Cromatografía métodos resumen

TECNOLOGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ECATEPEC
DIVISION DE ING. QUIMICA Y BIOQUIMICA
TEMA:
Resumen temas vistos 3er periodo parcial
(Métodos cromatograficos)
MATERIA:
Análisis instrumental
ALUMNO:
Fernández Alvirde Luis Alonso
GRUPO:
4351
NOMBRE DEL MAESTRO:

Luz Isabel Mendoza Luna
CICLO ESCOLAR:
20/21-2
FECHA DE ENTREGA:
13/12/21
INDICE
1.-TÉRMINOS CLAVE EN CROMATOGRAFÍA:
2.- CROMATOGRAFÍA EN PAPEL (CP).
3.- CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC).
4.- CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF)
5.- CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN EN GEL (CG)
6.- CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO (CII)
7.- CROMATOGRAFÍA DE GASES (CG).
8.- CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS (HPLC).
9.- ESPECTROSCOPÍA DE MASAS (EM)
10.- RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR (RMN)

TÉRMINOS CLAVE EN CROMATOGRAFÍA:

¿Qué es la cromatografía?
La cromatografía es un método de separación de mezclas complejas, que es ampliamente

utilizado en diversas ramas de la ciencia. Se puede utilizar para cuantificar, identificar y
separar los componentes de una mezcla. Para ello emplea el principio de la retención
selectiva (por polaridad o tamaño y forma de los componentes), que consiste en el distinto
comportamiento de los componentes de una mezcla sobre un soporte específico (como un
papel, un gas, un líquido, una resina) y una fase líquida o gaseosa que fluye a través del
soporte.
De esa manera, la cromatografía emplea diversas técnicas que aprovechan las diferencias en
la velocidad de retención de cada componente, y puede separarlos, identificarlos y
cuantificarlos.
En muchos casos es clave la adsorción (diferente de la absorción, que está referida a la

difusión de un componente desde una fase hasta otra), concepto que se refiere al proceso por
el que las partículas son retenidas sobre una superficie. De acuerdo a la diferencia de
velocidades de adsorción sobre un soporte y a la afinidad por este soporte de los
componentes de la mezcla, podrán separarse para luego ser cuantificados o identificados.
En general, todos los tipos de cromatografía dependen de una serie de instrumentos,

compuestos químicos y determinada tecnología. Debido a ello, es importante conocer algunos
conceptos para poder entender el funcionamiento de las técnicas cromatográficas:
Fase estacionaria. Es una sustancia que se mantiene inmóvil mientras se ejecuta la

cromatografía (papel, gas, liquido, resina, gel, Etc.).
Fase móvil. Es la sustancia que se mueve durante la cromatografía. Puede ser un líquido o
un gas. La muestra que contiene el analito se administra en la fase móvil.
Analitos. Son las sustancias que se van a separar, cuantificar y/o identificar utilizando la
cromatografía, es decir, son las sustancias que se van a analizar.
Muestra. Es la mezcla que se va a analizar. Puede estar constituida por uno o varios analitos,
y otros componentes que pueden no ser de interés, de los que serán separados los analitos.
Tiempo de retención. Es el tiempo que demora un analito en pasar desde la columna o

