UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

Influenza Aviar

Epidemiología Veterinaria
Varios

Diapositiva 1: Carátula
Diapositiva 2: Marco Teórico
Diapositiva 3: Marco Teórico
1) ¿Qué es la influenza aviar?
La Influenza Aviar (IA) también conocida como gripe de las aves es una
enfermedad viral altamente contagiosa de carácter sistémico que afecta
principalmente pollos, pavos y otros tipos de aves de corral, atacando diversos
órganos y provocando una elevada tasa de mortalidad.
Es causada por un virus perteneciente a la familia Orthomyxoviridae, los cuales
presentan partículas virales de forma esférica o pleomórfica de 100 nm,
envoltura y genoma que comprende de 8 segmentos de ARN de cadena sencilla,
fragmentada y con polaridad negativa; el cual se duplica dentro del núcleo de las
células infectadas. Este virus presenta proteínas ubicadas en su nucleocápside; y
entre las importantes tenemos: la hemaglutinina y la neuraminidasa, debido a que
la presencia de dichas glicoproteínas determinan su capacidad de transmisión.

Si bien todas las aves son vulnerables a la influenza aviar, las aves acuáticas
migratorias, en particular los patos salvajes, constituyen el reservorio natural de
los virus de la influenza aviar y esas aves son también las más resistentes a la
infección; en cambio, las aves de corral domésticas, en particular los pollos y los
pavos, son bastante vulnerables a las infecciones, presentando alta mortalidad.

2) Clasificación
Se conocen 16 subtipos de virus de la influenza que infectan a las aves, lo que
representa un amplio espectro.
Existen subtipos del virus de la Influenza Aviar debidos a las diferencias
antigénicas en base a la hemoaglutinina (H) y a la neuraminidasa (N) presentes
en su estructura. Para el virus influenza A hay 18 diferentes antígenos HA (H1
al H18) y 12 diferentes antígenos NA (N1 al N12).

Diapositiva 4: Marco Teórico

3) Transmisión
En las aves, los virus de la influenza aviar se eliminan en las heces y las
secreciones respiratorias, oculares y orales. Todos pueden transmitirse a través del
contacto directo con las secreciones de las aves infectadas, especialmente a través
de las heces o de los alimentos y el agua contaminados. Debido a la naturaleza
resistente de los virus de la IA, incluida su capacidad para sobrevivir durante largos
períodos cuando las temperaturas son bajas; también pueden transportarse en el
equipo agrícola y propagarse fácilmente de una granja a otra; pero también por
vectores mecánicos como la Mosca cumplen un rol importante en el transporte del
virus de la IA a los centros de producción.

Las aves silvestres normalmente portan virus de IA en sus tractos respiratorios o

intestinales, pero no suelen enfermarse, lo que les permite transportar los virus a
largas distancias a lo largo de sus rutas migratorias.

4) Signos clínicos
Los signos clínicos varían según la cepa del virus y la especie afectada. Las aves
acuáticas pueden transportar la enfermedad sin manifestar ningún signo aparente;
en comparación, las aves de corral, las cuales presentan una alta susceptibilidad.
La signología del virus de la influenza de baja patogenicidad en aves de corral
infectadas comprende la depresión, presencia de plumas erizadas, diarreas, baja
productividad y leves inflamaciones en los órganos del tracto respiratorio. En
cambio, la signología del virus de alta patogenicidad comprende alteraciones
graves a nivel digestivo, respiratorio, reproductor y nervioso; encontrando aves
postradas, inflamación y congestión de barbillas y crestas, edema de la piel,
hemorragia en pulmones y patas, parálisis, disminución de la producción de huevos
y presencia de cáscaras blandas o ausencia completa de la misma.

Diapositiva 5: Marco Teórico

5) Variabilidad genética
Respecto a la recombinación genética, podemos mencionar que la IA es un agente
cuya patogenicidad es variable, tenemos cepas de alta patogenicidad y de baja
patogenicidad.
El virus de IA es reconocido como extraño frente al organismo debido a las
proteínas en su superficie. De todas esas proteínas de superficie que se observan
en la imagen, las más importantes son la hemaglutinina y neurominidasa debido a
que le confieren a ese virus la capacidad de ser reconocido como extraño y la
capacidad de variabilidad genética. La hemaglutinina se ancla con los
anticuerpos, y la neurominidasa permite al virus que cuando llegue a las células
diana, se abra y libere su material genético a las células hospedadoras.
La característica principal de la IA es que estas proteínas de superficie tienen
capacidad recombinante, es decir, pueden mutar y recombinarse
continuamente, inclusive pueden autoeliminarse en procesos replicativos; y NO
tiene mecanismos de reparación. Normalmente todos los virus, bacterias, etc,
cuando hay una falla en la replicación de su cadena genética y se dan cuenta que
hay error, tienen mecanismos de reparación para que dicho error no se mantenga, y
por ello todas las replicaciones son iguales. Sin embargo, el virus de influenza aviar
no posee esos mecanismos de reparación; por eso observamos diferentes cepas
como la H5N1, H3N8, H7N3, etc; por ende las combinaciones son infinitas.

Diapositiva 6: Marco Teórico

6) Diagnóstico
La elección de las pruebas diagnósticas en realidad se basa en el contexto de la
población a evaluar. Por ejemplo: Para prueba de tamizaje la OIE recomienda el
uso de inmunodifusión en agar gel debido a la alta sensibilidad y especificidad
que comprende esta prueba; sin embargo los test de ELISA indirecto podrían usarse
para lo mismo, teniendo una mayor especificidad que la prueba de inmunodifusión
en agar gel, sin embargo ELISA es más costosa. Es importante mencionar que la
inmunodifusión en agar gel sirve para detectar anticuerpos en gallinas y pavos,
pero no para las demás especies, ya que no todas las especies aviares producen
anticuerpos precipitantes, especialmente los patos.
Respecto al aislamiento viral, se le considera la prueba gold standard de la IA, y
esta prueba tiene una alta sensibilidad y especificidad.
Por otro lado, el PCR, permite la detección de ADN o ARN del patógeno y esta
prueba tiene una especificidad y sensibilidad casi perfecta.
Y finalmente, de la inhibición de la hemaglutinación, les puedo mencionar que
permite determinar el título de anticuerpos en el suero; y además es usada para
detectar subtipos específicos de IA. Además de ello, en las investigaciones se usa
para poder diferenciar la aglutinación por virus de Newcastle con respecto a la IA.

