PDF de Oftalmicos

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
Evaluación de la calidad microbiológica de gotas oftálmicas naturales

multidosis de mayor comercialización en la ciudad de Quito
Trabajo de investigación presentado como requisito previo para la obtención del título de:
QUÍMICA FARMACÉUTICA
Autor: Espinoza Méndez Raquel Estefanía

reespinoza@uce.edu.ec
Tutor: Terán Soto Rommy Ivette

riteran@uce.edu.ec
DMQ, abril, 2018

Dedicatoria
“La mayor gloria no es nunca caer, sino levantarse siempre”

Nelson Mandela
1918-2013
Dedico de manera muy especial el presente trabajo a Dios por permitirme cada día luchar por
cumplir cada una de mis metas propuestas, por darme a la mujer que me llena de orgullo, mi
madre Raquel, te amo y no hay manera de devolver tanto que me has ofrecido desde que nací.
Esta tesis es un logro más que llevo a cabo y sin lugar a dudas ha sido en gran parte gracias a
ti; no sé dónde me encontraría de no ser por tu ayuda, tu compañía y amor mamita. A los
hermanos más increíbles del mundo Miguel Ángel, Priscila; Eva mi mascota favorita, por ser
mi apoyo incondicional por sus palabras de aliento, por todos los momentos y locuras
compartidas.
Por ser una familia que me llena de orgullo, por su amor y calidez, su ayuda fue fundamental
en la culminación de la tesis.
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Agradecimientos
Una etapa más termina, y por cada uno de los momentos vividos quiero darle mis
agradecimientos a Dios por ser parte y por permitirme estar aquí y disfrutar de cada una de las
experiencias en cada paso de mi carrera profesional, a mi madre Raquel que con su paciencia
y amor supo aconsejarme y darme la seguridad para ser la persona que soy, cumplir con mis
sueños y metas; a mis hermanos Miguel Ángel y Priscila, gracias por creer en mí en todo
momento aun cuando la situación no estaba del todo bien, por su apoyo incondicional muchas
gracias. Los amo.
A mi familia, abuelitos, tíos, primos y amigos quienes siempre estuvieron ahí con un consejo
o con una palabra de aliento.
A mi alma mater, la Universidad Central del Ecuador, Facultad de Ciencias Químicas por mi
formación académica, profesional y personal, a Dr. Javier Santamaría y MSc. Dayana Boja por
su paciencia, consejos, soporte, sabiduría y buen sentido del humor aportadas para la
realización del presente trabajo; a la Dra. Liliana Naranjo, Dra. Janeth Montalvo, por ser pieza
fundamental en la formación de la carrera de Química farmacéutica.
A la MSc. Rommy Terán por su confianza, experiencia, compresión, tiempo, dedicación y

sobre todo paciencia a la culminación de este trabajo de titulación.
Y como olvidarme a mis amigos y ahora colegas Gaby Alejandro, Gaby Daza, Lichita, Pola,
por tantas vivencias dentro y fuera de las aulas de clase; Gus, Denissecita y Fer (mi nuci
querida) por ser mis hermanos de otra madre con ustedes hasta el final; Estefanía, Johanna,
Deysi, Gina, Jenny, Anita por su ayuda, paciencia, y consejos; Tania gracias por tantos años
de amistad incondicional, pese a la distancia siempre has estado ahí con tu apoyo y finalmente
y no menos importante Ana Lucia y Xavier que en su tiempo me acompañaron en esta etapa.
A todos ustedes muchas gracias
iii
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v
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Lugar donde se realizó la investigación
El presente trabajo de investigación se desarrolló en el Laboratorio de Microbiología General
y Farmacéutica y en el Laboratorio de Tecnología Farmacéutica de la Facultad de Ciencias
Químicas de la Universidad Central del Ecuador como parte del proyecto semilla fase III
auspiciado por la Universidad Central y dirigido por Rommy Terán.
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Índice de contenidos
Autorización de autoría intelectual ........................................................................................ v
Constancia de aprobación del Proyecto de Invetigación ...................................................... v
Constancia de aprobación del trabajo final por tribunal ..................................................vii
Lugar donde se realizó la investigación ...............................................................................vii
Índice de contenidos...................................................................................................................
Índice de tablas........................................................................................................................ iv
Índice de figuras ....................................................................................................................... v
Índice de anexos ...................................................................................................................... vi
Abreviaturas .............................................................................................................................. i
Resumen ....................................................................................................................................ii
Abstract ................................................................................................................................... iii
Introducción ............................................................................................................................. 1
Capítulo I El Problema ............................................................................................................ 3
1.1 Planteamiento del problema ........................................................................................ 3
1.2 Formulación del problema .......................................................................................... 6
1.3 Objetivos ..................................................................................................................... 7
1.3.1 Objetivo general. .................................................................................................. 7
1.3.2 Objetivos específicos. .......................................................................................... 7
1.4 Justificación e importancia .......................................................................................... 7

Capítulo II Marco Teórico ................................................................................................... 11
2.1 Antecedentes de la investigación .............................................................................. 11
2.2 Fundamentación teórica ............................................................................................ 15
2.2.1 Anatomía y fisiología del ojo ............................................................................. 15
2.2.2 Soluciones oftálmicas ........................................................................................ 16
2.2.3 Administración tópica de soluciones oftálmicas................................................ 19
2.2.4 Medicamento Natural y Tradicional .................................................................. 20
2.2.5 Formulación farmacéutica de medicamentos naturales y tradicionales ............. 20
2.2.6 Generalidades en la elaboración de los Productos Naturales............................. 21
2.2.7 Buenas prácticas agrícolas y de recolección de plantas medicinales ................. 21
2.2.8 Formas farmacéuticas líquidas ........................................................................... 22
2.2.9 Productos naturales para uso ocular ................................................................... 22
2.2.10 Clasificación de las formas farmacéuticas según los criterios microbiológicos 23
2.2.11 Buenas prácticas de manufactura para productos farmacéuticos estériles ......... 23
2.2.12 Análisis de la esterilidad de productos farmacéuticos ....................................... 26
2.2.13 Esterilidad de las soluciones oftálmicas ............................................................ 30
2.2.14 Control organoléptico ........................................................................................ 30
2.2 Fundamentación legal ............................................................................................... 30
2.3 Hipótesis .................................................................................................................... 33
2.3.1 Hipótesis de trabajo............................................................................................ 33
2.3.2 Hipótesis nula..................................................................................................... 33
i
2.4 Conceptualización de variables ................................................................................. 33
2.4.1 Variable Dependiente......................................................................................... 33
2.4.2 Variables Independientes ................................................................................... 33
Capítulo III Metodología de la Investigación ...................................................................... 35
3.1 Diseño de la Investigación ........................................................................................ 35
3.1.1 Enfoque .............................................................................................................. 35
3.1.2 Nivel ................................................................................................................... 35
3.1.3 Tipo de investigación ......................................................................................... 36
3.2 Materiales y métodos ................................................................................................ 36
3.2.1 Población............................................................................................................ 36
3.2.2 Muestra .............................................................................................................. 37
3.2.3 Materiales ........................................................................................................... 37
3.2.4 Métodos y procedimientos. ................................................................................ 41
3.3 Diseño experimental .................................................................................................. 45
3.3.1 Unidad de estudio .............................................................................................. 45
3.3.2 Variable de estudio ............................................................................................ 45
3.4 Operacionalización de variables................................................................................ 46
3.5 Técnicas e instrumentos de recolección de datos ...................................................... 48
3.6 Técnicas de procesamiento y análisis de datos ......................................................... 48
Capítulo IV Análisis y discusión de resultados ................................................................... 49
4.1 Control de la esterilidad de medios de cultivo y condiciones de trabajo .................. 49
ii
4.2 Resultados de la Prueba de esterilidad y microorganismos aislados en los productos
50
4.3 Análisis de la información técnica establecida en los envases de la gotas oftálmicas
naturales ............................................................................................................................... 56
4.4 Características organolépticas de las gotas oftálmicas naturales .............................. 66
4.5 Determinación del pH de las gotas oftálmicas naturales........................................... 67
Capítulo V Conclusiones y Recomendaciones ..................................................................... 72
5.1 Conclusiones ............................................................................................................. 72
5.2 Recomendaciones ...................................................................................................... 74
Bibliografía ............................................................................................................................. 75
Anexos ..................................................................................................................................... 83
iii
Índice de tablas
Tabla 1. Preservantes oftalmológicos. ..................................................................................... 19
Tabla 2. Clasificación de áreas limpias.................................................................................... 24
Tabla 3. Clase de partículas contenidas en áreas limpias de producción industrial ................ 25
Tabla 4. Cantidad de producto que se utiliza para la prueba de esterilidad ya se por filtración
por membrana o por inoculación directa según la USP39-NF34. .......................................... 27
Tabla 5. Materiales y equipos requeridos para la investigación .............................................. 37
Tabla 6. Información técnica de las etiquetas de los envases de las gotas oftálmicas naturales
.................................................................................................................................................. 39
Tabla 7. Operacionalización de variables ................................................................................ 47
Tabla 8. Resultados de la prueba de esterilidad del producto .................................................. 51
Tabla 9. Microorganismos aislados de las gotas oftálmicas naturales..................................... 54
Tabla 10. Descripción de las especificaciones técnicas de las etiquetas de los colirios naturales
.................................................................................................................................................. 58
Tabla 11. Relación del tipo de envase y el volumen de las gotas oftálmicas naturales con la
contaminación microbiana ....................................................................................................... 62
Tabla 12. Control organoléptico de las gotas oftálmicas naturales y su relación con la presencia
de contaminación microbiana .................................................................................................. 67
Tabla 13. Relación del pH de las gotas oftálmicas con los microorganismos contaminantes . 68
Tabla 14. Características del microorganismo Escherichia coli ............................................. 93
Tabla 15. Características del microorganismo Candida albicans ........................................... 93
Tabla 16. Características del microorganismo Bacillus subtilis .............................................. 94
Tabla 17. Características del microorganismo Bacillus cereus ............................................... 95
Tabla 18. Criterios de eficacia antimicrobiana ........................................................................ 98
iv
Índice de figuras
Figura 1. Equipo de Filtración por membrana ........................................................................ 29
Figura 3. Porcentaje de concurrencia de microorganismos gotas oftálmicas naturales .......... 55
Figura 4 Actividad del preservante frente a Escherichia Coli ................................................ 96
Figura 5 Eficacia del preservante frente Staphylococcus aureus............................................ 97
v
Índice de anexos
A: Esquema causa efecto ......................................................................................................... 83
B : Diagrama de flujo: Prueba de esterilidad de productos oftálmicos.................................... 84
C: Diagrama: Identificación de microorganismos bacilos Gram negativos ............................ 85
D: Diagrama: Identificación de microorganismos bacilos Gram positivos ............................. 86
E: Diagrama: Identificación de microorganismos cocos Gram positivos ................................ 87
F: Diagrama: Identificación de microorganismos levaduras ................................................... 88
G: Sondeo de comercialización de gotas oftálmicas naturales ................................................ 89
H: Resultados de la identificación de cada microorganismo ................................................... 93
I: Test de eficacia del preservante ............................................................................................ 96
J: Tipo de envase de las gotas oftálmicas naturales ................................................................. 99
vi
Abreviaturas
ARCSA: Agencia Nacional de Regulación, Control y Vigilancia Sanitaria
BPM: Buenas Prácticas de Manufactura
BPAR: Buenas Prácticas de Agrícolas y recolección
CEMED: Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos
Médicos
HEPA: High Efficiency Particulate Air
ISO: International Organization for Standardization
MSA: Agar Manitol Salado
Mac: MacConkey agar
OMS: Organización Mundial de la Salud
pH: Potencial de hidrógeno
SAB: Agar Sabouraud
TSA: Tripticasa soya agar
TSB: Caldo digerido peptona de caseína- peptona de soya
USP: Farmacopea de los Estados Unidos de América
i
Evaluación de la calidad microbiológica de gotas oftálmicas naturales multidosis de
mayor comercialización en la ciudad de Quito
Autor: Raquel Estefanía Espinoza Méndez
Tutor: Terán Rommy MSc.
Resumen
La terapia con productos naturales se ha convertido en una alternativa bastante común en
nuestro país, por ello se necesita que estos productos cumplan con todos los criterios de calidad
para que la población tenga acceso a productos seguros y eficaces. Las gotas oftálmicas son
productos que se deben fabricar en áreas asépticas para asegurar que son estériles, y que están
libres de microorganismos y pirógenos. Las gotas oftálmicas que son de origen natural,
también deberían cumplir con el criterio de esterilidad, para así garantizar su calidad y
seguridad para su uso por el paciente. En el presente estudio, se evaluó la calidad
microbiológica de 10 marcas de gotas oftálmicas naturales multidosis, de mayor
comercialización en los centros naturistas de la Ciudad de Quito y se estableció sí son o no
estériles. Se realizó la prueba de esterilidad por medio de la técnica de filtración por membrana,
según lo establecido en la Farmacopea de los Estados Unidos (USP39-NF34), y se encontró
que el 100% de los colirios naturales analizados, no cumplieron con la prueba de esterilidad.
Los microorganismos contaminantes identificados fueron: Pseudomonas aeruginosa,
Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus cereus y Candida albicans. Adicionalmente, se
midió el pH y se encontró que estaban dentro del rango de 3,5 a 8,5 establecido en la
farmacopea. Además, se efectuó el control organoléptico, donde el 80% de los productos tenían
partículas extrañas. Los análisis se hicieron en el laboratorio de Microbiología General y
Farmacéutica de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador. Los
resultados indican que las gotas oftálmicas naturales estaban contaminadas con
microorganismos patógenos y potencialmente patógenos, y su consumo puede suponer un
riesgo para la salud de los usuarios, de manera que un control más estricto por parte de las
entidades regulatorias pertinentes es mandatorio.
Palabras clave: GOTAS OFTÁLMICAS, PRODUCTOS NATURALES, ESTERILIDAD,
CONTROL ORGANOLEPTICO, pH.
ii
Evaluation of the microbiological quality of multidose natural ophthalmic drops of
greater commercialization in the city of Quito
AUTOR: Raquel Estefanía Espinoza Méndez
TUTOR: Terán Rommy MSc.
Abstract
Natural products therapy has become a fairly common alternative in our country, it is necessary
that these products meet total quality for the population has access to safe and effective
products. Eye drops are products that must be manufactured in aseptic areas to ensure they are
sterile and free of particles and pyrogens. Herbal eye drops should also meet the criteria of
sterility, to ensure their quality and safety for use by the patient. In the present study, the
microbiological quality of 10 commercial brands of natural multidose eye drops, most
commonly sold in naturists centers of the City of Quito were evaluated for sterility test. It was
performed by membrane filtration technique, as defined in the Pharmacopoeia of the United
States (USP39-NF34); it was found that 100% of natural eye drops analyzed, did not meet the
sterility test. Contaminating microorganisms identified were: Pseudomonas aeruginosa,
Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus cereus and Candida spp. Additionally, the pH was
measured and found to be within the range of 3.5 to 8.5 established in the pharmacopoeia. In,
the organoleptic control, 80% of the products were made foreign particles. The analyzes were
performed in the laboratory of Microbiology and Pharmaceutical Faculty of Chemical Sciences
of the Central University of Ecuador.
The results indicate that natural eye drops were contaminatedwith pathogenic microorganism
s and potentially pathogenic, and their consumption can pose a risk to the health of users,
so a tighter control by the entities relevant regulatory is mandatory.
Key words: OFTALMIC DROPS, STERILITY, NATURAL PRODUCTS, pH
iii
Introducción
Los productos naturales se han convertido en una terapia alternativa para el tratamiento
de varias patologías tanto en nuestro país como a nivel mundial, debido a sus precios
convenientes y a la creencia de que este tipo de productos causan menos efectos adversos
que los medicamentos sintéticos. Sin embrago, el hecho de que sean productos naturales
no los exime de cumplir con los parámetros microbiológicos establecidos en la normativa
y literatura oficiales.
Las preparaciones oftálmicas son productos estériles y libres de partículas extrañas. Su
contenido puede ser dosificado en envases monodosis o multidosis según los
requerimientos del paciente. Entre las preparaciones más comunes están: las soluciones,
geles, pomadas y suspensiones, siendo objeto de este estudio las soluciones oftálmicas.
Las gotas oftálmicas incluyen medicamentos prescritos por el médico y productos de
venta libre, productos para el cuidado de lentes de contacto, productos usados en
combinación con la cirugía ocular y productos naturales. Los colirios naturales al igual
que cualquier producto de aplicación oftálmica deben ser estériles y cumplir con los
parámetros fisicoquímicos y microbiológicos estandarizados, es así, que en el presente
trabajo de investigación se evaluó la calidad microbiológica de gotas oftálmicas naturales
multidosis, de mayor comercialización en la ciudad de Quito.
El presente trabajo de investigación está estructurado en cinco capítulos principales. En
el Capítulo I: El Problema, donde se detalla la importancia y justificación que tiene la
investigación, para el bien de los usuarios de estos productos naturales multidosis,
respaldado en referencias bibliográficas. También se establece el objetivo general y los
objetivos específicos del trabajo de investigación.
1
El Capítulo II: Marco Teórico, describe los antecedentes de la investigación, donde se
hace referencia a las investigaciones realizadas anteriormente sobre la esterilidad, control
microbiológico y las especificaciones de las gotas oftálmicas de origen natural. El marco
teórico que contiene los temas relacionados con este proyecto, incluyendo el marco legal.
Además, se describe las hipótesis al problema planteado y se identifican las variables a
través de su conceptualización.
El Capítulo III: Marco Metodológico, presenta el diseño de la investigación, incluyendo
el paradigma, nivel y tipo de investigación, conjuntamente se detalla la metodología de
la investigación según lo establecido en la USP39-NF34. Se describen también los
métodos y materiales que se utilizarán durante la experimentación, además se presenta
los resultados obtenidos durante la experimentación.
El Capítulo IV: Análisis y discusión de resultados, explica la razón de cada resultado
obtenido durante el trabajo de investigación.
El Capítulo V: Conclusiones y recomendaciones, presenta un resumen de los resultados
obtenidos en concordancia con los objetivos planteados.
2
Capítulo I
El Problema
1.1 Planteamiento del problema
Las gotas oftálmicas son soluciones con principios activos destinados a la aplicación
ocular y se usan como profilaxis en casos quirúrgicos, como antiinflamatorios y en ciertos
casos para combatir infecciones bacterianas. Estos productos son considerados estériles
y eso implica que deben ser elaborados y envasados en ambientes asépticos. Además,
deben tener un sistema preservante debidamente aprobado que asegure la calidad
microbiológica del producto terminado durante el almacenamiento y su uso por el
paciente. La administración de gotas contaminadas con microorganismos puede ser un
riesgo potencial para los pacientes, causando infecciones, lesiones graves, reacciones
sistémicas o hipersensibilidad ocular (Valcárcel, 1996).
El incumplimiento de las Buenas Prácticas de Manufactura en la fabricación de estos
productos oftálmicos naturales puede conllevar a su contaminación. Algunos estudios se
han realizado sobre la contaminación microbiológica de gotas oftálmicas que demuestran
que la presencia de microorganismos puede resultar de mucho riesgo en el uso de los
pacientes.
En el Cairo Egipto, Abo-State, M, et al, realizaron el análisis microbiológico de 75 gotas
oftálmicas con agentes antimicrobianos, compradas en distintas farmacias de la ciudad.
Se utilizaron métodos estandarizados de identificación microbiana, y además se realizó
la prueba de susceptibilidad antimicrobiana. Se encontró que el 77,3% de las muestras
analizadas estuvieron contaminadas, de las cuales se aislaron 133 microorganismos, de
los cuales 53 eran bacilos Gram positivos grandes identificados como Bacillus spp. En la
prueba de susceptibilidad se determinó que las especies de Bacillus eran susceptibles a
3
imipenem, amikacina, ciprofloxacino, levofloxacino, azitromicina, ofloxacina y
claritromicina, mientras que, fueron resistentes a gentamicina, vancomicina, ceftazida,
cefuroxima, cloranfenicol y colistina. (Abo-State, 2012). La contaminación por Bacillus
spp, se puede dar por la contaminación ambiental y por las materias primas.
En un Hospital de Kenia se realizó el análisis microbiológico de soluciones oftálmicas en
uso, de pacientes del Departamento de Oftalmología del Hospital de Kenyatta. Las
soluciones se analizaron en el Departamento de Microbiología de la Universidad de
Nairobi y se encontró que el porcentaje de contaminación microbiana fue del 6%. Se
identificaron varias especies bacterianas, como: Staphylococcus epidermidis,
Haemophilus spp, Bacillus spp Micrococcus spp, así como un bacilo Gram negativo. La
prueba de susceptibilidad a los antibióticos, se realizó con todos los microorganismos
encontrados por el método de difusión en disco. Todas las bacterias fueron susceptibles
a: vancomicina, gentamicina y ciprofloxacino, mientras que dos bacterias fueron
resistentes a cloranfenicol, tetraciclina, penicilina y cefotaxime. (Nentwich, 2007). Con
esto se concluyó que, los microorganismos Staphylococcus epidermidis, Bacillus spp,
Micrococcus spp pertenecían a la flora conjuntiva normal de los ojos o la piel, mientras
que la presencia de microorganismos Gram negativos representa un riesgo potencial para
los pacientes causando infecciones graves. Se mostró también que las bacterias presentan
resistencia a antibióticos, lo cual puede resultar en una lucha difícil contra las infecciones
causadas por los microorganismos contaminantes.
En Paraguay, Ginés, J et al, (2012) determinaron la tasa de contaminación microbiológica
de gotas oftálmicas utilizadas por pacientes que se atendían en la consulta externa de la
Fundación Visión en Asunción en el periodo 2007-2008. Después de la recolección, las
gotas oftálmicas fueron llevadas al Laboratorio de Microbiología del Instituto de
Investigaciones en Ciencias de la Salud, donde se analizó el contenido de los colirios por

