Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera: Química y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio
Práctica # 5 DOSIFICACIÓN DE LA HEMOGLOBINA.

Nombre: Dennise Mishell Cordero Martínez

Objetivos de la práctica de laboratorio
 Desarrollar en el estudiante la habilidad y destreza en el manejo del espectrofotómetro, el uso
de las cubetas y los cálculos para obtener resultados confiables.
 Conocer las diferentes funciones que realiza la hemoglobina en nuestro cuerpo
 Determinar y establecer los valores normales de la hemoglobina tanto en hombres como en
mujeres
Instrucciones o consideraciones previas
La hemoglobina es una proteína que sirve para el transporte de oxígeno y dióxido de carbono. La
masa total de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr de hemoglobina capaces de transportar
800ml de oxígeno. Una molécula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas polipépticas:
(unión de aminoácidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un átomo de fe
en estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas de
polipéptidos. Localizando cerca la superficie de la molécula, el HEM se combina de forma reversible
con una molécula de oxígeno y dióxido de carbono. Este grupo HEM es el responsable del color rojo
de la hemoglobina. La parte proteica o globina tiene 4 cadenas polipeptídicas que se denominan con
las letras α, β, γ, δ. Existe una cadena más la ε que está presente durante los 3 primeros meses de
vida se diferencian unas de las otras en el número o posición (de los aminoácidos de los que están
compuestas).

Por lo tanto, existen varios tipos de Hb. En

el ser humano se pueden encontrar las
siguientes hemoglobinas normales:
Hemoglobina A
Consta de 2 cadenas α y 2 cadenas β en un
adulto normal corresponde a más del 95%
del total, en un adulto sano está en porción
menor de 3%.
Hemoglobina F (fetal)
Consta de 2 cadenas α y 2 cadenas γ. Es la
hemoglobina principal en el feto desde el 4°
mes del embarazo hasta aproximadamente
los 6 meses de edad. La Hb F tiene mayor
afinidad por el oxígeno.

Hemoglobina Gower
Consta de 2 cadenas α y 2 cadenas ε.
Desaparece casi por completo en el tercer mes de embarazo y empieza a aparecer la Hb fetal.
Algunos datos se obtienen examinando a simple vista una muestra de sangre. Un aspecto normal del
suero o del plasma revela que el pigmento está en los glóbulos rojos. Si se agita en una sangre total
normal en el aire durante 15 min. Adquiere un color rojo claro por convertir la Hb en oxihemoglobina.
La sangre tiene un color rojo cereza brillante cuando el pigmento es carboxi-hemoglobina en la
intoxicación por CO. Las distintas Hb tienen espectros de absorción características a las que
determina en un espectrofotómetro. La identificación de diferentes formas de la Hb con la
determinación de sus espectros de absorción puede hacerse de una manera sencilla 

¿Qué es un análisis de hemoglobina?

El análisis de hemoglobina mide los niveles de hemoglobina en la sangre. La hemoglobina es una
proteína de los glóbulos rojos que lleva oxígeno de los pulmones al resto del cuerpo. Los niveles
anormales de hemoglobina podrían ser signo de un trastorno de la sangre.
Otros nombres: Hb, Hgb

¿Para qué se usa?

El análisis de hemoglobina se usa comúnmente para detectar anemia, un nivel anormalmente bajo de
glóbulos rojos en el cuerpo. Cuando una persona tiene anemia, las células no reciben el oxígeno que
necesitan. Los análisis de hemoglobina también se hacen comúnmente con otras pruebas, por
ejemplo:
 Hematocrito, que mide el porcentaje de glóbulos rojos en la sangre
 Conteo sanguíneo completo, que mide el número y tipo de glóbulos de la sangre
¿Por qué necesito un análisis de hemoglobina?
Su médico o profesional de la salud podría pedir este análisis como parte de un examen de rutina o si
usted:

 Tiene síntomas de anemia como debilidad, mareos, palidez o manos y pies fríos
 Tiene antecedentes familiares de talasemia, anemia falciforme u otros trastornos hereditarios de
la sangre
 Come una dieta baja en hierro y minerales
 Tiene una infección a largo plazo
 Ha perdido una cantidad excesiva de sangre por una herida o un procedimiento quirúrgico
¿Qué ocurre durante un análisis de hemoglobina?
Un médico o profesional de la salud le toma una muestra de sangre de una vena de un brazo usando
una aguja pequeña. Después de insertar la aguja, extrae una pequeña cantidad de sangre y la coloca
en un tubo de ensayo o frasquito. Tal vez sienta una molestia leve cuando la aguja se introduce o se
saca. Este proceso generalmente dura menos de cinco minutos.

¿Debo hacer algo para prepararme para la prueba?

