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Grupo 1 Separación de pigmentos fotosintesis

Biología Celular (Universidad Nacional Mayor de San Marcos)

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GUÍA DE PRÁCTICA VIRTUAL N° 06

SEPARACIÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

N. DE GRUPO: GRUPO 1
NOMBRES Y APELLIDOS
1.BASTIDAS CAYCHO, FRANÇOIS SALVADOR
2.DOMINGUEZ HUAMANCHUMO, ALESSANDRO
SEBASTIAN
3.LÓPEZ ZEGARRA, OSCAR SEGUNDO ARMANDO
4.OBREGÓN FLORES, JULIO JEISON
5.PRUDENCIO CRISÓSTOMO, GREYSON JHUNIOR
6.RUFASTO LIZARBE, JOSÉ LUIS
I. INTRODUCCIÓN

Los cloroplastos, organelas de las plantas y de los protistas semejantes a plantas, donde se lleva a
cabo la fotosíntesis, contienen varios tipos de moléculas de pigmento que absorben diferentes
longitudes de onda de luz (Kochnar & Gujral 2020). La clorofila a, la molécula del pigmento clave
captadora de luz en los cloroplastos, absorbe fuertemente las luces violeta, azul y roja, pero refleja la
verde, dando así el color verde a las hojas. Los cloroplastos también contienen otras moléculas,
denominadas colectivamente pigmentos accesorios, que absorben longitudes de onda adicionales de
energía luminosa y la transfieren a la clorofila a. Los pigmentos accesorios incluyen clorofila b, una
forma ligeramente diferente de la clorofila a que refleja la luz de color verde-amarillo y absorbe algunas
de las longitudes de onda de las luces azul y rojo-naranja que la clorofila a omite. Los carotenoides son
pigmentos accesorios que se encuentran en todos los cloroplastos; absorben las luces verde y azul y,
por lo tanto, aparecen principalmente en colores amarillo o anaranjado (Audersik et al. 2016).

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

La cromatografía en papel una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo que permite analizar
muestras en pequeñas cantidades, principalmente en la separación e identificación de compuestos
polares, como azúcares, antibióticos solubles en agua, aminoácidos, pigmentos e iones metálicos
(Moura & Rodeiro 2008, Sgariglia et al. 2010). Los pigmentos fotosintéticos son insolubles en el agua,
pero sí lo son en solventes orgánicos como el alcohol etílico y acetona. La separación mediante
cromatografía sobre papel transcurre a través de un mecanismo de adsorción, donde se establecen
una serie de equilibrios de adsorción-desorción que dependen de la polaridad de cada pigmento y del
tipo de fuerzas intermoleculares que puedan establecer con la estructura del papel y la del disolvente
(Torossi 2007).

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III. COMPETENCIAS

● Aplica la técnica de cromatografía en papel para separar pigmentos fotosintéticos.

● Diferencia los pigmentos fotosintéticos de una planta.

IV. MATERIALES

a) 10 a 15 hojas de otra planta de hojas verde oscuro y que se puedan triturar fácilmente (pueden
ser espinacas),
b) 10 a 15 hojas rojas y que se puedan triturar fácilmente,
c) 10 a 15 hojas amarillas o diferentes al verde y rojo.
d) Alcohol etanol 96°
e) Mortero o Tazón de loza
f) Canto rodado mediano
g) Vasos de vidrio o plástico
h) Embudo
i) Lápiz
j) Papel filtro (una hoja) (en caso no consigan una hoja de papel bond (90gr ó 75gr), papel toalla
grueso),

V. PROCEDIMIENTO

a) Disponga las hojas de las plantas en envases separados

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b) Quite las nervaduras de las hojas y colóquelas en un tazón por separado.