sistema por donde pase la fase móvil, hasta el detector (equipo que puede dar una señal de
detección utilizando alguna propiedad del analito).
Selectividad. Es la capacidad de diferenciar cada componente en la mezcla.
Eluyente. También se refiere a la fase móvil cuando sale de la columna cromatográfica.
El método cromatografico consiste en inocular una muestra en una fase estacionaria o fase
móvil (dependiendo del tipo de técnica cromatográfica). Luego, si por ejemplo, la fase móvil es
la que contiene la muestra, pasa a través de una fase estacionaria determinada.
La separación de los analitos dependerá de la afinidad de cada uno de los componentes tanto
por la fase estacionaria como por la fase móvil. Dependiendo de su naturaleza, algunas
sustancias tenderán a moverse con la fase móvil y otras a permanecer sobre la fase
estacionaria
CROMATOGRAFÍA EN PAPEL (CP).
FUNDAMENTO:
El fundamento es la elución de una muestra que fue absorbida por un papel filtro de alta
pureza, esta separación se lleva a cabo gracias a la capilaridad del papel filtro así como la
polaridad de los componentes de la muestra y la polaridad del Eluyente empleado,
MATERIALES Y O EQUIPO:
1.- papel filtro 2.- Eluyente 3.-muestra
CARACTERISTICAS GENERALES DEL METODO:
La fase estacionaria está formada por una tira de papel de filtro de alta pureza. La muestra a
analizar se coloca en forma de gota sobre un extremo del papel. Luego se sumerge la tira de
papel en un recipiente donde se encuentra la fase móvil, teniendo en cuenta que el extremo
donde está colocada la muestra quede en la parte de abajo del papel. La fase móvil asciende
por capilaridad arrastrando consigo la muestra y separando cada componente según la
polaridad de la muestra y la del eluyente. Este tipo de cromatografía se emplea principalmente
cuando cada componente de la muestra tiene un color diferente, entonces se puede ver el
despliegue de colores sobre el papel para identificarlos.
ventajas limitaciones
La sencillez de método Ausencia de color en la muestra

Bajo costo del método cuantificación de componentes de la
muestra
No se requiere equipo de análisis Análisis a muestras no polares
Se requiere de poca muestra para análisis

APLICACIONES:
1.- Separación y reconocimiento de carbohidratos en jugo de frutas
2.- Separación y determinación de tipos de

aminoácidos en jugo de verduras
3.- separar, analizar e identificar los componentes de la tinta de marcador permanente

4.- separar y analizar los azucares en el yogurt
5.- separación y clasificación de tipos de clorofila en jugos verdesa
CONCLUCION:
El método de cromatografía en papel es el más sencillo de los métodos cromatograficos ya
que este método no requiere de ningún equipo de análisis además de ser relativamente rápido
y eficiente en el análisis de azucares, cetonas, alcoholes, etc. además que nos permite
identificar compuestos muy similares que se logran diferenciar por su ligera diferencia de
tonalidad, aunque se tiene gran deficiencia para cuantificar los componentes, el grado de
reconocimiento que este método nos proporciona es suficiente para realizar diversos análisis
cromatograficos de cualificación con una sencillez inigualable dentro y fuera del laboratorio.
3.- CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC).
FUNDAMENTO:
Este método se fundamenta en la separación por adsorción de los componentes de la mezcla

en la fase estacionaria generalmente, gel de sílice o alúmina, reteniendo algunos
componentes por su polaridad y dejando que vallan eluyendo los otros con base a la
interacción entre las polaridades del analito y el eluyente
MATERIALES Y O EQUIPO:
1.- Columna cromatográfica 2.- geles sílice y alumina

3.- soporte universal. 4.- algodón 5.- arena de mar 6.-barilla larga
7.- solventes orgánicos

CARACTERISTICAS GENERALES DEL METODO:
La fase estacionaria se coloca dentro de una columna que puede ser de vidrio o acero
inoxidable, entre otros materiales. La fase móvil puede ser líquida o gaseosa. La muestra se
coloca en el extremo superior de la columna y se deja descender con la fase móvil utilizando
la gravedad.
 Cromatografía sólido-líquido. La fase estacionaria es sólida y la móvil es líquida.
 Cromatografía líquido-líquido. Ambas fases son líquidas.

Bajo costo del método conjugar los disolventes de manera adecuada
Los geles son reutilizables Caracterización de componente incoloro
Gran capacidad de separación por Requerimiento de detector para mayor
disolventes orgánicos exactitud
EQUIPO:
APLICACIONES:
1.- análisis del contenido y caracterización de la hemoglobina en sangre
2.- análisis del contenido de azucares en leche

3.- separación y caracterización del contenido de azucares de fruta en productos que

dicen ser frutales (TANG, BOING, DEL VALLE. ETC.)
4.- separación e identificación del contenido de triglicéridos en sangre
5.- separación e identificación de proteínas en bebidas de suplemento alimenticio

