“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de

independencia”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA
PERUANA

FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIA

ESCUELA DE BROMATOLOGÍA Y NUTRICIÓN HUMANA

CUESTIONARIO PRACTICA N°8

Tema: Pruebas de diferenciación bioquímica

Asignatura: Microbiología General

Docente: Blga. Jessy Patricia Vásquez Chumbe

Estudiantes:
 Graicht Murayari Claudia
 Fasabi Chavez Jeslin
 Grandez Vaquero Nohelia

Fecha de entrega: 4/05/2021

IQUITOS – PERÚ
2021
 TEMA: Pruebas de diferenciación bioquímica

OBJETIVOS:
- conocer las actividades metabólicas y enzimáticas de los microorganismos
- Identificar los productos finales de los procesos metabólicos
- Conocer los cambios que se producen, las reacciones químicas que ocurren, las
enzimas que intervienen, entre otros.

CUESTIONARIO:

1. ¿Cuáles son las rutas bioquímicas de obtención de energía de las

bacterias aerobias, anaerobias, fermentadoras y anaerobias estrictas?
¿Cuál de estas rutas es más eficiente y por qué?
Respuesta
Bacterias aerobias: el aceptor final de hidrógeno (electrones) es el oxígeno molecular
O2, ciclo de Krebs.
Bacterias respiradoras anaerobias: desnitrificación, reducción de sulfatos,
acetogénesis, reducción de hierro férrico.
Fermentadoras: los microorganismos utilizan glucosa como fuente de carbono y
energía, al entrar a la célula la glucosa se oxida en forma incompleta.
Bacterias anaerobias estrictas: realizan la fermentación porque carecen de la dotación
enzimática precisa.
Cada ruta es eficiente ya que eso depende de que bacteria va a realizar su ruta
bioquímica.

2. Describa brevemente las actividades enzimáticas que se identificaron

en cada uno de los medios de cultivo utilizados en la práctica. ¿Cuál es
la reacción bioquímica que cataliza cada una? ¿Cuáles son las enzimas
que intervienen?
Respuesta

 Indol: Mediante esta prueba se detecta la liberación de indol en un cultivo

bacteriano. Dicha liberación se debe a la degradación del aminoácido
triptófano mediante el enzima triptofanasa.
Enzimas: Tiosulfato reductasa, cisteína desulfurilasa y tiptofanasa.
 Catalasa. La catalasa es un enzima presente en la mayoría de los
microorganismos que poseen citocromos. El principal objetivo de esta prueba
es separar Micrococacceae (positiva) de Streptococcus spp. y Enterococcus
spp. (negativa).
 Oxidasa. Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas.
La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema
citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo el cual es reducido por
el oxígeno molecular produciéndose agua, o peróxido de hidrógeno según la
especie.
Enzima: Oxidasa
 Sustratos: Tiosulfato o grupos –SH de la cisteína y triptófano.
Enzimas: Tiosulfato reductasa, cisteína desulfurilasa y tiptofanasa.
Producto: H2S e Indol.
 Ureasa. Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea
formando dos moléculas de amoniaco por acción del enzima ureasa. Esta
actividad enzimática es característica de todas las especies de Proteus y se usa
sobre todo para diferenciar este género de otras enterobacterias que dan
negativo o positivo retardado.
Enzima: Ureasa.
Producto: Amoníaco. Indicador: Rojo de fenol.

3. ¿Explique por qué los tubos de fermentación de azúcares deben

evaluarse a las 24 y 48 horas? ¿Qué resultados se observarían en los
tubos en el caso de que un microorganismo metabolizara
oxidativamente la glucosa?
Respuesta
Es importante respetar el tiempo de lectura, porque si el caso 1 se lee antes de las
24hs. se va a interpretar como ac/ac y no lo es. Si el 2 se lee después de las 24hs, los
microorganismos ya se quedan sin hidratos de carbono entonces empieza a utilizar las
peptonas y se alcaliniza en el medio.

El resultado de la oxidación de la glucosa se vería afectado por el aumento del pH ya

que se oxida de carbohidrato a acido.

4. ¿Explique por qué se busca la presencia de precipitados de sulfuros en

el fondo del tubo de TSI y no en la superficie?
Respuesta

Porque así se puede ver el cambio que aran al precipitarse el gas, no pueden estar en
la superficie ya que como se precipita el gas romperá el agar y precipitara por arriba,
es por eso que al hacer estas pruebas los sulfuros siempre van al fondo del tubo. 5

BIBLIOGRAFÍA
1 Articulo inecol. Web: https://www.inecol.mx/inecol/index.php/es/2017-06-26-16-
35-48/17-ciencia-hoy/700-como-respiran-las-bacterias
Articulo: Bacterias anaerobias: procesos que realizan y contribuyen a la sostenibilidad
de la vida en el planeta. Web:
http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v13n24/v13n24a06.pdf
2 - Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología. Pag: 8-
9.web:
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiol
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- Pruebas Bioquímicas. Pag: 18, 16, 23. Web:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimicas_17461.PDF
3 Pruebas bioquímicas de identificación. Autora: Bioq. María de los Ángeles Sosa
Pruebas de Identificación rápidas. Web:
https://www.coursehero.com/file/75566886/pruebas-bioqu%C3%ADmicasppt/

4 GUIA DE MICROBIOLOGIA GENERAL: Autoras, María de los Ángeles Aquiahuati

Ramos- María de Lourdes Pérez Chávela: pag.57. web:

https://uamenlinea.uam.mx/materiales/licenciatura/diversos/
AQUIAHUATL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_practicas_de.pdf