lOMoARcPSD|15924991

Soluciones amortiguadoras

Bioquímica* (Universidad de Panamá)

StuDocu no está patrocinado ni avalado por ningún colegio o universidad.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)
 lOMoARcPSD|15924991

Universidad De Panamá
Facultad De Ciencias Naturales Exactas Y Tecnologías
Escuela De Biología
Departamento de Bioquímica

Prof. Alexander Arosemena

Laboratorio #1: Soluciones amortiguadoras

Estudiante: Kamy Rodríguez EC-46-15095 Grupo: 2-5 L2 (lunes) QM
217

Fecha de entrega: 20 de septiembre del 2020

Introducción

Las soluciones buffer o amortiguadoras son aquellas soluciones cuya concentración de

hidrogeniones varía muy poco al añadirles ácidos o bases fuertes. Se preparan
disolviendo un ácido débil (o base débil) y una sal de dicho ácido débil (o base débil).

Se basa en el Principio de Le Châtelier, en el equilibrio químico. El ácido o base

utilizado, siendo débil, se disocia parcialmente en la solución, por lo que hay una
proporción según su constante de equilibrio tanto de producto como de reactivo.

Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una disolución frente a la adición de

cantidades relativamente pequeñas de ácidos o bases fuertes. Su función es muy
importante en los sistemas químicos y biológicos y los procesos que requieran un cierto
valor de pH que no sea modificable con facilidad. Ya sea para el funcionamiento
adecuado de las enzimas en el sistema digestivo o los glóbulos blancos en el torrente
sanguíneo.

En esta experiencia trabajamos realizando los cálculos necesarios para preparar

soluciones amortiguadoras, y, además, evaluar la capacidad amortiguadora (cantidad de
ácido o base fuerte que puede neutralizar) de las mismas.

Procedimiento

1. Realizar los cálculos utilizados para preparar 50 ml de solución amortiguadora

de acetato de pH 5.2; 4.8 y 3.7 las cuales deben tener una concentración 0.1 M si
el pKa es 4.74 a partir de las soluciones 0,1 M de HC2H3O2 y NaC2H3O2.
(Actividad 1).
2. Preparación de soluciones diluidas a partir de las soluciones amortiguadoras en
el paso anterior; para ello se rotulan 6 vasos químicos: dos con la letra A; 2 con
la letra B y dos con la letra C. A la letra A se agrega 20 ml de la solución
original; a las letras B se le agrega 5 ml de la solución original y 20 ml de agua y

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

la letra C se le agrega 5 ml de la diluida B y 20 ml de agua y calcular la

concentración de la solución en cada dilución con la fórmula V 1 xC 1 =V 2 x C
2 (Actividad 2).
3. Un juego de soluciones A, B y C es titulada con HCl 0.1 M y otro juego de A, B
y C se titulan con NaOH 0.1 M. Con los volúmenes consumidos por cada una de
estas soluciones se determina la capacidad amortiguadora (β) (Actividad 3).

Resultados

Actividad 1

Calcular los ml de soluciones de ácido acético 0.1 M y acetato de sodio 0.1M utilizados
para preparar 50 ml de solución amortiguadora de acetato de pH 5.2-4.8-3.7 las cuales
deben tener una concentración 0.1 M si el pKa es 4,74 a partir de las soluciones 0,1 M
de HC2H3O2 y NaC2H3O2.

pH = pKa + log([Ac-]/[HAc])

 pH 5.2

pH = pKa + log([Ac-]/[HAc])
5.2 = 4.74 + log([Ac-]/[HAc])
5.2 - 4.74 = + log([Ac-]/[HAc])
0.46 = + log([Ac-]/[HAc])
Antilog * 10 (0.46) = [Ac-]/[HAc]
2.88/1 = [Ac-]/[HAc]
Moles totales = 2.88 mol Ac + 1.0 mol HAc = 3.88 mol Amort
 (Ac-) = (2.88 mol Ac- / 3.88 mol Amort) * 50 ml = 37.1 mL (Ac-)
 (HAc-) = (1.00 mol HAc- / 3.88 mol Amort) * 50 ml = 12.9 mL (HAc-)

37.1 mL (Ac-) + 12.9 mL (HAc) = 50 mL Amort

 pH 4.8

pH = pKa + log([Ac-]/[HAc])
4.8 = 4.74 + log([Ac-]/[HAc])
4.8 - 4.74 = + log([Ac-]/[HAc])
0.06 = + log([Ac-]/[HAc])
Antilog * 10 (0.06) = [Ac-]/[HAc]
1.14/1 = [Ac-]/[HAc]

