Universidad Nacional de Ingeniería

Facultad de Ingeniería Química y Textil

Departamento Académico de Ingeniería Química

Tercer Trabajo de Aplicación de Bioingeniería

GRUPO 1
Avances recientes en biomateriales basados en polisacáridos para aplicaciones de
ingeniería de tejidos y administración de fármacos

Miembros:
● Ayala Cordova, Katherine Lizbeth 20172642E
● Caceda Moscoso,Vivian Stephanie 20172601G
● Martínez Sánchez, Marco Antonio Uriel 20161248I

Fecha de presentación: 17/07/2021

Docente: Ing. Enrique Neira Montoya

Lima, Perú
 Índice

1. Introducción 1

2. Polisacáridos: estructura, propiedades y funcionalización química 2

2.1. Quitosano 2
2.2. Dextrano 2
2.3. Ácido hialurónico 3
2.4. Heparina 4
2.5. Alginato 5
2.6. Pululano 5
2.7. Sulfato de condroitina 6
2.8. Celulosa 7

3. Estrategias de reticulación para el diseño de biomateriales basados en polisacáridos 7

3.1. Reticulación física 7
3.2. Reticulación química 9

4. Biomateriales basados en polisacáridos para la administración de fármacos 11

4.1. Encapsulación física de fármacos 11
4.2. Acoplamiento químico de fármacos 18
4.3. Orientación activa y pasiva 21
4.3.1. Orientación activa 21
4.3.2. Orientación pasiva 24

5. Biomateriales basados en polisacáridos para la ingeniería de tejidos 26

Referencias bibliográficas 28
 Índice de Figuras

Figura 1: Estructura silla del Quitosano (Sood et al., 2021) ..................................................... 2

Figura 2: Estructura silla del Dextrano (Sood et al., 2021) ....................................................... 3

Figura 3: Estructura del ácido hialurónico (Sood et al., 2021) .................................................. 4

Figura 4: Estructura de la Heparina (Sood et al., 2021)............................................................. 4

Figura 5: Estructura del Alginato (Sood et al., 2021) ................................................................ 5

Figura 6: Estructura del Pululano (Sood et al., 2021) ................................................................ 6

Figura 7: Estructura del Sulfuro de condroitina (Sood et al., 2021) .......................................... 6

Figura 8: Estructura de la Celulosa (Sood et al., 2021) ............................................................. 7

Figura 9: Evaporación de solvente (Sood et al., 2021) ............................................................ 13

Figura 10: Representación esquemática del proceso de síntesis de nanocompuestos de

quitosano/eudragit S-100 unidos por enlaces disulfuro cargados con paclitaxel y su

biodistribución en ratones Balb/C después de la administración oral ( Sood et al., 2019 ) ..... 14

Figura 11: Micro/nano encapsulación (Sood et al., 2021) ....................................................... 16

Figura 12: Gelificación iónica (Sood et al., 2021) ................................................................... 17

Figura 13: Representación esquemática de la síntesis de NP de Xyl-SS-Cur/5-FUSA como

sistema de administración de fármacos ( Sauraj et al., 2020) .................................................. 20

Figura 14: Representaciones esquemáticas de estrategias de focalización activas y pasivas

(Sood et al., 2021) .................................................................................................................... 22

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Avances recientes en biomateriales basados en polisacáridos para aplicaciones de

ingeniería de tejidos y administración de fármacos

1. Introducción

Actualmente se busca innovar en la biomedicina con el uso de nuevos materiales e

investigaciones recientes han permitido el uso de polímeros naturales y sintéticos;

nanopartículas; liposomas; microgeles; micelas; conjugados polímero – fármaco y

dendrímeros. Es importante resaltar que los polímeros sintéticos permiten el control sobre el

peso molecular y la incorporación de grupos funcionales que brindan propiedades mecánicas

particulares (Qiao & Wang, 2018); por otro lado, los polímeros naturales, como los

polisacáridos, nos brindan biocompatibilidad y biodegradabilidad, que son propiedades

importantes al momento de aplicarlos en la biomedicina. Es por esto que se han desarrollado

nanoformulaciones con polisacáridos que minimizan la degradación prematura de los fármacos

y proporcionan una buena biodistribución, una penetración intracelular mejorada y una

estabilidad mejorada de biomoléculas (Liu, Willför y Xu, 2015). Además, se ha buscado que

estas formulaciones desarrollen nuevos sistemas de administración de fármacos con la

capacidad de liberarlos en forma simultánea o secuencial y así lograr una mejora en la terapia

dedicada (Duan et al., 2016). Todo esto en base a variedad de respuestas a estímulos como

enzimas, temperatura, pH, etc., según la composición del sistema desarrollado (Wei et al.,

2017). Así mismo, los polisacáridos han causado interés en la elaboración de biomateriales

para desarrollar la encapsulación celular y andamios de ingeniería de tejidos (Bombaldi de

Souza et al., 2019). Siendo de bajo costo y con facilidad de procesamiento, posibilidades de

funcionalización, interacción con el tejido cercano, biocompatibilidad y biodegradabilidad

(Miao, Wang, Zeng, Liu & Chen, 2018). En este trabajo se proporciona información acerca de

la estructura química, propiedades fisicoquímicas y aplicaciones de algunos polisacáridos

 2

como alginato, celulosa, quitosano, dextrano y ácido hialurónico. Además, se describen

diferentes estrategias de reticulación física y química para el desarrollo de biomateriales

utilizando polisacáridos para la administración de fármacos y la regeneración de tejidos.

2. Polisacáridos: estructura, propiedades y funcionalización química

2.1. Quitosano

El quitosano es un polisacárido natural, y es considerado uno de los más abundantes.

Es considerado como un polisacárido lineal y se compone de unidades de D-glucosamina y

N-acetil-D-glucosamina que se distribuyen aleatoriamente. Cuenta con propiedades de

biocompatibilidad, biodegradabilidad y no toxicidad que son utilizadas en la biomedicina.

