FACULTAD DE INGENIERÍA Y CIENCIAS APLICADAS

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
BIOTECNOLOGIA HUMANA

Células CAR para CD19

Autores

TIPANTUÑA EDU

MANCHENO ALEJANDRO

Año

2021
RESUMEN

Con el fin de desarrollar tratamientos con alta eficiencia en torno al control o

eliminación de tumores que producen cáncer en los distintos tejidos. Ha surgido la
inmunoterapia la cual se basa en el uso de los propios mecanismos del organismo,
pero modificados con el fin de aumentar su capacidad de detección y eliminación de
células tumorales. Entre estas técnicas existe una basada en el uso de las células T con
receptores quiméricos modificados denominadas como células T CAR (chimeric
antigen receptor). Estos receptores quiméricos son más eficientes en la detección de
células mutadas en comparación con las células T normales llegando a detectar
incluso cuando las células cancerígenas ya han evadido la detección del sistema
inmune natural del paciente. Recientemente la FDA aprobó el uso de las células T
con CAR CD19 para el tratamiento de tumores especificos con posible uso para la
oncología, estas células proporcionan ventajas cambiando el paradigma del cáncer
proporcionando una nueva era. La eficiencia de las celas CAR T es clara en ciertos
tejidos, pero en un enfoque general tiende a ser reducida, esto no quiere decir que no
se la pueda usar como tratamiento colaborador a otro que si tenga la eficiencia
deseada. La investigación de este tipo de inmunoterapia aún tiene que ser
perfeccionada hasta el punto de poder convertirla en los tratamientos principales
contra el cáncer.

ABSTRACT

In order to develop highly efficient treatments around the control or elimination of

tumors that cause cancer in different tissues. Immunotherapy has emerged which is
based on the use of the body's own mechanisms but modified to increase its ability to
detect and eliminate tumor cells. Among these techniques there is one based on the
use of T cells with modified chimeric receptors called CAR T cells (chimeric antigen
receptor). These chimeric receptors are more efficient in detecting mutated cells
compared to normal T cells, even detecting when cancer cells have already evaded
the detection of the patient's natural immune system. Recently, the FDA approved the
use of CAR CD19 T cells for the treatment of specific tumors with possible use for
oncology, these cells provide advantages by changing the paradigm of cancer
providing a new era. The efficiency of CAR T cells is clear in certain tissues, but in a
general approach it tends to be reduced, this does not mean that it cannot be used as
a collaborative treatment for another that does have the desired efficiency. Research
on this type of immunotherapy has yet to be refined to the point where it can become
the leading cancer treatments.
 ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN
2. SISTEMA INMUNE
3. TIPOS DE INMUNIDAD
3.1 INMUNIDAD INNATA
3.2 INMUNIDAD ADAPTATIVA
4. SISTEMA INMUNE Y LOS TUMORES:
5. INMUNOTERAPIA
6. TIPOS DE INMUNOTERAPIA
6.1 Terapia de inmunoglobulina
6.2 Uso de factor de transferencia (TF)
6.3 Uso de inmunosupresores
6.4 Trasplante
6.5 Uso de interferón gamma
6.6 Inhibidores de puntos de control inmunológico
6.7 Antagonistas de citocinas (IL-1RA)
7. CANCER
8. INMUNOTERAPIAS CONTRA EL CANCER
8.1 Inhibidores de punto de control inmunitario
8.2 Terapia de transferencia de células T
8.3 Anticuerpos monoclonales
8.4 Vacunas de tratamiento
8.5 Inmunomoduladores
9. TERAPIA CON CÉLULAS ADOPTIVAS PARA EL CÁNCER
10. CÉLULAS T CON RECEPTOR DE ANTÍGENO QUIMÉRICO (CAR)
10.1 Orientación
10.2 Señalización
10.3 Trafico
10.4 Persistencia
10.5 Función
10.6 Toxicidad
11. USO DE CÉLULAS ASESINAS NATURALES TRANSDUCIDAS CON CAR EN
TUMORES LINFOIDES POSITIVOS PARA CD19
11.1 Seguridad
11.2 Respuestra al tratamiento
11.3 Expansión, migración y persistencia de CAR-NK
12. CONCLUSIONES
13. REFERENCIAS
1. INTRODUCCIÓN

Inicios de la investigación en torno a la inmunoterapia.