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

Moles totales = 1.14 mol Ac + 1.0 mol HAc = 2.14 mol Amort
 (Ac-) = (1.14 mol Ac- / 2.14 mol Amort) * 50 ml = 26.6 mL (Ac-)
 (HAc-) = (1.00 mol HAc- / 2.14 mol Amort) * 50 ml = 23.4 mL (HAc-)

26.6 mL (Ac-) + 23.4 mL (HAc) = 50 mL Amort

 pH 3.7

pH = pKa + log([Ac-]/[HAc])
3.7 = 4.74 + log([Ac-]/[HAc])
3.7 - 4.74 = + log([Ac-]/[HAc])
-1.04 = + log([Ac-]/[HAc])
Antilog * 10 (-1.04) = [Ac-]/[HAc]
0.09/1 = [Ac-]/[HAc]
Moles totales = 0.09 mol Ac + 1.0 mol HAc = 1.09 mol Amort
 (Ac-) = (0.09 mol Ac- / 1.09 mol Amort) * 50 ml = 4.1 mL (Ac-)
 (HAc-) = (1.00 mol HAc- / 1.09 mol Amort) * 50 ml = 45.9 mL (HAc-)

4,1 mL (Ac-) + 45.9 mL (HAc) = 50 mL Amort

Actividad 2 y 3

Preparación de soluciones diluidas a partir de las soluciones preparadas en el paso

anterior y calcular la concentración de la solución en la dilución.

[]=C
V1 x C1 =V2 x C2
β = ml HCl o NaOH x M HCl o NaOH / ΔpH x 0.020 L Sol. Amort.

Ph 5.2
M mL Sol. H2 [ ] de sln mL mL β HCl β NaOH ΔpH
O HCL NaOH (mmo (mmol o
lo mol)
mol)
A 20 de A 0 0.1 M 18 mL 4 mL 75 16.67 1.20

B 5 de A 20 0.02 M 10 mL 1.5 mL 36.70 5.50 1.09

C 5 de B 20 0.004 M 2 mL 0.1 mL 7.84 0.39 1.02

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

Cálculos:
A
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 20 mL / 20 mL
C2 = 0.1M

 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 18 mL HCl x 0.1 M / 1.20 x 0.020 L Sol. Amort.

β HCl = 75 mmol o mol.

β NaOH = 4 mL NaOH x 0.1 M / 1.20 x 0.020 L Sol. Amort.

β HCl = 16.67 mmol o mol.

B
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.02 M

 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 10 mL HCl x 0.1 M / 1.09 x 0.025 L Sol. Amort.

β HCl = 36.70 mmol o mol.
β NaOH = 1.5 mL NaOH x 0.1 M / 1.09 x 0.025 L Sol. Amort.
β HCl = 5.50 mmol o mol.

C
 Concentración [ ]
C2 = 0.02 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.004 M

 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 2 mL HCl x 0.1 M / 1.02 x 0.025 L Sol. Amort.

β HCl = 7.84 mmol o mol.
β NaOH = 0.1 mL NaOH x 0.1 M / 1.02 x 0.025 L Sol. Amort.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

β HCl = 0.39 mmol o mol.

Ph 4.8
M mL Sol. H2O [ ] de mL mL β HCl β ΔpH
sln HCL NaOH (mmol NaOH
o mol) (mmol
o mol)
A 20 de A 0 0.1 M 14 mL 7.5 mL 62.5 33.48 1.12
B 5 de A 20 0.02 M 7 mL 3.7 mL 25.93 13.70 1.08
C 5 de B 20 1 mL 0.7 mL 4 2.8 1.00

Cálculos:
A
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 20 mL / 20 mL
C2 =0.1 M
 Capacidad amortiguadora (β).
β HCl = 14 mL HCl x 0.1 M / 1.12 x 0.020 L Sol. Amort.
β HCl = 62.5 mmol o mol.
β NaOH = 7.5 mL NaOH x 0.1 M / 1.12 x 0.020 L Sol. Amort.
β HCl = 33.48 mmol o mol.

B
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.02 M
 Capacidad amortiguadora (β)
β HCl = 7 mL HCl x 0.1 M / 1.08 x 0.025 L Sol. Amort.
β HCl = 25.93 mmol o mol.
β HCl = 3.7 mL HCl x 0.1 M / 1.08 x 0.025 L Sol. Amort.
β HCl = 13.70 mmol o mol.

