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MODULO II: MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA, UROANÁLISIS Y CITOLOGÍA EN SALUD

INSTITUTO SUPERIOR TECNOLÓGICO


“PERÚ JAPÓN”

CARRERA PROFESIONAL DE TÉCNICA


ENLABORATORIO CLÍNICO

INFORME DE PRACTICAS PRE PROFESIONALES

MODULO II:

MICROBIOLOGÍA PARASITOLOGÍA, UROANÁLISIS Y CITOLOGÍA


EN SALUD PUBLICA (366 HORAS)

ESTUDIANTE:

OCMIN MENDOZA DEIVI

LUGAR DE PRACTICA:

CENTRO MÉDICO “NEILL M ROMAN ROBLES”

RUC: 29392331850

ACTIVIDAD ECONOMICA AL QUE SE VINCULA:

SECTOR SALUD

RESPONSABLE DE LA EMPRESA:

Lic. RODRIGUEZ GARCÍA JESUS ALBERTO

FECHA DE INICIO:

18/10/2021

FECHA DE TÉRMINO:

09/12/2021

CHACHAPOYAS

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DEDICATORIA

A mis familiares por haberme forjado como la

persona que soy; muchos de mis logros se los

debo a ellos, me motivan constantemente

para lograr mis anhelos.

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INDICE

PAG.

I. PRESENTACION……………………………………………………………………... 04

II. DATOS GENERALES………………………………………………………………... 05

III. CAPACIDADES TERMINALES……………………………………………………. 06

IV. ASPECTO TECNICO DE LA PRACTICA………………………………………… 06

CAPACIDAD N° 01…………………………………………………………………… 06

CAPACIDAD N° 02…………………………………………………………………… 12

CAPACIDAD N° 03…………………………………………………………………… 15

CAPACIDAD N° 04…………………………………………………………………… 16

CAPACIDAD N° 05…………………………………………………………………… 22

CAPACIDAD N° 06…………………………………………………………………… 22

CAPACIDADES LOGRADAS ………………………………………………………..39

V. CONCLUCIONES Y RECOMENDACIONES………………………….………….. 44

VI. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA…………………………………………………... 45

VII. ANEXOS……………………………………………………………………...………... 46

VIII. IMÁGENES DE LA PRACTICA ……………………………………………………. 47

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PRESENTACION

El presente Módulo se elaboró para describir las técnicas de análisis clínicos realizadas

durante el periodo de prácticas profesionales correspondientes al Módulo II, el que

está orientado al estudio de los Métodos y Técnicas de estudio Microbiológico; en este

se realiza el aislamiento de bacterias, levaduras, hongos filamentosos y parásitos a

partir de muestras biológicas patológicas tales como; heces, orina, secreciones, y

líquidos.

La experiencia de prácticas pre profesionales tuvo lugar en el Centro Médico “Neill

M. Román Robles” la que ofrece servicios de ayuda al diagnóstico en las áreas de

hematología, microbiología, inmunología, bioquímica y uroanálisis de carácter

privado y asistencial

Aquí se maneja una gran diversidad de muestras en las diferentes áreas, destacando

como muestra principal sangre venosa periférica en sus diferentes derivados de

fraccionamiento (suero, plasma, elementos formes) así como de orina, heces, esputo

entre otros. En definitiva, en un laboratorio clínico se puede analizar un gran abanico

de muestras con el objetivo de encontrar un buen diagnóstico y el mejor tratamiento

para el paciente. Sin embargo, es importante que todas las personas que trabajen en

esta área cumplan con una serie de requisitos de seguridad.

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II. DATOS GENERALES

2.1 NOMBRE DEL ESTUDIANTE:

OCMIN MENDOZA DEIVI

2.2 CARRERA PROFESIONAL:

TÉCNICO EN LABORATORIO CLÍNICO

2.4 MODULO PROFESIONAL:

MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA, UROANÁLISIS

Y CITOLOGÍA EN SALUD.

2.5 LUGAR DE PRÁCTICAS:

CENTRO MÉDICO “NEILL M. ROMÁN ROBLES”

2.6 FECHA DE INICIO : 18/10/2021

2.7 FECHA DE TÉRMINO : 09/12/2021

2.8 TOTAL DE HORAS ACUMULADAS:

366 HORAS

2.9 JEFE O AUTORIDAD BAJO CUYO ORIENTACION Y/O


ASESORAMIENTO SE REALIZA LA PRÁCTICA:

LIC. RODRIGUEZ GARCIA JESUS ALBERTO


JEFE DEL ÁREA DE LABORATORIO

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III. CAPACIDADES TERMINALES:

MICROBIOLOGIA PARASITOLOGIA, URO ANALISIS Y CITOLOGIA

EN SALUD

3.1 Entender la anatomía y fisiología renal y realizar el análisis cualitativo, cuantitativo,

bioquímico y de sedimento en muestras de orina seleccionando el material y reactivos

adecuados.

3.2 Analizar los diferentes grupos de microorganismos patógenos, susceptibles de ser

recuperados a partir de muestras biológicas.

3.3 Demostrar y ensamblar correctamente de acuerdo a las especificaciones técnicas de

instrumentos de microscopia.

3.4 Analizar los conceptos de limpieza, desinfección y esterilización aplicados a los

procedimientos realizados en el laboratorio de microbiología.

3,5 Realizar técnicas de aislamiento, identificación y recuento de microorganismos,

empleando los equipos y reactivos indicado, en función al parámetro a determinar.

3.6 Realizar técnicas adecuadas de estudio parasitológico, tomando en cuenta las normas

de bioseguridad.

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IV. ASPECTOS TECNICOS DE LA PRÁCTICA

CAPACIDAD A LOGRAR N° 01

ENTENDER LA ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA RENAL Y REALIZAR EL ANÁLISIS

CUALITATIVO, CUANTITATIVO, BIOQUÍMICO Y DE SEDIMENTO EN

MUESTRA DE ORINA SELECCIONANDO EL MATERIAL Y REACTIVO

ADECUADO.

ANATOMIA Y FIOSIOLOGÍA DE LOS RIÑONES

El sistema urinario humano es un conjunto de órganos encargados de la producción,

almacenamiento y expulsión de la orina.

A través de la orina se eliminan del organismo los desechos

nitrogenados del metabolismo (urea, creatinina, ácido

úrico) y otras sustancias tóxicas. El aparato urinario

humano se compone de 2 riñones y un conjunto de vías

urinarias. El riñón produce la orina y se encarga del

proceso de osmorregulación. La orina formada en los riñones es transportada por los

uréteres hasta la vejiga urinaria donde se almacena hasta que sale al exterior a través de

la uretra durante el proceso de la micción. La unidad básica de filtración se denomina

nefrona, cada riñón tiene alrededor de 1 000 000 de nefronas.

INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO

La infección del tracto urinario (ITU) es considerada generalmente como la existencia de

microorganismos patógenos en el tracto urinario con o sin presencia de síntomas. El

origen bacteriano de la ITU es el más frecuente (80%-90%); en este caso, la definición

exacta exige no solo la presencia de gérmenes en las vías urinarias, sino también su

cuantificación en al menos 105 unidades formadoras de colonias (UFC)/ mL de orina. Sin

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embargo, varios estudios han establecido que un tercio o más de los pacientes,

mayoritariamente mujeres sintomáticas, tiene conteos de UFC por debajo de este nivel y

presentan ITU. En los hombres –tienen menor probabilidad de contaminación–

sintomáticos, se considera como sugerente de infección una cifra de 103 UFC/mL.

EXAMEN COMPLETO DE ORINA (ECO)

El Uroanálisis, consta de 3 exámenes que se realizan en un orden específico, para que los

resultados sean lo más fiable posible. El orden en que se realiza es el que sigue:

− Examen Físico macroscópico (Color, Olor, Transparencia y Viscosidad).

− Examen Químico (Densidad, pH, Proteína, Glucosa, Cuerpos Cetónicos, Bilirrubina,

Urobilinógeno, Nitritos, Sangre y Leucocitos).

− Examen del Sedimento Urinario (Estructuras Organizadas, Estructuras No

Organizadas).

1. MATERIALES

1.1 Material biológico

Muestras de orina, previa orientación al paciente para recogerla

1.2 Materiales de laboratorio

- Láminas portaobjetos

- Láminas cubreobjetos

- Tubos de ensayo

- Tiras reactivas.

- Gradilla

1.3 Equipos

- Centrífuga

- Microscopio

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2. PROCEDIMIENTO

EXAMEN FÍSICO MACROSCÓPICO

Consiste en evaluar el aspecto físico de la orina, el cual se realiza a simple vista o en

forma macroscópica e incluye: color, aspecto y densidad.

• Color: el color normal va desde el cristalino al amarillo oscuro, Esta coloración es

dada principalmente por el pigmento urocromo, aunque puede variar por diferentes

patologías. Puede verse de color rojizo sanguinolento, por el consumo de betarragas

y sangrados o anaranjado por el metabolismo de algunos antibióticos, también

puede tener un color oscuro; en los casos de patologías como la coluria

• Aspecto: puede ser trasparente, ligeramente turbio o turbio. La orina se muestra

turbia por la presencia de los elementos formes que puede presentar; mientras más

elementos formes; más turbia. Puede ser a la presencia de leucocitos, pus, células

epiteliales, filamentos mucoides, gérmenes en abundancia, cristales, etc

• Densidad: varía desde 1.010- 1.030.

• Refleja la capacidad del riñón de concentrar o diluir la orina.

EXAMEN QUÍMICO

Las cintas reactivas son tiras plásticas con cojinetes absorbentes impregnados con

diferentes productos químicos que, al tomar contacto con orina, producen reacciones

químicas que generan cambios de color del cojinete. De esta manera, se obtienen

resultados cualitativos y sami-cuantitativos dentro de segundos a minutos mediante

simple pero cuidadosa observación, se detecta la presencia de: Ácido ascórbico,

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Leucocitos, Nitritos, Urobilinogeno, Proteínas, Glucosa, Cuerpo cetónicos,

Bilirrubina, PH y Densidad.

Se realiza de la siguiente manera:

• Primero colocamos en un tubo de ensayo aproximadamente de 10 a 12 ml de

orina, luego introducimos la tira reactiva en la muestra por un espacio de 1 a

2 segundos y retiramos inmediatamente. En seguida se deja reposar la tira por

un minuto y se procede a realizar la lectura comparando los colores de las

bandas de reacción con la banda control del frasco.

EXAMEN MICROSCÓPICO O DE SEDIMENTO URINARIO.

Se sigue la siguiente técnica.

a. En el tubo de ensayo se coloca la orina, siempre calibrando con otro tubo

del mismo calibre y se lleva a centrifugar de 3.000 a 3.500 rpm x 5

minutos.

b. Transcurrido el tiempo se retira los tubos de la centrifuga y se elimina

completamente el sobrenadante.

c. Luego se homogeniza el tubo de ensayo para reunir el sedimento y se

coloca una gota sobre una lámina portaobjeto y se cubre con una laminilla.

d. Finalmente se lleva al microscópica, primero se enfoca con el objetivo de

10x y para la lectura con el objetivo de 40x.

Dentro de los Elementos formes que he observado durante la práctica en los

exámenes completos de orina cabe mencionar a los leucocitos, hematíes, células

epiteliales, bacterias, espermatozoides; también he observado cristales tales como

oxalato de calcio, ácido úrico, fosfato triple, cristales amorfos nitritos.

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LOGROS

• El color no tiene nada que ver con el aspecto; orinas de aspecto turbio, no siempre

eran un amarillo fuerte.

• Si marcaba nitratos positivos que se evidencia por un color rosa en la tira reactiva,

era muy posible que en el sedimento viera bacterias, pero cuando era Nitrito

negativo encontraba muchas veces bacterias en el sedimento

• En el cuadro muestro los cristales que con mayor frecuencia observé durante mis

prácticas.

• También observe levaduras, leucocitos y


bacterias en varias oportunidades.
• En cierta oportunidad confundí los glóbulos
rojos con levaduras, pero en adelante ya sabía
diferenciarlos.

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CAPACIDAD LOGRADA N° 2.
ANALIZAR LOS DIFERENTES GRUPOS DE MICROORGANISMOS

PATOGENOS, SUSCEPTIBLES DE SER RECUPERADOS A PARTIR

DE MUESTRAS BIOLÓGICAS

Los microorganismos como las bacterias, levadurasy hongos filamentosos

generalmente se aislan mediante medios de cultivo artificiales, que son sustancias

nutritivas que permiten el crecimiento de estos para luego identificarlos, los aislamos

de muestras de orina, heces, screción faringea y secreción vaginal son los de mayor

frecuenia.

MICROORGANISMOS AISLADOS DE INFECCIONES URINARIAS

En más del 95% de los casos, un único microorganismo es el responsable de la ITU.

El agente etiológico más frecuente de ITU en ambos sexos es la Escherichia coli,

responsable del 75% a 80% de casos; el 20% a 25% restante incluye microorganismos

como: Staphylococcus saprophyticus, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Klebsiella

sp., Streptococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa. En el caso de la ITU

complicada y nosocomial, la E. coli sigue siendo el principal agente causante, pero la

presencia de Klebsiella sp, Citrobacter y Pseudomonas aeruginosa y de gérmenes

grampositivos como Staphylococcus epidermidis meticilinorresistente y Enterococcus

sp. está aumentada,

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INFECCIONES GASTROINTESTINALES BACTERIANAS.

