLR-7,
aprobado para el tratamiento de algunas enfermedades dermatológicas
Condilomas Acuminados
Carcinoma basocelular superficial
Queratosis actínica
La activación de TLR-7/TLR-8
conduce a la síntesis de
citoquinas y quimioquinas
pro-inflamatorias, así como
de IFN de tipo I (α y β)
El IMIQUIMOD activa diferentes tipos celulares
Taller: comparación entre psoriasis y dermatitis atópica
Respuesta Dept. de Inmunobiología

Eduardo Osinaga
inmune y
cáncer
HISTORIA NATURAL DEL CÁNCER
Células Células Cáncer Cáncer
normales anormales “in situ” invasivo
Vaso linfático
Vaso sanguíneo
Cáncer primario
Invasión
local
Angiogénesis
Heterogeneidad
celular tumoral Vaso linfático
Metástasis
Vaso sanguíneo
Cáncer:
enfermedad de etiopatogenia molecular
Blancos moleculares en cáncer:
Oportunidad para el desarrollo de nuevos tratamientos
Hanahan and Weinberg, Cell 2011

¿Los tumores poseen antígenos capaces de activar
al sistema inmune?
Inmunovigilancia:
Pequeñas cantidades de células cancerosas, mediante sus nuevos
antígenos, inducirían respuestas inmunes que eliminan a un
tumor sin evidencia clínica.
¿Qué evidencias apoyan su existencia?

Existen antígenos que
inducen el rechazo de
tumores mediante
inmunización activa
J. Natl. Cancer Inst. 18:769 (1957)

¿Cuáles son los principales
mecanismos efectores
anti-tumorales?
Ciclo de la Inmunología del cáncer
Chen and Mellman, Immunity 2013

Respuestas inmunes Inmunosupresión
anti-tumorales intra-tumoral
Microambiente tumoral e inmuno-evasion
Tang et al., Int Immunopharmacol (2020)

El melanoma puede contener muchos linfocitos Treg
Jacobs et al., Lancet Oncol (2012)

Plasticidad de los protagonistas de la respuesta inmune
Célula Actividad Actividad
efectora supresora
Linfocito T CD4 Th1, Th2, Th17 Treg
Th17 Treg
Linfocito T CD8 Citotóxico Regulador
Célula Dendrítica Inmunogénica Tolerógenica
Macrófago M1 M2
Natural killer Citotóxica Angiogénica
(uNK)
¿Cómo se regula la
actividad
“contra el tumor” o a
Th1 Th2
“favor del tumor”?
Diferenciación hacia Th17 o Treg
Zúñiga et al., Immunol. Rev. (2013)

Interconversión Th17 / Treg en tumores
Ye et al., Am. J. Pathol. (2013)

Cambios en los macrófagos
Macrophages durante
activation la progresión
switch duringtumoral
the
Porta et al., Immunobiology (2009)

Los leucocitos en un tumor pueden significar tanto protección
para el huésped como más posibilidades de diseminación…
Becht et al., Cancer Immunol Immunother (2014)

Las células tumorales inducen la formación de
estructuras linfoides terciarias
que ayudan a evadir la respuesta inmune
Neagu, Adv. Clin. Chem (2012)
¿Podría existir correlación entre la evolución clínica y el tipo

de células inmunes que infiltran un tumor?
Relación entre subpoblaciones de linfocitos T
y pronóstico de pacientes con cáncer
124 artículos
20 tipos de cáncer
Fridman et al., Nature Rev Cancer (2012)

Intenso Mediano Débil
Linfocitos T efectores memoria (CD45RO+) se asocian
con mejor pronóstico en cáncer de colon
Pages et al., New Engl J Med (2005)

La evaluación combinada de linfocitos T efectores memoria y
citotóxicos predicen mejor la evolución clínica en cáncer
Pacientes con cáncer de colon estadio I/II
Pages et al., J Clin Oncol (2009)

El desarrollo de inmunoterapia anti-tumoral requiere
de un profundo conocimiento de las interacciones
entre los diferentes “jugadores” del sistema inmune
Inmunoterapia Dept. de Inmunobiología
Eduardo Osinaga
del cancer:
• Células CAR-T
• Neoantígenos
Estrategias de inmunoterapia anti-tumoral
Poorebrahim et al., Crit Rev Clin Lab Sci (2019)

La activación de un linfocito B sólo
requiere de la presencia del antígeno
La activación de un linfocito T requiere de péptidos
asociados a MHC de células presentadoras del antígeno
Limitantes para la respuesta

anti-tumoral de los linfocitos T:
LT CD4+
➢ Sólo reconocen antígenos
peptídicos
➢ Los tumores pueden evadir el

reconocimiento disminuyendo
la moléculas MHC de clase I
LT CD8+
¿Cómo lograr que un linfocito T se active reconociendo
al antígeno como lo hace un linfocito B?
Receptores CAR (Chimeric Antigen Receptors)
Gill and June, Immunological Reviews (2015)

Diferencias en la activación entre un linfocito T y un CAR-T
Poorebrahim et al., Crit Rev Clin Lab Sci (2019)

Evolución en el diseño de células CAR-T
Hartmann et al., EMBO Molecular Medicine (2017)

De la producción de linfocitos CAR-T a la muerte de células tumorales
Fun et al., J. Hematol. Oncol. (2017)

¿Ventajas de los linfocitos CAR-T
para el tratamiento del cáncer?
➢ Reconocimiento del antígeno de forma HLA-

independiente, sin necesidad de procesamiento
➢ Además de antígenos peptídicos se reconocen
carbohidratos y glicolípidos
➢ Se activa tanto a los linfocitos CD4+ como a los CD8+
➢ Se generan rápidamente linfocitos T específicos de
tumores
➢ Pueden diferenciarse en linfocitos memoria
➢ Bajo riesgo de autoinmunidad y de enfermedad injerto
contra huésped (GvHD)
➢ Una ¨droga viva¨ a partir de una única administración
Procedimiento para el tratamiento con células CAR-T
https://www.creative-biolabs.com/car-t/ind-development-for-car-t-cell-therapy.htm
Logros en la ruta hacia la incorporación de los CAR-T en la clínica
En Agosto de 2017 la FDA aprobó al CAR-T Tisagenlecleucel (Kymriah, Novartis Pharmaceuticals Corp.)
para el tratamiento de niños y adultos jóvenes con leucemia linfoblástica aguda.
En Octubre de 2017, la FDA aprobó al CAR T Axicabtagene ciloleucel (Yescarta, Kite Pharma, Inc.) para
el tratamiento de ciertos tipos de linfomas de células B en adultos.
Jackson et al., Nature Rev. Clin. Oncol. (2016)
Los buenos resultados con células CAR-T
no se han observado en tumores sólidos
¿Por qué los linfocitos CAR-T tienen poco éxito contra tumores sólidos?
Ausencia de un
blanco antigénico
ideal
Mirzaei et al., Front Immunol (2017)

Desarrollo de células CAR-T de 4º generación
Hartmann et al.,
EMBO Mol Med (2017)
Linfocitos CAR-T ¨blindados¨
Sermer and Brentjens, Hematol. Oncol. (2019)

¿Qué problemas pueden observarse en la
utilización de linfocitos CAR-T ?
Shah and Fry, Nat Rev Clin Oncol (2019)

Los macrófagos juegan un rol clave en el desarrollo del Síndrome de
Liberación de Citoquinas (CRS) y la neurotoxicidad por células CAR-T
Rooney and Sauer, Nat Med (2018)

¿Neoantígenos tumorales?
También conocidos como ¨tumor-specific

antigens¨ (TSA), es el repertorio de péptidos
que las células tumorales expresan en su
superficie asociados a MHC y son reconocidos
por los TCR de los linfocitos T.
Desde una perspectiva inmunológica un

neoantígeno tumoral es una proteína extraña
al organismo, completamente ausente en los
tejidos normales.
¿Cómo se realiza su identificación?