7) ¿Cómo prevenir la IA?

Las medidas incluyen:
1) Mantener las aves de corral fuera de las áreas frecuentadas por aves silvestres;
2) No introducir elementos en los predios que puedan atraer a las aves silvestres; 3)
Mantener un control estricto del acceso a los galpones de los vehículos, personal y
equipos; manteniendo protocolos de desinfección al ingresar; 4) Mantener en
buenas condiciones sanitarias las granjas, los gallineros y los equipos. 5) Evitar la
introducción de aves de estatus sanitario desconocido a los galpones. 6) Declarar a
los servicios veterinarios los casos de enfermedad y muerte de aves. 7) Realizar
una vigilancia epidemiológica efectiva.

Diapositiva 7: Análisis de casos

Diapositiva 8: Artículo 1- Perú
Diapositiva 9: Introducción
La Influenza Aviar (IA) es una enfermedad de gran importancia para la industria
avícola, debido a las pérdidas económicas y restricciones al comercio internacional
que ocasiona, además del riesgo zoonótico que representa. En las aves silvestres,
la infección es generalmente asintomática. Se ha demostrado la posibilidad de
introducción del virus en diversas zonas geográficas mediante el comercio
internacional, ingreso ilegal y, principalmente, por la migración de aves
silvestres, situación que implica un grave riesgo para los países del continente
americano. El objetivo del presente estudio fue hacer seguimiento de la presencia
del virus de IA en las poblaciones de aves silvestres en los humedales de
Puerto Viejo, en Lima.

Diapositiva 10: Materiales y métodos

Se colectaron 900 muestras de heces de aves silvestres en los Humedales de
Puerto Viejo. Las muestras se colectaron en tres periodos: abril-mayo,
agosto-setiembre de 2008 y enero-febrero de 2009, identificándose las especies
a distancia con la ayuda de binoculares. Con hisopos se recogió directamente del
suelo de 0.3 a 0.5 gramos por muestra de heces que fueron conservadas en
medios de cultivo celular RPMI enriquecidos al 1% con albúmina de suero
bovino y transportadas a 4°C al laboratorio de Patología Aviar de la Universidad
de San Marcos.
El aislamiento viral de las muestras de heces se hizo mediante la inoculación de
embriones de pollo SPF de 10 días de edad, vía cavidad alantoidea, luego los
huevos fueron incubados durante 120 horas; y se determinó la actividad
hemaglutinante del fluido alantoideo en los embriones inoculados mediante este
método, debido a que el virus de influenza aviar tiene la capacidad de aglutinar los
eritrocitos. Luego, se confirmó la presencia de virus de influenza aviar en los
fluidos con actividad hemoaglutinante, mediante el uso de un kit de ELISA de
captura de antígeno. La razón por la que fue utilizada ELISA de captura de
antígeno fue para detectar la presencia de antígeno del virus de la influenza
aviar de tipo A, basándose en la detección de la hemaglutinina o la neurominidasa;
sin embargo, esta prueba no brinda información acerca del subtipo de virus.
De manera simultánea, se descartó Newcastle mediante la prueba de inhibición
de la hemoaglutinación, con sueros conteniendo anticuerpos específicos para
el virus. Luego, las muestras positivas a virus de IA fueron remitidas para su
confirmación mediante la prueba de PCR transcriptasa reversa en tiempo real y
su subtipificación mediante secuenciamiento.

Los datos obtenidos fueron sometidos a la técnica de evaluación de riesgo

mediante la simulación Monte Carlo, la cual es una técnica usada para estimar los
posibles resultados de un evento incierto.
Posteriormente, las proporciones se expresaron con un intervalo de confianza al
95%, es decir que con un 95% de seguridad el valor real estará en el rango
establecido de acuerdo a los resultados obtenidos en el estudio.

Diapositiva 11: Resultados

Se aislaron siete cepas de virus de influenza aviar de baja patogenicidad del
subtipo H12N5 en 900 muestras en 18 especies de aves silvestres, presentes en
los humedales de Puerto Viejo.
De estas cepas, seis fueron aisladas en la especie migratoria Arenaria interpres
(perteneciente al orden Charadriiforme) y una en la especie residente Fulica
ardesiaca. Además, se aislaron tres cepas del virus de Newcastle en la especie
Anas bahamensis. Las muestras positivas a influenza aviar fueron colectadas
entre abril y mayo de 2008, es decir en los meses de verano; y las muestras
positivas a Newcastle fueron colectadas entre enero y febrero de 2009.
La técnica de evaluación de riesgo mediante la simulación de Monte Carlo indicó
que la probabilidad de encontrar el virus de influenza aviar en las aves silvestres de
los Humedales de Puerto Viejo es del 0.88%, con un límite mínimo y máximo que va
de 0.15 a 2.53%, con un intervalo de confianza de 95%. Asimismo, no hubo
diferencias estadísticas significativas entre las prevalencias encontradas para
cada periodo de muestreo.

Diapositiva 12: Conclusiones

- Se aislaron siete cepas de virus de influenza aviar de baja patogenicidad del
subtipo H12N5 de aves silvestres, con una prevalencia de infección de 0.88%, lo
cual demuestra que las aves silvestres, migratorias y residentes de los Humedales
de Puerto Viejo, Lima, estuvieron expuestas a los virus de influenza aviar y
constituyen un reservorio del virus en el país.