Se pueden distinguir dos grupos según la patología que ocasionan: las salmonelas

entéricas (Salmonella enterica serotipo Enteritidis, Typhimurium) que dan lugar a

cuadros de gastroenteritis, y las salmonelas tíficas (Salmonella

enterica serotipo Typhi y con menos frecuencia, los serotipos paratyphi A, paratyphi

B y paratyphi C), que ocasionan cuadros febriles sépticos y, a veces, diarrea.

Otros microorganismos que causan infecciones intestinales son los Enteroparásitos

tales como Giarda lamblia y Entamoeba histolytica que son protozoario frecuentes,

también tenemos helmintos como Ascaris lumbricoides, Trichuris trichuria y Taenia

solium.

MICROORGANISMOS PATÓGENOS DEL TRACTO

RESPIRATORIO SUPERIOR

Más del 90% de las infecciones respiratorias superiores (IRS) son víricas y no por

bacterias. La infección simultánea por bacterias y virus puede agravar el curso de la

enfermedad, la mejor descrita es el sinergismo entre el virus influenza y Streptococcus

pneumoniae. Por lo general la enfermedad inicia con el rompimiento de la barrera del

tejido epitelial, probablemente como resultado de la replicación intracelular de los

virus, lo cual permite que microorganismos como S. pneumoniae, Staphylococcus

aureus o Moraxella catarrhalis se instalen como agentes infecciosos. Se han

reportado interacciones entre diversos organismo.

MICROORGANISMOS PATÓGENOS AISLADOS DE SECRECIONES

VAGINALES

Por lo general, causan secreción vaginal, malestar y olor vaginal. Sin embargo, estos

síntomas no indican necesariamente una infección; en su lugar, pueden ser el resultado

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de otros trastornos que afectan a la vagina. Por ejemplo, sustancias químicas u otros

materiales (como productos de higiene o de baño, detergentes para la ropa, espumas y

geles anticonceptivos o ropa interior sintética) pueden irritar la vagina y provocar una

secreción y malestar. En estos casos, la inflamación resultante se denomina vaginitis

no infecciosa (vaginitis inflamatoria).

Una secreción vaginal puede tener su causa en un trastorno que afecta a otros órganos

reproductores, más que a la vagina. Por ejemplo, determinadas enfermedades de

transmisión sexual (ETS), como la infección por clamidia o la gonorrea producen

secreción vaginal. Las bacterias que provocan estas enfermedades se pueden propagar

desde la vagina hacia el cuello uterino (la parte inferior y estrecha del útero que se abre

hacia el interior de la vagina) y el útero, causando enfermedad inflamatoria pélvica.

El herpes genital, que puede causar vesículas en la vulva (la zona alrededor de la

abertura de la vagina), la vagina y el cuello uterino, también causa secreción vaginal.

Las infecciones vaginales incluyen; vaginosis bacteriana, vaginitis por Trichomona

vaginales y infecciones por levaduras (candidiasis)

LOGRO

Durante mis prácticas los microorganismos que más he visto son los parásitos

en examenes directos coproparasitológicos con SSF y Lugol.

En secreciones nasofaríngea en unas oportunidades se aisló Streptoccus del

grupo “A”. Los virus no se pueden aislar en medios artificiales como la

mayoría de las bacterias asi que para el diagnóstico de estos se realizaban

pruebas rápdas serológicas. Ejemplo el Sarc -2 que causa el Covid.

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CAPACIDAD A LOGROS N° 3

DESMONTAR Y ENSANBLAR CORRECTAMENTE DE ACUERDO A LAS

ESPECIFICACIONES TECNICAS LOS INSTRUMENTOS DE

MICROSCOPIA.

Somos responsables de que el microscopio se mantenga óptimo para el trabajo; y para esto

todos los días debía limpiar el microscopio cada vez que se terminaba la jornada de trabajo

así como taparlo con su funda, se nos dieron reglas claras de manipular y cuidar los

microscopios en el laboratorio, tales como no coger con losdedos los lentes, evitar

derramamientos de fluidos en la platina, etc.

No estamos autorizados para desemsamblar el microscopio, pero si conocemos sabemos

cómo se hace para una buena limpieza.

Si hubiese alguna falla o un defecto en ello, se procede a comunicar al área de

mantenimiento.

Durante mis prácticas use mucho el microscoipio en las áreas de;

Lectura de sedimento urinario.

Lectura de heces, para observar parásitos.

Lectura de BK.

Lectura de secreciones vaginales: láminas coloreadas por la técnica de

coloracion Gram.

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CAPACIDAD A LOGRAR N° 4
ANALIZAR LOS CONCEPTOS DE LIMPIEZA, DESINFECCION Y

ESTERELIZACION APLICADOS A LOS PROCEDIMIENTOS

HABITUALES REALIZADOS EN UN LABORATORIO DE

MICROBIOLOGIA.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL AREA DE LABORATORIO

La peligrosidad de un agente esta directamente relacionada con el tipo de microorganismo

y la manipulacion a la que es sometido. Por ello es básico.

Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio.

Conocer la metodología de trabajo del laboratorio.

Conocer el equipamiento del laboratorio.

Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia.

Conocer las leyes relacionadas con la seguridad biológica.

Respetar y hacer cumplir todo lo anterior.

Para que se produzca un accidente por agente biologico deben concurrir básicamente cuatro

elementos:

a. Un huesped suseptible.

b. Un agente infeccioso.

c. Una concentración suficiente de éste

d. Una ruta de transmisión apropiada.

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De todos ellos, el que mejor se pueda controlar en el laboratorio es la ruta de transmisión.

Las rutas de transmisión más comunes en el laboratorio son el aerea y la inoculación

directa, muy por encima de todas las demás, aunque la oral, la percutanea y el contacto

directo con la piel o las mucosas también son posibles.

Siendo imposible determinar a ciencias ciertas si cualquier material biológico esta

contaminado con microorganismo del grupo 2 ó 3, ciertas muestras (respiratorias, etc) en

las que sea posible que existe un microorganismo del grupo 3 deben manipularse

rutinariamente en las cabinas de seguridad Biologica (CSB).

1. MEDIDAS GENERALES

Las siguientes medidas son de obligado cumplimiento en cualquier área del laboratorio:

El acceso al loboratorio está limitado al personal autorizado.

No deben entrar en el mismo familiares ni amigos.

El personal de laboratorio debe implicarse en el cumplimiento de las normas de

seguridad.

Todas las áreas estaran debidamente marcadas con la señal de riesgo biológico y su

nivel de contención.

Las puertas y ventanas deben permaneser cerradas para mantener la adecuada

contencion biológica.

Todas las superficies de trabajo se limpiaran y se desinfectaran diariamente y

siempre que se produzca un derrame.

