Factores ambientales

Factores ambientales

El conocimiento de los efectos ambientales nos permite explicar la

distribución de los microorganismos en la naturaleza y hace posible
diseñar métodos que controlen o incrementen las actividades
microbianas.
Considerando que los microorganismos están presentes virtualmente en
todos los hábitats
• Concentración y tipo de nutrientes
• Temperatura
• pH
• Disponibilidad de agua
• Oxígeno
 Concentración y tipo de nutrientes
Macronutrientes. Nutrientes requeridos en grandes cantidades.
 Concentración y tipo de nutrientes
Micronutrientes. Nutrientes requeridos en pequeñas cantidades
ó cantidades trazas.
• Factores de crecimiento. Compuestos orgánicos que se
requieren en pequeñas cantidades y sólo por algunas células.
(vitaminas, aminoácidos, purinas y pirimidinas)

La fuente natural de todos los nutrientes proviene del ambiente

u hospederos (pueden romper homeostasis)
La fuente en el laboratorio, proviene de del Medio de cultivo
que es una mezcla de nutrientes preparados in vitro para
promover el crecimiento de los microorganismos
 Medios de cultivo
• Medios definidos químicamente (Por su composición)
Conoces la concentración molar
– Medio basal

• Medios complejos
• Peptona o Triptona
• Extracto de levadura
• Chocolate
• Medios Mínimos Medios de cultivo
– Medio basal (Por su función)
• Medios enriquecidos o Enriquecimientos
– LB
• Medios “Selectivos”*
– Medio Sulfito de bismuto para Salmonella typhi
– Antibióticos
• Medios Diferenciales
– Agar sangre (Streptococcus pyogenes)
• Medios Selectivos y Diferenciales
– MacConkey
• Sales biliares y cristal violeta inhiben G+
• Lactosa permite diferenciar G-
*Todo medio de cultivo es selectivo, unos mas que otros
 Efecto del calor sobre el
crecimiento
Los valores absolutos de las temperaturas
mínimas o máximas varían entre mo. y
por lo general, reflejan el rango de temp.
media de sus hábitat naturales.
 Efectos del calor
El calor ejerce dos tipos de efectos opuestos sobre los organismos vivos:
• Si aumenta, las reacciones químicas y enzimáticas de la célula son más
rápidas y el crecimiento se acelera.
• Por encima de una cierta temperatura algunas proteínas pueden sufrir
daños irreversibles y las reacciones celulares caen rápidamente a cero
Temperaturas cardinales o fundamentales
• Temp. mínima: Por debajo de esta temp. no es posible el
crecimiento.
• Temp. óptima: Temp. en la que se produce el crecimiento más
rápido (más cerca de la máxima que de la mínima).
• Temp. máxima: Temp. por encima de la cual, no es posible el
crecimiento.
 Efecto de la temperatura sobre la velocidad de
crecimiento y consecuencias moleculares para la célula
Clases de microorganismos según la temperatura

Los hábitats normales de

muchos mo. Pueden ser
extremadamente calientes o
extremadamente fríos.

A estos microorganismos
se les conoce como
extremófilos.
 Psicrófilos
• Crecen bien a 0º C optima a 15º C máxima a 20º C
• Mas del 90% del océano es mas frío a 5º C
• Muchos aislados del ártico o antártico
• Arquea psicrófila Methanogenum aislada de lago Ace en
antártica

Psicrótrofos (psicrófilos tolerantes)

• Pueden crecer de 0 a 7º C
• Optimo 20-30º C máxima 35º C
• Son la fuente mas grande de contaminación en comidas
refrigeradas
 Los psicrófilos se encuentran en ambientes
permanentemente fríos, como en regiones polares y
sedimentos marinos

Micrografía de esporas pigmentadas en rojo del

alga de las nieves Chlamydomonas nivalis.

