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Laboratorio 1 “Potencial de Membrana en Reposo”

Juan Felipe Moreno Martínez

Primera parte.

Ejercicio 2. Efecto de la temperatura sobre el potencial de equilibrio de un ión.

a. Para cada uno de los iones, ajuste el cursor de la temperatura a un nivel superior al del
inicio, y corra el simulador. ¿Qué observa en la cinética y el potencial de equilibrio para
cada ion? Explique la razón de este cambio comparándolo con el estado inicial. ¿Cómo
cambian sus respuestas si se disminuye la temperatura?

Se puede observar que el potencial de equilibrio aumenta de manera negativa para K y Cl,
es decir, pasa de un -61.5mV a un -64.1mV. De igual manera para Na, pasa de un 61.5mV a
64.1mV, en este caso aumenta de manera positiva. Esto sucede al pasar de una
temperatura de 37°C a 50°C. Para este caso se tiene una relación directamente
proporcional, puesto que a medida que aumenta la temperatura, aumenta su potencial de
equilibrio en cada uno de los iones. En cuanto al movimiento de los iones, al aumentar la
temperatura aumenta el movimiento de los iones.
Si la temperatura disminuye, por ejemplo, a 20°C, se tiene que, para K y Cl, su potencial de
equilibrio ahora es de -58.4mV y para Na es de 58.4mV, es como si disminuyeran sus
niveles de potencial de equilibrio. Y a su vez disminuye el movimiento de los iones.

b. Elija uno de los iones y realice el estudio gráfico de cómo cambia el potencial de
equilibrio del ion en función de la temperatura. Analice la gráfica obtenida y calcule a
partir de la misma la relación entre las concentraciones extra e intracelular del ión
elegido. Compare este resultado con el de su simulación.

Para este punto, se escogió el ión Na.


De la gráfica se puede ver que la relación entre el potencial de equilibrio y la temperatura
es directamente proporcional, es decir, a medida que aumenta la temperatura, aumenta
el potencial de equilibrio del ión Na. Por otro lado, existe una relación línea entre la
temperatura y el potencial de equilibrio, que indica que la concentración es constante,
tanto intra como extracelular.

Ejercicio 3. Efectos de las concentraciones iónicas.

Colocando nuevamente el pasador para el ión K+, habilite ahora el simulador en la


función de ecuación de Nernst a 37 °C. El simulador cambia la expresión matemática
empleada (parte superior derecha) ¿A qué se debe este cambio?

Debido a que a los 37°C se tiene la temperatura corporal, al sustituir dicho valor expresado
en Kelvin en la ecuación del potencial de equilibrio de Nernst, se llega a dicho valor de
-61.5mV como se observa en la ecuación.

a. Reduzca la concentración extracelular del ión K+ a 2 mM y corra el simulador. ¿Qué


sucede con el potencial de equilibrio para este ión? Discuta su observación.

Pasa a tener un potencial de equilibrio de -104.5mV. De la gráfica del simulador se


observa como al disminuir la concentración extracelular el potencial empieza a ser
mas negativo o empieza a bajar la gráfica a valores más negativos.

b. Aumente la concentración extracelular del ión a 20 mM y corra el simulador. ¿Qué


sucede en el experimento? Compare sus resultados con respecto a la experiencia
previa.
Como se observa en la imagen superior, se tenía un potencial de equilibrio de
-104.5mV a 2mM extracelular. Al cambiar dicha concentración extracelular de 2mM a
20mM el potencial de equilibrio ahora es de -43mV y se puede observar como en el
simulador la línea roja se desplaza hacia arriba implicando que el potencial deja de ser
menos negativo.
c. Repita la simulación con los otros dos iones (sodio y cloro), disminuyendo primero la
concentración extracelular y aumentando después esta concentración para cada ión.
Explique que observa en cada caso respecto al potencial de equilibrio de cada ión.

Para Na.

A una concentración extracelular de 2mM el potencial de equilibrio es de -43mV.


Mientras que teniendo una concentración de 20mM, el potencial de equilibrio es de
18.5mV. Para este caso se puede ver de la simulación como empieza en la
concentración baja y termina en una concentración alta, se ve como la grafica de la
simulación cambia de acuerdo a los cambios de las concentraciones.

Para Cl.

A una concentración extracelular de 2mM el potencial de equilibrio es de 43mV.


