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PROCEDIMIENTO DE TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA EL

PROGRAMA DE VIGILANCIA DE RESISTENCIA A LOS


ANTIMICROBIANOS (RAM)
AVE, PORCINO Y BOVINO
DIRECCIÓN GENERAL DE INOCUIDAD AGROALIMENTARIA, ACUÍCOLA Y
PESQUERA

2017
Procedimiento de toma y envío de muestras para el Programa
De Vigilancia de Resistencia a los Antimicrobianos (RAM) –Ave,
Porcino y Bovino--
Dirección General de Inocuidad Agroalimentaria,
Acuícola y Pesquera
Clave: PR-TF-SM-22 Versión: 01 Fecha: Diciembre 2017 Página: 1 de 42

Índice

Página

I. Introducción ..................................................................................................................................2

II. Marco Jurídico-Administrativo ...................................................................................................3

III. Objetivo .........................................................................................................................................4

IV. Alcance .........................................................................................................................................5

V. Glosario de Términos y abreviaturas .......................................................................................6

VI. Criterios Generales .....................................................................................................................7

VII. Descripción del Procedimiento ............................................................................................... 30

VIII. Mapa del Procedimiento.......................................................................................................... 32

IX. Anexos ....................................................................................................................................... 33

X. Firmas y Cambios .................................................................................................................... 42


Procedimiento de toma y envío de muestras para el Programa
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I. Introducción

Los agentes antimicrobianos son medicamentos que se utilizan para tratar las infecciones, en
concreto las que son de origen bacteriano, y resultan fundamentales tanto en salud humana
como en sanidad animal, aunque durante los últimos años algunas bacterias han presentado
una resistencia parcial o total a varios de ellos. Este fenómeno, denominado Resistencia a los
Antimicrobianos (RAM), preocupa cada vez más tanto en el ámbito de la salud pública como
en el de la sanidad animal. Muchas de las acciones que se llevan a cabo en pro de la sanidad
animal exigen la disponibilidad y el buen uso de medicamentos veterinarios de calidad, y
sobre todo de agentes antimicrobianos. La sanidad animal es un componente clave de las
políticas de bienestar animal, de seguridad alimentaria y de inocuidad de los alimentos.

La RAM se refiere a los microorganismos –bacterias, hongos, virus y parásitos– que se han
vuelto resistentes a sustancias antimicrobianas. Este fenómeno, aunque puede ocurrir de
manera natural a través de la adaptación de los microbios al medio ambiente, se ha visto
exacerbado por el uso inadecuado y excesivo de antimicrobianos

De acuerdo a estimaciones de la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y


la Agricultura (FAO), alrededor de 700, 000 personas mueren cada año a causa de
infecciones debidas a la RAM. En todo el mundo, la RAM supone una amenaza importante
para la inocuidad y seguridad alimentarias, los medios de subsistencia, la sanidad y el
bienestar de los animales y el desarrollo económico y agrícola. Tan sólo, la intensificación de
la producción agrícola ha llevado a una utilización cada vez mayor de antimicrobianos, un uso
que se espera que aumente en un 67 por ciento para 2030.

Es importante mencionar que el 60% de los agentes patógenos peligrosos para el hombre son
de origen animal: hombres y animales tienen en común bacterias patógenas, de tal modo que
es indispensable combatirlas y prevenirlas a nivel nacional, regional y mundial.

En los últimos decenios, la RAM ha representado una amenaza creciente para el tratamiento
eficaz de una gama cada vez mayor de infecciones causadas por bacterias, parásitos, virus y
hongos. La RAM menoscaba la eficacia de los fármacos antibacterianos, antiparasitarios,
antivíricos y antifúngicos, lo que dificulta, encarece e incluso imposibilita el tratamiento de los
pacientes. Las consecuencias afectan principalmente a los pacientes vulnerables, dado que
pueden dar lugar a enfermedades prolongadas y a una mayor mortalidad.
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II. Marco Jurídico-Administrativo

Ley Federal de Sanidad Animal. Art. 6 secciones II, XIII, XXVII, XXIX, XXX, LIII, LXIX y LXXI

Ley General de Responsabilidades Administrativas. DECRETO por el que se expide la Ley


General del Sistema Nacional Anticorrupción; la Ley General de Responsabilidades
Administrativas, y la Ley Orgánica del Tribunal Federal de Justicia Administrativa

Reglamento de la Ley Federal de Sanidad Animal, art. 15, 26, 225 y 227

Código Sanitario para los Animales Terrestres 2016, OIE, capítulos 6.6 a 6.10

Manual de Procedimientos que establece los criterios, requisitos y mecánica de operación que
aplicará la Dirección General de Inocuidad Agroalimentaria, Acuícola y Pesquera (DGIAAP) para la
Autorización de Médicos Veterinarios Responsables en el área de Establecimientos Tipo
Inspección Federal (MVRATIF)
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III. Objetivo

Servir como herramienta a Médicos Veterinarios Oficiales y Responsables Autorizados adscritos a


establecimientos de sacrificio de las especies aviar, porcina y bovina Tipo Inspección Federal en la
selección, toma y envío de muestras obtenidas del intestino delgado de pollos, gallinas, pavos, cerdos
y bovinos en el marco del Programa de Resistencia a los Antimicrobianos, brindando claridad y
certeza en el muestreo y reduciendo la incertidumbre de los resultados que serán obtenidos, a fin de
encontrar cepas de las bacterias Salmonella spp., Escherichia coli y Campylobacter spp. resistentes a
antimicrobianos de uso común en la Medicina Veterinaria y Medicina Humana para su posterior
secuenciación genética.
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IV. Alcance

Aplicará a Unidades de Producción que proveen de aves, cerdos y bovinos a los establecimientos TIF
de sacrificio de estas especies a nivel nacional, mediante el muestreo que realizarán Médicos
Veterinarios Oficiales y Responsables Autorizados TIF en este tipo de establecimientos. El muestreo
se encuentra dirigido al aislamiento de Salmonella spp, Escherichia coli y Campylobacter spp. en los
ciegos de los animales muestreados, para la determinación de su resistencia a agentes
antimicrobianos de uso común en la Medicina Veterinaria y Medicina Humana, así como de los genes
de resistencia asociados.