Además, entre sus propiedades fisicoquímicas tenemos que es insoluble en agua y en

condiciones alcalinas, pero es soluble en ácidos débiles (Bakshi et al., 2020). Sus principales

aplicaciones son en ingeniería de tejidos, medicina regenerativa, administración de fármacos

y vendajes para heridas debido a que cuenta con propiedades analgésicas, antibacterianas,

antifúngicas y mucoadhesivas.

Figura 1: Estructura silla del Quitosano (Sood et al., 2021)

2.2. Dextrano

El dextrano es un polisacárido bacteriano extracelular y es producido a partir de

sacarosa por bacterias del ácido láctico. Sus propiedades fisicoquímicas varían según las
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cepas microbianas y el método de extracción. Es soluble en agua y pocos disolventes como

formamida, glicerol, sulfuro de metilo y etilenglicol. Su uso se expande en amplias áreas

como la industria alimentaria, cosmética, tratamiento de aguas residuales y aplicaciones

biomédicas ya que cuenta con baja toxicidad, biocompatibilidad, biodegradabilidad y

capacidad de retención de agua. En la ingeniería de tejidos, la presencia de enzimas

microbianas dextranasas son capaces de dirigir el suministro de fármacos a la región del

colón (Sood, Gupta, & Agrawal, 2021).

Figura 2: Estructura silla del Dextrano (Sood et al., 2021)

2.3. Ácido hialurónico

El ácido hialurónico (HA) es un polisacárido cargado negativamente de origen natural,

ya que cuenta con un grupo carboxilo en su estructura. Esto permite que absorba gran de

agua provocando un hinchamiento de HA hasta mil veces sus dimensiones, lo cual se

aprovecha en la administración de fármacos basados en HA. El HA con alto peso molecular

brinda propiedades inmunosupresoras y antiinflamatorias. Por otro lado, con bajo peso

molecular contribuye en la migración celular y promueve la angiogénesis (Sood, Gupta, &

Agrawal, 2021).
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Figura 3: Estructura del ácido hialurónico (Sood et al., 2021)

2.4. Heparina

Es un glucosaminoglicano de origen natural cuyas fuentes son tanto terrestres como marinas

para la producción comercial y farmacéutica. Su estructura es de un disacárido lineal y un

glicosaminoglicano natural. Debido a su alta carga tiene una alta densidad de carga que

utiliza para unirse con proteínas y péptidos; también se ha utilizado como factor de

crecimiento en fibroblastos, endotelial vascular y selectinas e inhiben la actividad del

crecimiento tumoral y la metástasis. Sus propiedades anticoagulantes marcan su uso en

nanoportadores, en vehículos de administración de fármacos. (Sood, Gupta, & Agrawal,

2021)

Figura 4: Estructura de la Heparina (Sood et al., 2021)

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2.5. Alginato

Estructuralmente el alginato es un copolímero de bloque aniónico lineal, no ramificado y

ácido 𝛼- l -gulurónico, sus principales fuentes vienen de algas como marinas como la

Laminaria, Durvillaea, Turbinaria, Fucus y Nereocystis; y también de bacterias como

Azotobacter y Pseudomonas. Los biomateriales/nanofibras basados en alginato se utilizan

en aplicaciones de ingeniería de tejidos, administración de medicamentos y apósitos para

heridas gracias a su biocompatibilidad, flexibilidad mecánica, actividad de reticulación y

propiedades gelificantes (Severino et al., 2019; Taemeh, Shiravandi, Korayem & Daemi ,

2020).

Figura 5: Estructura del Alginato (Sood et al., 2021)

2.6. Pululano

Se obtienen del almidón por medio de hongos similares a la levadura. Su estructura es

la de un homopolisacárido que está entre la amilosa y el dextrano. Tiene características

hidrofílicas, son poco solubles en medio alcalino e insolubles en compuestos orgánicos y

tiene un punto de fusión de 250°C. Los nanogeles autoensamblados a base de pululano, se

han sintetizado mediante reticulación e interacciones hidrófobas entre los grupos

colesterilo. También tiene propiedades como biodegradabilidad, no toxicidad y no

mutagenicidad que hacen que sea candidato para la industria farmacéutica, alimentaria,

ingeniería de tejidos, selección de genes y administración de fármacos. (Singh et al., 2017).

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Figura 6: Estructura del Pululano (Sood et al., 2021)

2.7. Sulfato de condroitina

Está presente en el cartílago asociado con proporcionar resistencia a la compresión. Su

estructura consta de tres constituyentes como la condroitina, sulfotransferasa y PAPS: se

produce a partir de condrocitos y mantienen las actividades normales de los cartílagos, actúa

como lubricante que proporciona propiedades de amortiguación al cartílago. SE ha utilizado

como agente terapéutico para condiciones patológicas a saber artrosis, enfermedades

cardiovasculares e ingeniería de tejidos, debido a las propiedades de anticoagulación,

antiinflamatoria, anti apoptótica, antioxidante y antitumoral. (Yang et al., 2020).

Figura 7: Estructura del Sulfuro de condroitina (Sood et al., 2021)

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2.8. Celulosa

Es el biopolímero más abundante en la tierra y el Celluloid fue el primer polímero

termoplástico a base de celulosa. La fuente de celulosa incluye plantas, animales marinos,

algas, bacterias, hongos y fuentes minerales. La celulosa tiene un punto de fusión elevado y

suele ser propensa a la oxidación, los cuales restringen la solubilidad en agua y en

compuestos orgánicos. Tiene la estructura de un homopolisacárido lineal con unidades de

d-glucopiranosilo con enlaces 𝛽− 1, 4 glicosídicos, y debido a los enlaces OH forman

enlaces intramoleculares con alta resistencia a la tracción. La baja toxicidad,

biodegradabilidad, biocompatibilidad y buenas propiedades hacen que la celulosa se utiliza

en la administración de fármacos, vendajes para heridas y muchas otras aplicaciones

biomedicas (Javanbakht, Hemmati, Namazi & Hey- dari, 2020).