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Los residuos y muestras peligrosasque van a ser incinerados fuera del laboratorio

deben ser transportados en contenedores cerrados, resistentes e impermeables

siguiendo las normas espesificas para cada tipo de residuo.

El laboratorio debe permanecer limpia y ordenado y no es aconsejable utilizar los

pasillos como almacen. Simpre debe quedar un espacio libre no inferior a 120 cm

para poder evacuar el laboratorio en caso de emergencia.

El transporte de las muestras dentro o entre el laboratorio se realiza de tal manera

que, en caso de caida, no se produzca salpicaduras. Lo recomendable es hacerlo en

cajas herméticas o neveras transpotables. Estas cajas o neveras deberan ser rígidas

y resistentes a los golpes, contar con materiales absorbentes en su interior y de fácil

desinfección. Se etiquetara o identificara de forma oportuna y no podran ser

utilizadas para otros fines. Bajo ningún concepto se deben transpotar las muestras

a mano.

La ropa protectora, facilmente ajustable y confortable, asi como guantes, gafa, etc

debe estar disponible en todo momento. La ropa protectora de las áreas con nivel

de contencion 3 (batas) nunca debe ser usada fuera del área de trabajo y si se quita

debe de ser desechada automaticamente en una bolsa de material contaminado.

Jamás debe volver a ser usada.

Todo personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con

materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes cuando

se manipulen muestras o cultivos que contengan posibles patogenos.

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Los guantes siempre seran desechados antes de salir del área de trabajo . jamás se

saldra de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se cogera el telefono, se

tocaran las hojas de examen, maniquetas de las puertas, etc.

Tras quitarse los guantes, se realiza un lavado de manos.

Se usaran gafas protectoras y mascarilla faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o

aerosoles.

Se pondra extremo cuidado en minimizar el riesgo de autoinoculacion y de

generación de aerosoles.

Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al supervisor y al

jefe del laboratorio y hacerse constar por escrito.

Nadie podra trabajar en el área de tuberculosis con una prueba de tuberculina

negativa.

Esta rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realiza pipeteo automático

con material adecuado y cada trabajador será instruido para manejarlo debidamente.

En las zonas de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el

papel contaminado es muy difícil esterilizacion.

No deberan usarse lentes de contacto.

El personal con el cabello largo debe llevarlo recogido.

Comer, beber, fumar y aplicarse cosméticos esta formalmente prohibido en el área

de trabajo del laboratorio, asi como el almasenamiento de comida o bebida.

El personal debe lavarse las manos frecuentemente durante las actividades

rutinarias,tras acabar la jornada laboral y siempre antes de abandonar el laboratorio

(almorzar). Se usara un jabón antiséptico y el secado se realizara con papel.

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Las heridas, cortes en las manos, si se han producido en el laboratorio, serán

comunicado al responsable de la sección correspondiente, asi como al supervisor

de Bioseguridad que lo registrara haciendo constar todas las circunstancias. Las

heridas y cortes deben ser convenientemente vendados y después es impresendible

ponerse guantes.

2. CLASIFICACION DE LOS AGENTES BIOLOGICOS POR GRUPO DE

RIESGO:

Agentes biologicos del grupo 1.

Agrupa microorganismos que tiene escaso o nulo riesgo de provocar enfermedades

humanas. Es aquel que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un

peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y

existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.

Ejemplo: Helmintos intestinales

Agente biologico del grupo 2.

Agrupa microorganismos que pueden provoacr enfermedad humana de riesgo

moderado, si proboca una infección al personal de laboratorio, ésta tiene tratamiento y

cura.

Ejemplo: Actinomyces sp, Bacterioides sp, Enterobacterias, Shigella sp, Candida sp.

Agente biologico del grupo 3.

Agrupa microorganismos que pueden provoacr enfermedaes humanas graves. Tiene

tratamiento y cura limita. presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgos

de que se propague a la colectividad.

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Ejemplo. Histoplasma sp, Mycobacterium, Yersenia pestis, Capsulatum, Neisseria

meningitidis, Coccidioides inminitis, Chlamydia trachomatis.

Agente biologico del grupo 4.

Agrupa microorganismos que provocan enfermedades graves en el ser humano,no hay

tratamiento para su cura.

Ejemplos: virus de la inmudeficiencia humana (VHI), virus de la fiebre hemorragica

ébola

LOGROS

En todo momento he aplicado las normas de

bioseguridad.

En el tacho de bolsa roja eliminaba; algodones

con sangre, tiras reactivos, frascos de muestras,

casetes utilizados

Las muestras que mayormene he manipulado en este módulo para aislar y/u

observar microorganismos son las muestras de heces y orina y en todo momento

use mi protección personal de bioseguridad.

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CAPACIDAD A LOGRAR N° 5
REALIZAR TÉCNICAS DE AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y RECUENTO

DE MICROORGANISMOS, EMPLEANDO LOS EQUIPOS Y REACTIVOS

INDICADO, EN FUNCIÓN AL PARÁMETRO A DETERMINAR.

TECNICAS DE COLORACION EMPLEADAS EN EL AREA DE

BACTERIOLOGIA.

La observación microscópica puede efectuarse mediante el examen en fresco de una

suspensión microbiana, lo que permite visualizar microorganismos vivos y reconocer

sus movimientos, apreciar sus distintas formas, tamaños y agrupaciones, o mediante

un extendido o frotis coloreado. Las tinciones en microbiología son las primeras

herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades

infecciosas.

La tinción es un proceso por el cual las moléculas de un colorante se absorben a una

superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los

microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Hay una gran

variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes

agentes infecciosos –en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos–. La tinción

de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis

bacteriológico, mientras que la tinción de Wright se ocupa para el diagnóstico de

enfermedades muy particulares en el rubro de la parasitología. Hay técnicas tintoriales

específicas de gran utilidad, como la tinción de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el

diagnóstico de enfermedades crónicas como la tuberculosis o la tinción de azul de

lactofenol, que preserva e identifica a los componentes estructurales de los hongos.

Las diferentes tinciones en el laboratorio microbiológico tienen una utilidad

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fundamental para el diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples patologías de

etiología infecciosa.

A. COLORACION DE ZIEHL NEELSEN

Se basa en que ciertos microorganismos no son desteñidos con alcohol ácido si han

sido previamente teñidos con fucsina fenicada. A estos microorganismos se les

denomina ácido alcolhol resistentes.

Una vez realizada la decoloracion con esta mezcla se

utiliza un colorante de contraste (azul de metileno) para

poder observar las células sensibles a la decoloracion

con alcohol ácido.

