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1
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN MOLECULAR UV/VIS
• Fuente de radiación:
• lámpara de Deuterio o Hidrógeno: proporcionan espectro continuo en la
región UV (160-375 nm)
• lámpara de filamento de Tungsteno: radiación visible e IR cercano
• arco de xenón: espectro continuo entre 150 y 800 nm
• Selector de longitudes de onda:
• filtros
• monocromadores: de red, de prisma
• Recipiente muestra:
• cubetas cuarzo o sílice fundida para que sean transparentes a la luz
(permitan en paso de radiación de la región espectral de interés)
• Detector de radiación:
• fotomultiplicadores o fotodiodos 2
mayor frecuencia Espectro Visible menor frecuencia
Verde: 490-570 nm
Amarillo: 570-585 nm
Parte del espectro visible es absorbido y
Naranja: 585-620 nm
otra parte reflejado (color
Rojo: 620-780 nm: complementario)
3
Colores complementarios:
Absorción a 420-430 nm: se ve amarillo
Absorción a 500-520 nm: se ve rojo.
Absorción total: se ve negro
Reflexión total: se ve blanco
4
Figura. Instrumento medición UV/vis de un solo haz
5
Instrumento tipo- haz simple
6
Espectrofotómetros de doble haz Lambda 3A y
4B (Perkin-Elmer)
7
8
Espectrofotómetros de diodos apilados
“diode array”
9
Doble haz
10
11
12
Conceptos básicos
Región de longitudes de onda comprendida entre 160 y
780 nm (UV-vis)
13
MEDIDA DE LA TRANSMITANCIA Y
DE LA ABSORBANCIA
14
MEDIDA DE LA TRANSMITANCIA Y DE LA
ABSORBANCIA
La disolución del analito debe
mantenerse en algun tipo de
recipiente transparente, o
cubeta
15
MEDIDA DE LA TRANSMITANCIA Y
DE LA ABSORBANCIA
Aproximadamente el 8,5 % de un haz de luz amarilla se pierde por
reflexión en su paso a través de una cubeta de vidrio rellena de agua
Para compensar todos estos efectos, la potencia del haz transmitido por la
disolución del analito se compara, generalmente, con la potencia del haz
transmitido por una cubeta idéntica que sólo contiene disolvente
16
LEY DE BEER
Consideremos el bloque de material absorbente (sólido,
líquido o gas)
17
Ley de Beer
La potencia del haz que entra en la sección, Px, es proporcional al numero de
fotones por centímetro cuadrado y dPx representa la cantidad absorbida en la
sección; la fracción absorbida será, entonces -dP/P, y esta relación también es
igual a la probabilidad media de captura. El signo menos indica que P sufre un
descenso.
18
donde n es el numero total de partículas en el
bloque
19
Ley de Beer
El área de la sección transversal S puede expresarse en términos de
volumen del bloque V en cm3 y su longitud b en cm
20
Ley de Beer
El número de moles viene dado por:
21
Aplicación de la Ley de Beer a
mezclas
La ley de Beer también se puede aplicar a un medio que
contenga mas de un tipo de sustancias absorbentes
22
Limitaciones de la ley de Beer
En algunas ocasiones estas desviaciones están relacionadas
con el fundamento de la ley y representan limitaciones
propias de la misma
desviaciones instrumentales
desviaciones químicas
23
Limitaciones de la Ley de Beer
LIMITACIONES A LA LEY DE BEER
E. De complejación
Falta de uniformidad de la sección
transversal de absorción
Efecto del disolvente
Impurezas de
los reactivos
Interferencias
de la muestra
24
Limitaciones propias de la ley de Beer
La ley de Beer describe de forma correcta el comportamiento de
absorción de un medio que contiene concentraciones de analito
relativamente bajas; en este sentido, es una ley limite
25
Limitaciones propias de la ley de Beer
26
Otras limitaciones propias de la ley de
Beer
También surgen desviaciones de la ley de Beer como consecuencia de la
