TEMA 3

1.Los equipos de laboratorio.

Equipos básicos, se encuentras en todos laboratorios y cuyo uso es mas general.

Equipos específicos, indispensables para determinadas pruebas.

1.1.El agitador magnetico.

Aparato electrónico que sirve para facilitar la dispersión de solicitudes o mezclas poco
viscosas.

Consta de un motor que gira en un rango entre 100 a 1.200 rpm. Lleva un dispositivo
electrónico que controla el movimiento giratorio y la velocidad.

Esta provisto de unos campos magnéticos adicionales, controlan la bala o barra magnética
que se sumerge en la mezcal que hay que girar. Accesorios la placa calefactora y el mando de
la temperatura, mientras agita la mezcla, la caliente y favorezca su dispersión.

FUNCIONAMIENTO

 Colocar sobre el plato el vaso precipitado.

 Itroducir eliman de teflon para gitar el liquido.
 Cubrir el vaso con papel parafinado o de aluminio.
 Conectar a la red electrica y encender ON.
 Ajustar la velocidad progresivamente hasta alcanzar un velocidad que permita una
agitacion optima que no sea muy grusca.
 Finalizada la agitacion, en posicion 0.
 Apagar el interruptor y dejarlo en OFF.
 Sacar el iman de teflon cn ayuda de ora barra o varilla imantada colocada fuera del
recipiente.

PRECAUSIONES

 El vaso de precipitado que centrado.

 Regular la velocidad de mas bajo aumentando progresivamente.
 El liquido no debe rebosar el recipiente (se puede tapar).
1.2.El agitador de tubos.

Vibrador vórtice o agitador tipo vórtex, sirve para agitar mezclas contenidas en tubos de
ensayo, Eppendorf, etc., de modo rápido.

Carcasa metálica de plástico, parte frontal lleva: Interruptor y cabezal donde se coloca el tubo
de ensayo para agitarlo. También puede llevar varios cabezales, un mando regulador de
velocidad y botón que selecciona el modo de trabajo: continuo o manual.

FUNCIONAMIENTO

 Conectarlo a la red y encenderlo.

 Seleccionar modo de empleo: continuo y de agitación ininterrumpido o bien manual, la
agitación se activa al ejercer una ligera presión.
 Colocar el tubo.
 Regular la velocidad por la mas baja e ir aumentándola.
  Finalizada la agitación, posición 0.
 Apagar el interruptor OFF.

PRECAUSIONES

 Tapar con un tapón o cubrir con papel parafilm.

1.3.Baño termostatizado.

Permite calentar una sustancia a la temperatura que se desee. El baño maría es el mas
utilizado, también ha baños termostizados de aceite y arena (alcanzan temperaturas
superiores a los 100 C.

Deposito donde se coloca el agua destilada, debe ser resistente a las oxidaciones, y una rejilla
para colocar las muestras.

Su función es mantener las muestras a una temperatura determinada gracias a un dispositivo

de recirculación del agua que hace que la temperatura se mantenga uniforme en cualquier
punto del deposito.

FUNCIONAMIENTO

 Llenar de agua destilada hasta la señal indicada por el fabricante.

 Encender con el interruptor.
 Al seleccionar la temperatura requerida, se enciende el indicador luminoso.
 Cuando se apaga, se habrá alcanzado la temperatura seleccionada y el baño estará
preparado para poner la muestras.

PRECAUSIONES

 No sobrepasar el nivel del agua.

 Seleccionar la temperatura adecuada.

1.4.El destilador.

Separa dos liquidos miscibles o las impurezas solidas miscibles en un liquido.

Recipiente que resiste altas temperaturas: un sistema de calor, puede ser externo (baño
termostatizado o mechero) o interno (resistencia electrónica); un refrigerante con un
serpentín en su interior , donde circula agua fría para condensar el vapor y unas conexiones,
son tubos acodados y esmerilados que encajan perfectamente con la boca del recipiente
donde se coloca la muestra a destilar, el refrigentante, y con el recipiente de recogida del
liquido destilado.

FUNCIONAMIENTO

 Colocar en el matraz de reacción la mezcla que queremos separar.

 Unir el matraz con el refrigerante por la parte superior y el refrigerante al recipiente
de recogida del destilador en la parte interior.
 Poner la placa calefactora bajo el matraz y enchufarla para calentar la mezcla.
  Poner en marcha el refrigerante de modo que entre agua por la parte inferior y salga
por la goma de arriba.
 Colocar el foco de calor bajo el matraz y encenderlo para calentar la mezcla.

