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|ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD: CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA
INFORME DE LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS II

PRÁCTICA No 6

TEMA:

DETERMINACIÓN DE COLESTEROL

1. DATOS GENERALES

NOMBRES CÓDIGOS
CHICAIZA MOPOSITA YULISSA MISHELL 3562
CHUNATA MANOTOA YESSENIA PAOLA 3499
GUAMAN LOPEZ GRACE YAJAIRA 3468
MAJI CISLEMA EDISON FERNANDO 3488
VARGAS QUISNIA VALERIA ESTEFANIA 3685

GRUPO No.: 7
DOCENTE: DRA. ADRIANA MONGE
NIVEL: SEXTO PARALELO: “B”
LUGAR DE REALIZACIÓN: LABORATORIO DE DOCENCIA
FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:
2021/12/21 2022/01/04
2. OBJETIVOS
2.1. General
• Determinar Colesterol en Sangre
2.2. Específicos
• Explicar el método de análisis utilizado en esta determinación.
• Conocer los valores de referencia en la determinación de Colesterol.
• Calcular las concentraciones de colesterol en la muestra de suero.
• Interpretar los resultados obtenidos y correlacionarlos con su importancia
biomédicas

3. MARCO TEÓRICO

COESTEROL

- ¿Qué es y para qué sirve el colesterol?

El colesterol es uno de los lípidos o grasas más importantes que se encuentran en nuestro
cuerpo. Sirve, fundamentalmente, para la formación de las membranas de las células de
nuestros órganos y como “materia prima” para la síntesis de hormonas sexuales y las de
origen suprarrenal; también es precursor de los ácidos biliares, que son sustancias que
forman parte de la bilis y que facilitan la digestión de los alimentos grasos. (1)

- ¿Existen dos tipos de colesterol?

Sí..., aunque con matices. Si bien el colesterol es un principio único, como hemos dicho
antes, es transportado en la sangre por las lipoproteínas. Básicamente, hay dos lipoproteínas
que se encargan de este transporte: las lipoproteínas de baja densidad o LDL (del inglés,
low density lipoprotein) y las de alta densidad o HDL (high density lipoprotein). (1)

Las primeras son encargadas de llevar el colesterol a los tejidos, y su exceso se asocia al
desarrollo de la arteriosclerosis. Las HDL extraen el colesterol sobrante de las células y de
las placas de ateroma. (1)

En los análisis del laboratorio, además del colesterol total, se determina el colesterol ligado
a ambos tipos de lipoproteínas: colesterol-LDL y colesterol-HDL. Corresponden, dadas sus
propiedades de aumentar o disminuir las placas de ateroma, a lo que coloquialmente se
denomina colesterol “malo” o “bueno”. (1)

DISLIPIDEMIAS Y CLASIFICACIÓN

- Dislipidemias

Las dislipidemias son aquellas alteraciones en la síntesis, transporte o metabolismo de las


lipoproteínas que cursan con concentraciones de lípidos alteradas, tanto por exceso
(hiperlipidemia), como por defecto (hipolipidemia). El estudio de estas anomalías es
importante, ya que existe una asociación significativa entre las alteraciones de las
lipoproteínas plasmáticas y el desarrollo del proceso aterosclerótico. Por tanto, su
diagnóstico a partir de un análisis de rutina de laboratorio es de importancia debido a que su
relación con la enfermedad cardiovascular es causal y presentan una gran morbimortalidad.
(2)

- Clasificación

SEGÚN FENOTIPO LIPÍDICO (FREDRICKSON-OMS):

En 1972, la OMS aceptó como estándar mundial la clasificación realizada por Fredrickson,
basada en el fenotipo lipoproteico encontrado mediante electroforesis o ultracentrifugación,
para clasificar las anormalidades lipídicas en cinco tipos. Aunque resulta de utilidad para
diferenciar las hiperlipemias, presenta importantes limitaciones como son su incapacidad
para diferenciar el origen y el mecanismo responsable de la alteración lipídica. Por esta
razón, en la actualidad, su empleo en la práctica clínica es limitado, siendo más interesante
la clasificación etiológica. (2)