Diapositiva 13: Artículo 2- Irán

Diapositiva 14: Prevalencia de influenza aviar (H9N2) en granjas
comerciales de codorniz, perdiz y pavo en Irán, 2014- 2015.
Introducción
Irán tiene la industria avícola más grande de Oriente Medio. De hecho, Irán
ocupó el tercer lugar en la producción de carne de pavo en Asia en 2012, pero
además ha crecido significativamente en la cría comercial de perdiz y codorniz. La
mayoría de las razas avícolas comerciales se importan a Irán desde otros
países y con frecuencia son propensas a diversas enfermedades. Las
instalaciones de cría tienden a estar superpobladas y las granjas se
construyen muy cerca unas de otras, lo que permite la propagación de virus
como el H9N2, el cual es endémico de Irán.

Diapositiva 15
Además, la investigación ha demostrado que las codornices podrían funcionar
como amplificadores de los reordenamientos de IA mejorando el potencial de
la cepa parental para infectar a otras especies como los humanos y otros
mamíferos. El virus del subtipo H9N2 es endémico no sólo en Irán, sino también
en otros países de Oriente Medio y Asia. Por otro lado, el virus H9N2 es capaz de
recombinarse con los virus de la influenza humana y, debido a esto, se han
reportado muchos casos de transmisión a humanos. Además, hay varios informes
de mortalidad de aves de corral comerciales por el virus H9N2.
En vista del reciente aumento en el desarrollo de la cría de codornices, perdiz y
pavos en Irán, este estudio se llevó a cabo para investigar la seroprevalencia y
la propagación del virus H9N2 entre las granjas.

Diapositiva 16
Colección de muestra
Este estudio transversal se realizó entre los años 2014 y 2015 e incluyó granjas
comerciales de codorniz, perdiz y pavo. La toma de muestras se realizó en granjas
que estaban activas pero que aún no habían hecho la vacunación de las aves
contra el virus H9N2.
El muestreo se definió constatando que el número de explotaciones de pavos,
patos y gansos a muestrear garantice la identificación de al menos una
explotación infectada si la prevalencia de explotaciones infectadas es de al menos
el 5%, con un 99 % intervalo de confianza.
Se tomaron muestras de doce aves de cada granja para asegurar el 99% de
probabilidad de identificar al menos un ave positiva si la prevalencia esperada
de aves seropositivas era ≥ 30%.

Prueba de laboratorio
Se extrajo un mililitro de sangre de la vena alar de pavos y luego se separó el suero
incubando la sangre a temperatura ambiente durante 1 h. Para codornices y
perdices, el método fue el mismo pero solo se tomaron 0.5 mL de sangre. Luego,
las muestras de suero se trataron con glóbulos rojos de pollo SPF al 10% y se
incubaron a temperatura ambiente durante 30 min.

Diapositiva 17:
Luego, se realizó la prueba de inhibición de la hemaglutinación para
diferenciarlos de la infección del virus de Newcastle.
Aquellas muestras de suero con títulos de 4 o más se consideraron positivas.
Además, las granjas que tenían al menos un ave positiva fueron designadas
como positivas.
Para garantizar la validez de los resultados, todas las muestras recogidas procedían
de granjas no vacunadas. No se produjeron problemas o limitaciones importantes a
lo largo de la duración de este estudio.

Análisis de los datos

La información general de todas las granjas utilizadas durante la recolección de
muestras se obtuvo del sistema de monitoreo y vigilancia de enfermedades de Irán.
Para la descripción estadística, se analizó la abundancia de las muestras positivas y
las fincas, así como la media de los títulos de las fincas. La comparación de la
media de los títulos séricos y la proporción de aves seropositivas entre todas las
unidades se analizó mediante el análisis de varianza unidireccional (ANOVA) y la
prueba de Tukey. Un valor de p <0,05 se consideró estadísticamente
significativo, sin embargo, valores menores a aquel indican que los resultados
pudieron deberse al azar, debido a una mala toma de muestra o que la muestra no
fue suficiente, etc. Todos los procedimientos estadísticos se realizaron con SPSS
versión 22 para mostrar la distribución de fincas en el país.

Diapositiva 18
Resultados
Año 2014
Se recolectaron muestras de 58 granjas de pavos, 14 granjas de codornices y 5
granjas de perdiz con un total de 77 granjas. De eso, se tomaron muestras de
682 pavos, 154 codornices y 58 perdices (un total de 894 muestras). 52 de 77
granjas muestreadas (67,5%) (Fig. 1a) y 437 de 894 aves fueron seropositivas
(48,9%) para el subtipo de influenza aviar H9N2. La abundancia de granjas y
sueros positivos se muestra en la (Tabla 1). La provincia de Isfahan tuvo la mayor
abundancia entre todas las provincias de Irán, con 18 de 19 granjas de pavos y 2
de 4 granjas de codornices siendo positivas.

Año 2015
Se recolectaron muestras de 54 granjas de pavos, 8 granjas de codornices y 7
granjas de perdiz con un total de 69 granjas. De ellos, se analizaron 675 pavos,
105 codornices y 76 perdices, con un total de 856 aves.
41 de las 69 granjas (59,4%) fueron seropositivas para el subtipo de influenza aviar
H9N2 (Fig. 1b). Por otro lado, 307 de 856 sueros (35,9%) dieron positivo. La
abundancia de granjas y sueros seropositivos se muestra en la (Tabla 1).
Las provincias de Isfahan y Zanjan tuvieron el mayor número de muestras positivas
con 15 y 3 granjas de pavos positivas, respectivamente. Le siguió la provincia de
Yazd con 2 granjas positivas de codornices y la provincia de Fars con 2 granjas
positivas de perdiz.