Figura 8: Estructura de la Celulosa (Sood et al., 2021)

3. Estrategias de reticulación para el diseño de biomateriales basados en polisacáridos

3.1. Reticulación física

La ventaja de reticular los hidrogeles basados en los polisacáridos es el hecho de que

no se utilizan reticulantes suplementarios durante la síntesis, evitando algún problema de

los biomateriales fabricados (Hu & Xu, 2020). Ha habido un mayor interés en la elaboración
 8

de hidrogeles debido a la relativa libertad de fabricación. Variando las opciones de

polisacáridos, la clase de reactivo, la temperatura es factible controlar y cambiar las

propiedades y estructura de la formación final del gel. La interacción iónica y el

autoensamblaje suelen ser los métodos más usados para sintetizar biomateriales basados en

polisacáridos reticulados físicamente (Eslahi, Abdorahim & Simchi, 2016). El alginato, el

quitosano y la pectina son polisacáridos que participan en la reticulación iónica. El uso de

nanofibras para la empresa de fármacos específicos se ha empleado considerablemente para

ganar un mejor índice terapéutico. Oligómeros catiónicos de quitosano físicamente

reticulados con reticulantes aniónicos como la goma xanthum y ácido poliaspártico se han

usado para la liberación prolongada de fármacos. También se han planteado las

interacciones iónicas en la reticulación de alginato para desarrollar fibras, hidrogeles,

nanopartículas, microesferas, etc.; los cuales son útiles para la administración de fármacos

y regeneración de tejidos.

El autoensamblaje de hidrogeles también puede ser posible a través de interacciones

electrostáticas de polisacáridos de cargas opuestas, este método se regirá tanto por la fuerza

iónica y el pH. Los hidrogeles de autoensamblaje de pululano con dextrano (Lachowicz et

al., 2019), STMP y miARN se han utilizado como estrategias para la administración de

fármacos. Además, los derivados de dextrano y pululano que contienen restos de 𝛽 ‐

ciclodextrina y adamantano se han usado para el autoensamblaje supramolecular que da

paso a la formación de nanopartículas para la administración de fármacos (Antoniuk et al.,

2017; Stensgaard Diget et al., 2019). Para la síntesis de hidrogeles supramoleculares de 𝛽 ‐

ciclodextrina y adamantano se ha empleado un autoensamblaje de ácido hialurónico.

También se ha estudiado que los hidrogeles supramoleculares activados por UV de

quitosano con norborneno se puede aplicar para la biomedicina debido a los nanoporos de

los hidrogeles y su no toxicidad para las células de los humanos (Michel et al., 2020). El
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proceso de coacervación de los polisacáridos también ha sido de gran interés, ya que se

someten al proceso de coacervación en solución que implica la interacción de dos especies

que resulta en una separación que coexisten.

Otro de los procesos de los polisacáridos es el de complejación, que se utiliza para el

autoensamblaje de hidrogeles mediante quitosano con alginato, goma gellan y kappa

carragenina cuya resistencia se modificó encapsulando nanopartículas de óxido de cerio

(Patel et al., 2020).

3.2. Reticulación química

Los polisacáridos químicamente reticulados se pueden diseñar mediante el

acoplamiento de grupos funcionales selectivos. Los hidrogeles formados por reticulación

química muestran más estabilidad, mayor resistencia y mejores propiedades mecánicas

como resistencia a la tracción, esfuerzo cortante, flexión, etc. en comparación con los

hidrogeles formados por reticulación física. Los puntos de reticulación químicamente

basados en hidrazona, disulfuro, cetales, etc. también responden a estímulos externos

extendiendo así la aplicación del hidrogel formado en el campo biomédico. En la literatura

se han empleado varios enfoques basados en diferentes reacciones químicas:

1) En el método de adición de Michael, dos componentes que tienen grupos electrofílicos

(aceptor de Michael) como grupos acrilato, crotonato, maleimida y vinilsulfona, y

nucleofílicos (donante de Michael) como SH, fosfina; se hacen reaccionar entre sí para

generar reticulación química. Este método es directo pero cuando se ejerce en

compuestos biológicos muestra algunas desventajas debido a la aparición de reacción

secundarias al competir con nucleófilos. Por ejemplo, quitosano injertado con ácido

acrílico y quitosano injertado con tri (2-carboxietil) fosfina.

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2) Por otro lado, la química de clic es una plataforma versátil para diseñar hidrogeles

químicamente reticulados debido a la variedad de grupos funcionales que se pueden usar,

condiciones de reacción suaves, alta quimioselectividad y altos rendimientos. Adición de

azida-alquino y adición de azida-alqueno son enfoques de la química del clic que se

utilizan frecuentemente para desarrollar los biomateriales deseados. Sin embargo, este

enfoque requiere el uso de metales tóxicos como catalizador; por lo tanto, se han hecho

varios esfuerzos para usar métodos libres de metales. Por ejemplo, para evitar la toxicidad

causada por el catalizador micromolar de Cu (I), se ha utilizado la química de clic de

diels-alder para combinar alginato modificado con furano con reticulantes a base de

bismaleimida.

3) Además, la reacción de OH, 𝑁𝐻2 , o grupos funcionales hidrazidos con restos aldehídos

que dan como resultado la formación de la base Schiff que también se ha utilizado para

la formación de hidrogeles. Los hidrogeles biocompatibles para la encapsulación celular

y la administración de fármacos se pueden preparar fácilmente mediante este enfoque en

condiciones de reacción suaves, ejerciendo así menos estrés sobre la carga útil. Un

ejemplo de hidrogeles basados en polisacáridos preparados por este método para

aplicaciones biomédicas es la formación de bases Schiff mediante la reacción de

polialdehído dextrano y carboximetil quitosano (Yang et al., 2019).