A lo largo de la historia han existido personas que guiados por su curiosidad y por la
motivación de aportar un beneficio a la humanidad han desarrollado experimentos los
cuales han iniciado varias disciplinas que en la mayoría de los casos ellos mismo no
se imaginaban que su trabajo tendría una consecuencia tan grande. Una de estas
personas fue el cirujano WB Coley el cual mediante su trabajo nombrado “The
Treatment of Malignant Tumors by Repeated Innoculations of Erysipelas: With a
Report of Ten Original Cases” publicado a finales del siglo XIX. En la mencionada
publicación muestra su observación en la reducción del tamaño de sarcomas mediante
inyecciones de Streptococcus pyogenes dando así a los primeros escritos en relación
con la inmunología y oncología. Se puede decir que fue de las primeras personas en
observar un comportamiento inmuno-oncológico lo cual más de un siglo después es
la base para varios tratamientos que buscan luz verde para su aplicación en humanos
con resultados prometedores.

2. SISTEMA INMUNE

Los seres humanos gracias a varios siglos de evolución han logrado desarrollar un
sistema eficiente para tratar infecciones de organismos ajenos al propio cuerpo,
también llamados antígenos y regular el comportamiento celular que pueda afectar a
la salud del humano. Este se ha denominado sistema inmune el cual posee diversos
órganos y células especializadas. Entre los órganos definidos como principales se los
nombra al timo y la médula ósea con una función encargada de proporcionar un
ambiente óptimo para la maduración de las células inmunitarias relacionadas a la
inmunidad adquirida. Como órganos secundarios se enlistan a el bazo, ganglios
linfáticos y tejido especializado de las mucosas; estos órganos son encargados de la
presentación del antígeno, proceso por el cual varias reacciones trabajan en conjunto
para formar una señalización la cual es reconocido por los linfocitos T.

3. TIPOS DE INMUNIDAD
3.1 Inmunidad innata

Se puede decir que es la primera línea de defensa ante la respuesta de un agente

extraño, este agente no se limita solo a patógenos ya que puede incluir toxinas. Se
reconoce ciertas secciones características presentes en distintos tipos de patógenos o
en el caso de regulación celular del propio organismo reconocer patrones de células
defectuosas o mutantes. Al ser un sistema no especifico actúa de manera similar para
una amplia gama de microorganismos. Sus primeras líneas de defensa se basan en
barreras las cuales pueden ser superficiales, en el caso de la piel, o químicas como es
la secreción por parte de la piel de péptidos específicos para combatir la actividad
microbiana. Otro tipo de barreras para impedir la actividad de patógenos son las
barreras humorales como es la fiebre que puede traducirse con un aumento de
temperatura con el fin de dificultar la proliferación de la infección; la inflamación
producida por la liberación de compuestos específicos por células las cuales han sido
dañadas causando la acumulación de células inmunes que producirán compuestos
tóxicos hacia el patógeno al mismo tiempo que promueven el reclutamiento de
leucocitos; finalmente el sistema del complemento encargado de complementar la
destrucción de agentes patógenos en conjunto con los anticuerpos mediante cascadas
bioquímicas. La inmunidad innata es un componente presente en gran parte de formas
de vida.