Diapositiva 19
Análisis de resultados
La comparación del título medio de sueros entre todas las granjas en 2014 no
muestra una diferencia significativa entre las granjas de pavos y las granjas
de codornices (p> 0.05). Lo mismo ocurrió con las granjas de codornices y de
perdiz. Sin embargo, el título medio de las granjas de perdiz fue
significativamente más bajo que el de las granjas de pavos en 2014 (p <0.01),
es decir, que este resultado SÍ puede ser extrapolado. Además, la comparación
entre el título medio de aves seropositivas en cada unidad muestra que no
existe una diferencia significativa entre granjas de pavos y granjas de
codornices, así como entre granjas de codornices y granjas de perdiz. Sin
embargo, el porcentaje medio de granjas de pavos seropositivas fue
significativamente mayor que el de las granjas de perdiz (p <0.01).
Diapositiva 20:
En el año 2015, no se observó diferencia significativa entre el título en suero medio
de las granjas y el porcentaje de aves seropositivas (p> 0.05). La comparación entre
las estadísticas de estos 2 años tampoco indicó diferencias significativas.

En general, la prevalencia total de H9N2 de granjas seropositivas y aves

seropositivas fue de aproximadamente 63,7 y 42,5%, respectivamente. Ambas tasas
son altas, pero la tasa más alta se registró para los pavos.
En el estudio actual, el 57,1% de las granjas de codornices analizadas y el 31,8% de
sus aves resultaron seropositivas para HI-H9. La seroprevalencia del H9N2 en las
granjas de codornices fue menor que en las granjas de pavos.

Diapositiva 21:
Conclusión
En el estudio actual, mostramos que el virus de la influenza H9N2 prevalece en
granjas de pavo, codorniz y perdiz en Irán. Dado que se están estableciendo
muchas más granjas de este tipo para las operaciones, y considerando la
endemicidad del H9N2 dentro del país, existe una posibilidad muy alta de que
ocurra la infección en estas granjas.
El virus H9N2 se ha correlacionado fuertemente con la reordenación con otros
subtipos, como el H7 y H5, y esto representa una gran amenaza para la salud
pública, pero además de mamíferos. Los resultados del estudio sugieren cesar las
operaciones de los mercados de aves de corral vivas en un intento por mitigar
la propagación; sin embargo, esto puede tener un resultado económico adverso
para los criadores de aves a nivel nacional.
Finalmente, es necesario realizar una investigación más profunda para seguir
investigando la epidemiología y la circulación del virus en aves y granjas, pues el
presente estudio fue el primero de este tipo realizado en Irán.

Diapositiva 23: Artículo 3- Países Bajos

Diapositiva 24: Artículo 3- Muertes de aves silvestres durante el brote del
virus de influenza aviar altamente patógena (H5N8) en Países Bajos, 2017.

DIAPOSITIVA 25: Bueno, desde ya las autoridades de holanda estaba vigilando la

situación, desde mayo- junio de 2016, se detectó un nuevo reordenamiento del
virus de la influenza aviar altamente patógena subtipo H5N8 en aves acuáticas
enfermas en China y en la frontera entre Rusia y Mongolia. En octubre de 2016,
se encontró en Hungría.
Los virus H5N8 luego se propagaron rápidamente por Europa por la ruta
migratoria que se observa en este gráfico y que las primeras detecciones
fueron en austria, alemania y dinamarca, causando una muerte masiva entre las
aves acuáticas silvestres.
Entonces el brote de h5N8 llegó a los Países Bajos a principios de noviembre
aproximadamente, pero su primera detección fue el 8 de noviembre.
Después de la primera detección de H5N8 en aves acuáticas, hasta el 18 de
noviembre se encontraron cientos de cadáveres en los lugares de Gouwzee y
Wolderwijd que fueron 5,300 cadáveres . Se estima que el 85% eran patos
copetudos, el porrón común 6% y la focha común 4%, así como las demás
especies de un menor de 1%.
Pero, debido a que estos datos se basan en el número de cadáveres notificados,
subestiman las muertes reales.
Se obtuvo que las tasas de detección de cadáveres durante las búsquedas diarias
en Gouwzee y Wolderwijd eran del 90% al 95%; sin embargo, la eficiencia de
búsqueda probablemente fue mucho menor en otros focos de brotes, y es
importante mencionar ello, porque afecta directamente a lo planteado en los
resultados.
Por otro lado a partir de fines de noviembre, el brote llegó a otras zonas de aguas
abiertas, que fue la isla de Texel con 883 y Frisia 2371 muertes, en la cual la
especie predominante fue el Wigeon euroasiático. Y las otras dos ciudades con
2107 cadáveres reportados. También se aumento la muerte de otras especies como
gaviotas, corvidos y aves rapaces presuntamente por estar en contacto con los
cadáveres.

DIAPOSITIVA 26: Entonces en este cuadro vamos a resumir la temporada del brote
en holanda, las especies que más han sido afectadas y las zonas. Entonces aquí
donde estoy señalando se dio la primera detección de influenza aviar altamente
patógena H5N8 en aves silvestres el 8 de noviembre, posterior a ello, el 25 de
noviembre se dio la primera detección de este mismo virus pero en aves de corral,
lo que se tuvo en conclusión que el virus se logró diseminar y los gráficos de abajo
explicará ‘’cómo’’. Entonces la línea roja indica la alta muerte de la especie del pato
copetudo, el color azul es del Euroasiático, los cadáveres no identificados son del
color gris claro, y las especies combinadas son del gris oscuro. Acá no podemos ver
las muertes de las aves de corral porque en este estudio solo se muestrearon a las
aves silvestres.

