cc

ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO

AMBIENTE

Organismos Transgénicos

Realizado por:
EDISSON CASTILLO P.
ESNEYDER SALINAS CAMPOS.
OSCAR DAVID PUENTES.

Presentado a:
DIEGO FERNANDO CARDENAS

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

2022
cc

OBJETIVO

 Identificar las características de un organismo genéticamente

modificado y comparar su aplicabilidad como herramienta
terapéutica, en el sector agropecuario y agroindustrial, mediante
el análisis de casos específicos relacionados en artículos
científicos.

ESTUDIO DE CASO A

El añublo del arroz es una de las enfermedades más limitantes en la

producción de arroz. Investigadores del sector agrario son llamados a
proponer un método de edición genómica para la obtención de una
variedad de arroz (Oryza sativa L. japonica) resistente al ataque por
Magnaporthe oryzae. Los investigadores sugieren abordar el problema
mediante la interrupción del gen OsSEC3A a través de la tecnología
CRISPR / Cas9, mediante la estrategia de transformación de
protoplastos con vectores binarios de expresión Cas9 / gRNA.
Las plantas de arroz OsSEC3A mutantes mostraron signos de inmunidad
mejorada, incluido un mayor contenido de ácido salicílico, una
regulación positiva de los genes relacionados con la respuesta de
defensa y una mayor resistencia de la enfermedad contra M. oryzae (Ma
et al., 2018).

Explique:

1. ¿Qué significa el acrónimo CRISPR?

ESNEYDER SALINAS CAMPOS & EDISSON CASTILLO P

R/ El acrónimo CRISPR es la sigla inglesa para “Clustered Regularly

Interspaced Short Palindromic Repeats” que en español significa
repeticiones palindrómicas cortas, agrupadas y regularmente
interespaciadas, o sea, fragmentos de ADN repetitivos que las bacterias
usan para defenderse de los virus invasores.

Los virus infectan a las bacterias, cuando contrae una infección viral, se
crean secuencias repetitivas presentes en el ADN de las bacterias, que
funcionan como autovacunas. Contienen el material genético de los
virus que han atacado a las bacterias en el pasado, por eso permiten
cc

reconocer si se repite la infección y defenderse ante ella cortando el

ADN de los invasores.

2.¿Cuál es la función biológica del sistema CRISPR/Cas en las

células
procariotas?

R/ CRISPR/Cas es un mecanismo de defensa en bacterias y arqueas

análogo al silenciamiento con ARN interferente en eucariontes, que
identifica y degrada secuencias de ácidos nucleicos exógenos. Se
compone de dos elementos: un ARN proveniente de la secuencia
CRISPR, llamado «ARNcr», y la endonucleasa Cas. El ARNcr es el
encargado de dirigir a Cas hacia su secuencia complementaria, donde
Cas realiza el corte.

También Corta la secuencia de ADN de manera precisa para modificarla,

bien sea eliminando la porción cortada o insertando un nuevo ADN. En
este sentido, los genes son modificados.

Las secuencias espaciadoras son altamente diversas inclusive entre

cepas estrechamente relacionadas, inicialmente se utilizaron para
diferenciar distintos aislados, cepas y especies bacterianas. El Cas
contiene dos dominios clave para su actividad, uno dominio de nucleasa
(RuvC) y otro de helicasa (HNH). El sistema CRISPR/Cas actúa como un
sistema inmune adaptativo, que emplea el RNA antisentido codificado
por las secuencias espaciadoras como guía para que la nucleasa Cas
reconozca como blanco a las moléculas de DNA exógeno y lo desactive
mediante la introducción de cortes específicos.
cc

Figura 1. Fases del sistema inmune adaptativo bacteriano CRISPR/Cas.

(a) Fase de inmunización. Fragmentos de material genético exógeno
adquirido a través de virus o plásmidos es incorporado en el locus
CRISPR, donde se utilizará posteriormente para proteger a la bacteria de
una reinfección. (b) Fase de inmunidad. FUENTE: (Chávez-Jacobo &
Víctor M., 2018).

EVOLUCIÓN CRONOLÓGICA TECNOLOGIA CRIPR/Cas

Figura 2. Evolución cronológica de la tecnología de CRIPR/cas, FUENTE

(Cong, L et al., 2013).

3. ¿Qué es un motivo adyacente de protoespaciador (PAM, del inglés

Protospacer adjacent motif)?

EDISSON CASTILLO P.