3.2 Inmunidad adaptativa

Como su nombre manifiesta es el tipo de inmunidad que se va a ir adaptando,

dependiendo del patógeno que ingrese al organismo, es característico de vertebrados
mandibulados. Se basa en la memoria inmunológica la cual consiste en conjunto con
el proceso de presentación del antígeno de producir anticuerpos específicos para
patógenos específicos, las células de memoria son las encargadas de “recordar”
estructuras características del patógeno y fomentar una respuesta fuerte en caso de
detectar a ese mismo microrganismo. Entre los componentes encargados de la
inmunidad adaptativa encontramos a un tipo de leucocito nombrado como linfocito
entre ellas destacan las clases B y T, estas células son producidas en las células madre
pluripotentes hematopoyéticas las cuales se encuentran en la medula ósea. Estas
células tienen su función específica en los distintos tipos de respuesta siendo las
células B relacionadas con la respuesta humoral mientras que las células T se
encuentran involucradas en la inmunidad mediada por las propias células del
organismo. Estas células tienen en su estructura receptores específicos destinados a
reconocer un objetivo determinado. En el caso de las células T este receptor solo va
a funcionar si existe un proceso previo donde el patógeno es procesado por el
complejo de histocompatibilidad mayor. Por otro lado, las células B reconocen los
microorganismos sin la necesidad de un procesamiento previo ya que su receptor se
basa en el uso de una parte de la superficie del patógeno la cual le da el potencial de
reconocer al microorganismo ajeno completo.

Entre los linfocitos T existe una subdivisión dependiendo de la función de la célula,

en el caso de los linfocitos T citotóxicos son los encargados de eliminar a las células
que se encuentren infectadas por virus o bacterias. los linfocitos T colaboradores por
otro lado tienen la función de decidir qué tipo de respuesta será la encargada en caso
de la detección de un patógeno es decir actúa como un regulador de la respuesta innata
y adaptativa; vale la pena mencionar que al ser reguladores no poseen ningún tipo de
actividad citotóxica. Otro grupo peculiar del cual no se tiene la certeza de que tipo de
antígenos o moléculas de estos son las que las estimulan son las células T γδ por lo
general los linfocitos T están conformados por dos cadenas α y β, pero en el caso de
estos linfocitos peculiares poseen su receptor formadas por cadenas γ y δ, otro punto
en el que difieren de las células T normales es que no necesitan un procesamiento
previo para la detección del antígeno.

El funcionamiento de las células B es más específico ya que al momento de reconocer

al cuerpo extraño mediante su receptor de antígeno este complejo ingresa a la célula
B donde es degradado en péptidos, este compuesto peptídico degradado va a colocarse
en la superficie del linfocito unido a un grupo de moléculas especificas denominadas
como CMH, este complejo a su vez atrae linfocitos T colaboradores, finalmente esta
última molécula activa al linfocito B. Esta activación causa que la célula B se divida
dando como resultado la producción de millones de anticuerpos específicos para este
antígeno, estos serán transportados por la linfa y el plasma donde al llegar al antígeno
se quedaran adheridos dejándoles una “marca” la cual va a ser reconocida por células
citotóxicas empezando así la eliminación de la infección.
Tabla comparativa de los tipos de inmunidad.

INMUNIDAD INNATA INMUNIDAD ADAPTATIVA

Respuesta no especifica Respuesta especifica

Reacciona en base a patrones Reacciona en base a los antígenos

moleculares

Existe una respuesta máxima de La respuesta máxima tarda desde el

inmediato reconocimiento del antígeno

Intervienen células y componentes Intervienen células y componentes

humorales humorales

No produce memoria inmunológica Produce memoria inmunológica

Existe en gran parte de organismos Existe en vertebrados mandibulados.

4. SISTEMA INMUNE Y LOS TUMORES:

El sistema inmune no solo está encargado de eliminar potenciales amenazas al

organismo que tengan como origen el exterior del cuerpo además presenta funciones
encargadas del reconocimiento de células que divergen de un comportamiento
normal, estas pueden ser células infectada por virus o bacterias y células mutantes con
potencial para desarrollar tumores u otro tipo de condiciones médicas. Al ser células
que no se comportan como el resto tienden a producir moléculas extrañas las cuales
son reconocidas por el sistema inmune como ajenas al cuerpo marcándolas como
antígenos esto a su vez genera que las células inmunitarias tengan prioridad en la
eliminación de las células mutantes. Por lo general el sistema inmune es eficiente en
la eliminación de células tumorales, pero estas al producirse continuamente debido a
infecciones microbianas constantes, por el contacto con sustancias nocivas
continuamente o hábitos dañinos pueden llegar a evadir al sistema inmune y silenciare
por intervalos de tiempo con el fin de desarrollar mecanismo que le permita a la célula
alimentarse al mismo tiempo que evade la detección por parte del sistema inmunitario.
Un mecanismo en el cual estas células se adaptan es la disminución CMH de clase I
en su superficie con el fin de tratar de semejarse lo más posible a células normales,
otro mecanismo es la producción de sustancias específicas para inhibir células
inmunes como es el caso de la producción de TGF-β lo cual inhibe específicamente a
macrófagos y linfocitos. Una vez las células cancerígenas han logrado evadir de una
u otra forma al sistema inmune y su mecanismo de detección el cáncer va a
desarrollarse sin ninguna restricción.