Los resultados del programa de muestreo no generarán ningún tipo de disposición sobre los
productos, teniendo alcances de concientización en el uso de antimicrobianos en unidades de
producción, por lo que la trazabilidad es un aspecto importante dentro del Programa.
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V. Glosario de Términos y abreviaturas

Establecimiento Tipo Inspección Federal: Las instalaciones en donde se sacrifican animales y


están sujetas a regulación de la Secretaría en coordinación con la Secretaría de Salud en el ámbito
de competencia de cada Secretaría y cuya certificación es a petición de parte.

Lote: Conjunto de animales agrupado durante un periodo de tiempo determinado bajo las mismas
condiciones, identificado de origen con un código específico;

Médico Veterinario Oficial: Profesionista de la Medicina Veterinario asalariado por la Secretaría.

Médico Veterinario Responsable Autorizado TIF: Profesionista autorizado por la Secretaría, para
prestar sus servicios de coadyuvancia y emisión de documentos en establecimientos TIF destinados
al sacrificio y procesamiento, u otros que determine la Secretaría, para garantizar que se lleve a cabo
lo establecido en las disposiciones que derivan de la Ley Federal de Sanidad Animal. Dicho
profesionista fungirá como responsable ante la Secretaría.

Persona Auxiliar: Persona que conoce el procedimiento de toma de muestra y apoya al Médico
Veterinario Oficial o Médico Veterinario Responsable Autorizado TIF para realizar el muestreo.

Muestra: Porción extraída de un todo que conserva la composición del mismo y a partir de la cual se
pretende conocer la situación del todo del que procede mediante a realización de estudios o análisis.

Unidad de Producción: Espacio físico e instalaciones en las que se alojan especies animales, para
su cría, reproducción y engorda con el propósito de utilizarlas para autoconsumo, abasto o
comercialización;

CENASA: Centro Nacional de Servicios de Diagnóstico en Salud Animal


CNRPyC: Centro Nacional de Referencia de Plaguicidas y Contaminantes
DETIF: Dirección de Establecimientos Tipo Inspección Federal

DGIAAP: Dirección General de Inocuidad Agroalimentaria, Acuícola y Pesquera


DGSA: Dirección General de Salud Animal
DSCP: Dirección de Servicios y Certificación Pecuaria
RAM: Resistencia a Antimicrobianos.
TIF: Tipo Inspección Federal
UP: Unidad de Producción
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VI. Criterios Generales

Los días de muestreo serán programados por la DETIF y hechos del conocimiento, así como el inicio
del muestreo, al Supervisor TIF quien remitirá esta información al Médico Veterinario Oficial (MVO) o
Responsable Autorizado TIF (MVRATIF) en el establecimiento. En caso de que en el día programado,
exista alguna eventualidad que impida el muestreo, el MVO o MVRATIF deberá llevar a cabo el
muestreo en el día siguiente de actividad del establecimiento, notificándolo al Supervisor TIF y a la
DETIF, contemplando los tiempos de envío y recepción de las muestras al Laboratorio y los días de
labor del mismo, evitando la toma y envío de muestra los días jueves y viernes, cabe hacer mención
que deberá documentarse las causas que eviten la toma de la muestra con la programación indicada.

El número de muestras será constante para cada mes, determinado para cada establecimiento,
debiendo cumplir un mínimo de número de muestras mensuales. Si durante el mes no se llevaron a
cabo actividades de sacrificio, el MVO o MVRATIF lo debe notificar al Supervisor para que éste
genere un oficio dirigido al Director de Establecimientos TIF, en donde asiente que la(s) muestra(s)
programada(s) no fueron tomadas por tal motivo y en su caso, por otro que impida el muestreo.

Si durante la programación del muestreo el sacrificio se encuentra suspendido, pero existe sacrificio
en otro día del mes correspondiente de muestreo, el MVO o MVRATIF deberá tomar la(s) muestra(s)
notificándolo al Supervisor y a la DETIF.

a) Selección de la unidad de producción a muestrear

La selección de la Unidad de Producción (UP) a muestrear se hará por un método aleatorio simple.
Este tipo de muestreo es un diseño en el cual cada muestra posible tiene igual probabilidad de
selección:

Permite la equis-probabilidad de elección de cualquier elemento, y la independencia de selección de


cualquier otro. En este procedimiento se extraen al azar un número determinado de elementos, ‘n’,
del conjunto mayor ‘N’ o población. En consecuencia, cada elemento de la población tiene la misma
probabilidad de ser seleccionado en la muestra (n/N).

Por definición, cada elemento (i) de los N de la población tiene igual probabilidad de ser seleccionado
(pi = n/N). Una forma práctica es elegir n de a uno y sin reponer sorteando n números aleatorios
distintos entre 1 y N, usando una “tabla de números aleatorios” o un programa de cómputo (por
ejemplo la función “ALEATORIO” de Excel®).
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En este caso utilizaremos el formato de selección de números aleatorios de Excel® que se encuentra
disponible en el micrositio http://sdg.senasica.gob.mx/acceso.asp, en donde se colocará el número
total de UP que ingresarán animales a sacrificio en el establecimiento el día en el que se programa el
muestreo. El número resultado de la aplicación de la fórmula, será el número de UP a muestrear con
respecto al listado de programación de recepción (Hoja de sacrificio diaria) con la que se realiza la
inspección ante mortem.

Para poder hacer la elección de la unidad de producción, con respecto al número aleatorio resultante,
primero deberá hacerse un listado de las unidades de producción de origen de los animales a
sacrificar en el día de muestreo, o bien, valerse de la orden de sacrificio programada.

Ejemplo:

1. Tener claro la cantidad de UP que ingresarán animales el día de muestreo; así como su
nombre o Razón Social.

En nuestro ejemplo el total de UP es 5

2. Utilizar el formato de números aleatorios y colocar el total de UP que ingresaran animales a


sacrificio el día en que se encuentra programado el muestreo.
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3. El número aleatorio resultante, será la UP de la que se muestrearán las aves, de acuerdo al


listado de nuestro ejemplo:

En caso de que en muestreos subsecuentes, se observe que la UP a muestrear se repite a


muestreos anteriores y existe disponibilidad de seleccionar UP diferentes, deberá correr nuevamente
la fórmula de números aleatorios. Esto con la finalidad de llevar a cabo el muestreo en la mayor
cantidad de UP existentes.

b) Identificación de las muestras

Debe seguir la siguiente nomenclatura:

1. Utilizar las iniciales RAM


2. Seguidas de la especie. AVE (aviar), POR (porcino) y BOV (bovino).
3. Luego las iniciales TIF seguidas del número de establecimiento sin espacios
4. Finalizar con el número consecutivo de la muestra a dos dígitos

Ejemplos:

RAM-AVE-TIFA188-01 / RAM-POR-TIF240-08 / RAM-BOV-TIF111-02

En caso de que la muestra sea notificada por el Laboratorio como no viable para su proceso, deberá
tomar una nueva muestra, ésta debe identificarse con el mismo consecutivo de la muestra que no fue
viable seguida de la letra “R”.