c) Cortas las hojas de las plantas en pedazos muy pequeños en el tazón de cerámica o mortero
cerámico (no madera)
d) Una vez bien picadas las hojas, añada al envase el alcohol poco a poco y simultáneamente
vaya triturando con un canto rodado (piedra redonda), continúe echando el alcohol, hasta un
máximo de 50ml hasta obtener un líquido de color verde intenso o del color que se obtenga de
las hojas diferentes.

e) Con el empleo de un embudo y papel filtro, vierta el contenido filtrado en un vaso.

f) Distribuya la solución obtenida en otros vasos y coloque en cada uno un pedazo de papel filtro,
de unos 10 x 4 cm (o de la misma longitud que el vaso), sujetando un extremo del papel a un
lápiz, mientras que el otro extremo debe estar en contacto con la solución.

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g) Espere hasta que el solvente haya viajado hasta el extremo superior del papel antes de retirar
el cromatograma del vaso. (observe las diferentes formas de resultados)

h) Repita el mismo procedimiento con las hojas de la planta diferente a la espinaca.

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VI. RESULTADOS (a desarrollar en formato de tarea)

a) Registre el tiempo de avance de cada banda de los resultados, mediante dibujo o fotografía
cuántas bandas o zonas de distintos colores se pueden distinguir en las hojas de las dos
plantas empleadas.

/ 30 min / 20 min / 10 min / 5 min /

b) Forma de presentar los resultados (indicar nombre científico de la planta, nombre común,
medidas de las bandas en cm y min

/ Carotenos ( 5cm) / Xanofilas(3cm) / Clorofila A(2cm) / Clorofila B (1

cm) /

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c) Interpretar los resultados comparando con el patrón

—CAROTENOS

— XANOFITOS

— CLOROFILA B

— CLOROFILA A

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VII. DISCUSIÓN (a desarrollar en formato de tarea)

a) Señale qué pigmento representa cada color.

● CLOROFILA A: VERDE CLARO
● CLOROFILA B: VERDE OSCURO
● XANOFITOS: VERDE AMARILLENTO
● CAROTENOS: MARRÓN CLARO
b) Explique las razones de los colores para cada pigmento.
Estos colores se dan ya que al momento de echar el alcohol y el tiempo de espera
para que se dé la separación comienzan a mostrarse los colores de los diferentes
pigmentos.
c) Tomando los resultados de las hojas no verdes, discuta las razones de las diferencias
encontradas.
Se dan estas diferencias debido a que en el caso de las hojas verdes estas presentan
unos pigmentos como el Caroteno mientras que en las hojas de otro color encuentras
la pigmentación de las antocianinas
d) Utilice la bibliografía para realizar la discusión

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Audesirk, T., G. Audesirk & B.E. Byers. 2016. Biology_Life on Earth with Physiology. Pearson.
Kochnar, S.L. & S.K. Gujral. 2020. Plant Physiology. Cambridge University Press.
Manrique, E. 2003. Los pigmentos fotosintéticos, algo más que la captación de luz para la fotosíntesis.
Ecosistemas 12(1): 1-11. Link
Merhan, O. 2017. The biochemistry and antioxidant properties of carotenoids.
http://dx.doi.org/10.5772/67592
Moura, N. & C. Rodeiro. 2008. Análise de pigmentos de pimentões por cromatografia em papel.
Química nova na escola 29; 4 pp. Link
Sgariglia, M., J. Soberón, D. Sampietro y M. Vattuone. 2010. Cromatografía: conceptos y aplicaciones.
Revista Arakuku 2(1): 1–6. Link
Torossi, F. 2007: Una experiencia sencilla con fundamentos complejos: la separación de pigmentos
fotosintéticos mediante cromatografía sobre papel. An. Quím. 2007, 103(4), 45−51.

INFORME DE PRÁCTICAS
COMPETENCIAS
● Comprende el fundamento de la separación de moléculas por cromatografía
● Aplica la técnica de cromatografía en papel para separar pigmentos fotosintéticos.
● Diferencia los pigmentos fotosintéticos de una planta.

