GUÍA DE LABORATORIO

“Observación de Células en Mitosis”

Nombres:

INTRODUCCIÓN
El ciclo celular corresponde al periodo comprendido entre el nacimiento de una
célula y su división en dos. Se subdivide en el periodo de interfase (G1, S, G2) y de división
celular (M). Algunas poblaciones celulares se encuentran en constante proliferación,
circulando permanentemente en el ciclo, mientras que otras pueden encontrarse en
reposo proliferativo (G0).
Los mecanismos básicos de la división celular comprenden una división nuclear,
denominada mitosis, y una división citoplasmática o citodiéresis. La mitosis asegura que
las células hijas resultantes tengan la misma cantidad de material genético que la célula
progenitora. Para que esto se cumpla, la célula progenitora duplica su material genético
(ADN) durante el período S, el que luego se organiza en forma de cromosomas durante la
mitosis, los cuales son repartidos a las células hijas quedando ambas con el mismo
número y tipo de cromosomas.
Sobre la base de observaciones hechas con microscopios ópticos y electrónicos, la
mitosis se ha dividido en 5 etapas de acuerdo con los sucesos observados en cada una de
ellas:

1) PROFASE: La célula comienza su división mitótica. Los centrosomas (organelos

organizadores de microtúbulos) se duplican y migran hacia los polos de la
célula. Se forma un áster de microtúbulos. La cromatina comienza a
condensarse.
2) PROMETAFASE: Se rompe la membrana nuclear (carioteca). Se forma el huso
mitótico a partir de los centrosomas. Se termina de condensar la cromatina, y
los cromosomas se organizan, anclándose a los microtúbulos del huso a través
del cinetocoro.
3) METAFASE: Los cromosomas se ubican en el plano ecuatorial de la célula por la
tensión ejercida por los microtúbulos unidos a los cinetocoros.
4) ANAFASE: Se separan las cromátidas hermanas por la ruptura del centrómero.
Debido al acortamiento y alargamiento de las fibras del huso, las cromátidas
comienzan a moverse hacia los polos.
5) TELOFASE: Las cromátidas llegan a los polos. Desaparecen los microtúbulos del
huso unidos a los cinetocoros. Se forma la membrana nuclear alrededor de
cada grupo de cromosomas, y éstos comienzan a descondensarse.

Durante la citodiéresis, que comienza en anafase, se pone fin a la división celular. En ésta,
se reparten de manera más o menos equitativa los componentes celulares, y un anillo
contráctil bajo la membrana plasmática, estrangula la célula hasta que se parte en dos.
TRABAJO PRÁCTICO

Observación de las etapas de la mitosis en tejido meristemático de raicillas de cebolla

(Allium cepa)

Obtención de la preparación:
a) Poner una cebolla en agua hasta que crezcan raicillas.
b) Colocar 2 o 3 raicillas en un vidrio reloj, y cubrir con 1 ml de Orceína Acética.
c) Calentar suavemente en un mechero hasta la aparición de vapores. (**)
d) Dejar enfriar por 5 minutos sobre el mesón, puede agitar suavemente el vidrio
reloj.
e) Repetir 3 veces las etapas c y d.
f) Dejar reposar entre 20 y 30 minutos.
g) Colocar en un portaobjetos un trozo de ápice de raicilla, de no más de 2 mm.
h) Agregar una gota de Orceína Acética
i) Cubrir con un cubreobjetos.
j) Golpear suavemente con un lápiz para despegar las células y eliminar burbujas.
k) Presionar el cubreobjetos con el dedo pulgar.
l) Si la muestra está buena se puede sellar con esmalte de uñas al finalizar la clase.

(**) Normas de seguridad:

- Para manipular el vidrio reloj utilice una pinza de madera.
- Alejar del mechero objetos inflamables.
- Para calentar la muestra se pasa suavemente el vidrio reloj por encima de la
llama, hacia un lado y hacia el otro.
- No oler directamente el vapor de la tinción, es ácido acético.
- En un laboratorio SIEMPRE se camina con calma, sin correr para no chocar, y sin
gritar.

Observación de las preparaciones:

a) Observe las células en mitosis, con aumentos progresivos de 4X, 10X y al final 40X
b) Identifique las distintas etapas de la mitosis (las que se observen, pero al menos 2)
y dibújelas acá.
GUÍA DE TRABAJO

1) ¿Por qué es importante elegir el ápice de la raicilla de cebolla para realizar esta
preparación?

2) ¿Por qué fue necesario utilizar Orceína Acética para realizar esta preparación?

3) ¿Cómo varía el contenido de ADN y el número de cromosomas en un ciclo

proliferativo mitótico?

4) ¿Qué diferencias existen entre las citodiéresis de las células animales y vegetales?
Dibújelas.

5) La colchicina es un compuesto que afecta el proceso mitótico provocando su

detención en la etapa de metafase. ¿Qué estructura celular es afectada por la
colchicina?

6) ¿Qué tejidos del cuerpo humano usarías como muestra para estudiar la mitosis?
Justifica

7) ¿Podrías usar glóbulos rojos o eritrocitos para realizar estudios de cromosomas?

Justifica.
EVALUACIÓN

Descriptor SI (1 punto) NO (0 punto)

Trabajan de manera ordenada en el laboratorio.
Utilizan el microscopio según las instrucciones de la
Frau.
Dejan todo el material utilizado limpio y ordenado.
Muestra los dibujos de las etapas de la mitosis.
La entrega no tiene ninguna falta de ortografía.
Entregan dentro del plazo.
**Cada pregunta tiene 2 puntos