R/ El motivo adyacente de protoespaciador o PAM es una secuencia de

ADN de 2-6 pares de bases inmediatamente después de la secuencia de
ADN dirigida por la nucleasa Cas9 en el sistema inmune adaptativo
bacteriano CRISPR.
PAM es un componente del virus o plásmido invasor, pero no es un
componente del locus CRISPR bacteriano. Cas9 no se unirá con éxito o
cc

escindirá la secuencia de ADN objetivo si no es seguido por la secuencia

PAM.
PAM es un componente de orientación esencial (que no se encuentra en
el genoma bacteriano) que distingue a la bacteria en si del material de
ADN, evitando así que el locus CRISPR sea atacado y destruido por
nucleasas. (C. Anders, et al., 2014)

Una secuencia corta que debe estar presente junto a una secuencia de
ADN para que Cas9 se una y corte. Evita la escisión de la matriz CRISPR
del anfitrión, donde no está presente PAM

ESNEYDER SALINAS CAMPOS

La secuencia PAM es en una secuencia de tres a cinco nucleótidos, que

varía siempre entre especies y que es fundamental para el
reconocimiento de la diana por la endonucleasa. Este sitio se conoce
como motivo adyacente al protoespaciador (PAM) y se cree que es
necesario para evitar la autoinmunidad, ya queya que, sin este elemento
de reconocimiento adicional, los crRNA reconocerían su propio gen
codificante y la nucleasa podría introducir cortes en su propio genoma.

4. “sgRNA” es la abreviatura que hace referencia a una molécula

sintética de ARN guía de cadena sencilla. ¿Cuál es la función de sgRNA
en el Sistema CRISPR/Cas? Por favor apóyese de imágenes para explicar
dicha función tal claramente como le sea posible.

EDISSON CASTILLO P.

R/ La función del sgRNA en el sistema CRISPR/Cas es reconocer la

región de interés del ADN objetivo y dirige la nucleasa Cas allí para su
edición. El gRNA se compone de dos partes: crispr RNA (crRNA), una
secuencia de 17-20 nucleótidos complementaria al ADN objetivo, y tracr
RNA, que sirve como andamio de unión para la nucleasa Cas.

La proteína asociada a CRISPR es una endonucleasa no específica. Se

dirige al locus de ADN específico por un gRNA, donde se rompe la doble
hebra. Hay varias versiones de nucleasas Cas aisladas de diferentes
bacterias. La más utilizada es la nucleasa Cas9 de Streptococcus
pyogenes.
 cc

Figure 3. El sistema CRISPR-Cas9.  El sistema CRISPR-Cas9 comprende un ARN guía (ARNg) y una
nucleasa Cas9, que juntos forman un complejo de ribonucleoproteína (RNP).  Se requiere la presencia de un
motivo adyacente protoespaciador (PAM) específico en el ADN genómico para que el gRNA se una a la
secuencia objetivo.  La nucleasa Cas9 luego hace una ruptura de doble cadena en el ADN (indicada por las
tijeras).  Los mecanismos de reparación endógenos desencadenados por la ruptura de la doble hebra pueden
dar como resultado la inactivación del gen a través de una mutación de cambio de marco o la inactivación de
una secuencia deseada si está presente una plantilla de ADN.
OSCAR DAVID PUENTES

El sgRNA (single guide RNA), o guria único de ARN, es uno de los dos
componentes principales junto con las nucleasas, del sistema CRISPER-
Cas, y es la encargada de reconocer la región de interés del ADN
objetivo y dirigir a la nucleasa Cas allí para su edición (Synthego).

Figura 4. representación esquemática del corte producido por el

sistema Crisper-Cas FUENTE: (Hart T et al., 2015)
cc

En este sistema la endonucleasa Cas9 se une a al ARN guía (sgRNA),

que lo dirige a una secuencia de DNA especifica en el cual se debe
incluir a continuación de esta una secuencia corta PAM, que guiara a el
corta para que se una y realice el corte. La nucleasa Cas9 luego hace
una ruptura de doble cadena en el ADN (indicada por las tijeras). Los
mecanismos de reparación endógenos desencadenados por la ruptura de
la doble hebra pueden dar como resultado la inactivación del gen a
través de una mutación de cambio de marco o la inactivación de una
secuencia deseada si está presente una plantilla de ADN. (Synthago)

ESNEYDER SALINAS CAMPOS

El CRISPR/Cas como se mencionó posee dos componentes la proteína Cas 9 y

la molécula de ARN conocida como el ARN guía. Este RNA guía está formado
por crRNA y la molécula de crRNA transactivador tracRNA.
El sgRNA es una fracción nucleótida, la cual tiene como función guiar y señalizar
a la enzima cas 9 la posición de la secuencia a modificar acorde con lo que se
quiere obtener en la intervención de la técnica.