4
métodos microbiológicos convencionales para la búsqueda e identificación de bacterias
aerobias, bacterias anaerobias, hongos y levaduras. El porcentaje de contaminación
microbiana de los productos analizados fue del 11%. Los microorganismos identificados
fueron Staphylococcus coagulasa negativo, Propionibacterium acnes, Serratia
marcescens, Corynebacterium spp, Alcaligenes faecalis y Aspergillus fumigatus, en este
estudio se sugería dar orientaciones a los pacientes en cuanto al modo de uso,
almacenamiento y tiempo de cambio de los colirios por parte del oftalmólogo y el químico
farmacéutico ya que estos microorganismos pueden causar infecciones graves o empeorar
la condición de un paciente. (Ginés, 2012) De este estudio se concluye que los
microorganismos aislados como Staphylococcus coagulasa negativo, Propionibacterium
acnés, Corynebacterium spp, son procedentes de la flora conjuntiva normal y de la piel,
mientras que la contaminación por bacterias Gram negativas como Serratia marcescens,
Alcaligenes faecalis, y el hongo Aspergillus fumigatus pueden causar infecciones
oculares graves por tratarse de microorganismos patógenos.
La contaminación microbiológica de las gotas oftálmicas naturales se puede dar por
factores como: El incumplimiento de las buenas prácticas agrícolas y de recolección de
plantas medicinales, para la selección de la materia prima que para la elaboración de estos
productos naturales es de vital importancia, la OMS en su preocupación por garantizar la
calidad de los productos proporciona directrices que orientan a la obtención y recolección
de materia vegetal de calidad (OMS, 2003); la falta de las Buenas prácticas de
manufactura, la OMS en su anexo 6 del Informe 59, establece parámetros para la
elaboración adecuada de productos farmacéuticos estériles, desde las especificaciones de
área de preparación, llenado, esterilización, control de calidad del producto terminado
hasta las normativas que debe seguir el personal encargado. (OMS, 2011); Por último y
no menos importante la formulación juega un papel crucial, donde al no escoger un
5
sistema preservante y envase adecuado que ayude inhibir el crecimiento microbiano
durante el uso, estos productos naturales se podrían contaminar causando cambios físicos
y químicos a los productos comercializados e infecciones oculares a los usuarios.
Para asegurar la calidad microbiológica de las gotas oftálmicas naturales, el fabricante
debe cumplir con las especificaciones de calidad, propias del proceso de fabricación para
estos productos estériles, se deben además ejercer acciones de vigilancia y control por
parte de las agencias de gobierno para asegurar este cumplimiento. En el Ecuador, la
entidad encargada de estos procesos es la Agencia Nacional de Regulación, Control y
Vigilancia Sanitaria (ARCSA), que además de realizar control y vigilancia, debe realizar
el control posregistro, en los establecimientos donde se fabrican, almacenan, distribuyen
y comercializan Productos Naturales procesados de uso medicinal, con el fin de verificar
y garantizar el cumplimiento de las especificaciones técnicas de los productos y así
asegurar su calidad. (ARCSA, 2016).
No se ha encontrado evidencia que estos controles posregistro se realicen de forma
periódica para gotas oftálmicas naturales. En este estudio se evaluó la calidad
microbiológica de productos oftálmicos naturales comercializados en centros naturistas
de Quito, y se identificó la existencia de microorganismos contaminantes.
1.2 Formulación del problema
¿Las gotas oftálmicas naturales multidosis cumplen con las especificaciones de calidad
microbiológica especificada en la literatura en este caso la USP39-NF34 (Farmacopea de
los Estados Unidos de América)?
6
1.3 Objetivos
1.3.1 Objetivo general.
 Evaluar la calidad microbiológica de las gotas oftálmicas naturales de mayor
comercialización en la ciudad de Quito.
1.3.2 Objetivos específicos.
 Realizar la prueba de esterilidad de las gotas oftálmicas naturales.
 Aislar e identificar los microorganismos presentes en las gotas oftálmicas
naturales.
 Determinar el pH de las soluciones oftálmicas naturales.
 Realizar el control organoléptico de las gotas oftálmicas naturales.
1.4 Justificación e importancia
La resolución de la Asamblea Mundial de la Salud (WHA62.13) adoptada en 2009,
actualizó la estrategia de la OMS sobre medicina tradicional 2002-2005, en su renovación
busca ayudar a los países a promover de mejor manera la salud y proteger a los usuarios
de estos productos, mediante el uso seguro y eficaz de la Medicina Tradicional
Complementaria, por lo que los estados miembros son responsables de definir las
necesidades presentes y futuras, y crear sus propios perfiles de los productos naturales.
(OMS, 2013)
En la última década, la medicina tradicional ha ganado interés en todo el mundo, en Chile
el 71% de la población recurre a la medicina tradicional y a las plantas medicinales. En
algunos países desarrollados como Australia, Canadá, los Estados Unidos de América y
Francia, se ha popularizado el uso de medicina tradicional, complementaria y alternativa,
7
para tratar o prevenir enfermedades y para mejorar la calidad de vida de los usuarios. Para
ello, la OMS ha logrado dar mayor reconocimiento al uso de la medicina tradicional,
logrando que en la última década, 25 países declaren tener una política nacional de
regulación para productos herbarios. (OMS, 2003).
En Europa, Alemania tiene conformada una comisión de fitoterapia y sustancias
herbarias, que se encarga de recopilar toda la información de los medicamentos herbarios
con criterios de seguridad y eficacia. En América Latina, el proceso de legislación y
regulación de productos naturales varia de un país a otro, y esto se debe a las diferencias
culturales entre países, en Argentina las tiendas herbarias se encuentran autorizadas para
la venta de productos naturales, pero existe falta de control desde los criterios de la
recolección de la planta hasta el proceso de molienda. En otros países como Brasil, para
garantizar la calidad, eficacia y seguridad de los productos herbarios se exigen
documentación completa de las plantas, pero debido a la resistencia de algunas empresas
no se ha establecido la ley donde se da prioridad a la evaluación de la seguridad y eficacia
de algunas plantas medicinales, mientras que en Chile, existe un sistema integrado de
legislación para este tipo de productos por lo que el registro sanitario es necesario para la
comercialización de productos naturales. (Calixto, 2000)
La preocupación por la diseminación y publicidad de los productos naturales a nivel
mundial, busca la armonización de la legislación para productos naturales a nivel
mundial.
En la recopilación de García M et al, (2004) comparan la legislación para productos
naturales o fitofármacos disponible de algunos países de la Región Iberoamérica entre
ellos Brasil, Argentina, Chile, Perú, México, Guatemala, Colombia Cuba, Bolivia,
Ecuador, y España. Se concluye la heterogeneidad de las leyes en cuanto a las
8
definiciones del objeto de regulación y a los parámetros que se exigen en las solicitudes
para la comercialización de productos naturales. Con esto se busca que haya una
homogeneidad dentro del marco legal, para garantizar los productos de buena calidad,
acabar con el fraude y especulación de los fitofármacos y proteger la salud de las personas.
(González, 2004)
Algunos esfuerzos se han hecho en otros países para regular y alertar sobre la
comercialización de productos naturales. En marzo del 2016, la agencia regulatoria de
Cuba CEMED (Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos
Médicos) lanzó una alerta acerca de la venta por internet de unas gotas oftálmicas
naturales: “Gotas Milagrosas”, “Natural de Aloe” y “Zanahoria y Aloe” de marca “Colirio
cubano” del Laboratorio Ferchop en la Habana, productos que forman parte del presente
trabajo de investigación. Estos productos se comercializan en varios países de
Latinoamérica incluido el Ecuador. Esta instancia señaló, que las agencias regulatorias de
Argentina, Chile y Perú también emitieron alertas acerca de la comercialización
fraudulenta de estos productos. (CIMUN, 2017).
En el Ecuador, la fabricación, almacenamiento y comercialización de productos naturales
procesados de uso medicinal, es regulada por el ARCSA, entidad que se encarga de emitir
el registro sanitario a estos productos, para el uso seguro de los pacientes, que
generalmente pertenecen a grupos vulnerables, de bajos recursos económicos, que tienden
a auto medicarse o que consideran según las creencias tradicionales que los medicamentos
naturales causan menos efectos adversos que los medicamentos sintéticos. Sin embargo,
el control posregistro no se da con regularidad y los productos naturales podrían no ser
seguros microbiológicamente, pero se expenden libremente en los Centros naturistas de
la ciudad de Quito.
9
En este estudio, se realizó el análisis microbiológico de gotas oftálmicas naturales con la
finalidad de reportar la posible presencia de microorganismos que podrían poner en riesgo
a los usuarios, ya que, el uso de colirios contaminados por patógenos puede causar
infecciones, malestar e incluso empeorar la patología en proceso. Los resultados serán
notificados al ARCSA para que tome las medidas pertinentes, en el caso de encontrar
alguna irregularidad en la seguridad microbiológica en los productos analizados.
10
Capítulo II
Marco Teórico
2.1 Antecedentes de la investigación
Las gotas oftálmicas como cualquier medicamento estéril, deben ser preparadas bajo
condiciones asépticas y cumplir con buenas prácticas de almacenamiento, con el fin de
evitar la contaminación microbiana. Para prevenir una contaminación durante el uso, no
se recomienda que sea prolongado, ya que a pesar de que muchos de estos productos
contienen preservantes en su formulación, se han reportado casos de contaminación
durante su administración. (Rahman, 2006)
En Japón, Saisyo, A et al (2016) determinaron la tasa de contaminación microbiana y las
especies contaminantes de gotas oftálmicas usadas por pacientes ambulatorios y
hospitalarios del Hospital de la Universidad de Yamaguchi. Se analizaron un total de 1615
muestras, de las cuales 1094 contenían conservantes antimicrobianos pero mostraron un
2,8% de contaminación microbiana, 289 muestras libres de conservantes preparadas en
el hospital tenían el 2,1% de contaminación. Las soluciones que no contenían
conservantes pero estaban equipadas con un filtro, no presentaron contaminación
microbiológica. Los microorganismos identificados fueron Pseudomonas fluorescens,
Acinetobacter spp, Pseudomonas aeruginosa, Sthaphylococcus coagulasa negativo, y
Candida spp. Los resultados mostraron que todas las preparaciones tienen riesgo de
contaminación, especialmente las preparaciones del hospital en las que pueden crecer
microorganismos patógenos durante su uso. (Saisyo, 2016) La presencia de
microorganismos Gram negativos supone un riego potencial para los pacientes. Aunque
la tasa de contaminación parece ser menos frecuente en productos con preservantes la
contaminación microbiana puede darse, de manera que se deben seguir las
11
recomendaciones de los profesionales de la salud en temas como el uso, almacenamiento
y administración de las preparaciones oftálmicas.
En Udaipur, India se realizó un estudio prospectivo de la esterilidad de gotas oftálmicas
que tenían entre 35 y 52 días de utilización, las cuales eran dispensadas solamente en la
farmacia del Hospital Hisar a los pacientes ambulatorios del Departamento de
Oftalmología. No se encontraron microorganismos contaminantes en las soluciones
analizadas, por lo que se concluye que la contaminación microbiana no es una regla que
cumplen todas las soluciones pese a su procedencia y almacenamiento, como se ha
mencionada en otros estudios publicados. (Virani, 2015)
El porcentaje de contaminación de las gotas oftálmicas y los microorganismos aislados,
algunos pertenecientes a la flora normal de la conjuntiva, varía entre los diferentes
estudios realizados. En Ahvaz, una ciudad al suroeste de Irán, Feghhi, M et al,
investigaron la incidencia de contaminación por bacterias y hongos en productos
oftálmicos, en el Departamento de Oftalmología del hospital Imam Khomeini, en el que
recogieron aleatoriamente 286 productos a los 1,2,3,4 y 7 días de uso por el paciente.
Para la recuperación de los microorganismos usaron las gotas restantes de los goteros,
tapones, y cuentagotas, inoculando la muestra en medios selectivos y usando técnicas de
identificación estandarizadas. La tasa de contaminación fue de 17,8% en general. Los
microorganismos más comunes encontrados fueron Bacillus cereus, Staphylococcus
epidermidis, Bacillus subtilis, especies de Diphtheroid spp, y Nocardia spp algunos
hongos como Candida albicans y Rhodotorula, algunos de ellos pertenecientes a la flora
humana mientras que otros eran saprofitos del suelo. La contaminación microbiana
presente en estos productos oftálmicos indicó un riesgo potencial para los pacientes en
los hospitales, ya que se trataba de microorganismos potencialmente patógenos. (Feghhi,
2008)
12
La mayoría de colirios contienen preservantes y se envasan en recipientes de plástico,
aquellos colirios que no contienen preservantes se usan para evitar la irritación de los ojos
al igual que en el caso de ciertas alergias. En Reino Unido Rahman, et al (2006),
determinaron la tasa de contaminación microbiana de 95 diferentes gotas oculares
mutidosis libres de preservantes de pacientes hospitalizados y ambulatorios del Hospital
General Gartnavel. Se realizó el análisis tanto cualitativo como cuantitativo de los
productos con procesos estandarizados. La incidencia general de contaminación fue del
8,4%, ninguno de los colirios que contenían antibióticos presentaron contaminación,
mientras que el 19% de los productos que no contenían antibióticos estaban
contaminados. Los microorganismos encontrados fueron Staphylococcus aureus,
Staphylococcus coagulasa negativo, Bacillus spp, Serrattia spp, Klebsiella oxytoca,
Enterobacter cloacae y Streptococcus alfa, este tipo de contaminación por
microorganismos patógenos implica un riesgo potencial muy alto para los pacientes
pudiendo provocar infecciones oculares graves o complicaciones de las patologías ya
presentes. (Rahman, 2006)
En las últimas décadas, el consumo de preparaciones a base de productos naturales ha
incrementado, no así su control y vigilancia. En Portugal, Martins, H et al (2001)
evaluaron la contaminación microbiológica utilizando métodos convencionales. Se
recogieron del mercado 62 muestras de siete plantas entre ellas manzanilla, seda de maíz,
menta de centeno, hojas de naranjo, de las cuales el 96,8% estaban contaminadas con
Bacillus cereus, de ellas el 19,2% presentaban las esporas de este microorganismo; el
83,9% de las muestras presentaba Clostridium perfringens y contaminación con
diferentes hongos como Fusarium spp, Aspergillus flavus y Aspergillus niger.
13
El cuadro microbiológico presentado en este estudio sugiere que los productos con plantas
pueden ser de alto riesgo para tratar problemas de salud, por lo que las autoridades
pertinentes deben tomar medidas para el control sanitario de estos productos naturales.
(Martins, 2001)
En el 2016 la agencia regulatoria de Cuba CEMED (Centro para el Control Estatal de
Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos), emitió una alerta sobre la venta por
internet de unas gotas oftálmicas naturales, “Gotas Milagrosas”, “Natural de Aloe” y
“Zanahoria y Aloe” de marca Colirio cubano realizado por el Laboratorio Ferchop en la
Habana, los cuales forman parte de este estudio, mismas que se comercializan en varios
países de Latinoamérica incluyendo Ecuador. Esta entidad no ha otorgado ningún tipo de
autorización sanitaria para la comercialización de este tipo de productos.
Además CEMED en su comunicado COMUNICACIÓN DE RIESGO No. 03/2016,
menciona que en noviembre del 2015 DIGEMID (Dirección General de Medicamentos,
Insumos y Drogas) de Perú lanzó una alerta N° 62, en la que comunicó que habían
encontrado puntos donde se vendían productos naturales sin registro sanitario, entre los
productos estaban los colirios cubanos. Los productos fueron enviados al Centro de
Control de Calidad del Instituto Nacional de Salud, para su correspondiente análisis donde
se concluyó que no cumplían con las especificaciones de esterilidad.
El mismo año en Chile, la Agencia Nacional de Medicamentos, del Instituto de Salud
Pública dio a conocer en el documento Ref. N° 5696/15, la prohibición de la venta de los
productos “Colirio Natural de Sábila y Zanahoria” y el Colirio Gotas Naturales “Noni”
por no tener autorización para su comercialización, a esto se suma que se trataban de
productos contaminados. En el comunicado figura finalmente que estos productos son
considerados Medicamentos fraudulentos ya que no se conoce el fabricante y no cuentan
con registro sanitario. (CEMED, 2016).