C
 Concentración [ ]

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

C2 = 0.02 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.004 M
 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 1 mL HCl x 0.1 M / 1.00 x 0.025 L Sol. Amort.

β HCl = 4 mmol o mol.
β NaOH = 0.7 mL NaOH x 0.1 M / 1.00 x 0.025 L Sol. Amort.
β HCl = 2.8 mmol o mol.

Ph 3.7
M mL Sol. H2O [ ] de mL mL β HCl β ΔpH
sln HCL NaOH (mmol NaOH
o mol) (mmol
o mol)
A 20 de A 0 0.1 M 8 mL 15 mL 33.33 62.5 1.20
B 5 de A 20 0.02 M 3 mL 6.5 mL 10.71 23.21 1.12
C 5 de B 20 0.004 M 0.2 mL 1.3 mL 0.8 5.2 1.00

Cálculos:

A
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 20 mL / 20 mL
C2 =0.1 M
 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 8 mL HCl x 0.1 M / 1.20 x 0.020 L Sol. Amort.

β HCl = 33.33 mmol o mol.
β NaOH = 15 mL NaOH x 0.1 M / 1.20 x 0.020 L Sol. Amort.
β HCl = 62.5 mmol o mol.

B
 Concentración [ ]
C2 = 0.1 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.02 M

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 3 mL HCl x 0.1 M / 1.12 x 0.025 L Sol. Amort.

β HCl = 10.71 mmol o mol.
β NaOH = 6.5 mL NaOH x 0.1 M / 1.12 x 0.025 L Sol. Amort.
β HCl = 23.21 mmol o mol.

C
 Concentración [ ]
C2 = 0.02 M x 5 mL / 25 mL
C2 =0.004 M
 Capacidad amortiguadora (β)

β HCl = 0.2 mL HCl x 0.1 M / 1.00 x 0.025 L Sol. Amort.

β HCl = 0.8 mmol o mol.
β NaOH = 1.3 mL NaOH x 0.1 M / 1.00 x 0.025 L Sol. Amort.
β NaOH = 5.2 mmol o mol.

Actividad 4

Analiza los resultados obtenidos en la preparación de las soluciones y en el cálculo de

Capacidad Amortiguadora

El pKa es el valor pH en el que una especie química aceptarán o donar un protón. Al

preparar la solución con un pH de 5.2 se requirió mayor cantidad de la especie
desprotonada pues cuanto menor sea el pKa, más fuerte es el ácido y mayor es su
capacidad de donar protones. La solución con un pH de 3.7 pasa todo lo contrario, se
requirió mayor cantidad de la especie protonada, es más básico y mayor su capacidad de
recibir protones.

En el caso de la solución con un pH de 4.8 es bastante peculiar, los valores de la pKa y

pH están muy cerca entre sí, lo que significa que hay casi igual concentración de la
especie protonada y desprotonada, se requieren cantidades similares de HC2H3O2 y
NaC2H3O2 para preparar este buffer.

Lo confirmamos al realizar los cálculos de capacidad amortiguadora y ver

numéricamente la cantidad de especies necesaria para preparar dicho buffer. A medida
que la concentración disminuye también lo hace la capacidad amortiguadora.

Actividad 5

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

Resolver los Siguientes Problemas:

1. ¿Qué masa de NaC2H3O2 debe disolverse en 0,300 L de HC2H3O2 0,25 M

para obtener una disolución de pH = 5,09? ka = 1,82 x10 -5

Datos:

[Ac-] = NaC2H3O2 pH = 5,09 Concentración = 0,25 M

[HAc] = HC2H3O2 V = 0,300 L
Ka = 1,82 x10 -5

pKa = -log Ka
pKa = -log 1,82 x10 -5
pKa = 4.74

pH = pKa + log([Ac-]/[HAc])

5,9 = 4,74 + log([Ac-]/[HAc])

5.9 - 4.74 = + log([Ac-]/[HAc])
1,16 = + log([Ac-]/[HAc])
Antilog * 10 (1,16) = [Ac-]/[HAc]
14,45/1 = [Ac-]/[HAc]
[Ac-] = 14,45 [HAc]

[Ac-] + [HAc] = 0,25 M

14,45 [HAc] + [HAc] = 0,25 M
15,45 [HAc] = 0,25 M
[HAc] = 0,25 M / 15,45
[HAc] = 0,0162 M

