GUIA DE PROCEDIMIENTOS PERFIL DIABÉTICO.

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POE).

PRUEBA PÉPTIDO C ÁREA: BIOQUIMICA MÉDICA
CÓDIGO 783

DESCRIPCIÓN GENERAL DE LA PRUEBA:

El péptido C es una sustancia producida en el páncreas, junto con la insulina. La
insulina es una hormona que controla los niveles de glucosa (azúcar en la sangre)
en el cuerpo (1). Permite evaluar la necesidad en algunos pacientes y apoya la
investigación de posibles complicaciones como la Hipoglicemia. Con este perfil se
puede también investigar un posible caso de Síndrome de Resistencia a la
Insulina.
FASE PREANALITICA:
METODOLOGIA CONDICIONES DEL PACIENTE (2).
 No comer, ni beber nada durante 8 a 12 horas.
 Reposo continuo en cama.
 Asegurarse que ningún medicamento que consuma el paciente provoque
una reacción. La insulina exógena genera anticuerpos anti-insulina que
altera los resultados.
 No consumir alcohol.
 No fumar.
 No consumir drogas.
 12 horas previas al análisis no tomar multivitaminas o suplementos
dietéticos que contienen biotina o vitamina B7, que se encuentran
comúnmente en la piel, el cabello, las uñas y los suplementos y
multivitaminas.
Variables preanalíticas.
 Aumentado:
Edad (incremento del 0.4%/año en individuos de 60-90 años), alanina (en
no diabéticos), chocolate, harinas, bananas, fumar, pérdida de peso,
ingestión de sucrosa.

 Disminuido:
Ejercicio, dieta con alto contenido de grasas monoinsaturadas, sueño,
almacenamiento incorrecto de la muestra.
Muestra requerida: Suero o plasma.
PRUEBA:
Las dos pruebas más validadas son la medida de péptido C a los 6 minutos de la
administración intravenosa de glucagón o a los 90-120 minutos tras un test de
dieta mixta líquida (3).
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA.
Muestra T. Congelado -20 °C Refrigerado 2-8 °C
(preferido)
Suero 30 días 7 días
Plasma 3 meses 5 horas
Evite más de cinco ciclos de congelación.
Interferencias:
Hemolisis.
FASE ANALITICA (4):
MÉTODO:
Quimioluminiscencia.
FUNDAMENTO DEL MÉTODO.
La quimioluminiscencia está basada en la interacción Antígeno-Anticuerpo que,
dependiendo del tipo de ensayo a desarrollarse (sándwich o competitivo), emitirá
una señal de luz directa o inversamente proporcional a la concentración de la
molécula de interés en presencia de algunos reactivos.
METODOLOGÍA.
En el primer paso, las micropartículas paramagnéticas de muestra recubiertas con
anticuerpo monoclonal anti-péptido C (ratón) y anticuerpo monoclonal anti-péptido
C conjugado a la fosfatasa alcalina (ratón) se añaden a una cubeta de reacción.
Tras la incubación, el péptido C de la muestra se une a las micropartículas
recubiertas de anticuerpo anti-péptido C y al anticuerpo anti-péptido C conjugado a
la fosfatasa alcalina para formar un complejo de sándwich. Las micropartículas se
capturan magnéticamente y las sustancias sin unir se eliminan por lavado.
En el segundo paso, la solución de substrato se añade a la cubeta de reacción. El
anticuerpo anti-péptido C conjugado a la fosfatasa alcalina (ratón) cataliza la
solución en el inmunocomplejo que queda en las micropartículas. La reacción
quimioluminiscente resultante se mide como unidades de luz relativas (RLU) con
el fotomultiplicador integrado en el sistema. La cantidad de péptido C presente en
la muestra es proporcional a las unidades de luz relativas (RLU) generadas
durante la reacción. La concentración de péptido C puede calcularse con la curva
de calibración
La muestra es inaceptable si:
 Hay burbujas en la muestra.
 La muestra no está bien mezclada después de descongelarse.
 La muestra no fue centrifugada luego de descongelarse.
 Si se transfirió la capa lipídica tras la centrifugación.
 La muestra está hemolizada.
 Uso las muestras inactivadas con calor.
EQUIPO.
 Analizador para inmunoensayo de quimioluminiscencia serie CL de
Mindray.
 Centrifuga.
MATERIAL.
 Cat.No.Péptido C211: Calibradores de péptido C, 1×2,0 ml
 de cada calibrador C0, C1 y C2.
 Cat.No.IML311: Multicontrol de inmunoensayo (L), 3×2.0 ml.
 Cat.No.IMH311: Multicontrol de inmunoensayo (H), 3×2,0 ml.
 Cat.No.IML312: Multicontrol de inmunoensayo (L), 6×2,0 ml.
 Cat.No.IMH312: Multicontrol de inmunoensayo (H), 6×2,0 ml.
 Cat.No.WB411: Búfer de lavado, 1 ×10 l.
 Cat.No.CS511: Solución de substrato, 4 ×115 ml.
 Cubeta de reacción
PROCEDIMIENTO DEL INSERTO.
Para obtener resultados óptimos con este ensayo, los operadores deben leer
detenidamente el manual de funcionamiento del sistema para informarse bien
sobre las instrucciones de funcionamiento, el control y la conservación de las
muestras, las precauciones de seguridad y el mantenimiento. Prepare también
todos los materiales necesarios para el ensayo. Antes de introducir el kit de
péptido C (CLI) en el analizador por primera vez, el frasco de reactivo sin abrir
debe volcarse suavemente al menos 30 veces para volver a suspender las
micropartículas que se han asentado durante el envío o almacenamiento.
Inspeccione visualmente el frasco para confirmar que las micropartículas están
suspendidas. Si las micropartículas permanecen adheridas al frasco, continúe
volcándolo hasta que se vuelvan a suspender por completo. Si las micropartículas
no se suspenden, se recomienda no usar ese frasco de reactivo. Póngase en
contacto con el servicio de atención al cliente de Mindray. No vuelque los frascos
de reactivo abiertos. Para este ensayo, se necesitan 10 μl de muestra para un
único análisis. Este volumen no incluye el volumen muerto del contenedor de la
muestra. Si se realizan más análisis de la misma muestra, se necesita un volumen
adicional.
FASE POST ANALITICA.
VALOR DE REFERENCIA:
Un resultado normal es entre 0.5 a 2.0 nanogramos por mililitro (ng/mL) o 0.2 a 0.8
nanomoles por litro (nmol/L). Los rangos de los valores normales pueden variar
ligeramente entre laboratorios. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o
pueden evaluar distintas muestras

Bibliografía
1. Biblioteca Nacional de Medicina. (2019). Prueba de péptido C. MedlinePlus,
aprox. 4 p.
2. Plan de Laboratorios Clínicos y Bancos Biológicos. (2009). Manual de
Obtención y Manejo de Muestras. Sevilla: Servicio Andaluz de Salud.
3. Laboratorios cibic. (2015). Laboratorios bioquímicos. Utilidad clínica de la
determinación del péptido C, 3 aprox.
4. Co., S. M.-M. (2015). China Patente nº 518057 P.R.China.