14
En el Ecuador, gotas oftálmicas naturales se comercializan en centros naturistas sin
ninguna restricción, y se desconoce si la agencia regulatoria ARCSA realiza el control
posregistro periódico de estos productos, sin embrago ARCSA a través de su Centro
Nacional de Farmacovigilancia, recomienda no usar “Colirio Cubano Gotas Milagrosas”,
“Colirio El Cubano Sábila de Aloe” y “Colirio El Cubano Noni Plus” por no poseer
registros sanitarios y por tanto no se puede garantizar su seguridad (ARCSA, 2016). Estos
productos fueron parte del presente proyecto junto con otros productos que parecen tener
registro sanitario, por consiguiente, en este proyecto de investigación, se analizó los
colirios naturales previo a su uso y que son de venta libre en la ciudad de Quito.
2.2 Fundamentación teórica
Las preparaciones oftálmicas, son productos estériles libres de partículas extrañas y
microorganismos, destinados a la aplicación ocular, por este motivo la especificación
dominante para estos productos es la esterilidad debido a la fisiología del ojo humano ya
que la administración de este tipo de productos es difícil por los tejidos superficiales y la
permeabilidad de la córnea. (Gerbino, 2005)
2.2.1 Anatomía y fisiología del ojo
Los parpados y el sistema lagrimal, son los encargados de eliminar cualquier material en
el ojo a menos que sea pequeño y compatible con los tejidos de superficie del ojo, desde
el punto de vista fisicoquímico. Los ojos constan de estructuras como:
Los párpados que dan protección mecánica del globo ocular y a la córnea mediante la
lubricación con secreciones de las glándulas lagrimales y de células especializadas que se
encuentran en la conjuntiva.
El globo ocular, cuya capa externa es resistente y plegable, y su contenido de agua es
regulada por la córnea, la esclerótica que forma dos tercios del ojo, es blanca excepto
15
cuando hay una irritación debido a la dilatación de los vascular tiene microcirculación
sanguínea la cual nutre a todos los tejidos. Además el aparato óptico está formado
secuencialmente de la película precorneana, córnea, humor acuoso, pupila, cristalino
humor vítreo y la retina.
La conjuntiva está compuesta de la membrana conjuntival que cubre la superficie de la
porción blanca del ojo y la capa interna de los parpados, lo cual permite el movimiento
del globo ocular.
El sistema lagrimal, cubre y lubrica las superficies de la córnea y la superficie conjuntival
por un líquido secretado por la conjuntiva y por las glándulas lagrimales cuya secreción
ayuda a la lubricación y limpieza en condiciones ordinarias para mantener la estabilidad
de la córnea y la conjuntiva. (Gerbino, 2005)
2.2.2 Soluciones oftálmicas
Son preparaciones estériles, libres de partículas extrañas y pirógenos, que contienen uno
o más principios activos disueltos en un medio acuoso cuya aplicación tópica son los ojos.
Estos productos deben ser estables química, física y biológicamente, además de no ser
tóxicos e irritantes para la córnea. (Mendez, 2011). Estas preparaciones pueden contener
excipientes que ayudan a ajustar la tonicidad o la viscosidad, a estabilizar el pH,
preservantes antimicrobianos apropiados, que sean compatibles con los componentes de
la formulación. En caso de no contener antimicrobianos se deberán formular en envases
unidosis para evitar la contaminación microbiana una vez abiertos. (Real Farmacopea
Española, 2008)
Las características más importantes de las soluciones oftálmicas son:
16
2.2.2.1 Transparencia
Las soluciones oftálmicas están libres de partículas extrañas, y la filtración por membrana
suele ser un mecanismo para conseguir ese resultado, a más que ayuda a la esterilización
de los productos. La transparencia depende también del envase el cual debe ser estéril y
sin pelusas. (Gerbino, 2005)
2.2.2.2 Estabilidad:
Es la duración de las cualidades físicas, químicas y terapéuticas de las soluciones
oftálmicas la cual depende de la naturaleza del principio activo, el pH del producto, el
método de preparación, los excipientes de la formulación y el tipo del envase. El pH del
producto, la sensibilidad al oxígeno, el tipo de envases constituyen factores de estabilidad
para muchas formulaciones. (Gerbino, 2005)
2.2.2.3 Buffer y pH
Las preparaciones oftálmicas deben estar formuladas con un pH equivalente al de las
lágrimas naturales el cual está alrededor de 7.4, esta capacidad no siempre se logra por
las características de los demás aditivos, por los que la USP39-NF34 menciona que el pH
permitido para las soluciones oftálmicas se encuentra en un rango de 3,5 hasta 8,5, este
valor deberá centrarse en el pH donde el producto sea más estable. (USP, 2016). Por lo
tanto, el pH debe ser optimizado con un sistema amortiguador de buffer, para mantener
la vida útil del producto. (Gerbino, 2005)
2.2.2.4 Tonicidad
Se refiere a la presión osmótica la cual se expresa por las sales presentes en una solución
acuosa. Una solución oftálmica es isotónica, ya que su tonicidad es igual a la del Cloruro
de Sodio 0,9%. (Gerbino, 2005)
17
2.2.2.5 Viscosidad
Los preparados oftálmicos suelen contener polímeros que trasmiten espesor a la película
lagrimal y aumentan el tiempo de contacto con la córnea, evitando la tasa del drenaje
lagrimal. Se utilizan sustancias como polímeros como Hidroxipropilmetilcelulosa,
alcohol polivinilico, y hidroetilcelulosa. (Gerbino, 2005)
2.2.2.6 Aditivos
Son sustancias químicas que con compatibles con los principios activos de la formulación,
los más comunes son: el agua purificada USP como vehículo de la formulación,
tensoactivos que ayudan a la solubilidad de los integrantes, y preservantes
antimicrobianos para evitar la contaminación en productos multidosis. (Gerbino, 2005)
2.2.2.7 Preservantes antimicrobianos
Los conservantes son sustancias químicas o mezclas de sustancias que añadidas a la
formulación ayudan a evitar la contaminación microbiana, introducida accidentalmente
en el envase. La selección de conservante puede ser difícil por lo que se determinaron los
siguientes criterios para su elección: debe tener un amplio espectro contra
microorganismos Gram positivos, Gram negativos, hongos y levaduras, ser compatible
con los componentes de la formulación y el envase, no ser tóxico, y además debe ser
estable al pH de la solución. (Gerbino, 2005) Los preservantes no deben ser agregados
con el fin de justificar el incumplimiento de las Buenas Prácticas de Manufactura.
La tabla N° 1 presenta los preservantes más utilizados en las formulaciones de preparados
oftálmicos, sus estructuras y concentraciones:
18
Tabla . Preservantes oftalmológicos.
Tipo Estructura Concentración
Compuesto de amonio 0,004 – 0,02 %

cuaternario La más común: 0,01%
Mercuriales orgánicos 0,001 – 0,01%
Parahidroxi benzoatos Máximo 0,1%
Clorobutanol 0,5%
Alcohol aromático 0,5 – 0,9 %
Elaborado por: Raquel Espinoza
Adaptada de: (Gerbino, 2005)
2.2.3 Administración tópica de soluciones oftálmicas
Uno de los principales problemas de contaminación de las gotas oftálmicas es el manejo
inadecuado de los productos por el paciente o el personal de salud. El farmacéutico debe
aconsejar la manera de administración de las preparaciones oftálmicas.
19
Las recomendaciones son las siguientes: el paciente debe tener limpias las manos al
momento de aplicar estos productos estériles, una vez abierto, evitar que la punta del
cuentagotas toque la superficie del ojo, y que la tapa tenga contacto con superficies sucias.
Los colirios no se deben usar cuando hayan cambiado de color o se encuentren caducados.
(Gerbino, 2005) Por lo tanto, es recomendable usar un colirio no más de cuatro semanas.
Las soluciones oftálmicas contaminadas con Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtillis,
Aspegillus fumigatus pueden causar infecciones. Los agentes antimicrobianos presentes
en la formulación deberían ser eficaces ante estos microorganismos. Por lo que se
recomienda tomar medias asépticas antes, durante y después de la fabricación de las
soluciones oftálmicas. (Abo-State, 2012)
2.2.4 Medicamento Natural y Tradicional
Son productos cuyos principios activos son obtenidos directamente o por procesos
tecnológicos de plantas, animales o vegetales, que su uso se encuentra justificado por la
medicina tradicional o por estudios científicos, cuya finalidad es profiláctica, curativa o
de diagnóstico. (UNIMED, 2001)
2.2.5 Formulación farmacéutica de medicamentos naturales y tradicionales
Las técnicas en la fabricación de medicamentos a partir de sustancias activas sintéticas,
se pueden aplicar para los productos naturales de uso medicinal, sin olvidar que este tipo
de productos merecen cuidados especiales. En tecnología farmacéutica, la materia prima
para la formulación de estos productos son los extractos y tinturas, los cuales pueden ir
en cantidades variables, pero pequeñas de principios activos, y cantidades grandes de
excipientes como sales orgánicas e inorgánicas, azúcares, polisacáridos y algunos
polímeros. En la formulación de productos naturales se debe tener principal atención en
20
la estabilidad de los principios activos y forma farmacéutica con la que se va administrar.
(Sharapin, 2000)
Las formas farmacéuticas se preparan a partir de extractos y tinturas por lo que clasifican
de la siguiente manera:
 Formulaciones líquidas: Gotas, jarabes, soluciones, suspensiones para cápsulas
blandas de gelatina.
 Formulaciones solidas: Comprimidos, comprimidos recubiertos, cápsula de
gelatina y gránulos.
 Preparaciones semisólidas para uso externo: Cremas, lociones, pomadas y
supositorios. (Sharapin, 2000)
2.2.6 Generalidades en la elaboración de los Productos Naturales
La eficacia y seguridad de estos productos se consigue desde la correcta selección de la
materia prima, la elaboración hasta el control de calidad del producto natural terminado.
Para la elaboración de los productos naturales se debe tener en cuenta: que la forma
farmacéutica deber ser aceptable, y entregar la dosis terapéutica correcta de principio
activo para ser eficaz y seguro para el paciente, su formulación debe ser estable física,
química y biológicamente, y ser libre de contaminación microbiana. (Sharapin, 2000)
2.2.7 Buenas prácticas agrícolas y de recolección de plantas medicinales
La materia prima vegetal de uso medicinal al igual que cualquier materia prima debe
cumplir con parámetros que garanticen su calidad para la producción de productos
naturales clasificados como medicamentos.
La OMS en su preocupación por garantizar la calidad de los productos herbarios
medicinales proporciona directrices que orientan a la obtención y recolección de materia
21
vegetal de calidad al igual que el procesamiento de la materia recolectado desde su secado
hasta su envasado, almacenamiento y distribución. (OMS, 2003)
2.2.8 Formas farmacéuticas líquidas
Estas formas farmacéuticas se preparan a partir de extractos vegetales y tinturas. Los
extractos fluidos deben diluirse mientras que los extractos blandos o secos deben ser
disueltos según el solvente que requiera la formulación en ambos casos. Cuando el
extracto sea poco soluble se puede utilizar un sistema cosolvente como por ejemplo
glicerina poliglicoles, sorbitol, si el caso de no conseguir resultados satisfactorios se
pueden utilizar surfactantes no iónicos como Polisorbato o derivados del ácido oleico.
Algunos principios activos aumentan su solubilidad cuando forman sales, el pH mejora
la solubilidad y la estabilidad de algunos principios activos. Finalmente, la filtración es
un proceso esencial, ya que remueve todas las sustancias insolubles de un extracto, pero
puede remover a los principios activos. (Sharapin, 2000). Dentro de las formas
farmacéuticas liquidas tenemos los preparados naturales para uso ocular.
2.2.9 Productos naturales para uso ocular
Los productos naturales para uso ocular son preparaciones que contienen ingredientes
naturales en su formulación, debido a que muchas de las propiedades beneficiosas de
algunas plantas podrían ayudar a mejorar la salud visual. Estos productos se preparan a
base de infusión de plantas, extractos y tinturas diluidos según el tipo de materia prima.
(Sharapin, 2000)
Entre los productos más comunes están los colirios de: manzanilla, zanahoria, aloe, malva
Eufrasia llantén, romero, alcachofa. (Rodríguez, 2012)
En el Ecuador, se comercializan gotas oftálmicas de zanahoria, aloe, manzanilla, uchuva,
dedo de niño, o combinaciones de estas plantas.
22
2.2.10 Clasificación de las formas farmacéuticas según los criterios microbiológicos
2.2.10.1 Productos no estériles
Son productos que pueden tener una cantidad permitida de cierto tipo de
microorganismos, pero que las farmacopeas oficiales especifican la cantidad máxima de
microorganismos aerobios y de mohos y levaduras así como las especies microbianas que
no deben estar en este tipo productos. (Aulton M. , 2004)
2.2.10.2 Productos estériles
Los productos estériles deben estar libres de microorganismos, pirógenos y partículas
extrañas. La fabricación de los productos estériles debe ser aséptica, en áreas limpias
destinadas solo a la producción de este tipo de productos. (Aulton M. , 2004)
2.2.11 Buenas prácticas de manufactura para productos farmacéuticos estériles
Los productos farmacéuticos estériles deben cumplir con parámetros para una elaboración
adecuada, desde las especificaciones de área de preparación, llenado, esterilización,
control de calidad del producto terminado hasta las normativas que debe seguir el personal
encargado. (OMS, 2011)
2.2.11.1 Áreas de preparación de productos farmacéuticos estériles
Los productos estériles se deben elaborar en áreas limpias, las cuales se clasifican de
acuerdo con los requerimientos medioambientales. Cada proceso de fabricación requiere
un nivel de limpieza ambiental para minimizar los riesgos de contaminación por
partículas o microorganismos del producto o de los materiales que se utilizan.
La Tabla N° 2 muestra la clasificación de las áreas de producción de productos estériles
según la Unión Europea.
23
Tabla . Clasificación de áreas limpias
Número máximo permitido de partículas por

m3 mayor que o igual al tamaño tabulado
En
Clase Características En reposo funcionamiento
5.0 µm 0.5 µm 5.0 µm 0.5 µm