El virus lo que hace inicialmente es ingresar a la bacteria, el mecanismo

CRISPR/Cas 9 realiza como la identificación del gen extraño, el CRISPR/Cas
contienen normalmente dos genes Cas 1 y Cas 2 y a la vez presenta tres tipos; el
tipo I Cas 3, el tipo II Cas 9 y el tipo III cas 10 que son específicos cada uno de
ellos. Continuando con el proceso el PAM contribuye a la unión de la proteína
Cas 9 con el ARN guía, posteriormente el sgRNA desenrolla parte de doble hélice
de ADN hasta encontrar el sitio especifico o diana para cortar.
DNA VIRUS INCORPORANDOSE A LA BACTERIA

VIRUS
SECUENCIA PRIMERO DE
CRISPR /Cas contienen dos genes Cas 1 RECONOCIMIENTO DEL PAM
y Cas 2 PARA POSTERIORMENTE
LOGRAR LA UNIÓN DNA-Cas 9

CRISPR /Cas presentan tres tipos:

Tipo I Cas 3-Tipo II Cas 9-Pipo III cas

10, y cada una es una secuencia
especifica
SEPARACION DE LAS
HEBRAS
UNIÓN DNA-sgRNA
El sgRNA
interactuando
con enzima Cas 9

SITIO O DIANA A CORTAR

Figura 5: Proceso de adquisición, expresión interferencia crispr/cas.

cc

5. OsSEC3A, una subunidad importante del complejo de exocisto en el

arroz. ¿Cuál es la función del complejo de exocisto a nivel celular?

OSCAR DAVID PUENTES

R/ SEC3 es una subunidad del complejo de exoquistes que recluta otras

subunidades que residen en el citoplasma hacia la membrana plasmática
(Finger et al. , 1998 ; Wiederkehr et al. , 2003 ). Estudios previos en
maíz y Arabidopsis revelan que las mutaciones en SEC3 dan como
resultado que no se logre el alargamiento correcto del cabello de la raíz
( Wen et al. , 2005 ) y un crecimiento defectuoso del tubo polínico
( Bloch et al. , 2016 ). Estas observaciones de crecimiento polarizado
comprometido en plantas con SEC3 mutado indican que SEC3
desempeña un papel en la exocitosis polar. La novedad de este estudio
es que mostramos por primera vez que SEC3 tiene un papel en la
respuesta de defensa de la planta en arroz. Aunque elLas plantas de
arroz mutantes Ossec3a mostraron un crecimiento más lento de las
raíces principales en comparación con las plantas de tipo salvaje, no se
observó una inhibición específica del crecimiento del pelo de la raíz
(Figura 3B). Además, no se observaron defectos en el crecimiento del
tubo polínico porque las plantas mutantes homocigóticas Ossec3a
produjeron semillas normales (Ma et all).

6. Escriba la secuencia PAM utilizada por los investigadores para lograr

la interrupción del gen OsSEC3A.

R/ El vector de destino Cas9 fue impulsado por el promotor de

ubiquitina de maíz para la expresión en arroz, y la expresión de sgRNA
fue impulsada por el promotor de tipo pol III de U3 sgRNA. Se utilizó la
recombinación de puerta de enlace para movilizar sgRNA, después de lo
cual los vectores binarios de T-DNA para la coexpresión de Cas9 y
sgRNA se transformaron en callos de arroz. (Ma, J et al., 2018).

7. Escriba la secuencia objetivo de edición ubicada en la vecindad del

PAM.

R/ La secuencia del motivo adyacente al protoespaciador (PAM) está

subrayada en la Figura 6, mientras que la secuencia diana está
sombreada en gris. Los resultados de la secuenciación de los alelos
mutantes se alinean con la secuencia del genoma de referencia.
cc

Figura 6: Secuencias de La mutación de OsSEC3A.

8. Mencione 2 características fenotípicas presentes en las plantas de

arroz OsSEC3A mutantes. ¿puede cada una de estas características
favorecer o desfavorecer la producción de arroz? ¿si o no? y, ¿por
qué?