En la primera etapa se calienta la mezcla liquida hasta que los componentes de menor punto
de ebullición pasan a estado de vapor. En la segunda etapa, el vapor se condensa (con ayuda
del refrigerante) pasando al estado liquido y separando la mezcla inicial.

TIPOS

 El sistema de destilación simple, cuando existe una diferencia muy grande entre los
puntos de ebullición de los componentes de la mezcla o cuando queremos purificar un
liquido separándolo de su impurezas solidas.
 El sistema de destilación fraccionada, cuando hay que separar una mezcla homogénea
formada por líquidos que tienen puntos de ebullición muy próximos entre si.
 El sistema de destilación al vacío reduce la presión durante el proceso de destilación
para que los puntos de ebullición de liquidas sean menores y evita que se alteren
sustancias termolábiles.

PRECAUSIONES

 La fuente de calor debe suministrar al matraz un color uniforme.

 Para regular la ebullición se pueden poner perlas de vidrio con la mezcla.
 Poner un termómetro e la parte superior del matraz para ver la temperatura del vapor
que va a pasar al refrigerante.
 El matraz debe encajar perfectamente con el refrigerante, y este con el recipiente de
recogida.
 Conviene dejar el refrigerante encendido unos 20 minutos después de apagar al foco
de calor para terminar de condensar los vapores.

-El termómetro situado en la parte superior del matraz nos indica la temperatura de los
vapores que asciende y pasan al refrigerante.

1.5. La estufa.

Para proporcionar ambiente aislado a temperaturas mas o menos altas: desde las 30 C hasta
temperaturas muy elevadas.

Cámara de paredes metálicas en cuyo interior hay unas bandejas sobre las que se coloca el
material. Debe llevar un interruptor, un regulador de temperatura, un termómetro (para
indicar la temperatura de interior) y un temporizador (para indicar el tiempo).

FUNCIONAMIENTO

 Introducir los materiales y cerrar la puerta.

 Conectar a la red eléctrica, encender ON y seleccionar la temperatura. Cuando el
termómetro indica que se ha alcanzado la temperatura seleccionda,se contabiliza el
tiempo que debe durar el proceso.
 Al fnalizar, OFF y desenchufar.

TIPOS
  Estufa de secado: Esterilización o secado de materiales termorresistentes (hasta 500
C) mas habitual se realiza a 180 C durante dos horas. También se denomina horno de
secado o Poupinel.
 Estufa de cultivo o bacteriológica: Se utiliza enmicrobiologia papa el cultivo y
crecimiento de microorganismos. Alcanza como máximo 80 C, mas habituales entre los
37 y 40 C.
 Estufa tipo mufla: Horno de laboratorio alcanza 1500 C, para estudios de calcinación o
incineración de muestras.

PRECAUSIONES

 No colocar en el suelo interior, sino encima de las bandejas.

 NO deben tocar las paredes ni el techo dela estufa.
 No poner objetos encima de la estufa.
 No introducir material que no resista el calor.
 En el horno Poupinel, dejar que baje la temperatura antes de abrir la puerta.
 Extraer con guantes o pinzas para evitar quemaduras.

1.5.El microscopio.

Observar muestras u objetos que, a simple vista no podemos ver, como células, bacterias,
cristales o componentes de mezclas heterogéneas.

La x nos indica los aumentos de la lente. Ejemplo, 100x aumento de 100 veces.

-Solo el objetivo de 100x es de inmersión, se impregna con una gota de aceite de inmersión:
los objetos secos nunca se impregnan con liquido de inmersión porque se estropean.

TIPOS

A. Microscopio óptico.

Emplea luz visbles.

 Microscopio de campo claro: microscopio óptico básico.

 Microscopio de campo oscuro: lleva con el condensador un disco opaco que refracta
(desvía) la luz.
 Microscopio de contraste de fases: lleva un diafragma anular en el condensador y un
elemento en el interior del objetivo.
 Microscopio de interferencia: polariza la luz con na placa birrefringente o prisma.
Mayor resolución que el microscopio de contraste de fases.
 Microscopio de fluorescencia: tiene fuente de luz ultravioleta, unos filtros que
seleccionan determinada longitud de onda y un condensador de campo oscuro.