4) Como enfoque alternativo para la reticulación química de hidrogeles, la

polimerización radical de grupos vinilo ha proporcionado una herramienta versátil para

crear biomateriales deseados.

Sin embargo, la selección del agente de reticulación es muy importante considerando

las aplicaciones biomédicas, ya que el uso de productos químicos puede conducir a que los

biomateriales tengan toxicidad. Aparte de este problema de la toxicidad, los reticulantes

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químicos también pueden impartir colores específicos a los biomateriales basados en

polisacáridos que podrían restringir su uso en aplicaciones de ingeniería de tejidos,

especialmente en el reemplazo o regeneración de la piel.

4. Biomateriales basados en polisacáridos para la administración de fármacos

Los polisacáridos han sido de interés para muchos grupos de investigadores por ser

un potente sistema de administración de fármacos para terapias gracias a sus propiedades

como no toxicidad, biodegradabilidad, biocompatibilidad, baja inmunogenicidad.

4.1. Encapsulación física de fármacos

La encapsulación física de fármacos en un sistema portador ofrece las ventajas de

estructuras inalteradas y de retener la bioactividad de los fármacos cargados. La gelificación

iónica, la técnica de evaporación de solventes, la micro/nano encapsulación son algunas de

las técnicas ampliamente utilizadas basadas en polisacáridos.

a) La tecnología de evaporación de solventes (nanoprecipitación) desde sus inicios ha sido

utilizada constantemente para sintetizar nanopartículas y encapsular moléculas

terapéuticas en ellas para aplicaciones de administración de fármacos. Xu et al.

desarrolló un método de nanoprecipitación mediante un simple proceso de mezcla gota

a gota para sintetizar poli (d,1-ácido láctico)-dextrano (PLA-Dex) nanopartículas

cargadas con ciprofloxacina. El método aprovecha el proceso para separar el fármaco y

el polímero en dos fases orgánicas y acuosas diferentes. Para abordar las deficiencias y

mejorar tanto la eficiencia de fabricación como las capacidades de transporte de

fármacos de los sistemas de administración de fármacos contra el cáncer (ACDDS), el

grupo de investigación de Nisa Patikarnmonthon fabricó nanopartículas anfifílicas de

dextrano mediante la introducción de laurato de vinilo hidrófobo en la columna

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vertebral de dextrano para la orientación intestinal. Se demuestra que la unión de grupos

hidrófobos de laurato de vinilo al esqueleto del dextrano dio como resultado

interacciones hidrófobas hidrófilas que llevaron a la síntesis de un copolímero anfifílico

capaz de formar nanopartículas. El extracto de placenta porcina se utilizó como modelo

de carga para dilucidar la eficacia de carga y administración del fármaco del sistema

sintetizado. Los copolímeros de poli(l-lactida) injertados con celulosa en el que se

encapsuló el fármaco acetato de prednisona mediante la técnica de evaporación del

disolvente. En solución acuosa, se demostró el autoensamblaje del copolímero en

micelas con el núcleo de las micelas que consta de segmentos de poli(l-lactida)

(hidrófobos) y los segmentos de celulosa (hidrófilos) que representan las capas

externas. Se observa una liberación controlada de acetato de prednisona y casi el 95%

del fármaco se liberó en un período de tiempo de 7 días. Los ejemplos anteriores indican

claramente que los polisacáridos tienen una ventaja adicional en comparación con otras

clases de polímeros, debido a los fáciles métodos de post modificación, biológicos

actividad, homogeneidad y biocompatibilidad que dan como resultado un sistema de

transporte de fármacos que puede ayudar a abordar los desafíos terapéuticos médicos.

De esta manera, la encapsulación de nanopartículas de polímero cargadas con fármacos

en polisacáridos podría usarse para un efecto sinérgico diseñando cuidadosamente el

sistema. Modificaciones exitosas en la cadena principal del polímero y el núcleo de

polisacáridos podrían resultar en una mayor capacidad de carga útil y una liberación

personalizada del fármaco cargado.

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Figura 9: Evaporación de solvente (Sood et al., 2021)

Se sabe que algunos polisacáridos, especialmente heparina y quitosano, se dirigen

a regiones del colon. Para atacar la colitis ulcerosa (CU), enfermedad que afecta al tracto

gastrointestinal, Zhang et al. nanopartículas de albúmina de suero humano (HSA)

coencapsuladas de albúmina de suero humano (HSA) recubiertas de heparina (HEP)

fabricadas (BUD) (un esteroide antiinflamatorio) y vancomicina (Vanc) (antibiótico).

Se informó un efecto antiinflamatorio más alto para las nanopartículas de HEP-HSA

coencapsuladas con BUD / Vanc en comparación con el efecto inflamatorio individual

de las nanopartículas de HSA cargadas con un solo fármaco in vitro con la especificidad

de la diana intestinal en un modelo murino de colitis (Zhang et al., 2020). Se. informa

de la fabricación de nanopartículas de quitosano-eudragit S 100 (CSE NP) unidas

covalentemente para atacar activamente el cáncer colorrectal. PTX se encapsuló en el

sistema diseñado para estudiar el perfil de liberación del fármaco y la capacidad de

encapsulación del sistema diseñado. Aproximadamente el 66% de la población celular

se observó en la fase G2 / M en la interacción con las NP de CSE cargadas con PTX.

In vivo estudios de biodistribución post administración confirmó la retención de CSE

NP en la sección de colón hasta 24 h.

