ROSA DE BENGALA
DETECCION DE LA BRUCELLOSIS POR AGLUTINACION EN PLACA
Para diagnóstico “in vitro”
PRINCIPIO
El test de Rosa de Bengala es un test de diagnóstico rápido para la detección de
anticuerpos anti-Brucella. El reactivo consiste en una suspensión estandarizada
de microorganismos a pH ácido que aglutinan en presencia de anticuerpos anti
Brucella sp.
UTILIDAD DIAGNÓSTICA
La infección por Brucella sp. induce a una respuesta inmune de tipo humoral
con la producción de anticuerpos anti-Brucella. El reactivo de Rosa de Bengala
permite la detección de estos anticuerpos generados como consecuencia de la
infección.
Las pruebas de serodiagnóstico febril se deben realizar en paralelo junto con
cultivos adecuados para el aislamiento e identificación del organismo causal.
Una única prueba de laboratorio no permite establecer un diagnóstico. Los
resultados se han de evaluar en el contexto de todos los datos clínicos y de
laboratorio obtenidos.
REACTIVOS
Kit 100 determinaciones Ref. 99 77 09
Contiene:
1 x 5 mL reactivo Ref. 99 78 18
1 x 1 mL Control Positivo Ref. 99 46 12
1 x 1 mL Control Negativo Ref. 99 32 15
Placa de reacción y agitadores deshechables.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO
El reactivo y los controles están listos para su uso.
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO
Reactivo:Suspensión bacteriana inactivada de B. abortus, a pH ácido, teñida
con Rosa de Bengala y adicionada de fenol al 0,5%.
Control positivo: Pool de sueros de origen animal con anticuerpos anti–Brucella.
Control negativo: Pool de sueros de origen animal, no reactivos.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los componentes del kit almacenados a 2–8ºC, son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta. No congelar.
Indicaciones de alteración de los reactivos:
Presencia de partículas en el reactivo después de homogeinezar.
Desechar los controles en los que, a pesar de la presencia de azida sódica, se
observe crecimiento bacteriano.
MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio.
MUESTRA
Suero exento de hemólisis. Puede conservarse a 2–8ºC durante una semana.
Se aconseja congelar la muestra si se desea conservarla durante períodos
más prolongados. Descartar las muestras contaminadas. Las muestras deben
estar libres de precipitados, en caso contrario se pueden producir resultados
anómalos.
Manipular todas las muestras como si fueran potencialmente infecciosas.
PRECAUCIONES
Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos.
Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación
del reactivo.
El reactivo contiene fenol, y los controles azida sódica como conservantes.
La eliminación de los residuos debe hacerse según la normativa legal vigente
CONTROL DE CALIDAD
Se aconseja incluir en cada serie de tests los controles positivo y negativo que
acompañan al reactivo.
Se aconseja que cada laboratorio establezca su propio programa de control
de calidad y los procedimientos de corrección de las desviaciones detectadas.
QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.
Empresa Certificada ISO 9001 / ISO 13485
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN
Tel. ++ 34 (977) 70. 62. 30 Fax ++ 34 (977) 70. 30. 40
Revisión: 02.2017 PRO4_REG9_ROSAB_4
PROCEDIMIENTO
1. Llevar los reactivos, muestras y controles a temperatura ambiente.
Homogeneizar la suspensión reactiva con suavidad, incluso en el interior
de la pipeta del cuentagotas.
2. Colocar 40 μL del suero y 1 gota (40 μL) de controles sobre cada uno
de los círculos de reacción.
3. Añadir una gota (40 μL) de reactivo sobre las gotas anteriores y
mezclar con los agitadores desechables.
4. Balancear la placa y observar la presencia o ausencia de aglutinación
después de 4 min.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
POSITIVO: Aglutinación clara.
NEGATIVO: La suspensión permanece homogénea
VALORES DE REFERENCIA
Los valores de referencia de los anticuerpos anti-Brucella están definidos en la
literatura como ≤25 UI/mL.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de
referencia.
PRESTACIONES. CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
Sensibilidad: se obtienen reacciones positivas a partir de 25 UI/mL con relación
al 2º estándar Internacional de suero anti-Brucella (NIBS/WHO).
Prozona: No se presenta el fenómeno de prozona hasta concentraciones de
1000 UI/mL.
Los resultados obtenidos con el reactivo no presentan diferencias significativas
al comparalos con los obtenidos con el reactivo de referencia.