R/ La interrupción de OsSEC3A por CRISPR/Cas9 provocó una estatura

enana y un fenotipo que imitaba la lesión. El Ossec3a mutante exhibió
respuestas de defensa mejoradas, como lo muestran los niveles de
transcripción regulados al alza de genes relacionados con la patogénesis
y la síntesis de ácido salicílico, niveles aumentados de ácido salicílico y
resistencia mejorada al patógeno fúngico Magnaporthe oryzae.
Estas Características favorecen la respuesta y resistencia en las plantas
obtenidas, aportando evidencias de un avance biotecnológico que puede
ayudar cuando se implemente en cultivos a gran escala.

9. Mencione 3 razones, por las que la tecnología CRISPR/Cas9 fue

preferida por los investigadores con respecto a las tecnologías de
recombinación genética y mutagénesis convencional. Estas razones
deben tener soporte documental científico. Para ello, refiérase a la
base de datos Science Direct desde la página de la biblioteca de la
UNAD (enlace para ingresar al recurso de la biblioteca:
https://stadium.unad.edu.co/) y al buscador académico (enlace
para ingresar al buscador: https://scholar.google.es/) y garantice
la selección de 3 documentos relacionados con CRISPR/Cas9 y sus
ventajas competitivas. Lea y extraiga las 3 razones para usted, más
importantes. Por favor tenga adherencia a las normas APA para las
citaciones correspondientes.

R/ Las razones son:

1. Debido a la excelente capacidad para apuntar y escindir

secuencias de ADN específicas, CRISPR se diseñó como una
cc

herramienta de edición de genes; En comparación con las

herramientas de edición de genes anteriores, incluida la
nucleasa de dedos de zinc (ZFN) y las nucleasas efectoras
similares a activadores de transcripción (TALEN), la
herramienta de edición de genes basada en CRISPR funciona
mucho mejor (Smits, J. P et al., 2021).

2. El sistema CRISPR surge como una alternativa factible para

lograr la edición del genoma: es de fácil diseño e introducción,
más económico, rápido y eficiente al momento de localizar y
modificar una secuencia. Por estos factores, CRISPR se ha
convertido en uno de los sistemas con mayor potencial en la
edición genómica y actualmente se estudian sus posibles
aplicaciones en diversos ámbitos. (Lammoglia-Cobo, et al
2016)

3. Su aplicación a estudios de genomas completos permite un

cribado a gran escala de blancos de drogas (Riveros et al.,
2020) y otros fenotipos ayudará a generar modelos animales
modificados genéticamente que podrán beneficiar a estudios
farmacológicos y a la comprensión de enfermedades humanas.
Las aplicaciones de CRISPR/Cas9 en plantas y hongos también
prometen un cambio en el curso de las investigaciones en el
área de la agricultura (Riveros et al., 2020).

10. ¿Para qué sirve la herramienta web CRISPR-P 2?0

(http://crispr.hzau.edu.cn/CRISPR2/)?

R/ La herramienta web CRISPR-P 2.0 sirve para para la edición del

genoma en plantas.
A medida que la tecnología CRISPR / Cas9 ha evolucionado rápidamente
en los últimos dos años, una plataforma actualizada, CRISPR-P 2.0
proporciona un servicio web para el diseño asistido por computadora de
sgRNA altamente eficiente con efectos mínimos fuera del objetivo. Tiene
funciones de la siguiente manera:

1. Es compatible con el diseño de sgRNA para 49 genomas de

plantas. Se proporcionan ARNg para 49 especies de plantas con
la última versión del genoma y anotación.
2. Se mejora el sistema de puntuación de sgRNA para la eficiencia
dentro del objetivo y el potencial fuera del objetivo. CRISPR-P
2.0 utiliza un sistema de puntuación modificado para calificar el
cc

potencial de desviación y la eficiencia de desviación de sgRNA

para Streptococcus pyogenes Cas9, que es el sistema CRISPR-
Cas9 más amplio. El sistema de puntuación en CRISPR-P 2.0 se
basa en el conocimiento actualizado sobre la edición del
genoma SpCas9.
3. Admite varios sistemas CRISPR-Cas. Admite el diseño de
secuencias de guía para varios sistemas CRISPR-Cas como
Cpf1 (Zetsche et al., 2015) y varias endonucleasas Cas9.
4. Se proporciona un análisis exhaustivo de la secuencia de guía,
que incluye: contenido de GC, sitio de endonucleasa de
restricción, secuencia de microhomología que flanquea el sitio
de orientación (puntaje de microhomología) y la estructura
secundaria de sgRNA.
5. También se proporciona la identificación de sgRNA a partir de
secuencias personalizadas. Si el genoma / secuencia del
usuario no figura en los genomas seleccionables, permite a los
usuarios cargar secuencias personalizadas e identificar sgRNA.