dependencia de ε del índice de refracción del medio
27
Desviaciones químicas de la ley de
Beer
Cuando un analito se disocia, se asocia o reacciona con un
disolvente para dar lugar a un producto con un espectro de
absorción diferente al del analito, se producen desviaciones de la
ley de Beer
HIn → H+ + In-
color 1 (λ1; ε 1) color 2(λ2; ε2)
28
Desviaciones químicas de la ley de
Beer
29
Ejemplo-parte 1
Se determinaron las absortividades molares a 430 y 570 nm
del acido debil HIn (Ka = 1,42 x 10-5) y de su base conjugada
In- mediante medidas de disoluciones del indicador en medios
fuertemente ácidos y fuertemente básicos
30
Calcular los datos de absorbancia para las disoluciones no tamponadas
cuyas concentraciones totales de indicador están comprendidas entre 2
x 10-5 y 16 x 10-5 M
31
Reordenando los términos obtenemos la expresión cuadrática
[In-]2 + 1,42 x 10-5 [In-] - 2,84 x 10-10 = 0
A430 = 2,06 x 104 x 1,00 x 1,12 x 10-5 +6,30 x 102 x 1,00 x 0,88 x
10-5= 0,236
32
Otras limitaciones
Dimerizaciones
Cuando una disolución de dicromato potásico no tamponada se
diluye se produce una transformación parcial en cromato, como
consecuencia del equilibrio dímero-monómero existente en este
compuesto
Complejos
Cuando se mide la absorbancia de un complejo, por ejemplo,
Fe(SCN)63- para que se cumpla la ley de Beer hay que mantener
constante la concentración de ligando libre, lo cual se consigue
frecuentemente operando en gran exceso de ligando respecto al
metal
33
Datos en relación a las desviaciones
químicas de la ley de Beer
34
Desviaciones instrumentales originadas
por la radiación policromática
El cumplimiento estricto de la ley de Beer sólo se observa
cuando la radiación es realmente monocromática
35
Expresión de la ley de Beer en
presencia de radiación policromática
Considemos un haz formado solo por dos longitudes de onda λ’ y λ’’.
Asumiendo que la ley de Beer se aplica estrictamente para cada una de
estas longitudes de onda, podemos escribir para la radiación λ’
36
Cuando la medida de la absorbancia se realiza utilizando una radiación compuesta
por ambas longitudes de onda, la potencia del haz emergente de la disolución
viene dada por P’ + P" y la del haz del disolvente por P0’ + P0’’. Por tanto, la medida
de la absorbancia Am
37
Sin embargo, la relación entre A y la concentración deja de ser lineal cuando
las absortividades molares difieren entre si
38
Desviaciones de la Ley de Beer
También se ha observado experimentalmente que las
medidas de absorbancia en el máximo de los picos
estrechos hace que la desviación de la ley de Beer no
sea significativa si la anchura de banda efectiva del
monocromador o filtro es menor de 1/10 de la mitad de
la anchura del pico de absorción en la semialtura
39
40
Ruido instrumental como función de la
transmitancia
Una medida espectrofotométrica lleva consigo tres etapas:
ajuste del 0 % de transmitancia
ajuste del 100 % de transmitancia
medida del porcentaje de T cuando se sitúa la muestra en la trayectoria
de la radiación
41
Para relacionar la desviación estándar de la concentración σc
, con la desviación estándar de la transmitancia σT se
procede tomando la derivada parcial de esta ecuación con
respecto a T, manteniendo b y ε constantes. Es decir
42
Dividiendo la ecuación anterior
por el cuadrado de
Se obtiene
(σc/c)2 = (σT/T lnT)2
Para un número limitado de medidas se reemplaza la desviación estándar de la población σc y σT, por la
desviación estándar de la muestra sc y sT, y se obtiene:
Esta ecuación relaciona la desviación estándar relativa de c (sc/c) con la desviación estándar absoluta de
la medida de transmitancia (sT).