Ventajas de los neoantígenos tumorales
➢ Pueden inducir respuestas inmunes contra epítopes

estrictamente tumor-específicos.
➢ Inducen la activación de linfocitos T contra el tumor
➢ Son la base del desarrollo de ¨vacunas personalizadas¨
➢ Menor posibilidad de inducir autoinmunidad
➢ Pueden potenciar a otras inmunoterapias (inhibidores de

checkpoints)
Historia vinculada con los neoantígenos tumorales
Jiang et al. J. Hematology & Oncology (2019)

Identificación de neoantígenos
en tumores murinos utilizando NGS
Antitumoral effects of mutated peptide vaccines in mice with
aggressively growing B16F10 tumors.
La tecnología de NGS pasó a ser ampliamente utilizada para
explorar la existencia de neoantígenos reconocidos por
linfocitos T en pacientes con cáncer
Nuevos aportes para el desarrollo de
inmunoterapias del cáncer basadas en linfocitos T
Durgeau et al., Front Immunol (2018)

Neoantígenos y desarrollo de estrategias de
inmunoterapia del cáncer
Schumacher and Schreiber, Science (2015)

Aparecen nuevos dilemas…
¿Inmunoterapia en cáncer? Si
¿Cuál? ¿A quién?
Hacia la personalización de la
inmunoterapia del cáncer…
¿Inmunoterapia?
¿Quiénes se benefician?
¿Cuándo?
¿Cómo?
Sathyanarayanan and Neelapu, Mol Oncol (2015)
Inmunoterapia Unidad Curricular “Hematología e Inmunología”
del cancer: Eduardo Osinaga
Inhibidores de
puntos de
control
Estrategias de
inmunoterapia
anti-tumoral Galluzzi et al.
Oncotarget (2014)
Vacunas anti-tumorales:
larga historia con muy poco impacto clínico
Vacunas contra el cancer aprobadas por la FDA

(U.S. Fod and Drug Administration):
1) BCG (Mycobacterium bovis atenuados, TheraCys), intravesical para

tratamiento y profilaxis de recurrencias en cancer de vejiga no-
músculo invasive.
2) Sipuleucel-T (Provenge®), vacuna de células dendríticas para pacientes
con cancer de próstata metastásico resistentes a la castración.
3) Talimogene laherparepvec (T-VEC or Imlygic®), vacuna basada en virus
oncolíticos para tratamiento de pacientes con melanoma avanzado
Sólo tres, luego de muchas décadas de investigación!!!

… hasta que hace 10 años
la historia comenzó a cambiar…
p<0.001
Ipilimumab
Ipilimumab + gp100
gp100
¡Luego de más de 100 años de investigaciones,
la inmunoterapia del cáncer muestra utilidad clínica!
¿Qué cambió? La estrategia!!

“Inhibir al inhibidor”
Melanoma 4 metástasis cerebrales Anti-PD1 Remisión completa
Activación y regulación de linfocitos T
Waldman et al., Nat Rev Immunol (2020)

Mecanismo de acción
del anti-CTLA4
Prolonga la actividad
de los linfocitos T
Depleta Tregs intratumorales
Aumenta relación CD8+/Treg
En modelos, sin efecto en

animales con melanoma….
Las células tumorales PD-L1+ inhiben la
función de linfocitos T del microambiente
INHIBICIÓN
Mecanismo de inhibición del eje PD1/PD-L1

Respuesta anti-tumoral por regulación de check-points
Alto Menor
riesgo de autoinmunidad riesgo de autoinmunidad
Qin et al., Am J Transl Res 2018

¿Inmunoterapia
sin antígenos?
¿Qué papel cumplen los
antígenos tumorales en la
inmunoterapia mediada
por los inhibidores de
checkpoints?
Se desencadenan respuestas
inmunes pre-existentes
que están en estado latente
Frecuencia de mutaciones
somáticas observadas en
3.083 tumores
MELANOMA
Lawrence et al., Nature (2013)
Pero….las respuestas clínicas efectivas sólo se
observan en 10-50% de los pacientes
Es indispensable acceder a biomarcadores predictivos

de respuesta a inhibidores de checkpoints
Anticuerpos anti-PD-L1!!!!....
La cantidad de linfocitos T CD8 activados
es un biomarcarcador importante
Sobrevida de los subgrupos de pacientes según
la expresión de interferón-γ a nivel tumoral
Fehrenbacher et al., Lancet (2016)

Inmunoterapia con anticuerpos anti-PD-1/PD-L1
Biomarcadores de respuesta
Qin et al., Am J Transl Res 2018

Impacto del tratamiento previo con antibióticos en pacientes con
cáncer de pulmón o renal que recibieron anticuerpos PD-1/PD-L1
Routy et al., Science (2018)

El análisis metagenómico de materias fecales predice la respuesta
a los 3 meses en pacientes tratados con anticuerpos anti PD-1
El comensal asociado más significativamente con buena evolución
de pacientes con NSCLC y RCC fue Akkermansia muciniphila

Importancia de la bacteria comensal Akkermansia muciniphila
en el tratamiento anti-tumoral de bloqueo PD-1

Evasión de la respuesta inmune y resistencia a los
tratamientos con anticuerpos anti-puntos de control
Pacientes con resistencia primaria.

Otros la pueden adquirir
Spranger and Gajewski,

Annu Rev Cancer Biol (2018)
La señalización por la vía WNT/β-catenina en melanoma
puede mediar inmunoevasión y resistencia a la inmunoterapia
¿Útil para inmunoterapia

personalizada a
determinados pacientes?
Spranger et al., Nature (2015)

¿La asociación con otros tratamientos podría aumentar
la actividad anti-tumoral de anti-PD1/PD-L1?
Chen and Mellman, Immunity (2013)

La radioterapia puede convertir al
microambiente tumoral en una “vacuna in situ”
Inducción de inmunogenicidad donde previamente no existía
Demaria and Fromenti, Front Oncology (2012)

Muerte celular inmunogénica por drogas anti-tumorales
Emens and Middleton, Cancer Immunol Res (2015)

Mejores posibilidades en inmunoterapia del cáncer…
INMUNOTERAPIA CONTRA EL CÁNCER CON ANTICUERPOS
MONOCLONALES
Fisiología hematológica e Inmunología Básica y Aplicada, CBCC6
Depto. Inmunobiología, Facultad de Medicina
Teresa Freire
INMUNOTERAPIA CONTRA EL CÁNCER CON ANTICUERPOS
MONOCLONALES
Teresa Freire
Conceptos a tratar en este video
1) Anticuerpos monoclonales para terapia contra el

cáncer
2) Anticuerpos monoclonales de bloqueo de puntos de
control
3) Anticuerpos biespecíficos
4) Linfocitos CAR T
En las ultimas décadas el paradigma del
tratamiento del cáncer evolucionó:
Tratamientos Terapias
TERAPIAS
DIRIGIDAS selectivas
QUIMIOTE citotóxicos
-RAPIA relativamente
E basadas en
INMUNOTE
inespecíficos RAPIA mecanismos
biológicos
Blancos moleculares en cáncer:
Oportunidad para el desarrollo de nuevos tratamientos
Hanahan and Weinberg, Cell 2011

Actividad anti-tumoral de anticuerpos de uso clínico
Marabelle and Gray

Pediatr Blood Cancer (2015)
¿Como funcionan…?
ADCC
(a) AcMo une su Ag y su porción Fc es reconocida por el receptor Fc de una célula NK. Cross-linking del
receptor libera perforinas y granzimas destinadas a lisar la celula tumoral.
(b) Partes de la célula lisada son tomadas por células presentadoras de Ag
(c) Se activan linfocitos B (producción de más Acs) y T citotóxicas Adams et al. NATURE
BIOTECHNOLOGY 2005
slg
CD52 CD20 Epratuzumab (anti-CD22) for
CD23 aggressive non-Hodgkin's lymphoma
HLA-DR
Apolizumab (anti HLA) B-cell

lymphomas and chronic lymphocytic
CD22 leukemia (CLL)
Campath (alemtuzumab), lymphomas

B lymphocyte and leukemias
Rituximab (antiCD20) Chimeric IgG1

monclonal antibody for B-cell
lymphomas and leukemias
Lumiliximab (anti-CD23) chimeric

Adapted from Press O, et al. macaque monoclonal antibody for
Cancer J Sci Am. 1998 CLL
Beneficio terapéutico del Rituxmab (anti-CD-20)
en pacientes con Leucemia Linfoide Crónica
1.0
1.0 MabThera-FC
87.2% 0.8
Progression-free rate
MabThera-FC
Cumulative survival
0.8
51.8 meses
0.6
0.6
FC 0.4
0.4 82.5%
0.2
FC
0.2
p = 0.012 p < 0.001 32.8 meses
0.0 0.0
1 2 3 4 5 0 1 2 3 4 5
0
Time (years) Time (years)
Una parte sustancial del efecto anti-tumoral es mediado

por mecanismos de la vía del complemento y/o ADCC
Hallek et al. Blood 2009 114: Abstract 535.