- El fenotipo I es una hipertrigliceridemia exógena por un aumento de los


quilomicrones plasmáticos. (2)
- El fenotipo IIa corresponde a un hipercolesterolemia por un aumento de LDL,
mientras que el IIb es un hipercolesterolemia por un aumento de VLDL y LDL, con
elevación moderada de triglicéridos de origen endógeno. (2)
- El fenotipo III es una dislipidemia caracterizada por presentar la denominada banda
β ancha en la electroforesis de lipoproteínas. Esta banda está compuesta por
remanentes de quilomicrones y VLDL, VLDL ricas en colesterol e IDL, las cuales
se unen y forman la β-VLDL. (2)
- En cambio, los fenotipos IV y V corresponden a hipertrigliceridemias, siendo la de
tipo IV de origen endógeno a expensas de VLDL, y la de tipo V de origen mixto
con un aumento tanto de TG exógenos (quilomicrones) como endógenos (VLDL).
(2)

SEGÚN ETIOLOGÍA:

Según esta clasificación podemos diferenciar entre dislipidemias primarias y secundarias,


siendo las primeras de un origen en el que predominan las causas genéticas, y las segundas
de un origen en el que predominan los factores ambientales u otros trastornos o
enfermedades. (2)

a. DISLIPIDEMIAS PRIMARIAS:

Su desarrollo se debe principalmente a causas genéticas y afectan a un 5-10% de la


población general. La mayoría son de origen poligénico, es decir, que su aparición se debe
a la presencia de numerosas variantes genéticas, y las diferencias interindividuales se deben
a la exposición a determinados factores genéticos, médicos o ambientales que marcarían la
diferencia en la expresión de la dislipidemia a igualdad susceptibilidad genética. Por otro
lado, también existen dislipidemias causadas por mutaciones en un solo gen, denominadas
monogénicas, y que exhiben un patrón de herencia mendeliana de tipo autosómico
dominante, codominante o autosómico recesivo. (2)

- Hipercolesterolemias Primarias:

Distintas entidades clínicas cursan con aumentos en los niveles plasmáticos de LDL, entre
las cuales podemos encontrar: la hipercolesterolemia familiar, el defecto familiar en la
apolipoproteína B-100 y la hipercolesterolemia poligénica. (2)
El hipercolesterolemia familiar (HF) se origina por mutaciones en el receptor de LDL
(LDLR) que pueden ocasionar defectos en su síntesis, bloqueo del transporte del receptor
desde el retículo endoplásmico hasta el aparato de Golgi y defectos en la internalización del
LDLR. (2)

El defecto familiar en la apolipoproteína B-100 (DFB) se trata de un defecto en el gen


que codifica la ApoB-100, la apoproteína de las LDL que interactúa con el LDLR. (2)

El hipercolesterolemia poligénico (HP) es la hiperlipidemia más frecuente dentro de las


hipercolesterolemias primarias con fenotipo IIa de Fredrickson. Se caracteriza por cifras de
LDL por encima de 190 mg/dl como consecuencia de la interacción de múltiples genes con
el ambiente. (2)

- Hipertrigliceridemias primarias:

Comprenden un grupo de hipertrigliceridemias familiares debidas a mutaciones en distintos


genes, entre las que se encuentran: la deficiencia familiar de lipoproteína lipasa (LPL), la
deficiencia familiar de ApoC-II y el déficit de ApoA-V. (2)

En la deficiencia familiar de LPL, se produce un aumento marcado de los quilomicrones y


no de VLDL, a pesar de ser esperable un incremento conjunto debido al rol de la LPL en el
metabolismo de ambos. (2)

- Hiperlipidemias mixtas:

Son las caracterizadas por un aumento de los niveles plasmáticos de colesterol total y
triglicéridos simultáneamente. Entre las causas primarias, se destacan la hiperlipidemia
familiar combinada y la disbetalipoproteinemia o hiperlipidemia tipo III.