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Figura 10: Representación esquemática del proceso de síntesis de nanocompuestos de

quitosano/eudragit S-100 unidos por enlaces disulfuro cargados con paclitaxel y su
biodistribución en ratones Balb/C después de la administración oral ( Sood et al., 2019 )

Parámetros como la concentración de los copolímeros seleccionados, la

temperatura y la modificación química juegan un papel vital en la utilización efectiva

de vehículos de fármacos basados en polisacáridos. Cabe señalar que la utilidad de los

polisacáridos cargados con fármacos para aplicaciones teranósticas implica la selección

de nanopartículas que podrían proporcionar un contraste mejorado durante la formación

de imágenes. Aunque no están directamente involucrados en proporcionar señales de

imágenes, los polisacáridos juegan un papel crucial para ayudar a las nanopartículas a

llegar al sitio objetivo, además de brindar la posibilidad de liberación controlada de

fármacos para lograr una terapia personalizada.

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b) La micro / nano encapsulación de fármacos es uno de los métodos prometedores de

encapsular fármacos en biomateriales basados en polisacáridos. Las

micro/nanocápsulas son sistemas de administración de fármacos coloidales que constan

de compartimentos acuosos encerrados dentro de una carcasa hidrófoba. Dependiendo

del material utilizado para la formación de la cáscara, las cápsulas se clasifican como

liposomas y polimerosomas. Recientemente, se han realizado trabajos en la fabricación

de nanopartículas autoensambladas encapsuladas en fármacos que consisten en

polímeros anfifílicos. El uso restrictivo de tensioactivos y disolventes orgánicos en la

síntesis de estas formulaciones son algunas de las ventajas clave asociadas con esta

estrategia. En un estudio, Zhang et al. informó de la síntesis de una serie de copolímeros

de bloque CoS/poli (d, l-lactideco-glicólido) (CoS-b-PLGA) de diferentes longitudes

de bloques hidrófobos mediante un enfoque de acoplamiento de extremo a extremo.

Los copolímeros sintetizados presentaron la capacidad de autoensamblarse en micelas

estables en un ambiente acuoso. La doxorrubicina (DOX) se encapsuló eficientemente

dentro de las micelas CoS-b-PLGA durante el proceso de autoensamblaje para la

formación de micelas con un comportamiento de liberación sostenida tras la

estimulación del pH (Zhang y col., 2017). Para apuntar a la sobreproducción de receptor

de ácido fólico (FA) en células de cáncer colorrectal, se formularon micelas

autoensambladas de CoS/CS/FA. El fármaco bortezomib se encapsuló dentro de las

micelas mediante un método de atrapamiento físico mediante partición. Los resultados

informados indicaron una captación mejorada de las micelas autoensambladas de

CS/CHS/FA en líneas de células colorrectales en comparación con la línea de células

de cáncer de pulmón (A549) sin receptores de FA expresados en la superficie (Soe et

al., 2019). Un análisis cuidadoso de los ejemplos anteriores muestra claramente que las

micelas esféricas son bastante más fáciles de desarrollar, pero para fabricar micelas con
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diferentes formas mediante el autoensamblaje, se deben controlar cuidadosamente

varios parámetros como la temperatura y la concentración.

Figura 11: Micro/nano encapsulación (Sood et al., 2021)

c) El método de gelificación iónica implica interacciones electrostáticas entre

polielectrolitos y un contraión . El método de gelificación iónica fue desarrollado por

primera vez en 1997 por Calvo et al. para la nanoencapsulación de proteínas utilizando

nanopartículas de quitosano con tripolifosfato de sodio (TPP) como reticulante

(Santana y Salazar, 2020). En este método, se utilizan reticuladores físicos para reticular

los polímeros. El método de gelificación iónica ofrece contrarrestar los posibles efectos

secundarios del uso de productos químicos como reticulantes y se explora la técnica de

gelificación iónica para preparar nanopartículas de CS cargadas con 5FU. Se informó

una eficiencia de encapsulación (EE) de casi el 44% para este sistema (Sun et al., 2017).

Saeed et al. donde se usó hexametafosfato como agente de reticulación para sintetizar

nanopartículas de quitosanftalato estables cargadas con doxorrubicina. Se informó una

mejora de la citotoxicidad diez veces mayor para este sistema en comparación con la

doxorrubicina libre (Saeed, Dmour y Taha, 2020). En cada caso, el agente de

reticulación se incorporó dentro del polímero durante el proceso de síntesis. Las

microesferas y submicroesferas basadas en alginato se consideran un candidato potente

para aplicaciones biomédicas debido a su proceso de gelificación iónica relativamente

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suave. Las limitaciones de los enlaces iónicos relativamente débiles del alginato de

sodio que a menudo resultan en una menor eficiencia de encapsulación acompañada de

liberación explosiva del fármaco se abordaron mediante la fabricación de microesferas

de derivados de alginato con modificaciones metacriladas. A continuación, las

microesferas se reticularon con la ayuda de fotoiniciadores, radiación visible o

ultravioleta. Se utilizó doxorrubicina (fármaco modelo) para dilucidar la importancia

de este sistema basado en alginato como un nuevo portador de fármacos para el cáncer

de pulmón (Fenn, Miao, Scherrer y Oldinski, 2016). Además, Tabet et al. informaron

de la gelificación del ácido hialurónico mediada por albúmina que además resultó en la

formación de micro / nano partículas al interactuar con CoS. La rentabilidad del método

de gelificación iónica para la encapsulación de fármacos se informó como un aspecto

clave para clasificar estos biomateriales como un candidato potente para ser utilizado

como portador de fármacos para la matriz extracelular (MEC) (Tabet et al., 2019). En

el caso del método de gelificación ionotrópica, la interacción electrostática del

polianión o policatión con contraiones da como resultado las construcciones 3D

deseadas. Estas estructuras 3D están muy influenciadas por la existencia de diferentes

grupos funcionales en los polisacáridos.

