BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LICENCIATURA EN QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO.

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

TAREA: CUESTIONARIO PRÁCTICA

PREPARACIÓN DE MATERIAL Y MEDIOS DE CULTIVO

DRA. MARÍA DE LA CRUZ MENESES SÁNCHEZ

SALAZAR VÉLEZ ALMA LIZZET

FECHA DE ENTREGA
03/09/2021
 Práctica No. 3 Preparación de material y medios de cultivo

Cuestionario

1. ¿Qué ocurriría si los medios de cultivo no se esterilizaran tras su preparación?

Como existen microrganismos en el ambiente, lo que ocurriría es que

obtendríamos crecimientos que no fueran de nuestra muestra, por lo que, las
colonias que crecerán en nuestro medio no sabríamos si es de
nuestra muestra problema o de algún organismo que estuviese en el área de
trabajo mientras se preparó el medio de cultivo.

2. ¿Qué es y cómo se lleva a cabo la esterilización por calor húmedo y por calor seco?

Es la acción de destruir los gérmenes patógenos o de hacer estéril e

infecundo algo que antes no lo era, pero la diferencia entre estos dos métodos es
que por calor húmedo se emplean las autoclaves u ollas de presión que por baño
maría y presión controlada logran altas temperaturas para la
esterilización, a diferencia del calor seco, en donde utilizan una estufa
bacteriológica u horno que alcance altas temperaturas, aquí no se utiliza aguay la
esterilización se logra por el calor que emite el equipo.

3. Describe los siguientes métodos de eliminación de microorganismos: tindalización,

pasteurización, filtración, radiaciones y gases.

Tindalización: es un método de esterilización que permite eliminarlas

esporas y las bacterias resistentes a las temperaturas elevadas. Este método
somete a las bacterias a un calentamiento durante 30 minutos a
bajas temperaturas. Se renueva la operación hasta que las formas
vegetativas son eliminadas y el ambiente ha quedado totalmente
esterilizado. La tindalización corresponde, sobre todo, el proceso de
esterilización que permite conservar la carne.

Pasteurización (también pasterización): es el procedimiento que consiste en

someter un alimento, generalmente líquido, a una temperatura aproximada de
80grados durante unos segundos y después enfriarla rápidamente, con el fin de
destruir los gérmenes y prolongar su conservación.

Esterilización por filtración: se logra por el paso de un líquido o un gas a través

de un material capaz de retener los microorganismos presentes. La esterilización
por filtración se emplea para materiales sensibles al calor, tales como ciertos
medios de cultivo, azúcares, soluciones de antibióticos y otros medicamentos, etc.

Técnica de esterilización por radiación: consiste en exponer los productos a

una energía ionizante para lograr el Nivel de Aseguramiento de
Esterilidad requerido. Los niveles de energía se logran con partículas aceleradas o
energía electromagnética. La energía gamma es la preferida por su gran
penetración y la facilidad de aplicación.

Óxido de etileno (OE): es un gas, compuesto de una mezcla que contiene 12%de
óxido de etileno y 88% de clorofluorocarbono. En la esterilización con óxido de
etileno la acción bactericida interfiere en el metabolismo proteico normal y en los
procesos reproductivos de los microorganismos. Este sistema de elección
de esterilización se emplea para material que no soporta altas temperaturas, o
bien que se deteriore con el vapor como: Hule, plástico, equipos e
instrumental delicados, endoscopios, etc.

4. ¿Qué es un bioindicador de esterilidad?

Indicadores biológicos: Un indicador biológico es una preparación

caracterizada de un microorganismo específico resistente a un proceso
de esterilización en particular. Los indicadores biológicos se utilizan como
auxiliares en la operación de la calificación física de aparatos de
esterilización, en el desarrollo y establecimiento de un proceso de
esterilización validado para un producto, en la verificación periódica de
esterilización validada de un equipo, materiales y componentes de
empaque que se empleen en procedimientos asépticos y en programas
de verificación periódica de ciclos de esterilización previamente establecidos
y documentados.
 5. ¿Qué ventajas presenta el agar?

Nos permite tener medios sólidos y presenta la gran ventaja de que casi ningún
microrganismo es capaz de degradarlo, por lo que las placas fabricadas con él no
se alteran.

Realizar los siguientes cálculos para la preparación de Medios de Cultivo

Indicaciones:

 Para placas grandes se necesitan 25 ml por cada placa

 Para placas chicas se necesitan 10 ml por cada placa
 Para tubos se necesitan para este ejercicio 4 ml por cada tubo
 10 placas grandes de Agar Verde Brillante (58 gramos en 1000 ml)

-45 placas chicas Agar Sal y Manitol (111 gramos en 1000 ml)

45 placas x 10 ml = 450 ml

111 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 450 ml

111 gramos x 450 ml 49950

x= = =49.95 gramos
1000 ml 1000 ml

-17 placas grandes Agar Rojo Bilis Violeta (41.5 gramos en 1000 ml)

17 placas x 25 ml = 425 ml

41.5 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 425 ml
 41.5 gramos x 425 ml 17637.5
x= = =17.6375 gramos
1000ml 1000 ml

-30 placas chicas Agar Sulfito de Bismuto (52 gramos en 1000 ml)

30 placas x 10 ml = 300 ml

52 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 300 ml

52 gramos x 300 ml 15600

x= = =15.6 gramos
1000 ml 1000 ml

-60 placas grandes Agar MacConkey (50 gramos en 1000 ml)

60 placas x 25 ml = 1500 ml

50 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 1500 ml

50 gramos x 1500 ml 75000

x= = =75 gramos
1000 ml 1000 ml

-20 placas chicas Agar Tiosulfato Citrato Sales Biliares (88 gramos en 1000 ml)

20 placas x 10 ml = 200 ml

88 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 200 ml

88 gramos x 200 ml 17600

x= = =17.6 gramos
1000 ml 1000 ml
-15 Tubos con Caldo Nutritivo (8.0 gramos en 1000 ml)

15 tubos x 4 ml = 60 ml

8.0 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 60 ml

8.0 gramos x 60 ml 480

x= = =0.48 gramos
1000 ml 1000 ml

-25 Tubos con Agar de Hierro y Triple Azúcar (59.4 gramos en 1000 ml)

25 tubos x 4 ml = 100 ml

59.4 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 100 ml

59.4 gramos x 100 ml 5940

x= = =5.94 gramos
1000 ml 1000 ml

-30 Tubos con Caldo Soya Tripticasa (30 gramos en 1000 ml)

30 tubos x 4 ml = 120 ml

30 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 120 ml

30 gramos x 120 ml 3600

x= = =3.6 gramos
1000 ml 1000 ml
-10 Tubos con Agar Citrato de Simmons (24.2 gramos en 1000 ml)

10 tubos x 4 ml = 40 ml

24.2 gramos -------------- 1000 ml

X -------------- 40 ml

24.2 gramos x 40 ml 968

x= = =0.968 gramos
1000 ml 1000 ml