La hiperlipidemia familiar combinada (HLFC) es la forma más común entre las


dislipidemias de origen genético. Alrededor del 20% de los individuos que la padecen
experimentan coronariopatía por aterosclerosis antes de los 60 años. (2)

La disbetalipoproteinemia o hiperlipidemia tipo III se origina por un defecto estructural


en la ApoE que conduce a una disminución en la unión a los receptores hepáticos y
periféricos de APOB/E, lo que resulta en una disminución de la captación hepática de las
IDL y los quilomicrones remanentes, lo que incrementa el recambio de sus componentes a
nivel plasmático con otras lipoproteínas como las LDL y las HDL. (2)

- Hipolipidemias primarias:

Se tratan de trastornos genéticos que se presentan con mucha menor frecuencia que las
hiperlipidemias primarias. Cursan con niveles muy bajos e incluso ausentes de
lipoproteínas circulantes. Dentro de este grupo, se destacan la abetalipoproteinemia, la
hipobetalipoproteinemia familiar y las hipoalalfalipoproteinemias. (2)

La abetalipoproteinemia es una enfermedad de transmisión autosómica recesiva de muy


baja incidencia que se manifiesta desde la infancia. Se caracteriza por niveles bajos de
VLDL y LDL con ausencia de ApoB-100. Las concentraciones plasmáticas de colesterol
total y TG son extremadamente bajas. (2)

La hipobetalipoproteinemia familiar se caracteriza por un bajo nivel plasmático de LDL


y ApoB. Clínicamente se manifiesta con aumento de las enzimas hepáticas, intolerancia
oral y malabsorción intestinal a las grasas e hígado graso. (2)

Las hipoalalfalipoproteinemias constituyen un grupo de distintas condiciones


caracterizadas por presentar unos niveles bajos de HDL, menores de 35 mg/dl y
normalmente comprendidos en el rango de entre 20-29 mg/dl, y por tener un elevado
potencial aterogénico. (2)

b. DISLIPIDEMIAS SECUNDARIAS:

Este tipo de dislipidemias son las más frecuentes y se deben a factores ambientales, a malos
hábitos higiénico-dietéticos o a la presencia de otra enfermedad subyacente.
Entre las causas más significativas de estas dislipidemias se encuentran la diabetes mellitus,
la obesidad, el síndrome metabólico, el hipotiroidismo, el síndrome nefrótico, así como el
tabaquismo. Aunque en la dislipidemia secundaria está indicado en muchos casos el
tratamiento con fármacos hipolipidemiantes, siempre será prioritario el tratamiento y
control previo de la enfermedad de base, así como una corrección de los hábitos. (2)
4. METODOLOGÍA

Pipetear en cubetas (Agua En agua destilada


INICIO destilada, STD y Reactivo) Blanco de reactivo: 100μl

Reactivo
ESTÁNDAR (STD) Blanco de reactivo: 1000μl
STD: 1000μl
Mezclar
STD: 100μl
Muestra: 1000μl

Leer la absorbancia de la
Incubar por 5 min a muestra y el estándar,
37°C o por 10 min de frente al blanco de FIN
20 a 25 °C reactivo antes de los 60
min.

5. EQUIPOS Y MATERIALES
• Espectrofotómetro
• Centrífuga
• Baño maría
• Pipetas automáticas
• Tubos tapa roja
• Vacutainer
• Torniquete
• Gradilla de tubos
• Torundas de algodón con alcohol
• Reactivos de colesterol
6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

DATOS

ABSORBANCIAS VALOR
Abs del blanco 0.02
Abs del estándar 0.439
Abs de la muestra 0.832

CÁLCULOS Y RESULTADOS

CONCENTRACIÓN DE COLESTEROL
(Ab muestra − Ab del blanco) mg
Concentración de Colesterol = × 200 ⁄dL
(Ab del estándar − Ab del blanco)

(0.832 − 0.02) mg
Concentración de Colesterol = × 200 ⁄dL
(0.439 − 0.02)

𝐦𝐠
Concentración de Colesterol = 𝟑𝟖𝟕. 𝟓𝟖𝟗 ⁄𝐝𝐋

Concentración de Colesterol
Factor =
Ab del estándar − Ab del blanco

mg
387.589⁄dL
Factor =
0.439 − 0.02

mg
Factor = 925.033 ⁄dL

mg
Factor = 925.033 ⁄dL × (Ab estándar − Ab blanco)

mg
Factor = 925.033 ⁄dL × (0.439 − 0.02)
mg
Factor = 925.033 ⁄dL × (0.419)