11. ¿Cuál es el flujo de trabajo que debe aplicarse para emplear la

herramienta web CRISPR-P 2.0? Escriba los 6 pasos.

R/ La siguiente lista proporciona una descripción general rápida de los

pasos involucrados en el diseño de sgRNA.

1. Acceda a la página "Enviar" para iniciar un trabajo. Seleccione

un genoma que esté estudiando, ingrese el locus del gen, la
posición del cromosoma o la secuencia de ADN en formato
FASTA. Otros parámetros como PAM, promotor de snoRNA,
armazón de RNA, longitud de la secuencia guía (espaciador)
también se deben definir o con argumentos predeterminados.
Luego, haga clic en el botón "Enviar". Si su secuencia no se
pudo encontrar en la búsqueda explosiva de su genoma
seleccionado, puede saltar a 4
2. Unos segundos después del envío, el navegador web ingresaría
automáticamente a la página de resultados del diseño de
sgRNA. En primer lugar, la secuencia diana se mapea en su
genoma. Todos los sgRNA posibles se seleccionan y se
muestran en un modelo de genoma gráfico y se muestra
información sobre posibles ubicaciones dentro y fuera del
objetivo, que incluyen: puntaje dentro del objetivo, puntaje
fuera del objetivo, contenido de GC, sitio de endonucleasa de
restricción, etc.
cc

3. Al hacer clic en el botón "avanzar" para ingresar a la "Página de

resultados avanzados del diseño de sgRNA". Proporcionó una
estructura secundaria de sgRNA y una puntuación de
microhomología para los procesos, una elección adicional de
sgRNA eficiente. Diseñando sgRNAs de acuerdo a tus
necesidades.
4. El usuario puede identificar la puntuación en el objetivo de la
secuencia de sgRNA personalizada en la página "Diseño"

ESTUDIO DE CASO B:

Científicos de una empresa japonesa, crearon la primera rosa del mundo

con pigmento para color azul. Anteriormente, rosas de coloración azul
ya eran producidas a través de cruces selectivos, pero no eran
consideradas azules verdaderas. La técnica utilizada consistió en extraer
el gen de la enzima que produce el pigmento azul de una flor llamada
“pensamiento” e incorporarlo al genoma de la rosa para que produzca el
color azul.

Explique:

1. ¿Cuáles fueron las especies de flores que utilizaron los

investigadores para aislar el gen que participa en la biosíntesis del
color azul?.

R/ Es importante resaltar que los flavonoides son los encargados en

las plantas de su coloración, además de otras funciones como
atrayentes de insectos en la ovoposición, agentes protectores contra
rayos UV, infecciones producidas por fitopatogenos y antioxidantes.

Los flavonoides presentan varios tipos o subgrupos como flavonas y

flavonoles son los más comunes y con color amarillo; flavanonas y
flavanonoles son los menos conocidos son incoloros o ligeramente
amarillos; y las antocianinas que son el grupo más representativo en
pigmentos que originan el color malva, rosa, violeta y azulado; las
auronas que son los pigmentos amarillos dorados existentes en
ciertas flores; las isoflavonas son todas coloreadas y de poca
distribución en las plantas. Los flavonoides también se destacan por
su papel como inhibidores de enzimas, en este sentido se encuentra
la enzima prolina hidroxilasa.
cc

Las flores que utilizaron los investigadores para aislar el gen que
participa en la coloración azul de la rosa proviene de claveles
(Dianthus caryophyllus), transgénicos de coloración violeta
introduciendo derivados de la delfinidina de Petunia hybrida; ya que
los pétalos de la rosa no poseen la flavonoide 3’5’ hidroxilasa (F3’5’H)
que es la enzima clave para la biosintesis de delfinidina, responsable
de la coloración purpura y azul.

