Nombre del alumno_____________________________     

Notas aclaratorias: 
Todas las preguntas y ejercicios se valorarán sobre 10. 
Todas  las siglas empleadas en las  respuestas  y todos  los  términos  utilizados en las ecuaciones  deben  ser definidos,  en 
caso contrario, la respuesta se considerará incorrecta 
No se admiten tachaduras. Si es necesario emplear algún sistema de borrador o pedir hojas adicionales 
________________________________________________________________________________________ 
PREGUNTA 1  
a) (sobre 6) El tolueno presenta un factor de capacidad de 3.50 y una altura de plato teórico de
10.6  μm  en  una  columna  de  HPLC  de  150  x2.5  mm  empaquetada  al  80%.  Si  un  compuesto  no 
retenido eluye a 1.33 min, calcular: La anchura de pico para la elución del tolueno,  la velocidad 
lineal de la fase móvil y  el flujo de la fase móvil. 

b) (sobre  2)    ¿Qué  disolvente  se  espera  que  produzca  menores  factores  de  capacidad  para  la
mayoría  de  los  solutos  en  cromatografía  en  fase  inversa,  tetrahidrofurano/agua  al  30/70  o 
metanol/agua  40/60?. Calcular. 
C o n t r ib u c ió n d e c a d a d is o lv e n t e a l a f u e r z a d e f a s e s
m ó v ile s d e c o m p o s ic ió n b in a r ia o t e r n a r ia

G rupo d is o lv e n t e S i

Agua 1 0 .2 0
I E t e r e t íli c o 2 .8

II M e ta n o l 5 .1 2.6
E ta n o l 3.6

III t e t r a h id r o fu r a n o 4 .0 4.5
V C lo r u r o d e m e t ile n o 3 .1
VI A c e to n it r ilo 5 .8 3.2
V III C lo ro fo r m o 4 .1
H e x an o 0

c) (sobre 2) Dos solutos presentan factores de capacidad adecuados pero aparecen mal resueltos
cuando se emplea una fase móvil compuesta por acetonitrilo/agua, 20/80. ¿Qué se debe cambiar? 
Proponer  nuevas condiciones para llevar a cabo la separación.  

1 
Nombre del alumno_____________________________     

PREGUNTA 2 

En la teoría cinética de la cromatografía:  

a) (sobre 5) Deducir el término  factor de capacidad a partir de la definición de velocidad media de
migración de un soluto.  

b) (sobre 5) Explicar la ecuación de Van Deemter.

2 
  Nombre del alumno_____________________________     

PREGUNTA 3 (sobre 10) 

 El ácido fórmico (ka, HA= 10‐4) se distribuye entre agua y cloroformo en función del pH, siendo kD, HA 
=  100.  Calcular  el  número  de  extracciones  sucesivas  necesarias  para  reextraer  el  50%  del  ácido 
fórmico presente  en una disolución clorofórmica, cuando se emplea una fase acuosa a pH=7. Se 
emplea un volumen de la fase acuosa que es igual al 20% del volumen de la disolución orgánica 
extraída.  

3 
Nombre del alumno_____________________________     

PREGUNTA 4. 

a)(sobre  4)    En  la  determinación  de  benceno  por  cromatografía  usando  un  detector  de 
espectrometría  de  masa,  cuando  se  empleó  el  benceno  deuterado  como  patrón  interno  se 
obtuvieron los siguientes resultados:  

Patrón [benceno], ppm [benceno Señal del benceno Señal del benceno
deuterado], ppm deuterado
1 1.0 10.0 304 2992
2 5.0 10.0 3520 6145
3 10.0 10.0 3025 2819

Calcular el factor de respuesta para el método propuesto. 

b) (sobre  6)  El  análisis  de  una  muestra  de  un  n‐hexanol  comercial  se  ha  realizado  por
cromatografía usando patrón interno (n‐pentanol). Para ello de la muestra comercial se pipeteó 1 
mL y se enrasó a 10 mL con un disolvente apropiado.  Cuando se inyecta una alícuota de 20 μL de 
esta muestra diluida conteniendo además 1.10 mmoles de n‐pentanol (I.S)  se obtienen valores de 
áreas de 1.83 y 1.12 unidades, para n‐pentanol y para n‐hexanol, respectivamente. Por otra parte, 
una alícuota de 20 μL de un patrón conteniendo 1.25 mmoles de pentanol (IS) y 1.20 mmoles de n‐
hexanol disueltos en un disolvente apropiado, dieron valores de  áreas para el n‐pentanol de 2.08 
unidades y para el n‐hexanol de 2.32 unidades. Calcular el contenido de n‐hexanol en el producto 
comercial expresado como g/mL.  