Mientras que teniendo una concentración de 20mM, el potencial de equilibrio es de
-18.5mV. En este caso se comporta como el Na pero de la manera opuesta. De lo
anteriormente mencionado se puede ver en el comportamiento de la gráfica del
simulador.
d. Ahora estudiaremos el efecto de los cambios en las concentraciones intracelulares
de los iones sobre sus respectivos potenciales de equilibrio. Para ello debe tener en
cuenta que las concentraciones extracelulares deben estar ajustadas a sus valores
originales (10 mM para el K+, 100mM para el Na+ y 100mM para el Cl-). Realice este
ajuste y explique qué sucede con el potencial de equilibrio de cada ión al modificar
su concentración intracelular (aumentar y disminuir).

De manera análoga como se hizo en el punto anterior, se va a hacer las respectivas


modificaciones en la concentración intracelular de 2mM y 20mM.

Para K.

Para una concentración intracelular de 2mM, se tiene que el potencial de equilibrio es


de 43mV. Mientras que para dicha concentración intracelular de 20mM, es de -18mV.
De la gráfica de la simulación se puede ver como empieza con la concentración de
2mM seguida de la de 20mM, esto se evidencia debido al cambio que tiene la grafica
pasando de un valor positivo a un valor negativo. La diferencia entre estas
concentraciones es de 61mV ( 43-(-18)=61 ).

Para Na.

Para una concentración intracelular de 2mM, se tiene que el potencial de equilibrio es


de 104.6mV. Mientras que para dicha concentración intracelular de 20mM, es de
-43mV. De la gráfica de la simulación se puede ver como empieza con la concentración
de 2mM seguida de la de 20mM, esto se evidencia debido al cambio de valores que
presenta la línea de la gráfica. La diferencia entre estas concentraciones es de 61.6mV
( 104.6-43=61.6 ).

Para Cl.
Para este caso, se tiene una concentración intracelular de 2mM equivalente a
-104.5mV y para 20mM se tiene una concentración de 43mV. Como se observa en la
gráfica de la simulación, el comportamiento de Cl es el mismo de Na pero de manera
contraria. Y de igual forma, la diferencia entre ambas concentraciones es de 61.5mV.

e. Para cualquiera de los iones, ¿qué sucede con el potencial de equilibrio para el ión si
se igualan las concentraciones extra e intracelular?

Para el caso del ión Cl, al igualar las concentraciones intra y extracelular en 100mM, se
tiene que el potencial de equilibrio es igual a 0mV.

f. Realice el estudio gráfico de cómo depende el potencial de equilibrio de un ión de:


• La concentración extracelular del ión.
• La concentración intracelular del ión.
• La relación entre las concentraciones del ión a ambos lados de la membrana
(concentración extracelular/concentración intracelular).
A partir de esta última gráfica, explique cómo puede determinar a partir del gráfico
la temperatura a la que fue realizada la simulación. Determínela y compare su
resultado con el valor de temperatura de la simulación.

Concentración extracelular del ión.


Concentración intracelular del ion.

Segunda parte.

Ejercicio 1. Potencial de membrana en reposo.

Determine el potencial de membrana en reposo en las condiciones iniciales a 37°C (las


concentraciones de potasio intracelular y extracelular son 100 mM y 10 mM respectivamente.
Las de sodio y cloro valen 100 mM en el medio extracelular y 10 mM en el intracelular).

¿Cuál es su valor?, ¿qué significa su signo?, ¿cómo es el campo eléctrico a través de la


membrana?
De acuerdo a los parámetros dados anteriormente, se configuraron dichas concentraciones intra y
extracelular para cada ión. Por otro lado, para los P’s de cada ion, se dejo como PK+=100, PNa+=1
y PCl-=10.

El valor del potencial de membrana es de -59.2mV. El signo negativo significa que esta mas
cargada negativamente con respecto al exterior. Como es negativo dicho potencial de membrana
en reposo, significa que el campo eléctrico en la membrana apunta hacia adentro de la célula.

En estas condiciones explique para cada especie iónica (K+, Na+ y Cl-) cómo sería la tendencia a
moverse a través de la membrana si:

• Sólo existieran diferencias de concentración del ión a ambos lados de la membrana

K+: Tiende a ir del interior al exterior.

Na+: Tiende del exterior al interior.

Cl-: Tiende del interior al exterior.

