LABORATORIO MICROSCOPÍA I Y II

INTEGRANTES

MANUEL CORREA LOPERA LOPERA

SALOMÉ AVALO RESTREPO

DOCENTE

SEBASTIAN PARRA GARCIA

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

LABORATORIO BIOLOGÍA GENERAL

MEDELLIN - ANTIOQUIA

2022
CONTENIDO

Introducción ........................................................................................................... 3

Objetivos ................................................................................................................ 4

Materiales .............................................................................................................. 5

Microscopía I ...................................................................................................... 5

Microscopía II ..................................................................................................... 5

Procedimiento ........................................................................................................ 6

Microscopía I ...................................................................................................... 6

Microscopía II ..................................................................................................... 7

Discusión ............................................................................................................... 8

Microscopía I ...................................................................................................... 8

Microscopía II ..................................................................................................... 9

1. Análisis de algunos conceptos básicos ....................................................... 9

2. Unidades utilizadas en mediciones microscópicas .................................... 11

3. Observación con el objetivo de inmersión ................................................. 12

Preguntas ..................................................................................................... 13

Conclusiones ....................................................................................................... 17

Referencias .......................................................................................................... 18
Introducción

El microscopio además de ser un instrumento que permite observar objetos que no

son visibles al ojo a simple vista, también permite también hacer mediciones y hacer
otra clase de estudios morfológicos y fisiológicos. En este caso hablaremos de la
microscopia que se define como la observación de objetos muy pequeños bajo
grandes aumentos, en donde el microscopio juega el mayor papel en el estudio y
análisis de objetos y organismos demasiados pequeños, también hablaremos de lo
que es poder de resolución, poder de aumento, campo visual y la utilización de las
medidas en micrometría.

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Objetivos

Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto binocular y sus respetivas
funciones.

Conocer el correcto manejo del microscopio compuesto binocular.

Aprender a manejar a preparar muestras en fresco.

Entender algunos conceptos básicos de microscopia tales como poder de

resolución, poder de aumento y campo visual.

Comprender las unidades de medida de mayor uso en microscopia y las utilice para
resolver algunos problemas comunes en este campo.

Adquirir destrezas para hacer mediciones aproximadas de células y estructuras.

Aprender a utilizar el objetivo de inmersión.

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Materiales

Microscopía I
• Microscopios compuestos binoculares
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Hilos de color
• Papel delgado con letras impresas
• Tijeras
• Tela suave para limpiar el microscopio

Microscopía II
• Microscopios compuestos binoculares
• Portaobjetos
• Cubreobjetos (laminillas)
• Goteros
• Beakers o frascos pequeños con agua
• Toallas de papel absorbente
• Papel delgado con letras impresas
• Aceite de inmersión
• Placas permanentes (De sangre)
• Papel para limpiar lentes (kleenex facial blanco)
• Tela suave para limpiar el microscopio

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Procedimiento

Microscopía I
Se lavo el portaobjetos con jabón y abúndate agua y se seco con un pedazo de tela
que no dejaba residuos encima del vidrio. Con un gotero se eco una gota en el
centro del portaobjetos y después se puso un pedazo de hilo de color de un cm de
largo aproximadamente, Apoyamos luego el cubreobjetos en un ángulo de 45° con
relación al portaobjetos y se sostuvo con un lápiz de modo que hiciera contacto con
el agua, se dejó caer lentamente para evitar la formación de burbujas.

Pusimos la placa de hilo sobre la platina y la fijamos utilizando pinzas. Centramos

la muestra en el orifico de la platina con las perillas del carro. Iniciamos con la
observación del objetivo de 4X abriendo el diafragma haciéndolo coincidir con la
abertura del objetivo, subimos hasta le tope la platina y luego mirando por los
oculares ajustamos la luz de manera que fuera homogénea.

Se comenzó el proceso de enfoque de la muestra con cada objetivo y se obtuvieron

los siguientes resultados:

Se realizo nuevamente el procedimiento de montado de placa, pero ahora con una

letra:

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Microscopía II

Al iniciar la clase practicamos como enfocar los objetos en el microscopio con hilos
y letras igual que en la clase anterior, posteriormente procedimos con el montaje de
la place permanente (en este caso de sangre) la que procedimos a enfocar con los
lentes de 4X, 10X, 40X y luego de este agregamos aceite de inmersión para poder
enfocar con el 100X (objetivo de inmersión)

Cuando terminamos de usar el objetivo de inmersión limpiamos cuidadosamente la

placa permanente y el objetivo de cualquier resto de aceite de inmersión para evitar
el deterioro de los mismos; desmontamos el objetivo de inmersión del revolver del
microscopio para entregarlo al monitor del laboratorio para su adecuado
almacenamiento.