Se realizan operaciones de alto
3 520 3 520
A riesgo. Debe tener un flujo de 20 20
aire unidireccional
Se realizan preparaciones 3 520 3 520
B 29 29
asépticas y de llenado
Áreas higiénicas para donde se
llevan a cabo etapas menos 352 000 352 000
C 2900 2900
criticas como el sistema de
cerrado
Áreas higiénicas para donde se
llevan a cabo etapas menos 3 520 000 No No
D 29000
criticas como el sistema de definido definido
cerrado
Adaptada de: (OMS, 2011)
La International Organization for Standardization (ISO) establece y controla las normas
de fabricación para todas las áreas industriales, la tabla N° 3 resume el valor máximo de
concentración y tamaños de partículas para las diferentes áreas limpias:
24
Tabla . Clase de partículas contenidas en áreas limpias de producción industrial
Número de Valor máximo de la concentración de partículas por metro cúbico,

clasificación igual o mayor a los tamaños indicados en el cuadro inferior
N de ISO
0,1 µm 0,2 µm 0,3 µm 0,5 µm 1 µm 5 µm
Clase ISO 1 10 2 - - - -
Clase ISO 2 100 24 10 4 - -
Clase ISO 3 1 000 237 102 35 8 -
Clase ISO 4 10 000 2 370 1 020 352 83 -
Clase ISO 5 100 000 23 700 10 200 3 520 832 29
1 000
Clase ISO 6 237 000 102 000 35 200 8 320 293
000
Clase ISO 7 - - - 352 000 83 200 2 930
Clase ISO 8 - - - 3 520 000 832 000 293 000
35 200 8 320
Clase ISO 9 - - - 293 000
000 000
Adaptado de: INGELYT (2017)
La relación entre los parámetros establecidos entre la Unión Europea y la ISO 14644-1
se establece de la siguiente manera:
 Grado A y grado B, Clasificación de partículas del aire es ISO 5
 Grado C (en reposo y funcionamiento) clasificación de partículas en el aire ISO
7 y ISO8 respectivamente
 Grado D, clasificación de partículas ISO 8
2.2.11.2 Esterilización de los productos farmacéuticos
Los productos una vez elaborados se deben esterilizar totalmente en su envase final, para
lo cual se puede emplear calor seco, calor húmedo, por radiación ionizante, empleando
óxido de etileno, o en caso de que las propiedades del contenido de sean susceptibles a
25
los procesos anteriores se realiza filtración por membrana y posteriormente se realiza un
llenado aséptico en el envase final.
Cada procedimiento depende de los registros sanitarios de manufactura y
comercialización. Un requisito importante en los materiales de partida es la baja
contaminación microbiana y su biocarga se debe monitorear antes de la esterilización.
(OMS, 2011)
2.2.12 Análisis de la esterilidad de productos farmacéuticos
La prueba de esterilidad, se aplican a sustancias, preparaciones o artículos cuya esterilidad
es requerida por la Farmacopea oficial. Este análisis se lleva a cabo bajo condiciones
asépticas para productos estériles, en el que se establece la presencia o ausencia de
microorganismos aerobios y/o anaerobios facultativos viables entre ellos tenemos
bacterias, hongos y levaduras. (USP, 2016)
Sin embargo, un resultado satisfactorio únicamente indica que no se han encontrado
microorganismos contaminantes en la muestra examinada bajo las condiciones de la
prueba.
La esterilidad de los productos se puede hacer por dos métodos: Filtración por membrana
que se usa cuando la naturaleza del producto lo permite, es decir, para preparaciones
acuosas, alcohólicas o aceitosas e inoculación directa para productos sólidos, equipo
quirúrgico, dispositivos estériles y líquidos. Tanto para productos líquidos como sólidos
se debe determinar la cantidad de envases de acuerdo con el tamaño del lote para el
análisis de esterilidad. La tabla N° 4 presenta la cantidad apropiada de unidades y de
producto que se necesitan para trasladar a los medios de cultivo destinados para la
determinación de bacterias aerobias y anaerobias (caldo Tioglicolato) como para la
26
determinación de hongos y levaduras (Tripticasa de Soya), de acuerdo con las
especificaciones de la USP39-NF34 para la prueba de esterilidad.
Tabla . Cantidad de producto que se utiliza para la prueba de esterilidad ya se por

filtración por membrana o por inoculación directa según la USP39-NF34.
Cantidad por envase Cantidad mínima de producto a

utilizar
Líquidos
Menos de 1ml El contenido total de cada envase
La mitad del contenido, pero no menos
1-40 ml
de 1ml
Más de 40ml y no menos de 100ml 20ml
10% del contenido del envase, pero no
Más de 100ml
menos de 20ml
Líquidos antibióticos 1ml
Preparaciones insolubles, cremas y
Usar el contenido de cada envase para
ungüentos que van a ser suspendidos o
suministrar no menos de 200mg
emulsificados
Sólidos
Menos de 50mg El contenido total de cada envase
La mitad del contenido, pero no menos
50mg o más, pero no menos de 300mg
de 50mg
300mg- 5g 150mg
Más de 5g 500mg
Catgut y materiales quirúrgicos para uso 3 secciones de una hebra (cada una de
veterinario 30cm de longitud)
Apósitos quirúrgicos: algodón, gasa (en
100mg por paquete
paquetes)
Material de sutura y otros materiales de
El dispositivo completo
empaque individual
El dispositivo completo, cortado en
Otros dispositivos médicos
piezas o desmontado
Adaptado de: (USP, 2016)
27
2.2.12.1 Método de Inoculación directa
Es un método que sirve para determinar la ausencia o presencia de microorganismos
viables en productos estériles como: líquidos oleosos, catgut, materiales de sutura
quirúrgica para uso veterinario, productos en forma de sólidos, algodón purificado, gasas,
apósitos quirúrgicos y dispositivos estériles, que deben estar libres de microorganismos
ya que requieren un uso o administración estéril. Esta técnica consiste en transferir el
material estéril a los medios de cultivo para la detección de bacterias aerobias y
anaerobias y a Caldo digerido peptona de caseína- peptona de soya para la detección de
hongos y levaduras. La cantidad de producto que se encuentra establecido en la Tabla N°
2, se transferirá de manera aséptica al medio de cultivo, el cual se agitará para que la
muestra se homogenice, previamente a la incubación. En caso que la muestra presente un
preservante se realizará su neutralización previa del producto con una sustancia adecuada
o mediante la dilución de la muestra. (USP, 2016)
2.2.12.2 Método de filtración por membrana
El método se usa para soluciones acuosas, soluciones con bajo contenido de alcohol,
aceites y soluciones oleosas, sólidos solubles, ungüentos y cremas, antibióticos sólidos a
granel o mezclas, productos estériles en aerosol y dispositivos con guías que indiquen que
son estériles como jeringas. El método consiste en filtrar el producto a través de una
membrana constituida por ésteres de celulosa, con un tamaño de poro de 0,45 µm y con
un diámetro 47mm. Todos los microorganismos, quedan retenidos en la membrana
proporcionando mayor sensibilidad que el método de inoculación directa. El equipo de
filtración es similar al de la figura N° 1, que consta de tres partes: el vaso de filtración
con un soporte para la membrana, un embudo y el matraz Kitasato. La filtración se realiza
por aspiración con una bomba de vacío. (USP, 2016)
28
Figura . Equipo de Filtración por membrana
Adaptada de (Center Química, 2014)
Antes de efectuar la prueba, es recomendable filtrar una pequeña cantidad de líquido de
enjuague estéril sugerido por la farmacopea. Después de filtrar el producto, y si este tiene
conservantes se procede a lavar la membrana con un líquido de enjuague estéril. La
membrana es incubada en el Medio fluido de Tioglicolato, que es usado para el cultivo y
aislamiento de bacterias aerobias, anaerobias exigentes, y facultativas y Caldo digerido
peptona de caseína- peptona de soya utilizado para microorganismos aerobios estrictos,
facultativos y microorganismos exigentes.
La incubación es por 14 días bajo las siguientes condiciones: para el Caldo de Tioglicolato
a una temperatura de 30 a 37°C y para el Caldo de digerido de peptona de caseína-peptona
de soya a temperatura ambiente es decir a 22,5°C. Se examina los medios directamente,
en busca de evidencias macroscópicas de crecimiento microbiano, hasta el momento de
la finalización. Si el medio presenta turbidez antes de los 14 días de incubación no es
necesario completar el periodo de los 14 días.
29
Si no se hallan pruebas de crecimiento microbiano en la prueba, el producto examinado
cumple con la prueba de esterilidad. Si se hallan pruebas de crecimiento microbiano, el
producto examinado no cumple con la prueba de esterilidad. (USP, 2016)
2.2.13 Esterilidad de las soluciones oftálmicas
La prueba de esterilidad para soluciones oftálmicas se puede realizar por los métodos de
filtración de membrana o por inoculación directa, pero debido a que el método de
filtración por membrana proporciona mayor sensibilidad, debido a que se analiza todo el
volumen de producto por lo tanto todos los microorganismos quedan retenidos en la
membrana, y los componentes del producto no interferirán en la turbidez del medio de
cultivo en caso de presentarse, se decide trabajar por este método. El procedimiento se
realiza bajo condiciones asépticas, evitando así la contaminación microbiana, para lo cual
se puede trabajar en una cabina biológica de flujo laminar.
2.2.14 Control organoléptico
Son todas las características que se pueden percibir con los órganos de los sentidos, este
control es importante porque interviene en la aceptación del producto. Entre las
características tenemos aspectos, olor, sabor, color. (Bedoya, Flórez, & Martínez, 2011)
2.2 Fundamentación legal
El presente proyecto de investigación se respalda en las siguientes bases legales:
OMS: Organización Mundial de la Salud
En la 3 7 a ASAMBLEA MUNDIAL DE LA SALUD ,17 de mayo de 1984 se establece
las mejoras en el sistema de salud mundial por medio de nivelaciones para el personal de
salud sobre el uso de medicamentos, comunicados a la sociedad, mejoramiento de las
áreas de salud, revisión de las recetas médicas, control del stock de medicamentos
presente en los hospitales, estudios de farmacolvigilancia en hospitales y empresas
30
farmacéuticas, todo esto como precaución para el uso racional de medicamentos (Salud
O. M., 1984).
Organización mundial de la salud Serie de informes técnicos de la OMS, No. 961,
2011 Anexo 6
Buenas prácticas de manufactura establecidas por la OMS para productos farmacéuticos
estériles
1. Consideraciones generales
1.1 “La producción de preparaciones estériles se debe realizar en áreas asépticas, a las
cuales sólo sea posible ingresar a través de esclusas para el personal y/o los equipos y
materiales. Estas áreas se deben mantener con un estándar de higiene adecuado y con un
suministro de aire a través de filtros que tengan la eficiencia requerida.” (OMS, 2011)
2. Control de calidad
2.1 “La prueba de esterilidad al producto terminado debe considerarse sólo como la última
de una serie de medidas de control para asegurar la esterilidad. La prueba debe ser
validada para el o los productos en cuestión.” (OMS, 2011)
Ley Orgánica de Salud
“Art. 363.- El Estado será responsable de garantizar la disponibilidad y acceso a
medicamentos de calidad, seguros y eficaces su comercialización y promover la
producción nacional y la utilización de medicamentos que respondan a las necesidades
epidemiológicas de la población” (Chiriboga, 2011).
31
Normativa Sanitaria para la obtención del registro sanitario
Reglamento y control de productos naturales de uso medicinal
Para todo producto natural procesado de uso medicinal que se obtenga a partir de un
recurso natural, independientemente de las investigaciones que se realicen fuera del país;
y como consecuencia se origine alguna patente, el Estado Ecuatoriano será copropietario
de esa patente, derecho a recibir las regalías correspondientes” (ARCSA, 2016)
Del objeto y ámbito de aplicación
“Art. 1.- Objeto.- La presente Normativa Técnica Sanitaria tiene por objeto establecer los
parámetros de calidad, seguridad y eficacia, bajo los cuales se otorgará el Registro
Sanitario a los Productos Naturales Procesados de Uso Medicinal. De la misma forma
establecer los criterios para la realización de la promoción, control, vigilancia y sanción
de dichos productos. Establecer los parámetros para la operación, control, vigilancia y
sanción de los establecimientos donde se fabrican, almacenan, distribuyen y
comercializan los Productos Naturales Procesados de Uso Medicinal.” (ARCSA, 2016)
De la vigilancia y control
“Art. 54.- Las acciones de vigilancia y control posregistro en los establecimientos donde
se fabrican, almacenan, distribuyen y comercializan Productos Naturales Procesados de
Uso Medicinal, se ejecutarán periódicamente con el objeto de verificar el cumplimiento
de las especificaciones técnicas del producto con las cuales se otorgó el Registro
Sanitario, así como ante denuncias presentadas a la ARCSA y alertas sanitarias.”
(ARCSA, 2016)
“Art. 55.- El muestreo para el análisis de control de calidad posregistro estará a cargo de
la Comisión Inspectora que la Agencia Nacional de Regulación, Control y Vigilancia
32
Sanitaria-ARCSA designe, conformada por profesionales farmacéuticos, quienes
actuarán de acuerdo al procedimiento que se establezca y con las garantías dispuestas en
la Ley Orgánica de Salud.” (ARCSA, 2016)
2.3 Hipótesis
2.3.1 Hipótesis de trabajo
“Las gotas oftálmicas naturales de mayor comercialización en los centros naturistas de la
Ciudad de Quito, cumplen con la prueba de esterilidad según lo establecido por la USP39-
NF34 (Farmacopea de los Estados Unidos de América) para productos oftálmicos
estériles”
2.3.2 Hipótesis nula
“Las gotas oftálmicas naturales de mayor comercialización en los centros naturistas de la
Ciudad de Quito, no cumplen con la prueba de esterilidad según lo establecido por la
USP39-NF34 (Farmacopea de los Estados Unidos de América) para productos oftálmicos
estériles”
2.4 Conceptualización de variables
2.4.1 Variable Dependiente
Las gotas oftálmicas naturales: son preparaciones que contienen ingredientes naturales
en su formulación, debido a que muchas de las propiedades beneficiosas de algunas
plantas podrían ayudar a mejorar la salud visual.
2.4.2 Variables Independientes
Prueba de esterilidad: es la prueba que se lleva a cabo bajo condiciones asépticas para
productos estériles, en el que se establece la presencia o ausencia de microorganismos
33
aerobios y/o anaerobios facultativos viables entre ellos tenemos bacterias, hongos y
levaduras.
Aislamiento e identificación de microorganismos: es la identificación de los
microorganismos presentes en los productos que se encuentren contaminados, mediante
técnicas establecidas.
Determinación del pH: es la medida que expresa el grado de acidez o basicidad de una
sustancia.
Características organolépticas: son aquellas cualidades que se pueden percibir con los
órganos de los sentidos.
34
Capítulo III
Metodología de la Investigación
3.1 Diseño de la Investigación
3.1.1 Enfoque
El presente trabajo de investigación se realizó en base a un paradigma cuantitativo, ya
que se desarrolló y se comprobó hipótesis, con el uso de modelos matemáticos, con un
estudio experimental previo para describir las situaciones que se presentaron a lo largo de
la experimentación, el mismo que proporcionó resultados que fueron cuantificados.
Hernández, R (2010) explica que con este enfoque “se intenta explicar y predecir los
fenómenos investigados buscando regularidades y relaciones causales entre elementos”
(Hernández, 2010), es por eso que la finalidad del estudio fue determinar la calidad
microbiológica de gotas oftálmicas naturales, mediante la prueba de esterilidad y la
determinación del pH.
3.1.2 Nivel
La modalidad de la investigación en este estudio corresponde a un nivel de tipo
exploratorio, ya que se examinó un tema de investigación que no tiene mucho respaldo
en la literatura o que a su vez no se ha realizado. El análisis microbiológico de gotas
oftálmicas naturales antes de su uso no cuenta con respaldo de investigaciones realizadas.
Por otro lado este estudio presenta un nivel descriptivo ya que se obtuvo información
independiente de las variables planteadas para describir la tendencia entre los datos.
(Hernández, 2010)
35
3.1.3 Tipo de investigación
El tipo de investigación fue experimental por que las variables fueron asignadas y
controladas a lo largo de la investigación, la elección se basó en la necesidad de realizar
la prueba de esterilidad soluciones oftálmicas naturales con el fin de descartar la presencia
de microorganismo que puedan afectar a los usuarios de estos productos. (Supo, 2015)
El proceso experimental se desarrolló en el Laboratorio de Microbiología General y
Microbiología Farmacéutica de la Facultad de Ciencias Químicas – Universidad Central
del Ecuador.
3.2 Materiales y métodos
3.2.1 Población
La población a estudiar en esta investigación estuvo constituida por gotas oftálmicas
naturales de mayor comercialización en la ciudad de Quito, para lo cual, primero se revisó
la Base de Datos del ARCSA, y se encontró tres productos con registro sanitario vigente
de los cuales solo uno se comercializaba en las tiendas naturistas. Al visitar las Tiendas
naturistas y Distribuidoras de Productos Naturales se encontró productos adicionales, por
lo que se realizó un sondeo de gotas oftálmicas que se encuentra en el Anexo C: Sondeo
de comercialización de gotas oftálmicas. Se comparó con la lista de productos que se
encuentra en la base de datos con la lista de productos encontrados en los centros
naturistas, y se encontró que en las tiendas y distribuidoras había productos que no
constaban en la lista oficial del ARCSA. Con los productos encontrados se realizó el
presente estudio.
36
3.2.2 Muestra
Una vez realizado el sondeo de comercialización, la muestra fue constituida por 10
productos de marcas diferentes que se comercializaban libremente en la Ciudad de Quito.
Cada producto fue analizado por triplicado.
3.2.3 Materiales
Los recursos materiales que se utilizaron durante el desarrollo del trabajo de investigación
se detallan en la Tabla N° 5:
Tabla . Materiales y equipos requeridos para la investigación