Figura 12: Gelificación iónica (Sood et al., 2021)

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4.2. Acoplamiento químico de fármacos

Los conjugados de fármacos poliméricos pertenecen a la categoría de agentes

terapéuticos poliméricos y corresponden a un enfoque novedoso hacia sistemas eficientes

de administración de fármacos. Los conjugados de polímero-fármaco se colocan en la clase

de sistemas de administración de nanofármacos en los que se logra el acoplamiento químico

a través de enlaces covalentes entre polímeros hidrófilos y moléculas de fármaco a través

de enlazadores biológicamente activos; ofrecen las ventajas de una carga mejorada de

fármacos, un patrón de liberación sostenida y una estabilidad elevada en contraste con otros

nanoportadores con encapsulación de moléculas de fármacos mediante métodos físicos.

El paclitaxel (PTX) se usa ampliamente como fármaco contra el cáncer para muchos

tipos de tumores como el melanoma, el cáncer de mama y de ovario, respectivamente. PTX

también es una opción de fármaco para que muchos investigadores prueben la efectividad

de sus sistemas diseñados para la terapéutica del cáncer. Se diseñan micelas de profármaco

PTX utilizando NP de oligoglicerol dendrítico (dOG) HA-b-dendrítico (NP HA-dOG-PTX)

cargadas con DiR (tinte de fluorescencia) para mejorar el tratamiento y la focalización

eficiente del modelo de cáncer de mama humano xenoinjerto in vitro y in vivo niveles. In

vivo los estudios de biodistribución del sistema diseñado (4 h después del tratamiento)

presentaron una acumulación significativa de colorante DiR en los tejidos tumorales en

contraste con otros órganos, este estudio demostró un sistema multifuncional con

capacidades de direccionamiento tumoral. mediante PTX conjugado con HA para

aplicaciones teranósticas en cáncer. Además, nanopartículas de oro encapsulado cles

(AuNP) con un endrímero de poli (propilenimina) (G5.NH2) que a su vez se funcionalizó

con 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10- ácido tetraacético (DOTA) (quelante a base

de manganeso), isoth de fluoresceína iocianato (FITC) y HA ((𝐴𝑢0 )100𝐺5. 𝑁𝐻2 −FI-

 19

DOTA(Mn)-HA). El sistema sintetizado que encapsula AuNPs ofrece varias ventajas en

comparación con AuNPs solos, que incluye una solubilidad en agua superior, un

comportamiento estable en condiciones de pH variadas y citocompatibilidad. En este estudio

𝐺5. 𝑁𝐻2 el dendrímero actuó como agente terapéutico. El ligando HA se unió a la superficie

del dendrímero mediante acoplamiento EDC química. Las AuNP conjugadas con HA-

dendrímero tal como se prepararon se informaron por su utilidad como una sonda de

imagenología eficaz para la administración de fármacos y la obtención de imágenes de

células tumorales. Las nanopartículas sensibles a estímulos se han categorizado como

nanopartículas inteligentes debido a su inmensa perspectiva en varios campos, incluido su

potencial en aplicaciones biomédicas.

Las aplicaciones teranósticas de las nanopartículas también han ganado una inmensa

importancia en el campo de la quimioterapia tumoral. Las interacciones de los conjugados

de alginato-deferoxamina (AD) con los componentes de la sangre fueron estudiadas por Sun

et al. Aquí, el modelo de oxidación de hemoglobina se utiliza para investigar las propiedades

antioxidantes y las interacciones del sistema diseñado en los glóbulos rojos (RBC), el

complemento, el sistema de coagulación y las plaquetas, respectivamente. Se informa el

mecanismo subyacente de la propiedad antioxidante de los EA a través de la quelación del

hierro junto con la dependencia del peso molecular de la actividad antioxidante de los EA

(T. Sun et al., 2020). Las sondas teranósticas utilizadas en estos estudios presentaron amplias

aplicaciones y han demostrado ser muy eficaces con una eficacia significativa. Para apuntar

a la mayor concentración de glutatión citosólico (GSH) en las células tumorales, Se diseñan

nanopartículas de profármacos con respuesta redox de conjugados de xilano y curcumina

unidos por disulfuro (XylSSCur) mediante un proceso de dos pasos. El primer paso que

implicó la esterificación de la curcumina se realizó utilizando ácido 3,3′-ditiodipropiónico

para sintetizar la curcumina terminada en monocarboxilo (Cur-SS-COOH). En el segundo

 20

paso, se conjuga xilano con Cur-SS-COOH para obtener Xyl-SS-Cur. Por lo tanto, se formó

el sistema Xyl-SS-Cur autoensamblado en agua para formar NP núcleo-capa con xilano

formando la capa (hidrófilo) y curcumina constituyendo el núcleo (hidrófobo) (Figura 13).

Figura 13: Representación esquemática de la síntesis de NP de Xyl-SS-Cur/5-FUSA como

sistema de administración de fármacos ( Sauraj et al., 2020)

El fármaco anticanceroso 5-fluorouracilo se modificó a ácido 5-fluorouracilo-1-

esteárico lipófilo (5-FUSA) y se encapsuló en el núcleo de las NP Xyl-SS-Cur diseñadas

para formar NP Xyl-SSCur / 5-FUSA. El sistema diseñado muestra menos citotoxicidad

 21

contra las líneas celulares de cáncer colorrectal HT-29 y HCT-15 (origen humano). Se

informó la escisión del enlace disulfuro y la liberación del fármaco al encontrar niveles

mejorados de glutatión (GSH) en una célula cancerosa para las nanopartículas poliméricas

diseñadas. El sistema fabricado presenta la ventaja de ser un sistema de administración de

fármacos dual.

4.3. Orientación activa y pasiva

Para establecer un tratamiento efectivo para una condición patológica, el sitio de acción

de una molécula terapéutica es de primordial importancia. Generalmente, el lugar donde se

administra el fármaco está mayormente alejado del lugar específico donde se espera un

efecto terapéutico. Por lo que la actividad terapéutica de una dosis se ve muy comprometida

si la molécula administrada es incapaz de cruzar las barreras biológicas que diferencian el

sitio de administración del sitio de compromiso. La administración de fármacos dirigida y

los sistemas de administración de fármacos basados en nanopartículas (NDDS) ha sido

relevante en el logro de esta noción, ya que personifica el enfoque interdisciplinario al

involucrar campos tales como química, biología, ciencia de materiales, farmacéutica y

medicina clínica.

