Módulo: Ensayos Biotecnológicos

Tarea tema 05: Determinación de la toxicidad aguda.

Alumno: Silvia Fernández de la Puebla Gavin

Actividad: Con esta tarea se conseguirá determinar la acción tóxica aguda del detergente sodio dodecil sulfato
(SDS), sobre Dafnia magna (crustáceo marino).

Pasos a seguir:

A.- Buscar información sobre los estudios experimentales para la determinación de la ecotoxicidad de una
sustancia.

B.- Leer el guión del supuesto práctico.

C.- A partir de los datos experimentales dados en el supuesto, elaborar un informe con los apartados siguientes:

1.- Título (el indicado en el guion de la práctica).

DETERMINACIÓN DE LA TOXICIDAD AGUDA, EC50

2.- Sustancia química del ensayo.

La sustancia química del ensayo será el detergente: sodio dodecil sulfato (SDS).

3.- Organismo vivo sobre el que se ha realizado el ensayo.

Sobre el crustáceo marino: Dafnia magna

4.- Mostrar las dos tablas correspondientes a los datos experimentales obtenidos en el ensayo.

Organismos inoculados
[SDS] (mg/l) Replicado 1 Replicado 2 Total
0,0 12 10 22
0,4 12 12 24
0,8 11 11 22
1,6 11 9 20
3,2 11 10 21
6,4 13 10 23
12,8 12 10 22
25,6 10 12 22
51,2 12 8 20

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Tarea tema 05: Determinación de la toxicidad aguda.
Alumno: Silvia Fernández de la Puebla Gavin

Organismos vivos tras 48 horas de exposición

[SDS] (mg/l) Replicado 1 Replicado 2 Total
0,0 12 10 22
0,4 11 12 23
0,8 11 10 21
1,6 9 8 17
3,2 8 8 16
6,4 8 6 14
12,8 5 3 8
25,6 1 2 3
51,2 0 0 0

5.- Mostrar en una tabla la concentración, los organismos totales inoculados, los organismos totales vivos, los
organismos totales muertos y el % de mortalidad, para 48 horas (redondear para poner sin decimales).

Tras 48 horas de exposición

[SDS] Organismos Organismos Organismos Mortalidad

(mg/l) Inoculados (totales) Vivos (totales) Muertos (totales) (%)

00 22 22 0 0 ,0
0,4 24 23 1 4,2
0,8 22 21 1 4,5
1,6 20 17 3 15,0
3,2 21 16 5 23,8
6,4 23 14 9 39,1
12,8 22 8 14 63,7
25,6 22 3 19 95,0
51,2 20 0 20 100,0

0
% 𝑚𝑜𝑟𝑡𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑 = 𝑥 100 = 0
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6.- Mostrar en una tabla la concentración, la transformación de la concentración a logaritmos decimales, el

logaritmo decimal de la concentración más uno (sumar una unidad al valor obtenido del logaritmo para
asegurar que se trabaja siempre con valores positivos), el % de mortalidad y la transformación del % de
mortalidad a valores Probit según la tabla de transformación (NTP 291), para las 48 horas.

Tras 48 horas de exposición

[SDS] (mg/l) Log [SDS] Log [SDS]+1 Mortalidad (%) Probit
0 0 ,0 0
0,4 -0,40 0,6 4,2 3,25
0,8 -0,10 0,9 4,5 3,36
1,6 0,20 1,20 15,0 4,33
3,2 0,51 1,51 23,8 4,59
6,4 0,81 1,81 39,1 4,97
12,8 1,11 2,11 63,7 5,64
25,6 1,41 2,41 95,0 6,64
51,2 1,71 2,71 100,0 8,09

7.- Realizar la gráfica del % de mortalidad frente a la concentración de la sustancia ensayada, a las 48 horas.
¿Qué tipo de gráfica se obtiene?

Se obtiene una grafica lineal correspondiente a una calibración lineal externa

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Tarea tema 05: Determinación de la toxicidad aguda.
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8.- Realizar la gráfica de mortalidad en valores Probit frente al logaritmo decimal de la concentración
más una unidad (para obtener números positivos), a las 48 horas. Realizar una regresión lineal y obtener la
ecuación que relaciona la mortalidad en valores Probit con el logaritmo de la concentración más una
unidad, (log [SDS])+1.

9.- Dar a la unidad Probit el valor 5 y obtener el valor de la concentración para un 50% de mortalidad, a las 48
horas, EC50-48h.

log [SDS]+1 = 0,3018x 5 + 0,2982

log [SDS]+1= 1,8072

log [SDS]= 1,8072 -1 =0,8072

[SDS]= 6,4150 mg/l

10.- Comparar y discutir los EC50 con valores publicados. Para ello consultar la Ficha de datos de Seguridad,
de la marca comercial de reactivos químicos Sigma-Aldrich-Merck (sección 12).

Según lo establecido en la ficha de datos de seguridad, la concentración que hemos obtenido no supondría una
cantidad toxica ya que [SDS] < 308 mg/l

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