43
Debido a la relación logarítmica entre
T y A, la precisión de la medida de la
concentración difiere según el
intervalo de absorbancia que se esté
midiendo:
44
El error relativo en la absorbancia, es la medida de nuestra
precisión analítica
45
Otra forma de interpretar que el error fotométrico es
menor entre valores de absorbancia de 0,4 a 0,7 es
considerar que:
46
Efecto de la anchura de la rendija en las medidas de
absorbancia
Para conseguir espectros complejos bien resueltos se
requieren anchuras de rendija estrechas.
Las áreas bajo los picos individuales son las mismas, pero anchuras de
rendija elevadas dan lugar a picos mas anchos y mas bajos
47
La medida cuantitativa de las bandas de absorción estrechas requieren
el uso de anchuras de rendija estrechas o, alternativamente, ajustes de
anchura de rendija muy reproducibles
48
Efecto de la radiación dispersada.
Longitudes de onda extremas de un
instrumento
La radiación dispersa puede causar desviaciones instrumentales de la ley
de Beer
Cuando las medidas se realizan a las λ extremas de un instrumento, los
efectos de la radiación parasita pueden ser más importantes
En ocasiones pueden llevar a la aparición de falsos picos de absorción
Ejemplo:
Consideremos un espectrofotometro que trabaja en la región visible
equipado con óptica de vidrio, fuente de wolframio y célula fotovoltaica
como detector
A longitudes de onda inferiores a 380 nm, las ventanas, cubetas y prisma
comienzan a absorber radiación, reduciendo así la energía que llega al
detector
La señal de salida de la fuente también desciende rápidamente en esta
región; la sensibilidad del dispositivo fotoeléctrico también disminuye
Como consecuencia de ello la señal total para el ajuste del 100 % de T
puede ser tan baja como el 1 ó 2 % de la señal correspondiente a la
región comprendida entre 500 y 650 nm
49
Intensidad de la radiación emitida por las
fuentes típicas en la zona UV-visible
50
Efecto de la radiación dispersada.
Longitudes de onda de mayor sensibilidad
de un instrumento
Cuando la radiación dispersa está constituida por λ a las
cuales el instrumento es muy sensible, el efecto de la
radiación dispersa puede ser muy importante
ε = 8,7 x 10-19 P A
52
Cómo se aplica y se utiliza la espectroscopía UV-
visible
Para las transiciones permitidas según la
mecánica cuántica que dan lugar a bandas de
absorción intensas (ε= 104 a 105 ), los valores
de P están comprendidos entre 0,1 y 1
53
Especies absorbentes. Cromóforos
La absorción de radiación UV-vis por una especie
atómica o molecular M se puede considerar como un
proceso en dos etapas:
55
Otras formas de relajación molecular
56
Especies absorbentes que contienen
electrones σ, π y n
Las especies absorbentes que contienen electrones σ, π y n son
fundamentalmente iones y moléculas orgánicas, así como algunos
aniones inorgánicos. Consideraremos especialmente las primeras.
57
Especies absorbentes que contienen
electrones σ, π y n
Las dificultades experimentales asociadas con el
ultravioleta de vacío son muy importantes, por ello, la
mayoría de los estudios de compuestos orgánicos se
llevan a cabo a longitudes de onda superiores a 185
nm.
58
Tipos de electrones absorbentes
Los electrones que contribuyen a la absorción en una
molécula orgánica son:
(1) enlazantes, que participan directamente en la formación de
enlaces entre átomos, asociándose con más de uno de ellos
(2) no enlazantes o electrones que no participan en ningún
enlace que están en gran parte localizados alrededor de átomos
como oxigeno, halógenos, azufre y nitrógeno
59
Tipos de electrones absorbentes
La distribución de la densidad de carga de un orbital sigma es
rotacionalmente simétrica alrededor del eje del enlace.
60
Muchas moléculas orgánicas contienen electrones no
enlazantes. Estos electrones, se designan con el símbolo n.
La energía para los distintos tipos de orbitales moleculares
difiere significativamente.
El nivel de energía de un electrón no enlazante se encuentra
entre niveles de energía de los orbitales π y σ enlazantes y
antienlazantes.