Son microorganismos Ácido alcohol resistente las micobacterias, debido a la

composicion de su pared celular (tienen Ácidos micolicos). Estas tinción tiene interés

des el punto de vista del diagnóstico clínico puesto que algunos microorganismos

patógenos son ácido alcohol resistentes, tales como Mycobacterium tuberculosis y M

leprae

.A1. MATERIALES

MATERIAL BIOLOGICO

ESPUTO

COLORANTES Y REACTIVO

Fuccina fenicada

Alcohol acido

Azul de metileno

EQUIPOS

Microscopio

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OTROS MATERIALES

Láminas portaobjeto.

Asa bacteriologica.

Mechero bunsen.

Encendedor.

Marcador.

Asa de siembra.

A.2 PREPARACION Y FIJACION DEL FROTIS

Primero se pone un papel absorbente sobre la mesa de trabajo para evitar la

contaminacion.

Luego se flamea la lámina porta objeto a la llama de un mechero para

desengrasarlo.

Luego con la ayuda de un palillo de madera, se cogio partículas purolentas de

la muestra de esputo y se depositó en el centro de la lámina portaobgeto.

Seguidamente se realiza un extendido sobre el área central de la lámina con un

movimiento continuo de rotacion de adentro hacia afuera.

Hecho el frotis, se dejo secar a temperatura ambiente.

Si se desea acelerar el secado; debe colocarse la lamina cerca del la estufa

Una vez que los frotices estuvieron secos, se fijaron a la llama del mechero por

3-4 veces con el lado del extendido de esputo hacia arriba.

Cabe mencionar que todo el material y las muestras utilizadas se tratan con

fenol al 5% para luego llevarlos a la autoclave o al incinerador.

No olvide nunca que debe usar rigurosamente las mediadas de bioseguridad.

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A.3. TECNICAS DE COLORACION

A la lámina conteniendo el frotis se le agrega fucsina fenicada y se calientan

las láminas por debajo, con la llama de un mechero de alcohol, hasta que se

produzcan 3 vapores (de humo), no dejando que hierva y se deja actuar por

espacio de 5 minutos. Se enjuaga los frotis con agua corriente.

Luego se agrega la solucion decolorante (alcohol-ácido) y se deja actuar

durante 1 minuto. Se enjuaga con agua corriente.

Por ultimo se agrega el colorante de contraste azul de metileno y se deja actuar

por espacio de 1 minuto. Se enjuaga con agua corriente y se deja secar para

luego ser llevada al microscopio para su observacion.

A.4. RESULTADO

Los bacilos de la tuberculosis (BAAR) se observaron de color rojo por que cogen el
colororante fucsia fenicada.

LECTURA DE LA BACILOSCOPIA: cuantificar aproximadamnte el contenido


de bacilos mediante cruces.

INFORME DE RESULTADOS
NO SE ENCUENTRA BAAR EN 100 CAMPOS Negativo
Escribir númerode
1 A 9 BAAR EN 100 CAMPOS
bacilos
MENOS DE UN BAAR POR CAMPO EN 100
+
CAMPOS
1 A 10 BAAR POR CAMPO EN 100 CAMPOS ++
MAS DE 10 BAAR POR ACAMPO EN 20
+++
CAMPOS

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B. COLORACION GRAM

La coloracion gram, es un coloracion compuesta que permite diferenciar dos grandes

grupos de bacterias (Gram + y Gram -), según se comporten ante esta tinción.

El fundamento radica en la diferente estructura de la pared celular de ambos grupos: las

bacterias gram (+), tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared; mientras que

las bacterias gram (–) , tienen una capa de peptidoglicano más fina y una capa

lipopolisacaridica externa.

Después de la coloración de contraste las células gram negativas son rojas,

mientras que las Gram positivas permanecen violetas. La safranina puede o no

utilizarse, no es crucial para la técnica, puede ser reemplazada, sirve para hacer una

tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas.

Tras la tinción con el primer colorante (cristal violeta) se efectua un lavado con etanol

–acacetona que arrastrará al colorante solo en la Gram(-), mientras que en las Gram

(+) el colorante queda retenido y las células permaneceran violetas .

Las celulas Gram (-) se tiñen después con un colorante de contraste (safranina) para

que puedan observarse.

B.2 MATERIALES

MATERIAL BIOLOGICO

Sedimento urinario, secrecion vaginal, secrcion de herida, secrecion naso

faringea, etc.

COLORANTES Y REACTIVO

Cristal violeta

Alcohol acetona

Lugos

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safranina

EQUIPOS

Microscopio

OTROS MATERIALES

Láminas portaobjeto.

Asa bacteriologica.

Mechero bunsen.

Encendedor.

Marcador.

Asa de siembra.

B.2. PREPARACION Y FIJACION DEL FROTIS

Antes de realizar los frotices de las muestra en estudio, esteriliza el asa

bacteriológica. Luego con el asa esterelizada se toma una pequeña cantidad de

muestra y se coloca en el centro del portaobjeto y se realiza la extension en una

superficie aproximadamente de 1 a 2cm, siempre con movimientos concéntricos.

Seguidamente se dejo secar a temperatura ambiente.

Las extensiones debera ser finas y uniformes para permitir el paso de la luz a travez

de ellas

B.3. TECNICA DE COLORACION

Una vez realizados los frotis, estos se dejaron secar a temperatura ambiente.

Luego se realizó la fijacion de la muestra, esto se logra pasandolo la lámina

porta objeto conteniendo el frotis a la llama de un mechero de 3 – 4 veces.

Seguidamente se coloca la lámina sobre las barillas de coloracion.

Luego se agrega el colorante, cristal violeta, y se deja actuar por espacio de

un minuto. Luego se enjuaga con agua corriente.

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Luego se añade lugol, y se dejo actuar por espacio de dos minutos.

Luego se enjuaga con agua corriente.

Seguidmente se añade el decolorante alcohol acetona y se deja actuar por un

espacio de 30 segundos a un minuto. Luego se enjuaga con agua corriente .

Por último se grega el colorante de contraste, safranina, y se deja actuar por

30 minutos.

Se enjuaga al agua corriente.

Se deja secar y luego se llevo al microscopio para su posterior observacion

con objetivo de 100X.

B.34 INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

Las bacterias Gram positivas se observa de color violeta o morado y las bacterias

Gram negativas se observa de color rojo o rosado.

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1. PREPARACIONES DE MEDIOS DE CULTIVO QUE PERMITAN

IDENTIFICAR LAS BACTERIAS CAUSANTES DE PROCESO

INFECCIOSOS

Un medio de cultivo es una solución acuosa (bien como tal,o bien incorporado a un

coloide en estado gel), en la que estan presentes todas las sustancias necesarias para

el crecimiento y multiplicacion de los microorganismos (IN VITRO).

Tienen como objetivo aislar las diferentes especies bacterianas u hongos, para luego

proceder a su identificacion y llevar a cabo una serie de estudios complementarios.

Actualmente muchos medios se venden listos para servir en Placas y sembrar,

siembargo aún en varios laboratorio se trabaja con los medios de cultivo tradicionales

3.1 RECOMENDACIONES QUE TUVE EN CUENTA PARA SU

PREPARACION.