No se necesita ninguna preparación especial para un análisis de hemoglobina. Si su médico ha pedido
otros análisis con su muestra de sangre, se le podría indicar que no coma ni beba nada por varias
horas antes de la prueba. Su médico o profesional de la salud le dirá si debe seguir alguna instrucción
especial.
¿Tiene algún riesgo esta prueba?
Los riesgos de un análisis de sangre son mínimos. Después de la prueba, algunas personas sienten
un dolor leve, mareos o se les forma un moretón. Por lo general, estos síntomas desaparecen
rápidamente.
¿Qué significan los resultados?
Los niveles de hemoglobina pueden estar fuera de los límites normales por muchas razones. Si los
niveles de hemoglobina están bajos, esto podría ser signo de:

 Diferentes tipos de anemia

 Talasemia
 Deficiencia de hierro
 Enfermedad del hígado
 Cáncer y otras enfermedades
Si los niveles de hemoglobina están altos, esto podría ser signo de:

 Enfermedad pulmonar
 Enfermedad del corazón
 Policitemia vera, un trastorno en que el cuerpo produce demasiados glóbulos rojos. Puede
causar dolores de cabeza, cansancio y dificultad para respirar
Si cualquiera de sus niveles es anormal, eso no significa necesariamente que tenga un problema
médico que requiera tratamiento. La dieta, el nivel de actividad, los medicamentos, el ciclo menstrual
de una mujer y otras consideraciones pueden afectar los resultados. Además, usted podría tener un
nivel anormalmente alto de hemoglobina si vive en una región de tierras altas. Pregúntele a su médico
o profesional de la salud qué significan sus resultados. Toda la hemoglobina contenida en la sangre
del paciente, se oxida por acción del Ferricianuro de potasio a Metahemoglobina, y mediante el
Cianuro de potasio forma un complejo insoluble denominado CIANOMETAHEMOGLOBINA, de color
rosado, a un pH 7.2. El complejo es medido en el espectrofotómetro a 540 nm. La intensidad de la
coloración es proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra.

Reactivos de laboratorio

 Reactivo de hemoglobina (Reactivo de Drabkin)

 Solución Estándar de Hemoglobina. (Ej. 14.5 g/dl.) Se la obtiene en el comercio

Materiales de laboratorio

 Muestra de sangre venosa con EDTA.

 pipeta semiautomática de 10 landas
 tubo de ensayo de 100 x 13
 dispensador para volumen de 2.5 ml
 lápiz graso, tubera para 10 tubos
 puntas amarillas
 Papel higiénico,


Equipos de laboratorio

 Espectrofotómetro
 cubetas cuadradas de 1 cc de paso de luz.

Actividades a desarrollar/ técnica operatoria

Resultados obtenidos

Conc. del Estándar

Hemoglobina g/dl= ----------------------- x D. Opt. Muestra
D. Opt. Estándar

Conc. Estándar
o Factor de Hb. = ----------------------
D. Opt. Estándar

Hb. g/dl. = Factor de HB. X D. Opt. Muestra.

Rangos de Referencia

Hombre adulto 13 a 16 gr./dl

Mujer adulta 11,5 a 14,5 gr./dl

Conclusiones
El reactivo contiene cianuro potásico, es venenoso. Evitar la inhalación y el contacto con la piel.
(Jamás pipetear el reactivo). Concluimos después de realizar la práctica que la hemoglobina es una
proteína muy importante ya que se encarga de llevar el oxígeno desde la atmosfera a los tejidos y de
igual forma recoger el anhídrido carbónico desde los tejidos para llevarlos a los pulmones.
La hemoglobina puede tener algunas alteraciones como la anemia falciforme que es un tipo de anemia
por la mala colocación de aminoácidos lo que causa que los glóbulos rojos tengan una forma de semi
luna y sus funciones se vean afectadas.
Existen valores de referencia de la hemoglobina tanto para los hombres como para las mujeres y que
a más altura donde se cica los valores de hemoglobina también van a aumentar.

Recomendaciones

 Un valor DISMINUIDO Anemias primarias, Cáncer. Embarazo, Enfermedades renales

 Un valor ELEVADO Cardiopatías, Deshidratación, Estancias en lugares de mucha altitud

Bibliografía

 Rodríguez J. (2012). Guía de Prácticas de Hematología y Atlas Editorial EduQuil

 Kodak, B. (2015) Hematología Fundamentos y aplicaciones clínicas.
 Robert K. Murray. Bioquimica de Harper: MCGRAW HILL; 2010. 
 Hall JE. Tratado de Fisiología Médica de Guyton y Hall: ELSEVIER; 2011
 Calle., D. A. El Laboratorio en Bioquímica. Quito. 2014 LINKOGRAFÍA 1.
http://kidshealth.org/es/parents/thalassemias-esp.html 2.