𝐦𝐠
Factor = 𝟑𝟖𝟕. 𝟓𝟖𝟗 ⁄𝐝𝐋

IMPORTANCIA CLINICA

El colesterol es un lípido (grasa). Se forma en el hígado a partir de alimentos grasos y es


necesario para el funcionamiento normal del organismo. El colesterol está presente en la
membrana plasmática (capa exterior) de todas las células del organismo. El colesterol se
desplaza por la sangre mediante unas moléculas denominadas lipoproteínas. (3)

Los valores normales son:

- Normal: menos de 200 mg/dl y se considera con bajo riesgo de sufrir cardiopatías.
- Normal-alto: entre 200 y 240 mg/dl.
- Alto: por encima de 240 mg/dl se considera colesterol alto.

El valor que se obtuvo al momento de realizar los cálculos es de 387.589 mg/dL por lo que
podemos decir que sobrepasa los niveles normales mencionados anteriormente, se puede
decir que el paciente tiene hiperlipidemia o hipercolesterolemia.

DISCUSIÓN

En primera instancia el colesterol es un lípido anfipático y, como tal, es un componente


estructural esencial de las membranas, donde es importante para el mantenimiento de la
permeabilidad y fluidez correctas, y de la capa externa de las lipoproteínas plasmáticas. Se
sintetiza en muchos tejidos a partir de la acetil-CoA, y es el precursor de todos los otros
esteroides en el organismo, incluso corticosteroides, hormonas sexuales, ácidos biliares y
vitamina D. Además, el colesterol proviene de dos fuentes: la mayor producción se efectúa
en el hígado y otra parte se adquiere a través de la ingesta de alimentos que lo contienen.
(4)

Tomando en cuenta este particular el valor obtenido del colesterol es de 387.589 mg/dL,
que básicamente sobrepasa los niveles normales de colesterol, como tal, según el Instituto
Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre (NHLBI, por sus siglas en inglés), las
personas deben realizarse el primer análisis de colesterol entre los 9 y los 11 años y, luego,
deben hacerse uno cada cinco años, por otro lado El National Heart, Lung and Blood
Institute recomienda que los hombres de entre 45 y 65 años y las mujeres de entre 55 y
65 años se realicen análisis de colesterol cada 1 o 2 años. Las personas mayores de 65 años
deben hacerse análisis de colesterol una vez al año, adicionalmente se efectúa que los
valores menores de 200 mg/dL se considera un nivel deseable, un nivel de 200 hasta 239
mg/dL es considerado en el límite superior y valores de 240 mg/dL en adelante se considera
como tal colesterol alto y esto puede está asociado con enfermedades de las arterias
coronarias. (5)

ESQUEMA DE PIPETEO DEL COLESTEROL


7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

CONCLUSIONES

• Para determinar el colesterol en sangre se realizó con el suero del paciente la cual
fue tratada (después de hidrolisis enzimática y oxidación) se leyó en un
espectrofotómetro a 500-546 nm.
• Para la determinación se empleó el método enzimático colorimétrico, para lo cual
antes de analizar la muestra pasa por un proceso previo, centrifugación, se procede a
tomar en tubo de ensayo distintos 100µL de estándar, en un segundo tubo 100 µL de
reactivo y los tubos con las muestras a analizar, los cuales se mezclan e incuban por
5 min a 37º C para posteriormente leer los tubos en un espectrofotómetro.
• Para la determinación de colesterol los valores de referencia que se evidenciaron
son dependiendo si son adultos o jóvenes siendo así que en adultos el valor de
referencia está dentro del límite deseable menor de 200 mg/dL, el límite alto entre
200-239 mg/dL y se considera alto cuando el valor es superior a 240 mg/dL,
mientras que para personas menores de 19 años el valor de referencia está dentro del
límite deseable menor de 170mg/dL, el límite alto entre 170-199 mg/dL y se
considera alto cuando el valor es superior a 200 mg/dL.
• Las concentraciones de colesterol que se obtuvieron luego de los cálculos
respectivos fueron de 387.589 mg/dL, lo cual nos indica que es un valor elevado a
los valores de referencia, lo cual nos puede indicar una acumulación de depósitos de
grasa en las arterias, lo que ocasiona un estrechamiento en las arterias provocando
obstrucciones en el cuerpo lo que se conoce como ateroesclerosis u otras
enfermedades asociadas a esta patología. (6)
RECOMENDACIONES