• Que los ingredientes deben ser medios en cantidad exacta y en un recipiente

adecuado.

• Que debe agregarse el volumen de agua necesario para disolver los ingredientes, y

que después debo añadir el resto . El agua debe de ser destilada.

• Si se trata de disolver un medio que contiene agar, sera necesario el calor.

• No se recomienda el calentamiento sobre la llama, se debe preferir el empleo del

baño maria o de vapor .

Una disolucion completa se reconose por la ausencia de gránulos de agar en las

paredes del recipiente.

3.2 PREPARACION DE AGAR MAC CONKEY.

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Todos los frascos de medios de cultivo traen en su etiqueta las cantidades del

polvo-medio para 1000ml de agua destilada asi como el procdimiento de su

preparación. Así tenemos que:

Ejemplo:

Para preparar 1000ml de agar Mc conkey se necesita 58 gramos de agar, según la

etiqueta del frasco, entonce; si necesito preparar 250ml, ¿cuántos gramos de agar

necesitaré? Para esto aplicamos la regla de tres simple.

Luego, estos 14.5 gramos lo colocamos en un matraz de vidrio, y le agregé 250ml

de agua destilada.

Procedi a calentar hasta que disuelva completamente, finalmente se esterilizó en

la autoclave a 121°C por 15 min.

Volumen final: 250 ml de agar Mack conkey.

ENTONCES; Pesé 14.5 gramos de agar y lo disolvi en 250 ml de agua destilada.

3.3 TÉCNICAS O MÉTODOS DE SIEMBRA EN MEDIOS DE CULTIVO.

La siembra es el procedimiento por el cual se pone en contacto el microorganismo

con un medio de cultivo, para que en condiciones optimas de temperaturas y

tiempo de incubacion puede desarrollase y multiplicarse invitrio.

Siempre lo debo trabajar cerca del mechero de bunsen para flamear la boca del tubo
o la placa petri con el medio, antes y despues de sembrar para evitar
contaminaciones.

Para sembrar en placa petri es importante que la superficie del medio este
completamente seco, para conseguir esto las placas deben quedar en reposo durante
2 horas.

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A. MATERIALES.

➢ Muestra para cultivo

➢ Tubos y Placas petri con medios de cultivo.

➢ Asa de siembra.

➢ Mechero de Bunsen.

E. MÉTODOS.

3.3.1 Método por inoculacion en medio líquido

➢ El asa de siembra debe ser esterelizada en la llama (flameada) y enfriar antes de

tomar la muestra.

➢ Tomar con el asa de siembra una cantidad suficiente de la muestra.

➢ Introducir el asa de siembra con la muestra hasta el fondo del tubo con medio

líquido, sin tocar las paredes del mismo.

3.3.2 Metodos por estria en medio solido en tubo.

➢ El asa de simbra debe ser esterelizada en la llama (flameada), y enfriar antes de

tomar la muestra.

➢ Tomar con una pequeña muestra con el asa de simbra.

➢ Deslizar el asa de siembra suavemente en zigzag en el tubo con medio sólido,


empezando desde el fondo del tubo.
3.3.3 Métodos por dispensión agotamiento en medio sólido en Placa petri

➢ El asa de siembra debe ser esterelizada en la llama (flameada), y enfriar antes de

tomar la muestra.

➢ Tomar con el asa de siembra un cantidad suficiente de muestra.

➢ El asa debe ser sostenida suavemente entre los dedos con cuidado de no hundir

en el medio.

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➢ Sembrar en el medio sólido en placa Petri, dividido en cuatro cuadrantes,

inoculando la muestra en cantidades sucesivamente menores en cada cuadrante,

cada cuadrante presentará diferentes distribución de colonias.

3.3.4 Método por puntura en medios semi sólido en tubo

➢ La aguja de la platinao debe ser esterilizada a la llama (flameada), y enfriada.

➢ Tomar con la aguja de platino (o alambre recto), una pequeña cantidad de

muestra.

➢ Sembrar en el agar semisólido introduciendo la aguja en forma vertical. Debe

tenerse cuidado en hacer que el trayecto de salida sea el mismo que el de

entrada.

3.4 EL URCULTIVO

Una muestra de orina normalmente no debe tener bacterias o si tiene debe ser una

mínima cantidad, el doctor solicita realizar un urocultivo cuando el paciente

presenta regular cantidad de germenes en una examen de orina completa.

Para hacer el cultivo de la orina, llamada tambieén urocultivo, el paciente no debe

haber recibido antibioticos por lo menos cinco días antes del examen.

Los medios de cultivo sirven para aislar microorganismos que se encuentran en

escasa cantidad y decidir cuál sera el antibiotico más efectivo en el tramiento de la

infeccion (antibiograma).

Los medios de cultivo pueden ser:

➢ Medios solidos: Agar en placas petri o en tubo. (Ejemplo; agar LIA, TSI, etc)

➢ Medio líquidos: Tubos con caldos de cultivo ( Ejemplo caldo nutritivo).

Los microorganismos que frecuentemente se encuentran en la orina infectada:

E.coli, otros; Pseudomona aeruginosa, Enterococo, citrobacter, klebsiella.

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Se acepta que un recuento superior de 100 000 bacterias por ml de orina, indica

infeccion de las vias urinarias.

A. MATERIALES

➢ Muestra de orina.

➢ Microscopio.

➢ Placas de agar Mac conkey.

➢ Placas de agar sangre.

➢ Asa de siembra estandar (calibrada).

➢ Mechero

B. METODO

➢ Tomé la orina sin centrifugar con el asa de siembra calibrada (cada asa

suministra 0,01 o 0,001 ml de orina)

➢ Sembrar la orina por dispersion agotamiento con una asa de siembra

calibrada, sobre una placa de agar sangre y otra sobre una placa de agar de

Mac conkey.

➢ Rotular e incube a 37°c.

C. LECTURA E INTERPRETACION
➢ Se detalla las características de las colonias en agar Mac conkey u en el

agar sangre.

➢ Seleccionar colonias del agar Mac conkey y repicar (resembrar) en los

medios de diferenciación bioquímica (TSI, citrato, uria,etc). Esto permite

identificar la bacteria que estahaciendo la patología.

Para conocer el número de microorganismos en un ml de orina, se cuentan las

colonias y el resultado se multiplica por 100 si se usa asa de 0,01ml o por 1000

si se uso asa de 0,01 ml. El resultado sera el número de bacterias por ml de

orina, considerandose:

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Cuando el número de colonias sobrepasa de 100 000 bacterias por ml de orina,

al informar no interesa precisar el número exacto de bacterias, solo debe

informarse “mas de 100 000 bacterias por ml de orina”.