CONCLUCIONES:
Este método cromatografico es bastante potente en términos de separación e identificación de
compuestos, muy polares, poco polares y nada polares, gracias a la interacción entre la
polaridad del eluyente y la polaridad de los componentes de la muestra, además de su amplia
aplicación en la industria alimentaria también puede ser utilizada para el análisis de algunos
medicamentos. En general es un método sencillo y económico fácil de realizar en el
laboratorio, los materiales requeridos son fáciles de encontrar en cualquier laboratorio y los
geles son potencialmente reutilizables si no hubo ningún tipo de toxico o contaminante estos
pueden ser secados a temperatura entre los 120 y 180 grados C.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF)

FUNDAMENTO:
Esta técnica se basa en el principio de adsorción de la muestra por un gel de sílice untado
sobre un papel como capa fina sobre una lámina de vidrio o metal (fase estacionaria), y en un
eluyente (fase móvil) que puede ser agua o disolvente este asciende por el papel eluyendo los
componentes de la muestra dependiendo de su nivel de adsorción de los componentes por la
fase estacionaria.
Materiales y/o equipo:
1.- Vaso de pp
2.- Placa de aluminio con gel de sílice 3.- eluyente éter de petróleo
Eter dietilico hexano
CARACTERISTCAS GENERALES DEL METODO.

El funcionamiento de esta técnica es parecido al de la cromatografía en papel, pero en este
caso la fase estacionaria se construye depositando una resina polar (casi siempre sílica gel),
sobre una placa de vidrio o aluminio. Se coloca cierta cantidad de la muestra a 1cm del borde
inferior de la placa. Luego se sumerge esta placa, teniendo en cuenta que el extremo que
contiene la muestra debe quedar hacia abajo, en un recipiente que contiene la fase móvil. La
fase móvil asciende por capilaridad separando los componentes de la muestra.
Método económico Análisis en muestra no polar
Facilidad de obtención de materiales Cuantificación de compuestos
Alta potencia en separación Caracterización en ausencia de color
APLICACIONES:
1.- separación y reconocimiento de lípidos en alimentos
2.- detección y separación de componentes en tintas permanentes
N-metilpirrodinona Glicerol
3.- separación y análisis de resinas acrílicas (en pinturas no permanentes)
4.- separación e identificación de algunos ácidos presentes en el vino
5.- separación e identificación de clorofilas en jugos verdes naturales

CONCLUCION:
Este método es bastante sencillo, y permite separar gran cantidad de muestras un número
mayor que en cromatografía en papel, este metodo es bastante simple y es muy fácil hacer un
análisis cualitativo de muestras por este metodo en el laboratorio con pocos materiales.
CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN EN GEL (CG)
FUNDAMENTO:
Este metodo se basa en la exclusión molecular por tamaño, dependiendo del tamaño y de la
forma de los componentes de la muestra estos entran en los poros del gel de sílice y
dependiendo del número de poros que logren atravesar tendrán un tiempo de elución distinto
saliendo primero las moléculas más grandes.
Materiales y/o equipo:

Características generales del metodo:
Se prepara la columna cromatográfica introduciendo un algodón como filtro evitando tapar la

llave de salida, se agrega el gel previamente hidratado, posteriormente se agrega la muestra
Y se va agregando el eluyente (agua) y se deja que con la gravedad se realice el arrastre de
los componentes atreves de los poros del gel, si se requiere una cuantificación mas exacta se
pueden utilizar distintos tipos de detectores de viscosidad, concentración o por refracción de
luz, una característica resaltable en este metodo es la ausencia de interacciones entre la fase
móvil y el analito ya que en este metodo la polaridad no influye
El eluyente es únicamente agua Se dificulta el análisis de muestras polares
Es el metodo mas económico Si las moléculas son de tamaño similar es
imposible diferenciarlas
Podemos identificar los pesos moleculares La exactitud de la cuantificación
APLICACIONES:
1.- separación y detección de carbohidratos en alimentos

