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Los colorantes fluorescentes utilizados para teñir las células se detectan con la ayuda de un microscopio
de fluorescencia. Este es similar a un microscopio óptico, excepto que la luz atraviesa dos sistemas de
filtros. El primero 1 filtra la luz antes de que alcance el espécimen y sólo deja pasar las longitudes de onda
que excitan al colorante fluorescente usado. El segundo 2 bloquea esta luz y sólo deja pasar las
longitudes de onda emitidas por el colorante fluorescente. Los objetos tenidos se ven de color brillante
sobre un fondo oscuro
MICROSCOPIO CONFOCAL
Fl microscopio contocal es un tipo especializado de microscopio de fluorescencia que construye una
imagen por barrido del especimen con un haz laser. El haz se enfoca en un
solo punto a una profundidad determinada del especimen, y un orificio en el detector
permite que solo la fucrescendia emitica desde este misto punto see riciuiad ente
imacen. el barrido der
foco: un corte óptico. Una sente de cortes opticos a diferentes protuncidades permite construir una
imagen tridimensional. Aqui se muestra el embrion de un insecto tenido
con una sonda fluorescente para actina (una proteina filamentosa). (A) La microscosia de
fluorescencia convencional genera una imagen borrosa, debido a la presencia de estruturas riucrescentes
por encima y por debajo del plano cel foco. (B) 1:
• microscoolc
confocal proporciona un corte optico que muestra con claridad las celulas individuales
En el microscopio electrónico de barrido (MEB), el espécimen, que ha sido cubierto con una película muy
delgada de un metal pesado, es barrido por un haz de electrones dirigido a un foco por bobinas
electromagnéticas que, en estos microscopios, actúan como lentes. La cantidad de electrones
dispersados o emitidos mientras el haz bombardea cada punto sucesivo de la superficie del espécimen se
mide mediante el detector, y se la usa para controlar la intensidad de los puntos sucesivos en una imagen
reconstruida en una pantalla de video. El microscopio genera imágenes llamativas de objetos
tridimensionales con gran profundidad de foco y puede resolver detalles en un rango de 2 a 20 m, lo que
depende del aparato.
MICROSCOPIO CONFOCAL
El microscopio confocal es un tipo especializado de microscopio de fluorescencia que construye una
imagen por barrido del espécimen con un haz láser. El haz se enfoca en un solo punto a una profundidad
determinada del espécimen, y un orificio en el detector permite que sólo la fluorescencia emitida desde
este mismo punto sea incluida en la imagen. El barrido del haz por el espécimen genera una imagen
definida del plano del foco: un corte óptico. Una serie de cortes ópticos a diferentes profundidades permite
construir una imagen tridimensional. Aquí se muestra el embrión de un insecto teñido con una sonda
fluorescente para actina (una proteína filamentosa). (A) La microscopia de fluorescencia convencional
genera una imagen borrosa, debido a la presencia de estructuras fluorescentes por encima y por debajo
del plano del foco. (B) La microscopia confocal proporciona un corte óptico que muestra con claridad las
células individuales.