Materiales Medios de cultivo
500g TSA (Tripteina Soya Agar) CONDA Cat.
1068.00
3 Caja de guantes de látex ANDINO Ecuador 500g SAB (Sabouraud dextrosa agar) CONDA Cat.
Puntas plásticas 1024.00
Cajas Petri Gold Lab 500g Sabouraud dextrose agar + Cloramphenicol
Cajas Petri de vidrio BOTTOM CONDA Cat. 1090.00
Tubos de ensayo con tapa rosca 500g SAB Cetrimide agar base CONDA Cat.
Gradillas para tubos de ensayo 1102.00
Erlenmeyer 100, 250, 500, 1000 ml 500g Agar nutritivo CONDA Cat. 1156.00
Porta objetos CITOPLUS 500g Manitol salado agar CONDA Cat. 1062.00
Probetas 500g MacConkey Agar CONDA Cat. 1052.00
Espátula 500g Brain Heart Infusion broth CONDA Cat.
Filtros de membrana MILIPORE de 0,45mm y 1400.00
47mm de diámetro 500g Medio líquido Tioglicolato DIFCO
500g TSB (Tripteina Soya Broth) CONDA
Peptone water CONDA Cat. 1403.00
Equipos 500g Agar MYPC (manitol yema de huevo
polimixina) DIFCO
Micropipetas 200ul y 1000ul TSI Agar
THERMOSCIENTIFIC Simmoms citrate Agar ISO 10273 CONDA Cat.
1014.00
100 Tubos Eppendorf 1,5 ml
SIM Medium CONDA Cat. 1514.00
Vortex CLASSIC VELP SCIENTIFICA Agar urea
Estufa BINDER FD Medio RM-VP (Rojo de Metilo y Voges Proskauer)
Incubadora INCUCELL CONDA Cat. 1512.00
Cabina Biológica de flujo laminar BIOBASE A2
Clase II
Reactivos
Espectrofotómetro FISHER SCIENTIFIC
37
Equipo de filtración MILIPORE
Bomba de vacío
Potenciómetro METTLER TOLEDO Etanol 96 % 1l
Microscopio NIKON Model SC Etanol 70 %
Marcadores para vidrio ZEBRA Polisorbato 80, 20g
Autoclave WISECLAVE LECITINA
Incubadora METREXLAR Cristal violeta GRAM STAIN B&M
Refrigeradora INDURAMA Solución de yodo GRAM STAIN B&M
Alcohol cetona GRAM STAIN B&M
Safranina GRAM STAIN B&M
Se analizaron 10 productos de gotas oftálmicas naturales por triplicado cada uno, de tres
laboratorios fabricantes diferentes, los cuales se venden libremente en Quito. La tabla N°
6 detalla las características y códigos de cada producto analizado en este estudio. Al
momento del análisis microbiológico todos los productos estaban dentro de la fecha de
caducidad.
38
Tabla . Información técnica de las etiquetas de los envases de las gotas oftálmicas naturales
Fecha de Fecha de
Código Producto Marca Principio activo Contenido elaboración expiración Lote Registro sanitario
mes /año mes /año
Zanahoria Gota
Colirio
P001 oftálmica Zanahoria 15ml Oct-2014 Oct-2020 00C6178 Reg. I.S.P N° 2136
Cubano
vitaminado
Sábila y Zanahoria
Colirio
P002 Gota oftálmica Sábila, Zanahoria 15ml Oct-2014 Oct-2020 00C6178 Reg. I.S.P N° 2136
Cubano
vitaminado
Sábila Natural de Colirio
P003 Aloe de Sábila 15 ml May-2016 May-2021 00C6178 Reg. I.S.P N° 2136
Aloe Cubano
Reforzado con
Gotas milagrosas Vitaminas A y E,
Colirio
P004 Lagrimas tilo, manzanilla, 15ml Oct-2014 Oct-2020 00C6178 Reg. I.S.P N° 2136
Cubano
artificiales Sábila, Zanahoria,
Albaca
Flor de sauco,
semilla de hinojo,
Colirio Ojo de Colirio Dedo de niño,
P005 15 ml Oct-2014 Oct-2020 00C6178 Reg. I.S.P N° 2136
águila Cubano Uchuva Eufrasia,
Aloe vera,
Vitaminas A y E
39
Daucus Carota,
Matricaria Plus Matricaria CE-03-16-
P006 Vicatec 20ml Feb-2016 Feb-2018 594-MNN-09-11
antes Eufrasia Chamomilla, 2000
sumidades flor
FE-11-
Agua de rosas y
P007 Forty eyis plus Vicatec 20ml Nov-2016 Nov-2018 2016- 04394-MAN-09-06
suero fisiológico
2000
Extracto de
Colirio gotas del Lab.Hoss Zanahoria y
P008 20ml NT Dic-2020 NT NT
milagro Natural Extracto de
manzanilla
Extracto de
Lab. Hoss
P009 Optivision Caléndula y 20ml NT Dic-2020 NT NT
Natural
Extracto uvilla
Tilo, Sábila,
albahaca, Llantén
Gotas milagrosas Colirio
Malva,Manzanilla, Reg. I.S.P N°
P010 Lagrimas Vision 20ml Feb-2015 Dic-2018 NT
elixer de 13632
artificiales Forte
Rosas,Jalea Real,
Uchuva, Noni,
*NT= No tiene
40
3.2.4 Métodos y procedimientos.
3.2.4.1 Preparación de medios de cultivo y aseguramiento de su esterilidad
Los medios de cultivo se prepararon según las especificaciones del fabricante y se
esterilizaron por calor húmedo en autoclave 120°C por 25 minutos, y 1,01atm de presión.
Para asegurar la esterilidad de los medios, se incubaron las cajas y los tubos con los
medios sin inocular ningún microorganismo, a 35°C por 24 horas en caso de los medios
que fueron utilizados para las bacterias y a 25°C por 5 días para medios que se usaron
para hongos y levaduras. Los medios fueron estériles ya que no presentaron
contaminación microbiológica luego de la incubación, lo que indica que los medios de
cultivo fueron adecuados para realizar diferentes pruebas durante el presente trabajo de
investigación.
3.2.4.2 Control del funcionamiento del autoclave
El funcionamiento correcto del autoclave, se monitoreó regularmente colocando una
cinta indicadora 3M™ Comply™ sin plomo para la esterilización por vapor, que indicó
que el autoclave llego a la temperatura adecuada. El control con indicador biológico se
hizo colocando una cinta impregnada con endosporas de Geobacillus stearothermophilus
y de Bacillus subtilis. Una vez que el proceso de autoclave terminó, se puso a incubar el
indicador biológico en Caldo LB a 56°C por 6 días, no hubo crecimiento en el tubo de
prueba, ni en el control negativo pero si en el control positivo (cinta sin autoclavar) a las
24 horas de incubación, lo que indica que el autoclave fue capaz de eliminar formas
resistentes de los microorganismos y por consiguiente las formas vegetativas, asegurando
de esta manera que todo el material, medios de cultivo e implementos necesarios para las
pruebas microbiológicas eran estériles y no afectarán la carga microbiana de los productos
analizados.
41
3.2.4.3 Control de esterilidad del ambiente en la cabina biológica de flujo laminar
Se colocó una caja abierta de TSA y de SAB en el interior de la cabina de flujo laminar,
durante el tiempo de procesamiento de las muestras. Se cerraron las cajas y se incubaron
a 35°C por 24 horas el medio de TSA en caso para bacterias y a 25°C por 5 días para
hongos y levaduras. El lugar de trabajo fue aséptico ya que no hubo crecimiento
microbiano en ningún medio, por lo tanto se aseguró que las condiciones de trabajo eran
óptimas para la realización de la prueba de esterilidad.
3.2.4.4 Prueba de esterilidad del producto <71 Capítulo 71, USP39-NF34 >
Antes de comenzar con la prueba de esterilidad, se desinfectó con alcohol al 70% la cabina
biológica de flujo laminar, posteriormente se encendió la luz UV por 30 minutos para
asegurar su esterilidad. Todo el material que ingreso a la cabina fue desinfectado con
alcohol y antes de empezar a procesar las muestras se encendió el flujo laminar por 5
minutos.
Se procesaron diez productos diferentes, por triplicado cada producto. Los productos
fueron codificados con el fin de facilitar el etiquetado e identificación de tubos y cajas.
Las muestras se analizaron por el método de filtración por membrana, para la filtración
de las muestras se utilizó un equipo de filtración descrito en la figura N°1, la membrana
MILIPORE que se usó para la filtración fue de tamaño de poro 0,45 µm y 47 mm de
diámetro, compuesta por una mezcla de ésteres de celulosa. Para la filtración por
membrana se transfirió 20 ml de Agua Peptonada estéril (Líquido de Dilución y Lavado
para filtración por membrana recomendado por la USP39-NF34) antes de agregar el
producto, en el aparato y después se filtró el producto y se realizó el lavado de la
membrana con 100ml de Agua peptona estéril, este proceso de lavado se hizo al menos
3 veces. Una vez finalizada la filtración, se cortó asépticamente la membrana y cada mitad
42
se transfirió a Tioglicolato y a TSB. El Tioglicolato, es usado para el cultivo y
aislamiento de bacterias aerobias, anaerobias exigentes, y facultativas. El caldo digerido
peptona de caseína- peptona de soya (TSB) es utilizado para microorganismos aerobios
estrictos, facultativos y microorganismos exigentes respectivos. La incubación fue bajo
las siguientes condiciones: para el Caldo de Tioglicolato a una temperatura de 35 a 37°C
y para el TSB a 22,5°C durante 14 días. Se examinó los tubos que contenían la membrana
en los medios ya descritos anteriormente, cada 24 horas en busca de turbidez lo cual es
evidencia de crecimiento microbiano, si se encontró turbidez no fue necesario esperar los
14 días de incubación
3.2.4.5 Identificación de microorganismos aislados.
Los tubos que presentaron turbidez se procesaron con el fin de identificar a los
microorganismos, para lo cual, se realizó el pase a medios selectivos. Los tubos con el
medio de Tioglicolato que presentaron evidencia de crecimiento microbiano se pasaron a
TSA para el aislamiento de microorganismos aerobios anaerobios facultativos y estrictos,
agar Mac Conkey para el aislamiento de bacilos Gram negativos fermentadores de
lactosa, Manitol salado agar para identificar Gram positivos como Staphylococcus y Agar
Cetrimida para la determinación de Pseudomonas aeruginosa mientras que los tubos con
TSB se pasaron a los medios TSA y SAB para la identificación de hongos y levaduras.
Los medios de TSA MSA, Mac, y Cetrimida se incubaron a 37°C por 24 horas, SAB se
incubó a 22,5 °C por cinco días. Una vez pasado el tiempo de incubación correspondiente
para cada medio, se observó las características de las colonias y se realizó la Tinción
Gram. Para identificar y confirmar la especie de microorganismo se realizó las baterías
de Pruebas bioquímicas específicas para microorganismos Gram Positivos y Gram
negativos, al igual que el pase a medios selectivos y diferenciales. Los procedimientos
para la identificación de los microorganismos se detallan en los anexos: C. Identificación
43
para bacilos Gram negativos, D. Identificación para bacilos Gram positivos, E.
Identificación para coco Gram positivos, F. Identificación para levaduras.
El anexo H presenta el resultado de la identificación de cada microorganismo encontrado
mediante el pase a medios específicos y las pruebas bioquímicas que se realizaron.
3.2.4.6 Determinación del control organoléptico de las gotas oftálmicas naturales
Se realizó las diferentes pruebas como el aspecto, color y, presencia de partículas
extrañas; para hacer una comparación con las especificaciones de los productos tópicos
oculares que se encuentran en el la Base de datos del ARCSA, para el caso de los
productos que se encuentren registrados en la base de datos.
El análisis de color, olor y aspecto se hizo siguiendo la metodología descrita en Bedoya,
et al (2011), todo el contenido de cada envase se colocó en un vaso de precipitación de
vidrio donde se determinó visualmente el color. La prueba de olor se realizó colocando
la muestra 15 minutos al ambiente y se describió si es inodoro o de olor característico.
(Bedoya, Flórez, & Martínez, 2011)
Las soluciones oftálmicas deben estar exentas de partículas, en la USP39-NF34 <789>
indica que se pueden analizar las soluciones oftálmicas por inspección visual en busca de
partículas extrañas. La presencia de partículas extrañas se realizó colocando cada
producto en un vaso de precipitación completamente limpio y se describió visualmente la
presencia o ausencia de partículas.
3.2.4.7 Determinación del pH de gotas oftálmicas naturales
Se transvasó todo el producto a un vaso de precipitación para medir el pH con las tiras
pH Fix 0-14 (método cualitativo).
44
Se sumergió la tira en el vaso de precipitación se esperó un minuto, y luego se comparó
visualmente con los datos establecidos por el fabricante para determinar el pH de los
productos.
Para la determinación con el potenciómetro (método cuantitativo), se usó un
potenciómetro previamente calibrado, se colocó la solución en un vaso de precipitación
estéril, en que se sumergió el electrodo lavado con agua destilada previamente y se leyó
automáticamente el pH después se lavó el electrodo con agua destilada y se procedió a
las siguientes lecturas.
3.3 Diseño experimental
3.3.1 Unidad de estudio
3.3.1.1 Gotas oftálmicas naturales:
Son preparaciones que contienen ingredientes naturales en su formulación, debido a que
muchas de las propiedades beneficiosas de algunas plantas podrían ayudar a mejorar la
salud visual.
3.3.2 Variable de estudio
3.3.2.1 Prueba de esterilidad:
Determina la presencia o ausencia de microorganismos en productos estériles. La prueba
de esterilidad es un parámetro absoluto, que estipula si un producto estéril cumple o no
con las especificaciones de USP39-NF34.
3.3.2.2 Identificación de microorganismos:
Es un conjunto de técnicas y procedimientos establecidos que establecen la identidad de
un microorganismo.
45
3.3.2.3 Determinación del pH:
Es la medida que expresa el grado de acidez o basicidad de una sustancia.
3.4 Operacionalización de variables
La tabla N° 7 detalla cada una las variables junto con las dimensiones que se
determinaron durante el presente trabajo de investigación.
46
Tabla . Operacionalización de variables
Variables Dimensiones Indicadores Instrumento

Dependiente
Distribuidoras de Cantidad de productos

Variable
Gotas oftálmicas Sondeo de

Productos naturales para el
naturales comercialización de
Naturales análisis
gotas oftálmicas
Crecimiento
microbiano
Cumple
Independiente
(turbidez)
Variable
Prueba de Esterilidad Cuaderno de Laboratorio
No cumple
No crecimiento
microbiano
Independiente
Variable
Identificación de Crecimiento de Características de las

Cuaderno de Laboratorio
microorganismos colonias colonias
Aspecto
Características de
Independiente
Color
cada solución
Variable
Control organoléptico Olor Cuaderno de laboratorio

Ausencia de
Partículas partículas extrañas
extrañas
Independiente
Variable
Determinación del Tiras indicadoras de

Cuaderno de laboratorio
pH pH
3,5 – 8,5
Potenciómetro
47
3.5 Técnicas e instrumentos de recolección de datos
Para la presente investigación toda la información bibliográfica se recolectó de textos y
publicaciones actualizadas en el internet como fuentes primarias, en revistas y páginas
web para consultas generales y como fuente secundaria a través de la lectura y el análisis
de los contenidos para cada caso y la toma de notas en aspectos importantes en un
cuaderno de fundamentos.
La información experimental fue recolectada en el cuaderno de laboratorio de acuerdo a
las siguientes características:
Se usó una tabla donde consta la información del producto, si cumple o no cumple con
la prueba de esterilidad, en el caso de los productos que no cumplen con la esterilidad se
menciona en otra tabla los microorganismos identificados. Finalmente se verificó y se
comparó si estos resultados cumplieron con las especificaciones microbiológicas de la
USP39-NF34 (Farmacopea de los Estados Unidos de América) para productos estériles
oftálmicos.
3.6 Técnicas de procesamiento y análisis de datos
Después de la recolección de datos en el cuaderno de laboratorio se procedió a calcular:
 Porcentaje de contaminación microbiana.
 Porcentaje de productos que cumple o no la prueba de esterilidad
 Distribución de los microorganismos contaminantes en los productos.
 Porcentaje de productos que no cumplen con el parámetro del pH y
características organolépticas.
Una vez obtenidos estos datos se procedió a realizar las diferentes discusiones.
48
Capítulo IV
Análisis y discusión de resultados
4.1 Control de la esterilidad de medios de cultivo y condiciones de trabajo
Debido a que los colirios están en la categoría de productos estériles, la USP39-NF34
indica que la prueba de esterilidad, debe llevarse a cabo en un área ISO 5 para evitar
resultados falsos positivos en los productos analizados. Para ello las muestras fueron
analizadas en una cabina biológica de flujo laminar, BIOBASE A2 Clase II que ayudó a
mantener el ambiente de trabajo libre de partículas y probables contaminantes en el
análisis de colirios naturales. Para monitorear la cabina, se colocó una caja abierta de TSA
y de SAB en el interior, durante el tiempo de procesamiento de las muestras. Se cerraron
las cajas y se incubaron a 35°C por 24 horas el medio de TSA para bacterias y a 25°C
por 5 días el medio de SAB para hongos y levaduras. El lugar de trabajo fue aséptico ya
que no hubo crecimiento microbiano en ningún medio.
La protección en la cabina se logra por un proceso físico que impulsa el aire a través de
filtros de grandes superficies conocidos como filtros HEPA, los cuales tiene una
eficiencia retención de partículas del 99,9% con un tamaño promedio del 0,3 µm, también
son adecuados para la retención de aerosoles producidos por los procedimientos de
filtración por membrana en la prueba de esterilidad de los productos naturales analizados.
(Salud O. P., 2002)
Para asegurar la esterilidad de los medios de cultivo que se utilizaron durante la
experimentación, se incubaron las cajas y los tubos con los medios sin inocular ningún
microorganismo. Comprobando que todos los medios de cultivo fueron estériles ya que
no presentaron contaminación microbiológica luego de la incubación.
49
Se comprobó el funcionamiento del autoclave con la cinta indicadora 3M™ Comply™
sin plomo para la esterilización por vapor, que indicó que el autoclave llegó a la
temperatura adecuada. El control con indicador biológico se hizo colocando una cinta
impregnada con endosporas de Geobacillus stearothermophilus y de Bacillus subtilis. Lo
cual, indicó que el autoclave fue capaz de eliminar formas resistentes de los
microorganismos y por consiguiente las formas vegetativas, asegurando de esta manera
que todo el material, medios de cultivo e implementos necesarios para las pruebas
microbiológicas eran estériles y no afectaron la carga microbiana de los productos
analizados.
Estos resultados indican la seguridad microbiana de los materiales y equipos así como,
del área de trabajo. Asegurando así que los resultados y aislamientos microbianos
detectados, provienen netamente de los productos y no de fuentes externas de
contaminación.
4.2 Resultados de la Prueba de esterilidad y microorganismos aislados en los
productos
Para investigar la calidad microbiológica de las gotas oftálmicas naturales, se realizó la
prueba de esterilidad por la técnica de filtración por membrana.
La tabla N° 8 muestra que de los 10 productos analizados cada uno por triplicado el 100%
no pasan la prueba de esterilidad, por lo tanto, no cumplen con lo establecido en la USP39
NF34, que menciona que los productos de categoría 1, en este caso las soluciones
oftálmicas, deben ser estériles. En la prueba de esterilidad, los tubos de Tioglicolato y
TSB deben revisarse diariamente y durante 14 días, en busca de turbidez. En este estudio,
no hubo necesidad de esperar 14 días de incubación, ya que el 80% (n=24) de los
productos mostró evidencia de crecimiento microbiano a las 24 horas y el 20% (n=6) a
50
las 48 horas, lo cual podría indicar que debido a la alta carga microbiana de los productos,
la turbidez se hizo evidente en corto tiempo.
Tabla . Resultados de la prueba de esterilidad del producto
Crecimiento en TSB y Tioglicolato