Ejemplos:

RAM-AVE-TIFA188-01 Notificada como no viable


RAM-AVE-TIFA188-01R Identificada con el mismo número/Re muestreo

RAM-POR-TIF240-08 Notificada como no viable


RAM-POR-TIF240-08R Identificada con el mismo número/Re muestreo
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b. Selección de las muestras

Una vez identificada la UP a muestrear, se procederá a autorizar el sacrificio de manera rutinaria, sin
embargo será importante que en acuerdo con el establecimiento se pueda realizar lo más pronto
posible el sacrificio de la UP seleccionada con el fin de poder enviar la muestra el mismo día de la
obtención.

La UP seleccionada será identificada desde su inicio y se deberá notificar al encargado del


establecimiento que haga de conocimiento cuando inicia el sacrificio de ese lote.

En el caso de bovinos será requisito que los animales del lote se encuentren identificados con arete
que contenga código SINIDA de origen, con la finalidad de contar con datos de trazabilidad hasta la
unidad de origen.

b.1. Aves

El lote deberá ser dividido en tres tercios con el objetivo de tomar submuestras al inicio (1er tercio), a
la mitad (2º tercio) y al final del lote (3er tercio), como se describe a continuación.

Cada muestreo estará compuesto por un sub muestreo de 5 paquetes viscerales (intestinos)
pertenecientes a un mismo lote, éstas corresponderán a la selección al azar de:

* 2 paquetes, no consecutivos, en el primer tercio del lote sacrificado.


* 1 paquete en el segundo tercio del lote sacrificado.
* 2 paquetes, no consecutivos, en el tercer tercio del lote sacrificado.

El paquete visceral se tomará inmediatamente una vez que éste es exteriorizado de la canal. Si la
víscera seleccionada se encuentra visiblemente contaminada con alimento, ingesta, heces, bilis, etc.,
seleccione otra al azar en el mismo tercio del lote.

La obtención y/o manipulación de los paquetes viscerales deberá hacerse de manera sanitaria,
valiéndose de un auxiliar para llevar a cabo la obtención de la misma, en la manera que se describe
más adelante. Deberá hacerse la colección de los cinco paquetes viscerales y después proceder a la
toma de muestra.

b.2 Cerdos y bovinos

El (los) animal(es) a muestrear se seleccionará(n) mediante el uso del formato de selección de


números aleatorios de Excel® que se encuentra disponible en el micrositio
http://sdg.senasica.gob.mx/acceso.asp, en donde se colocará el número mínimo (1) y máximo de
animales a sacrificar en el establecimiento, provenientes de la UP seleccionada el día en el que se
programa el muestreo. Deberá tomarse el tracto intestinal intacto como se describe más adelante. Si
en el tracto intestinal seleccionado es visible la contaminación con alimento, ingesta, heces, bilis, etc.,
deberá seleccionar el siguiente que no esté contaminado.
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c. Procedimiento de muestreo

c.1. Materiales

 Campo estéril desechable de 50x70 cm Para el muestreo en aves y cerdos

 Guantes de látex estériles (1-2 pares)

 Bolsa estéril para contener la muestra

 Gasas estériles (2-8)

 Abatelenguas estéril (1-2) Sólo para bovino

 Cintillos plásticos (10) Sólo para aves

 Alcohol isopropílico al 70%

 Marcador de tinta indeleble

 Tijeras y pinzas estériles

 Caja térmica (hielera)

 Bolsas tipo ziploc nuevas. Medidas mínimas de 16.5 cm x 14.9 cm (5) Obligadas en aves

 Refrigerantes (1 ó 2)

 Formato de registro de envío de muestras (Clave FR-SM-LAB-IDM-00/14)

 Guías de embarque (paquetería)


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c.2. Metodología

c.2.1 Previo a la toma

Para la preparación y toma de muestra es necesario contar con una persona auxiliar, que apoye en
todo momento, cuidando la integridad de la muestra.

Es de suma importancia utilizar instrumentos limpios y desinfectados, procurando un ambiente lo más


aséptico posible en el sitio de colección de la muestra; así como de la aplicación de buenas prácticas
durante la toma de la muestra que eviten la contaminación cruzada de la misma o de los materiales,
con superficies no estériles.

En el Anexo 1 del presente se encuentra el procedimiento de lavado de manos y en el Anexo 2 el


procedimiento de colocación de guantes estériles.

a) Prepare el área de la toma de muestra, siguiendo los siguientes pasos:

1. Verifique que el material se encuentra completo (contemple el uso de más materiales en caso de
algún incidente). Se debe asegurar que los geles refrigerantes fueron colocados en congelación por lo
menos 24 horas antes de la toma de muestra.

2. La superficie donde se llevará a cabo la toma de muestra deberá ser limpiada y desinfectada por
personal del establecimiento, garantizando que la superficie se encuentra seca y libre de residuos de
las soluciones utilizadas.

Para el caso del muestreo en bovinos: No será necesaria un superficie específica para la toma de
muestra, ésta se hará en el carro de vísceras en un área sin tránsito de personal, que permita
manejar los materiales estériles con prácticas que eviten la contaminación de la muestra. No
obstante, los materiales de muestreo deben encontrarse accesibles para la toma.

3. Lave y desinfecte sus manos y disponga el material en la superficie dónde será tomada la muestra
considerando un área libre (mínima 50 x 50 cm) para llevar a cabo la toma. Los materiales deben
permanecer en su empaque individual.

4. Identifique la bolsa estéril en donde será colectada la muestra, la información necesaria será la
fecha de toma de la muestra y la identificación de la misma.

