Fundamentos de la Vida Laboratorio

Práctica No. 3
Extracción de DNA o ADN

Integrantes Matrícula
1 ______________________________________ ______________
2 ______________________________________ ______________
3 ______________________________________ ______________
4 ______________________________________ ______________
5 ______________________________________ ______________

INTRODUCCIÓN:

Existen dos tipos generales de ácidos nucleicos: el DNA o ADN “Ácido Desoxirribonucleico” y
el ARN “Ácido Ribonucleico”.

El ADN en las células eucariotas,

constituye el material genético y sólo se
encuentra en el núcleo, las mitocondrias
y los cloroplastos. Dicho material
genético se transfiere de una célula a
otra durante la división celular,
previamente compactándose para
formar los cromosomas (cromátidas).

Los cromosomas de las células

eucariotas presentes en las fresas, los
plátanos, los gallos y en los seres
humanos; están formados por genes que
a su vez químicamente, están
constituidos por la molécula de ADN
(Figura 1).

Para la extracción de ADN de las células, es necesario eliminar estructuras celulares como la
pared celular, la membrana plasmática y la membrana nuclear, para dejar libre a dicha
1
 Fundamentos de la Vida Laboratorio

molécula y posteriormente aislarla mediante un proceso de precipitación. Asimismo, es

importante proteger al ADN de otros factores físicos o químicos que podrían degradarlo.
Al aislar el ADN, éste podrá ser observado como fibras blanquecinas. En la actualidad, los
científicos pueden separar un gen de un ser vivo e insertarlo en otro. Por ejemplo, es posible
aislar genes humanos para luego insertarlos en el genoma bacterial; por la técnica del ADN
recombinante para producir insulina humana (proteína que regula el azúcar en la sangre).

Además de esta información, es importante que revisar la actividad realizada sobre el tema
de Ácidos Nucleicos y los recursos de Living Class, indicador por tu profesor(a).

OBJETIVOS:
1. Conocer la técnica aplicada en el laboratorio para extraer ADN de células eucariotas
vegetales y animales.
2. Extraer ADN de células eucariotas vegetales y animales.

INSTRUMENTOS, MATERIALES Y REACTIVOS

1 Vaso de precipitado de 100 mL 1 Bolsa ziploc

1 Agitador de vidrio
1 Tubo de ensayo de 6 mL
1 Trozo de gasa (10 cm2)
1 Fresa mediana o un plátano
pequeño no maduro.
1 muestra de 2 a 3 mL de saliva con
células de la mejilla (de una misma
persona).
1 Palillo
1 Tijera
Alcohol etílico de 70°G.L
Solución extractora de ADN “A” (1.2 mL
de agua destilada, 1.5 g de sal y 5 mL
de detergente líquido sin color).
Solución extractora de ADN “B” A (1.2
mL de agua destilada, 1.5 g de sal y 5
mL de detergente líquido sin color y 1 g
de ablandador para carnes con
proteasas).

PROCEDIMIENTOS (NOTA: tomar fotos de los resultados de cada procedimiento)

Para la extracción de ADN de células vegetales:

2
 Fundamentos de la Vida Laboratorio

1. Pesar 3 g de fresa o de plátano no maduro.

2. Colocar el fruto dentro de una bolsa ziploc y aplastarlo con los dedos cuidando de no
romper la bolsa.

3. Agregar a la bolsa 3 mL de solución extractora de ADN “A” luego empujar todo el aire
extra y volver a cerrar la bolsa.

4. Mezclar homogéneamente el fruto machacado con la solución extractora de ADN “A”

evitando hacer espuma.

5. Hacer un corte en una esquina de la bolsa ziploc para vaciar la mezcla a un vaso de
precipitado, previamente colocar una gasa para filtrar o colar la mezcla (para retener
los restos del fruto).

6. Tirar las gasas con los restos del fruto.

7. Agregar poco a poco 3 mL de alcohol etílico frío, haciéndolo resbalar por las paredes
del vaso de precipitado (el cual deben mantener a 45° de inclinación).

8. Observar el efecto que provoca el alcohol etílico con el filtrado del fruto. Dejar reposar
por 2 minutos.

9. Identificar cómo se forman y flotan fibras blanquecinas, quedando en la parte superior.

Éstas fibras corresponden al ADN extraído.

10. Con un palillo separar las fibras y registrar los resultados con un par de fotos.

Para la extracción de ADN de células animales:

1. En un tubo de ensayo agregar aproximadamente 2 a 3 mL de saliva.
2. Agregar 2 a 3 mL de solución extractora de ADN “B”.
3. Agregar poco a poco 2 a 3 mL de alcohol etílico frío, resbalando por las paredes del tubo
de ensayo. Manteniéndolo en una posición de 45°. Dejar reposar por 3 a 5 minutos.
4. Identificar cómo se forman y flotan las fibras blanquecinas de ADN, registrar los resultados
con un par de fotos.

3
 Fundamentos de la Vida Laboratorio

RESULTADOS
Anexar fotos (las suficientes como evidencias de sus resultados) y escribir pie de
figura a cada imagen, describiendo sus resultados.

DISCUSIONES
1. ¿Qué realizaste durante la práctica para liberar el ADN de los organelos que lo contenían?
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________

2. ¿Qué realizaste durante la práctica para separar o aislar las fibras de ADN?
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________

3. ¿Qué factores físicos o químicos podrían afectar al ADN dentro y fuera de las células?
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________