Cumple con la prueba de
Código N° (turbidez)
esterilidad
24 horas 24 horas – 5 días 5-14 días
a + No
P001 b + No
c + No
a + No
P002 b + No
c + No
a + No
P003 b + No
c + No
a + No
P004 b + No
c + No
a + No
P005 b + No
c + No
a + No
P006 b + No
c + No
a + No
P007 b + No
c + No
a + No
P008 b + No
c + No
a + No
P009 b + No
c + No
a + No
P010 b + No
c + No
+ Presencia de turbidez
Una vez realizada la prueba de esterilidad se comprobó que el 100% de las muestras
analizadas en este estudio no fueron estériles, por lo tanto, podrían representan un riesgo
potencial para los pacientes.
51
Los resultados son parecidos con los del estudio de Abo-State, M, et al, (2012) en el que
realizaron el análisis microbiológico de 75 gotas oftálmicas sintéticas con agentes
antimicrobianos, compradas en distintas farmacias de la ciudad de El Cairo y se encontró
un porcentaje alto (77,3%) de productos contaminados, en ese caso por bacilos Gram
positivos. El estudio de Narciso, (2015) muestra en cambio, que al realizar el control
microbiológico de un lote de solución oftálmica de Timolol, el 100% de los productos
fueron estériles. (Narciso, 2015)
Una vez realizada la prueba de esterilidad de las gotas oftálmicas naturales y al encontrar
que todos los productos estaban contaminados, se procedió a aislar e identificar los
microorganismos presentes.
La tabla N° 9 y la figura N° 2 detallan los diferentes microorganismos identificados. El
36,7% de los productos estaban contaminados por Pseudomonas aeruginosa, el 33,3%
por Bacillus subtilis, el 20% estaban contaminados por Bacillus cereus y el 3,3% por
Escherichia coli, la única levadura recuperada en el 20% de los productos fue Candida
albicans. Los productos P002, P005, y P006 presentan dos microorganismos coexistiendo
en la misma muestra. En el producto P002 Escherichia coli y Bacillus subtilis, en el P005
Pseudomonas aeruginosa, y Bacillus Subtilis, y en el producto P006 se encontró Bacillus
cereus y Bacillus subtilis. Estos datos indican que los colirios naturales resultaron medios
propicios para el desarrollo inclusive de más de una especie de microorganismo.
Los resultados indican que las condiciones ambientales donde se fabrican estos productos
no son asépticas o no son adecuadas para la elaboración de estos productos estériles.
El haber encontrado microorganismos del genero Bacillus, puede indicar que el ambiente
o la materia prima con la que se elaboraron los extractos para los colirios naturales,
estaban contaminados. El haber aislado Escherichia coli, indica contaminación con
52
materia fecal probablemente del operador, que no seguiría buenas prácticas de
manufactura. El agua también podría ser el vehículo para este microorganismo, indicando
que el agua usada en la elaboración de los colirios no es de uso ni de calidad farmacéutica.
El agua de riego de las plantas empleadas en la elaboración de los colirios también podría
no ser microbiológicamente segura.
Es importante, mencionar que es probable que no se esté llevando a cabo el manejo de
Buenas Prácticas agrícolas, ya que una de las fuentes de contaminación puede ser la
materia prima la cual es de origen vegetal.
La materia prima vegetal de uso medicinal al igual que cualquier materia prima debe
cumplir con parámetros que garanticen su calidad para la producción de productos
naturales clasificados como medicamentos. Por lo cual, es importante tener en cuenta que
la producción de medicamentos naturales que cumplan con parámetros de seguridad y
calidad se debería cuidar desde la el proceso de cosecha en el que se verifique que se está
utilizando el abono adecuado, el agua de riego, el uso exclusivo de territorio para la
materia vegetal; seguido del proceso de recolección, selección secado, almacenamiento y
distribución. (OMS, 2003)
En Bolivia, Palacios, K, et al (2014) realizaron un control de calidad a colirios naturales
de: Aloe, Sábila y Zanahoria, Rosa Tilo Ginseg Albahaca. En los colirios de Aloe, Sábila
y Zanahoria encontraron bacilos Gram negativos, identificados mediante pruebas
bioquímicas como Pseudomonas spp, al igual que en la presente investigación donde el
36.7% de los colirios naturales analizados estaban contaminados por este
microorganismo. Esta bacteria, se ubica de preferencia en lugares húmedos y su presencia
en los productos podría ser por el agua y los ambientes de almacenamiento de por ejemplo
las materias primas con alta humedad.
53
Tabla . Microorganismos aislados de las gotas oftálmicas naturales
Código N° Bacterias Mohos y levaduras

a Pseudomonas aeruginosa -
P001 b Pseudomonas aeruginosa -
c Pseudomonas aeruginosa -
a Escherichia coli -
P002 b Bacillus subtilis -
c Bacillus subtilis -
a Pseudomonas aeruginosa, Bacillus Subtilis -
P005 b Pseudomonas aeruginosa, Bacillus Subtilis -
c Pseudomonas aeruginosa, Bacillus Subtilis -
a Bacillus cereus, Bacillus subtilis -
P006 b Bacillus cereus, Bacillus subtilis -
c Bacillus cereus, Bacillus subtilis -
a Bacillus subtilis -
P007 b Bacillus subtilis -
c Bacillus subtilis -
a - Candida albicans
P008 b - Candida albicans
c - Candida albicans
a - Candida albicans
P009 b - Candida albicans
c - Candida albicans
a Bacillus cereus -
P010 b Bacillus cereus -
c Bacillus cereus -
- Ausencia de bacterias u hongos y levaduras
54
Figura . Porcentaje de microorganismos presentes en las gotas oftálmicas naturales
% de microorganismos de las gotas oftálmicas

naturales
Porcentaaje de concurrencia
(n=11) 36,7%
(n=10) 33,3%
(n=6) 20,0% (n=6) 20,0%
(n=1) 3,3%
Escherichia coli Pseudomonas Bacillus subtilis Bacillus cereus Candida spp.

aeruginosa
Microorganismo
También se aisló Bacillus subtilis en 10 colirios (33,3%) y Bacillus cereus en 6 (20%).
En el estudio de Abo-State, M, et al, (2012) se analizaron 75 muestras de colirios
compradas en diferentes farmacias, se aislaron también microorganismos del género
Bacillus spp pero en mayor porcentaje (77,3%) de productos (Abo-State, 2012). La
contaminación por microorganismos de este género se pudo dar por el ambiente
inadecuado de preparación de los colirios y por el uso de materia prima contaminada. A
pesar de ser Bacillus subtilis clásicamente un no patógeno, hay datos de que puede causar
abscesos si infecta el humor vítreo. (Gerbino, 2005). Bacillus cereus en cambio es más
patógeno, pues puede contaminar fácilmente los alimentos y causar infecciones en los
humanos al generar toxinas. (Sánchez, 2016).
55
En el estudio de Feghhi, M et al, (2008) de 286 colirios multidosis, el 17,8% presentó
contaminación microbiana. En este estudio a más de Bacillus encontraron Staphylococcus
epidermidis, especies de Diphtheroid spp, y Nocardia spp algunos hongos como Candida
albicans y Rhodotorula (Feghhi, 2008). Estos resultados concuerdan con los del presente
trabajo de investigación, donde también se identificaron Bacillus cereus, Bacillus subtilis
y Candida albicans.
Los microorganismos identificados en esta investigación indican que las gotas oftálmicas
naturales multidosis que se comercializan libremente en la ciudad de Quito, no son aptas
para su uso, ya que podrían representar un riesgo potencial, en especial para grupos
vulnerables como pacientes pediátricos, geriátricos e inmunocomprometidos.
4.3 Análisis de la información técnica establecida en los envases de la gotas
oftálmicas naturales
Los productos naturales de uso medicinal deben cumplir con las especificaciones de
calidad, seguridad y eficacia por parte del fabricante, y es la agencia regulatoria ARCSA,
la encargada de verificar que se cumplan. Esta agencia establece en su normativa, que
para obtener el registro sanitario se debe presentar los siguientes parámetros: las
especificaciones técnicas del proceso de elaboración de estos productos, la descripción
del recurso natural, especificaciones y límites de la materia prima, proceso de fabricación,
decripción del producto terminado, y estudios toxicológicos con el fin de garantizar la
calidad de productos naturales. Para corroborar la calidad de los productos naturales, se
puede realizar el control de la información presente en las etiquetas de los productos
como:
Nombre comercial del producto, nombre cientifico (género y especie), nombre del
laboratorio fabricante, composición cuantitativa en peso del recurso natural usado,
número de lote, fecha de elaboración y fecha de vencimiento, número de registro sanitario

56
y contenido del envase, que indican que han pasado por un proceso de revisión y
aceptación para la obtención del resgistro sanitario. En esta investigación se hizo la
verificación de la información presente en la etiqueta tanto del envase primario como
secundario, al igual que las características del envase, el prospecto y el contenido.
La tabla N° 10 muestra la información técnica de las etiquetas de los envases. El 70% de
los productos contenía información completa en la etiqueta como: nombre del producto,
contenido, la fecha de elaboración, fecha de caducidad, numero de lote y registro
sanitario, mientras que el 20% no tenía fecha de elaboración, lote y registro sanitario y
el 10% no tenía el número de lote.
El 10% de los productos tenía la información y descripción del recurso natural en la
etiqueta es decir, que se encontró la especificación del género y la especie detallada en
la etiqueta, mientras que el 90% de los productos se encontraba el nombre vulgar del
recurso natural.
57
Tabla . Descripción de las especificaciones técnicas de las etiquetas de los colirios naturales
Fecha de Fecha de
País del
Código N° Producto Lote elaboración expiración Registro sanitario
fabricante
mes /año mes /año
a
P001 b Zanahoria Gota oftálmica vitaminado Oct-2014 Oct-2020 Reg. I.S.P N° 2136
c
a
P002 b Sábila y Zanahoria Gota oftálmica vitaminado Oct-2014 Oct-2020 Reg. I.S.P N° 2136
c
a
Cuba 00C6178 May-2016
P003 b Sábila Natural de Aloe May-2021 Reg. I.S.P N° 2136
c
a
P004 b Gotas milagrosas Lagrimas artificiales Oct-2014 Oct-2020 Reg. I.S.P N° 2136
c
a
P005 b Colirio Ojo de águila Oct-2014 Oct-2020 Reg. I.S.P N° 2136
c
a
P006 b Matricaria Plus antes Eufrasia CE-03-16-2000 Feb-2016 Feb-2018 594-MNN-09-11
c Ecuador
a
FE-11-2016-
P007 b Forty eyis plus Nov-2016 Nov-2018 04394-MAN-09-06
2000
c
a
P008 b Colirio gotas del milagro NT NT Dic-2020 NT
c
a
P009 b Optivision Chile NT NT Dic-2020 NT
c
a
P010 b Gotas milagrosas Lagrimas artificiales NT Feb-2015 Dic-2018 Reg. I.S.P N° 13632
c
NT: No tiene
58
El producto P006, es el único que posee registro sanitario vigente, y consta en la base de
datos del ARCSA, el resto de productos tienen registro sanitario, pero no constan en la
base de datos de la agencia regulatoria. La Normativa para la obtención del regsitro
sanitario en el Capítulo III “DEL REGISTRO SANITARIO” dice que los productos
previo a su fabricación, importación, distribución, almacenamiento y distribución deben
tener de manera obligatoria el Registro sanitario otrogado por el ARCSA. (ARCSA,
2016)
Durante el proceso de otorganiento del registro sanitario los productos naturales
procesados de uso medicinal serán establecidos como medicamentos de venta libre o sin
precripcion médica para lo cual el ARSCA en su REGLAMENTO DE CLASIFICACIÓN
DE MEDICAMENTOS Y PRODUCTOS NATURALES, menciona en el Art. 3 que los
medicamentos deben cumplir con una serie de criterios para ser catalogados como
productos de venta libre entre ellos la forma farmaceutica debera se de vía oral (VO) o
tópica y no de administrción intravenosa (IV) o intramuscular (IM). (ARCSA, 2014) Sin
embargo, no se específica que categoría tendrian los productos cuya forma farmacéutica
es la oftálmica, pero desde el punto de vista de la aplicación, las gotas oftálmicas naturales
vendrían a ser productos que se usan por vía tópica por lo que podrían ser catalogados
como productos de venta libre. Por lo que los productos analizados en este estudio se
podrían vender libremente en las tiendas naturistas de Quito, sin embargo esto no los
exime de que tienen la obligacion de cumplir con los parámetros de seguridad.
Se evidenció además que 5 de los 10 productos analizados, tenían el mismo número de
lote pese a que se trataba de productos con principios activos distintos.
El número de lote es un dato obligatorio, indica que el producto se ha fabricado y
envasado en condiciones homogéneas. En este caso, el hecho de que los productos tienen
59
el mismo lote, puede indicar que el laboratorio responsable de la fabricación no cumplió
con Buenas prácticas de manufactura, por lo tanto no se puede dar una garantía en cuanto
a la calidad de estos colirios.
La tabla N° 11 muestra que ningún producto tiene prospecto. Por lo tanto, no cumple con
el artículo 31 de la Normativa sanitaria para la obtención del registro sanitario del
ARCSA, que menciona que todos los productos naturales de uso medicinal deben incluir
un prospecto dirigido al usuario, con todos los datos y la información del producto y el
uso, como por ejemplo: las precauciones que se debe tomar al momento de la
administración, el tiempo de tratamiento, las reacciones adversas, contraindicaciones y
la información sobre el almacenamiento. (ARCSA, 2016)
Por lo tanto, al no tener prospecto, los usuarios no tienen la información que el fabricante
esta en obligación de dar a conocer para la segura administración de los productos.
La Farmacopea Argentina sugiere que el volumen de las gotas oftálmicas no debe ser
mayor a 15ml. En la tabla N° 11 se observa que el 50% de los productos cumple con esta
recomendación, mientras que el 50% restante tiene un volumen de 20ml, lo cual puede
representar un riesgo, ya que, al usar el producto por más tiempo puede incrementarse la
población de microorganismos, predisponiendo al paciente a infecciones oculares más
severas. Lo recomendable es usar los productos multidosis por no más de 4 semanas (Real
Farmacopea Española, 2008). En los productos estériles, es importante que cuenten con
un cierre inviolable para que no pierdan su esterilidad al momento del almacenamiento.
(ANMAT, 2003).
La inspección visual de los productos indicó, que el 90% estaban limpios y sin
alteraciones tanto en su envase primario como el envase secundario, mientras que el 10%
60
tenían el envase secundario degradado y el envase primario no tenía la etiqueta limpia y
legible (tabla N° 11).
61
Tabla . Relación del tipo de envase y el volumen de las gotas oftálmicas naturales con la contaminación microbiana
Limpieza y legibilidad del
Descripción del Envase primario y envase
Código N° Contenido Tipo de gotero Prospecto
secundario
Primario Secundario
a + +
P001 b + + NT
c + +
a + +
P002 b Frasco plástico polietileno de color blanco. - - NT
c Gotero tipo drop-tainer + +
Tapón gotero de plástico de color natural
Tapón gotero de plástico de
a 15ml transparente de tipo presión. Tapa de plástico - -
color natural transparente de
P003 b polietileno de color blanco. Tipo gotero + + NT
tipo presión.
c Caja de cartulina dúplex + +
a + +
P004 b + + NT
c - -
a + +
P005 b + + NT
c + +
a Frasco gotero de vidrio ámbar tipo III. Tapa + +
P006 b plástica de polipropileno negra, de rosca, con + + NT
c pera azul de caucho P18 y pipeta dosificadora + +
de vidrio transparente. Lámina de seguridad
Pera azul de caucho P18 y
termoencogible de PVC
20ml pipeta dosificadora de vidrio
a + +
transparente.
P007 b + + NT
c + +
Caja de cartulina dúplex, termoencogible de
seguridad de plástico.
62
a + +
P008 b + + NT
Frasco de vidrio ámbar. Tapa rosca negra /
c + +
inserto gotero de 18mm de plástico blanca Inserto gotero de 18mm de
a plástico blanca + +
P009 b Caja de cartulina dúplex + + NT
c 20ml + +
Frasco gotero de vidrio ámbar. Tapa plástica de
a
color negra, de rosca, con pera negra de caucho Pera negra de caucho y + +
b
P010 y pipeta dosificadora de vidrio transparente. pipeta dosificadora de vidrio + + NT
c
transparente. + +
Caja de cartulina dúplex
NT: No tiene prospecto
+: Limpieza y legibilidad de los envases y etiquetas
-: Envase degradado y etiquetas sucias e ilegibles
63
Las gotas oftálmicas naturales analizadas pertenecen a laboratorios de tres países Cuba,
Chile y Ecuador, no se ha encontrado una legislación que especifique el tipo de envase
para estos productos. Sin embargo, al hacer el análisis del envase se evidencia que el 50%
de los productos tienen un tipo de envase de plástico de polietileno, conocido como Drop
tainer, el otro 50% de los productos tenía un tipo de envase de vidrio ámbar. Sin embargo,
el 30% de los productos tenía un gotero con una pera de caucho y pipeta de vidrio mientras
el 20% tenía un inserto gotero como dosificador. Los cinco productos con envases tipo
Drop-tainer de plástico de polietileno también pueden contaminarse al ponerse en
contacto con la superficie del ojo o con lo dedos de las personas durante su uso. (Gerbino,
2005) Sin embargo, son los más recomendados para este tipo de formulación. Y dos
productos de vidrio ambar con inserto gotero, que gracias a su diseño podría otorgar
mayor seguridad al al no tener contacto ni con el ojo no con la superficie de la mesa, sin
embargo, no es el más adecuado desde el punto de vista de la administración debido a
que para su aplicación se tiene que agitar varias veces para las gotas caigan, la cantidad
no podría ser la correcta y el peor de los casos la gota podría caer fuera del ojo.
Al analizar el envase primario se encontró que hay tres tipo de goteros dosificadores. Los
productos que usan un frasco gotero con pipeta dosificadora de vidrio con pera de caucho,
se podrían contaminar con mayor facilidad, debido a que tienen mayor superficie expuesta
al ambiente, al tener contacto con la superficie de las manos o con la mesa o si apoya en
los párpados o en las pestañas.. En esta investigación, se encontró que los productos P006
y P007 tenían el problema no solo en el gotero, sino la pera de caucho, la cual no tenía un
cierre hermético lo que podría permitir el paso de oxígeno y humedad creando un
ambiente propicio para el desarrollo microbiano.
El envase debe proteger a la forma farmacéutica de los daños mecánicos como
compresión, a la formulación de los agentes como la humedad, temperatura, la luz y la
64
contaminación microbiana durante la distribución almacenamiento y uso, al igual que
no debe interaccionar ni fisica y químicamente con el producto, de mantener su
estabilidad. (Gerbino, 2005)
El tipo de material del envase es importante para la conservacion del producto, en el caso
de las soluciones oftálmicas no hay una especificación que indique cual es el tipo de
envase más adecuado. En la USP39-NF34 menciona los tipos de envases que se pueden
usar dependiendo de la formulación del productos. Con respecto a los envases de vidrio
menciona que las recomendaciones se dan con respecto a aptitud del tipo vidrio; Los
envases de vidrio Tipo II son adecuados para uso parenteral y no parenteral. Los envases
de vidrio Tipo II se usan para los productos acuosos ácidos y neutros para uso parenteral
y no parenteral. Tipo III por lo se usan para productos no parenterales. El tipo de vidrio
se usa siempre y cuando se realicen las pruebas de aptitud del material y mediante los
datos de estabilidad del productos. Mientras que, los envases de plástico incluyen
materiales como polietileno, polipropileno, olefinas cíclicas. Para el uso del envase de
plástico se debe garantizar que haya una reglamentación del sitema de envase, las cuales
deben cumplir con una serie de parámetros fisicoquímicos y de biocompatibilidad, sin
olvidarse de los datos de estabilidad del producto. (USP, 2016)
La elección del envase para soluciones oftálmicas es importante no solo para mantener la
estabilidad del producto, sino para evitar su contaminación durante su almacenamiento,
distribución y administración. Sin embargo, los productos que se analizaron en esta
investigación estaban contaminados independientemente del tipo de envase.
Sin embargo, los productos analizados al encontrarse contaminados se desconoce si los
envases fueron una fuente de contaminación. En el anexo J se encuentran las imágenes
del tipo de envases que se encontraron en este estudio.
65
4.4 Características organolépticas de las gotas oftálmicas naturales
En la USP39-NF34 se establece que las soluciones oftálmicas deben estar exentas de
particulas extrañas visibles y de microorganismos.
La tabla N° 12 evidencia que el 80% de las gotas oftálmicas naturales presentó partículas
extrañas visibles, mientras que el 20% no, pero todos los productos estaban
contaminados. De manera, que se puede comprobar, que la falta de alteración física no
puede asegurar que el producto esté libre de microorganismos.
El producto P006 es el único que cuenta con especificaciones en la base de datos del
ARCSA para realizar una comparación, de los 9 productos restantes no se cuenta con
información en la base de datos, por lo que no se pudo hacer la comparación visual sin
embargo, los resultados del control organoléptico se tabulan en la tabla N° 12.
66
Tabla . Control organoléptico de las gotas oftálmicas naturales y su relación con la
presencia de contaminación microbiana
Presencia de Microorganismos
Producto Color Olor Aspecto
partículas contaminantes
Líquido acuoso Presencia de Pseudomonas

