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PRÁCTICA No. 8.

DIVISIÓN CELULAR MITOSIS


1. DURACIÓN: 3 HORAS
2. OBJETIVOS
2.1 Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular en células
de cebolla (Allium cepa)
2.2 Identificar y relacionar los cambios en las células en las diferentes fases de la
mitosis.

3. FUNDAMENTO TEÓRICO
Según la teoría celular se reconoce que la vida se origina a partir de una célula y
que esta proviene de otra célula preexistente. Esta multiplicación ocurre a través
de un ciclo que contiene etapas consecutivas y secuenciales que al concluir retorna
al punto de inicio para empezar de nuevo otro ciclo y poder originar las células
hijas, este proceso se conoce como ciclo celular.

La multiplicación celular es uno de los aspectos más importantes de la biología


porque implica la continuidad de la vida a través de procesos de división celular y
transmisión de la herencia genética. Las células pueden presentar procesos de
división celular llamada Mitosis y Meiosis.

3.1 CICLO CELULAR: es una secuencia regular y repetitiva de crecimiento y


división celular que sufren todas las células. La duración de este ciclo es variable y
depende del tipo celular, del organismo y de factores externos como la
temperatura, factores de crecimiento, nutrientes y toxinas
La regulación del ciclo celular es muy importante en organismos pluricelulares y a
que un descontrol de la velocidad del ciclo podría descompensar y alterar el
equilibrio funcional del organismo dando lugar a consecuencias tan negativas como
el cáncer.
El ciclo celular consta de cinco fases: G1, S, G2, mitosis y citocinesis. Las tres
primeras fases se agrupan en lo que se denomina interfase durante la cual la
célula se prepara para realizar la división celular formada por las dos últimas fases.
La función de las fases de la interfase queda resumida de la siguiente forma: Fase
G1 Fase S y Fase G2.
3.1.1 Fase G1: la célula aumenta de tamaño (casi lo duplica) al mismo tiempo
que se sinterizan los compuestos necesarios para la replicación del ADN. En este
periodo la célula alcanza un punto clave para dividirse denominado umbral de
desarrollo que permite que se desencadena todas las condiciones que llevan a
completar el ciclo celular.
3.1.2 Fase S: (Synthesis) es donde ocurre la síntesis y replicación del material
hereditario (ADN) que se encuentra en el núcleo.
3.1.3 Fase G2: permite que se activen todos los procesos y se sintetizan los
compuestos necesarios para que se desencadene la división celular.

Ilustración 1.Tomado de internet http://www.unl.edu.ar/

3.2 DIVISIÓN CELULAR: las moléculas de ADN ya duplicadas se separan para


originar células hijas. En la Mitosis se originan dos células hijas con idéntico
contenido de ADN al de la célula original, mientras que en la Meiosis se originan
cuatro células con la mitad de ADN.
3.2.1 MITOSIS: es una división celular por la cual a partir de una célula madre se
producen dos células hijas que genética, estructural y funcionalmente son iguales
entre sí e iguales a la propia célula madre.
Esto se debe a que han recibido, excepto en el caso de procesos anormales, la
misma información genética de la célula madre y por lo general en la mayoría de
los organismos la misma cantidad de citoplasma y organelos celulares. Este
fenómeno se produce tanto en células procariotas como en células eucariotas.
En los procariotas y eucariotas unicelulares o de vida libre la división celular es el
proceso por el cual se propaga la información genética y aumenta el número de
individuos de la población, mientras que en los organismos pluricelulares la división
celular es esencial para el desarrollo del organismo a partir del zigoto y para la
reparación de las células que han muerto por desgaste o por lesiones ocurridas en
los tejidos.
Existen diferencias entre la división celular de procariotas y eucariotas derivadas de
la distinta estructura y de la diferente cantidad de ADN que poseen estos tipos de
células. En las células eucariotas el proceso de división es más complejo debido a
la existencia de un núcleo en el que se almacena la cromatina condensada en
forma de cromosomas que en algunos casos, pueden ser muy numerosos. El
mecanismo utilizado para la división celular se denomina mitosis, aunque es el
mecanismo que afecta al material genético. Normalmente este mecanismo se
continúa con la división del citoplasma denominada citocinesis. 1

1
Manual de Laboratorio de biología básica de organismos multicelulares, Pontifica Universidad Javeriana,
2010
Ilustración 2.Tomado de internet https://bit.ly/2WT9yS9

La Mitosis tiene las siguientes fases: Metafase, Anafase, Telofase y por último
la división del citoplasma denominada Citocinesis
Metafase Anafase

Telofase Citocinesis Figura 1.4

Ilustración 3.Tomado de internet http://www.sct.ub.es:801/Galeria/Galeria.htm


3.2.2 MEIOSIS: este tipo de división celular se presenta en organismos con
reproducción sexual, en donde a partir de una célula madre se originan cuatro
células hijas, cada una con la mitad del contenido genético. Esto sucede porque
hay dos eventos de redistribución del material genético y se produce en los
órganos reproductivos porque es necesario la formación de células sexuales
llamadas gametos con la mitad de cromosomas.