Vale la pena mencionar que existen diversos factores que influyen en

la intensidad de la coloración como:

 El tipo y el nivel presente de antocianina (la biosintesis de

antocianina)
 El complejo de antocianinas e iones metálicos (producen
coloraciones azules.)
 La presencia de copigmentos flavonas y flavonoles.
 La modificación de antocianinas por hidroxilación, metilación,
acilación o conjugación.
 La variación del pH vacuolar (con tendencia a color rojizo con
pH ácido y azul con pH neutro).”.

http://
www.plantasyhongos.es/glosario/antocianinas.htm

2. ¿Cuál es el gen encargado en participar en la biosíntesis del color

azul? ¿Qué proteína se traduce a partir de este gen?.

R/ El gen encargado en participar en la biosíntesis del color azul es

blue gene, el cual lleva la información para que se produzca la enzima
que produce la delfinidina.
cc

La del delfinidina es una antocianina, son pigmentos que se hallan en las

vacuolas de los vegetales y le dan el color rojo, purpura o azul a hojas,
flores o frutos, se clasifican dentro de los flavonoides.
Su estructura químicamente son glucósidos de las antocianidinas, es
decir, están constituidas por una molécula de antocianidina, que es la
aglicona, a la que se le une un azúcar por medio de un enlace
glucosídico. La estructura química básica de estas agliconas es el ion
flavilio, también llamado 2-fenil-benzopirilio que consta de dos grupos
aromáticos: un benzopirilio y un anillo fenólico; el flavilio normalmente
funciona como un catión.

3. ¿Para desarrollar esta rosa trangénica fue necesario recurrir al

Silenciamiento genético, la recombinación genética o ambos? Explique
su respuesta.

R/Este proceso se lleva a cabo mediante el proceso de recombinación

genética debido a que el sistema de de transformación por
agrobacterium, se requiere de cepas desarmadas, que son aquellas, en
las que el T-DNA ha sido eliminado. Para obtenerlas, el plásmido
residente Ti debe ser modificado mediante un proceso de
recombinación, que permite eliminar los genes responsables de la
formación de tumores en la planta, denominados ONC (oncogenes) y los
genes OPS para la síntesis de opinas, que se encuentran en la región del
T-DNA. Para esto es introducido a la cepa de Agrobacterium a desarmar,
un plásmido foráneo con regiones de homología con el T-DNA y un gen
para resistencia a antibióticos. Dado el proceso de recombinación entre
el plásmido TI y el plásmido foráneo, se elimina el T-DNA y se introduce
en el plásmido TI el gen para resistencia a antibióticos que,
posteriormente, va permitir identificar la bacteria desarmada, mientras
que plásmido foráneo con la región T-DNA es eliminado (Granados et al
2012).

4. ¿Cuál fue el método de transformación que emplearon para la

obtención de esta planta transgénica?.

R/ Para este caso se llevo a cabo la transformación genética mediado

por Agrobacterium tumefaciens, con DNA proveniente de pCGP602 con
el vector binario pCGP293 y dio origen a pCGP90; y DNA proveniente
de pCGP175, con el promotor pCGP293 para obtener pCGP802.
Los vectores binarios (sistemas en trans) es la estrategia más
empleada.
Esta estrategia consiste en el uso de dos plásmidos en la bacteria, uno
de ellos, el vector binario, contiene los bordes del T-DNA en el que se
cc

incluye el casete de expresión o genes de interés y, el otro, el plásmido

residente es el que contiene los genes "Vir", que son los encargados de
mediar la transferencia efectiva del casette de expresión hacia las
células vegetales. (Granados et al 2012)

5. En este experimento existió un gen marcador de selección. ¿por qué

es necesario utilizar un gen marcador de selección? y ¿cuál es el gen
marcador de selección que se utilizó para la producción de la rosa
“Applause”?.

6. ¿Sería posible que esta rosa transgénica sea obtenida mediante la

tecnología CRISPR/Cas9? Explique el porque de su respuesta.

7. ¿Es ético que los investigadores modifiquen genéticamente los

organismos?.