Las transiciones electrónicas entre los distintos niveles de
energía, son posible cuatro tipos de transiciones
σ→σ* n→σ * n→π* π→π*
61
Transiciones σ→σ*. Poseen una energía asociada muy elevada, y origina bandas de
absorción en el UV de vacío. Por ellos no tienen interés práctico y no se le dedica atención
en análisis
62
Transiciones nÆπ* y π Æπ*
63
Transiciones nÆπ* y π Æπ*
El efecto hipsocromico surge de una mayor solvatación del
par de electrones no enlazantes que disminuye la energía del
orbital n Æ salto mayor Æ mayor ε Æ λ corta
64
Cromóforos orgánicos
Los máximos permiten la identificación de grupos
funcionales, pero esta identificación es difícil (efecto del
disolvente, etc)
65
Cromóforos orgánicos
Como se ve en la Tabla la absorción de los multicromóforos en una
molécula orgánica sencilla, es aproximadamente aditiva.
66
Cromóforos orgánicos
67
Efecto de la conjugación
La conjugación entre el doble enlace del oxígeno de los
aldehídos, cetonas y ácidos carboxílicos y un doble enlace
olefínico da lugar a un comportamiento similar
68
A medida que
aumenta la
conjugación, el
sistema absorbe a
λ mayores , o sea
más hacia el
visible
69
A mayor conjugación de sistemas aromáticos la absorción se
desplaza al visible
Este
compuesto es
de color
anaranjado
70
Características de absorción de algunos
cromóferos comunes
71
Absorción de sistemas aromáticos
Los espectros UV de los hidrocarburos aromáticos
se caracterizan por tres grupos de bandas cuyo
origen son las transiciones π→π*.
72
Las tres bandas características del benceno se ven
muy afectadas por la sustitución del anillo
73
Los grupos –OH y -NH2 tienen un efecto auxocrómico
sobre el cromóforo benceno, particularmente en
relación con la banda B.
74
Además, el efecto auxocrómico es más pronunciado para el
anión fenolato que para el propio fenol, probablemente debido
a que el anion tiene un par extra de electrones no
compartidos que contribuyen en la interaccion.
76
ABSORCIÓN EN LA QUE
PARTICIPAN ELECTRONES d y f
La mayoría de los iones de los metales de
transición absorben en la región ultravioleta o visible
del espectro.
78
Absorción por iones lantánidos y
actínidos
Espectros
característicos de
cuatro lantánidos
79
Absorción por los elementos de la 1ª y la 2ª serie
de los metales de transición
80
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
81
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
La serie de los metales de transición se caracteriza
por tener cinco orbitales d parcialmente ocupados
(3d en la primera serie y 4d en la segunda), cada uno
de ellos capaces de alojar a un par de electrones.
82
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
83
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
Premisa común:
las energías de los orbitales d de los iones de los metales de transición en
disolución no son iguales
84
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
Ocupan los espacios
entre los tres ejes Æ
densidad electrónica
mínima a lo largo de los
ejes y máxima en la
diagonal entre los ejes
Densidades electrónicas
dirigidas a lo largo de los
ejes
86
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
La densidad de carga máxima de los orbitales dz2 está situada a
lo largo de los ejes de unión. El campo negativo de un ligando
unido tiene además un efecto mayor sobre este orbital que sobre
los orbitales dxy, dxz y dyz, cuyas densidades de carga no
coinciden con los ejes de unión.
87
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
Así, el diagrama de niveles de energía para la configuración
octaédrica muestra que las energías de todos los orbitales d
aumentan en presencia de un campo ligando, pero, además, que
los orbitales d se desdoblan en niveles que difieren en un ∆ de
energía
88
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
En los diagramas de energía para complejos con cuatro enlaces
coordinados:
Configuración tetraédrica, en la que los cuatro grupos se
distribuyen simétricamente en el espacio alrededor del ion
metálico,
89
Absorción por los elementos de la 1ª y la
2ª serie de los metales de transición
La magnitud del ∆ depende de varios factores, que incluyen la
carga del ion metálico y la posición del elemento en el sistema
periódico.