P001 Anaranjado Inodoro
traslucido partículas aeruginosa
Líquido acuoso Presencia de Escherichia coli,

P002 Anaranjado Inodoro
traslucido partículas Bacillus subtilis,
Líquido acuoso Presencia de Pseudomonas
P003 Verde Inodoro
traslucido partículas aeruginosa
Verde Líquido acuoso Presencia de Pseudomonas
P004 Inodoro
limón traslucido partículas aeruginosa
Pseudomonas
Líquido acuoso Presencia de
P005 Anaranjado Característico aeruginosa, Bacillus
traslucido partículas
Subtilis
Líquido acuoso No hay presencia de Bacillus cereus,

P006 Rosa Característico
traslucido partículas Bacillus subtilis
Líquido acuoso No hay presencia de

P007 Rosado Característico Bacillus subtilis

P008 Azulado Inodoro Candida albicans

P009 Azulado Inodoro Candida albicans
Líquido acuoso Presencia de

P010 Ámbar Característico Bacillus cereus
opalescente partículas
4.5 Determinación del pH de las gotas oftálmicas naturales
La USP39-NF34 menciona que el pH permitido para las soluciones oftálmicas se
encuentra en un rango de 3,5 hasta 8,5.
La tabla N° 13 muestra que todas las gotas analizadas estaban dentro del rango permitido.
El pH se determinó tanto por un método cualitativo (tiras indicadoras de pH) como por
un método cuantitativo (potenciómetro).
67
El rango de pH determinado por tiras fue de 4 a 8 y por el potenciómetro fue de 4,31 a
8,09; todos los productos se encontraron dentro del rango permitido por la farmacopea.
El crecimiento microbiano en las gotas se dio en estos rangos de pH, indicando la
capacidad de adaptación de los microorganismos contaminantes.
Tabla . Relación del pH de las gotas oftálmicas con los microorganismos

contaminantes
Colirio pH pH tiras
Microorganismos contaminantes
natural Potenciómetro indicadoras
P001 8,05 8 Pseudomonas aeruginosa
P002 8,09 8 Escherichia coli, Bacillus subtilis,

Pseudomonas aeruginosa, Bacillus
P005 8,2 8
Subtilis
P006 5,53 5 Bacillus cereus, Bacillus subtilis
P007 5,88 6 Bacillus subtilis
P008 7,39 7 Candida albicans
P009 7,4 7 Candida albicans
P010 4,31 4 Bacillus cereus

Los microorganismos pueden proliferar en condiciones diferentes de temperatura,
humedad, oxígeno y del pH ambiental, sin embargo existen organismos que pueden
desarrollarse en cualquier ambiente. El pH óptimo para de crecimiento bacteriano es 6,5
a 8,5, mientras que el pH para las levaduras esta entre 3,5 y 4,5. (Tortora, Funke, & Case,
2007)
Los microorganismos comensales y patógenos crecen mejor en un medio neutro o
ligeramente alcalino cuyo pH esta entre 7,2 y 7,6. (Pumarola, Rodriguez, García, &
Piedriola, 1999) En este estudio, el producto P002 tenía un pH de 8,09 y se encontraba
68
contaminado con Escherichia coli un microorganismo patógeno. Los productos P001,
P003, P004, P005 tenían un pH entre 7,98 y 8,2 en estos productos se aisló Pseudomonas
aeruginosa que pertenece al grupo de los patógenos oportunistas, del mismo grupo se
aisló Candida albicans de los productos P008 y P009. El rango de pH neutro ligeramente
básico, indica que el ambiente de los colirios naturales era ideal para el desarrollo de estos
microorganismos patógenos y patógenos oportunistas.
El pH óptimo para el crecimiento de Bacillus subtilis es de 4,3 a 5,0. (Canet, 2016) En
los productos P002, P005, P006, P007 el pH fue de 5,0 a 8,2 difiere un poco de la
condición mencionada en la literatura, sin embargo, este microorganismo puede tolerar
este tipo de condiciones ya que es capaz de formar endosporas la que pueden soportar
condiciones extremas entre ella un pH muy ácido.
Con los resultados obtenidos se demostró que el pH de los colirios naturales estuvo dentro
del rango permitido, y se conoce que es posible que el ojo tolere pH entre 3,0 y 8,6
dependiendo del sistema amortiguador del producto, por lo tanto las formulaciones
deberán centrarse alrededor de este pH donde el producto sea más estable, y deberá tener
una capacidad amortiguadora baja para que sea aceptable por el paciente. (USP, 2016)
Sin embargo, se desconoce si en la formulación de los productos analizados, tuvieron un
sistema buffer adecuado que ayude al mantenimiento del pH y que no provoque lesiones
o dolor en la córnea. También hay que recordar que todas las soluciones se encuentran
contaminadas por lo que no se podría asegurar que el pH determinado sea el
correspondiente al del producto inicial o que se haya alterado por la presencia de los
microorganismos encontrados o sus metabolitos.
Las gotas oftálmicas sean sintéticas o de productos naturales de uso medicinal, enfrentan
un problema de deterioro por parte de los microorganismos durante su uso y
69
almacenamiento. La protección de estos productos multidosis se logra por la adición de
preservantes. Una de las pruebas previas que se realizó en el presente estudio, fue
comprobar la eficacia de preservante de las gotas oftálmicas naturales, para los
microorganismos establecidos en la USP39-NF34, pero al realizar la prueba se visualizó
que las gotas oftálmicas naturales tenián contaminacion preexistente, por lo que se decidió
hacer la prueba de esterilidad, en lugar de la de eficacia del preservante, pues era evidente
que este no estaba cumpliendo la función de proteger al producto de la contaminación
microbiana. En el anexo I, constan las figuras de los resultados del test de eficacia del
preservante frente a los dos microorganismos.
La seguridad de las gotas oftálmicas naturales multidosis depende del cumplimiento de
las Buenas Prácticas de manufactura para productos estériles, esto debería ser vigilado y
regulado por la Agencia Nacional de Regulación Control y Vigilancia Sanitaria (ARCSA)
quien además debería asegurar el control postregistro de los productos. En marzo del
2016, la agencia regulatoria de Cuba CEMED lanzó una alerta acerca de las venta por
internet de unas gotas oftálmicas naturales: “Gotas Milagrosas”, “Natural de Aloe” y
“Zanahoria y Aloe” de marca “Colirio cubano” del Laboratorio Ferchop en la Habana
productos que formaron parte del presente estudio ya que se comercializaban libremente
en la ciudad de Quito. Esta instancia señaló, que las agencias regulatorias de Argentina,
Chile y Perú también emitieron alertas acerca de la comercialización fraudulenta de estos
productos. (CIMUN, 2017).
En Ecuador, pese a la alerta emitida a través de su Centro Nacional de Farmacovigilancia,
que recomienda no usar “Colirio Cubano Gotas Milagrosas”, “Colirio El Cubano Sábila
de Aloe” y “Colirio El Cubano Noni Plus” por no poseer registros sanitarios, estos
productos se siguen comercializando libremente.
70
En la lista de productos naturales que tiene una alerta sanitaria estuvo el Colirio Cubano
Gotas Milagrosas, Colirio Cubano Sábila de Aloe, y Colirio Cubano Zanahoria y Aloe
que se venden sin restricción. Los resultados de este estudio deben ayudar a que estos
productos salgan definitivamente de circulación ya que su calidad microbiológica pone
en riesgo a los usuarios. Los resultados serán notificados a la Agencia regulatoria
ARCSA para que tome las medidas pertinentes.
71
Capítulo V
Conclusiones y Recomendaciones
5.1 Conclusiones
Se evaluó la calidad microbiológica de las gotas oftálmicas naturales de mayor
comercialización en la ciudad de Quito, comprobando que no son seguras para su uso. El
100% de estos productos no cumplían con la especificación de esterilidad que se
encuentra en la USP39-NF34 para productos oftálmicos.
El microorganismo que se encontró con mayor porcentaje fue Pseudomonas aeruginosa
con un porcentaje de 36 %, seguido por los microorganismos Bacillus cereus y Candida
albicans con un porcentaje del 20% Bacillus subtilis con el 10% y Escherichia coli con
el 1% contaminación en los productos. La presencia de estos microorganismos indica el
incumplimiento de las Buenas Prácticas de Manufactura; las condiciones ambientales
podrían no ser asépticas ni adecuadas para su fabricación, por otro lado otras fuentes de
contaminación pudieron ser la materia prima contaminada, como el agua, los extractos y
finalmente los operadores.
El 70% de los productos contenía información completa en la etiqueta como: nombre del
producto, contenido, la fecha de elaboración, fecha de caducidad, numero de lote, registro
sanitario, mientras que el 20% no tenía fecha de elaboración, lote y registro sanitario y
el 10% no tenía el número de lote. Lo cual se demostró que estos productos a más de
comercializarse libremente no eran seguros para los usuarios.
Se evidenció además que 5 de los 10 productos analizados tenían el mismo número de
lote pese a que se trataba de productos con principios activos distinto. En este caso, el
hecho de que los productos tienen el mismo lote puede indicar que el laboratorio
72
responsable de la fabricación no cumplió con Buenas Prácticas de Manufactura al
momento de su elaboración, por lo tanto no se puede dar una garantía en cuanto a la
calidad de estos colirios.
Ningún producto tiene prospecto. Por lo tanto, no cumple con el artículo 31 de la
Normativa sanitaria para la obtención del registro sanitario del ARCSA, que menciona
que todos los productos naturales de uso medicinal deben incluir un prospecto dirigido
al usuario, por lo tanto los usuarios no cuentan con la información de la forma de uso y
el almacenamiento del producto.
En la caracterización de los productos, el 90% de no se encuentran en la base de datos del
ARCSA, por lo tanto se desconocen las especificaciones de las características
organolépticas y no se puede decir que la contaminación microbiana modificó las
características iniciales del producto. El producto P006 cuenta con registro sanitario
vigente y constan en la base de datos del ARCSA las especificaciones se compararon con
los ensayos realizados concluyendo que los productos cumple con las características
aceptadas por la agencia regulatoria, pero el producto se encontró contaminado con
Bacillus subtilis. De los 9 productos restantes tenían registro sanitario pero no consta en
la base de datos, por lo tanto no se cuenta con especificaciones por lo que no se pudo
hacer la comparación visual Se realizó el control organoléptico de las soluciones
oftálmicas naturales multidosis. El 80% de las gotas oftálmicas naturales presentan
partículas extrañas visibles, mientras que el 20% no presentó partículas pero todos los
productos estuvieron contaminados. El hecho de que no haya presencia de partículas
extrañas, no significa que no haya contaminación microbiana.
73
Se determinó el pH de las gotas oftálmicas naturales, el cual estaba dentro del rango de
3,5 a 8,5 que menciona la USP39-NF34, el cual favorece el crecimiento de todos
microorganismos encontrados en este estudio.
5.2 Recomendaciones
Debido a que estos colirios pueden ser una fuente de microorganismos infecciosos, y a
más de eso resistentes a los antimicrobianos, es recomendable realizar el patrón de
susceptibilidad de estos microorganismos a diversos antibióticos. Estas pruebas ya se
están realizando como continuación de este estudio.
Se recomieda que el ARCSA realice el control y vigilancia de estos productos naturales
que se venden libremente en Quito. Se constate que los productos tienen registro sanitario
vigente, y que cumplen con todos los requerimientos mediante un control posregistro,
para garantizar la comercializacion de productos seguros, eficaces y de calidad.
74
Bibliografía
Abo-State, M. (2012). Contamination of Eye Drops with BacillusSpecies and Evaluation
of Their Virulence Factors. World Applied Sciences Journal, 847-855.
Aguilar, J. H. (09 de 2003). Normalización de cuatro fórmulas para uso oftálmico
(colirios): cloranfenicol; antazolina- nafazolina ; TIMOLOL Y GENTAMICINA.
Recuperado el 14 de 11 de 2017, de http://ri.ues.edu.sv/5688/1/10126026.pdf
ANMAT. (2003). Farmacopea Argentina. Buenos Aires.
ARCSA. (2014). Reglamento de clasificacion de medicamentos y productos naturales.
Quito.
ARCSA. (26 de 04 de 2016). Agencia de Regulación, Control y Vigilancia Sanitaria.
Recuperado el 02 de 08 de 2017, de Arcsa recomienda no consumir “Colirio
Cubano Gotas Milagrosas”, “Colirio El Cubano Sábila de Aloe”, “Colirio El
Cubano Noni Plus” porque no tienen registro sanitario nacional:
http://www.controlsanitario.gob.ec/?s=+Arcsa+recomienda+no+consumir+%E2
%80%9CColirio+Cubano+Gotas+Milagrosas%E2%80%9D
ARCSA. (2016). Reglamento y control de productos naturales de uso medicinal.
Guayaquil.
Ashok, G. (2010). Tratamiento antibiótico y antiinflamatorio en oftalmología. Buenos
Aires: Editorial Médica Panamericana S.A.
Aulton, M. (2004). Farmacia. La ciencia del diseño de las formas farmaceuticas. Madrid:
ELSEVIER.
75
Aulton, M., & Taylor, K. (2013). Aulton's Pharmaceutics: The Design and Manufacture
of Medicines. Churchill Livingstone/Elsevier.
Becerra, O. E. (2012). Elaboración de Instrumentos de Investigación. México: CUAM.
Bedoya, A., Flórez, O., & Martínez, G. (2011). Evaluacion de formas farmacéuticas.
Medellín, Colombia: Universidad de Antioquia.
Calixto, J. (2000). Efficacy, safety, quality control, marketing and regulatory guidelines
for herbal medicines (phytotherapeutic agents). Brazilian Journal of Medical and
Biological Research, 179-189.
Calvo, B. (03 de 2015). Preparaciones de uso oftálmico. Recuperado el 22 de 07 de 2017,
de
https://ocw.ehu.eus/pluginfile.php/10124/mod_resource/content/1/10122015_ma
teriales_de_estudio/Tema_15.-_Preparados_para_uso_oftalmico.pdf
Canet, J. J. (19 de 01 de 2016). Seguridad e Higiene alimentaria. Recuperado el 19 de 01
de 2017, de Escherichia Coli: características, patogenicidad y prevención (I):
http://www.betelgeux.es/blog/2016/01/19/escherichia-coli-caracteristicas-
patogenicidad-y-prevencion-i/
Cantor, N. (2009). Queratitis bacteriana por Pseudomonas aeruginosa asociada al uso
de lentes de contacto. Recuperado el 01 de 2018, de
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/8404/tesis369.pdf?se
quence=1
CEMED. (2016). Medicamentos fraudulentos: colirios cubanos. La Habana.
76
Center Química. (2014). Membrana para filtración esterilizante. Recuperado el 03 de 08
de 2017, de
http://www.centerquimica.com.ar/productos_membranas_filtracion.html
Chiriboga, D. D. (2011). Uso Racional de Medicamentos . Carcteristicas de la receta ,
(pág. 3). Quito .
CIMUN. (31 de 01 de 2017). COLIRIOS CUBANOS “Gotas Milagrosas”, “Ojo de
Águila”, “Natural de Aloe”, “Zanahoria y Sábila” son fraudulentos. Recuperado
el 22 de 07 de 2017, de http://cimuncol.blogspot.com/2017/01/en-marzo-de-
2016-la-agencia-regulatoria.html
De la Rosa, M. d. (2000). Calidad microbiológica del aire de una zona limpia en una
industria farmacéutica. Anal. Real Academia Nacional de Farmacia, 66(2).
Esteva de Sagrear, J. (25 de 04 de 2015). Portal de Búsqueda de la BVS Enfermería.
Obtenido de Eye-drops form olden times to the XIXth century:
http://pesquisa.bvsalud.org/enfermeria/resource/es/ibc-143967
Feghhi, M. (Febrero de 2008). Evaluation of fungal and bacterial contaminations of
patient-used ocular drops. Medical Mycology, 17 - 21.
Gerbino, P. (2005). Remington: The Science and Practice of Pharmacy (21st ed.).
Philadelphia: LIPPINCOTT WILLIAMS & WILKINS.
Ginés, J. (12 de 2012). Contaminación microbiana de colirios utilizados por pacientes en
la consulta externa de oftalmología. Recuperado el 09 de 07 de 2017, de
http://scielo.iics.una.py/pdf/iics/v10n2/v10n2a05.pdf
77
González, M. G. (2004). Legislación en Iberoamérica sobre fitofármacos y productos
naturales medicinales. Revista de Fitoterapia, 53 - 62.
Hernández, R. F. (2010). Metodología de la Investigación. México: McGRAW-HILL.
Kim, M. S. (08 de 2012). Comparison of contamination rates between preserved and
preservative-free fluoroquinolone eyedrops.
M S Kim, C. Y. (8 de 09 de 2008). Microbial contamination of multiply used preservative-
free artificial tears packed in reclosable containers. Recuperado el 11 de 06 de
2017, de m http://bjo.bmj.com
Martins, H. M. (2001). Evaluation of microbiological quality of medicinal plants used in
natural infusions. International Journal of Food Microbiology, 149–153.
Mendez, B. (15 de 02 de 2011). Soluciones oftalmicas. Obtenido de
https://es.scribd.com/doc/48915074/SOLUCIONES-OFTALMOLOGICAS
Narciso, K. (2015). Estabilidad acelerada a largo plazo de una solución oftalmica esteril
de timolol fabricado por el Laboratorio VITALINE S.A.C. Trujillo.
Nentwich, M. (2 de 05 de 2007). Microbial contamination of multi-use ophthalmic
solutions in Kenya. Wold View, 1265–1268.
OMS. (31 de 03 de 2003). Recuperado el 16 de 08 de 2017, de
apps.who.int/gb/archive/pdf_files/WHA56/sa5618.pdf
OMS. (2003). Directrices de la OMS sobre buenas prácticas agrícolas y de recolección
(BPAR) de plantas medicinales. Recuperado el 12 de 10 de 2017, de
http://apps.who.int/medicinedocs/es/d/Js5527s/
78
OMS. (2011). Buenas prácticas de manufactura establecidas por la OMS para productos
farmacéuticos estériles. Recuperado el 12 de 10 de 2017, de Anexo 6:
www.cofepris.gob.mx/MJ/Documents/Normas/anexo6nom059.pdf
OMS. (2013). Estrategia de la OMS sobre la medicina natural. Recuperado el 13 de 08
de 2017, de http://www.who.int/iris/handle/10665/95008
Palacios Katherine, M. J. (15 de 10 de 2014). Control de calidad de medicina natural
(Colirios de uso oftalmológico). Recuperado el 23 de 07 de 2017, de
http://www.dui.uagrm.edu.bo/Informacion/Expociencia2014/1571.pdf
Pareja, B. (1967). Farmacotecnia. Peru: Campodonico ediciones S.A.
Porges, Y. (15 de 12 de 2003). Sterility of Glaucoma Medications Among Chronic Users
in the Community. Journal of ocular pharmacology and therapeutics, 123-128.
Pumarola, A., Rodriguez, A., García, J., & Piedriola, G. (1999). Microbiología y
parasitología médica. Barcelona: Masson S.A.
R, H. V. (2007). Generalidades de los conservantes en las formulaciones oftálmicas.
Archivos de la Sociedad Española de Oftalmología, 531-532.
Rahman, M. e. (2006). Microbial contamination of preservative free eye drops in multiple
application containers. British Journal of Ophthalmology, 139-141.
Real Farmacopea Española. (01 de 2008). PREPARACIONES OFTÁLMICAS.
Recuperado el 03 de 07 de 2017, de
http://www.ugr.es/~adolfina/asignaturas/TF3/colirios.pdf
Roca, D. Á. (2014). Pseudomonas aeruginosa: un adversario peligroso. Acta bioquímica
clínica latinoamericana, 48(4), 465-74.
79
Rodríguez, I. (2 de 04 de 2012). Colirios naturales: Cuida tus ojos. Recuperado el 22 de
07 de 2017, de http://www.ellahoy.es/salud/articulo/colirios-naturales-cuida-tus-
ojos/54033/
Rojas, M. L. (Mayo-ago de 2007). Análisis microbiológico de plantas medicinales con
óxido de etileno. Revista Cubana de Farmacia, 41(2).
Rosenthal, R. (2006). Evaluation of the Preserving Efficacy of Lubricant Eye Drops with
a Novel Preservative System. JOURNAL OF OCULAR PHARMACOLOGY AND
THERAPEUTICS, 22(6), 441 - 448.
ROSENTHAL, R. A. (2006). Evaluation of the Preserving Efficacy of Lubricant Eye
Drops with a Novel Preservative System. JOURNAL OF OCULAR
PHARMACOLOGY AND THERAPEUTICS, 22(6), 440-448.
Saisyo, A. (2016). Microbial Contamination of in-use Ophthalmic Preparations and Its
Prevention. Bull Yamaguchi Med Sch, 17-24.
Salas, I. (2000). Factores de virulencia en cepas Candida albicans. Costarricense de
Ciencias Médicas, 21(1).
Salud, O. M. (1984). Uso Racional de medicamentos., (pág. 3). Japon.
Salud, O. P. (2002). Cabinas de seguridad biológica: uso, desindección y mantenimiento.
Whashington: OPS.
Sánchez, J. (2016). Bacillus cereus un patógeno importante en el control microbiológico
de los alimentos. Fac. Nac. Salud Pública, 230-242.
Sandle, T. (2016). Pharmaceutical Microbiology. Essentials for quality assurance and
quality control. Chippenham, UK: Woodhead Publishing.
80
Semwal, U. P. (2015). Evaluation of preservative effectiveness in ophthalmic drops by
microbial challenge test. World Journal of Pharmaceutical Sciences, 3(1), 31-36.
Sharapin, N. (2000). Fundamentos de tecnología de productos fitoterapéuticos. Santafé
de Bogota: CYTEC.
Supo, J. (2015). Seminarios de Investigacion. Obtenido de
http://seminariosdeinvestigacion.com/niveles-de-investigacion/
Thompson, J. (2006). Practica Contemporanea en Farmacia. México: Mc.Graw-Hill
Interamericana.
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introducción a la microbiología. Buenos Aires:
Médica Panamericana.
UNIMED. (16 de 01 de 2001). Normas para medicamentos naturales, tradicionales y
homeopaticos. Obtenido de
http://apps.who.int/medicinedocs/documents/s18840es/s18840es.pdf
USP. (2016). United States pharmacopeia 39-The national formulary 34. Rockville, MD:
United Book Press.
Valcárcel, A. J. (1 de 9 de 1996). Instituto Superior de Medicina Militar "Dr. Luis Díaz
Soto". Obtenido de Farmacología en enfermedades oftálmicas (II). :
http://www.bvs.sld.cu/revistas/oft/vol9_1_96/oft05196.htm
Virani, S. (30 de Noviembre de 2015). Microbiological Safety of Using Eye Drops After
One Month: Contamination is A Rule or Mere Regulation ? Del J Ophthalmol,
26(3), 176-179.
81
Vu, N., Lou, J., & Kupiec, T. (2014). Quality control: Microbial limit tests for nonsterile
pharmaceuticals, part 2. International Journal of Pharmaceutical Compunding,
305-310.
WHO. (13 de 07 de 1992). Pautas para las elaboración de medicamentos herbarios.
Recuperado el 13 de 08 de 2017, de
http://apps.who.int/medicinedocs/es/d/Jh2987s/6.html#Jh2987s
WHO. (2008). PanAmerican Health Organization. Obtenido de Anexo 1. Informe 32:
http://www.paho.org/hq/dmdocuments/2008/1_Anexo_1_informe_32
82
Anexos
: Esquema causa efecto
Cambio de las características
químicas y físicas del producto