• Sólo existieran fuerzas de origen eléctrico sobre ese ión.

Se debe tener en cuenta que como la célula es mas negativa en el interior que el exterior, los iones
que son negativos, tienden al exterior mientras que los que son positivos se mueven al interior de
la célula.

Ejercicio 2. Efecto de la temperatura sobre el potencial de membrana en reposo.

Corra el simulador del potencial de membrana en reposo a diferentes temperaturas y discuta


qué sucede con el resultado obtenido. Suponiendo que esta es una célula excitable, explique
cómo afecta la temperatura la excitabilidad de la célula.

Temperatur 10 20 30 40 50 60 70 80
a (°C)
Potencial de -54.1 -56 -57.9 -59.8 -61.7 -63.6 -65.5 -67.5
membrana
en reposo
(mV)
A medida que aumenta la temperatura, el potencial de membrana en reposo se vuelve más
negativo.

Al ser el potencial de membrana en reposo a partir de la temperatura, la excitabilidad de la célula


se vuelve un poco brusca al momento de buscar una excitación.

Ejercicio 3. Efectos de las permeabilidades iónicas sobre el potencial de membrana en reposo.

a. Seleccione la aplicación de la ecuación de Goldman a 37°C. En las condiciones iniciales,


¿cuál es el ión más permeable a la membrana en estado de reposo?

El ion K+. En situaciones de reposo, la mayor parte de canales abiertos serán los iones de
Potasio.
b. Modifique la concentración extracelular de cada ión tal cual se indica en la tabla (uno
por vez teniendo la precaución de que las permeabilidades y las concentraciones de los
otros dos iones sean las originales), registre el potencial de equilibrio de cada ión y el
potencial de membrana obtenido en cada caso. Compare este último valor con el valor
original del potencial de membrana (fila celeste). ¿Todos los cambios realizados
afectaron de igual manera al potencial de membrana en reposo? Concluya sobre sus
resultados.

[K+]e [K+]i [Na+]e [Na+]i [Cl-]e [Cl-]i Ej (mV) Em


K+ Na+ Cl- (mV)
10 100 100 10 100 10 -61.5 61.5 -61.5 -59.2
50 100 100 10 100 10 -18.5 61.5 -61.5 -20
10 100 500 10 100 10 -61.5 104.5 -61.5 -51.5
10 100 100 10 500 10 -61.5 61.5 -104.5 -67.5

Si, todos los cambios afectaron dicho potencial de membrana en reposo.


Al cambiar la concentración extracelular del K+ a 50mM, se obtuvo un aumento en el
potencial de equilibrio de K+, pasando de -61.5mV a -18.5mV, dando como resultado que
el potencial de membrana en reposo es de -20mV, que estaba antes en -59.2mV (fila
celeste).
De igual forma cuando se realizan los cambios en las concentraciones extracelulares de los
iones de Na+ y Cl-, se puede observar de la tabla que para el caso de Na+ al tener una
concentración de 500mM aumenta su potencial de equilibrio en una mayor parte, pero no
disminuye significativamente el potencial de membrana en reposo, ya que pasa de
-59.2mV a -51.5mV. Por último, para Cl-, se tiene que una concentración extracelular de
500mM y de igual manera como ocurre con Na+, aumenta de manera significativa
negativamente el potencial de equilibrio del ion y para el caso del potencial de membrana
en reposo, este aumenta en la misma proporción de Na+ pero negativamente.

c. Ahora analizaremos cómo afecta la permeabilidad de un ión al potencial de reposo de la


membrana celular. Para ello cambie la permeabilidad del potasio (PK+) a 10 y registre
cuánto vale el potencial de membrana en reposo. Este cambio, ¿afecta al potencial de
equilibrio del potasio? ¿Cómo explica las observaciones realizadas para el potencial de
membrana y para el potencial de equilibrio del potasio?

Potencial de membrana en reposo: -50.8mV. Al pasar de una permeabilidad de 100 a 10,


el potencial de equilibrio del potasio no cambia. Esto indica que a pesar de que se
disminuye la permeabilidad del potasio en una gran cantidad, dicho potencial de equilibrio
no cambia, pero en cuanto al potencial de membrana en reposo al disminuir su
permeabilidad, también disminuye.

