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PLACA BACTERIANA –

BIOFILM DENTAL
DR.FABRICIO VILLACIS
BIOFILM
Las enfermedades de mayor
incidencia en la cavidad oral son la
caries y la enfermedad periodontal,
consideradas enfermedades
infecciosas,

Factor etiológico primario son


bacterias que por medio de
mecanismos directos o indirectos
causan daño tisular

En la actualidad, se han identificado


más de 700 especies bacterianas
como integrantes de la microbiota
bucal normal
La cavidad bucal es considerada un ecosistema
poblado por organismos fisiológicamente
diferentes,

Los cuales coexisten exitosamente gracias a


mecanismos adaptativos.

Existencia de sitios que facilitan su adhesión,

Superficies de los dientes, el surco gingival, la


lengua, las amígdalas, las superficies mucosas
que revisten toda la boca
Biopelícula
Biopelículas se forman
cuando las bacterias
Las bacterias existen en la
flotantes encuentran una
naturaleza bajo dos estados:
superficie, se adhieren a
ella.

elaboran señales químicas


bacterias planctónicas, de para coordinar
libre flotación (1 %) y diferenciación
bacterias sésiles,
integrantes de colonias de
microrganismos llamadas
biopelículas (99 %).

formación de estructura,
incluido el desarrollo de
una cubierta polisacárida
protectora
Donlan, y colaboradores, ha definido
como “una comunidad microbiana sésil,
caracterizada por células que están
adheridas irreversiblemente a un
sustrato o interfase, o unas con otras, las
cuales están encerradas en una matriz
de sustancias poliméricas extracelulares
que ellas han producido, y exhiben un
fenotipo alterado en relación con la tasa
de crecimiento y transcripción génica”
Comunidades microbianas adheridas
a una superficie, rodeadas por una
matriz extracelular polimérica de
origen microbiano y otros
compuestos del medio
Una comunidad estructurada de
células bacterianas embebidas en
una matriz polimérica propia y
adheridas a una superficie viva o
inerte
ESTRUCTURA DEL
BIOFILM
Están compuestos
por microcolonias de
células bacterianas
(15 - 20% volumen),
hongos, levaduras, algas y
envueltas en una
densa matriz
polimérica
protozoos
extracelular (75 -
80%) con marcados
canales de agua

Las colonias son


morfológicamente
como torres o en
forma de hongo,
transporte de solutos a través
del biofilm.

Las microcolonias
están separadas por
una red de canales
de agua que
medio de transporte de
funcionan como un
sistema circulatorio
primitivo,
nutrientes y de remoción de
productos de deshecho
En menor cantidad se encuentran otras
macromoléculas, como proteínas,
ácidos nucleicos y diversos productos
procedentes de la lisis bacteriana
En la matriz también pueden hallarse:
cristales de sales minerales, partículas
de corrosión, de sedimento o ambas, o
componentes sanguíneos
Formación de la película dental (película adquirida):

Todas las zonas de la boca, entre ellas las superficies de los tejidos blandos,
FASES DE los dientes y las de restauraciones fijas y removibles, están cubiertas por una
película de glucoproteínas.

FORMACIÓN
DEL Esta constituida por componentes salivales y del líquido gingival, así como de
desechos, productos bacterianos y de células de los tejidos del huésped. Los
mecanismos que intervienen en la formación de la película del esmalte
BIOFILM incluyen fuerzas electrostáticas, de Van der Waals e hidrófobas.