Antes del uso de pinzas y tijeras, éstas deben encontrarse limpias y esterilizadas. La limpieza
constará de la eliminación de partículas gruesas y el uso de agua y agentes detergentes para eliminar
la suciedad. Para la esterilización de tijeras y pinzas, en caso de ser de materiales inoxidables, podrá
hacerse uso del esterilizador de circulación de agua caliente (≥ 82.5° Celsius) ubicado en la mesa de
inspección, sumergiendo en su totalidad las mismas durante 30 segundos o bien hacer uso de los
métodos que el establecimiento lleve a cabo con otros utensilios para este fin.
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5. Si las pinzas y tijeras serán esterilizadas poco antes de la toma utilizando el esterilizador u otros
métodos, colóquelas sobre una gasa estéril en la superficie desinfectada para la toma. Evite tocar la
gasa con las manos, lleve a cabo buenas prácticas, con el fin de evitar una contaminación cruzada.

6. Únicamente para aves. Con ayuda de un auxiliar, desinfecte los cintillos plásticos, puede hacer uso
de alcohol isopropílico o bien de los métodos que el establecimiento lleve a cabo en otros utensilios
para este fin. Para hacer uso del alchohol isopropílico al 70%, coloquese guantes desechables no
estériles y tome los cintillos, el auxiliar deberá rociar o verter alcohol isopropílico sobre los cintillos,
procure que el alcohol cubra toda la superficie de los mismos, coloque los cintillos sobre una gasa
estéril en la superficie desinfectada para la toma. Evite tocar la gasa con las manos, lleve a cabo
buenas prácticas, con el fin de evitar una contaminación cruzada.

Para proceder a la toma de la muestra los materiales deberán estar completos y el área de toma
preparada con un ambiente, instrumentos y materiales limpios, desinfectados y esterilizados. La
superficie para la toma de muestra deberá estar limpia y desinfectada, haciendo uso de los materiales
y soluciones con las que cuenta el establecimiento, asegurando la estabilidad de la superficie.

b) Colecte el (los) ciego (s)

7. Lave y desinfecte sus manos, colocándose los guantes estériles de acuerdo al Anexo 2.

8. La persona que le auxilie deberá lavarse y desinfectarse las manos.

Aves

Cada muestra estará conformada de 5 pares de ciegos provenientes de 5 aves originarias de un


mismo lote.

 Seleccione la canal de la que obtendrá el paquete visceral, retire el paquete visceral evitando
la contaminación de los guantes con superficies u objetos. En caso de requerir corte, la
persona auxiliar deberá hacerlo con tijeras o cuchillo esterilizado.

 La persona auxiliar deberá abrir por la superficie externa, una bolsa tipo ziploc nueva para que
deposite el paquete visceral. La persona auxiliar deberá sellar la bolsa y colocarla en el área
de muestreo.

Si la víscera seleccionada se encuentra visiblemente contaminada con alimento, ingesta, heces, bilis,
etc., seleccione otra al azar en el mismo tercio del lote. Cambie los guantes utilizados por otros
guantes, pudiendo ser no estériles, en cuyo caso deberán ser desinfectados con alcohol ispopropílico
al 70% (Anexo 4).

 En caso de contaminación de los guantes con alimento, ingesta, heces, bilis, etc. deberá hacer
el cambio por otros guantes, pudiendo ser no estériles, en cuyo caso deberán ser
desinfectados con alcohol ispopropílico al 70% (Anexo 4).
Repita nuevamente los pasos hasta completar los cinco paquetes viscerales.
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Porcinos
 Seleccione aleatoriamente un tracto intestinal intacto del área de selección de muestra (área
de inspección de víscera). Si en el tracto intestinal seleccionado es visible la contaminación
con pienso, ingesta, heces o bilis, podrá seleccionar el siguiente que no esté contaminado.

 Dirija el intestino seleccionado al área de toma de muestra.

Bovinos
 Seleccione aleatoriamente un tracto intestinal intacto del área de selección de muestra (área
de evisceración). Si en el tracto intestinal seleccionado es visible la contaminación con pienso,
ingesta, heces o bilis, podrá seleccionar el siguiente que no esté contaminado.

c.3.2 Toma de muestra

Una vez preparada el área de obtención de muestras, listos los materiales a utilizar y seleccionado(s)
el (los) ciego (s), proceda a la toma de muestra.

9. Tanto la persona auxiliar como el Médico Veterinario Oficial o Médico Veterinario Responsable
Autorizado TIF que toma la muestra, deberán lavarse y desinfectarse las manos de acuerdo al Anexo
1. El auxiliar deberá colocar el campo estéril en la superficie libre de la mesa para hacer la toma de
muestra evitando tocar la superficie estéril del campo (Anexo 3), asimismo, retirará el empaque de los
guantes estériles, evitando su contaminación y disponiéndoles a un borde del campo estéril para su
colocación.

10. Colóquese los guantes estériles de acuerdo al Anexo 2.

Aves

I. La persona auxiliar deberá abrir la bolsa ziploc plegando la cara externa para que el Médico
Veterinario Oficial o Médico Veterinario Responsable Autorizado TIF tome el paquete visceral
contenido en la bolsa.

II. Retire el paquete visceral de la bolsa tipo ziploc y separe el mesenterio de los sacos ciegos
(Imagen 1). Obsérvense los diagramas 1 y 2 para orientar la localización de las estructuras
anatómicas.
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Diagrama 1
E. esófago, Eg. Estómago glandular o proventrículo B. buche, M. molleja, H. hígado, P. páncreas, Int. Intestino delgado,
Ig. Intestino grueso, C. ciegos, Ur. Uréter, O. oviducto (hembras), Cl. cloaca.

Diagrama 2
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Imagen 1
III. Haga la separación de cada saco ciego utilizando la misma mano (es decir, utilice la misma mano
para manipular los ciegos y con la otra separe las demás estructuras anatómicas) y desplace con
ésta misma el contenido cecal hacía el apéndice de cada ciego.

IV. Con ayuda de la persona auxiliar tome una gasa estéril, ésta deberá ser humedecida con alcohol
isopropílico al 70%, limpie suavemente con la gasa el área en el ciego dónde se realizará el corte,
aproximadamente a 1 cm debajo de la unión ileo-cecal.