D. El ANTIBIOGAMA

El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la

susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de

antibióticos. Miuller hinton agar, es el medio recomendado universalmente

para la realización de la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos

A. MATERILAES

MATERIAL BIOLOGICO

➢ Crecimiento bacteriano de medios deferenciales

OTROS MATERIALES

➢ Placas servidas con medio Miuller hinton

➢ Discos de antibióticos, según crecimieto bacteriano

➢ Mechero

➢ Agua destilada

➢ Hisopo esteril

➢ Asa de siembra

➢ Tubos de ensayo

EQUIPO

➢ Incubadora

B. PROSEDIMIENTO

➢ Con el asa de siembra sacar una colonia del crecimieto bacteriano

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➢ Colocar la colonia en un tubo de ensayo con aproximadamente 50ul de

agua destilada.

➢ Con el hisopo esteril rmover hasta obtener una solución ligeramente

turbia y homogenea

➢ Sembrar en Miuller hinton con este hisopo

aplicando la técnina de estrias, entoda la

superficie del medio.

➢ Luego colocar los discos; 5 en cada placa. Considere 2 placas.

➢ Incubar a 37°C por 24 horas.

INTERPRETACION DE RESULTADOS

Después de la incubación, registrar el diámetro de las zonas de inhibición o la

minima concentración inhibidora. Interpretar los resultados como sensibles,

intermedios o resistent de acuerdo a una tabla normativa standarizada

3.5 TÉCNICA DE OBTENCION DE MUESTRA DE HONGOS

Generalmente los hongos que se aislan en el laboratorio son los hongos filamenosos

del grupo de los Dermatofitos que atacan la queratina del cuerpo; ya sea uñas, piel o

cuero cabelludo

A. MATERIALES

MATERIAL BIOLOGICO

➢ Raspado ed uñas, piel o escamas de cabello infectado

EQUIPO

➢ Microscopio

REACTIVOS Y COLORANTES

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➢ KOH al 10%

➢ Azul De Lactofenol

OTROS MATERIALES

Portaobjetos

Hisopos

Placas Petri esteriles

Frascos esteriles de boca ancha descartables

Pinza de depilar

Tigera

Hoja de visturi esteril

Guantes descartables

3.5.1 OBTENCIONDE ESCAMAS DE MUESTRA DE PIEL

Lo primero que se realizó fue la asepsia del sitio donde se va a recolectar la

muestra con algodón y alcohol al 70% y esperamos a que se evapore

completamente.

Luego cogimos el bisturí y procedí a realizar el raspado de la escama de la

piel de los bordes de la lesión, estas escamas se recolectaron en una caja Petri

esteril.

En caso de lesiones humedas, eritematosas y con exudados la muestra se

recolecta con un hisopo estéril.

3.5.2 OBTENCION DE MUESTRA DE UÑAS

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Lo primero que se realizo fue la asepsia del sitio donde se va a recolectar

la muestra con algodón y alcohol al 70% y esperamos que se evapore

completamente.

Luego se cogio una hoja de bisturí y se procedio a raspar la uña, desde

el extremo distal hasta el proximal recolectando el detrito ungueal en

una placa Petri estéril.

En otros casos, fue necesario cortar la uña con tijera estril, este material

se recolecta en placas petri.

B. PROCESAMIENTO DE MUETRAS CLINICAS.

Una vez que se a obtenido la muestra se procede a realizar lo siguiente.

Sobre una lámina portaobjeto limpia y desengrasada, se coloca una gota

de KOH al 10% y luego con una pinza se cogio la muestra de la caja

Petri y se depósitó en la gota del reactivo KOH y se emulsiono.

Luego se cubrio con una laminilla cubre objeto y se llevo a flamear a la

llama de un mechero sin que hierva, esto se realiza para desnaturalizar

a las proteinas y aclarar la muestra.

Luego se llevo la preparacion al microscopio y primero se obtuvo con

objetivo de 10x para enfocar y después se pasa al de 40x para la

identificación.

En un resultado positivo, se observaron hifas, seudohifas y levaduras

de hongos.

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CAPACIDAD A LOGRAR N° 6
REALIZAR TÉCNICAS ADECUADAS DE ESTUDIO PARASITOLÓGICO,

TOMANDO EN CUENTA LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD.

1. OBTENCION DE LA MUESTRA DE HECES CON FINES DE ESTUDIO

PARASITOLOGICO

La correcta obtencion de la muestra es un prerrequisito fundamental para un buen

diagnóstico adecuado.

Para tal fin, deben considerarse los factores que contribuyen el diagnóstico presuntivo

de las parasitosis, la preparacion fisica y emocional del paciente para la toma de

muestra, los procedimientos requeridos para su obtencion, transporte y preservacion,

finalmente, su procesamiento e identificacion del agente etiologico.

CONDICIONES GENERALES

La cantidad de la muestra debe de ser 3 a 6 gramos o (tamaño de un frejol) o de una

cucharada sopera si la muestra es líquida

La muestra sera depositada en un frasco de boca ancha con tapa rosca y rotulado

corectamente con sus datos del paciente; nombres y apellidos.

Toda muestra con fines de estudio parasitológico, deben obtenerse antes del uso de

medicamento antiparasitario.

Toda muestra se recepciona con su orden de análisis.

La muestra no tiene que estar mezclada con orina o contaminada con tierra, etc.

Llevar la muestra lo más pronto posible al laboratorio.

Si el paciente no es regular en las deposiciones y ha evacuado en la noche anterior

al examen, se recomienda guardar la muestra en un lugar fresco no expuesto a la

luz solar, para que no se altere las formas parasitarias.

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La muestra debe ser recolectada a cualquier hora del dia. Debe ser solo una

muestra para el examen simple; en caso de muestra seriada deben ser tres muestra

una por día.

EXAMEN PARASITOLÓGICO SIMPLE O SERIADO

El examen parasitologico se realiza con la finalidad de hallar en las heces formas

parasitarias como huevos, quistes o lavas que esten afectando

la salud del paciente. Se realiza primero un examen

macroscopico en la que se observa si hay presencia de sangre,

moco o fraccines de algunos parásitos como las tenia que no

salen completas en las heces. Un examen simple es cuando el doctor solicita una

sola muestra al paciente y un examen seriado, cuando solicita tres muestras; una

por día.

1. MATERIALES:

MATERAIL BIOLOGICO

Heces

REACTIVOS

Lugol

Suero salino fisiológico

EQUIPOS

Microscopio

OTROS MATERAILES

Frasco de vidrio o plástico boca ancha tapa rosca

Palito bajalengua

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Marcador

Lamina portaobjeto, laminilla cubreobjeto

Cinta adhesiva (para la técnica de Grahan)

2. PROCEDIMIENTO

2.1 EXAMEN DIRECTO MACROSCOPIO

El examen directo o macroscopio de las heces

sirve para constatar algunas caracteristicas fisicas

de las deposiciones como son: consistencia, color,

presencia o ausencia de sangre y moco, presencia

de restos alimenticio,etc.