 GA101
 Anticuerpo anti CD-20 humanizado con modificaciones en la glicosilación
de la región Fc
 Presenta mayor afinidad por el receptor Fc gamma RIII
 Resulta en un incremento de 100 veces en su actividad ADCC
 Finalizaron los estudios en fase III y se lanzo al mercado en 2013
 Ocrelizumab y AME-133v :
 Anticuerpo anti-CD20 humanizado con modificaciones en el Fc
 Logra una alta afinidad por el receptor Fc gamma RIII
 Mejor tolerado a dosis altas (> 750 mg/m2)
Significado de la sobre-expresión de Her2
en cáncer de mama
Tumor más Respuesta

agresivo al Herceptin
Marcador pronóstico Marcador predictivo
Biomarcadores de “blancos moleculares”:
aporte a tratamientos más personalizados
Aporte de biomarcadores a una mejor relación
Beneficio/Toxicidad en tratamientos oncológicos
Walgren et al, JCO

2005
Mejores resultados al asociar al
Trastuzumab con una toxina (Emtansina)
Preferente localización tumoral de drogas citotóxicas
transportadas por inmuno-nanopartículas
Con diferentes
anticuerpos
podemos
desarrollar
estrategias de
utilidad para
distintas drogas
y tumores
Nuevos usos
para viejas drogas
Premio Nobel 2018 en Fisiología/Medicina
James P. Allison Tasuku Honjo
Inmunoterapia oncológica a través del bloqueo de

puntos de control inmunológicos
Los leucocitos en un tumor pueden significar tanto protección
para el huésped como más posibilidades de diseminación…
Becht et al., Cancer Immunol Immunother (2014)

En la sinapsis inmunológica se localizan moléculas
activadoras e inhibidoras
APC Linfocito T
Las interacciones entre B7-CD28 y B7-CTLA4
regulan la activación y la inhibición del linfocito T
Ipilimumab
Ipilimumab
Buchbinder and McDermott, Clin Ther (2015)

Las interacciones entre B7-CD28 y B7-CTLA4
regulan la activación y la inhibición del linfocito T
Ipilimumab
Ipilimumab
Se desencadenan respuestas
inmunes pre-existentes
Buchbinder and McDermott, Clin Ther (2015)
que están en estado latente
Ipilimumab
doble mecanismo de actividad anti-tumoral
Las células tumorales PD-L1+ inhiben la
función de linfocitos T del microambiente
Ipilimumab:anti-CTLA4
Nivolumab: anti-PD1
Ipilimumab:anti-CTLA4
Anticuerpo biespecífico blinatumomab aprobado
para tratamiento en leucemia linfoide aguda
Linf T
Actividad
Anti-CD3 citotóxica
Anti-CD19 Antígeno blanco

CD19
Célula
tumoral
Chimeric antigen receptor (CAR) T cells
Tres generaciones en
el desarrollo de
receptores CAR
El tratamiento con linfocitos CAR es similar al
procedimiento de trasplante de médula autólogo
Maus and June, Clin. Cancer Res. (2016)

Mayores opciones para inmunoterapia anti-tumoral
APLICACIÓN DEL CONOCIMIENTO
MOLECULAR A NIVEL ASISTENCIAL
GENES PACIENTE
PROTEÍNAS MÉDICO
Anticuerpos monoclonales
ANTÍGENOS TRATAMIENTO
Clonado de genes
Amplificación génica (PCR)
ELISA – RIA
Imagenología molecular
………………..
MEDICINA MEDICINA
MOLECULAR CLÍNICA
INMUNOTERAPIA DE PATOLOGÍAS INFLAMATORIAS Y AUTOINMUNES
CON ANTICUERPOS MONOCLONALES
Teresa Freire
Kim and Kim, Biomol Ther (2015)

INMUNOTERAPIA DE PATOLOGÍAS INFLAMATORIAS Y AUTOINMUNES
CON ANTICUERPOS MONOCLONALES
Teresa Freire
1) Mecanismos de acción de anticuerpos terapéuticos

2) Anticuerpos terapéuticos más utilizados contra
patologías inflamatorias o autoinmunes
3) Fortalezas y limitaciones de los anticuerpos
terapéuticos
Innate immune Adaptive immune
responses responses
Mecanismos de acción de los anticuerpos
monoclonales terapéuticos
Bloqueo de citoquinas o factores de crecimiento
Previenen que los ligandos se unan a sus receptores
Infliximab 1998 Enfermedad de Crohn: anticuerpo quimérico anti-TNFa

Bloqueo de receptor o modulación del receptor
Previenen que los receptores unan sus ligandos
anticuerpo anti-IL6
Bloqueo de receptor o modulación del receptor
El anticuerpo induce la internalización del receptor por

lo que disminuye su expresión en la superficie celular
Anticuerpos que inducen depleción
Depleción de la célula por opsonización o lisis mediada

por complemento
Anticuerpos que inducen señalización
Altera la diferenciación o la función de la célula

Anticuerpos Terapéuticos utilizados en
patologías autoinmunes o inflamatorias
MAb Tipo Especificidad Enfermedad Autoinmune o

Inflamatoria
Adalimumab Humano TNFa Artritis reumatoidea
Infliximab Quimérico Artritis psoriática
Certolizumab Humanizado Espondilitis anquilosante
pegol Enfermedad de Crohn
Psoriasis
Colitis Ulcerosa
Epratuzumab Humanizado CD22 Lupus (SLE)
Rituximab Quimérico CD20 Artritis reumatoidea
Tocilizumab Humanizado IL-6R Artritis reumatoidea
Basiliximab IL-2 Prevención del rechazo de

Daclizumab trasplante de riñón
Anticuerpos Terapéuticos
Fortalezas Limitaciones
Tecnologías disponibles para la Muy caros
generación y optimización de la
producción
Éxito alto comparado con otras Aplicación limitada a
drogas: 17% para los anticuerpos moléculas membranarias o
humanizados en el primer ensayo extracelulares
clínico
Baja toxicidad No se pueden administrar de
forma oral
Tecnologías disponibles para el Penetración limitada al SNC
mejoramiento del efecto biológico (barrera hematoencefálica)
APLICACIÓN MÉDICA DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES
Teresa Freire
APLICACIÓN MÉDICA DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES
Fisiología hematológica e Inmunología Básica y Aplicada, CBCC6 2020
Teresa Freire
1) Anticuerpos monoclonales
2) Generación de anticuerpos monoclonales
3) Aplicación médica: características de los
anticuerpos monoclonales
4) Terapia
5) Diagnóstico
Los anticuerpos son moléculas bifuncionales
Premio Nobel 2018 en Fisiología/Medicina
James P. Allison Tasuku Honjo
Inmunoterapia oncológica a través del bloqueo de

puntos de control inmunológicos
UN POCO DE HISTORIA:
Los Anticuerpos Monoclonales
¿Cómo surge la idea de obtener anticuerpos
monoclonales?
“Imaginemos una gran mezcla de sustancias químicas entre las cuales

nos interesa sólo una de ellas. Una sustancia entre millones y millones.
Esta sustancia es el Antígeno, es la aguja en el pajar. Si logramos
obtener un Anticuerpo que solo reconozca a ese Antígeno, dicho
Anticuerpo puede funcionar como un imán capaz de ignorar la existencia
del pajar y reconocer exclusivamente la aguja”
César Milstein, Conferencia “Los Anticuerpos Monoclonales”