5. INMUNOTERAPIA

Han surgido varias formas de tratamiento a lo largo de las décadas basadas en

investigación y observación, el enfoque clásico se basa en usar fármacos a partir de
sustancias y compuestos específicos a una determinada concentración. Mediante el
auge de los fármacos se ha establecido el modelo clásico como la primera alternativa
al momento de buscar la cura o mínimo el tratamiento eficiente a determinadas
enfermedades o condiciones. En el caso del cáncer el enfoque clásico no ha rendido
de forma eficiente en la mayoría de los casos ya que solo la aplicación de
medicamentos no es suficiente para detener la proliferación de tumores en los
distintos tejidos, mucho menos erradicarlo por completo. Visto a buscar alternativas
fuera de un enfoque clásico se ha optado por el modelo del propio del funcionamiento
del sistema inmune; de esta visión surge el termino denominado como inmunoterapia
la cual se la puede definir como la manipulación e incremento de la capacidad del
propio organismo para tratar con las afecciones, en el caso del cáncer se traduciría en
la capacidad de detectar tumores y eliminarlos. En la actualidad los ensayos clínicos
realizados en base al tratamiento de cáncer están liderados por desarrollo de terapias
inmunogénicas. Dentro de las distintas posibilidades en torno al tratamiento
antitumoral se han se han desarrollado una amplia gama de posibilidades entre las
cuales destacan: anticuerpos monoclonales, citoquinas y la inmunoterapia con células
T o células natural killer. En el reciente segundo impulso de la inmunoterapia una
gran parte de los investigadores han decidido centrarse en los linfocitos T los cuales
poseen agregado en su estructura de receptor como es en el caso de las células T
modificadas con un receptor antigénico quimérico (CAR).
 La inmunoterapia es un metodo para la regulación del sistema unmunológico
con el objetivo de ocacionar un efecto terapéutico en enfermedades como
reacciones de hipersensibilidad, transplante de órganos y tejidos, transtornos
inflamatorios o enfermedades autoinmunes entre otras mas enfermedades, la
inmunoterapia tiene el unico objetivo de mejor la calidad de vida de las
personas con estas enfermedades. Para la inmunoterapia se usan
medicamentos como por ejemplo Inmunosupresores o biologicos como
anticuerpos monoclonales, citocinas tambien el uso de vitaminas y minerales
con el proposito de controlar la respuesta inmunitaria (Wang et al., 2019).