Desarrollo de patologías
Cambios es la calidad del producto
oculares
Desarrollo de microorganismos
patógenos
Contaminación microbiana de gotas oftálmicas
naturales
Malas prácticas de manufactura Falta de control pos registro
Control y vigilancia del ARCSA

Áreas de Falta de
Problemas en la
preparación y esterilidad en el
formulación
envasado no proceso y
adecuadas producto
terminado
Ineficacia del
preservante
83
: Diagrama de flujo: Prueba de esterilidad de productos oftálmicos
Esterilización de la cabina de flujo

30 minutos
Encender el flujo laminar
Armar el equipo de filtración
Colocar la membrana asépticamente
en el vaso del equipo de filtración
Filtrar el producto
Retirar y cortar la membrana en partes
iguales Tioglicolato
Colocar cada mitad en los medios 14 días
TSB
líquidos
Incubar
TSA
Presencia de Si Inoculación a medios

específicos SAB
turbidez
MCK
No
Producto estéril MSA
84
: Diagrama: Identificación de microorganismos bacilos Gram negativos
Tinción Gram
Bacilos Gram negativo
Oxidasa
Positivo Negativo
Pseudomonas spp Enterobacteriaceae
Crecimiento en Pruebas
Cetrimide bioquímicas
TSI / Cetrimide
TSI
SIM
UREA
SIMMONS
CITRATO
RM-VP
85
: Diagrama: Identificación de microorganismos bacilos Gram positivos
Tinción Gram
Bacilos Gram positivos
Tinción de endosporas
Catalasa
Positivo Negativo
Manitol salado Clostridium spp
Lactobacillus spp
MYPC
Colonias de color Colonias que color rojo con
amarillo un halo de precipitación
crema
Bacillus subtilis Bacillus cereus
86
: Diagrama: Identificación de microorganismos cocos Gram positivos
Cocos Gram positivos
Catalasa
Positivo Negativo
Coagulasa Streptococcus spp
Positivo Negativo
Staphyloccocus
aureus
Manitol salado
87
: Diagrama: Identificación de microorganismos levaduras
Tinción simple
Todas negativas
Ureasa
Fermentación de carbohidratos
OF(glucosa)
Candida guillermoddi
Todas positivas
Candida lusitaneae
Candida albicans
Candida krusei
Candida parapsilosis
Fermentación de carbohidratos
Candida kefyr
OF(lactosa)
Candida albicans Candida guillermoddi
Candida lusitaneae
Tubo germinal en suero Candida krusei

sanguíneo
Candida parapsilosis
Formación de clamidosporas
Candida kefyr
88
: Sondeo de comercialización de gotas oftálmicas naturales
89
90
91
92
: Resultados de la identificación de cada microorganismo
Tabla . Características del microorganismo Escherichia coli
Ensayo Resultado
TSA Colonias redondas medianas, borde completo, con elevación
Tinción Gram Bacilos Gram-negativos (pequeños)
Agar MacConkey Colonias redondas rosadas con halo tubio blanquecino, borde completo.
Oxidasa Negativo
TSI A/A, el medio cambio de rojo a amarillo, no hubo la producción de gas y H2S
Utilización de citrato Negativo
Producción de ureasa Negativo
SIM Producción de H2S negativo, Indol negativo, Movilidad positivo
RM-VP Rojo de metilo positivo, Voges-Proskauer negativo
Tabla . Características del microorganismo Candida albicans
Ensayo Resultado
SAB Colonias redondas blanquecinas, borde completo con elevación.
Tinción simple Estructuras ovaladas casi redondas
Prueba de O.FL No fermenta lactosa, el tubo no cambio de color
Prueba del tubo

En el microscopio se observó unas esferas con una protuberancia
germinal
Formación de En el microscopio se observó unas estructuras ovaladas con una doble
clamidosporas membrana
93
Tabla . Características del microorganismo Bacillus subtilis
Ensayo Resultado
TSA Colonias grandes blanquecinas, mucoides, de borde irregular
Tinción Gram Bacilos Gram-positivos en cadenas largas
Catalasa Positivo
Formación de endosporas Positivo, endosporas centrales, de formación ovoide
Colonias irregulares de color blanquecino, las colonias

Agar Manitol Salado
cambiaron el color del medio de rojo a amarillo
RM-VP RM negativo, VP positivo
Agar MYP (Manitol-Yema de

Colonias amarrillas redondas, de borde completo.
huevo-Polimixina)
94
Tabla . Características del microorganismo Bacillus cereus
Ensayo Resultado
TSA Colonias grandes blanquecinas, rugosas y secas, de borde
irregular
Tinción Gram Bacilos Gram-positivos en cadenas cortas
Catalasa Positivo
Formación de endosporas Positivo, endosporas centrales, de formación ovoide
Agar Manitol Salado Colonias irregulares de color blanquecino secas, las colonias
cambiaron el color del medio de rojo a amarillo
RM-VP RM negativo, VP positivo
Agar MYP (Manitol-Yema de Colonias rojas redondas, de borde completo.
huevo-Polimixina)
95
: Test de eficacia del preservante
Actividad del preservante frente a Escherichia Coli

7
5
P001
P002
Log(UFC/ml)
4
P003
P004
3
P005
P006
2 P007
0
0h 7 días 14 días 14 días
Figura Actividad del preservante frente a Escherichia Coli
96
Actividad de preservante frente a Staphylococcus aureus
8
6
P001
5 P002
Log(UFC/ml)
P003
4 P004
P005
3
P006
2 P007
0
0h 7 días 14 días 14 días
Figura Eficacia del preservante frente Staphylococcus aureus
97
Tabla . Criterios de eficacia antimicrobiana
Productos de Categoría 1
A los 7 días, una reducción logarítmica de

Bacterias
no menos de 1,0 desde el recuento inicial
calculada; a los 14 días, una reducción
logarítmica de no menos de 3,0 del
recuento inicial y a los 28 días ningún
incremento con respecto al recuento de los
14 días.
Levaduras y Hongos
Ningún incremento a los 7, 14 y 28 días
Filamentosos con respecto al recuento inicial
Adaptado de: (USP, 2016)
98
: Tipo de envase de las gotas oftálmicas naturales
Tipo de envase Envase primario y secundario Tipo de gotero
Frasco plástico polietilen de color

Gotero tipo drop-
blanco. Tapón gotero de plástico
tainer Tapón
de color natural transparente de tipo
gotero de plástico
presión. Tapa de plástico
de color natural
polietileno de color blanco. Tipo
transparente de
gotero
tipo presión.
Frasco gotero de vidrio ámbar.

Tapa plástica de polipropileno
negra, de rosca, con pera azul de
caucho y pipeta dosificadora de Pera azul de
vidrio transparente. Lámina de caucho y pipeta
seguridad termoencogible dosificadora de
vidrio transparente.
Caja de cartulina dúplex,
termoencogible de seguridad de
plástico.
Frasco de vidrio ámbar. Tapa rosca

negra / inserto gotero de 18mm de Inserto gotero de
plástico blanca 18mm de plástico
blanca
99

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

Evaluación de la calidad microbiológica de gotas oftálmicas naturales

Autor: Espinoza Méndez Raquel Estefanía

Tutor: Terán Soto Rommy Ivette

DMQ, abril, 2018

“La mayor gloria no es nunca caer, sino levantarse siempre”

A la MSc. Rommy Terán por su confianza, experiencia, compresión, tiempo, dedicación y

A todos ustedes muchas gracias

El presente trabajo de investigación se desarrolló en el Laboratorio de Microbiología General

y Farmacéutica y en el Laboratorio de Tecnología Farmacéutica de la Facultad de Ciencias

auspiciado por la Universidad Central y dirigido por Rommy Terán.

Autorización de autoría intelectual ........................................................................................ v

Constancia de aprobación del Proyecto de Invetigación ...................................................... v

Constancia de aprobación del trabajo final por tribunal ..................................................vii

Lugar donde se realizó la investigación ...............................................................................vii

Índice de figuras ....................................................................................................................... v

Índice de anexos ...................................................................................................................... vi

Abstract ................................................................................................................................... iii

Capítulo I El Problema ............................................................................................................ 3

1.1 Planteamiento del problema ........................................................................................ 3

1.2 Formulación del problema .......................................................................................... 6

1.3 Objetivos ..................................................................................................................... 7

1.3.1 Objetivo general. .................................................................................................. 7

1.3.2 Objetivos específicos. .......................................................................................... 7

1.4 Justificación e importancia .......................................................................................... 7

2.1 Antecedentes de la investigación .............................................................................. 11

2.2 Fundamentación teórica ............................................................................................ 15

2.2.1 Anatomía y fisiología del ojo ............................................................................. 15

2.2.2 Soluciones oftálmicas ........................................................................................ 16

2.2.3 Administración tópica de soluciones oftálmicas................................................ 19

2.2.4 Medicamento Natural y Tradicional .................................................................. 20

2.2.5 Formulación farmacéutica de medicamentos naturales y tradicionales ............. 20

2.2.6 Generalidades en la elaboración de los Productos Naturales............................. 21

2.2.7 Buenas prácticas agrícolas y de recolección de plantas medicinales ................. 21

2.2.8 Formas farmacéuticas líquidas ........................................................................... 22

2.2.9 Productos naturales para uso ocular ................................................................... 22

2.2.10 Clasificación de las formas farmacéuticas según los criterios microbiológicos 23

2.2.11 Buenas prácticas de manufactura para productos farmacéuticos estériles ......... 23

2.2.12 Análisis de la esterilidad de productos farmacéuticos ....................................... 26

2.2.13 Esterilidad de las soluciones oftálmicas ............................................................ 30

2.2.14 Control organoléptico ........................................................................................ 30

2.2 Fundamentación legal ............................................................................................... 30

2.3 Hipótesis .................................................................................................................... 33

2.3.1 Hipótesis de trabajo............................................................................................ 33

2.3.2 Hipótesis nula..................................................................................................... 33

2.4.1 Variable Dependiente......................................................................................... 33

2.4.2 Variables Independientes ................................................................................... 33

Capítulo III Metodología de la Investigación ...................................................................... 35

3.1 Diseño de la Investigación ........................................................................................ 35

3.1.1 Enfoque .............................................................................................................. 35

3.1.2 Nivel ................................................................................................................... 35

3.1.3 Tipo de investigación ......................................................................................... 36

3.2 Materiales y métodos ................................................................................................ 36

3.2.2 Muestra .............................................................................................................. 37

3.2.3 Materiales ........................................................................................................... 37

3.2.4 Métodos y procedimientos. ................................................................................ 41

3.3 Diseño experimental .................................................................................................. 45

3.3.1 Unidad de estudio .............................................................................................. 45

3.3.2 Variable de estudio ............................................................................................ 45

3.4 Operacionalización de variables................................................................................ 46

3.5 Técnicas e instrumentos de recolección de datos ...................................................... 48

3.6 Técnicas de procesamiento y análisis de datos ......................................................... 48