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Buenos Aires, 1999
Reconocimiento de un epítope específico
Epítope
Cadena Cadena
pesada liviana
Problemas a resolver…
Policlonalidad  Monoclonalidad
Mortalidad  Inmortalidad
Problemas a resolver…
Policlonalidad  Monoclonalidad
Mortalidad  Inmortalidad
Hibridomas: la clave para producir anticuerpos monoclonales
Fusión celular
Fusionar una célula “inmortal” con el

linfocito B aislado productor de un anticuerpo
que reconoce un único epítope
La fusión de las membranas permite la

obtención de una célula con dos núcleos.
Cuando se produce la mitosis algunas de las
células hijas van a heredar los cromosomas de
ambos padres, estos son los hibridomas
Estrategia:
Células de mieloma.
Una célula B puede convertirse en
tumoral, cuando esto ocurre la
proliferación en cultivo puede
mantenerse casi indefinidamente
Köhler y Milstein aprovechan esta

característica para inmortalizar a la
célula productora de Ac fusionándola
con células de un mieloma.
Se combina el potencial de
crecimiento ilimitado con la
producción de anticuerpos específicos.
Esta técnica se conoce con el nombre

de hibridización de células
somáticas que da lugar a
Anticuerpos un hibridoma.
Anticuerpos Monoclonales
Policlonales
1) Reconocimiento altamente específico y de gran sensibilidad,
permitiendo el nacimiento del inmunoensayo
2) Pensar en dirigir estos anticuerpos hacia una célula maligna pensando

en su identificación y/o muerte específica: diagnóstico y/o terapia anti-
tumoral
3) Pensar en dirigir los AcMo para bloquear receptores que inhiban o

activen una señalización en la célula blanco: terapia en general
Diagnóstico Terapia
Conjugados a radioisotopos y o fluoróforos Conjugados a toxinas para activar una

para identificar a la célula de interés, respuesta citotóxica, mejorados para
mejorados para aumentar su vida media en aumentar la penetración tumoral o unir al
sangre o aumentar la sensibilidad de la Ag con más avidez
detección tumoral
Anti-CD3: Producido mediante la técnica del hibridoma fue
aprobado por la FDA en 1986 para el tratamiento del rechazo
del transplante de riñón.
Sin embargo, su uso clínico fue limitado a causa de una corta vida
media en sangre, un ineficiente reclutamiento de funciones
efectoras, además de problemas inmunológicos.
Problemas a resolver:
(HAMA response "human antimouse
monoclonal antibody")
Origen murino
Poca respuesta efectora (ADCC antibody-

dependent cell cytotoxity)
Tener los conocimientos para generar por ingeniería genética AcMo
quiméricos y humanizados capaces de mantener la especificidad por
su blanco diagnóstico y/o terapéutico.
Tamaño & Valencia
Clearence sanguíneo:
Tiempo en que el Ac permanece en la sangre
Retención Tumoral:
tiempo en el que el Ac queda retenido en el tumor (afinidad / avidez)
Penetración tumoral:
Facilidad con la que el Ac entra al tumor
scFv Diabody Minibody scFV-Fc Antibody
Retención
tumoral
Clearence
Penetración
tumoral
Penetración
tumoral
scFv Diabody Minibody scFV-Fc Antibody
DIAGNÓSTICO TERAPIA
Criterios de utilidad para imagenología in-vivo
 Unir su Ag con alta especificidad y afinidad
 Optimo “clearence” sanguíneo para obtener alto

contraste en corto tiempo
Tag-72 (OncoScint1) Carcinoma de colon
EGP-1 (Verluma1) Carcinoma de pulmon
CEA (CEA-Scan1) Cáncer colorrectal
PSMA (ProstaS-cint1) Cáncer de próstata

Inmuno-PET en paciente con cáncer de mama
metastásico utilizando 68Ga-herceptin (anti-Her-2)
Solit, Rosen et al
B
Imagenología no invasiva que brinda información inmuno-

histológica del tumor y sus diferentes localizaciones
28/12/04 17/03/05
Respuestas del Sistema
Inmune frente a patógenos
extracelulares
VIDEO 1
CBCC6: Unidad Curricular Hematología-Inmunología
Causas de muerte en el mundo: año 2005
Emerging Infectious Diseases, Volume 11, Number 4—April 2005

Emerging Infectious Diseases: a 10-Year Perspective from the National Institute of Allergy and Infectious Diseases
Anthony S. Fauci*, Nancy A. Touchette* , and Gregory K. Folkers*
Causas de muerte en el mundo: año 2016
3M
1,4M
1,3M
Inmunidad frente a patógenos
Características Generales
1. El sistema Inmune distingue entre micro-organismos

(MO) patógenos de los no-patógenos
2. La defensa frente a MO está mediada por la inmunidad

innata y la inmunidad adaptativa
3. La respuesta de la inmunidad innata determina la

naturaleza de la respuesta adaptativa
4. El sistema inmune es capaz de responder en forma

diferencial frente a diferentes agentes agresores
5) La supervivencia y virulencia del patógeno dependen de
su capacidad para evadir o resistir la RI del huésped
6) La RI desarrollada contra el patógeno puede causar

lesión tisular
7) Algunos microbios se establecen, quedan latentes,

controlados por la RI pero no eliminados
8) Defectos heredados o adquiridos en la respuesta inmune

innata o adaptativa son causa de susceptibilidades a
ciertas infecciones
Tipos de patógenos
1. Bacterias extracelulares
2. Bacterias intracelulares
3. Virus
4. Protozoos y parásitos multicelulares
5. Hongos (extracelulares-invasivos)
Tipos de patógenos
3. Virus
Bacterias Extracelulares
• Son capaces de dividirse fuera de las células del huésped
• Ejemplos:
- cocos gram-positivos (Staphylococcus, Streptococcus)
- cocos gram-negativos (meningococo, gonococo : Neisseria)
- bacilos gram-negativos (Escherichia coli)
- bacilos gram-positivos (Clostridium)
• Producen enfermedad a través de dos mecanismos:

- inflamación que destruye el tejido en el sitio de infección
- Toxinas: endotoxinas : lipopolysaccharide (LPS)
exotoxinas: toxina diftérica (interfiere en la síntesis proteica)
toxina colérica ( interfiere con transporte iónico)
antrax (interfiere vías de señalización críticas)
Las respuestas inmunes frente a bacterias extracelulares están

dirigidas a eliminar las bacterias y a neutralizar las toxinas
Inmunidad Innata: bacterias extracelulares
Piel y mucosas:
- Barrera física entre el medio interno y ambiente
externo
- queratina
- moco
- lisozima
- descamación del epitelio
- cilias
Antagonismo microbiano por la flora microbiana normal

-compite por el nicho y nutrientes
-producen ácidos grasos, peróxidos y bacteriocinas que
inhiben crecimiento de bacterias patógenas
Inmunidad frente a bacterias
extracelulares
INMUNIDAD INNATA
Producción de citoquinas pro-inflamatorias a través del reconocimiento de

PAMPs por PRRs
Fagocitosis por neutrófilos y macrófagos

extracelulares
INMUNIDAD INNATA
- Producción de citoquinas pro-inflamatorias a través del reconocimiento
de PAMPs por PRRs
- PRR secretados: MBL (activa el complemento por vía de las lectinas)
- PRR endocíticos: en fagocitos y células dendríticas (CLR, scavanger)
- PRR de señalización: TLR, CLR
- ILCs ( células linfoides innatas): ILC3- activadas por citoquinas inflamatorias

- Secretan: IL 17, IL22, GM-CSF que
reclutan neutrófilos al sitio de
infección y aumentan las actividades
de la barrera epitelial
ARNsc
ARNdc
Motivos CpG
Flagelina
TLR5
TLR7 TLR3 LPS

TLR8 TLR4 Lipoproteínas
TLR9 proteoglicanos
Endosoma Proteínas
adaptadoras
(MyD88) Respuesta inflamatoria
TLR2/6
aguda: TNFα, IL1, IL6 TLR2/1
Cascadas de vi
c
fosforilación
Reclutamiento de
leucocitos: quimioquinaszymosan
Factores de
transcripción
Orientación RI Adaptativa:
(NFkB)
IL12, IL18
Citoquinas (TNFα, IL1, IL12) iNOS
Quimioquinas
Núcleo Señalización / Activación +
Inmunidad INNATA frente a bacterias extracelulares
Fagocitosis por neutrófilos,
monocitos y macrófagos tisulares
Moléculas microbicidas en los fagolisosomas:
-Enzimas proteolíticas
-Lisozima, lactoferrina
-Defensinas
-Agentes oxidantes
VIAS DE ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO
LPS (Gram-)
Acidos Teicoicos (Gram+)
Peptidoglicano (Gram+)
Manosa en superficie de MO
(Salmonella, Listeria, Neisseria,