4.3.1. Orientación activa

Aunque los polisacáridos se exploran intensamente como un potente candidato

para sistemas de administración de fármacos y biomateriales regenerativos, no hay

tantos informes disponibles que mencionen el uso de polisacáridos como ligando de

direccionamiento activo, en la figura 14 (a). Los ejemplos para el direccionamiento

activo están relacionados principalmente con el ácido hialurónico (HA) y el sulfato de

condroitina (CoS). HA y CoS son los dos polisacáridos endógenos que existen en la

matriz extracelular (MEC) de una célula.

 22

Figura 14: Representaciones esquemáticas de estrategias de focalización activas y pasivas

(Sood et al., 2021)

Últimamente, se ha investigado la unión específica de HA y CoS a los receptores

CD44, que son muy expresivos en numerosos tipos de tumores. El HA se ha utilizado

como un sistema portador y también como un resto de direccionamiento para sistemas

de administración de fármacos dirigidos debido a sus propiedades como

biocompatibilidad, especificidad del objetivo y biodegradabilidad. El patrón de

modificación sin complicaciones y la especificidad hacia la unión con CD44 y los

receptores para la motilidad mediada por HA (RHAMM) (sobreexpresado en la

superficie de las células cancerosas) son una ventaja adicional asociada con HA.

Aprovechando la capacidad de focalización activa de HA, permetil sintetizado -HA

(HApCD) adaptado a ciclodextrina (pCD) y PTX adaptado a porfirina (PorTaxol)

mediante el proceso de condensación de amida y reacciones de esterificación,

respectivamente. Se diseñó un complejo supramolecular entre HApCD y PorTaxol

explorando la sólida interacción huésped-huésped entre pCD y parte de porfirina. El

diseño ofrecía naturaleza anfifílica y capacidad de autoensamblaje para desarrollar

 23

nanopartículas (HATXP) con una capa de HA (hidrófila) para la focalización activa y

un núcleo (hidrófobo) de profármaco PorTaxol. Se propone el diseño de un sistema de

administración de fármacos dirigido tanto para tumores primarios como para lesiones

metastásicas mediante NDDS utilizando HA. Los nanogeles a base de HA que

encapsulan DOX se diseñaron para lograr un direccionamiento activo a través de los

receptores para la motilidad mediada por HA (RHAMM) que se sobreexpresan en las

células cancerosas. La eficacia de dirección de los nanogeles de HA se estudió a fondo

en tumores primarios y metastásicos y en células cancerosas. Se informó que los

nanogeles de HA tienen una absorción celular significativa mediada por RHAMM y

una administración de fármacos in vitro y in vivo nivel. El uso del sistema de

administración de fármacos dirigidos mediado por receptores amplía el horizonte de los

biomateriales basados en polisacáridos en el tratamiento eficaz del cáncer. También

estudiaron la especificidad de la glicoproteína de la superficie celular de HA a CD44.

en células de cáncer colorrectal (HT29). Se desarrolla nanopartículas de liposomas

modificados con HA que encapsulaban 5-fluorouracilo (5-FU-lipo-HA) con un

diámetro hidrodinámico de 144±77 nm. Las nanopartículas diseñadas mostraron muerte

celular cancerosa selectiva dependiente del tiempo en HT29, un CD44 que sobreexpresa

células cancerosas colorrectales. El análisis del ciclo celular y el ensayo de apoptosis

de 5- FU-lipo-HA indicaron una detención en la fase G0 / G1 del ciclo celular con

formación de colonias reducida según lo indicado por el ensayo de formación de

colonias. El estudio cuantitativo de reacción en cadena de la polimerasa con

transcripción inversa (RT-PCR) en el sistema diseñado reveló una reducción

significativa en los niveles de ARN mensajero oncogénico (ARNm) y micro ARN

(miARN) para el grupo tratado con 5-FU-lipo-HA con aumento del nivel de supresores

de tumores. El sulfato de condroitina (CoS), otro polisacárido que se usa con frecuencia
 24

para la focalización activa debido a su especificidad diana para unirse con CD44 y

también es un sustrato para las P-selectinas. Como ejemplo, para dilucidar la capacidad

de direccionamiento de CoS, Liu et al. fabricó nanopartículas de quitosano encapsulado

(CS) con 10-hidroxi camptotecina (HCPT) y nanopartículas de PLGA modificadas con

CoS (NP de HCPT / CoSCS-PLGA) para atacarlas células de cáncer de colon. El

estudio destacó la importancia de CoS como ligando de direccionamiento para el

tratamiento de tumores con CD44 sobreexpresado. Se aprovecha la especificidad diana

CD44 de CoS sintetizando nanogeles de CoS-metotrexato para mejorar el cociente de

solubilidad y la eficacia de administración de metotrexato en células de cáncer

colorrectal. Un NDDS programable basado en CoS fue diseñado por Zhang et al. para

aumentar y sensibilizar la quimioterapia a los cánceres resistentes a los medicamentos.

Las nanopartículas de núcleo-capa diseñadas consisten en polímero de CoS reticulado

como capa exterior y el núcleo hidrófobo que encapsula tanto los fármacos libres como

los profármacos ligados a CoS. Las nanopartículas diseñadas presentaron un método

eficaz para el direccionamiento de CD44 específico de tumores. El sistema de transporte

basado en CoS diseñado ofrecía una captación celular específica junto con una

liberación repentina de fármaco a nivel celular debido a la descomposición de la capa

externa de CS. Las moléculas de fármaco liberadas podrían inducir una citotoxicidad

rápida específica del tumor. Debido a la capacidad de direccionamiento de CD44, los

conjugados basados en CoS mostraron un papel alentador en la administración de

fármacos dirigidos y en muchas otras aplicaciones farmacéuticas.