Los datos del estudio de las prestaciones del reactivo estan disponibles bajo
demanda
INTERFERENCIAS
Hemoglobina hasta 10 mg/mL y lípidos hasta 10 mg/mL no producen
interferencia.
La bilirrubina produce interferencia a partir de 2,5 mg/dL.
Los factores reumatoides a concentraciones inferiores a 300 UI/mL no producen
interferencias.
LIMITACIONES DEL MÉTODO
El reactivo de Rosa de Bengala es un reactivo de “screening”; todo resultado
positivo o negativo se debe evaluar junto con todas las demás pruebas clínicas
y diagnósticas.
Pueden aparecer resultados falsamente negativos en infecciones tempranas o
en las últimas etapas de la enfermedad.
Pueden obtenerse falsos positivos en muestras que presenten contaminación
bacteriana así como en sueros de individuos a los que se ha vacunado con la
cepa 19.
Nota: En clínica veterinaria el reactivo puede usarse como técnica de
“screening”. Las especificaciones para la realización de esta prueba están
fijadas por la legislación particular de cada país.
Todo resultado positivo debe confirmarse con una prueba específica (fijación
de complemento).
BIBLIOGRAFÍA
Ruiz-Mesa, JD., Sánchez-Gonzalez, J. , Reguera, JM.; Martín, L., Lopez-
Palmero, S., Colmenero, J. D. (2005) Clin. Microbiol. Infect., 11, 211-225.
Abdou, AE., (2000) Eastern Mediterranean Health J., 6, 796-807.
Lucero, NE., Bolpe, JE., (1998) J. Clin. Microbiol., 36, 1425-1427.
Vogel, H., Cherubim, CE., Millan, SJ., (1970) Am. J. Clin. Path., 53, 932-938.
Currier, RW., DVM, MPH, (1995) J. Am. Vet. Med. Assoc. (AVMA): Brucellosis.
 BENGAL ROSE
DETECTION OF BRUCELLOSIS BY SLIDE AGGLUTINATION
For “ in vitro” diagnostic
PRINCIPLE PROCEDURE
The Bengal Rose is a fast diagnostic test for the detection of anti-Brucella
antibodies. The reagent is standardized microorganism suspension at acidic pH 1. Bring reagent, samples and controls to room temperature.
which agglutinates in the presence of antibodies to Brucella sp. Softly homogenize the reactive suspension including the volume inside
the dropper.
DIAGNOSTIC USE 2. Dispense one drop each (40 μL) of serum and controls on different
Brucella sp. induces a humoral immune response with production of anti-Brucella slide reaction circles.
antibodies. The Bengal Rose test reagent allows detection of these antibodies 3. On each, add one drop (40 μL) of the reagent and mix with the aid of
generated as result of infection. Serodiagnostic test should be performed in a disposable stirrer.
parallel with cultures suitable for the isolation and identification of the causative 4. Tilt the slide for 4 min and observe for the presence or absence of
organism. agglutination.
Single test result could not be used to make a clinical diagnosis. It should
integrate clinical and laboratory data. RESULTS INTERPRETATION
POSITIVE: Clear agglutination.
REAGENTS NEGATIVE: The suspension remains homogeneous.
Kit for 100 tests Ref. 99 77 09
Contents: REFERENCES VALUES
a 1 x 5 mL Reagent Ref. 99 78 18 The titers considered as reference values for anti-Brucella antibodies are ≤ 25
1 x 1 mL Positive control Ref. 99 46 12 IU/mL.
e 1 x 1 mL Negative control Ref. 99 32 15 Each particular laboratory should establish its own reference range.
Slide and disposable stirrers.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
REAGENT PREPARATION Sensitivity: Positive reactions are obtained at levels higher than 25 IU/mL (anti-
n Reagent and controls are ready to use. Brucella serum, 2nd International Standard, NIBS/WHO)
There is no prozone effect for titers ≤ 1000 IU/mL.
e REAGENT COMPOSITION The results obtained showed no significant differences when comparing them
Reagent: bacterial suspension of inactivated B. abortus at an acid pH, stained with those obtained with the reference reagent.
s with Begal Rose and an added 0.5% of phenol.
Positive control: Pooled sera of animal origin with anti -Brucella antibodies. Details of the performance studies are available on request.