Las películas operan como barreras de protección, lubrican las superficies e


impiden la desecación del tejido. Sin embargo, también aportan un sustrato
al cual se fijan las bacterias
Los primeros colonizadores de la superficie dentaria cubierta
con la película son los microrganismos grampositivos
facultativos, como Actinomyces viscosus y Streptococcus
sanguis. Estos colonizadores iniciales se adhieren a la película
Colonización mediante moléculas específicas, denominadas adhesinas,

inicial o La biomasa madura mediante la proliferación de especies


adheridas, y se produce, además la colonización y el
colonización crecimiento de otras.

primaria
Hay transición de un ambiente aerobio inicial, caracterizado
por especies grampositivas facultativas, a otro notablemente
escaso de oxígeno, anaerobios gramnegativos
Colonización secundaria y maduración

Sin embargo, la naturaleza de la


Dichos patógenos se adhieren a las
biopelícula subgingival es más
Los colonizadores secundarios son células de bacterias ya presentes
complicada, ya que existen dos
los microrganismos que no en la masa de la biopelícula. Entre
biopelículas diferentes: una
colonizaron en un principio todas las bacterias que forman la La biopelícula supragingival está
asociada a la superficie radicular y
superficies dentales limpias, entre biopelícula, existen tres que tienen unida a la superficie dentaria y se
otra en íntima relación con la
ellos Prevotella intermedia, una relevancia especial en el inicio encuentra formada
superficie epitelial de la pared
Prevotella, especies de y la progresión de la enfermedad predominantemente por
blanda de la bolsa. Esta última
Capnocytophaga, Fusobacterium periodontal: Aggregatibacter Actinomyces.
contiene predominantemente
nucleatum y Porphyromonas actinomycetemcomitans (Aa),
espiroquetas y especies
gingivalis. Porphyromonas gingivalis (Pg) y
gramnegativas (P. gingivalis, T.
Tannerella forsythensis (Tf).
denticola).
FACTORES INTERVINIENTES EN LA FORMACIÓN DEL BIOFILM

Condiciones de la superficie Factores medioambientales Especies bacterianas

• La colonización • Otras características del


microbiana se incrementa medio acuoso como son
cuando la rugosidad de la el pH, cantidad de
superficie aumenta y el nutrientes, cargas iónicas,
área de superficie es temperatura y fluidez
mayor pueden jugar un papel
• la adhesión microbiana es importante en la adhesión
más rápida en superficies bacteriana al substrato.
hidrófobas como teflón y
otros plásticos que sobre
materiales hidrofílicos
como el vidrio o metales
¿Cómo se desarrolla el biofilm?

A partir de una célula planctónica


• Ciertas bacterias muestran o tienen la capacidad de
desarrollar estructuras de superficie que favorecen
la adhesión de las mismas a una superficie sólida,
tales como fimbrias y fibrillas
A partir de otro biofilm
Propiedades de los biofilms

• Heterogeneidad fisiológica
Dentro del biofilm puede observarse un rango muy amplio de micronichos, separados unos
de otros por mínimas distancias Se pueden encontrar, asimismo, ambientes muy diferentes en
cuanto al contenido de nutrientes del medio, fisiológicas (anaerobias, aerobias, microaerobias),
• Fenotipos en el biofilm
Cuando las bacterias crecen en el biofilm, en forma sésil, manifiestan un fenotipo diferente
respecto del que manifiestan cuando crecen en forma planctónica. Los fenotipos de las bacterias
que crecen en los biofilms son más resistentes frente a diversos antimicrobianos y mantienen esta
resistencia incluso cuando se desprenden del biofilm
• Señales en el biofilm Dentro del biofilm, las bacterias tienen capacidad para comunicarse entre
ellas, ya sea por medio de señales químicas o incluso mediante transferencia de material genético
a través de mecanismos tales como la conjugación, la transformación, la transferencia de
plásmidos y la transferencia de transposones «Quorum Sensing»,
Ventajas de los biofilms

Protección frente a
2. Ventajas nutricionales:
agresiones externas y mayor
aporte de nutrientes y
resistencia frente a los
eliminación de desechos.
antimicrobianos

3. Proporciona un medio 4. Capacidad de


ambiente adecuado para el intercomunicación entre las
desarrollo bacteriano. bacterias.
El «Quorum Sensing»
La comunicación celular de las
bacterias puede ser
Desarrollo de los mismos, como
desencadenada por pequeñas
a la mayor resistencia frente a
moléculas de señalización que
los antimicrobianos.
se difunden en los espacios
intercelulares

