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Las personas que tienen intolerancia a la lactosa no pueden digerir el azúcar (lactosa) que
contiene la leche. A raíz de esto, tienen diarrea, gases e hinchazón después de ingerir
productos lácteos. Esta afección, que también se llama absorción insuficiente de la lactosa,
no suele causar grandes problemas, pero los síntomas pueden ser molestos.
La leche posee un pH de 6.6, si se agrega acido acético a la leche, los grupos fosfato en el
carbonato de calcio se protonan y la proteína de la leche (caseína) precipita.
Se debe añadir acido acético 10% gota a gota con agitación en la leche contenida en un
vaso de precipitados hasta que esta alcance un pH de 5 (su punto isoeléctrico: el pH una
sustancia tiene carga neta de cero) si no se llega a este pH la precipitación nunca ocurrirá.
Entonces se obtiene una solución incolora de lactosa y etanol. Finalmente se deja en reposo,
el etanol se evapora y la lactosa cristaliza. En conclusión, el carbón nos sirve para eliminar
impurezas para un correcto cristalizado de la lactosa.
Se utiliza etanol en la fase final, ya que esta deshidrata y desestabiliza las micelas,
eliminando así las biomoleculas. El etanol también fue el responsable de la cristalización de
la lactosa.
8. QUE HARÍA USTED EN EL CASO DE QUE EL VASO DE PRECIPITADOS
CON ETANOL QUE ESTA CALENTANDO, SE INFLAMARA
Al tener la solución resultante del filtrado, este se debe guardar en un recipiente sellado o
tapado para que se formen posteriormente los cristales de lactosa, y se debe dejar reposar
durante 48h hasta una semana. Los cristales de lactosa aparecen a los lados y al fondo del
recipiente, como agregados esféricos, que luego se deben raspar y desprender.
Se debe esperar mas de 48 h para aislar los cristales de lactosa, ya que de esta manera se
consiguen cristales mejor formados, además se evita la oclusión de los cristales.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
La densidad de la leche es de 1.03 g/ml. Con este valor calcular el porcentaje de lactosa en
la leche.
LACTOSA
3.233 gr de lactosa
%Lac= ×100 %=3.139 %
103 gr de lec h e
Rendimiento Real
%Rendimiento= × 100
Rendimiento teorico
3.233 gr obtenidos
%Rendimiento= ×100
6 gr de lactosa teor icos
%Rendimiento=53.88 %
Se utilizo leche de marca Pinito, que en un contenedor de 250 ml tiene reportado 12 g de
azucares en su contenido nutricional (Calorias en Leche pinito descremada grasa 0.1 %).
Al haber utilizado únicamente 125 ml para el experimento se esperaría que el contenido
de azucares fuera de 6 g compuesto principalmente por lactosa. Por lo tanto se
obtuvieron únicamente 3.233 g de Lactosa aislada con un rendimiento medio de 53.88%
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Como primer paso durante el procedimiento se calentó 125 mL de leche descremada hasta
llegar a 40C, con el fin de que se precipitara la caseína contenida en la leche. La caseína es
una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína se encuentra en forma de sal
cálcica (caseinato cálcico) que se separa de la leche por acidificación, el siguiente paso fue
añadir ácido acético al 10% 40°C con el fin de que la leche alcanzara un pH de 5 (su punto
isoeléctrico: PH en que una sustancia tiene carga neta de cero) si no se llega a este PH la
precipitación nunca ocurrirá.
Al llegar al punto isoeléctrico se disuelve el fosfato de calcio (los grupos fosfato se
protonan), comienza la precipitación de la caseína y pasa lo que sucede con la
desnaturalización de las proteínas en este caso la proteína de la leche.
Al instante comienzan a formarse grumos en la superficie (la leche se cortó) reacción que
indica la precipitación de la caseína. Toda la sustancia solida se retira y del filtrado de la
leche descremada se obtiene el suero líquido, el cual presentó un color amarillo mientras
que el residuo fue un sólido blanco que finalmente formo una masa.
El siguiente paso fue agregar 2.5 g de carbonato de calcio CaCO3 al suero para decolorar
la solución y a la vez neutralizar el ácido. Este se agito por 10 minutos y posteriormente se
llevo a ebullición. El carbonato de calcio comenzó a precipitarse en el fondo del beacker
con un color blanco, precipitando además casi por completo las albuminas o proteínas del
suero permitiendo retirarlas para proceder al aislamiento de la lactosa.
Luego de batir bien, se filtra al vacío para extraer los sólidos ajenos a la lactosa a traves de
un papel filtro. El filtrado transparente se coloca en un frasco de compota. Se tapó bien el
frasco y se guardó en el refrigerador .
Una semana después se encontró precipitado en el fondo y las paredes del mismo. El cual
fue filtrado al vacío usando un papel filtro previamente tarado. Se lavó los cristales con
pequeñas porciones de alcohol 25 GL y finalmente se guardaron en la desecadora.
Con el producto ya seco se procede a pesarlo obteniendo finalmente 3.233 gr de lactosa de
nuestra muestra de 125 mL de leche marca Pinito, en contraste con el peso teorico de 6 gr
que pudo haber tenido los 125 mL de leche.