Candida albicans…)
Si el complemento se activa además se promueve la

opsonización y fagocitosis de la bacteria
Inmunidad ADAPTATIVA frente a bacterias
extracelulares
La inmunidad Humoral es la respuesta más importante

contra bacterias extracelulares pero también existe
una respuesta inmune Celular que complementa
Respuesta Inmune Adaptativa humoral frente a bacteri
extracelulares
Fig 13-6-1 abbas nuevo
La respuesta humoral es crítica para las bacterias

encapsuladas ricas en polisacáridos ya que son antígenos
T independientes y no activan células T
MECANISMOS EFECTORES DE LOS ANTICUERPOS:
✔ NEUTRALIZACIÓN: IgM, IgG e IgA de alta afinidad
✔ OPSONIZACION y FAGOCITOSIS: IgG1-IgG3
✔ ACTIVACION DEL COMPLEMENTO: IgM, IgG1 e IgG3

Neutralización de microbios y toxinas
por los anticuerpos
Interferencia Estérica
Efecto Alostérico
por los anticuerpos
por los anticuerpos
VIAS DE ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO
IgM e IgG
específicos
• La inmunidad HUMORAL es el mecanismo más importante
contra Bacterias Encapsuladas ( Streptococcus Pneumonia,
Neisseria sp)
• En éste contexto, el bazo juega un papel crítico en la

producción de anticuerpos y en el “clearence” fagocítico
de las bacterias opsonizadas
• ¿Pacientes que no tienen un bazo funcionante?

extracelulares
INMUNIDAD INNATA
- Producción de citoquinas pro-inflamatorias a través del
reconocimiento de PAMPs por PRRs
- Fagocitosis por neutrófilos y macrófagos
- Sistema del Complemento
INMUNIDAD ADAPTATIVA
- Humoral - Opsonización de bacterias
- Neutralización de toxinas bacterianas
- IgM e IgG activan la vía clásica del Complemento
- Celular - TCD4+ Th1: IFNγ activa

macrófagos TNF y linfotoxina reclutan y activan
neutrófilos
- TCD4+ Th17: reclutamiento de neutrófilos
Respuesta Inmune Adaptativa
frente a bacterias extracelulares
Fig 13-6-1 abbas nuevo

Complicaciones generadas por la activación de
la respuesta inmune específica frente a
bacterias extracelulares
• Inflamación ( daño tisular por ROS y enzimas lisosomales)

y shock séptico (en etapas tempranas rol principal de IL-1,
IL-6 y TNF alpha producido por macrófagos, “tormenta
citoquínica)
• Fiebre reumática: anticuerpos anti-proteína M de

estreptococos β-hemolíticos tienen reacción cruzada con
proteínas de miocardio y pueden producir alteraciones
valvulares, insuficiencia cardíaca y toque articular
• Glomerulonefritis pos-estreptocóccica por depósito de

inmunocomplejos circulantes a nivel del glomérulo renal
• Inhibición de la activación del Sistema del Complemento
anti-bacteriana extracelular • Variación antigénica

EVASIÓN de la Inmunidad
- alternancia entre fenotipos en forma reversible
• Producción de proteasas
- actividad proteolíticas sobre IgA
• Evasión de la fagocitosis y destrucción por fagocitos

- cápsulas de polisacáridos en neumococos impide
adherencia por pseudópodos de macrófagos
- inhibición de la opsonización mediada por anticuerpos
- resistencia a ser matadas por el estallido respiratorio
- resistencia a los gránulos de los fagocitos
- impiden el reclutamiento de los fagocitos y su activación
• Modulación del procesamiento y presentación antigénica

- inhibición de la expresión de MHC de clase II
- toxinas interfieren en el tráfico de las moléculas de MHC
• Escape de los NETs de neutrófilos
Inhibición de la activación y la deposición del
anti-bacteriana extracelular
1- inhiben la formación y activación de C3 convertasa

2- facilitan la degradación por el proteasoma de C3b
3- bloquean el depósito de C3b sobre la pared
4- impiden la formación de la C5 convertasa
5- promueven la producción de peptidasas de C5a
6- inhiben el MAC (peptidoglicanos de Gram+)
Sialilación de proteínas
Vesículas de
membrana
con antígenos
señuelos
Actividad
proteolítica
sobre IgA
Variación de antígenos
de superficie
Resistencia de las bacterias a ser matadas por el
estallido respiratorio de la célula huésped
anti-bacteriana extracelular Escape de los NETs de neutrófilos
NETs: Neutrophil Extracellular Traps (trampas)

▪ producidos en respuesta a patógenos G+ (Strepto de tipo A y Stafilo Aureus)
▪ estructura que contiene un esqueleto de cromatina parcialmente degradada ,
proteasas , AMPs)

Respuestas del Sistema
Inmune frente a patógenos
extracelulares
VIDEO 2
Tipos de patógenos
3. Virus
PARÁSITOS
• Protozoos, helmintos, ectoparásitos
• 30% población mundial
• Países tropicales o con alto índice de pobreza
• Ciclos vitales complejos

– Humanos + huéspedes intermediarios: como caracoles
• Infecciones generalmente crónicas

Inmunidad frente a parásitos
INMUNIDAD INNATA
- PARASITOS EXTRACELULARES
Vías alternativa y de las lectinas del complemento
- PROTOZOOS (Plamodium species/ Leishmania donovani) reconocidos

por TLRs y activan fagocitosis por macrófagos
(algunos viven allí luego)
- HELMINTOS (Ascaris Lumbricoides/Fasciolas)

Eosinófilos: liberación de gránulos tóxicos
-- Mastocitos y eosinófilos: respuesta inflamatoria no

específica mediada por proteasas y leucotrienos
Parásitos extracelulares que pueden sobrevivir en el interior
celular (protozoarios) :caso típico Leishmania major .
- T CD8 citotóxicos.
- LTCD4 Th1 vía INF-g (activan al macrófago).
- Anticuerpos específicos que facilitan fagocitosis en
etapas extracelulares breves.
- respuesta Th2: IL-4 ,IL-5 e IL-13 sobre todo Helmintos
✔IL-4 e IL-13 median expulsión de nemátodos intestinales

✔IL-4 aumenta producción de IgE -activa mastocitos y eosinófilos
- memoria
✔IL-5 activa eosinófilos y promueve su desarrollo
Los eosinófilos generan muerte del parásito por ADCC

- respuesta Th2: IL-4 ,IL-5 e IL-13 sobre todo Helmintos
✔IL-4 e IL-13 median expulsión de nemátodos intestinales

✔IL-4 aumenta producción de IgE -activa mastocitos y eosinófilos
- memoria
✔IL-5 activa eosinófilos y promueve su desarrollo
La inmunidad adaptativa contra los parásitos puede causar

lesión tisular ej : granuloma asociado a respuesta Th2 (con
Fibrosis)
parásitos helmintos intestinales extracelulares: respuesta Th9
-Las células Th9 producen IL-9, IL-4,IL-3 (in vitro dependientes de TGF-b e IL-10)
- promueve producción de IgE por los linfocitos B
- promueve proliferación y diferenciación de mastocitos
-Promueve secreción de mucus y de
quimioquinas por las células epiteliales
- atrae células ILC2 y promueve su actividad
Respuestas frente a helmintos
EVASIÓN de la Inmunidad anti-parasitaria • Ocupan nichos o espacios a los que las células T o
anticuerpos no pueden acceder -
Plasmodium infecta eritoricitos - T. gondii, intracelular,
estadio quístico - Esquistosomas: absorcion de proteínas del
hospedador (mimetismo)
• Variación antigénica
- Tripanosomas: modificación contínua de antígenos de superficie
(cambios en la expresión génica)
- En estadíos de madurez del paràsito en los tejidos se producen antígenos
diferentes que en las etapas infectivas
Variación antigénica en tripanosomas