[Ac-] = 0,25 M – 0,0162 M = 0,2338 M

g [Ac-] = PM * M * V (L)
g [Ac-] = 82,04 g/mol * 0,2338 mol/L * 0,300 L
g [Ac-] = 5,75 g NaC2H3O2

2. Se titulan 15 mL una disolución amortiguadora que tiene un pH inicial de 4.32.

Luego de titular con HCl 0.015 M, este consume un volumen de 6.5 ml y su pH
descendió a 3.28. Calcule su capacidad amortiguadora.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

Datos:

V sol. = 15 mL = 0.015 L
mL HCl = 6.5 mL
M HCl = 0.015 M
ΔpH = 4.32 - 3.28 = 1.04

β = ml HCl x M HCl / ΔpH x 0.020 L Sol. Amort.

β = 6.5 mL x 0.015 M / 1. 04 x 0.015 L Sol. Amort.
β = 6.25

Cuestionario (Actividad 6)

1. ¿Cuál amortiguador resultó ser más eficiente y resistente a la adición de ácido y

base? ¿Qué puede deducir de estos resultados?

Las soluciones preparadas con un pH de 4.8, el pH es muy cercano a la pKa, y cuando

el pH es igual al pKa del ácido, hay igual cantidad de las formas protonada y
desprotonada de la molécula, se necesita mayor cantidad de mmol o mol de ácido o base
para aumentar o disminuir una unidad de pH lo que se traduce en una mayor capacidad
amortiguadora.

2. ¿Cómo afecta la adición de agua al pH de los tres amortiguadores preparados en

el paso 1? Explique brevemente

No afecta, las soluciones tampones se pueden diluir sin que cambie la concentración. La
concentración depende solamente de ka y del cociente de las concentraciones del ácido
y del anión. Cuando se diluye la solución tampón, cambia la concentración de del ácido
y del anión, pero el cociente permanece constante, no cambia. Razón por la cual al
agregar agua destilada al buffer no cambiaba significativamente de pH.

3. ¿Por qué la disolución de NaCI no resiste la adición del mismo volumen de

NaOH que el amortiguador de acetato?

Esto se debe a que el NaCl no tiene propiedades amortiguadoras es decir que no se

resiste a cambios de pH como sucede en una solución amortiguadora la cual tiene esta
propiedad además de tener una capacidad amortiguadora en donde el número de moles
de iones hidronio y iones hidroxilo que se requieren para producir un cambio de PH de
una unidad.

4. Mencione cuatro usos específicos de las disoluciones amortiguadoras en un

campo de interés de su carrera. Explique brevemente.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

 El comportamiento del agua de mar. El pH del agua de mar es de

aproximadamente 8,2.
El pH es básico, debido a la acción en conjunto del CO2 atmosférico y de los seres
vivos que se encuentran en el interior del mar desempeñando un papel importante,
permitiendo que numerosas especies evolucionen y desarrollen un caparazón calcáreo.
La fabricación de este caparazón se basa en segregar iones calcio, que, junto al
carbonato presente en el agua, genera el carbonato de calcio que es un sólido bastante
insoluble, cuya función es la de recubrir gradualmente las partes blandas del organismo.

El consumo de carbonato, para formar carbonato de calcio, trae como consecuencia el

desplazamiento del pH hacia valores más básicos, así como una presencia mucho mayor
de bicarbonato disuelto en el agua, lo que permite mantener el pH en el rango

Entonces, el control de pH se debe a que las propias sustancias que se encuentran

disueltas en el agua de mar limitan el cambio en la H+ después de la adición de HCl.

 Amortiguador proteína.
Las proteínas intracelulares con sus grupos ionizables con diferentes valores de pK
contribuyen de forma importante en el mantenimiento del pH, mediante el intercambio
de H+ con iones unidos a proteínas que se desplazan al medio extracelular para
mantener la neutralidad eléctrica.

Por ejemplo, el sistema amortiguador hemoglobina, es un tampón fisiológico muy

eficiente debido tanto al cambio de pK que experimenta al pasar de la forma oxidada a
la reducida, como a la gran abundancia de esta proteína en la sangre (15% del volumen
total sanguíneo) y al hecho de que actúa dentro de los hematíes. Las propiedades
amortiguadoras de la hemoglobina desempeñan un papel fundamental en el transporte
sanguíneo del CO2 tisular hasta su eliminación pulmonar. En el interior del hematíe, por
acción de la Anhidrasa Carbónica, el CO2 se va a convertir en ácido carbónico que se
disocia dando un H+, que rápidamente será tamponado por la hemoglobina, y
bicarbonato que saldrá fuera del hematíe en intercambio con iones cloro.