Negative control: Pooled sera of animal origin. Nonreactive
o INTERFERENCES
STORAGE AND STABILITY Hemoglobin >10 mg/mL, highly lipemic sera (Lipids >10 mg/mL) or bilirubin ≥ 2.5
When stored at 2-8ºC, the components of the kit will remain stable until the mg/dl can interfere with the assay.
expiration date stated on the label. Do not freeze. Rheumatoid factors ≤ 300 IU/mL do not interfere.
n
Signs of reagent deterioration: METHOD LIMITATIONS
Presence of particles in the reagent after the homogenization. The Bengal Rose is a screening reagent. Any positive or negative result must be
n Discard those controls in which, in spite of containing sodium azide, a microbial evaluated together with all the clinical and diagnostic tests.
growth is apparent. False negative results can appear in the early infection or in the last stages of
the sickness.
ADDITIONAL EQUIPMENT False positive results can be obtained in samples with bacterial contamination as
o General laboratory equipment. well as ín sera from individuals vaccinated with the strain 19.
s
SAMPLE Note: In veterinary clinics, the reagent can be used as a screening technique.
o Non hemolyzed serum stored at 2-8ºC for no longer than one week. It is The specifications for doing the test are fixed by the particular regulations in
recommended to freeze the sample if desired to store it for a longer time. each country.
n Discard contaminated sera. The samples must be free from precipitates; All positive results must be confirmed with a specific test (complement fixation).
a otherwise anomalous results can be obtained. Manipulate all samples as if they
were potentially infectious. REFERENCES
Ruiz-Mesa, JD., Sánchez-Gonzalez, J. , Reguera, JM.; Martín, L., Lopez-
e CAUTION Palmero, S., Colmenero, J. D. (2005) Clin. Microbiol. Infect., 11, 211-225.
n The safety statements are on the label. It its recommended to read MSDS before Abdou, AE., (2000) Eastern Mediterranean Health J., 6, 796-807.
reagent manipulation. Lucero, NE., Bolpe, JE., (1998) J. Clin. Microbiol., 36, 1425-1427.
n Reagent contains phenol and controls contain sodium azide 0.09 % as a Vogel, H., Cherubim, CE., Millan, SJ., (1970) Am. J. Clin. Path., 53, 932-938.
preservative. Currier, RW., DVM, MPH, (1995) J. Am. Vet. Med. Assoc. (AVMA): Brucellosis.
Waste products must be handled as per local regulations.

- QUALITY CONTROL
It is recommended that positive and negative controls be run with the samples to
be processed to check the right performance of the test.
Each particular laboratory should establish its own control program.

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ISO 9001 / ISO 13485 Certified Company
A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN
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Revision: 02.2017 PRO4_REG9_ROSAB_4
ROSE BENGALE
DÉTECTION DE LA BRUCELLOSE PAR AGGLUTINATION SUR PLAQUE
Pour le diagnostic “in vitro”
PRINCIPE TECHNIQUE
Le test au Rose Bengale est un test de diagnostic rapide pour la détection
d’anticorps anti-Brucella. Le réactif est une suspension normalisée de micro- 1. Laisser les réactifs, les échantillons et les contrôles atteindre la
organismes à pH acide qui s’agglutinent en présence d’anticorps anti- Brucella. température ambiante.
Homogénéiser délicatement la suspension réactive ainsi que le volume
UTILITÉ DE DIAGNOSTIC contenu à l’intérieur de la pipette du compte-gouttes.
Brucella sp. induit une réponse immunitaire humorale avec production 2. Déposer 40 μL de sérum et 1 goutte (40 μL) de contrôles sur chacun
d’anticorps anti-Brucella. Le réactif Rose Bengale permet la détection de ces des cercles de réaction.
anticorps générés à la suite de l’infection. 3. Ajouter une goutte (40 μL) de réactif sur les gouttes précédentes puis
Les essais de sérodiagnostic fébrile doivent être effectués en parallèle avec mélanger à l’aide des agitateurs jetables.
les cultures appropriées pour l’isolement et l’identification de l’agent pathogène. 4. Balancer la plaque et observer la présence ou l’absence
d’agglutination au bout de 4 minutes.
Un test de laboratoire unique ne peut pas établir un diagnostic. Les résultats
doivent être évalués dans le contexte de toutes les données cliniques et de INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
laboratoire obtenus. POSITIF: Présence d’une agglutination nette.
NÉGATIF: La suspension reste homogène.
RÉACTIFS
Kit 100 déterminations Réf. 99 77 09 VALEURS DE RÉFÉRENCE
Contenu: Les valeurs de référence des anticorps anti-Brucella sont définies dans la
1 x 5 mL Réactif Réf. 99 78 18 littérature comme inférieures ou égales à 25 UI/mL.