CONCLUSIONES

La técnica CRISPR/Cas 9 es un avance importante de la ciencia para

editar genes en vegetales que permiten obtener protección contra
distintas enfermedades.
Los avances en Ingeniería genética como el gen anti-sentido,
CRISPR/Cas 9 han permitido editar genes que pueden hacia un mediano
plazo erradicar enfermedades transmisibles como la leucemia y muchas
otras que afectan a la humanidad.
La ediciónLa edición de genesde genes en el hombre debe garantizar
que la misma no genere o produzca cambios o efectos adversosefectos
adversos irremediables a la humanidad.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Mayboca Padilla, D., & Flores Ruiz, D. (2019). CRISPR/CAS: EL

FUTURO DE LA EDICIÓN GENÉTICA. EPISTEMUS, 13(26), 36–41.
https://doi.org/10.36790/epistemus.v13i26.94
 Chávez-Jacobo, Víctor M.. (2018). El sistema de edición genética
CRISPR/Cas y su uso como antimicrobiano específico. TIP. Revista
especializada en ciencias químico-biológicas, 21(2), e201825.
cc

Epub 03 de septiembre de
2020.https://doi.org/10.22201/fesz.23958723e.2018.2.5.
 Cong, L., Ran, F. A., Cox, D., Lin, S., Barretto, R., Habib, N., Hsu,
P. D., Wu, X., Jiang, W., Marraffini, L. A. & Zhang, F. (2013)
Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems.
Science, 339(6121), 819-823. DOI: 10.1126/science.1231143.
 C. Anders, et al., 2014. “Structural basis of PAM-dependent target
DNA recognition by the Cas9 endonuclease,” Nature
513(7519):569-573.
 Synthego | Full Stack Genome Engineering. (s. f.). Synthego.Com.
Recuperado 13 de enero de 2022, de
https://www.synthego.com/guide/how-to-use-crispr/sgrna.
 Hart T et al. (2015) High-Resolution CRISPR Screens Reveal
Fitness Genes and Genotype-Specific Cancer
Liabilities. http://goo.gl/qGHLCm.
 Ma, J., Chen, J., Wang, M., Ren, Y., Wang, S., Lei, C., & Cheng, Z.
(2018). Disruption of OsSEC3A increases the content of salicylic
acid and induces plant defense responses in rice. Journal of
experimental botany, 69(5), 1051-1064.

 Bloch D, Pleskot R, Pejchar P, Potocký M, Trpkošová P, Cwiklik L,

Vukašinović N, Sternberg H, Yalovsky S, Žárský V. 2016. Exocyst
SEC3 y fosfoinositides definen sitios de exocitosis en la iniciación y
el crecimiento del tubo polínico . Fisiología vegetal 172 , 980–
1002. [ Artículo gratuito de PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]

 Finger FP, Hughes TE, Novick P. 1998. Sec3p es un punto de

referencia espacial para la secreción polarizada en la levadura en
ciernes . Celda 92 , 559–571. [ PubMed ] [ Google Académico ]

 Wen TJ, Hochholdinger F, Sauer M, Bruce W, Schnable PS. 2005.

El gen roothairless1 del maíz codifica un homólogo de sec3, que
está involucrado en la exocitosis polar . Fisiología vegetal 138 ,
1637–1643. [ Artículo gratuito de PMC ] [ PubMed ] [ Google
Scholar ]

 Wiederkehr A, Du Y, Pypaert M, Ferro-Novick S, Novick P. 2003.

Se necesita Sec3p para la regulación espacial de la secreción y
para la herencia del retículo endoplásmico cortical . Biología
Molecular de la Célula 14 , 4770–4782. [ Artículo gratuito de
PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
cc

 Ma, J., Chen, J., Wang, M., Ren, Y., Wang, S., Lei, C., & Cheng, Z.
(2018). Disruption of OsSEC3A increases the content of salicylic
acid and induces plant defense responses in rice. Journal of
experimental botany, 69(5), 1051-1064.

 Lammoglia-Cobo MF, Lozano-Reyes R, García-Sandoval CD, et al

(2016). La revolución en ingeniería genética: sistema CRISPR/Cas.
Investigación en Discapacidad;5 (2):116-128.

 Smits, J. P., Meesters, L. D., Maste, B. G., Zhou, H., Zeeuwen, P.

L., & van den Bogaard, E. H. (2021). CRISPR-Cas9 based genomic
engineering in keratinocytes: from technology to application. JID
Innovations, 100082. https://doi.org/10.1016/j.xjidi.2021.100082

 Riveros Maidana R, Méndez Ferreira A, Benítez Candia N, Nara

Pereira E, Fernández Ríos D., (2020). Sistema CRISPR/Cas:
Edición genómica de precisión.Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud;
18(1): 97-107

 Granados, C. D., & Giraldo, A. C. (2012). Métodos de

transformación genética de plantas. Revista UDCA Actualidad &
Divulgación Científica, 15(1), 49-61.