V. Coloque un cincho de plástico en cada saco ciego, 2 cm debajo de la unión ileo-cecal (Imagen 2).

Imagen 2
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VI. Corte entre la unión íleo-cecal y el cincho, en cada saco ciego (Imagen 3), cuidando que las tijeras
permanezcan en el campo estéril.

Imagen 3

VII. La persona auxiliar abrirá la bolsa estéril de acuerdo al Anexo 6.

VIII. Deposite los ciegos dentro de la bolsa. Las muestras recogidas de cada canal se colocarán en la
misma bolsa estéril y se someterán a una muestra compuesta.
Para el muestreo de pavos:

Ambos ciegos deben colectarse sin drenaje. Sin embargo, si los ciegos son demasiado grandes para
caber en el recipiente de la muestra, drene el contenido cecal en la bolsa estéril como sigue:

* Con ayuda de la persona auxiliar tome una gasa estéril, ésta deberá ser humedecida con alcohol
isopropílico al 70%, limpie suavemente la parte distal del ciego. El auxiliar deberá abrir la bolsa estéril
de acuerdo al Anexo 6. Coloque el ciego sobre la bolsa estéril abierta y cuidadosamente corte una
pequeña abertura en el extremo del ciego para dejar que el contenido sea vertido dentro de la bolsa
de colección. Repita este proceso para los demás ciegos obtenidos.

IX. Repita los pasos I a VIII hasta completar la colección de los 5 pares de ciegos.

X. Una vez colocadas las 5 submuestras en la bolsa estéril, ciérrela de acuerdo al Anexo 7.
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Cerdo

I. Sujetar el ápice del ciego con una mano y separar suavemente rompiendo el tejido conectivo con la
otra mano. Para mayor referencia de como es y donde se ubica el ciego en porcino observar los
diagramas 3 y 4. Es posible que se necesiten tijeras para cortar el tejido conectivo. Continuar
sujetando el ciego con la misma mano en toda la recolección de la muestra.

Diagramas 3 y 4
Procedimiento de toma y envío de muestras para el Programa
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Porcino y Bovino--
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II. Eleve el ápice (Imagen 4) para permitir que el contenido fluya hacia el cuerpo principal del ciego.

Imagen 4. Elevar el ápice. Obtenido de FSIS DIRECTIVE 10100.1

III. Vierta el alcohol isopropílico sobre el ápice del ciego en el sitio de incisión propuesto. Deje reposar
durante 10 segundos y limpie una vez con una gasa limpia estéril.

IV. Usando tijeras, haga una incisión (Imagen 5) de una pulgada en el ápice del ciego a lo largo de la
banda cecal.

Imagen 5. Hacer una incisión. Obtenido del FSIS DIRECTIVE 10100.1

NOTA: Usar otro par de tijeras si el primer par viene contaminado o si estas se cayeron durante el
curso de la recolección de muestras.
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V. Coloque el cuerpo principal del ciego sobre el borde de la mesa (Imagen 6). Coloque la bolsa
estéril para muestra abierta debajo del ciego.

Imagen 6. Colocar el cuerpo principal sobre el borde. Obtenido del FSIS DIRECTIVE 10100.1

VI. Dirigir cuidadosamente la incisión sobre la bolsa estéril de la muestra para tomar los contenidos
cecales y evitar el derrame de contenidos en el piso. Incline lentamente el ciego hacia abajo para
permitir que el contenido cecal fluya libremente en la bolsa estéril.

NOTA: Si no es posible obtener suficiente contenido cecal mediante el vertido, use la mano libre para
extraer el contenido cecal del ciego, a través del área de la incisión y en la bolsa estéril de la muestra.
No permita que el ciego entre en contacto con la superficie interna de la bolsa estéril de la muestra.

Otra opción para la recolección de muestras si no hay auxiliar disponible y la consistencia del
contenido cecal lo permite, es:

Inserte la punta de una jeringa estéril de 60 cc a través del sitio de la incisión y en el ciego.

Retire el émbolo de la jeringa y retire al menos 30 ml de contenido cecal en la jeringa. Presione


lentamente el contenido de la jeringa en la bolsa estéril de la muestra.

No permita que la punta de la jeringa o catéter entre en contacto directo con la superficie interna de la
bolsa estéril de la muestra.
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VI. La bolsa estéril con la muestra debe estar ¼ a ½ lleno, conteniendo un mínimo de 30 ml. Las
manos no deben tener contacto con la superficie interna de la bolsa estéril. Cerrar la bolsa de
acuerdo al Anexo 7.

VII. Deseche el material de muestreo desechable (toallitas, almohadillas, depresor lingual (si se usa),
jeringa de 60cc (si se usó) y guantes) dentro de un recipiente de basura apropiado.

Bovino

I. Sujete el ápice del ciego con una mano y separe suavemente rompiendo el tejido conectivo con la
otra mano. Para mayor referencia de como es y donde se ubica el ciego en bovino observar el
diagrama 5. Las tijeras pueden ser necesarias para cortar a través del tejido conectivo. Continúe
sujetando el ciego con la misma mano en toda la recolección de muestras.

Diagramas 5
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II. Eleve el ápice (Imagen 7) para permitir que el contenido fluya hacia el cuerpo principal del ciego.

Imagen 7. Elevar el ápice. Obtenido del FSIS DIRECTIVE 10100.1

III. Vierta el alcohol isopropilico sobre el ápice del ciego en el área (sitio) de incisión seleccionado.
Deje reposar por 10 segundos.

IV. Limpie el área una vez con una gasa estéril

V. Usando las tijeras, haga una incisión longitudinal (Imagen 8) de 3 pulgadas en el ciego para que el
contenido cecal sea fácilmente visible.

Imagen 8. Hacer una incisión. Obtenido del FSIS DIRECTIVE 10100.1

Nota: Use un segundo par de tijeras, si el primer par se contamina o se deja caer durante la
recolección de la muestra
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VI. Recoger al menos 30 ml (Imagen 9) del contenido cecal utilizando uno de los siguientes métodos,
dependiendo de la consistencia del contenido cecal

Imagen 9. Obtener 30 ml de muestra. Obtenido del FSIS DIRECTIVE 10100.1

Si el contenido es de consistencia pastosa: inserte un abatelenguas en el ciego, retire el contenido


cecal y coloque el contenido en la bolsa estéril para la muestra. Repetir 3-5 veces hasta que se
recolecten al menos 30ml de contenido cecal.