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Discusión

Microscopía I
¿Qué relación encuentra entre sus tamaños? ¿A qué se debe esta diferencia?

R:/ En 4X la letra puede ser observada completamente y se pueden distinguir

algunas imperfecciones en el papel y los trazos de la tinta.

En 10X la letra puede ser distinguida y se pueden observar poros en el papel.

En 40X la letra en indistinguible y solo se puede apreciar los pigmentos de tinta

sobre el papel.

Las diferencias entre los distintos lentes del microscopio se deben a que al
incrementar el aumento de los mismos el campo de visión se reduce por lo que solo
es posible observar zonas más pequeñas de la letra.

¿Como se ve la imagen con relación a la posición de la letra en el

portaobjetos?

R:/ La imagen se observa de manera inversa por los oculares en comparación con
su posición en el portaobjetos.

¿Qué proporción aproximada de ella puede ver con relación a la obtenida con
el objetivo de 4X?

R:/ 95% porque es la función del objetivo, magnificar 40 veces el tamaño normal.

¿En qué dirección se mueve la imagen?

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R:/ La imagen se mueve inversamente proporcional, es decir, si movemos la placa
a la izquierda la imagen se desplazará a la derecha y de manera contraria, y si
movemos la placa hacia adelante podremos observar que la imagen se desplaza
hacia abajo; esto quiere decir que la imagen siempre se va a desplazar en dirección
contraria a la que se mueve el carro.

Microscopía II
1. Análisis de algunos conceptos básicos
a. Poder de resolución
¿Podrá usted, por tanto, ver separados con el microscopio compuesto
dos puntos que están a 10 micrómetros entre sí?

R:/ Si, se podría observar con un microscopio compuesto porque el poder de

resolución máximo es de 0,2 µm por lo tanto tiene la capacidad de observar
dos puntos que están a 10 µ m de distancia.

¿Y dos puntos que están a 0,02 micrómetros?

R:/ No porque el poder de resolución solo permite ver hasta 0,2 µm

Objetivos Poderes de resolución

4X 3,200 nm
10X 1,280 nm
40X 492,30 nm
100X 256 nm

¿Cómo puede relacionar los valores numéricos de los poderes de

resolución obtenidos para cada objetivo y las observaciones de las letras
que acaba de hacer en 4X, 10X y 40X?

R:/ Tienen una relación inversamente proporcional

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 ¿Cómo explica lo anterior?

R:/ A medida que aumenta el poder de resolución, disminuye el valor

numérico que lo representa y a su vez el tamaño y el campo visual de la letra.

b. Poder de aumento

Poder de aumento del Poder de aumento del

Aumento total
objetivo ocular
4X 10X 40X
10X 10X 100X
40X 10X 400X
100X 10X 1000X

c. Campo visual
¿Con cuál de los tres objetivos (4X, 10X y 40X) ve un área más grande de
una de esas letras?

R:/ Con el objetivo de 4x, debido a que abarca mayor área de la letra. (Se
puede observar la letra en su totalidad)

¿Con cuál hay mayor poder de resolución?

R:/ Hay mayor poder de resolución con el objetivo 40X, ya que con este
objetivo se puede diferenciar una menor distancia entre dos puntos, en
comparación con los objetivos de 4X y 10X que se observan mayores
distancias.

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 d. Diámetro (d) del campo visual

Objetivo Diámetro (mm) Área (mm2)

4X 4,5 mm 31,80 mm2
10X 1.8 mm 5,08 mm2
40X 0.45 mm 0,31 mm2
100X 0,18 mm 0,05 mm2

¿Qué relación hay entre los poderes de aumento del microscopio

compuesto y los valores de aumento y las áreas de los campos visuales?

R:/ Cada vez que hay mayor poder de aumento, menor es el diámetro, y el
área de visualización ya que el área observada será menor.

¿Está de acuerdo esto con las observaciones que acaba de hacer al mirar
las letras en 4X, 10X Y 40X?

R:/ Si, porque al incrementar el poder de aumento estamos observando una

porción cada vez más pequeña del objeto.

2. Unidades utilizadas en mediciones microscópicas

a) ¿A cuántos nanómetros equivale un milímetro?

R:/ Un milímetro es equivalente a 1.000.000 de nanómetros.

b) ¿Y a cuantos nanómetros equivale un ángstrom?