Tendría también capacidad para


influir en la estructura del
Puede promover la expresión de
biofilm, estimulando el
genes codificantes para la
crecimiento de especies
resistencia a un determinado
beneficiosas para el mismo e
antibiótico
inhibiendo el crecimiento de las
especies competidoras
1. Los antimicrobianos van a llegar en menores concentraciones
(concentraciones no efectivas frente a las bacterias) a las zonas
profundas del biofilm
2. Las bacterias, al ser atacadas con dosis subletales tienen capacidad
para desarrollar resistencia frente a los antimicrobianos (entrenamiento
de resistencia con dosis subletales)

Resistencia 3. Al crecer en forma sésil, las bacterias activan genes que proporcionan
mayor resistencia frente a los antimicrobianos en comparación con las
frente formas planctónicas

antimicrobianos 4. En zonas profundas del biofilm, que tienen un menor aporte de


nutrientes, las bacterias estarían en forma quiescente, que es un estado
bacteriano no susceptible a los antimicrobianos
5. Las bacterias estarían protegidas por la matriz de exopolisacáridos
frente a los antimicrobianos

6. Esta mayor resistencia de las bacterias cuando crecen en biofilm se


traduce en que, para que sea efectivo, se deben multiplicar incluso por
mil las concentraciones necesarias del antimicrobiano
PIRAMIDE DE SOCRANSKY
Pirámide de la asociación entre especies
bacterians subgingivales. (Socransky 2002)
• La hipótesis de la “placa específica”, enunciada por Loesche en 1976,
consideraba que, aunque la microflora bacteriana residente en la placa
comprenda una variedad de organismos diversos, sólo unas cuantas
especies estaban activamente comprometidas con el desarrollo de la
enfermedad. Posteriormente, Theilade en 1986, propuso la hipótesis de la
“placa no específica”. Refería que la caries dental era el resultado de la
actividad global de la microflora total de la placa. De esta forma, la
combinación heterogénea de microorganismos favorecería el desarrollo de
la enfermedad. Recientemente, se concilió los elementos principales de las
dos hipótesis anteriores. La hipótesis de la “placa ecológica”, propuesta por
Marsh y argumentada por una serie de estudios, sostiene que los
organismos asociados con la enfermedad pueden estar presentes también
en los sitios sanos, pero en niveles tan bajos
Patógeno oportunista,

Pacientes con endocarditis infecciosa,


Agregatibacter osteomielitis, glomerulonefritis,
actinomycetemcomitans endoftalmitis, neumonía, absceso cerebral y
hepático,
A. actinomycetemcomitans con otras
bacterias periodontales, podrían ser un
factor de riesgo en el desarrollo de
enfermedades cardiovascular
Características
• Actinobacillus actinomycetemcomitans.
• Neils y Mogens en el 2006, según estudios de ADN,
encuentran gran similitud en cuatro bacterias
Actinobacillus actinomycetemcomitans, Haemophilus
aphrophilus, H. paraphrophilus y H. segnis, conformando
estos un nuevo género llamado Agregatibacter
• Morfología y estructura Es un cocobacilo, no
móvil, no esporulado, capsulado, con
fimbrias, anaerobio facultativo que
desarrolla mejor en condiciones de
anaerobiosis.
• Su pared celular presenta las llamadas
endotoxinas o lipopolisacaridos típico de
una bacteria gram negativa
Factores de virulencia
Presenta fimbrias, vesículas, así como produce un material amorfo extracelular
proteico, que le permite adherirse a las células huésped. Siendo esta
adherencia el primer paso de todo proceso infeccioso

Leucotoxina: Tiene actividad citoletal en polimorfonucleares, penetrando y


formando poros transmembranosos, que producen pérdida de potasio
intracelular, con un resultado fatal para la célula

Endotoxina (LPS): Es una toxina sumamente activa, causando reabsorción ósea,


Colagenasa: enzima capaz de deteriorar el tejido conectivo del
periodonto.