• Es importante tener en cuenta las condiciones preanalíticas del paciente para la


extracción de la toma muestra.
• Se recomienda utilizar el método enzimático colorimétrico que este avalado en
laboratorios certificados para obtener resultados más confiables y seguros para el
paciente.
• Realizar un adecuado pipeteo de las muestras, así como de la sustancia estándar y
control para evitar errores al momento de analizar las muestras, por lo cual se debe
seguir un orden que es la lectura del estándar, control y finalmente las muestras a
analizar.
• Es fundamental contar con un laboratorio certificado que pueda dar garantía de los
resultados para el paciente, es necesario que los analistas mantengan siempre
estables el cumplimiento de los elementos de bioseguridad dentro de un laboratorio
para garantizar la integridad del profesional y el buen trato de la muestra.

8. BIBLIOGRAFÍA

1. Brea Hernando Á. Rioja Salud. [Online]; 2012. Acceso 01 de Enerode 2022. Disponible
en: https://www.riojasalud.es/servicios/medicina-interna/articulos/que-es-el-colesterol.

2. Villalba Torres A, Arrieta Giménez E, Espartero González A, López Gómez M,


Jiménez Moraleda B, Martínez Martínez M. Clasificación de las dislipidemias, una
revisión bibliográfica. Revista Sanitaria de Investigación. 2021; III(7).

3. NHS. El colesterol. Choices. 2008;: p. 1 - 5.

4. KM B. AccessMedicina home page. [Online]; 2013. Acceso 3 de Enerode 2022.


Disponible en:
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1441&sectionid=1004837
46.

5. Mayo Clinic. MAYO CLINIC. [Online]; 2021. Acceso 3 de Enerode 2022. Disponible
en: https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/cholesterol-test/about/pac-
20384601.

6. Mayo Clinic. Análisis de colesterol. [Online]; 2021. Disponible en:


https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/cholesterol-test/about/pac-
20384601.

7. Martinez E, Moize V, Daniel R. Clinic Barcelona. [Online]; 2018. Disponible en:


https://www.clinicbarcelona.org/asistencia/enfermedades/colesterol.

8. Mayo Clinc. Mayo Clinic. [Online]; 2019. Disponible en:


https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/high-blood-
cholesterol/symptoms-causes/syc-20350800.

9. Sanchez M. Dislipidemias. Scielo. 2015;: p. 1-16.

10 Medline PLus. Medline PLus. [Online]; 2019. Disponible en:


. https://medlineplus.gov/spanish/cholesterollevelswhatyouneedtoknow.html.

11 Barrios B, Ruiz D, Cristina L. Universidad Nacional del Noroeste Facultad de


. Medicina. [Online]; 2016. Disponible en:
https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/imagenes/ckfinder/files/files/Carrera-
Medicina/BIOQUIMICA/sindrome metabolico.pdf.

9. ANEXOS
9.1. CUESTIONARIO

1. ¿Qué indica el colesterol?

El colesterol indica la cantidad de cada tipo de colesterol y de ciertos lípidos en la sangre.


Como por ejemplo las lipoproteínas de baja densidad (LDL) y las lipoproteínas de alta
densidad (HDL). (7)

2. ¿Qué es lo que causa el colesterol?


Las causas son que puede limitar la irrigación sanguínea y aumentar el riesgo de infartos o
derrames cerebrales. (7)

3. ¿Cuáles son los síntomas del colesterol alto?

Por lo general, no hay signos o síntomas de que tenga colesterol alto. Un análisis de sangre
es la única manera para medir su nivel de colesterol. (8)

4. Hable sobre las lipoproteínas plasmáticas.

Las lipoproteínas plasmáticas. constituyen un sistema polidisperso y heterogéneo de


partículas de morfología casi esférica, que tienen un núcleo o core hidrófobo formado por
lípidos no polares, es decir, colesterol esterificado y triglicéridos (TAG), y por una capa
superficial hidrófila que contiene colesterol no esterificado, fosfolípidos (FL) y unas
proteínas específicas denominadas apoproteínas (Apo)

5. Consulte los siguientes términos: ateroesclerosis, dislipidemia, colesterol,


triglicéridos, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia.