B. Microscopio electrónico.

Para iluminar el objetivo utiliza un haz de electrones. Formas imágenes en una pantalla
fluorescente de modo que se consigue una mayor amplificación que el microscopio óptico.

PARTES DEL MICROSCOPIO

A. Sistema optico.
  Objetivos: sistemas de lentes localizados sobre el objeto que forma la imagen primaria
en el microscopio y se amplifica posteriormente con el ocular.
-Objetivo de inmersion en aceite: sumergir en aceite la lente del obejtivo y la muestra
que se va a observar . Es el 100x por tanto, aumenta 100 veces.
-Objetivos secos: existe un espacio ocupado por aire entre la lente frontal y
cubreobjetos. Se trata de los objetivos de menor aumento, como el 4x, el de 10x y el
de 40x.
 Oculares: lentes mas cercanos al ojo del observador, utilizando para amplificar la
imagen primaria transmitida por el objetivo. Los mas utilizados son los de 10x.

B. Sistema mecánico.

 Base o pie: parte inferior del microscopio de metal pesado para evitar vibraciones.
 Platina: placa de metal ennegrecido, donde se coloca las preparaciones. Fija o adosada
a un carro contornillos que le permiten movimientos de traslación para centrarla.

PARTES DEL MICROSCOPIO

 Brazo: sostiene el tubo y su movimiento vertical.

 Tornillo macrométrico: permite realizar movimientos rápidos de la platina o tubo del
microscopio, para encontrar la distancia focal (enfoque grueso).
 Tornillo micrométrico: movimiento suave que permite hacer la imagen mas nítida.
 Revolver: mecanismo giratorio que permite el cambio de los diferentes objetivos del
microscopio.
C. Sistema de iluminación.
 Condensador: lente o sistema de lentes cuya finalidad es iluminar la preparación
en la parte enfocada por el objetivo, de modo que el campo visual presente una
iluminación uniforme. Colocada directamente bajo la platina del microscopio.
 Diafragma-iris: mecanismo simple, acoplado al condensador, se utiliza para variar
el diámetro de una apertura.
 Fuente luminosa: proporciona la luz para la observación de la muestra.

FUNCIONAMIENTO

A. Manejo del microscopio con objetivos secos (4x,10x,40x y 60x).

 Bajar la platina con el tornillo macrométrico.
 Colocar la preparación en la platina.
 Colocar el objetivo d menor aumento 4x.
 Enchufar a la corriente y accionar el interruptor.
 Acercar al máximo el objetivo a la preparación, sin tocarla y mirando lateralmente,
con ayuda del tornillo macrométrico, girándolo en el sentido de las agujas del
reloj.
 Separar el objetivo, hasta observar algo nítido, con el tornillo macrométrico
girando hacia nosotros, dirección contrarias del reloj).
 Buscar un enfoque fino con el tornillo micrométrico.
 Regular la luz con el diafragma.
 Cambiar de objetivo, pasando al de 10x y 40x con el revolver. Si se pierde la
imagen empezar de nuevo bajando la platina.
 B. Empleo del objetivo del inmersión de 100x (100 aumentos)
 Bajar la platina.
 Subir el condensador para ver el circulo de luz que nos indica la zona que se va
visualizar y donde hará que echar el aceite.
 Girar el revolver hacia el objetivo de inmersión.
 Colocar una gota de aceite de inmersión sobre la preparación.
 Terminar de girar de revolver.
 Mirar y subir la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite.
 Enfocar con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo y la
preparación es mínima (menor que con el de 40x).

PRECAUSIONES Y MANTENIMIENTO

 Una vez que se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede
volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía.
 Una vez finalizada la observación,, se baja la platina y se coloca el objetivo de menor
aumento girando el resolver. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en
posición de observación.
 Limpiar el objetivo de inmersión con un papel especial para óptico.

PRECAUSIONES Y MANTENIMIENTO

 Nunca hay que tocar las lentes con las manos.

 No der el portaobjetos sobre la platina si no se esta utilizando el microscopio.
 Cuando no se este utilizando mantenerlo cubierto con su funda.
 Si el aceite de inmersión se seca se limpa con una mezcla alcohol-acetona (7:3) o
xinol.
 Jamás se deben forzar los tornillos giratorios.
 Mantener seca y limpia la platina.

1.6.La centrifuga.

Para separar componentes de una mezcla heterogénea firmada por uno o varios solidos que se
encuentran dispersos en un liquido.