Ilustración 4.Fases de la Meiosis. Tomado de internet www.unl.edu.ar


3.3 CITOCINESIS: es la reorganización de la membrana celular entre los núcleos
hijos generados lo que produce un fraccionamiento del citoplasma y separa
definitivamente a las nuevas células formadas.

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS.

4.1Microscopio
4.2 Micropreparados de reproducción celular
4.3 Ápices de cebolla cabezona
4.4Ácido clorhídrico diluido HCl 1%
4.5 Colorante orceina acética
4.6Portaobjetos y cubreobjetos
4.7 Aguja de disección.
4.8 Papel toalla
4.9Marcador de punta fina o sharpie
Los materiales subrayados deben ser traídos por los estudiantes.

5. PROCEDIMIENTO.

5.1 Observación de Mitosis

a. Con un pedazo de algodón impregnado de alcohol limpie la superficie del


portabojetos.
b. Cuatro días antes de hacer la práctica se pone un bulbo de cebolla en un
beaker lleno de agua, de tal forma que la parte inferior del mismo esté en
contacto con el agua. Si es necesario, inserte unos palillos de dientes en los
lados de la cebolla para tenerla suspendida en el agua, de esta manera se
habrán formado numerosas raíces de donde se obtendrán los ápices. Es
importante realizar la práctica cuando las raicillas todavía no han crecido
demasiado.
c. Con una tijera se corta el ápice (extremo de raicillas nuevas), procurando
que su longitud sea de unos 2 a 3 mm, porque esta es la zona de la raíz
donde se encuentran las células en división.
d. Se enjuaga los ápices de cebolla en agua destilada por 30 segundos.
e. Coloque las raíces en una caja Petri que contenga unos 3 mL de HCl 1% por
espacio de 7 a 8 min, con el objetivo de romper la pared celular.
f. Las raíces van a adquirir un color blanquecino.
g. Transferir los ápices a agua destilada y dejarlos allí 30 segundos (enjuague).
h. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos
gotas de orceina acética.
i. Coloque un cubreobjetos y coloque a calentar la placa en un plato caliente
por espacio de 1 min, debe vigilar que no se seque el colorante en el
montaje.
j. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione fuerte y
cuidadosamente por medio de un borrador de lápiz (esta técnica se llama
extendido por aplastamiento o squash). Recuerde que mientras esté más
aplastado, las células se separarán más unas de las otras para poder
distinguir las diferentes etapas de mitosis.
k. Observe al microscopio en 10 X y 40 X, dibuje las etapas que observe en 40X.

5.2 Observación de Meiosis

a. Con un pedazo de algodón impregnado de alcohol limpie la superficie del


portabojetos.
b. Fijar en etanol: ácido acético glacial (3:1) por 1 hora, las anteras de
diferentes flores especialmente agapantos.
c. Colocar las anteras en HCl 1M, en un portaobjetos y dejarlos de 2 a 3
minutos para ablandar la pared celular.
d. Realizar el aplastamiento con la cabeza de un alfiler para obtener una papilla.
e. Teñir las células con aceto orceina mínimo media hora teniendo cuidado de
no dejar secar el colorante.
f. Colocar una laminilla cubreobjetos sobre el preparado, envolverlo con un
trozo de toalla de papel y presionar para aplastar el tejido y dispersar las
células.
g. Observar al microscopio con objetivos con 10X y 40X para identificar las
fases de meiosis.

5.3 Observación de micropreparados


a. Observe en los objetivos 10x y 40x los micropreparados de reproducción
celular y realice los dibujos respectivos o anexe las fotografías identificando
las fases del ciclo celular.

b. Compare las fases observadas en los montajes que usted realizó y los
micropreparados identificando las similitudes entre ambos montajes.

6. RESULTADOS
a. Anexe los dibujos o las fotografías en 10X y 40X y ¿qué fases del ciclo
celular pudo identificar? compárelas con la literatura.
b. Describa cada uno de las fases de la mitosis y su importancia para el
crecimiento celular.
c. ¿Qué etapas de la mitosis logró observar?
d. Describa porque es importante la duplicación de cromosomas en el proceso
de mitosis, en la reproducción sexual
e. ¿Qué etapas de la Meiosis pudo identificar?
f. Consulte la diferencia entre las células somáticas y germinales
g. ¿Por qué se utiliza las raíces en crecimiento de la cebolla para observar la
mitosis?
h. ¿Cuál es la función que cumple en la orceína acética y el HCl en los montajes.
i. ¿Qué tipo de reproducción realizan las células del pelo, uñas y piel?
j. ¿Por qué es importante que en la Meiosis las cuatro células resultantes solo
tengan la mitad de cromosomas de la especie?

7. BIBLIOGRAFIA
Al final del manual.

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