6. TIPOS DE INMUNOTERAPIA
6.1 Terapia de inmunoglobulina
Primero las inmunoglobulinas son glicoproteínas compuestas por dos
cadenas pesadas y ligeras semejantes, estas se encuentran en la sangre
humana y son componentes que ayudar a tratar enfermedades, con el
proposito de prevenir y disminuir los trastornos del sistema inmune
(Ueda et al., 2018) como por ejemplo: Sindrome de hiper-IgM,
 Inmunodeficienciacomún variable, Gamma globulinemia ligada al
cromosoma X (Wang et al., 2019).
6.2 Uso de factor de transferencia (TF)
El factor de transferencia es la extracción de linfocitos con un bajo
peso molecular y que tenga la capacidad de transferencia de inmunidad
por la celulas (CMI) especificas de antigeno a Linfocitos T (Viza et al.,
2013). La terapia de factor de transferencia ha tenido éxito en:
Neumonía intersticial en estados inmunodeficientes adquiridos,
Tuberculosis primaria con inmunodeficiencia, Sindrome de Wiskott-
Aldrich, Queratoacantoma etc (Wang et al., 2019).
6.3 Uso de inmunosupresores
Los inmunosupresores son sustancias que tienen la capacidad de
suprimir la respuesta que otorfa el sistema inmunitario contra algun
antigeno (Sánchez, 2008). El uso de inmunosupresores han
contribuido a enfermedades como: Lupus eritematoso sistémico
(LES), El Sindrome de Wiskott-Aldrich y varias neoplasias (Wang et
al., 2019).
6.4 Trasplante
La terapia de transplante consta de el reemplazo de algun organo con
fallas o que no este en buenas condiciones por el de otro mismo organo
sano, uno de los ejemplo es el uso de transplante alogénico de células
madres para tratamiento de leucemio mieloide (Knorr et al., 2019),
aunque sigue en ensayos es uno de las posibles aplicaciones. Tambien
se puede realizar el trasplante de médula osea para enfermedades
como: Artemis SCID, Leucemia agua y por otro lado en el trasplante
de timo para tratar el Sindrome de DiGeorge (Wang et al., 2019).
6.5 Uso de interferón gamma
La terapia usando interferón gamma es una citocina pleiotrópica con
capacidades, proapoptóticos, antitumorales y antiproliferativos
afectando al sistema inmunitario (Castro et al., 2018), el uso de esta
terpia ha servido para tratar: Enfermedad granulomatosa crónica,
VIH/SIDA, Melanoma y Lepra lepromatosa (Wang et al., 2019).
6.6 Inhibidores de puntos de control inmunológico
 Los inhibidores de punto de control inmunológico (ICI), es una terapia
con la capacidad de interrupir la acciónn de proteinas que son
producidas en células tumorales o células T, este descubrimiento ha
contribuido al tratamiento del cancér metastásico (Haugh et al., 2020).
Para esta terapia existen farmacos aprobados como: Ipilimumab,
Durvalumab, Pembrolizumab y Nivolumab (Wang et al., 2019).
6.7 Antagonistas de citocinas (IL-1RA)
Las citocinas también son conocidas como citoquinas son proteinas
que ayudan al sistema inmunitario. Las terapias con citoquinas
antagonistas proporcionan beneficios para la disminución
inflamatorias de enfermedades autoinmunes y se ha usado en areas
como oncologia y reumatologia (Oppenheim, 2018), se han usado en
enfermedades como: Shock séptico, Osteopotosis, Enfermedad
inlfmatoria intestinal y Poliarteritis nudosa (Wang et al., 2019).
Aunque existen más terapias las presentadas son las investigadas y mas usadas
en la actualidad. Cada terapia tiene su beneficicio, cada paciente dependiendo
el estado en el que se encuentre, a travez de un analisis profundo se evaluara
la mejor terapia que pueda contribuir de mejor manera al paciente.

7. CANCER
Se puede definir al cáncer como la condición en la cual células anormales o
mutantes crecen de manera desproporcional en comparación con las células
normales, por lo general formando estructuras irregulares denominadas como
tumores. Los tumores empiezan a fomentar estragos en los órganos lo cual impide
un correcto funcionamiento a tal punto de llegar a la muerte en caso de que no sea
tratado o de que el tratamiento tuviera efectos beneficiosos bajos. Las células
mutantes pierden la característica de muerte celular programada convirtiéndolas
en células “inmortales”, poco después desarrollan un comportamiento donde su
principal objetivo es el crecimiento, al ser mutantes pierden también la capacidad
de diferenciación por lo que no siguen el patrón establecido para el tejido el cual
estaban destinadas. El organismo después de que las células tumorales lograron
evadir eficientemente al sistema inmune las células normales empiezan a perder
nutrientes esenciales para los tejidos ya que las células mutadas empiezan a
absorber la mayoría de los nutrientes sin ningún tipo de regulación proliferando
 los tumores alrededor de la zona afectada limitando las funciones del órgano. Es
de importancia recalcar que no solo existe un tipo de cáncer ya que el termino se
utiliza para abarcar varios tipos de condiciones dependiendo donde es el origen
de los tumores (Morrison et al., 2018).