R:/ Un ángstrom equivale a 0,1 nanómetros.

c) Una célula tiene un diámetro de 1.2 micrómetros ¿Cuánto mediría ese

diámetro en angstroms?

R:/ El diámetro de dicha célula en ángstroms seria de 12.000 ángstroms.

¿Y en milímetros?

R:/ En milímetros seria 0,0012 milímetros.

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 d) Si un microorganismo A tiene 120 micrómetros de largo y un
microorganismo B tiene 1200 ángstroms ¿Cuál de los dos tiene
mayor longitud?

R:/ El microorganismo A tendría una mayor longitud.

3. Observación con el objetivo de inmersión

a) ¿Qué función cumple el aceite de inmersión?

R:/ El aceite de inmersión tiene el mismo índice de refracción del vidrio (1,5)
e impide la refracción de los rayos de luz, por lo que si no se utilizara el aceite
parte de los rayos no penetrarían la muestra y la imagen se vería borrosa.

¿Por qué no utilizó para este enfoque algunas de las preparaciones en

fresco que hizo?

R:/ Porque la tensión superficial del aceite hace que el cubreobjeto se mueva,
lo que origina que la muestra se desplace durante su observación e impida
su análisis.

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Preguntas

1. Convierta
a. 0.0025 mm en µm y en A° -----------------------------> 2,5 µm / 25.000 A°
b. 5X10-3 nm en mm y en A° -----------------------------> 5x10-9 mm / 0,05 Aº
c. 1300 A° en nm, en µm y en mm ----------> 130 nm / 0,13 µm / 0,00013 mm

2. Escriba de mayor a menor, los poderes de resolución máximos

aproximados del microscopio compuesto, del microscopio electrónico
y del ojo humano.

R:/

a. Microscopio electrónico 0,001µm

b. Ojo humano en condiciones ideales 72µm
c. Microscopio compuesto 0,2µm

3. ¿Cuántas veces es mayor el poder de resolución máximo del

microscopio compuesto con parado con el ojo humano?

R:/ El microscopio ve en su máxima resolución unas 100.000 veces

comparado al ojo humano.

4. Determine según los poderes de resolución máxima aproximados del

ojo humano, del microscopio compuesto y del microscopio electrónico,
con cual o con cuales de estos se pueden ver las siguientes estructuras:

Promedios de
Estructuras Poderes de resolución
medidas
Virus del pollo 300 A° de diámetro Microscopio electrónico
Virus de la viruela 2500 A° de diámetro Microscopio compuesto

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 Ribosomas de 140 a 180 A° de
Microscopio electrónico
eucariotas diámetro
Escherichia coli 20000 A° de largo Microscopio electrónico
Mitocondrias 0.2 a 5 µm de largo Microscopio compuesto
Cloroplastos 5.8 µm de diámetro Microscopio compuesto
Glóbulos rojos de
7.5 µm de diámetro Microscopio electrónico
mamíferos
Paramecium Ojo humano en
0.1 a 0.3 mm de largo
caudatum condiciones ideales
Ojo humano en
Óvulo humano 0.15 mm de diámetro
condiciones ideales

5. Suponga que usted mira un microorganismo con el objetivo de 10X de

su microscopio, ¿Cuántas veces más (o menos) se vería aumentado (o
disminuido) ese microrganismo si lo mira con el objetivo de 40X?

R:/ Se vería aumentado 400X (40X * 10X = 400x)

6. Se tiene dos microorganismos A y B que miden de largo 50 y 100

micrómetros respectivamente ¿Cuál de los dos se verá aumentado
mayor número de veces si se le observa con el objetivo de 10X de su
microscopio?

R:/ Ambos organismos van a ser observados con el objetivo de 10X por lo
que se verán aumentados 100 veces más sin importar su tamaño respecto al
otro, por lo tanto, ninguno se verá aumentado mayor número de veces que el
otro (Aunque el microorganismo B se verá más grande que el
microorganismo)

7. Al observar una célula en su microscopio con el objetivo de 10X se pudo

determinar que tenía un diámetro aproximado de 0.5 milímetros ¿Cuál
será su diámetro si se observa con el objetivo de 40X?

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 R:/ El tamaño real de la célula es de 5 µm (porque al dividir su diámetro entre
el aumento aplicado, da como resultado 5 µm). Ahora bien, si se multiplica
su tamaño real por el aumentado que se aplica con el objetivo de 40X el cual
es 400, se obtiene como resultado 2000 µm, y éste sería el diámetro con
dicho aumento.