Citotoxinas: inhiben la proliferación de fibroblastos y la capacidad


del huésped de sintetizar colágeno, para la recuperación de los
tejidos.
Epiteliotoxinas: Destruye hemidesmosomas de la unión intercelular,
siendo un mecanismo de invasión y profundización de la infeccion.

Alteraciones locales inmunitarias: así como de inhibición de


inmunoglobulinas IgG, IgM por células B.
Fisiopatología

En el biofilm dental se han encontrado más de 700 tipos


bacteriano, siendo uno de ellos, una bacteria residente del
surco gingival.

El mecanismo de proliferación y destrucción, que tiene dos


funciones bien marcadas, daño de células de defensa y
reabsorción ósea.

El daño producido por esta bacteria es rápida, más aun si se


acompaña de abundante biofilm alrededor del diente, llegando
a deteriorar el periodonto con formación de bolsa periodontal,
pérdida de inserción, amplia movilidad del diente y con el
tiempo pérdida de este
Porphyromonas
gingivalis
Bacilo gram negativo predominante en la
Periodontitis crónica, sus múltiples factores
de virulencia la hacen sumamente agresiva.

En el surco gingival encuentra las condiciones


para su crecimiento, interaccionando con el
huésped produciendo una destrucción lenta
pero constante de los tejidos del periodonto
Microorganismos con mayor presencia en el
Biofilm dental subgingival
MORFOLOGÍA Y
ESTRUCTURA
P. gingivalis es un bacilo corto o cocobacilo,
anaerobio estricto.

Su pared celular presenta a nivel de la


membrana externa las endotoxinas, son
capsulados, no esporulados, sin flagelos y
abundantes fimbrias de diferentes tipos.
A nivel superficial presenta vesículas que
contienen una variedad de enzimas que
juegan un rol importante en su virulencia
Factores de virulencia

Cápsula: Endotoxina (LPS): Hemaglutininas: Fimbrias:

• constituido por • Presenta en la • Promueven la • Sustratos,


polisacáridos, membrana colonización moléculas, y
• Esta juega un rol externa de la • Unión bacteriana células, como
importante en la bacteria, epitelial,
evasión del compuesta en fibrinogeno,
sistema parte por el fibronectina,
inmunológico, lípido A, lactoferrina
eludiendo la • Ocasiona
fagocitosis inflamación
gingival,
destrucción del
tejido conectivo
y la reabsorción
del hueso
• Liberación de
prostaglandinas.
Fisiopatología

P. gingivalis es considerado un Poder adaptarse e invadir las


colonizador secundario, surco células epiteliales en un
gingival, que llega por contagio periodo aproximado de 20
o transmisión por individuos minutos, pudiendo replicarse
infectados, por medio de la dentro de ellas y diseminarse a
saliva principalmente. las células de alrededor

Degradar diversas proteínas,


componentes del surco
gingival, ligamento periodontal
y hueso alveolar
Tannerella forsythia
• T. forsythia es un bacilo de aspecto fusiforme, Gram negativo,
anaerobio estricto
• T. forsythia factores de virulencia que apoya el inicio y progresión de
la enfermedad presentes en la bolsa periodontal.
• Puede diseminarse por vía hematógena ser un factor de riesgo para
enfermedades como; aterosclerosis, artritis reumatoide, diabetes tipo
2
Factores de Virulencia

Capa S. Está relacionado con la adhesión e invasión bacteriana, así también atenúa la respuesta del
huésped

Lipoproteína Es una lipoproteína de superficie considerada una evasina, que muestra una actividad
sobre fibroblastos gingivales. La induce reabsorción ósea por inducción o activación de osteoclastos

Sialidasas Son enzimas que cortan enlaces de glicoproteínas del huésped, rol importante en la
colonización bacteriana la destrucción del tejido del huésped.

Enolasa Es una enzima citolítica induce la producción de citocinas proinflamatorias como IL-1β, IL-6,
IL-8 y TNF-α estaría potenciando la respuesta inflamatoria en la periodontitis.

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