8. INMUNOTERAPIAS CONTRA EL CANCER

La inmunoterapia se puede usar para tratar el cáncer, por ser un método
enfocado al sistema inmunitario que ayuda a atacar las infecciones y otras
enfermedades que ataquen al cuerpo humano. La función es detectar, destruir
e impedir el crecimiento de células cancerosas (NIH, 2019). Existen cuatro
tipos de inmunoterapia para tratar el cancer:
8.1 Inhibidores de punto de control inmunitario
En este tipo usan farmacos con el proposito de inihbir los puntos de
control que tiene el sistema inmunitario estimulando la repuesta
inmunitaria, el objetivo principal es bloquear estos puntos y hacer que
las células del sistema inmune actuen con más fuerza contra el tumor.
Este tipo se utilizan en canceres como por ejemplo en el Cáncer de
seno, Cáncer del higado, Cáncer de la piel, etc.
8.2 Terapia de transferencia de células T
Este tipo se centra en fortalecer a las células T para que pueda combatir
el tumor para este tipo se debe tomar el cáncer del paciente, la muestra
se lleva a un laboratorio y estimulan a las células para que logren
idetificar y logren combatir el cáncer, una vez obtenido estas células
se las prolifera y se vuelven a inyectar al paciente por medio de una
infusión. Recientemente laAdministración de Alimentos y
Medicamentos (FDA) aprobo las terapias con células T con CAR para
el cáncer de sangre.
8.3 Anticuerpos monoclonales
Esta terapia también se la conoce como anticuerpos terapéuticos. Los
anticuerpos monoclonales son proteinas elaboradas en laboratorios con
el objetivo de que se puedan unir especificamente al cancer
seleccionado, lo que hacen estos anticuerpos monoclonales es marcar
a las células cancerosas para que las células de sistema inmune puedan
reconocerle mas rapido y actuen en la eliminación del mismo. Al ser
 creador en laboratorio y tener este complejo especifico de
anticuerpo/tumor, se han probado en distintos tipos de tumores.
8.4 Vacunas de tratamiento
Las vacunas contra el cáncer tienen el objetivo de estimular al sistema
inmunitario para aumentar la respuesta de las céulas inmunitarias para
que puedan actuar en contra del tumor.
8.5 Inmunomoduladores
Los inmunomoduladores al igual que la vacuna es una sutancia con la
capacidad de aumentar la respuesta del sistema inmunitario para que
puedan actuar contra el cáncer.

La inmunoterapia al contrario que la quimioterapia, cirugia o radoterapia no

se han usado mucho, aunque al avanzar el tiempo se han ido evaluando las
diferentes terapias que tiene cada una y su posible potencial de accion contra
los tumores.

9. TERAPIA CON CÉLULAS ADOPTIVAS PARA EL CÁNCER

El término transferencia adoptiva de células T, se utiliza en tratamientos para
contrarestar el cáncer, se basa en extraer los linfocitos T del paciente los cuales
se transladan a un laboratio para su proceso de proliferación y adaptabilidad
al tumor para luego ser reintroducidos al paciente con el objetivo de que estas
nuevas células tengan un receptor al antigeno específico del tumor para que
logren adherirse al mismo para su eliminación. Un problema que presenta esta
terapia es los receptores de células T de alta afinidad (TCR), este receptor
provee una afinidad baja a los autoantigenos en contraste con los antígenos
extraños (Pardoll, 2003).

