METODOLOGÍA

Se efectuó la charla sobre el uso y la importancia de los hongos antagonistas como controladores
biológicos de fitopatógenos, los diferentes mecanismos o modos de acción de estos hongos como
por ejemplo microparasitismo, competencia por sustrato, antibiosis, desactivación de enzimas del
patógeno y resistencia inducida. Uno de los hongos antagonistas más utilizados es Trichoderma
spp, el cual es uno de los principales controladores biológicos de una serie de variedades de
Fusarium.

1. Primera actividad: Observación de xanthomonas spp y pseudomona spp.

Se procedió a tomar los platos Petri utilizados en el laboratorio para el cultivo de
bacterias. Se colocaron los platos en el transluminador en el cual se pudo observar la
diferencia de coloración de las pseudomonas. Se tomó fotografía evidenciando dicha
diferenciación.
2. Segunda Actividad: Inoculación de bacterias fitopatógenas creando halos con discos
impregnados de antibiótico.
a. Para iniciar dicha actividad, debemos tomar una pipeta Pasteur que se nos fue
proporcionada como material de laboratorio.
b. Tomamos igualmente un tubo eppendorf en el cual encontramos bacterias del género
xanthomonas spp.
c. Extraemos dichas bacterias con la pipeta para depositarlas en el centro del plato Petri
que contiene medio de cultivo agar nutritivo.
d. Haciendo uso de un hisopo esterilizado previamente, esparcimos las bacterias por
todo el medio agar nutritivo en el plato Petri.
e. Con una pinza esterilizada, se debe tomar un disco proporcionado como material de
laboratorio, y sumergirlo en Neomicina por un lapso de 15 segundos.
f. Se repite el proceso con los otros dos antibióticos los cuales son Ampicilina y
Tetraciclina formando un triangulo con los discos en el plato Petri.
g. Se debe rotular donde se encuentra cada laboratorio para luego ver el efecto de cada
uno de ellos sobre las bacterias en este caso las xanthomonas spp.
3. Tercera actividad: Inoculación de hongos fitopatógenos frente a hongos antagonistas.
a. Para realizar esta actividad, se nos proporciono un hongo antagonista o benéfico el
cual es Trichoderma spp. Haciendo uso de una pinza y un bisturí estériles, se debe
 hacer un corte y extracción de un pequeño fragmento de el hongo antagonista y
colocarlo en un plato Petri al lado derecho el cual contiene agar nutritivo.
b. Se esterilizan las herramientas y se debe repetir el procedimiento de extracción, pero
ahora del hongo que nosotros inoculamos en el laboratorio anterior y colocarlo al lado
izquierdo del plato Petri donde previamente colocamos el Trichoderma spp.
c. Procedemos a sellar el plato Petri con parafina y esperamos que ambos hongos se
reproduzcan y ver el efecto antagónico del hongo benéfico hacia el hongo
fitopatógeno.
 METODOLOGÍA

Se impartió la charla previa a la actividad la cual consistía principalmente en la discusión de

características que diferencian las bacterias, su medio de dispersión, condiciones ideales para que
estas bacterias se establezcan y se reproduzcan y los principales síntomas para su identificación y
sus principales daños a cultivos de importancia.

1. Primera actividad: Inoculación de frutos de camote y papa con bacteria Fitopatógena.

a. Se nos brindó una hoja de papel filtro esterilizado, el cual debemos colocar al fondo
de la tapa del plato Petri.
b. Debemos agregar agua destilada estéril al papel filtro de manera que se humedezca
todo el papel filtro.
c. Ahora procedemos a cortar un pedazo de papa y un pedazo de camote de
aproximadamente 5 mm de grosor y colocarlos sobre el papel filtro ya humedecido.
d. Se debe hacer un corte superficial en forma de X sobre las rodajas de papa y camote.
e. Posteriormente, se coloca el inoculo haciendo uso de una pipeta Pasteur con la cual
tomamos una gota de la bacteria Xanthomona spp, el cual es nuestro inoculo para esta
actividad, y depositamos una gota de inoculo en cada rodaja.
f. Se debe sellar correctamente el plato Petri con las rodajas ya inoculadas y esperar la
reproducción de la bacteria.
2. Segunda actividad: Inoculación de material vegetal (hojas de tomate) empleando hongos
Fitopatógenos.
a. Aforar uno de los beaker hasta el 75% con solución de hipoclorito al 3%.
b. Sumergir la hoja de tomate que se nos facilitó para la práctica durante 3 minutos en la
solución.
c. El otro beaker se debe llenar al mismo nivel (75%) con agua destilada, la cual se
utiliza luego que la hoja se sumerge en el hipoclorito al 3%.
d. Se debe sacar la hoja haciendo uso de una pinza estéril del primer beaker y sumergir
la hoja en agua destilada por 2 minutos.
e. Cuando pasen los 2 minutos, se debe extraer la hoja del segundo beaker con la pinza
esterilizada y colocarla sobre el papel estéril para extraerle la humedad.
f. Una vez la hoja esté seca, se toma con las pinzas nuevamente esterilizadas y se debe
colocar en el centro del plato Petri procurando que esté con el haz hacia arriba.
g. Haciendo uso de un bisturí esterilizado, se debe cortar y extraer 4 trozos del hongo
fitopatógeno y colocarlos en forma de cuadrado sobre la hoja de tomate.
h. Se procede a sellar el plato Petri con parafina y esperar que el hongo se reproduzca
sobre la hoja.