4.3.2. Orientación pasiva

En un sistema biológico, los polisacáridos generalmente experimentan degradación

hidrolítica o enzimática resultante de subproductos no tóxicos (Szymańska y Winnicka,

 25

2015). Las estrategias para llevar a cabo el uso terapéutico haciendo uso de la

orientación pasiva u orientación natural dependen estrictamente del microambiente de

una condición patológica.

En el caso de una célula tumoral, la focalización pasiva es significativamente

contingente al efecto de Permeabilidad y Retención Mejoradas (EPR). En el efecto EPR

las nanopartículas con un tamaño en el rango de 500 nm pueden atravesar fácilmente

los vasos sanguíneos del tumor debido a los espacios intermitentes desarrollados en las

células endoteliales. Al respecto, Ayub et al. desarrolló cisteamina nanoesferas de

alginato de sodio (SA) a través del enfoque capa por capa (LbL) para administrar

paclitaxel a células de cáncer de colon.

La modificación de la superficie del diseño SA basado en nanoesferas se realizó

mediante capas de poli(clorhidrato de alilamina) (PAH) y sal sódica de poli(ácido 4-

estirenosulfónico-co-ácido maleico) (PSSCMA) aprovechando la estrategia LbL. De

esta manera, el efecto EPR podría ser explorado para apuntar pasivamente a las células

tumorales.

El ambiente ácido de las células tumorales en comparación con el normal inspiró a

muchos grupos de investigación a diseñar nanoportadores sensibles al pH para atacar el

microambiente tumoral. En este sentido, Zhang et al. informó de la fabricación de un

sistema biocompatible y sensible al pH a base de dextrano (Dex) para lograr una mejor

quimioterapia. El grupo informó un sistema polimérico de diseño personalizado que

consta de etileno metacrilato de glicol metil éter (EGMA), metacrilato de metil glicolato

(MGMA) y Dex. Polimerización de radicales por transferencia de átomos en un solo

paso (ATRP) se realizó para sintetizar el polímero Dex-P (EGMA-co-MGMA) (DPP).

La molécula de fármaco hidrofóbico, DOX, se injertó en el diseño Polímero DPP a

 26

través de un enlace hidrazona lábil a los ácidos que da como resultado un profármaco

(DOXDT) formación. Se informó que el profármaco DOXDT resultante forman

micelas estables en medio acuoso. El sistema desarrollado ofrecía una liberación

controlada del fármaco cuando se encontraba con el microambiente del tumor ácido con

penetración tumoral mejorada. También se destacó la compatibilidad sanguínea in vivo

significativa junto con la biodistribución para dilucidar la eficacia terapéutica mejorada

del sistema diseñado.

5. Biomateriales basados en polisacáridos para la ingeniería de tejidos

La ingeniería de tejidos implica la regeneración del tejido dañado o la reparación del

tejido defectuoso proporcionando un microambiente 3D adecuado para la unión, diferenciación

y proliferación celular. Para lograr el microambiente 3D requerido, se están desarrollando

andamios 3D basados en materiales que pueden imitar la matriz extracelular de origen natural

(MEC) y proporcionar un apoyo para el crecimiento celular deseado. En este sentido, se han

utilizado individualmente o en combinación numerosos polímeros sintéticos y naturales para

fabricar andamios de ingeniería de tejidos. Los polímeros naturales como los polisacáridos

brindan una ventaja adicional de ser biocompatibles e imitar a la MEC. Por lo tanto, los

biomateriales basados en polisacáridos han surgido como una plataforma capaz para

aplicaciones de ingeniería de tejidos.

El quitosano se clasifica como polisacáridos policatiónicos naturales y puede mostrar

interacciones electrostáticas que se pueden utilizar para la producción de biomateriales. Puede

ser una interesante elección de material en un entorno fisiológico, donde la mayoría de las

biomoléculas son aniónicas. Esto, en combinación con propiedades como su biodegradabilidad,

biocompatibilidad, adhesión celular y las propiedades antimicrobianas marcan el éxito del

quitosano como material potente en el campo de la ingeniería de tejidos.

 27

Los hidrogeles hechos a base de quitosano se prepararon mediante reticulación

simultánea de CS y reducción de GO. Los hidrogeles muestran altas propiedades mecánicas y

porosidad debido a su densidad y orientación microestructuras. Estos hidrogeles ternarios

biocompatibles podrían utilizarse para aplicaciones de ingeniería ósea. El quitosano se ha

utilizado además en combinación con otros polisacáridos para diseñar armazones para la

regeneración de tejidos.

El dextrano (Dex) es otro polisacárido que se ha utilizado con frecuencia para el

desarrollo de andamios de ingeniería de tejidos. Los andamios a base de dextrano son

predominantemente usados para aplicaciones de ingeniería de tejidos debido a la resistencia

mostrada por el dextrano contra la absorción de proteínas y adhesión celular. Para utilizar un

andamio para aplicaciones de ingeniería de tejidos blandos, el tamaño de los poros, la porosidad

y la interconectividad son parámetros clave. Existen los hidrogeles inyectables preparados a

base de Dex mediante clic de azida-yne química. Este inyectable de hidrogel mostró una baja

toxicidad en los condrocitos y, por lo tanto, podría usarse para la regeneración del tejido

cartilaginoso. Por otro lado, también se encuentran los hidrogeles Dex fabricados que contienen

nanopartículas de vitrocerámica bioactiva, estos tienen una estructura microporosa y muestran

una mayor proliferación de osteoblastos humanos junto con actividad de fosfatasa alcalina.

También se ha utilizado Dex en combinación con otros polímeros naturales y sintéticos. Por

ejemplo, El-Meliegy y col. andamio compuesto de dextrano / quitosano fabricado con

nanohidroxiapatita.
 28

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