10. CÉLULAS T CON RECEPTOR DE ANTÍGENO QUIMÉRICO (CAR)

Las células con receptores de antígeno quimerico (CAR-T), donde se extrae
los linfocitos T del paciente mediante aféresis, esta técnica permite separar los
compuestos de la sangre y vamos a obtener los linfocitos T, estos mismos
linfocitos T se van a transladar a un laboratorio para se modificado
geneticamente y que pueda expresar receptores que capten los tumores y
pueda eliminarlos. Las células CAR-T son especificos para varios antígenos
 que se expresane en células tumorales como por ejemplo: CD19, CD22,
CD133, EGFR y Her-2 (ProMab, 2020).
Para diseñar las células CAR primero deben tener un dominio de unión al
antígeno que este asociado a algun tumor, deben tener una región espciadora
(bisagra), un dominio trans membrana y otro dominio de señalización
intracelular (S. Bridgeman et al., 2010).
10.1 Orientación
El antigeno que se escoja como diana para la especificidad de CAR
esun factor critico para la eficacia y seguridad de las células T
modificadas. Este antigeno se expresa unicamente solo en células
tumores lo que puede llevar a efectos de toxicidad tanto dentro como
fuera de las células tumorales, los antecedentes evidencian que las
células T-CAR solo poseen antigenos con la capacidad de adherirse a
la superficie de las células. Un objetivo de CAR es el antígeno CD19
que se expresa ampliamente en las células B normales y en las células
B malignas, la ventaja de expresar este antigeno CD19 es que no se
expresan en las células hematopoyéticas eto disminuye la toxicidad
tanto dentro como afuera de las células tumorales. Las células T
modificadas con CAR deben tener consideraciones como elegir
cuidadosamente el antígeno, ademas cuando el enlace de antigeno es
potente las células T dismunuye su eficacia (Curran et al., 2012).
10.2 Señalización
Para este paso se debe centrar en los dominios, en las células CAR de
primera generación poseen un activador inmunorreceptor basado en
tirosina (ITAM) de la cadena CD3 (Eshhar et al., 1993). La cadena
CD3 genera una señal para que s epueda activar las células T, al solo
tener esta señal provoca una deficiencia en el método de apoptosis de
las células T modificadas, para mejorar esta señal se han ido creando
células CAR de segunda generación que posee dominios
coestimulantes como el CD28 que puede interactuar con la familia B
tanto B7.2, B7.1 y B7, ademas CD28 genera una segunda señal, esta
señal estimula la señal 1 de CD3, mejorando la producción de cñelulas
T, la expresión y activación de las proteinas de apoptosis. Asi mismo
se genero CAR de tercera generación proporcionando una tercera selak
 coestimuladora adicional, estudios han demostrado ventajas como la
generación de células T, supervivencia de esta y la producción de
citocinas. La difencia que existe en las diferencias generaciones se
debate mas posibles combinaciones para optimizar la señalización de
las células T (Curran et al., 2012).
10.3 Trafico
El termino trafico se define como la acumulación en los sitios de union
a las células del tumor por un largo tiempo esto se ha demostrado en
pacientes con linfoma no Hodgkin (LNH) (Savoldo et al., 2011). Una
posible alternativa para mejorar este “trafico” es generar expresión de
receptores de quimiocina como CXCR2/CXCL1 o CCR4/CCL17
(Curran et al., 2012).
10.4 Persistencia
Las células T modificadas deben perdurar por un periodo de tiempo
extenso para una mejor eficiencia y que tenga la capacidad de eliminar
casi en su total el tumor. Una de las técnicas para mejorar la
persistencia de las células T es acondicionarla con quimioterapia este
procedimiento ha demostrado un aumento de persistencia de las
células T transferidas, por otro lado, también depende del dominio de
señalización, asi mismo las células T del virus aumenta la persistencia
de células T de CAR. Existen factores claves como la presencia
tumoral, producción de citocinas, la señalización y el uso de células T
especificas para virus (Curran et al., 2012).
10.5 Función
El principal objetivo es eliminar las células tumorales, y un factor que
impide es el microambiente del tumor. Por otra parte la proinflmación
provocada por el aumento de las citocinas provoca aplasia de células
B (Curran et al., 2012).
10.6 Toxicidad
La principal toxicidad provocada por estas células CAR son las que se
generan dentro y afuera de las células tumorales, tambien un aumento
de células T modificadas genera la proliferación de citocinas
proinflamatorias provocando insuficiencia multiorgánica. Los estudios
 siguen para lograr contrarestar estos efectos toxicos (Curran et al.,
2012).