 Amortiguador fosfato.
El tampón fosfato está compuesto por el hidrógeno fosfato (HPO42-) y el dihidrógeno
fosfato (H2PO4-). Ejerce su acción fundamentalmente a nivel intracelular, ya que es
aquí donde existe una mayor concentración de fosfatos y el pH es más próximo a su pK.
Interviene junto a las proteínas celulares de manera importante en la amortiguación de
los ácidos fijos

Actúa en el plasma y el líquido intersticial. Este tampón tiene un pKa de 6,8, el cual está
mucho más cerca del pH plasmático. Esto significaría que este tampón tendría que ser
más útil que el anterior, pero no es así ya que se encuentra en concentraciones menores
en sangre y la eliminación del fosfato es mucho más lenta, por vía renal.

 Amortiguador carbónico/bicarbonato.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

El tampón bicarbonato está compuesto por ácido carbónico (H2CO3) y bicarbonato

(HCO3-) y el valor de su pKa es de 6,1. Es el tampón más importante de la sangre (pH
= 7,4), representa el 75 % de la capacidad buffer total de la sangre. También está
presente en el líquido intersticial.

Poco potente desde el punto de vista químico, (pK =6.1). Es el tampón más importante
en la homeostasis del pH porque:

- Está presente en todos los medios tanto intracelulares como extracelulares. En el

medio extracelular la concentración de bicarbonato es elevada (24 mEq).
- Es un sistema abierto: la concentración de cada uno de los dos elementos que lo
componen son regulables: el CO2 a nivel pulmonar y el bicarbonato a nivel renal.

5. Mediante un diagrama con reacciones y basándose en el equilibrio químico,

explique cómo se comporta un amortiguador cuando se le adiciona un ácido y
una base fuerte.

A partir del ácido débil ácido acético (HC2H3O2) y su sal, acetato de sodio
(NaC2H3O2).
Cuando se agrega una pequeña cantidad de ácido, se combina con el ión acetato,
C2H3O2. En este caso el equilibrio se desplaza en la dirección de los reactivos: ácido
acético y agua. Habrá una pequeña reducción de la cantidad del [C2H3O2] y un
pequeño aumento del [HC2H3O2].
HC2H3O2(ac) + H2O(l) — H3O+(ac) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la izquierda

Si se agrega una pequeña cantidad de base a esta disolución tampón, se neutraliza por el
ácido acético, HC2H3O2, que desplaza el equilibrio en la dirección de los productos:
ión acetato y agua. La concentración del ácido [HC2H3O2] disminuye un poco, y la del
[C2H3O2-] aumenta un poco.
HC2H3O2(ac) + OH-(ac) — H2O(l) + C2H3O2-(ac)
El equilibrio se desplaza a la derecha

HC2H3O2 C2H3O2
HC2H3O2 C2H3O2
C2H3O2 HC2H3O2

Conclusiones

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)

 lOMoARcPSD|15924991

Su principal característica es que mantiene estable el pH de una disolución ante la

adición de cierta cantidad de ácido o base fuerte. El objeto de su empleo, en técnicas de
laboratorio, es precisamente impedir o amortiguar las variaciones de pH y, por eso
sirven para mantener constante el pH.

Una disolución reguladora o amortiguadora, tiene la capacidad de resistir los cambios

de pH cuando se agregan pequeñas cantidades de ácidos y bases. Este debe contener una
concentración relativamente grande de ácido para reaccionar con los OH- que se le
añadan; y también debe contener una concentración semejante de la base semejante para
que reaccione con la cantidad de iones H+ que se le añada.

Cuando la sustancia que se agrega a la solución amortiguadora es agua destilada el

cambio de PH va a ser mínimo. La relación entre la cantidad de ácido débil y su base
conjugada es próxima a uno la capacidad amortiguadora alcanza un punto máximo.

Los tampones fisiológicos son la primera línea de defensa frente a los cambios de pH de
los líquidos corporales. El pH de los medios biológicos es una constante fundamental
para el mantenimiento de los procesos vitales. La acción enzimática y las
transformaciones químicas de las células se realizan dentro de unos estrictos márgenes
de pH.

Descargado por Doily Alban (albanarmuelles0128@gmail.com)