La centrifuga de tubo:

 Tapa: manual o automática.

 Carcasa exterior y base que da estabilidad al aparato.
 Cámara interna contiene el cabezal y el rotor, lleva un motor. El cabezal, unido al roto,
dispone de los cortatubos donde se colocan los tubos de centrifuga.
 Panel de mandos: interruptor de encendido, el selector de la velocidad, un indicador
que se ilumina cuando esta girando el rotor y n indicador que se ilumina cuando la
tapa esta abierta.

Algunas centrifugadoras disponen de mas funciones, control de tiempo, tacómetro, freno,

sistema de refrigeración y bomba de vacío.

TIPOS
  Centrifuga de capilares: se utiliza en el laboratorio de hematología para una prueba
especifica llamada microhematocrito; en lugar de tubos se usan unos capilares que se
llenan con sangre, sepárala en suero y células sanguíneas.
 Centrifuga para tubos: para centrifugar las mezclas contenidas en tubos de centrifuga.

FUNCIONAMIENTO

 Conectar.
 Abrir la tapa.
 Situar en la cámara los tubos. Sean de igual tamaño y pesar lo mismo. SI no se ocupa
todos los portamuestras se deben colocar los tubos enfrentados con el fin de
mantener el equilibrio.
 Cerrar (el indicador de tapa abierta se debe apagar).
 Seleccionar la velocidad de centrifugacion (se encenderá el indicador de que el rotor
esta girando).
 Accionar el control de tiempo si dispone de esta función.
 Finalmente, volver la velocidad a la posición 0 una vez terminado el tempo de
centrifugacion.

PRECAUSIONES

 Comprobar los tubos encajan perfectamente.

 Identificar los tubos antes de introducirlos.
 Comprobar que los tubos estén bien colocados y cerrar la tapa con suavidad.
 No abrir la tapa durante el proceso.
 Si el modo de apertura de la tapa es automático, hay que accionar un botón para
abrirla y no forzarla.

1.7.El espectrofotómetro de absorción.

Identifica y determina cuantitativamente sustancias basándose en la cantidad de luz que

pueden adsorber, siendo útil para concentraciones desconocidas de sustancias en muestras
químicas como suero o sangre.

Consta de un foco luminoso, luz visible o luz ultravioleta-visible-infrarrojo a través de un

monocromador.

El monocromador selecciona la longitud de onda o una franja de longitudes de onda. Llegan a

una cubeta con la muestra a medir. Una vez allí, la luz será absorbida con mayor o menor
intensidad y otra parte saldrá de la cubeta.

El detector, que puede ser una célula fotoeléctrica, conjunto de varias o fotomultiplicador,
recoge e haz de luz que no ha sido absorbido por la muestra y transforma dicho impulso
luminoso en impulso mecánico, activando un sistema de lectura analógico o digital llamado
lector.

La espectrofotometría, técnica basada en la capacidad de los átomos y las moléculas para

absorber radiaciones electromagnéticas.

Toda radiación electromagnética (REM) se prolonga en forma de ondas sinusoidales y viene

caracterizada por una longitud de onda. Cada radiación tiene una longitud de onda (lambda),
es la distancia que hay entre dos máximos o dos mínimos de esa onda, y se mide en
nanómetros.

Un nanómetro es mil millones de veces mas pequeño que un metro:

1nm=10 m

FOTOMETRO

-Foco luminoso :Abarca solo el espectro visible, por eso se limita a medir en longitudes de .
onda del campo visible.

ESPECTROFOTOMETRO

Abarca el espectro ultravioleta-visible o espectro ultravioleta-visible-infrarrojo.

FOTOMETRO

-Filtros: Se utilizan filtros como el monocromador para aislar parte del espectro.

ESPECTROFOTOMETRO

Emplea un monocromador, que puede ser red de difracción o prisma o ambos de manera que
son selectivos que los filtros de fotómetro.

FOTOMETRO

-Cubeta: Es un tubo cilíndrico de vidrio y hay que poner mas volumen de muestra porque es
mayor.

ESPECTROFOTOMETRO

Es prismática (tetragonal) con caras planas y por eso no produce aberraciones ópticas (efecto
lente, errores de difracción, etc.) Pueden ser de plásticos o cuarzo son mas caras y precisas que
las cilíndricas. Tamaño normal de 3ml de capacidad, semimicro de 1,5ml o microcubeta de