REACTIVOS.

Acetato de plomo al 10% Hidróxido de sodio Nitrito de sodio

Acido clorhídrico Fenolftaleína Rojo congo

Acido nítrico Ninhidrina Sulfato de cobre

Fenilalanina Carbón Actividad Alcohol Terbutílico

PRÁCTICA 5 <HIDRÓLISIS DE UNA PROTEÍNA Y ENSAYOS PARA Guillen Juárez Jessica Daniela
PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS
3QM3 03/12/22 EQ: 2
I. Hidrólisis de Grenetina (Solución <A=).

Filtrar
Colocar 10 mL Agregar 1 g de Adaptar un Agregar 0.5 g
de HCl y 10 grenetina refrigerante en de carbón
mL de agua posición de reflujo y activado,
destilada calentar suavemente continuar
por 35 min. calentando por
2 min.

III. Solución de Grenetina sin hidrolizar II. Solución neutralizada de

(Solución <C=). hidrolizado de grenetina (Solución
<B=).
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Colocar en un vaso de 100 mL 0.5 g de grenetina, Tomar 5 mL de solución. <A= y neutralizarla con hidróxido de
agregar 20 mL de agua destilada y agitar. sodio al 10%

Preparar una solución Agregar 100 mL de

de albúmina, agitando Filtrar a través agua, agitar.
clara de huevo por 10 de un trozo de
IV. Solución de Albúmina (Solución <D=) manta de cielo.
segundos.

Reacción Xantoproteíca

Colocar en un tubo de ensayo 2

1) mL de solución de grenetina Calentar
hidrolizada (solución <A=) y en suavemente a baño Agregar a cada
otro, 2 mL de solución de María y observar la tubo 5 mL de ácido
albúmina (solución <D=). coloración. nítrico concentrado
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Agregar a cada
uno, gota a gota,
una solución de
hidróxido de sodio
al 10% hasta pH
básico. Observar el
cambio de color.
2) Reacción de Precipitación

Agregar a cada uno Agregar 1.0 mL de solución de

Colocar en un tubo de ensayo 2 5 mL de solución de acetato de plomo al 10%
mL de grenetina hidrolizada hidróxido de sodio al
(Solución <A=), en otro 2 mL de 10%
solución de albúmina (Solución
<D=); y en un tercer tubo de
ensayo, colocar 2 mL de agua
destilada.

Calentar a ebullición con agitación, por

cinco minutos. Observar los resultados.
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3) Reacción de Biuret

0.5 mL de 0.5 mL de A cada tubo, agregar 2 mL de

solución grenetina solución de sulfato de cobre al 2
de hidrolizad %. Agitar, observar y concluir.
albúmina a sin
(solución neutralizar
<D=). (solución
<A=)

0.5 mL de
agua
destilada +
0.5 mL de 0.5 mL de
0.5 mL de 0.5 mL de solución
solución de solución de de
s
grenetina sin grenetina albúmina
ol de
hidrolizar hidrolizada sin + 0.5 mL
hidróxido
(Solución neutralizar de
de sodio al <C=) + 0.5 (solución <A=) solución
10% (tubo mL de + 0.5 mL de de
testigo). hidróxido de solución de hidróxido
sodio al 10% hidróxido de de sodio al
4) Reacción con Ninhidrina
sodio al 10%. 10%.

0.5 mL de 0.5 mL de 0.5 mL de

agua solución solución al
destilada. de 1% de un
albúmina aminoácid
(solución o patrón.
<D=)

2 mL de 2 mL de 2 mL de Tubo
hidrolizad grenetina solución testigo sin
o de sin de proteína. Enfriar y agregar a los cuatro tubos
grenetina hidrolizar albúmina de ensayo, 1 mL de solución
( solución (solución. ( solución. acuosa de nitrito de sodio al 5%.
<A=) <C=) <D=) Observar y concluir.
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0.5 mL de 0.5 mL de
solución solución
de de
grenetina grenetina Agregar a cada tubo
Calentar a baño
sin 0.5 mL de solución
hidrolizad María por cinco
a a pH hidrolizar de ninhidrina al 3%
minutos y observar y
neutro (solución concluir.
(solución <C=)
<B=)
5) Reacción con ácido nitroso

Acción reguladora de aminoácidos

6)

Agregar a Agregar a cada Agregando

En tubo de ensayo Efectuar el
cada tubo tubo, gota a gota solución de
colocar 2 mL de mismo ensayo
0.3 mL de HCl 0.1N, hasta un empleando hidróxido de
hidrolizado de solución cambio de fenolftaleína sodio 0.1N de
grenetina a pH neutro indicadora coloración. al 0.1% como igual forma,
(solución <B=) y en de rojo
otro 2 mL de agua indicador hasta cambio
congo
destilada. de coloración.
Observar y
concluir.
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En una cromatoplaca, Identificar los

Dejar secar el cromatograma Secar en la estufa
aplicar una pequeña aminoácidos
e introducirlo en una cámara y revelar con un
muestra del Eluir el
de cromatografía que atomizador que presentes en el
hidrolizado de cromatograma.
contenga una mezcla de contenga una hidrolizado de
grenetina neutra
alcohol terbutilico-agua 3:1. solución de grenetina,
(solución <B=).
ninhidrina.
determinando
7) Cromatografía en placa fina valores de Rf.
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