Si el contenido es de una consistencia semi-acuosa: Coloque el ciego sobre el borde del área de
muestreo. Usando un asistente o auxiliar, coloque la bolsa estéril para muestra abierta debajo del
ciego y dirija el área de la incisión hacia abajo para permitir que el contenido cecal fluya fuera del sitio
de incisión y dentro del recipiente. El contenido cecal debe fluir libremente en la bolsa estéril para la
muestra mientras se evitan derrames.

No permita que el ciego entre en contacto directo con la superficie interior de la bolsa estéril para la
muestra.

Si el contenido es de una consistencia acuosa: Inserte la punta de una jeringa estéril con un
catéter de 60cc a través del sitio de la incisión y en el ciego. Retire el embolo de la jeringa y extraiga
al menos 30 ml de contenido cecal de la jeringa. Presione lentamente el contenido de la jeringa a la
bolsa estéril para la muestra

No permita que la punta de la jeringa entre en contacto directo con la superficie interna de la bolsa
estéril para la muestra.
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VII. Cierre firmemente la bolsa estéril de la muestra como se muestra en el Anexo 7. El recipiente
debe estar ¼ a ½ lleno, conteniendo un mínimo de 30 ml.

VIII. Desechar el material de muestreo usado (toallitas, almohadilla de plástico, depresor lingual [si se
utiliza], jeringa de 60 cc [si se utiliza] y guantes de examen) en un recipiente de basura apropiado.

c.2.3 Embalaje y envío

Coloque la bolsa estéril de colección con las muestras y el (los) refrigerantes suficientes para su
conservación durante el envío y remita por paquetería al Centro Nacional de Servicios de Diagnóstico
en Salud Animal (CENASA), con dirección en Km 37.5 Carretera Federal México-Pachuca. C.P.
55740, Tecámac, Estado de México. Tel. (55) 59051000, Ext. 53002.

Se deberá asegurar que la cantidad de refrigerantes sea suficiente para conservar una temperatura
de refrigeración durante el envío hasta la recepción de la muestra en el laboratorio.

Imagen 10

El contenedor deberá enviarse adjuntando la(s) hoja(s) de identificación de muestras oficiales para
envío a laboratorio del Sistema TIF que se encuentra disponible en el micrositio de comunicación
interna, con clave FR-SM-LAB-IDM-00/14 (Anexo 8). Será preferible que la(s) hoja(s) de
identificación se encuentre(n) dentro de la hielera, protegida(s) del ambiente de humedad que será
generado por el uso de refrigerantes, colocando únicamente en el área externa del embalaje la
información de remitente y destinatario (Imagen 10).
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No deben transcurrir más de 3 horas entre la toma de muestra y su envío a laboratorio, y no se debe
rebasar las 48 horas entre el envío y la recepción de las muestras en el mismo. La temperatura de
envío será de refrigeración.

En caso que no sea posible enviar la muestra el mismo día de muestreo, ésta podrá conservarse en
refrigeración y enviarse a la mañana del día siguiente, sin que se rebasen las 48 hrs desde la toma de
muestra hasta su llegada al laboratorio. Evitando, para estos casos, envíos los días jueves y viernes.

d. Notificación y seguimiento

El laboratorio recibirá las muestras y notificará de manera electrónica al MVO o MVRATIF, al


Supervisor TIF correspondiente si éstas no cumplen con las condiciones para su proceso. El
laboratorio desechará las muestras y su información, no obstante generará el registro de éste hecho.
El MVO o MVRATIF deberá colectar nuevamente las muestras en el día siguiente de actividad del
establecimiento una vez notificada la inconsistencia, comunicándolo al Supervisor TIF y a la DETIF,
contemplando los tiempos de envío y recepción de las muestras al Laboratorio y los días de labor del
mismo, evitando la toma y envío de muestra los días viernes.

El laboratorio procesará las muestras para la identificación, aislamiento y detección de resistencia a


los antimicrobianos dirigiendo los resultados al nivel central.

Para cualquier resistencia a antimicrobianos detectada en los resultados, la DETIF coordinará al


Supervisor TIF, quien dará seguimiento al caso al solicitar al MVO o MVRATIF la investigación de
trazabilidad de las muestras. Una vez que ésta información sea conjuntada, el Supervisor TIF remitirá
la documentación de trazabilidad dirigiéndola a la DETIF apegándose para ello en los requisitos de
trazabilidad utilizados para el Programa Nacional de Residuos Tóxicos y Contaminantes con
información documental del origen de la UPP (granja) de donde se obtuvo la muestra.

La información de trazabilidad debe ser enviada por el Supervisor TIF a la DETIF en un máximo de 7
días hábiles contados a partir de la solicitud emitida. La información será remitida de manera
electrónica y física.

e. Interpretación de Resultados

El Laboratorio emitirá los resultados de acuerdo a su interpretación en las pruebas de sensibilidad a


antimicrobianos, utilizando las categorías de: Sensible (S), Intermedio (I) y Resistente (R) para cada
uno de los antibióticos a los que se expuso la bacteria aislada.

En caso de detección en los resultados de las categorías “R”, se solicitará la trazabilidad


correspondiente. La DETIF podrá hacer solicitudes de trazabilidad si a la interpretación se detecta
alguna tendencia relevante.
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f. Actividades fuera del Establecimiento TIF

Como parte de la coordinación interlaboratorios participantes, una vez que se presenten detecciones,
de manera rutinaria el CENASA enviara los cultivos bacterianos de éstos hallazgos al Centro
Nacional de Referencia de Plaguicidas y Contaminantes (CNRPyC) para su secuenciación genómica.

El CNRPyC desarrollará la secuenciación genómica de la bacteria presente en la muestra y


conjuntará en un banco de datos la información que arrojen los resultados.