4 
Nombre del alumno_____________________________   

PREGUNTA 5. Definir: 

a) ¿Qué es un intercambiador iónico?. Tipos. Escribir un ejemplo de una reacción de intercambio y
explicar. 

b) Definir:  Selectividad  de  una  fase  móvil  en  cromatografía  líquida  de  reparto.  ¿Cómo  se
modifica?. 

c) Indicar  el  orden  de  elución  de  los  analitos  en  función  de  su  polaridad  en  cromatografía  de
reparto en fase normal. Razonar. 

d) Definir:  Coeficiente  de  reparto  en  cromatografía  de  exclusión.  Deducir  la  relación  con  el
volumen de elución. 

e) Definir límite de exclusión y de permeabilidad en cromatografía de exclusión.

5 
Nombre del alumno_____________________________     

PREGUNTA 6.  

Indicar los diferentes tipos de sistemas de ionización de masas que puede montar un sistema GC‐
MS o LC‐MS. Describir las características de los más representativos de cada tipo. 

6 
Nombre del alumno_____________________________   
PREGUNTA 7. Marcar la respuesta/as  correcta/as en cada pregunta 
1. ¿Cuál es el portador más habitual en cromatografía de gases?
 (a) helio 
 (b) nitrógeno 
 (c) argón 
___________________________________________________________________ 
2. En cromatografia de gases usando fases estacionarias no‐polares
 (a) los solutos son eluidos según disminuye su punto de ebullición 
 (b) los solutos son eluidos según aumenta su punto de ebullición  
 (c) los solutos son eluidos según disminuye su polaridad 
______________________________________________________________________ 
3. Se puede mejorar la separación de componentes en CG:
 (a) aumentando la temperatura en el punto de inyección. 
 (b) aumentando isotérmicamente la temperatura de la columna  
 (c) aumentando de forma programada la temperatura de la columna 
________________________________________ 
4. Los solutos conteniendo halógenos se detectan en CG mediante:
 (a) un detector de ionización de llama. 
 (b) un detector de captura electrónica. 
 (c) un detector de fotoionización. 
________________________________________ 
5. El índice de retención en cromatografía de gases:
 (a) relaciona el tiempo de retención de un soluto con el número de carbonos en su molécula. 
 (b) para un alcano lineal es igual a su número de átomos de carbono  
 (c) es el valor del tiempo necesario para que eluya un soluto inyectado en una columna capilar. 
________________________________________ 
6. Una inyección en split en CG se prefiere cuando:
 (a) el analito representa menos del  0.01% de la muestra. 
 (b) cuando el analito representa más del 0.10% de la muestra. 
 (c) cuando el analito contiene dos sustancias con tiempos de retención muy diferentes y así la muestra se 
analiza más rápidamente. 
________________________________________ 
7. Una inyección directamente en columna se usa:
 (a) cuando el analito está presenta en muy baja concentración. 
 (b) cuando la muestra se descompone debido a su punto de ebullición. 
 (c) cuando la muestra no se va a usar para análisis cuantitativo 
________________________________________ 
8. Comparadas con las columnas empaquetadas, las tubulares abiertas ofrecen:
 (a)  resoluciones  superiores,  menores  tiempos  de  análisis,  mayores  sensibilidades  y  mayor  capacidad  de 
muestra. 
 (b) resoluciones mayores, mayores tiempo de análisis, mejor sensibilidad y mayor capacidad de muestra. 
 (c) resoluciones mayores, menores tiempo de análisis, mayor sensibilidad y menor capacidad de muestra. 
________________________________________ 
9. En CG, la separación entre dos solutos se lleva a cabo porque:
 (a) los solutos tienen diferentes solubilidades en la fase móvil 
 (b) los solutos se volatilizan a diferentes velocidades en el inyector. 
 (c) los solutos pasan diferentes tiempos en la fase estacionaria. 
_______________________________________ 
10. Los detectores más habituales en CG son:
 (a) ionización de llama, conductividad témica, captura electrónica y masas. 
 (b) ultravioleta, fluorescencia, amperometricos y conductimétricos. 
 (c) espectrofotométricoos, índice de refracción, dispersión de luz y señales electroquímicas. 
*Las contestaciones incorrectas restan 1.0 punto

