FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

SEMESTRE 2021 - II

CURSO DE BIOLOGÍA
PRÁCTICA 10
MITOSIS
I. INTRODUCCIÓN
a) Ciclo Celular: Se denomina a los eventos repetitivos que permite el crecimiento y división celular. Consta de dos
periodos: la interfase y la división celular (mitosis) que es con la que termina el ciclo, generalmente complementa
con la división citoplasmática o citocinesis.
b) Interfase: Periodo en el que las células realiza la mayor actividad metabólica antes de entrar en división. La interfase
consta de tres periodos: G1 o periodo pre-replicativo, S donde ocurre la síntesis o replicación del DNA y G2 o pos
replicativo y finalmente la división celular. Los periodos G1 y G2 están regulados por genes y enzimas (quinasas)
dependientes de ciclina (Cdk) y cinasas.
c) Mitosis o cariocinesis consiste en el reparto equitativo del material nuclear entre dos células hijas; se define como
un proceso exacto para controlar la transmisión de los rasgos de la herencia de un núcleo a otro durante la división
celular. Es el mecanismo que genera nuevas células idénticas a la célula madre y reemplaza las células dañadas en
los organismos multicelulares.
El término mitosis se refiere a la secuencia de cambios que ocurren en el núcleo antes de la división
citoplasmática y se divide en las siguientes fases: Profase, metafase, anafase y telofase, estas fases pueden durar
desde unos minutos hasta varios días.
Fases de Mitosis (fig. 1):
- Profase: Es la primera fase, la cromatina inicia su condensación observándose fibra engrosadas. Al microscopio
óptico, inicia la desaparición del nucléolo y la carioteca, se forma el huso mitótico o acromático.
- Metafase: La cromatina llega a su máxima condensación, formándose los cromosomas. Los centrosomas llegan a
los polos y queda constituido el huso acromático (formado por microtúbulos), mientras que los cromosomas se
ubican en el plano ecuatorial.
- Anafase: Las fibras del huso acromático se acortan, los centrómeros se dividen, se separan las cromátides y migran
a los polos.
- Telofase: Los cromosomas se van descondensando al llegar a los polos, la carioteca se reorganiza y se forman los
nuevos núcleos.

II. COMPETENCIAS
- Determina el índice mitótico e interfásico.
- Identifica los procesos del ciclo celular Interfase y mitosis.
- Diferencia las fases de la mitosis vegetal y compara con las fases de las láminas fijas preparadas.
- Aplica la técnica de coloración.

III. FUNDAMENTO
Para la observar la interfase y las fases de la mitosis es necesario teñir los núcleos con un colorante
básico, como la orceína acética. Esta tinción se basa en la afinidad que tiene el colorante por la carga
negativa del grupo fosfato de la molécula del DNA y al teñir la cromatina de color morado y es posible
hacer el seguimiento de los cambios fisiológicos de la cromatina de condensación y descondensación
hasta culminar el ciclo celular.
IV. MATERIALES Y MÉTODOS
a) PREPARACIÓN PREVIA DE LOS BULBOS DE CEBOLLA
- Retirar las raíces y fibras secas de la base de un bulbo de cebolla fresca de 5 a 7 cm de diámetro.
- Insertar tres palillos en el bulbo, de manera que se pueda suspender en un pequeño vaso o recipiente
con agua. La base del bulbo debe estar sumergida en la superficie del agua. Las raíces empezarán a
crecer en dos o tres días.
- Observar diariamente hasta que las puntas de las nuevas raíces crezcan unos dos centímetros de largo.
Escoger las puntas de las raíces que presenta la región embrionaria de crecimiento rápido (meristemos).