8. Un estudiante observo en esta práctica de laboratorio una célula con el

objetivo de 10X y determino que su diámetro media una cuarta parte del
diámetro de ese campo visual
a. ¿Cuánto mide la célula?

R:/ 0.45 mm

b. ¿Se observará completamente esa célula si se utiliza el objetivo de

40X?

R:/ No, debido a que la célula y el diámetro del objetivo de 40X tiene la misma
medida y si se aumenta el número de veces que se ve la célula, solo se
podría observar parcialmente. (0,45 mm x 400 = 180)

9. Al observar en su microscopio un microrganismo determinado, con el

objetivo de 100X, un estudiante vio que ocupaba, a lo largo, dos veces
el diámetro del campo visual ¿Cuánto mide de largo ese
microorganismo?

R:/ 0.36 mm

10. Un microorganismo mide 300 micrómetros de diámetro. ¿Cuántos de

ellos se podrían alinear en el diámetro de cada uno de los campos
visuales del microscopio?

R:/

300 µm x 1mm / 1000 µm = 0.33 mm

4X 0.33 mm / 4.5 mm 0.006
10X 0.33 mm / 1.8 mm 0.16

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 40X 0.33 mm / 0.45 mm 0.66
100X 0.33 mm / 0.18 mm 1.66

11. Consulte los principios físicos correspondientes a la formación de

imágenes en el microscopio compuesto. Esquematice todo el proceso
hasta la obtención de una imagen. ¿Por qué una letra puesta en posición
normal de lectura se observa invertida en el microscopio?

R:/ El objetivo del microscopio actúa como una cámara fotográfica. Cuando
un objeto se sitúa más allá del foco de su lente, se produce una imagen
ampliada, real e invertida. El ocular actúa como una lupa que observa la
imagen que ha formado el objetivo, construyendo una nueva imagen mucho
más ampliada, virtual y derecha con relación a aquella, pero invertida con
relación al objeto examinado. Así, la imagen del microscopio compuesto
resulta de la combinación de las provocadas por una lente (objetivo) que
actúa como una cámara fotográfica, y otra (ocular) que actúa como una lupa
que observa la imagen formada por la primera.

La flecha ab corresponde al espécimen,

que está colocado un poco por delante del
foco (f) del objetivo, el cual forma una
imagen real, aumentada e invertida en a’b’.
Esta imagen se forma por dentro del foco (f
’) de la lente ocular. El ojo del observador
percibirá a través del ocular la imagen
virtual, aumentada y derecha a’’b’’ de la
imagen real a’b’.

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Conclusiones

La práctica concluyo con éxito ya que se logró reconocer cada parte del microscopio
y a su vez la correcta manipulación de este equipo del laboratorio. Se ha concluido
que mediante la practica hemos conocidos las partes fundamentales del
microscopio además de sus funciones esenciales la cual es obtener una imagen
aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los mismos.

Para concluir podemos decir que el microscopio ha sido y será el instrumento de

mayor utilidad en el estudio de las células y tejidos, además de que es es un
instrumento de precisión que permite identificar y describir estructura de
microorganismos, mediante el uso combinado de su sistema mecánico, óptico y de
iluminación.

El microscopio ha sido vital para la ciencia por que gracias a el se han podido
identificar diferentes estructuras que ha simple vista no se lograban apreciar,
dejándolo como una herramienta clave y de suma importancia en el mundo de la
ciencia y su desarrollo.

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Referencias
Barrecheguren, P. (2019, 16 de mayo). ¿Qué podemos ver con un microscopio?.
McGraw-Hill. Recuperado de https://www.mheducation.es/blog/que-podemos-ver-
con-un-microscopio

Fernández, J. (s/f). El Microscopio. Fisicalab. Recuperado de

https://www.fisicalab.com/apartado/microscopio

Gil, Marielsa. (2019, 17 de mayo). Aceite de inmersión: composición,

características, usos. Lifeder. Recuperado de https://www.lifeder.com/aceite-de-
inmersion/.

Narváez, D. (s/f). La microscopía: herramienta para estudiar células y tejidos.

MediULA. Recuperado de
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo4_6.
htm

Wegerhoff, R., Weildich, O., Kassens, M. (2005). Basis of light microscopy image.
Darmstadt: GIT VERLAG GmbH & Co. KG.

(2017, 13 de junio). Microscopios Ópticos – Algunos Fundamentos Básicos.

Baires. Recuperado de https://www.bairesac.com/blog/archivo/1786

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