11. USO DE CÉLULAS ASESINAS NATURALES TRANSDUCIDAS CON CAR

EN TUMORES LINFOIDES POSITIVOS PARA CD19
Como se conoce la terapia con células T con CAR CD19 han sido eficientes
en canceres de células B, pero con efectos negativos como la toxicidad. Y una
posible superación es usar células asesinas naturales (NK).
La FDA ha aprobado el uso de células T con CAR CD19 para el uso clínico
pero la producción es compleja y costosa en varios pacientes se ha demostrado
producción en exceso de citocinas y neurotoxicidad. Un posible candidato
para contrarestar son el uso de las células naturales asesinas (NK) y la
expresión CAR. Las células naturales asesinas juegan un papel muy
importante en el sistema inmune, las mismas que se dirigen a las células
tumorales, caso contrario de las células T las células naturales asesinas se
administran sin la necesidad de una compatibilidad HLA completa. Teniendo
en cuenta estos factores claves de las células NK se han evaluado en 11
pacientes el uso de estas células para tratar el linfoma, este estudio se aprobo
por la junta de revisión institucional del MD Anderson Cancer Center de la
Universidad de Texas. La extración de las células asesinas naturales (NK), se
extraen de la sangre del cordón donde se purificaron y proliferaron en
laboratorio, luego de su proliferación las células se transdujeron a un vector
retroviral para codificar el gen CAR y un endodominio CD28/CD3,
obteniendo un producto final de de CAR-NK las mismas fueron provadas in
vitro con resultados positivos.
11.1 Seguridad
Posterior a la infusión de células CAR-NK a los pacientes ninguno
presento efectos toxicos como producción elevada de citocinas o
neurotoxicidad, pero algunos pacientes tuvieron problemas
hematológicos pero reversibles, aunque no se demostro que la infusión
genero este problema.
11.2 Respuesta al tratamiento
El tratamiento para los pacientes para la mayoría tuvo una respuesta
parcial y completa, en un paciente se obtuvo una supresión del linfoma
 de alto grado, pero seguía con citopenia y en tres pacientes tuvieron
una recaida.
11.3 Expansión, migración y persistencia de CAR-NK
Para evaluar la expansión de las celulas CAR-NK se realizo un ensayo
cuantitativo en tiempo real in vivo. Al pasar los tres dias se observo
expanción por durante doce meses. En contraste con una sola infusión
de células CAR-NK los valores se mantuvieron por 1 año
independiente de los niveles de dosis administrada. En analisis de
sangre de la médula ósea y sangre periférica se evidenciaron nivel de
células CAR-NK.
Las células NK derivadas del extracto de la sangre del cordón para la
expresión de CAR, al ser probadas en los pacientes se obtuvo un 64%
de respuesta completa en siete de los once pacientes, con respuestas
rapidas. Los farmacos aprobados por la FDA con caracteristicas CAR
T la creación es mas compleja y costosa, caso contrario con CAR-NK
que es posible generar alrededor de 100 dosis a partir de una sola
extracción de sangre del cordón. Las células CAR-NK mostraron un
respuesta contra cánceres positivos CD19 (Liu et al., 2020).

12. CONCLUSIONES

Al no existir un solo tipo de cáncer los tratamientos pueden verse reducidos

dependiendo a que tejidos afectados se lo trate. En el caso de la inmunoterapia
diferentes enfoques demuestran tener más eficiencia en ciertos tejidos o zonas, pero
no quiere decir que no se las pueda aplicar como un tratamiento colaborador gracias
a que su eficiencia sigue siendo bastante prometedora aun en otro tipo de células. Los
tratamientos basados en células T del tipo CAR han avanzado su desarrollo de forma
exponencial pasando del laboratorio a ensayos clínicos en un tiempo relativamente
corto en comparación con otros enfoques. Al tener un potencial claramente marcado
se estima que la terapia de este tipo avance a pasos agigantados hasta ser uno de los
tratamientos principales contra el cáncer. No hay que olvidar que sigue teniendo
mucho terreno el cual perfeccionar tanto en costos como dificultad de la técnica con
el fin de no sólo aplicar a neoplasias de células B, sino también a otras neoplasias
hematológicas y tumores sólidos.
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