b) TÉCNICAS DE LABORATORIO
- Corte 1 cm de la punta de una raíz. Con una hoja de afeitar
- Coloque sobre una placa petri que contenga suficiente orceína acética.
- Sujete el petri con una pinza de madera y caliente cuidadosamente el petri de 3 a 5 minutos, evitando
que hierva y evite inhalar los olores.
- Corte la punta de la raíz y coloque en un portaobjetos con una gota de orceína fría.
- Cubra la preparación con una laminilla y con la punta de un estilete presione en círculos suavemente
hasta que la muestra quede bien extendida.
- Con un papel absorbente con cuidado elimine el colorante en exceso.
- Selle la laminilla con esmalte transparente.
- Examine la preparación coloreada, con el objetivo de 10X.
- Localice las células que están sus estructuras teñidas.
- Cambie al objetivo al de 40X aumento, reconozca las fases y grafique.

c) INDICES DE DIVISIÓN CELULAR

- Índice Interfásico: Se obtiene del cociente de células que se encuentran en interfase entre el número de
células que se encuentran en ciclo, expresado en porcentaje.
Índice Interfásico (II) = Número de células en interfase X 100
N° de células en ciclo celular
- Índice mitótico (IM): Se define como índice mitótico en los diferentes estados morfológicos de la mitosis
como la relación entre el número de células por unidad de espacio observado un aumento 40X que están
en mitosis durante un determinado periodo de tiempo. El cociente se utiliza principalmente como
estimación de la velocidad del crecimiento tisular. Se determina sumando los diferentes estados de fase
de mitosis multiplicados por 100 y divididos entre el número total de células meristemáticas que se
encuentran en ciclo celular. Se obtiene utilizando la ecuación de (PIRES et al., 2001). El cociente se utiliza
principalmente como estimación de la velocidad del crecimiento, renovación tisular y determinación de
algún efecto que cause alteración en su normal crecimiento por ejemplo en estado cancerígeno, o algún
efecto citotóxico.
Índice mitótico (IM) = Número de células en mitosis X 100
N° de células en Ciclo Celular
- Índice de Fase: Es el número de células que se encuentra en cada fase de la mitosis entre el número
total de células en mitosis.
Índice de Fase (IF) = Número de células en fase mitótica X 100
N° Total de célula en mitosis
I. RESULTADOS
- Ubique en un campo visual una población de células que se encuentren en ciclo en el anexo II.

- Contabilice las células que se encuentran en cada fase mitótica e interfásica.

- Aplique las ecuaciones determine el índice interfásico, índices de fases (profase, metafase, anafase,
telofase) e índice mitótico según (López-Sáez, 1965).

NÚMERO DE CÉLULAS EN INTERFASE: 49 %

NÚMERO DE CÉLULAS EN MITOSIS: 56 %

● NÚMERO DE CÉLULAS EN CICLO CELULAR: 105

Índice mitótico (IM) = Número de células en mitosis X 100

N° de células en Ciclo Celular

56x 100 = 53.3333333 %

105

Índice Interfásico (II) = Número de células en interfase X 100

N° de células en ciclo celular
 49x 100 = 46.6666667 %
105

Índice de Fase (IF) = Número de células en fase mitótica X 100

N° Total de célula en mitosis

PROFASE=15x100/56= 26.7857143 %
METAFASE=6x100/56=10.7142857 %
ANAFASE= 12x100/56= 21.4285714 %
TELOFASE= 23x100/56= 41.0714286 %

- Construir un cariotipo con los cromosomas humanos del anexo III.

- IMAGEN B:

Síndrome de Turner: sólo

hay un cromosoma X

45, X cromosomas

Es una malformación que afecta a las mujeres. Características:

- IMAGEN C:

Síndrome de Cri-du-Chat

CARACTERÍSTICAS:

- Microcefalia
- Problemas del
lenguaje
- Llanto muy agudo
- Barbilla pequeña
- Oclusión dental
defectuoso
-IMAGEN D
Síndrome de Klinefelter

Malformación que afecta a los varones. Se trata de una alteración numérica

de gonosomas en exceso, el cariotipo tiene 47 cromosomas en vez de 46.
Características:

- Talla alta
- No termina su desarrollo sexual
- Ginecomastia (crecimiento de mamas)
- Aspecto femenino