I- < Br - < Cl- < F- < OH- < C2O42- ~ H2O < SCN- < NH3 <
etilendiamina < o-fenantrolina < NO-2<CN-.
90
ABSORCIÓN POR TRANSFERENCIA DE CARGA
91
ABSORCIÓN POR TRANSFERENCIA DE
CARGA
Para que un complejo presente un espectro de transferencia de carga, es
necesario que uno de sus componentes tenga características de dador de
electrones y el otro componente tenga propiedades de aceptor de
electrones
La absorción de la radiación implica, entonces, la transferencia de un
electrón desde el dador hasta un orbital que está en gran parte asociado
con el aceptor
92
ABSORCIÓN POR TRANSFERENCIA DE
CARGA
93
Complejos de transferencia de carga con
compuestos orgánicos
94
ANÁLISIS CUALITATIVO
Las aplicaciones de la espectrofotometría ultravioleta y
visible en el análisis cualitativo son limitadas, ya que el
número de máximos y mínimos de absorción
correspondiente a una molécula es relativamente
pequeño.
95
Disolventes
Al elegir un disolvente no sólo se tiene que tener
en cuenta su transparencia sino también sus
posibles efectos sobre el sistema absorbente
96
Disolventes
En la Tabla se enumeran algunos
disolventes comunes y la longitud de
onda aproximada por debajo de la
cual no pueden usarse debido a la
absorción
97
Detección de grupos funcionales
Aunque la espectroscopía UV-visible no puede proporcionar la
identificación inequívoca de un compuesto orgánico es útil para detectar la
presencia de ciertos grupos funcionales que actúan como cromóforos.
Ejemplos:
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Analisis cuantitativo
Características de los métodos espectrofotométricos
Gran aplicabilidad tanto para sistemas orgánicos como inorgánicos
Buena precisión
99
Campo de aplicación
Especies absorbentes
Cromóforos orgánicos
Cromóforos inorgánicos
Co (II), Ni(II), Cu(II)
Nitrito, nitrato y cromato;
Tretróxidos de osmio y rutenio (amarillos)
Yodo molecular (amarillo en medio acuoso)
Ozono (azul)
100
Campo de aplicación
Especies no absorbentes
Reactivos inorgánicos:
SCN- para determinar Fe3+ (rojo), Co2+(azul)
Mo6+(amarillo, rojo en presencia de
reductor)
H2O2 para determinar Ti4+(amarillo – TiO(H2O2)2+)
V5+(rojizo, ion peroxivanádico, VO22+)
Cr6+ (color azul intenso extraible en eter
o alcohol amílico, CrO5, dos grupos
peróxido)
I- para determinar Bi3+ , Pd2+, Te4+(rojo TeI62-)
101
Campo de aplicación
Especies no absorbentes
Reactivos orgánicos:
o-fenantrolina Fe(II)
Dimetilglioxima Ni(II) y Pd(II)
Dietilditiocarbamato Cu(II)
Ditizona (difeniltiocarbazona) Pb(II), Hg(II)
102
103
Aspectos prácticos de las determinaciones
espectrofotométricas
Es necesario establecer adecuadamente las condiciones de trabajo para
qua la determinación espectrofotométrica se aplique al problema analítico
que nos interese de manera adecuada.
104
Aspectos prácticos en las medidas espectrofotométricas
105
Análisis de mezclas de sustancias absorbentes
La absorbancia total de una disolución, a una
longitud de onda dada, es igual a la suma de las
absorbancias que presentan los componentes
individuales.
A’ = ε’M b cM + ε’N b cN (para λ’)
A’’ = ε’’M b cM + ε’’N b cN (para λ’’)
106
Las cuatro absortividades molares ε’M, ε’N, ε’’M, ε’’N, pueden calcularse a
partir de disoluciones estándar individuales de M y de N, o mejor, a partir
de las pendientes de sus representaciones graficas de la ley dc Beer.