Banco de nieve en Sierra Nevada, California, con

coloración roja debido a la presencia de algas
 Mesófilos
• Optimo: 20-40º C, Mínimo: 15-20º C Máximo: 45º C
• La mayoría de los patógenos humanos
Termófilos
• Mas de 55º C, mínimo 45º C, optimo: 55-65º C
• Tienen mas proteínas termoestables que los mesófilos
• Lípidos de membrana polisaturados

Hiperermófilos
• Mínimo de 55º C, optimo:80-113º C
Crecimiento microbiano a altas temperaturas

Boulder Spring, un pequeño arroyo de agua • Gradiente térmico formado

hirviente en el Parque Nacional de Yellowstone. por cianobacterias en el
Presenta una temperatura de 1-2°C por encima
del punto de ebullicicón.Micrografía de esporas
límite superior de
pigmentadas en rojo del alga de las nieves temperatura 70-74°C.
Chlamydomonas nivalis.
¿Cómo se emplea la temperatura para el control
de microorganismos en procesos industriales?
 Pasteurización
• Es un proceso que reduce la población microbiana en leche y otros alimentos
sensibles al calor.

• Inicialmente se utilizó para matar las bacterias patógenas, especialmente los

organismos causantes de la tuberculosis, la brucelosis, la fiebre Q y la fiebre
tifoidea además de impedir la transmisión de patógenos como Salmonella y
Escherichia coli.

No es sinónimo de esterilización porque en ella no se destruyen todos los

organismos.

Impide el crecimiento de microorganismos alterantes e incrementa

considerablemente la vida media de los líquidos perecederos.
 Pasteurización
La leche pasa a través de un intercambiador de calor (tubo que está en contacto con una fuente
de calor)

El control cuidadoso de la tasa de circulación de la leche, y el tamaño y la temperatura de la

fuente de calor elevan la temp.

La leche se enfría rápidamente

 Ambientes fríos

Los océanos, que representan más de la mitad de la superficie terrestre, tienen una temperatura
media de 5°C y las profundidades marinas tienen temp. constantes de 1-3°C. En el Ártico y en el
Antártico hay vastas áreas permanentemente congeladas, o que se descongelan sólo algunas
semanas al año. Estos ambientes raramente son estériles.
 Pasteurización
• Están en uso dos métodos de pasteurización:

el calentamiento breve (20 segundos a 71,5-74°c), el calentamiento a alta

temperatura (2-5 segundos a 85-87°C) (pasteurización alta)

La leche se esteriliza también por calentamiento a temperaturas muy altas (UHT,

"Ultra High Temperature"). Se inyecta en la leche vapor de agua supercalentado,
con lo que la leche alcanza una temperatura de 135-150°C, que solo se mantiene
durante 1-2 segundos. Finalmente se deja que la leche se expanda en una tobera y
se enfría simultáneamente, con lo que se elimina el agua que se había añadido al
inyectar el vapor.

ó 63-66°C durante 30 min (pasteurización baja).

 Actividad del agua
• Osmosis
• Osmolaridad
• Hipotónico, hipertónico Isotónico
• Solutos compatibles
La disponibilidad biológica del agua no sólo es función del
contenido presente en un hábitat, también depende de la
concentración de solutos, como sales, azúcares y otras
sustancias presentes en él.
aw=(1/100)*(humedad)
aw=Psol/Pagua P=presión de vapor
Clasificación de los m.o. respecto a su tolerancia osmótica
• Osmotolerantes
• Halófilos de 2.8 a 6.2 M (NaCl) mínimo 0.2 M,
potasio interno 4 a 7 M
• Halófilos extremos
 Potencial oxido reducción
En los organismos la utilización de la energía derivada de las reacciones
químicas implica reacciones de oxidación-reducción (redox).

• Oxidación, se define como la pérdida de un electrón o varios electrones de

una sustancia.
• Reducción, se define como la ganancia de un electrón (o electrones) por
parte de una sustancia.

Los electrones cedidos por un donador son aceptados por un aceptor.

sustancia reducida
aceptor de e-
sustancia oxidada
Donador de e-
 Potencial de reducción
• Las sustancias varían en cuanto a sus tendencia a oxidarse o reducirse. Esta
tendencia se expresa como el potencial de reducción de la sustancia.
En el catabolismo, a menudo se considera al donador de
electrones como una fuente de energía. En la naturaleza existen
muchos donadores de electrones potenciales, pero es
importante tener en cuenta que lo que realmente libera energía
no es el donador de electrones mismo, sino la reacción química
mediante la cual se oxida el donador de electrones.
 Crecimiento microbiano a pH alto y a pH bajo
• La acidez o alcalinidad de una solución se expresa por su pH,
en una escala en la que la neutralidad es pH 7.