2.- separación y análisis de azucares en alimentos

3.- separación y caracterización de aminoácidos en alimentos

4.- detección de ácidos nucleicos en suspensiones alimenticias

5.- en industria farmacéutica para separar e identificar componentes

CONCLUCION:
Este método es útil únicamente para analizar mezclas que contienen moléculas con diferencia
de tamaño y estructura (PM), sin embargo es imposible analizar muestras que contengan
moléculas de tamaños muy similares ya sean muy grandes o muy pequeñas, este método es
muy versátil por su característica de la utilización de materiales y componentes básicos en
análisis químicos. Cabe mencionar que los disolventes utilizados únicamente disuelven la
muestra y no influyen en el arrastre de los componentes, ya que el eluyente es únicamente
agua.

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DIVISION DE ING. QUIMICA Y BIOQUIMICA

NOMBRE DEL MAESTRO:

1.-TÉRMINOS CLAVE EN CROMATOGRAFÍA:

2.- CROMATOGRAFÍA EN PAPEL (CP).

3.- CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC).

4.- CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF)

5.- CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN EN GEL (CG)

6.- CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO (CII)

7.- CROMATOGRAFÍA DE GASES (CG).

8.- CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS (HPLC).

9.- ESPECTROSCOPÍA DE MASAS (EM)

10.- RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR (RMN)

TÉRMINOS CLAVE EN CROMATOGRAFÍA:

La cromatografía es un método de separación de mezclas complejas, que es ampliamente

En muchos casos es clave la adsorción (diferente de la absorción, que está referida a la

En general, todos los tipos de cromatografía dependen de una serie de instrumentos,

Fase estacionaria. Es una sustancia que se mantiene inmóvil mientras se ejecuta la

Tiempo de retención. Es el tiempo que demora un analito en pasar desde la columna o

Selectividad. Es la capacidad de diferenciar cada componente en la mezcla.

Eluyente. También se refiere a la fase móvil cuando sale de la columna cromatográfica.

CROMATOGRAFÍA EN PAPEL (CP).

1.- papel filtro 2.- Eluyente 3.-muestra

CARACTERISTICAS GENERALES DEL METODO:

La sencillez de método Ausencia de color en la muestra

Se requiere de poca muestra para análisis

2.- Separación y determinación de tipos de

3.- separar, analizar e identificar los componentes de la tinta de marcador permanente

4.- separar y analizar los azucares en el yogurt

5.- separación y clasificación de tipos de clorofila en jugos verdesa

3.- CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA (CC).

Este método se fundamenta en la separación por adsorción de los componentes de la mezcla

1.- Columna cromatográfica 2.- geles sílice y alumina

7.- solventes orgánicos

CARACTERISTICAS GENERALES DEL METODO:

 Cromatografía sólido-líquido. La fase estacionaria es sólida y la móvil es líquida.

 Cromatografía líquido-líquido. Ambas fases son líquidas.

2.- análisis del contenido de azucares en leche

3.- separación y caracterización del contenido de azucares de fruta en productos que

4.- separación e identificación del contenido de triglicéridos en sangre

5.- separación e identificación de proteínas en bebidas de suplemento alimenticio

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF)

Materiales y/o equipo:

Eter dietilico hexano

CARACTERISTCAS GENERALES DEL METODO.

1.- separación y reconocimiento de lípidos en alimentos

2.- detección y separación de componentes en tintas permanentes

3.- separación y análisis de resinas acrílicas (en pinturas no permanentes)

4.- separación e identificación de algunos ácidos presentes en el vino

5.- separación e identificación de clorofilas en jugos verdes naturales

CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN EN GEL (CG)

Materiales y/o equipo:

Características generales del metodo:

Se prepara la columna cromatográfica introduciendo un algodón como filtro evitando tapar la

1.- separación y detección de carbohidratos en alimentos

2.- separación y análisis de azucares en alimentos

3.- separación y caracterización de aminoácidos en alimentos

4.- detección de ácidos nucleicos en suspensiones alimenticias

5.- en industria farmacéutica para separar e identificar componentes

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