Entonces en el gráfico de abajo, la geografia de holanda nos da un resumen

espacial de las muertes acumuladas durante los meses de noviembre, diciembre del
2016 y enero del 2017. Los circulos dependiendo del tamaño es la escala del
registro del número de muertes reportadas, y los colores antes mencionados indican
esa misma especie, pero aca tambien observaremos los triangulos amarillos y esto
indican la ubicacion de los brotes en las explotaciones avícolas comerciales, y como
esta junto en sí a los brotes reportados por aves silvetres, entonces ese fue el factor
de diseminación para las aves de corral, y la movilidad limitada de la invernada,
tambien se dice que la ecologia de las aves silvestres podria haber afectado y
aumentado el riesgo de infeccion en las aves de corral, ya que por ejemplo el
Wigeon euroasiatico comunmente vuelan sobre la tierra y asi pudo haber
diseminado en los alimentos o sitios de descanso, a comparacion de otra especie
que es el Aythya patos que rara vez vuelan sobre la tierra.

DIAPOSITIVA 27: Materiales y métodos

Entonces para resumir y entender este estudio, a partir del brote se examinó una
proporción pequeña de canales para detectar el virus de la IA altamente
patógena mediante transcripción inversa en tiempo real (RT - PCR) en
muestras de frotis de tráquea y cloaca. Luego, determinamos la patogenicidad
y el subtipo N mediante secuenciación. Las pruebas confirmaron la infección
por H5N8 en una gran proporción de patos copetudos, gaviotas, gaviotas,
aves rapaces y córvidos muestreados que se observan en la tabla); y otro subtipo
de virus de la influenza aviar altamente patógena se detectó sólo dos veces (H5N5
en pato copetudo y cisne mudo).

Entonces para entender esta tabla de resultados de las especies de aves

notificadas, estimaciones del tamaño de la poblacion de invierno, numero de
cadaveres y resultados de la prueba del PCR, a la izquierda vemos las especies de
las aves.
- En el signo de la cruz donde dice invierno máximo estimado de la poblacion
se refiere a una estimacion de poblacion que representa el maximo y el
minimo del 2009 al 2014 por los datos estadisticos de sovon, en la cual no en
todas las especies se estimó pero es un dato extra.
- En los incidentes de IAAP probados, nos indican el número de incidencia
positiva en comparacion con todos los incidentes probados (Izquierda numero
positivo por el pcr y derecha numero de las muestras que se tomaron) toda
esta fila fue por dia
- Donde dice No canales, es la poblacion.

DIAPOSITIVA 28: Materiales y métodos y resultados

Otro método que utilizaron es la base de datos científica pública de Sovon para
comparar el número de muertes por grupo de especies entre noviembre de
2016 y enero de 2017 con las que ocurrieron en el mismo período de tiempo de
2010-2011 a 2015-2016 en la cual vemos en la tabla de abajo.
Los recuentos de muertes entre los patos buceadores (incluidos los patos
copetudos) fueron> 2,000 veces más altos que el promedio en noviembre de
2016 y enero de 2017, y la prevalencia relativa de muertes aumentó
sustancialmente (4 a 177 veces) para patos, garzas, gansos, cisnes y córvidos.
El mismo análisis basado en otra base de datos arrojó resultados similares.

Entonces este cuadro de análisis estadístico nos indica que el asterísco rojos es el
numero de muertes notificadas durante noviembre 2016 hasta enero del 2017, esta
se muestra relacionada con el numero de muertes notificadas en el mismo periodo
de tiempo en los 5 años anteriores (Entonces quiere decir que la linea del medio es
el promedio 1, estas son las barras de error y nos indican el maximo y el minimo de
2011 - 2012 a 2015 - 2016).
Entonces por ejemplo en el caso de las muertes reportadas de patos buceadores
durante el 2016 - 2017 fueron 2000 veces más que el promedio en los 5 años
anteriores. Entonces el número de muertes se promedia entre las especies.

DIAPOSITIVA 29: Conclusiones

Entonces, recalcando que el artículo es un poco largo, hablando más que todo como
es importante la bioseguridad en general, las conclusiones importantes en este
artículo fueron:
- Se detectó en casi todas las aves el H5N8 de alta patogenicidad con alta tasa
de mortalidad
- La comparación de datos sobre las muertes del 2010 - 2011, aumentó en los
años 2016 y 2017 de 4 a 177 veces más
- Se estimó que hasta el 5% de las poblaciones invernales de patos copetudos
y wigeons euroasiáticos podrían haber muerto, del 2% a 10% en gaviotas
dorsales, y 11% a 39% en halcones peregrinos en Holanda
- Los Países Bajos y otras áreas importantes para las aves acuáticas
migratorias en Eurasia que se han visto afectadas por los brotes de H5N8 de
2016-2017 corren el riesgo de sufrir un número considerable de muertes de
aves durante futuros brotes de influenza aviar altamente patógena.
- La calidad de notificación de las muertes de aves silvestres durante este
brote de H5N8 mejoró enormemente, entonces esta última conclusión es la
cual más se han basado las autoridades de Holanda, ya que años anteriores
dicen que no tenían una buena notificación, y para contener los brotes y
minimizar las pérdidas en el sector avícola, el virus de la influenza aviar
altamente patógena, la detección en aves silvestres es fundamental, asi
como la vigilancia detallada podría evitar el riesgo de infección en las aves de
corral.

Diapositiva: Discusión de artículos

Carolina- Países Bajos: Bueno, ahora pasamos a las discusiones de nuestros
artículos. Para empezar, hablaremos acerca de la susceptibilidad de especies al
virus de la IA. Para ello cito el artículo Johnny realizado en Perú; en donde se
menciona que las aves silvestres eran reservorios naturales de la IA y no sufrían
daños al infectarse, inclusive él citaba otros autores que mencionan que las aves
silvestres podrían transportar el virus de alta patogenicidad sin mostrar signos. Sin
embargo, en Países Bajos se reportó una muerte masiva de aves silvestres.