•Acidófilos 0-5.5
•Neutrófilos 5.5-8
•Basófilos 8-11.5

Cuando se considera para cada

organismo el requerimiento de un pH
específico para el crecimiento, hay
que tener en cuenta que el pH
óptimo representa sólo el pH del
medio extracelular.
Si el pH interno baja a mas de
5 cualquier bacteria muere
 Tampones
• En cultivos en medio no renovado (sistemas cerrados), el pH cambia
durante el crecimiento a consecuencia de las reacciones metabólicas que
consumen o producen sustancias ácidas o básicas.

• Por eso, se añaden con frecuencia a los medios de cultivo microbianos

sustancias amortiguadoras denominadas tampones, a fin de mantener el
pH relativamente constante.

• Tampón utilizado cercano a la neutralidad (pH 6-7.5), tampón fosfato

(KH2PO4).
 Oxígeno y crecimiento
microbiano

A) Aerobios obligados
B) Anaerobios estrictos
C) Aerobios facultativos
D) Microaerófilos
E) Anaerobios aerotolerantes
 Formas tóxicas del oxígeno
• El oxígeno es un poderoso oxidante y un excelente aceptor de electrones
en la respiración.
 Enzimas que destruyen formas tóxicas del
oxígeno
• Las catalasas y las peroxidasas son proteínas que contienen porfirinas.
• Las SOD son proteínas que contienen metales (cobre y zinc ó manganeso
o hierro)
 Ensayo de la catalasa
Un asa de cultivo se mezcla con una gota de agua oxigenada al 30% sobre un
portaobjetos. La generación de burbujas indica la presencia de catalasa. Las
burbujas proceden del O2 generado en la reacción.
Métodos de estudio de m.o
anaerobios
 Presión

• Barotolerantes

• Barófilos
Photobacterium, Shewanella,
Colwellia.

• Termobarófilos
Pyrococcus
 Radiación
• Deinococcus radiodurans

Tarea: revisión del siguiente artículo

http://ijsb.sgmjournals.org/cgi/reprint/58/5/1252
Factores químicos
 Antisépticos y desinfectantes
Los antisépticos son aquellos agentes químicos que matan o inhiben el crecimiento de los microorganismos y
pueden aplicarse en tejidos vivos dada su escasa toxicidad para los tejidos.

Los desinfectantes son productos químicos que matan microorganismos y se usan en objetos inanimados.
Antisépticos y desinfectantes
 Agentes antimicrobianos (Antibióticos)
• A fin de controlar enfermedades infecciosas, es necesario disponer de compuestos químicos
que puedan usarse por vía interna. Tales comp. se denominan agentes quimioterapéuticos.
Agentes antimicrobianos
Modo de acción de los principales Antibioticos
quimioterapéuticos
 Espectro de acción de algunos agentes
quimioterapéuticos

• De todos los antibióticos descubiertos menos del

1% tiene aplicación médica
• G+ y G- Amplio espectro
Antibioticos semisinteticos
2.2.2 Halos de inhibición
2.2.3 Resistencia
 Evaluación de desinfectantes
• Técnica de dilución en tubo: • Técnica en placa de agar
1. Diluciones del agente químico 1.Se inocula el microorganismo a probar en
una placa con medio sólido
2.Se coloca el agente a probar impregnándolo
en un disco de papel.
3.Después de incubar se observa si existe
2. transferencia inhibición del microorganismo
3. M.O.
incubar
en medio

Transferencia a Turbidez
intervalos de tiempo

NOTA: Una modificación es agregar el agente

en el medio antes de inocular la bacteria
 Técnica de coeficiente
fenólico
Prueba estandarizada para comprobar el poder desinfectante de un agente
químico frente al del fenol.
Desinfectante

Inocular cultivo de
cepa indicadora
Fenol
Hacer diluciones

M
e
d
i
o Turbidez
Incubar

X 5min – si 10min Mayor dilución (desinfectante) Coeficiente

=
Mayor dilución (fenol) fenólico
 Evaluación de la viabilidad

Se emplea este procedimiento para verificar la viabilidad de la cepa estudiada. También

se conoce cuantas UFC se enfrentan al desinfectante.
Diluciones para cuenta viable

Cuenta viable
 Bibliografía
• Madigan, M.T., Martinko, J.M. y Parker, J. Brock, Biología de
los microorganismos. 10ª edición. Prentice Hall. USA.

• Schiegel, G. Microbiología General. Editorial Omega. España.