EVASIÓN de la Inmunidad anti-parasitaria • Alteración de la presentación antigénica -
inhibición de proteasas - inhibición de la expresión
de MHC
• Supresión de la respuesta inmune - Proteínas

homólogas a TGFβ - Inducción de Treg
(leishmania)
- Pueden acceder al interior celular y vivir o elaboran quistes (protozoos)
• Inhibición del Complemento - proteasas que

inactivan C3b (Leishmania ) - proteínas homólogas a inhibidores del
complemento (T cruzi y S mansoni)
• Efecto sobre células efectoras inmunes -

reducción de función de neutrófilos (Entamoeba histolytica) - evasión de
actividad microbicida
• - Escape del fagolisosoma (T. cruzi) - Inducción
de apoptosis
HONGOS
• La mayor parte de las personas están expuestas a los

hongos ( infecciones endémicas por esporas de hongos
en el ambiente)
• Estos son habitualmente eliminados por los mecanismos de

defensa del hospedador inmunocompetente
• Otros hongos son oportunistas y provocan infecciones

graves en pacientes inmunocomprometidos
• Los hongos que infectan al ser humano pueden vivir de

manera intra o extracelular
HONGOS
Infección muco-cutánea
que puede luego ser invasora
Inmunidad frente a HONGOS extracelulares
INMUNIDAD INNATA
- Producción de citoquinas pro-inflamatorias a través del reconocimiento de

PAMPs por PRRs de macrófagos y células dendríticas
TLR2 Zymosan
CLRs como Dectin-1 reconoce B-glucanos que
prende una vía que activa el inflamosoma NLRP3:IL-1β
NLRs activan el inflamososma : IL-1β e IL-18
- Sistema del Complemento (MBL, vía de lectinas)
- Neutrófilos y Macrófagos (sustancias fungicidas, derivados reactivos

del oxígeno y enzimas lisosómicas + fagocitosis)
pacientes con neutropenia son muy suceptibles!
-ILC3
Inmunidad frente a HONGOS
- Celular - TCD4+ Th1: IFNγ activa macrófagos

- TCD4+ Th17: IL17 recluta neutrófilos -T
CD8+ citotóxicos = lisis de células infectadas
COMPLICACIÓN = Formación de Granulomas

IL-17 GM-CSF
IL22
Aspergillus
fumigatus/ Las respuestas protectoras
C Albicans más importantes frente a la
mayoría de las infecciones
fúngicas
C Albicans
Infecciones cutáneo mucosas
Evasión de la Respuesta Inmune por Hongos
• IDO (Indoleamine 2,3-dioxygenase)
✔ favorece generación de Tregs y antagoniza
respuesta TH17 y sirve para
✔ en condiciones normales mantiene la flora
comensal pero el patógeno lo aprovecha para
desarrollar infecciones fúngicas crónicas
• Inhibición de citoquinas pro-inflamatorias:

✔ cepas virulentas de Cryptococcus Neoformans
inhiben IL-12 y TNF alpha
• La pared fúngica es una estructura dinámica:

cambian los antígenos:
✔ C.Albicans cambia los beta-glucanos que se
unen a Dectin-1
CONCEPTOS CLAVES
• Coordinación entre Inmunidad Innata y

Adaptativa
• Adaptación del SI a cada tipo de patógeno:
extracelular vs intracelular
• Los patógenos han desarrollado mecanismos
de evasión para sobrevivir
• La comprensión de los mecanismos de evasión
es de utilidad para desarrollar herramientas
biotecnológicas de intervención para evitar
infecciones

Inmunidad anti-viral
UC-13 Hematología e Inmunología
Teresa Freire, Depto. Inmunobiología, Facultad de Medicina
Virus humanos
VIRUS
• Patógenos obligados que se replican dentro de las células
usando parte de la maquinaria sintética del huésped
• Se adhieren a las células huésped utilizando receptores

específicos, permitiendo su penetración:
» VIH-1 → CD4
» SARS-Cov2 → ACE2 (Angiotensin converting enzyme 2)
• Dentro de las células pueden generar lesión por:
– Muerte celular por efecto citopático:

Interferencia con la síntesis proteica celular normal (infección “Lítica”)
– Síntesis de proteínas virales:
El virus se mantiene en la célula en forma latente (infección “Latente”)
Pueden reactivarse cuando el huesped pierde su inmunocompetencia
Los virus invaden las células adhiriéndose a ciertas
moléculas de superficie y atravesando la membrana
Virus envueltos Virus desnudos

Hepatitis
Mononucleosis
Herpes *
Varicela *
SARS-Cov
*
Influenza
Fiebre amarilla
Hepatitis C * Polio
*
*
HIV
Ebola
*
SARS-CoV-2 y CoviD19
Angiotensine coverting enzyme 2

ACE2
ssRNA
αCoronavirus 229E, NL63

Resfrío común
βCoronavirus OC43, HKU1
βCoronavirus: Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus: SARS-CoV-1 (2002)
Middle Eastern Respiratory síndrome coronavirus: MERS-CoV (2012)
SARS-CoV-2 : CoviD-19 (2019)
https://www.youtube.com/watch?v=xJeDrtRwGUY
Inmunidad frente a virus
INMUNIDAD INNATA
- Reconocimiento por PRRs

- IFN tipo I
- Células NK
Reconocimiento de virus por la inmunidad innata
Vías de señalización activas por virus
CLRs
Vías de señalización activas por virus
CLRs
TLR3
Células dendríticas
Célullas epiteliales
Macrófagos
Fibroblastos
RIG Células NK
Células endotieliales Mastocitos
(inducido por TLR4
Fibroblastos TLR7, TLR9
DC converncionales Células dendríticas
Macrófagos… plasmocitoides
alta produccion de IFN tipo I
Los IFNs de tipo I inhiben la replicación viral, representando
la primera línea de defensa de la Inmunidad anti-viral
El IFN y el IFN interactuan con el receptor IFNAR
presente en la superficie de las células infectadas y
en células vecinas
Una vez unidos
al receptor
IFNAR, se
induce la
expresión de
PKR y
OligoAdenilato-
Sintetasa:
-Inactivación de
factor de
traducción eIF-2
-Activación de
RNAsa latente
Las células NK inducen la apoptosis de células
infectadas por virus y secretan IFN y TNF
INMUNIDAD INNATA
- Reconocimiento por PRRs (TLR3 y TLR7)

- IFN tipo I
- Células NK
- Anticuerpos neutralizantes
- Linfocitos T CD8+ citotóxicos
INMUNIDAD ANTI-VIRAL
• Los anticuerpos neutralizantes inhiben la infectividad de los virus
• En algunos casos, pueden evitar que la infección se produzca:
Administración de anticuerpos neutralizantes como profilaxis post-exposición para virus
como el HBV y el de la rabia

Inmunidad Innata y adaptativa efectiva para erradicar virus
Inmunidad
Innata y
adaptativa
efectiva para
erradicar
virus
• Interferencia en las vías de señalización desencadenadas
EVASIÓN de la Inmunidad anti-viral por el reconocimiento del virus por la inmunidad innata
Interferencia de la actividad de cito- y quimoquinas
EVASIÓN de la Inmunidad anti-viral - proteínas solubles homólogas a receptores (IFNAR, TNF…)
- inhibidores de la PKR o RNAsa L (acción IFN I)
- Inhibición de la producción de citoquinas (IFN I, IL1…)
- proteínas homólogas a citoquinas, bloquean receptores
- producción de citoquinas inmuno-supresoras (IL10)
EVASIÓN de la Inmunidad anti-viral
⚫ Inhibición de la actividad de las células NK
- proteínas homólogas a MHCI
• Interferencia en la expresión/función de MHC

- Inhibición de la expresión o degradación de MHCI o II
- bloqueo del transportador TAP
- bloqueo de acidificación de endosomas
• Producción de análogos de FcR