Johnny- Perú: Esto es causado por la capacidad de variabilidad genética. En

realidad, lo sucedido en tu artículo era de esperarse. El virus de influenza aviar ha
demostrado a lo largo del tiempo esa capacidad. Para ello cito lo sucedido en Chile,
en donde un virus de baja patogenicidad ingresó a territorio chileno; y al cabo de
semanas, se volvió altamente patógeno, provocando un brote. Esto es porque
algunas especies son amplificadoras de la recombinación del virus, y esto fue dicho
también en el artículo de mi compañera Thalyta en Irán. Ella mencionó que los
codornices cumplen el papel de amplificadores.

Thalyta- Irán: Quería agregar que en la introducción de mi artículo, citaron que los
codornices presentan mayores tasas de mortalidad, seguido de las perdices y
finalmente pavos; y menciono esto porque nos indica que hay mayor susceptibilidad
no sólo entre aves de corral y silvestres, sino también entre las mismas aves de
corral.
Pero lo que además me llamó la atención de mi artículo fue la endemicidad del virus
H9N2, en donde se menciona que para aminorar las tasa de mortalidad hacen uso
de vacunas, obteniendo resultados positivos. Entonces, yo quería preguntarle a
Johnny acerca de si comparamos el contexto de tu artículo en Perú con el mío, te
animarías a usar la vacuna como medida preventiva.

Johnny- Perú: Pues, no. El Perú es libre de influenza aviar; y si uso vacunas
tendría varias consecuencias: En primer lugar si se aplica dosificaciones de la
vacuna al ave de manera incorrecta, podría generar la enfermedad e introducir el
virus a mi población. En segundo lugar, si como medida sanitaria empezamos a
evaluar a la población para saber si la enfermedad continúa ausente en un país; NO
podría diferenciar si los individuos evaluados son positivos por vacunación o por
exposición al agente. Y de hecho, esta complicación pudo evidenciarse en tu
estudio en Irán, en donde solo muestrearon a las aves no vacunadas. Por último,
tiene un impacto económico negativo debido a que el virus no está circulando en el
País, y considero más importante y eficaz las inversiones en la bioseguridad.
Entonces te podría decir que la vacunación es recomendada, pero dependiendo del
contexto.

Carolina- Países Bajos: Yo me he dado cuenta que en el artículo de Perú y en Irán,

usarán procedimientos bastantes parecidos. Sin embargo, en el artículo de Perú se
hizo uso de una prueba de ELISA directa y un PCR, pero en Irán no hicieron uso de
estas dos pruebas.

Thalyta- Irán: Considero que la razón por la que se usó ELISA captura de antígeno
en Perú fue para detectar la presencia de antígeno del virus de la influenza
aviar de tipo A, pero repito “antígenos”, recordemos que en Perú se estaban
evaluando especies silvestres, y muchas de ellas no producen anticuerpos
precipitantes, especialmente los patos; en cambio en Irán se evaluó aves de corral.
Y respecto a la prueba de PCR y secuenciamiento, estas se utilizaron como prueba
confirmatoria e identificar la cepa. En el artículo de Irán en cambio se utilizó la
prueba de inhibición de la hemaglutinación para detectar ANTICUERPOS, repito,
anticuerpos; para lo cual se usaron 4 antígenos diferentes de H9N2; no se usó el
PCR, porque el objetivo del estudio era identificar específicamente la presencia de
H9N2, y con la prueba de inhibición de hemaglutinación bastó.

Carolina- Países Bajos: Te doy totalmente la razón, pero admito que nunca tomé
en cuenta que el factor “especie” podría afectar en la decisión de toma de muestra,
inclusive si estas pertenecen a un mismo grupo, osea aves.

Thalyta- Irán: Yo en lo personal, me puse a investigar un poco acerca de la

situación estacional de sus países al momento de realizar el estudio. Y en Países
Bajos ocurrió un brote con muertes masivas, nunca antes reportado en “invierno”, a
comparación con los pocos casos positivos identificados en Perú y los cuales
ocurrieron en “verano”. De acuerdo a esto, ¿de qué manera asociamos la
temporada con la IA, si sus hallazgos importantes se dieron en temporadas
diferentes?

Carolina- Países Bajos: Sucede que cada “estación” como tal, tiene factores que
promueven o no la supervivencia y contagio del virus; y es importante que separes
estos dos términos.
Los casos aislados en el contexto de Johnny, pudieron deberse básicamente a la
alta densidad poblacional de aves que ocurre cada verano en Perú a causa de la
migración masiva de aves, lo que promueve a que el número de individuos
infectados sea mayor. Y respecto a la supervivencia del virus, este es capaz de
sobrevivir por mayor tiempo en climas cálidos con respecto a climas fríos; y eso es
otro punto a favor del aislamiento en Perú. Sin embargo, en el contexto de
temporadas frías en Países Bajos existe un aumento de la precipitación, y la
precipitación incrementa la humedad, lo cual corresponde a un ambiente favorable
para la replicación y desarrollo del virus de IA.
Por otro lado, a pesar que los resultados de Johnny son apoyados por la teoría,
considero que con los pocos resultados obtenidos no podemos realizar una
asociación con el clima en el estudio de Perú. En cambio, los reportes en mi estudio
fueron altos, entonces, yo podría tal vez asociar la humedad causada por la
precipitación en temporadas frías como un factor de riesgo; a pesar que detrás del
clima, existieron factores con mayor fuerza de asociación que al fín y al cabo
fomentaron el desarrollo de un brotes.

Johnny- Perú: Respecto a lo que dice mi compañera, yo creo que otro de los
motivos por el cual, en mi artículo se aisló muy pocas veces el virus es por la
“inmunidad de bandada” desarrollada después de la migración, y la cual repercute
en la tasa de replicación y posterior eliminación de viriones infectivos, disminuyendo
el porcentaje de aislamiento del virus en el laboratorio. Lo que me hace pensar que
la asociación de la inmunidad de bandada podría ser fuerte con respecto a la
asociación con el clima.
Carolina- Países Bajos: Ahora, yo quería preguntarle a Thalyta, acerca de que la
OIE recomienda como prueba de tamizaje a la inmunodifusión en agar gel. ¿Tu
recomendarías su uso en el contexto de Perú?