En todo momento ambos laboratorios podrán solicitar información complementaria al Establecimiento


TIF de donde se originen los hallazgos por medio de la DETIF.

g. Responsabilidades:

g.1 De la Dirección de Establecimientos TIF (DETIF)


a) Enviar la calendarización de muestreos al Supervisor TIF.
b) Notificar el inicio y cierre de muestreo anual de RAM al Supervisor TIF.
c) Mejorar las herramientas de implementación de los procedimientos de muestreo.
d) Dar seguimiento al programa de muestreo.
e) Recibir resultados de laboratorio con hallazgo y crear una base de datos.
f) Notificar resultados de hallazgo de resistencia a los antimicrobianos y solicitar al Supervisor la
trazabilidad de las unidades de origen de animales en los que se detectó resistencia
antimicrobiana.
g) Proveer de materiales para el desarrollo del muestreo.

g.2 Del Supervisor TIF


a) Recibir y distribuir la calendarización de muestreos que reciba desde la DETIF, a los MVO o
MVRATIF responsables en cada establecimiento TIF donde se llevará a cabo el muestreo.
b) Verificar la implementación del programa en sus visitas de supervisión, así como su
seguimiento a fin de asegurar su correcto desarrollo.
c) Recibir la notificación de resultados con hallazgo de resistencia a los antimicrobianos desde la
DETIF y conjuntar la información de trazabilidad para su envío.
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d) Notificar a la DETIF cualquier inconsistencia en el muestreo, así como de las circunstancias


que no permitan la toma de muestras.
e) Identificar las necesidades que surjan y limiten la implementación del muestreo, llevando a
cabo acciones de solventación, en el ámbito de su competencia, así como la notificación a la
DETIF en caso necesario.
f) Recibir notificaciones del Laboratorio sobre muestras no viables y dar seguimiento con el MVO
o MVRATIF en el establecimiento para la toma de nuevas muestras.

g.3 Del MVO o MVRATIF


a) Recibir la calendarización de los muestreos por parte del Supervisor.
b) Notificar al establecimiento sobre el inicio de muestreo de RAM.
c) Hacer la toma y envío de muestras de acuerdo a lo establecido en el presente Procedimiento.
d) Recibir la notificación de resultados con hallazgo de resistencia a los antimicrobianos desde la
DETIF y Supervisor TIF y conjuntar la información de trazabilidad para su envío al Supervisor
TIF.
e) Dar seguimiento a la programación de muestreo.
f) Informar al Supervisor TIF cualquier inconsistencia en el muestreo, así como de las
circunstancias que no permitan la toma de muestras.
g) Recibir notificaciones del Laboratorio sobre muestras no viables y llevar a cabo la nueva toma
de muestras.

g.4 Del Laboratorio (CENASA)


a) Recibir las muestras del Programa.
b) Notificar al MVO o MVRATIF, al Supervisor y a la DETIF las muestras que no son viables para
su análisis.
c) Llevar a cabo los análisis alineados a las recomendaciones internacionales para la detección
de resistencia a los antimicrobianos.
d) Validar, en su caso, las metodologías de diagnóstico en RAM.
e) Emitir la totalidad de los resultados y enviarlos al nivel central: correos
aurelio.hernandez@senasica.gob.mx y pamela.jimenez@senasica.gob.mx
DGSA-DSCP: correo rogelio.estrada@senasica.gob.mx
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f) Remitir los aislamientos bacteriológicos de Samonella spp., Escherichia coli y Campylobacter


spp. resistentes a antimicrobianos al Centro Nacional de Referencia de Plaguicidas y
Contaminantes para su secuenciación genómica, bajo las especificaciones solicitadas por el
CNRPyC.
g) Elaborar una base de datos de resultados, observaciones, inconsistencias y recomendaciones
sobre las muestras recibidas.

g.5 Del Laboratorio (CNRPyC)


a) Recibir aislamientos bacteriológicos de Samonella spp., Escherichia coli y Campylobacter spp.
resistentes a antimicrobianos.
b) Llevar a cabo los análisis alineados a las recomendaciones internacionales para la
secuenciación genómica.
c) Validar, en su caso, las metodologías de diagnóstico.
d) Elaborar la base de datos de los resultados obtenidos y su análisis conforme a las
necesidades del nivel central.
e) Publicar en las redes de salud los resultados obtenidos de este Programa en México.

g.6 Colaboración deseable del Establecimiento


a) Proveer materiales complementarios para el correcto desarrollo de este procedimiento.
b) Proporcionar las facilidades pertinentes al personal veterinario para el desarrollo del muestreo.
c) Proporcionar la información de trazabilidad de muestras con resultados de hallazgo de RAM al
MVO y MVRATIF en el establecimiento.

h. Contacto

Para cualquier duda o aclaración, favor de contactarse con la MVZ Pamela Jiménez Herrera, Médico
Veterinario Oficial de la DETIF al correo pamela.jimenez@senasica.gob.mx o al teléfono 59 05 13 00
ext. 51548 o bien al MVZ Aurelio Hernández Lozada, Subdirector de Mantenimiento de la
Certificación de Instalaciones Animales, Procesos y Productos de Establecimientos TIF, al correo
aurelio.hernandez@senasica.gob.mx o al teléfono 59 05 13 00 ext. 51504
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Procedimientos para RAM de ave, porcino y bovino

AVE PORCINO BOVINO


- El área de toma de muestra debe encontrarse en condiciones asépticas y los materiales deben estar completos
-Seleccionar aleatoriamente un intestino sin ninguna contaminación.
-Dirigir el intestino al área de toma de muestra.
-Se deben tomar 5 paquetes viscerales - Sujetar el ápice del ciego con una - No es necesaria un área específica
-Cada paquete visceral se depositará mano y separe el tejido conectivo con de toma de muestra.
en una bolsa tipo ziploc para ser la otra mano. Es posible que se - Sujetar el ápice del ciego con una
dispuesta en el área de muestreo necesiten tijeras. mano y separe el tejido conectivo con
-Retirar el paquete visceral de la bolsa - Elevar el ápice, el contenido fluya la otra mano. Es posible que se
ziploc y separar el mesenterio de los hacia el cuerpo principal del ciego. necesiten tijeras.
sacos ciegos - Verter alcohol isopropílico sobre el - Elevar el ápice, el contenido fluya
-Separación de cada saco ciego área de incisión. (10s) hacia el cuerpo principal del ciego.
usando la misma mano y desplazar el - Cortar con tijeras esterilizadas en el - Verter alcohol isopropílico sobre el
contenido cecal hacia el apéndice de área de incisión. (1 plg) área de incisión. (10s)
cada ciego. - Colocar el cuerpo principal sobre el -Limpiar una vez con gasa estéril
-Limpiar con una gasa el área de borde de la mesa. - Cortar con tijeras en el área de
incisión del ciego -Colocar la bolsa estéril abierta debajo incisión. (3 plgs)
-Colocar un cincho en cada saco ciego, del ciego. - Cuando el contenido cecal es
2 cm debajo de la unión ileo-cecal. -Tomar los contenidos cecales y evitar pastoso, insertar un abatelenguas
-Cortar entre la unión ileo-cecal y el derrame de contenidos en el piso. estéril y retirar el contenido. Depositar
cincho Incline el ciego hacia abajo para que el el contenido dentro de la bolsa estéril.
- La persona auxiliar debe abrir la contenido cecal fluya a la bolsa estéril. - Cuando el contenido cecal es acuoso,
bolsa estéril donde se depositaran los -Obtener 30 ml de contenido cecal. colocar el cuerpo principal del ciego
ciegos Cuando el contenido cecal es acuoso, sobre el borde de la mesa y verter los
-Las muestras de cada canal se tomar 30 ml usando jeringa estéril. contenidos cecales evitando derrames
colocaran en una misma bolsa estéril y Decantar en contenido en la bolsa en la bolsa estéril para muestra; o bien,
se someterán a una muestra estéril. tomar 30 ml usando jeringa estéril.
compuesta. Decantar en contenido en la bolsa
estéril.