Ademas permite observar la presencia de parásitos redondos adultos o

tenias fraccionadas.

2.2 EXAMEN DIRECTO MICROSCOPIO

Este análisis permite observar las formas microscopicas de los parásitos,en

cualquiera de sus formas evolutivas (trofozoitos,quistes de protozoos; larvas

o huevos de helmintos). Se realiza de la siguiente manera:

Lo primero es limpiar el portaobjeto una vez limpio la lámina, agregar una

gota de lugol en un extremo del porta objeto y en el otro extremo colocar

una gota de suero salino fisiologico una vez colocado los reactivos agregar

la muestra de heces que ya esta preparada, de preferencia sacamos del centro

con un palito baja lengua y cubrimos con una laminilla cubreobjeto.

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En seguida pasamos a llevar la muestra a observar al microscopio, primero

se enfoca con el objetivo de 10X una vez enfocada se utiliza el objetivo de

40X para la identificacion y confirmacion de las formas larvarias parasitarias.

Los parásitos encontrados con mayor frecuencia fueron: Ascaris lubricoides

Hymenolepis nana, Enterobius vermicularis, Giardia lambia y Entamoeba

coli.

CONSIDERACIONES QUE SE DEBE TOMAR POR LA

CONSISTENCIA DE LA MUESTRA:

a) Cuando la muestra es diarreica o liquida:

➢ Debe tomarse una muestra del fondo del frasco.

➢ Cuando la muestra contiene moco con o sin sangre,tomar de este

moco para hacer otra preparacion, ya que aqui podria encontrarse los

elementos patógenos en mayor cantidad.

b) Cuando la muestra es formada o dura:

➢ Debe tomarse la muestra del medio y si son demaciado duras agregar

una pequeña cantidad de suero fisiologico y luego realizar la preparacion

son soluciones salinas y lugol.

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METODO PARASITOLOGICO PARA LA DETRMINACION DE


Enterobio vermicularis (TÉCNICA DE LA CINTA ADHESIVA O DE
GRAHAM)
1. RECOMENDACIONES PARA LA TOMA DE MUESTRA
➢ No se debe colocar pomadas o polvo
de talco en la región anal la noche anterior,
previa la realización del examen.

➢ No debe haber ingerido medicamentos


antiparasitarios, al menos los últimos 3 días anteriores al examen.

➢ No colocar deposición en la lámina.

➢ La toma de muestra se debe realizar a primera hora de la mañana, antes de


bañarse, orinar y/o defecar.

➢ Una persona que no sea el paciente desprenda de la lámina de vidrio la cinta


adhesiva. Aplíquela varias veces por el lado engomado en todos los
alrededores del ano y entre las nalgas.

➢ Vuelva a pegar la parte engomada a la lámina de vidrio

➢ Repita este procedimiento durante 5 días seguidos, utilizando una lámina de


vidrio diferente cada mañana.

2, TRASLADO DE LA MUESTRA

➢ Transporte cuidadosamente (evitando golpes y caídas, dado que


el material es de vidrio) hacia la Unidad de Toma de Muestras,
tan pronto haya finalizado la recolección de todas las muestras.

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CAPACIDADES LOGRADAS

1. Correcta limpieza y desinfeccion ( con lejia) de las mesas de trabajo en el

área de Microbiología.

2. Correcto lavado y esterilización de las placas Petri, en donde se tenia que

preparar los medios de cultivo.

3. Antes de la esterilizacion del material de vidrio (placas petri, pipetas,

matraces) tenia que a envolver correctamente el material con papel kraf.

4. Me familiarice y adiestre en el uso del Autoclavado para esterilizar las

placas Petri con crecimiento bacteriano antes de ser eliminadas.

5. Se me presentaron retos cuando observaba muestras de orina con elementos

que nunca habia visto, lo supere leyendo de manera extra. Vi levaduras en

muestras de orinas, ahora las identifico acertadamente

6. La práctica permitió que los preparados de heces en fresco sean correctas,

pues al pricipio los prepraba muy densas o gruesas

7. Al principio era díficil identificar a Mycobacterium tuberculosis, la

insistencia a hechos que pueda identificarlo de manera acertada.

8. Los antibiogramas parecian muy dificil, ahora mido correctamente los halos

y busco en la tabla para saber si es sensible, resistente o intermedio el

antibiotico en relación a la bacteria que crecio

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CONCLUCIONES

➢ Las correctas recomendaciones para la recoleccion de muestras biológicas

permite obtener resultados confiables.

➢ Un rápido transpote de las muestras biológicas permite que la muestra no se

contamine.

➢ Las prácticas pre profesionales nos permite adquerir habilidades y destrezas

para nuestra vida profecional.

➢ El buen uso de las normas de bioseguridad nos permite cuidar nuestra salud y

la de los pacientes.

RECOMENDACIONES

➢ Aplicar medidas de Bioseguridad en las diferentes áreas del Laboratorio

Clínico.

➢ El practicante debe informarse acerca de las normas y actividades existentes en

la Institución, para cumplir satisfactoriamente con las mismas.

➢ Realizar capacitaciones sobre la recoleccion de muestras biológicas al personal

de laboratorio.

➢ Que el personal docente de la especialidad de laboratorio clínico del I.S.P

PERU JAPÓN realice el seguimiento respectivo de las prácticas efectuadas por

el estudiante.

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BIBLIOGRAFIA

➢ ARENAS, R. 2006 MICOLOGIA MEDICA 5°EDICION

EDITORIALMEDITERANEO CHILE.

➢ LYNCH,RAPHAEL,M.2°EDICION-INTERAMERICANA; MEXICO, 1972.

METODOS DE LABORATORIO.

➢ MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO INSTITUTO

NACIONAL DE SALUD

➢ MANUEL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO PARA EL

DIAGNOSTICODE LOS PARASITOS INTESTINALES DEL HOMBRE AÑO

LIMA -2003 INS

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ANEXOS

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IMÁGENES DE LAS ACTIVIDADES REALIZADAS DURANTE EL


DESARROLLO DE MIS PRACTICAS CORRESPONDIENTES AL MODULO II
CENTRO MÉDICO “NEILL ROMÁN ROBLES”

Fig. 01 Esterilizando el asa


bacteriológica para realizar una siembra
primaria, de una muestra de orina, lo
que es llamado urocultivo.

Fig. 02 Crecimiento de Staphylococcus


aureus en agar Manitol salado, se muestra
colonias amarillas por la fermentación del
manitol, característico de esta bacteria.

Fig. 03 realizando una coloración de Zihel


Neelsen de una muestra de esputo, para
el diagnóstico de Mycobacterium
tuberculosis, .

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