Thalyta- Irán: Bueno, la prueba de inmunodifusión en agar gel en general tiene

bastantes complicaciones. Pues no tiene una especificidad muy alta, y además solo
detecta la IgG, lo que significa que si nosotros tomamos la prueba en un estadío
agudo de la enfermedad, nos saldrá un resultado negativo, pero no es porque la
prueba no sirva, sino es por el tipo de anticuerpo que detecta. Si pides mi opinión,
yo utilizaría mejor una ELISA indirecta pues esta prueba es capaz de detectar tanto
IgG como IgM; y para mí es una mejor prueba de tamizaje.

Johnny- Perú: Claro, te doy toda la razón compañera. Ahora, quería preguntarte
Thalyta, acerca de ¿Qué significó para Irán la alta prevalencia de IA en las aves?

Thalyta- Irán: Bueno, esos resultados en realidad han causado bastantes

problemas a Irán. Hay una moderada mortalidad de las aves de producción por ser
un virus de baja patogenicidad, lo que genera grandes pérdidas económicas, pero
además el H9N2 representa un problema zoonótico al haber reportes de este virus
en humanos. Esto genera que muchos países no quieran importar productos Irán.
Pues, a pesar que es un virus de baja patogenicidad, le da a Irán una mala
reputación; y si no fuera endémico de IA estaría segura que más países
comercializarían con Irán.

Carolina- Países Bajos: Y a pesar de la alta prevalencia, mencionaste que tu

artículo era el primer informe dado en granjas de aves de pavos, codornices y
perdices; eso da mucho que decir acerca de la vigilancia epidemiológica de Irán.

Johnny- Perú: Claro, la implementación de medidas de bioseguridad; estimulación

de una mayor vigilancia epidemiológica y la vacunación en aves son procedimientos
que deben fomentarse en Irán para prevenir riesgos zoosanitarios.

Thalyta- Irán: Colegas, pero respecto al problema en los Países Bajos,

mencionaste que hubieron brotes en aves de corral después de la muerte masiva de
aves silvestres. Entonces, para evitar brotes en aves de producción ¿Ustedes no
creerían que sería mucho más fácil eliminar a las aves silvestres?

Johnny- Perú: Yo considero que tal vez podría funcionar, muchos países en
realidad ya han realizado estas prácticas, sin embargo no estoy al tanto de los
impactos secundarios que pueda generar.

Carolina- Países Bajos: Eso es porque ustedes solo hablan acerca de los impactos
que se podría generar en los sistemas de producción. Pero hay otros sectores que
se verían afectados, inclusive otros basados también en la economía como el
turismo. Además, las aves silvestres pueden producir beneficios a las economías y
a la sociedad, en cuanto a control de plagas, cacería y turismo.
No se recomienda tratar de contener la propagación sacrificando a grandes
cantidades de aves silvestres porque esta medida además de ser muy costosa
afecta la dinámica poblacional, cadena alimenticia, y no es eficaz. Además, el
impacto más grande es la dispersión de aves infectadas en zonas más amplias
incluídas ciudades ¿Consideran eso factible?
Es más efectiva realizar una vigilancia epidemiológica centralizada en una zona, que
hacerla en múltiples zonas a consecuencia de esta medida. Además, de poner en
riesgo a comunidades humanas y de otros animales. Pero además las aves
silvestres al estar en contacto con otros animales estimularían la variabilidad
genética.
Y considero que hay formas más eficaces de combatir el virus, como incrementar la
bioseguridad y contener más estrictamente los desplazamientos ilegales o no
reglamentados de aves de corral.

Thalyta- Irán: Y Johnny, ¿que significó los resultados de tu artículo en tu país?

Johnny- Perú: La verdad, solo demostró que cepas de baja patogenicidad circulan
en el Perú, pero habría la probabilidad que alguna vez podamos aislar un virus de
alta patogenicidad. Pero al comparar los resultados obtenidos por el artículo de los
países bajos, creería que es importante que Perú intensifique los programas de
vigilancia epidemiológica a aves silvestres, ya que están sufriendo tasas de
mortalidad sin precedentes.

Thalyta- Irán: Ahora que tocas el tema de aves silvestres, he identificado

Charadriformes tanto en tu artículo como el de Carolina. La literatura revisada indica
la infección común de esta especie. Como en ambos artículos hallaron
Charadriiformes, ¿sería prudente decir que las cepas de IA de Países Bajos pueden
llegar al Perú a través de la ruta migratoria?

Johnny- Perú: Pues no, porque a pesar de que los Charadriiformes son aves
migratorias, sólo migran a nivel continental, no a manera intercontinental. Entonces,
las cepas de influenza aviar pertenecientes a Charadriiformes de Países bajos no
pueden ser introducidas a través de la ruta migratoria de esta ave; sin embargo, por
el comercio ilegal de estas aves es posible que sí; asimismo por interacciones con
hospederos intermedios que tengan contacto con estas aves.

Thalyta- Irán: Respecto a las muestras; en tu artículo de Perú hicieron uso de

muestras de heces; a diferencia del artículo de Carolina, donde se hizo frotis de
tráquea y cloaca, y en el caso de mi artículo de Irán la muestra fue suero
sanguíneo. ¿Respecto a ello, consideran que pudo tener un impacto en los
resultados?
Carolina- Países Bajos: De hecho si; según la literatura, la muestras sanguíneas,
tienen menor probabilidad de contaminación porque sale la muestra sale
directamente de la vena alar, procedimiento que hicieron en el artículo de Irán y que
dá mucha más confiabilidad en los resultados; a comparación del artículo de Perú
donde las muestras fueron las heces, heces del suelo que pudieron contaminarse
con virus del ambiente, heces de otras aves, etc; habiendo posibilidad de muestras
positivas que no pertenecían necesariamente al ave que se indicó. Finalmente,
respecto al frotis usado en mi artículo, clínicamente es más confiable, pero las
pruebas hematológicas son más confiables.

