UNIVERSIDAD NACIONAL DE CATAMARCA - FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

TRABAJO PRACTICO N°3: ESTERILIZACION EN AUTOCLAVE

CARRERA: PROFESORADO EN BIOLOGIA

MATERIA: BIOLOGIA DE LOS MICROORGANISMOS
ALUMNOS:
• HEREDIA, BRAIAN M.U.N°: 2616
• LUQUE GOMEZ, LUCAS HERNAN M.U.N°: 3045
• ORTEGA, SOFIA NAHIR M.U.N°: 3054
• REARTE, CANDELA AGUSTINA M.U.N°: 3232
a

2022
Introducción
Un autoclave consiste en una cámara sellada en la que se introduce vapor de agua a alta
presión y temperatura que actúa como agente esterilizador. En el interior de la cámara, el
vapor de agua alcanza temperaturas superiores a 100 ºC, generalmente entre 121 y 140
ºC. Esta temperatura se mantiene entre 15 y 20 minutos. Para que el vapor de agua pueda
estar a más de 100 ºC, es necesario que la presión en el interior del autoclave sea superior
a la presión atmosférica normal.
La mayoría de microorganismos mueren a partir a de 80 ºC pero otros agentes biológicos,
como priones o esporas, requieren una mayor temperatura y tiempo para su destrucción e
inactivación. Una temperatura de las más utilizadas en autoclaves es 121 ºC durante 15 –
20 minutos, en función del tamaño de la carga y el contenido a esterilizar. Otra temperatura
común son 134 ºC durante 3 minutos.
TIPOS DE AUTOCLAVE

• AUTOCLAVES CLASE N: sirven exclusivamente para la esterilización de productos

sólidos es decir artículos no porosos, sin ranuras ni fisuras u otras características
que puedan obstaculizar la penetración del vapor en el material. Los instrumentos
esterilizados no se pueden transportar ni almacenar, debe ser instrumental de uso
inmediato.
• AUTOCLAVES CLASE B: con este tipo de autoclave se puede esterilizar cualquier
tipo de carga: materiales porosos, materiales embolsados, textiles y cuerpos huecos
como instrumental, turbinas y cánulas. Es el autoclave más utilizado hoy en día ya
que garantiza una máxima versatilidad y se adapta a los contextos más diversos.
Tiene un formato pequeño, pero a pesar de eso asegura un rendimiento de calidad
con la más alta eficacia y los mayores estándares de seguridad.
• AUTOCLAVES CLASE S: se trata de la clase intermedia entre los autoclaves clase
N y autoclaves clase B. Son esterilizadores que tienen ciclos definidos por el
fabricante, con programas para material sólido empaquetado (por ej instrumental
médico), material poroso. Son equipos que habitualmente incorporan bomba de
vacío.
TIPOS DE CARGA
Los tipos de carga que se pueden introducir en un autoclave para esterilizar son los
siguientes:

• -Carga sólida: son artículos no porosos, sin ranuras ni fisuras u otras características
que puedan obstaculizar la penetración del vapor en el material, ejemplos de carga
sólida son pinzas, porta agujas, espejo.
• -Carga porosa: material que puede absorber los fluidos, ejemplos de carga porosa
serían batas de cirugía y gasas.
• -Carga hueca de tipo A: longitud/diámetro >5mm, ejemplo de carga hueca de tipo A
sería una turbina.
• -Carga hueca de tipo B: longitud/diámetro <5mm, un ejemplo de carga hueca de tipo
B sería una cánula para cirugía.
 PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACIÓN DE MICROORGANISMOS EN
AUTOCLAVE
Materiales
• 2 Matraces (uno de 100ml y otro de 250ml)
• 3 Tubos de ensayos
• 1 Caja de Petri
• 3 Porta objetos
• Embudo
• Pipeta
• Algodón
• Papel aluminio
• Agar
• Balanza micrométrica
• Autoclave

Procedimiento
1. Lo primero que se realizó fue limpiar los materiales, excepto el algodón y el papel
aluminio.
2. Estos materiales fueron colocados en el autoclave con agua destilada hasta cubrir
la bandeja sin cubrir los materiales, se enciente el autoclave y se esterilizan durante
20 minutos.
3. Mientras controlábamos los minutos, con el algodón y el papel aluminio hicimos
tapones para los matraces y los tubos de ensayo, se utilizaron estos materiales
porque si tapamos los materiales con tapones de plástico o si utilizamos un trapo,
estos pueden transmitir el calor y por ende el calor de vapor podría entrar dentro de
los materiales cuando se encuentran en el autoclave.
4. A continuación se sacan mediante regla de 3 simples los gramos de agar que se
utilizaran para diluir y preparar la muestra para esterilizar; a partir de una
concentración de 1g de agar en 100ml de agua destilada, sacamos la cantidad de
agua para diluir 0,25g, 0,15g y 0,05g de agar, los resultados fueron 25ml, 15ml y
5ml de agua destilada respectivamente.
5. Para pesar los gramos necesarios en la balanza micrométrica, primero colocamos
el porta objetos en la balanza, taramos y cuidadosamente pesamos los gramos.
6. Teniendo los gramos pesados procedimos a colocarlos en los matraces, rotulamos,
colocamos la cantidad respectiva de agua destilada y centrifugamos manualmente
hasta lograr una mezcla homogénea.
7. Posteriormente colocamos los matraces con las diluciones en el autoclave, esta vez
durante 25 minutos para esterilizar las muestras.
8. Rotulamos los tubos de ensayo, y con la ayuda del embudo colocamos las diluciones
ya esterilizadas en los tubos, dejamos quietos los tubos para reposar las muestras.
9. Una vez que reposo la muestra durante unos minutos, la están listas para guardar
o utilizar, en caso de guardarlas se deben guardar en la heladera, y en caso de que
se quiera analizar la muestra se debe colocar en la cámara de flujo laminar por un
tiempo antes de usar.