7 
Nombre del alumno_____________________________     

PREGUNTA 8 
A) En  la  separación  cromatográfica  de  dos  vitaminas  solubles  en  agua  mediante  HPLC  y  en  régimen
isocrático, un aumento del contenido de hexano en la fase móvil provoca: 
a) Un aumento de los tiempos de retención para ambas vitaminas
b) Una disminución de los tiempos de retención solo para la más soluble
c) Una disminución de los tiempos de retención para ambas vitaminas
d) Un aumento de los tiempos de retención para la más insoluble
e) No influye en los tiempos de retención por ser liposolubles

B) La formación de iones mediante impacto electrónico en espectrometría de masas se considera como una
fuente de ionización:   
a) Que utiliza iones generados previamente.
b) Que produce mucha fragmentación.
c) Que produce poca fragmentación.
d) Que utiliza una fuente láser.
e) Ninguna de las anteriores

C) Para que una proteína se retenga en una columna cromatográfica de intercambio catiónico,
a) El intercambiador puede estar en forma aniónica
b) El intercambiador debe ser neutro
c) El pH del tampón debe ser más ácido que el  pI de la proteína
d) El pH del tampón debe ser más básico que el  pI de la proteína
e) Ninguna de las anteriores es cierta

D) Para eliminar el contenido de cloruro sódico en una muestra de sangre, la técnica más apropiada será:
a) Cromatografía de exclusión molecular
b) Cromatografía  de reparto en fase normal
c) Cromatografía de afinidad
d) Cromatografía iónica
e) Cromatografía de gases

E) Se requiere determinar la pureza de un medicamento por cromatografía de gases. Para poner a punto el
método de separación habrá que optimizar, entre otras, las siguientes variables: 
a) Composición de la disolución de la fase móvil, la fase estacionaria y la temperatura del horno
b) Composición de la disolución de la fase móvil, diámetro del capilar y potencial del campo
c) Composición de la disolución de la fase móvil, la fase estacionaria y las variables del detector
d) Gradiente de temperatura, naturaleza del  portador y caudal del portador.
e) Volumen del bucle, pH de la fase móvil y gradiente de elución

F) Una  muestra  de  un  medicamento  líquido  contiene  3.20  mg  de  un  principio  puro.  Para  confirmar  su
contenido  se  analiza  y  para  ello:  se  extrae,  se  evapora  el  disolvente  y  el  residuo  se  disuelve  en  10  mL.  Se 
inyecta en un cromatógrafo y se compara la señal obtenida (13.46 unidades) con la del patrón. Si un patrón 
que  contenía  30.0  mg  del  principio  puro  en  100  mL  da  una  señal  de  18.25  unidades  ¿Cuál  ha  sido  la 
recuperación en la preparación de la muestra?  

*Las contestaciones incorrectas restan 1.2 puntos

8 
Nombre del alumno_____________________________     

9 
 Nombre del alumno_____________________________   

300 E
PREGUNTA 9) 

200

C
Señal

100 tm
D
B
A

0
0 .5 1 1.5 2.5 3 3.5 4.5 5 5. 5 6.5 7 7.5 8.5 9 9.5 10.5 11 11.5 12.5 13 13.5 14.5 15 15.5
0 2 4 6 8 10 12 14 16
tiempo (min)

Sabiendo que la columna es C18, 100 x 2.5 cm. Composición de fase móvil: metanol/agua; 70/30. Calcular: 

1) Tiempo de retención para E:

2) Tiempo de retención corregido para B:

3) Factor de capacidad para el compuesto C:

4) Resolución para el compuesto D:

10 
Nombre del alumno_____________________________   

5) Número de platos teóricos y la altura del plato teórico para el compuesto E:

6) La velocidad lineal de la fase móvil:

7) Factor de separación D/C:

8) ¿Qué efecto general tendría una disminución del % de metanol sobre los tiempos de retención?;

9) ¿Qué efecto general tendría una disminución del flujo sobre la resolución de los picos?:

10) Ordenar los compuestos del cromatograma  por orden de polaridad, de mayor a menor.

11