Ateroesclerosis. - Acumulación de grasas, colesterol y otras sustancias en las paredes de


las arterias.

Dislipidemia. - son trastornos en los lípidos en sangre caracterizados por un aumento de los
niveles de colesterol o hipercolesterolemia e incrementos de las concentraciones de
triglicéridos (TG) o hipertrigliceridemia.

Colesterol. - es una sustancia cerosa que se encuentra en la sangre, una grasa natural,
presente en cualquier organismo e imprescindible para su funcionamiento.

Triglicéridos. - son un tipo de grasa (lípidos) que se encuentran en la sangre. Puesto que
son los principales constituyentes de la grasa corporal en los seres humanos por lo que se
almacenan en las células grasas.

Hipercolesterolemia. - es el aumento del nivel o cantidad de colesterol en sangre.

Hipertrigliceridemia. - es el nivel elevado de triglicéridos en la sangre. (9)


6. Importancia clínica del colesterol

Es importante el análisis de colesterol completo, también denominado lipograma o perfil


lipídico, es un análisis de sangre que permite medir la cantidad de colesterol y triglicéridos
en la sangre puesto que nos permite ayudar al médico a diagnosticar la cantidad de
colesterol presente en la sangre y así podrá continuar con el tratamiento. Y evitar el riesgo
de ataques cardíacos y otras formas de enfermedad cardíaca y enfermedades de los vasos
sanguíneos. (7)

7. Valores de referencia del colesterol

Personas de 19 años o menores:

Tipo de colesterol Nivel saludable

Colesterol total Menos de 170 mg/dL

No-HDL Menos de 120 mg/dL

LDL Menos de 100 mg/dL

HDL Más de 45 mg/dL

Hombres de 20 años o mayores

Tipo de colesterol Nivel saludable

Colesterol total 125 a 200 mg/dL

No-HDL Menos de 130 mg/dL

LDL Menos de 100 mg/dL

HDL 40 mg/dL o mayor

Mujeres de 20 años o mayores:

Tipo de colesterol Nivel saludable

Colesterol total 125 a 200 mg/dL


Tipo de colesterol Nivel saludable

No-HDL Menos de 130 mg/dL

LDL Menos de 100 mg/dL

HDL 50 mg/dL o mayor


(10)

8. ¿Qué es síndrome metabólico?

El síndrome metabólico es un grupo de trastornos que se presentan al mismo tiempo y


aumentan el riesgo de enfermedad cardíaca, accidente cerebrovascular y diabetes tipo 2.
Estos trastornos incluyen aumento de la presión arterial, niveles altos de azúcar en sangre,
exceso de grasa corporal alrededor de la cintura y niveles anormales de colesterol o
triglicéridos. (11)
9.2.REPORTE DE RESULTADO

LABORATORIO CLÍNICO
ATENCIÓN 24 HORAS
ANÁLISIS AUTOMATIZADO

Paciente: GRACE YAJAIRA GUAMÁN LÓPEZ Edad: 23 Sexo: Femenino


ID: 0604589168 Código: 3486
Medico: NO ASIGNADO Fecha recep: 04/01/2022
Muestra: Suero

ANÁLISIS RESULTADO VALORES DE REFERENCIA


DETERMINACIÓN 387.589 mg/dL 200-240 mg/dL
DE COLESTEROL

*RESULTADO CONFIRMADO
NOTA: Paciente con ayuno, toma de muestra 07:30

Lcda. Yulissa Chicaiza Dr. Edison Fernando Maji


LCDA LABORATORIO CLÍNICO BIOQUÍMICO FARMACÉUTICO
Procesado por: Validado por:

Av. 9 de Octubre, Suecia y Pasaje 1 (Colegio Hispanoamérica) Telf.: (03) 2626595 / 0992292496 /
0958842995
RIOBAMBA – ECUADOR

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