- Inhibición de interacción con FcRg leucocitarios
- Inhibición de activación vía clásica complemento
⚫ Variación antigénica
- mutación de secuencias que codifican para los epítopes T o B
(RNA)
⚫ Infección o inactivación de células inmuno-

competentes
intracelulares
Fisiología hematológica e Inmunología Básica y Aplicada, CBCC6, Año 2016
⚫ El sistema Inmune distingue entre (micro)organismos patógenos de

los no-patógenos
⚫ La supervivencia y virulencia de patógenos dependen de su

capacidad para evadir o resistir la RI del huésped
⚫ La RI desarrollada contra el patógeno puede causar lesión tisular

⚫La defensa frente a MO está mediada por la inmunidad innata y
específica (adaptativa)
⚫La respuesta de la inmunidad innata determina la naturaleza de la

respuesta específica
⚫El sistema inmune es capaz de responder en forma diferencial frente a

diferentes agentes agresores
Patógenos intracelulares
2. Virus
3. Parásitos protozoarios intracelulares
4. Hongos intracelulares
Características comunes a todos los

patógenos intracelulares
Los patógenos intracelulares pueden sobrevivir
dentro de los fagocitos
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Los Th1 son esenciales en la inmunidad contra
patógenos intracelulares

© 2005 Elsevier
intracelulares
CONCEPTOS CLAVES
• Coordinación entre Inmunidad Innata y

Adaptativa
• Adaptación del SI a cada tipo de patógeno: la
inmunidad contra patógenos intracelulares
tiene características comunes
• Los patógenos han desarrollado mecanismos
de evasión para sobrevivir
• La comprensión de los mecanismos de
evasión es de utilidad para desarrollar
herramientas biotecnológicas de intervención
para evitar infecciones
protozoarios intracelulares
Fisiología
hematológica e
Inmunología
Básica y
Aplicada,
CBCC6
Teresa Freire
Depto.
Inmunobiología,
Facultad de
Medicina Leishmania Cryptosporidium
Plasmodium
Trypanosoma Toxoplasma
Los parásitos intracelulares sólo se reproducen
dentro de las células hospederas
⚫ Solo pueden
reproducirse dentro de la
células del hospedero
⚫ Pueden multiplicarse
dentro de los fagocitos
⚫ Frecuentemente causan
enfermedad crónica
Inmunidad frente a parásitos protozoarios intracelulares
INMUNIDAD INNATA
- Reconocimiento por PRRs (TLR, CLR, inflamasoma)

- Linfocitos T gd
- Células NK
- Linfocitos CD4 Th1

- T CD8 citotóxicos, IFNg
- Anticuerpos específicos que facilitan fagocitosis en

etapas extracelulares breves
Inmunidad innata frente a parásitos
Protozoarios intracelulares
Inmunidad
frente
a parásitos
protozoarios
intracelulares
Inmunidad contra Plasmodium
The immunological balance
EVASIÓN de la Inmunidad por T. cruzi
Inmunidad frente a hongos
Teresa Freire. Depto. Inmunobiología, Facultad de Medicina
Blastomyces Candida
Suelo, hojas, madera microbiota mucocutánea y gastrointestinal
Histoplasma Coccidioides
Suelos de ambientes cerrados: minas,
Microbiota, suelo
Cuevas, túneles
Los hongos intracelulares
son facultativos
Blastomyces Candida
Suelo, hojas, madera microbiota mucocutánea y gastrointestinal
Histoplasma Coccidioides
Suelos de ambientes cerrados: minas,
Microbiota, suelo
Cuevas, túneles
Hongos intracelulares facultativos
Infecciones invasivas mortales en personas con sistemas inmunitarios debilitados
por trasplantes, enfermedades o tratamientos agresivos
Patógenos oportunistas
Polimórficos:
- levaduriforme
- filamentoso (hifas)
Adaptación
Evasión inmunológica sofisticada
Infecciones cutáneas (Candida) o pulmonares (Histoplasma,

inhalación)
Infecciones:
- superficiales (capa externa de la piel)
- cutáneas (capas queratinizadas, uñas, pelo)
- profundas (sistémicas, múltiples órganos)
Candida
albicans
Presente en la microbiota mucocutánea y gastrointestinal
TLR4
Infecciones superficiales y
sistémicas
Factores de virulencia:
Adeherencia,
enzimas degrativas,
cambio de morfología
Inmunidad innata contra C. albicans
TLR4
CGRP = calcitonin gene related peptide; AMPs = antimicrobial peptides; PMN = polymorphonuclear leukocyte
Inmunidad
Adaptativa
contra
C. albicans
Estrategias de evasión inmune utilizadas
por hongos intracelulares patogénicos
(a) La capa
protectora
enmascara los
PAMPs:
-mannoproteínas de
C. albicans
-Cápsula de C.
neoformans
- a-glucano de H.
capsulatum y P.
brasiliensis
(c) Los hongos patógenos pueden adaptarse (b) Alteración de formación de fagolisozomas.
al ambiente hostil del fagosoma y Los hongos patógenos pueden sobrevivir,
contrarestar la actividad anti-microbiana replicarse y escapar del fagolisozoma.
Inmunidad frente a
bacterias intracelulares
Legionella
Teresa Freire, Depto. Inmunobiología, Facultad de Medicina
Salmonella Listeria
Shigella
Rickettsia
Chlamydia
Mycobacterium
Receptores de reconocimiento
de patrones
FUNCIÓN DE LA IL-12 e IFN en la defensa contra una
infección bacteriana intracelular

© 2005 Elsevier
Inmunidad innata que media la eliminación
de bacterias intracelulares
⚫ Reconocimiento de PAMPs por

PRRs intracelulares
⚫ TLRs, CLRs, inflammasoma
⚫ Producción de IL-12 que activa

células NK
⚫ Las células NK activadas

secretan IFN que activan a su
vez a los macrófagos y potencian
su capacidad lítica

© 2005 Elsevier
Inmunidad adaptativa que media la eliminación
de bacterias intracelulares
⚫ Linfocitos Th1: contribuyen a la

diferenciación de Linfocitos T
citotóxicos (CTL) y activación de
macrófagos
⚫ CTL que reconocen la célula

⚫ Th1
infectada y la destruye por
⚫
apoptosis
CTL

© 2005 Elsevier
Cooperación de
células T CD4+
y T CD8+ en la
defensa contra
bacterias
Th1 intracelulares
Etapa de inducción de la respuesta CTL-CD8
1. Activación de
Linfocitos T CD8 en
el ganglio
2. Diferenciación a
Linfocitos T CD8
citotóxicos
Etapa efectora de la respuesta CTL-CD8
1. Fd
2. Fdf
3. Migración al
tejido inflamado
para matar Apoptosis por
células Perforina/Granzima o Fas/FasL
infectadas
Etapa efectora de la respuesta CTL-CD8
ADEMAS:
Los CTL secretan IFN y
TNF, promoviendo:
1.
2.
Fd
Fdf
- el reclutamiento y activación
3. Migración al de macrófagos, células NK y
tejido inflamado linfocitos T
para matar Apoptosis por
células - el procesamiento y
Perforina/Granzima o Fas/FasL
infectadas presentación antigénica
Las células NK y los linfocitos CD8 citotóxicos poseen
una actividad complementaria
Células NK Linfocitos T citotóxicos
Inmunidad Innata Adaptativa

Innata+Adaptativa
(anticuerpos/citoquinas)
Especificidad de antígeno No Si
Reconocimiento de célula Pérdida de lo propio Ag de patógenos

infectada presentados en el contexto
del MHCI
Receptores Receptores TCR

activadores/inhibidores
Activación celular No requieren activación para Requieren activación para

la citotoxicidad, aunque los generar la maquinaria
IFN-tipo I y la IL-12 potencian citotóxica
su actividad
Generación de memoria No Si
© 2005 Elsevier
Bacterias intracelulares inhiben la expresión de
MHCI en la célula infectada
EVASIÓN de la Inmunidad anti-
bacteriana intracelular
Mycobacterium
Listeria
Shigella
Chlamydia
Legionella