Para las concentraciones originales de potasio a ambos lados de la membrana, registre


el potencial de membrana en reposo para valores menores y mayores al valor inicial de
permeabilidad de potasio.
Compare en cada caso el potencial de membrana en reposo con el potencial de equilibrio
del potasio. Extraiga una conclusión al respecto.

Permeabilidad del potasio: 100mM

[K+]e [K+]i Ej (mV) Em (mV)


K+
10 100 -61.5 -59.2
8 100 -67.5 -64.1
5 50 -61.5 -57.4
1 20 -80 -61.6
10 150 -72.3 -69.2
50 170 -32.7 -33.2
120 200 -13.6 -14.5
8 150 -78.3 -74.1
5 170 -94.2 -86.7
1 200 -141.5 -113.5
11 90 -56.1 -54.5
50 50 0 -3.9
120 20 47.9 37.4

De acuerdo a la tabla de arriba, se puede concluir 4 diferentes situaciones. En la primera


se puede ver como al tener una concentración exterior e interior menor que la inicial el
potencial de equilibrio no varia tanto hasta tener valores pequeños de ambas
concentraciones. En cambio, el potencial de membrana puede como aumentar como
disminuir, pero se mantiene en un rango cercano al original, este no varia tanto. La
segunda situación es tener ambas concentraciones por encima de las iniciales, para este
caso se tiene en el potencial de equilibrio que va disminuyendo (siendo mas positivo) a
medida que se aumentan las concentraciones en ambos lados de la membrana. Y para el
caso del potencial de membrana, de manera directamente proporcional también
disminuye. La tercera parte corresponde a tener concentraciones extracelulares por
debajo de la inicial pero intracelulares por encima de la inicial. Para este caso, se tiene que
el potencial de equilibrio al tener los valores mas opuestos entre concentraciones, es
decir, como los extremos, dicho potencial de equilibrio aumenta de manera mas negativa.
Y para el potencial de membrana se tiene lo mismo, se vuelve mas negativo. Por último,
para la cuarta parte, es donde se tiene la concentración extracelular mayor a la inicial y se
tiene la concentración intracelular por debajo de la inicial. De este caso se tiene que el
potencial de equilibrio presenta casos donde puede ser negativo, donde al igualarse las
concentraciones, es cero y también potenciales positivos, estos se dan de acuerdo a como
se establecieron en este caso las concentraciones. Y para el potencial de membrana en
reposo, ocurre algo similar, trata de seguir esa analogía del potencial de equilibrio.

Con un valor de 10 para la permeabilidad de potasio, modifique la permeabilidad del


sodio a valores menores y mayores que el valor original. Compare el potencial de
membrana con el potencial de equilibrio del sodio y discuta el resultado obtenido.
Dejando los valores originales e iniciales de las concentraciones de K+, Na+ y Cl-, se tiene lo
siguiente únicamente cambiando los valores de permeabilidad de Na+.

PNa+ Ej Na+ (mV) Em (mV)

1 61.5 -50.8
0 61.5 -61.5
10 61.5 -14.9
20 61.5 0
50 61.5 19.6

De la tabla anterior se puede decir que a pesar de que se modifican los valores de
permeabilidad del sodio en gran cantidad, su potencial de equilibrio no cambia, pero si se
mira el potencial de membrana en reposo este si cambia bastante hasta el punto de que,
al aumentar su permeabilidad a mayores grande, pasa a ser positivo dicho potencial de
membrana.

Conclusiones.

De la práctica se pudo analizar y comprender como son los comportamientos de los potenciales de
equilibrio en los iones de K+, Na+ y Cl- no solo a una temperatura especifica si no a diferentes
temperaturas a través de la ecuación de Nernst. También variando las concentraciones intra y
extracelulares de los iones y ver qué efectos y cuáles son las consecuencias de esto en el potencial
de equilibrio.

Por otro lado, se hizo uso de la ecuación de Goldman para poder analizar los diferentes
comportamientos y ver como se distribuyen los iones en el potencial de membrana en reposo. De
igual forma se tuvo una temperatura fija y también variaciones para ver lo que sucedía con dicho
potencial de membrana. Así mismo, la variación y de no solo las concentraciones sino también de
las permeabilidades permitió ver como se comporta el potencial de membrana en reposo frente a
los diferentes cambios que tengan los iones de Na+, K+ y Cl-, teniendo en cuenta su potencial de
equilibrio.

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