Estas relaciones son validas sólo si se cumple la ley de Beer y si los dos
componentes se comportan de manera independientes el uno del otro. La
mayor exactitud en un análisis de este tipo se alcanza cuando se
seleccionan longitudes de onda en las que las diferencias entre las
absortividades molares sean grandes.
107
Espectrofotometría derivada y de longitud de onda
dual
En la espectrofotometría derivada, los espectros se obtienen representando
gráficamente la derivada primera o de mayor orden, de la absorbancia o de
la transmitancia, con respecto a la longitud de onda, en función de la
longitud de onda. A menudo estas representaciones gráficas revelan
detalles espectrales que se pierden en un espectro ordinario.
108
Dispositivos de modulación de la
longitud de onda
Se han desarrollado varios procedimientos para conseguir la
modulación de la longitud de onda.
109
Dispositivos de modulación de la longitud
de onda-II
Un segundo esquema para la modulación, requiere el uso
de un sistema dispersante doble ordenado de tal manera
que dos haces de longitudes de onda ligeramente
diferentes (normalmente 1 ó 2 nm) van a incidir
alternativamente en una cubeta de muestra y su detector;
no se utiliza haz de referencia.
110
Aplicaciones de los espectros derivados
Muchas de las aplicaciones más
importantes de la espectroscopia
derivada en las regiones ultravioleta
y visible son las identificaciones
cualitativas de especies, en las
cuales la observación en detalle
(aumentando la figura) de un
espectro derivado hace posible
distinguir entre compuestos que
tienen espectros solapados.
111
Aplicaciones de la espectroscopia de
derivadas
La espectrofotometría de longitud de onda dual ha
demostrado ser particularmente útil para la obtención de
espectros de absorción ultravioleta/visible de analitos
presentes en disoluciones turbias, donde la dispersión
de la luz elimina los detalles de espectro de absorción.
112
Uso de la espectrofotometría dual
para reducir interferencias
La espectrofotometría de longitud de onda dual también es útil
para el análisis de un analito en presencia de una interferencia
espectral.
113
Valoraciones fotométricas
Las medidas espectrofotométricas pueden utilizarse para detectar
el punto final de una valoración siempre que el analito, el reactivo
o el producto final de la valoración absorban radiación. En
ocasiones se añade un indicador coloreado que nos marca el
punto final.
Curvas de valoración
114
Se consideran los siguientes casos:
(a) La valoración de una especie no absorbente con un valorante coloreado que
origina un producto de reacción incoloro da lugar a una línea hori-zontal en las
etapas iniciales, seguido de un rápido ascenso de la absorbancia pasado el
punto de equivalencia
(b) La formación de un producto coloreado, a partir de reactivos incoloros,
produce inicialmente un aumento lineal en la absorbancia, seguido de una
región en la cual la absorbancia se mantiene independiente del volumen de
reactivo añadido
(c) La sustancia que se valora es coloreada, pero el compuesto resultante es
incoloro, así como el reactivo
(d) La sustancia que se valora y el valorante absorben a la longitud de onda de
medida, pero no el producto de la reacción
(e) Tanto el producto de la reacción como el valorante absorben, pero con
absortividades molares diferentes, siendo la del producto de la reacción menor
que la del valorante. La muestra no absorbe
(f) el mismo caso anterior, pero ahora εproducto de la reacción> εvalorante
115
1: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe.
2: Analito no absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto absorbe.
3: Analito absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto no absorbe.
4: Analito absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe.
5: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe.
6: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe.
116
Condiciones de una valoración
fotométrica
Con objeto de obtener un punto final fotométrico satisfactorio, es
necesario:
117
Instrumentación en las valoraciones
fotométricas
Las valoraciones fotométricas se realizan en un espectrofótometro o un fotómetro que se ha
modificado para poder intercalar el recipiente de valoración en la trayectoria de la luz.