© 2005 Elsevier
Complicación: formación de granulomas
- Nódulos papables
- Liberación de enzimas líticas que causan
daño tisular (necrosis)
activado
Bacteria
intracelular
Respuesta inmune contra M. tuberculosis
• Evasión de la fagocitosis y destrucción por
fagocitos
• - resistencia a efectos de agentes oxidantes
• - impide la maduración de los fagosomas (acidificación…)
• - ruptura de la membrana del fagosoma y escape al citoplasma
EVASIÓN de la Inmunidad anti- 1. Inducción de la producción de citoquinas
supresoras
- producción de TGF e IL-10 por DC y macrófagos
2-6. Modulación del procesamiento y presentación
antigénica
- inhibición de la expresión de moléculas co-estimuladoras y MHCII
- inhibición de la internalización de componentes bacterianos
- inhibiciòn del procesamiento de antígenos
EVASIÓN de la Inmunidad anti- • 7-10. Inhibición de la activación de linfocitos
- fosforilación de TCR o BCR
- aumento de apoptosis (FasL)
- diferenciación a Treg
Algunas bacterias intracelulares
pueden vivir de forma extracelular Legionella
Facultativos
Salmonella Listeria
Shigella
Rickettsia
Chlamydia
M. leprae
Obligados
Inflamación
Marcelo Hill
INFLAMACION
Respuesta inespecífica y autolimitada que coordina

elementos celulares y moleculares del sistema inmune,
sistema vascular y sistema nervioso frente a una agresión.
Extravasación de leucocitos al tejido conectivo para eliminar

la amenaza y reparar el daño generado.
Respuesta sistémica: MO, hígado, hipotálamo, etc.

¿Cómo se manifiesta?
Provoca dolor, hinchazón,

enrojecimiento y aumento de
temperatura de la zona afectada.
Características básicas
Etapas de la inflamación
Reconocimiento
Activación endotelial
Reclutamiento de leucocitos
Eliminación de la sustancia nociva
Resolución
Reparación
Principales causas de inflamación
 Infecciones (bacterias, virus, parásitos)
 Traumatismo
 Agentes físicos y químicos
 Necrosis tisular (cualquier causa)
 Cuerpos extraños
 Reacciones inmunitarias
Clasificación de Inflamación
Aguda: Crónica:
• Duración de horas a días. • Duración de semanas a meses.
• Irritante severo • Irritante de baja intensidad
• Intensos cambios vasculares • Pocos cambios vasculares
• Células: leucocitos • Células: linfocitos, macrófagos y
polimorfonucleares. células plasmáticas
• Exudación profusa. • Exudación escasa
• Consistencia blanda • Consistencia firme
• Ninguna o ligera proliferación de • Proliferación de tejido conectivo,
tejido conectivo, vasos y epitelio vasos y epitelio.
Puede desencadenarse en situaciones muy diversas
3/30
Ejemplos de enfermedades inflamatorias
INFLAMACION AGUDA
A nivel local:
• Vasodilatación
• Aumento de la permeabilidad vascular
• Quimiotaxis y activación leucocitaria
• Eliminación de la noxa
• Resolución y cicatrización
INFLAMACION AGUDA
Componentes vascular, celular y plasmático

COAGULACION E INFLAMACION
↑ Factores coagulación
↑ Mec pro-trombóticos endoteliales
↓ Mec anti-coagulantes
COAGULACION INFLAMACION
Trombina PAR
Metabolismo AA Citoquinas, quimioquinas

↑P-selectina
INFLAMACION Y TROMBOSIS
EN COVID-19
Mediadores Químicos
Celulares Plasmáticos
• Histamina • Sistema del complemento

• Serotonina C3a y C5a
• Enzimas lisosómicas • Sistema de las quininas
• Prostaglandinas • Sistema de la coagulación
• Leucotrienos
• Factor activador de las
plaquetas
• Citoquinas (TNFα, IL-1, IL-6)
HISTAMINA
Trauma, frío, calor
IgE Vasodilatación
Anafilotoxinas
DAMPs, PAMPs
↑ Perm Vasc
IL-1, IL-8
COMPLEMENTO E INFLAMACION
La IgG y la IgM activan el complemento

• Anafilotoxinas (C3a, C4a, C5a) (generando C3a y C5a), lo cual lleva a
• Quimiotaxis (C3a, C5a) liberación de los gránulos (histamina y
• Metabolismo AA(C5a) serotonina) de los mastocitos y los cambios de
adhesión, migración y permeabilidad.
Metabolismo del AA e Inflamación
GENERALIDADES SOBRE CITOQUINAS
Linfoquinas/monoquinas e interleuquinas
Pequeñas glicoproteínas (100 AA)
Alta afinidad citoquina:receptor
Secretadas por una gran variedad de células
Pleiotropismo
Redundancia
Citoquinas: mediadores claves en la inflamación
Inducción de
citoquinas por
PAMPs y DAMPs
La tormenta citoquínica en la inflamación
ACCIONES CITOQUINICAS PRO-INFLAMATORIAS
Efectos sistémicos de citoquinas inflamatorias
FAMILIA DE LA IL-1
INFLAMOSOMA
Complejo multiproteico que contiene:
- PRR (NOD-like)
- Proteína adaptadora ASC
- Caspasa 1
Pro-IL-1β IL-1β
Pro-IL-18 IL-18
FAMILIA DE LA IL-1:
MECANISMOS REGULADORES
EL BLOQUEO DE IL-1β EN CLINICA
EL INFLAMASOMA FAVORECE LA RESPUESTA AL
ANTI-PD-1 EN MELANOMA
EL INFLAMASOMA FAVORECE LA RESPUESTA AL
ANTI-PD-1 EN MELANOMA
FAMILIA DE LA IL-1:
EFECTOS EN INMUNIDAD ADAPTATIVA
TNF y sus receptores
TNF y sus receptores
Kalliolas and Ivashkiv, Nat Rev Rheumatol (2015)

Kalliolas and Ivashkiv, Nat Rev Rheumatol (2015)
EFECTOS PARADOJALES DEL BLOQUEO
DE TNF-alfa
Dificultades para el manejo farmacológico de la inflamación
• Redundancia
• Pleiotropismo
• Necesidad
LA RESOLUCION DE LA INFLAMACION
UN PROCESO ACTIVO
INFLAMACION, RESOLUCION Y CICATRIZACION
La reparación esta prevista desde el inicio del programa inflamatorio

MACROFAGOS ALTERNATIVAMENTE ACTIVADOS M2
ANTI-INFLAMATORIOS Y METABOLISMO DEL
ACIDO ARAQUIDONICO
LIPOXINAS: EICOSANOIDES ANTI-INFLAMATORIOS Y
PRO-RESOLUTIVOS
Headland and Norling, Semin Immunol (2015)

Presentación de Antígenos

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Presentación de Antígenos

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Presentación de Antígenos

• Ubicar la presentación antigénica en el marco de una respuesta inmune (activación

• Conocer las distintas vías de presentación antigénica y su sentido fisiológico.

• Identificar mecanismos de regulación: pH, ligandos TLR...

• Identificar distintas APCs y comprender su papel en la respuesta inmune.

• pérdida de adhesividad al epitelio

• Los antígenos exόgenos se presentan a los T CD4 en el MHC II

•Los antígenos exόgenos pueden presentarse en el MHC I

•Los antígenos endόgenos pueden presentarse en el MHC II

Línea de Linfocitos T específica T

Ovoalbúmina nativa Ovoalbúmina digerida

APC APC APC APC APC

Viable Fijada Viable Fijada

Las APCs aportan el MHC y la capacidad de procesar el antígeno

EL LINFOCITO T DEBE RECONOCER EL

EL LINFOCITO T DEBE RECONOCER EL

Base molecular de la restricción por el MHC

•Interacción saturable, disociación lenta

• Falta de discriminación de lo propio y no propio

• Un haplotipo se une a un repertorio dado de péptidos antigénicos

METABOLISMO DEL MHC II

El peligro inmunológico madura la DC que mejora su

Unidades inducibles: LMP-2 y LMP-7

• Los antígenos exόgenos se presentan a los T CD4 en el MHC II

•Los antígenos exόgenos pueden presentarse en el MHC I

•Los antígenos endόgenos pueden presentarse en el MHC II

• Los antígenos exόgenos se presentan a los T CD4 en el MHC II

•Los antígenos exόgenos pueden presentarse en el MHC I

•Los antígenos endόgenos pueden presentarse en el MHC II