Desafortunadamente, bacterias indeseables como Salmonella o E.

coli también pueden

terminar en el yogur. Estas bacterias pueden enfermar gravemente a las personas.

Así es como se ve un buen yogur natural. Observe la textura y el color uniformes.

Ahora eche un vistazo a este yogur. ¿Ves cómo se separan el suero y el agua? ¿Se están
formando esas burbujas de aire cerca del fondo de la botella? Estos pueden ser signos de
contaminación.

Este yogur parece sospechoso, pero para saber si está contaminado, necesitamos verlo mucho
más de cerca.

vamos a recolectar muestras de yogur y prepararlas para verlas bajo el microscopio haciendo
una tinción de Gram

En el proceso de tinción de Gram, utilizaremos diferentes químicos para teñir las bacterias que
se encuentran en el yogur. Bueno, míralos bajo el microscopio. Las bacterias se tiñerán de
diferentes colores dependiendo del tipo que sean.

Las bacterias que se tiñen de un color rosado o rojizo como este se denominan gramnegativas
y su presencia significa que el yogur está contaminado.

Las bacterias que se utilizan para hacer yogur con leche se tiñen de color púrpura. Se ven así
en un microscopio y se denominan grampositivos. Las bacterias rosadas se llaman
gramnegativas.

Vamos a realizar una tinción de Gram del yogur para ver qué tipo de bacterias están presentes.

Muy bien, preparemos nuestros portaobjetos para la tinción de Gram.

Para evitar que las bacterias contaminen nuestra zona de trabajo, hemos limpiado la mesa con
una solución de etanol al 70%. También encenderemos un mechero Bunsen para esterilizar
bien las asas de inoculación para usarlo más tarde y ayudar a mantener un ambiente de
trabajo estéril.
vas a utilizar un percutor para encender el mechero Bunsen. el gas ya está bajo, así que lleve el
percutor al mechero Bunsen con el lado de pedernal hacia abajo y apriete el percutor para
crear chispas.

Necesitamos diluir el yogur antes de colocarlo en el portaobjetos del microscopio. Bueno, use
un PBS (solución salina tamponada con fosfato) como diluyente para diluir el yogur. Eso nos
ayuda a ver las bacterias con el microscopio.

Comience colocando 1 ml del diluyente en un tubo de ensayo con una pipeta.

Este es un bucle de inoculación, un pequeño bucle de alambre que se usa para recolectar
muestras. Úselo para colocar una pequeña cantidad de yogur en el tubo de ensayo con el
diluyente.

Empiece por esterilizar el asa de inoculación en la llama del mechero Bunsen. Mantenlo
directamente en la llama hasta que se ponga al rojo vivo.

Una vez que se haya enfriado, utilice el bucle para obtener una pequeña muestra de yogur del
recipiente sospechoso. Para obtener una buena muestra, introduzca la mano en el recipiente o
mezcle bien el yogur primero.

Ahora, agite suavemente el tubo de ensayo durante 5 a 10 segundos para mezclar bien la
muestra de yogur con el diluyente.

Utilice el asa de inoculación para transferir una pequeña cantidad de muestra del tubo de
ensayo al portaobjetos preparado.

Esterilizar nuevamente el asa de inoculación en la llama del mechero Bunsen. Mantenlo

directamente en la llama hasta que se ponga al rojo vivo.

Transfiera una pequeña cantidad de muestra del tubo de ensayo a su portaobjetos preparado.

Coloque dos bucles llenos de la muestra en el portaobjetos.

Incline la corredera para extender la gota ligeramente, aproximadamente del tamaño de un

centavo.
Ahora bien, fije bien la diapositiva. Esto evita que las bacterias se eliminen cuando
comenzamos el proceso de tinción.

Coloque el portaobjetos en un broche, como una pinza de ropa, y páselo sobre la llama del
mechero Bunsen. Tenga cuidado de no ponerlo directamente en la llama. No queremos
quemar la muestra, simplemente secarla para que las bacterias no se eliminen.

Ahora comenzamos el proceso de tinción. Una vez completada la tinción, podemos mirar estos
portaobjetos con un microscopio.

Usamos cuatro productos químicos para teñir un portaobjetos. Los aplicamos en un orden
específico y enjuagamos el portaobjetos con agua corriente lenta entre cada producto
químico.

El primero es violeta cristal. Esta es nuestra mancha violeta, que indicará bacterias
grampositivas.

Usando el gotero, exprima suficientes gotas para cubrir su muestra

déjalo reposar durante 60 segundos

Ahora usa la botella de gramos de yodo. Los gramos de yodo fijarán el tinte a las paredes
celulares de las bacterias y lo harán permanente.

Ahora enjuague con agua corriente lenta

Exprima varias gotas sobre la muestra, lo suficiente como para cubrirla por completo.

déjalo reposar durante 60 segundos

Ahora enjuague con agua corriente lenta

Ahora vamos a utilizar la solución de alcohol. Esto eliminará el exceso de tinte, dejando solo el
tinte fijado a las bacterias.

Use el gotero de alcohol para cubrir la muestra con alcohol.

Deje reposar el alcohol durante 30 segundos. El tiempo es muy importante en este paso. No
dejes que el alcohol se asiente por más de 30 segundos.

ahora enjuague con agua corriente lenta

Ahora ha teñido de púrpura las bacterias gram positivas. El siguiente y último paso teñirá de
rosa las bacterias restantes. Estas bacterias son gramnegativas.

déjalo reposar durante 60 segundos

Ahora enjuague con agua corriente lenta

Ahora nuestro tobogán está listo, pero todavía está húmedo. Para secarlo, colóquelo entre dos
hojas de papel absorbente muy absorbente.

presione suavemente el papel hacia abajo unas cuantas veces para secar el agua del
portaobjetos.

Buen trabajo. ahora tiene un portaobjetos listo para mirar bajo el microscopio. Intente hacer el
siguiente por su cuenta. Siempre puede tocar el botón de pista si necesita ayuda para recordar
qué paso viene a continuación

Observe el temporizador y los dos botones junto a él. Estos botones le permiten decidir cuánto
tiempo esperar por una mancha antes de enjuagar.

Recuerde que puede tocar el botón de pista en la parte inferior derecha para obtener ayuda.
Use el gotero para exprimir suficientes gotas para cubrir su muestra

Felicidades. Esto es lo que encontramos bajo el microscopio. La imagen de la izquierda

muestra solo el tipo deseable de bacterias gram positivas y ningún signo de bacterias gram
negativas

el de la derecha está contaminado. Observe las bacterias teñidas de rosa; esos son
gramnegativos. Estos contaminantes incluyen bacterias indeseables que podrían ser dañinas.

Mira todas esas bacterias gramnegativas. Es bueno que hayamos detectado esto antes de que
se envíe el producto. ahora tendremos que investigar un poco para determinar cómo se
contaminó el yogur e identificar la cepa exacta de bacterioa que contaminó el yogur