Para las valoraciones fotométricas se han utilizado tanto los fotómetros de filtro como los
espectrofotómetros. Sin embargo, se prefieren los últimos, ya que sus anchuras de banda,
más estrechas, aumentan la probabilidad de cumplimiento de la ley de Beer.
118
Aplicación de las valoraciones fotométricas
Las valoraciones fotométricas proporcionan resultados más exactos que los obtenidos
mediante un análisis fotométrico directo, ya que para determinar el punto final se
utilizan los datos de varias medidas.
El punto final obtenido fotométricamente utiliza medidas alejadas del punto final, por lo
que las reacciones de valoración no necesitan tener constantes de equilibrio muy
elevadas como ocurre en valoraciones que utilizan medidas próximas al punto de
equivalencia
119
Ejemplo de valoración fotométrica
La valoración fotométrica se ha utilizado en las
valoraciones con EDTA y con otros agentes
complejantes.
120
Estructura de los ligandos fotométricos:
Grupos específicos de reacción
La mayoría de los ligandos usados actualmente en fotometría son
sustancias orgánicas.
121
Grupos activos de reacción
Los grupos ácidos capaces de ceder protones pueden ser -OH (hidroxilo) -SH
(mercapto) e -NH (imino) entre otros.
Los grupos básicos de Lewis poseen átomos con pares de electrones libres para
aportar a la configuración electrónica del metal. Estos átomos pueden ser S, O y N
y los grupos que forman generalmente enlaces de coordinación son:
122
Grupos activos de reacción
La reactividad de estos grupos activos va dirigida a ciertos iones metálicos,
por eso se les llama “grupos específicos o selectivos de reacción”.
123
La formación de un complejo coloreado depende de la naturaleza del ligando y del
ion metálico.
124
Según el tipo de grupos ácidos o básicos que posea un ligando,
la carga del ion metálico y la estequiometría del complejo, este
tendrá o no carga y por tanto será o no soluble.
Si posee grupos ácidos que compensan las cargas del metal (de
acuerdo con el número de ligandos que entran) los complejos
son insolubles como el Ni-dimetilglioxima y aunque se puede
extraer, no siempre reúnen buenas condiciones para la
fonometría.
125
Grupos activos de creación
126
Determinación de aniones en aguas
Nitratos y nitritos
127
Determinación de nitritos en aguas
La determinación de nitritos en agua se lleva a cabo mediante la
diazotación (reacción de Griess) y determinación mediante
espectrofotometría del producto formado.
128
Fosfatos en aguas
Los abonos inorgánicos están constituidos por diversas clases de fosfatos
solubles. El fósforo se puede encontrar en las aguas como aniones meta-
(PO3-), piro- (P2O74−), ortofosfato (PO43−), hidrogenofosfato (HPO42-) y
polifosfatos (P3O105-). Debido a su elevada solubilidad, estos aniones son
arrastrados fácilmente por las aguas superficiales hacia ríos, acuíferos,
etc.
129
Método del azul de molibdeno
El método del azul de molibdeno, se basa en la reducción del complejo anterior
con ácido ascórbico dando un complejo de estado de oxidación inferior [Mo(V)]
de color azul intenso.
130
Determinación de elementos en tejidos
vegetales
Boro
131
Azufre-problemática
En la actualidad existe un gran interés por medir el contenido de azufre
de las plantas.
132
Azufre- análisis
Los sulfatos se determinan mediante turbidimetría, ya que es un método simple,
rápido, sensible y selectivo.
133
Aniones de azufre
Las especies de azufre que se encuentran con mayor frecuencia en el
agua son los sulfatos (SO42-), sulfitos (SO32-), sulfuros y tiosulfatos
(S2O32-). Su concentración no debe ser superior a 0,05 ppm.
134
135
Determinación de metales pesados
136
UV-visible como sistema de detección en
otras técnicas instrumentales
Cromatografía HPLC
137
Detectores UV-visible utilizados en HPLC
Existen dos tipos de detectores UV aplicables a
cromatografía HPLC
Longitud de onda fija
Longitud de onda variable.
139
Inyector y columna
140