I. INTRODUCCIÓN (1 puntos)
En el siguiente informe mostrado se explica todo el proceso que se realizó
para llegar a esta separación y todas las conclusiones a la que se llegó sobre
la cromatografía así como datos de importancia con respecto a este tema.

II. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA: (5 Puntos)

Descripción de la metodología y procedimiento empleado en los experimentos

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● Recolección de las hojas

● Quitar las hojas de sus ramas
● Poner las hojas en el mortero
● Machacar las hojas en el mortero
● Echarle alcohol a la mezcla que ha salido de las hojas
● Remover la mezcla y luego echarlo en un recipiente con ayuda del
embudo
● Poner una hoja de papel amarrado con un lápiz en la parte superior del
recipiente
● Esperar unos minutos a que comience a subir la mezcla para que se de
la separación de pigmentos

III. RESULTADOS (5 Puntos)

Presente los resultados obtenidos en tablas, fotos, y/o videos, de acuerdo a las indicaciones
dadas en la guía de práctica

IV. DISCUSIÓN (5 Puntos)

a) Explique las diferencias entre distancias y tiempos de la cromatografía de las plantas
La separación comenzó a partir del minuto 5 que tiene una distancia de 1cm de
Clorofila A, luego de 10 minutos apareció la Clorofila B con una distancia de 2cm,
luego de 20 minutos apareció la Xantofila con 3cm de distancia y al final el Caroteno
con 5cm de distancia en el minuto 30.
b) Señale qué pigmento representa cada extracto de hojas.
● CLOROFILA A: VERDE CLARO
● CLOROFILA B: VERDE OSCURO
● XANTOFILA: VERDE AMARILLENTO
● CAROTENOS: MARRÓN CLARO
c) Explique las razones de los colores para cada pigmento.
Estos colores se dan ya que al momento de echar el alcohol y el tiempo de espera
para que se dé la separación comienzan a mostrarse los colores de los diferentes
pigmentos.
d) Tomando los resultados de las hojas verdes y no verdes, discuta las razones de las
diferencias encontradas.
Esto se debe a que en la parte final de la hoja se encuentra los carotenos de color
marrón y en los demás la Clorofila A, B y Xantofila que viene a hacer diferentes tonos
de verde.
e) Sustente las razones por las cuales se emplea alcohol en esta práctica.
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Los pigmentos fotosintéticos pueden extraerse de los tejidos gracias a su solubilidad

en disolventes orgánicos como éter y benceno.La eliminación se lleva a cabo por
saponificación del grupo éster de las clorofilas, lo que las hace insolubles en este
disolvente.

V. CUESTIONARIO (3 Puntos)
a) Explique otros métodos que se emplean para separar pigmentos fotosintéticos.
Cromatografía Líquida y Bombardeo con átomos rápidos son otros métodos que se
usan.
b) Menciona entre 5 a 10 plantas (indicando nombre común, nombre científico,
importancia) comestibles (entre verduras y frutas diferentes a los mostrados en
la clase) que contengan carotenoides (carotenos y xantófilas).
● Zanahoria (Daucus carota): a - y b -caroteno
● Naranja (Citrus sinensis): Violaxantina, b -criptoxantina, luteína,
zeaxantina
● Mango (Mangifera indica) :Violaxantina, b -caroteno
● Tomate (Lycopersicum esculentum): Licopeno
● Pimiento rojo (Capsicum annuum): Capsantina, capsorrubina
● Melocotón (Prunus persica): b -criptoxantina, luteína
● Papaya (Carica papaya): b -criptoxantina, b -caroteno
● Guayaba (Psidium guajava): Licopeno, b -caroteno
● Ciruela (Spondias lutea): b -criptoxantina

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (1 punto)

-http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004-06222004000200003
-https://www.abc.com.py/edicion-impresa/suplementos/escolar/separaciondepigm
entos-fotosinteticos-1693885.html

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