Cerrar la bolsa estéril con la muestra de acuerdo al Anexo 7


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VII. Descripción del Procedimiento

Actividad Documento
Responsable
No. Descripción involucrado
Programación de las muestras a tomar, emisión de
Dirección de oficio de inicio de muestreo de Resistencia a los
1
EstablecimientosTIF Antimicrobianos (RAM). Difusión de información a los
Supervisores TIF.

Notificar el inicio de muestreo, número de muestras y


Supervisor TIF 2
fechas de muestreo al MVO o MVRATIF.

Médico Veterinario
De acuerdo al día de muestreo programado, *Orden de matanza
Oficial o Responsable 3 *Formato de números
seleccionar la granja a muestrear aleatorios
Autorizado TIF
Médico Veterinario Selección de las muestras
Oficial o Responsable 4
Autorizado TIF
Previo al muestreo:
- Identificar la bolsa estéril.
- Preparar el área de trabajo con materiales e
Médico Veterinario instrumentos limpios, desinfectados y esterilizados
Oficial o Responsable 5 procurando un ambiente lo más aséptico posible.
Autorizado TIF - Garantizar que la mesa de toma de muestra ha
sido lavada y desinfectada y que los materiales
están completos considerando cualquier
incidencia.
Toma de la muestra:
- Lavar y desinfectar las manos, el personal auxiliar
Médico Veterinario
deberá hacerlo. El MVO o MVRATIF se deberá
Oficial o Responsable 6
colocar guantes estériles.
Autorizado TIF
- Aplicar el procedimiento que le corresponde a la
especie, ya sea aviar, bovina o porcina.
Embalaje y envío de muestras:
Una vez colectadas las muestras, colocar la bolsa
Médico Veterinario con la muestra en una caja térmica con refrigerantes
Oficial o Responsable 7 suficientes para su conservación durante el envío por
Autorizado TIF paquetería al laboratorio (CENASA). Asegurar que la
cantidad de refrigerantes permite conservar la
temperatura de refrigeración de las muestras.
Médico Veterinario El contenedor deberá enviarse adjuntando la hoja de * Formato FR-SM-LAB-
IDM-00/14.
Oficial o Responsable 8 identificación de muestras oficiales.
Autorizado TIF
Recibirá las muestras y notificará al MVO o
Laboratorio CENASA 9 MVRATIF, así como al Supervisor TIF si la muestra
no cumple con las condiciones para su análisis.
Médico Veterinario Si la muestra enviada no tiene las condiciones para
Oficial o Responsable 10 su análisis, realizará nuevamente el muestreo,
Autorizado TIF notificando al Supervisor TIF.
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Actividad Documento
Responsable
No. Descripción involucrado
Realizará el análisis de las muestras, enviando los
resultados al nivel central.
Laboratorio Enviará los aislamientos de Salmonella spp,
11
(CENASA) Escherichia coli y Campylobacter spp., resistentes a
antimicrobianos al CNRPyC para su secuenciación
genómica, cuando así sea el caso.
Recibirá los aislamientos de Salmonella spp
resistente a antimicrobianos para realizar la prueba
de secuenciación genómica, generando una base de
Laboratorio
12 datos y realizando el análisis de información
(CNRPyC)
solicitada por el nivel central.
Publicará en las redes de salud los resultados
obtenidos de este Programa en México.
En caso de cualquier detección de resistencia a
antimicrobianos, solicitará al Supervisor TIF de
Nivel central (DETIF) 13
seguimiento para conocer la trazabilidad de las
muestras.
Solicitará al MVO o MVRATIF la investigación de
trazabilidad de la muestra con hallazgo de RAM y
enviará al solicitante del nivel central, la
Supervisor TIF 14
documentación física y electrónica de dicha
investigación en un máximo de 7 días hábiles,
contados a partir de la fecha de solicitud.
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VIII. Mapa del Procedimiento


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IX. Anexos

ANEXO 1

TÉCNICAS ASÉPTICAS PREVIAS A LA TOMA DE LAS MUESTRAS

A) LAVADO Y SANITIZADO DE MANOS

1. Lavar perfectamente las manos hasta la mitad del antebrazo (tanto del que toma la muestra
como del ayudante)

2. Secar perfectamente las manos con toallas de papel desechable.

3. Sanitizar las manos antes de la colocación de los guantes y antes de tocar el equipo de
muestreo.
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ANEXO 2

MANEJO DE GUANTES
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ANEXO 3

MANEJO DE CAMPO ESTERIL


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ANEXO 4

DESINFECCION DE GUANTES
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ANEXO 5

DESINFECCION DE CINTILLOS PLÁSTICOS


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ANEXO 6

MANEJO DE BOLSA ESTERIL (APERTURA)


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ANEXO 7

MANEJO DE BOLSA ESTERIL (CIERRE)


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ANEXO 8

FORMATO DE TOMA DE MUESTRAS FR-SM-LAB-IDM-00/14


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Dirección General de Inocuidad Agroalimentaria,
Acuícola y Pesquera
Clave: PR-TF-SM-22 Versión: 01 Fecha: Diciembre 2017 Página: 42 de 42

X. Firmas y Cambios

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