1 x 1 mL Contrôle positif Réf. 99 46 12 Il est recommandé que chaque laboratoire établisse ses propres valeurs de
1 x 1 mL Contrôle négatif Réf. 99 32 15 référence.
Plaque de réaction et agitateurs jetables.
PERFORMANCE. CARACTÉRISTIQUES DE FONCTIONNEMENT
PRÉPARATION DU RÉACTIF Sensibilité: des réactions positives apparaissent à partir de 25 UI/mL par rapport
Le réactif et les contrôles sont prêts à l’emploi. au second sérum étalon international anti-Brucella (NIBS/WHO).
Phénomène de prozone: aucun phénomène de prozone n’a été observé jusqu’à
COMPOSITION DU RÉCTIF des concentrations de 1000 UI/mL.
Réactif: suspension bactérienne inactivée de B. abortus à pH acide colorée au Les résultats obtenus avec le réactif ne montrent pas de différences significatives
rose Bengale additionné de phénol à 0,5%. quand on les compare à ceux obtenus avec le réactif de référence.
Contrôle positif: Mélange de sérums d’origine animale avec des anticorps anti-
-Brucella. L’étude de la performance du réactif est disponible sur demande.
Contrôle négatif: Mélange de sérums d’origine animale non réactifs.
INTERFÉRENCES
CONSERVATION ET STABILITÉ L’hémoglobine et les lipides n’interfèrent pas avec l’essai jusqu’à 10 mg/mL et
Conservés entre 2-8ºC, les réactifs et les contrôles sont stables jusqu’à la date 10 mg/mL respectivement.
de péremption indiquée sur l’étiquette. Ne pas congeler. La bilirubine interfère avec l’essai à partir de 2,5 mg/dL.
Les facteurs rhumatoïdes n’interfèrent pas à des concentrations inférieures à
Indications d’altération du réactif: 300 UI/mL.
Présence de particules après l’homogénéisation.
Rejeter les contrôles présentant une croissance bactérienne. LIMITES DE LA MÉTHODE
Le réactif de Rose Bengale est un réactif de dépistage; tout résultat positif ou
MATÉRIEL NÉCESSAIRE MAIS NON FOURNI négatif doit être évalué avec tous les autres examens cliniques et diagnostiques.
Matériel courant de laboratoire. Des résultats faussement négatifs peuvent apparaître au cours d’infections
précoces ou au dernier stade de la maladie.
ÉCHANTILLON Des faux positifs peuvent être observés sur des échantillons présentant une
Sérum exempt d’hémolyse. Peut être conservé à 2-8°C pendant une semaine. contamination bactérienne, ainsi que sur des sérums d’individus vaccinés avec
Il est conseillé de congeler l’échantillon pour une conservation plus prolongée. la souche 19.
Eliminer les échantillons contaminés. Les échantillons doivent être exempts de
précipités, sinon peut produire des résultats anormaux. Remarque: En clinique vétérinaire, le réactif peut être utilisé comme une
Manipuler tous les échantillons comme s’ils étaient potentiellement infectieux. technique de dépistage. Les spécifications pour la réalisation de cet essai sont
définies par les normes en vigueur de chaque pays.
PRÉCAUTIONS D’EMPLOI Tout résultat positif doit être confirmé par un essai spécifique (fixation du
Les indications de sécurité sont sur l’étiquette des produits. On conseille de complément).
consulter la fiche des données de sécurité avant de manipuler le réactif.
Le réactif contient du phénol et les contrôles de l’azide de sodium comme BIBLIOGRAPHIE
conservateurs. Ruiz-Mesa, JD., Sánchez-Gonzalez, J. , Reguera, JM.; Martín, L., Lopez-
L’élimination des déchets doit être effectuée conformément aux normes en Palmero, S., Colmenero, J. D. (2005) Clin. Microbiol. Infect., 11, 211-225.
vigueur. Abdou, AE., (2000) Eastern Mediterranean Health J., 6, 796-807.
Lucero, NE., Bolpe, JE., (1998) J. Clin. Microbiol., 36, 1425-1427.
CONTRÔLE DE QUALITÉ Vogel, H., Cherubim, CE., Millan, SJ., (1970) Am. J. Clin. Path., 53, 932-938.
Il est conseillé d’utiliser les contrôles positif et négatif, fournis avec le réactif, Currier, RW., DVM, MPH, (1995) J. Am. Vet. Med. Assoc. (AVMA): Brucellosis.
dans chaque série d’essais.
Nous suggérons que chaque laboratoire d’établir son propre programme et les
procédures de correction des écarts dans les mesures de contrôle qualité.

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