Johnny- Perú: Claro, eso me quedó claro. Ahora, quería preguntarle a Carolina,
qué tan importante fue el uso de la prueba de PCR en tu artículo. Osea, ¿hubo
razones por las cuales usaron esa prueba además de la alta especificidad y
sensibilidad que tiene?

Carolina- Países Bajos: Si, de hecho sí. Se usó además porque proporciona datos
filogenéticos que permiten realizar estudios moleculares entre los diferentes brotes
de influenza aviar y de esta manera podemos vincularlos, además de poder saber
de donde provienen las cepas aisladas. Este método tiene como ventaja adicional
que existe muy poca posibilidad de contaminaciones cruzadas, pues los resultados
se obtienen en tiempo real.

Carolina- Países Bajos: Yo quería preguntar también, me he dado cuenta que a

comparación de mi artículo, ustedes usaron la prueba inhibición de la aglutinación
antes del PCR. ¿Me preguntaba el por qué?

Thalyta- Irán: Lo que sucede es que la presencia de otros virus capaces de

aglutinar como el de Newcastle es recurrente, entonces en el artículo de Johnny y
en otras revisiones fue importante hacer esa prueba, más que nada para diferenciar
los virus de IA. Pero además en el caso de mi artículo de evaluación a aves de
corral, fue usado por la alta especificidad que esta prueba tiene para identificar
anticuerpos, entonces, sí fue importante el uso de esta prueba.

Johnny- Perú: Ya para terminar, ¿cuáles fueron los factores de riesgo identificados
en sus artículos respecto a la influenza aviar?
Sobre mi artículo yo podría decir que un factor de riesgo para la introducción de la
influenza aviar es la migración de aves silvestres, ustedes. ¿qué me podrían decir
acerca de sus artículos?

Carolina - Países Bajos: En el caso de mi artículo, los factores de riesgo que pude
identificar fueron en primer lugar la migración de aves silvestres, porque estas viajan
en diferentes direcciones y destinos, al hacer esto, son expuestas a cepas de otras
países, se infectan y al regreso de la migración la densidad de las aves se hace
mayor, asimismo la densidad y variabilidad viral, lo cual genera que al estar tantas
cepas presentes la recombinación genética se haga exponencial, entonces se crean
nuevas cepas, que en este caso tuvieron la capacidad de causar alta mortalidad en
las aves; por otro lado Holanda es un país que tiene muchas lagunas, está cerca de
la costa, y tiene humedales con una gran diversidad de aves silvestres, y en este
caso, hablando en general, los patos acuáticos son los que predominan en estas
áreas y dan oportunidad a la diseminación de este virus. Y para terminar según el
artículo, los profesionales comentaron que años anteriores no se notificó con
responsabilidad cuando había muertes masivas de las aves, lo que recalca que no
han cumplido al cien porciento con las medidas de seguridad, por ello, en mi articulo
la calidad de la notificación de las muertes de aves silvestres durante el brote de
H5N8 de 2016 y 2017 mejoró enormemente en comparación con brotes anteriores,
cuando los nombres de las especies, las tasas de mortalidad y los patrones
espacio-temporales de muerte rara vez se registraban.

Thalyta- Irán: Los factores de riesgo que pude identificar en mi artículo fue la
importación de aves de países en los cuales los brotes de IA son constantes como
por ejemplo China, y Asia en general. Otro factor de riesgo fue que las granjas de
aves en realidad estaban muy cerca una de las otras. Otro factor de riesgo fue la
deficiente bioseguridad de las granjas. Además, quisiera mencionar que la vigilancia
epidemiológica de Irán respecto a la influenza aviar era pésima.
Bueno, terminamos con la discusión y ahora pasamos a las conclusiones.

Diapositiva: Conclusiones
Bueno, como conclusión tenemos:
- La susceptibilidad de las especies aviares al virus de IA es volátil y depende de la
capacidad de variabilidad genética del virus, por lo cual se debe intensificar la
vigilancia epidemiológica no sólo en los sistemas de producción de aves de corral,
sino también en las zonas donde habitan las aves silvestres, considerando a estas
últimas no sólo como agentes capaces de introducir el virus a una zona, sino
también como poblaciones susceptibles a la influenza aviar.
- La elección de las medidas de prevención en un país depende del contexto que
atraviesa, tomando en cuenta el contexto sanitario, cultural y económico; asimismo
- La buena implementación de medidas de bioseguridad, protocolos sanitarios,
control epidemiológico, la concientización poblacional y la notificación rápida son
factores que disminuyen la prevalencia e impactos en general dada por la influenza
aviar.
- La estacionalidad trae consigo factores que podrían o no favorecer la
supervivencia y replicación del virus; así como la infección masiva de aves
silvestres.
- La migración de aves silvestres cumplen un rol importante en la diseminación del
virus de influenza aviar en el mundo, por lo cual debe estudiarse las rutas y
dinámica poblacional de la migración con la finalidad de predecir las posibles zonas
vulnerables para prevenir y controlar posibles brotes.
- La elección de pruebas serológicas y/o de diagnóstico dependen de la
especificidad y sensibilidad que presenten las mismas, dependen también del
contexto del estudio, población y especie aviar a evaluar y además de la
disponibilidad económica que se presente al momento del estudio.
- Los impactos que genera la influenza aviar en los países depende de la
patogenicidad del mismo; pudiendo provocar desde leves enfermedades en aves de
corral, hasta muertes masivas en aves en general, restricciones comerciales y
grandes pérdidas económicas.
- La cercanía a humedales y entre sistemas de producción, la migración, el clima,
clandestinidad, y la importación de aves de dudosa procedencia, entre otros
factores, constituyen factores de riesgo de infecciones por el virus de IA.