Madras Agric. J., 2017, 104 (7-9): 304-307; doi: 10.29321 / MAJ.2017.

000066

Desarrollo de nuevas formulaciones de solubilizantes de fósforo

Bacterias que utilizan la tecnología de secado por pulverización

1 R. Brindavathy y 2 M. Gnanachitra
1 Estación de Investigación de Semillas Oleaginosas, Universidad Agrícola de Tamil Nadu, Tindivanam.
2 Centro Nacional de Investigación de Legumbres (NPRC), Universidad Agrícola de Tamil Nadu, Vamban.

La tecnología de secado por pulverización se utiliza a menudo como técnica de encapsulación en las industrias alimentaria y mediada
por microbios. La encapsulación de microorganismos en una matriz polimérica como células microbianas inmovilizadas facilitaría tal
formulación novedosa. Se realizó un experimento para investigar los mejores portadores solubles en agua mediante la encapsulación
de Bacillus megaterium var.
phosphaticum por tecnología de secado por aspersión. Entre los portadores probados, la maltodextrina y el almidón soluble produjeron un polvo
encapsulado fino con una alta carga poblacional de 10 7 CFU.g- 1 y vida útil de hasta doce meses. Con respecto al factor de solubilidad, se encontró

que la maltodextrina era completamente soluble en agua y las células se suspendían fácilmente mientras que el almidón soluble tenía ligeras

precipitaciones al final. Además, en este estudio se observó que a una temperatura óptima de la boquilla de 120 ° C, el producto encapsulado con

maltodextrosa resultó con una alta población seguida de una temperatura de la boquilla de 110 ° C. La mejor bioformulación que apoyó la

capacidad de supervivencia en la rizosfera fueron los productos secados por aspersión con mayor carga microbiana que las formulaciones

líquidas y los portadores a base de lignito.

Palabras clave: Bacterias solubilizantes de fósforo, Formulación secada por pulverización, Maltodextrosa

Los biofertilizantes son microorganismos vivos, a diferencia de los contenido en condiciones favorables. Los productos encapsulados son
fertilizantes químicos, ellos mismos no son la fuente de nutrientes, pero fáciles de producir, almacenar y manipular durante los procesos de
pueden ayudar a las plantas a acceder a los nutrientes disponibles en la producción (Cassidy et al., 1998). Este proceso implica recubrir y
rizosfera de los cultivos. Cada uno de los microbios introducidos actúa proteger iones de microorganismos mediante tecnología de secado por
como una biomáquina, generando continuamente el flujo de nutrientes aspersión. El principio de inmovilización de rizobacterias mediante
desde el suelo a las plantas de manera saludable, lo que resulta en un secado por aspersión es proteger los microorganismos introducidos en el
mejor crecimiento y productividad. La exploración de estos microbios suelo y asegurar una liberación gradual y prolongada en la región de la
reduciría las aportaciones químicas. Sin embargo, la aplicación oportuna rizosfera (John et al., 2011).
de biofertilizantes es crucial para la productividad sostenible de los
cultivos. Cuando se obtiene un inóculo satisfactorio, el siguiente paso
La tecnología de secado por aspersión ha recibido una gran atención
importante es investigar una formulación adecuada. Se han aislado,
en el pasado reciente en las prácticas de bioformulación para
caracterizado, cultivado y mejorado genéticamente muchas cepas, pero
biofertilizantes, lo que resulta en un sistema de suministro controlado de
no han aparecido en el mercado comercial, quizás debido a una
partículas microencapsuladas con morfologías físicas precisas
formulación inapropiada. Las limitaciones que se observan generalmente
(Peighambardoust et al.,
son material de soporte poco atractivo, menor vida útil, contaminaciones,
2011). El secado por pulverización es un método para producir un polvo
pérdida de calidad en el transporte e instalaciones de almacenamiento
seco a partir de un líquido o suspensión mediante el secado rápido con un
inadecuadas que reducen la calidad del producto (Herrmann y Lesueur,
gas caliente. El recubrimiento de materiales particulados con cualquier
2013). La investigación sobre la formulación ha demostrado vías para los
polímero es una operación fundamental que se practica ampliamente
transportadores alternativos a los más voluminosos como turba, lignito,
durante el secado por pulverización. El almidón es un polímero renovable,
vermiculita etc., Por ejemplo, los cultivos basados en lignito son masivos
económico y biodegradable, y sus principales fuentes son los cereales
y tienen una carga poblacional inversa con su período de
(arroz, trigo y maíz) y los tubérculos (patatas y mandioca). La maltodextrina,
almacenamiento. Recientemente, la encapsulación de bioinoculantes ha
un polímero derivado enzimáticamente del almidón, es otro polisacárido que
sido desafiada y utilizada en la agricultura mediante el uso de procesos
se utiliza para el mismo propósito.
de producción como secado por aspersión, liofilización, polimerización
interfacial, reticulación. etc., ( Schoebitz, 2013).

La microencapsulación con polímeros adecuados en agua ayuda a

facilitar la diseminación de bacterias en el entorno objetivo. Este proceso
puede limitar la transferencia de calor, mientras se seca por aspersión y
minimiza los efectos nocivos (Teixeira, 1995). La supervivencia de las
células microbianas durante el procedimiento de secado por aspersión
La microencapsulación se define como un proceso para empaquetar
depende de muchos factores, incluida la cepa del organismo, la edad del
material sensible como medicamentos, células microbianas en polímeros
cultivo, las condiciones de crecimiento y las condiciones de secado por
especializados, que pueden liberar su
aspersión (Lievense, 1994).
Correo electrónico del autor para correspondencia: brindamuruga@yahoo.co.in

Se pueden obtener poblaciones microbianas más altas del
producto resultante. Esta fórmula compacta es muy ventajosa
para una fácil difusión de los bioinoculantes y para el
almacenamiento. Se ha investigado la encapsulación de
bacterias seleccionadas para su uso en entornos de suelo en
agricultura y biorremediación (Rebah et al., 2007).
La intención de esta investigación es investigar un nuevo portador
de agua para la entrega de bioinoculantes con la ayuda de protección
celular, mayor vida útil, portadores más baratos, procesos precisos y
tecnología de entrega de una manera rentable.
Material y métodos
Se llevaron a cabo estudios de bioformulación soluble en agua en el
Departamento de Microbiología Agrícola de la Universidad Agrícola de
Tamil Nadu, Coimbatore. Se utilizaron almidón soluble esterilizado de
calidad comercial y maltodextrina como polímeros para la encapsulación.
Se estudió la estandarización de la temperatura óptima para el secado por
aspersión, las fases de crecimiento de la célula, la vida útil, los estudios de
almacenamiento y la capacidad de supervivencia en la rizosfera y esto se
comparó con la formulación existente como formulación líquida y basada
en vehículo. Una sustancia a encapsular (la carga celular) y un portador
anfipático (polímero) se homogeneizan como una suspensión en agua
(forma la suspensión). Bacillus megatherium var. phosphaticum, Se utilizó
una bacteria solubilizadora de fósforo como cultivo de prueba. El producto
resultante se probó mediante dilución en serie y técnica de siembra en
placa después de completar cada experimento y se usó medio de agar
nutritivo para este propósito.
Producción de concentrados celulares y secado por aspersión.
El cultivo de prueba en fase estacionaria se recogió por
centrifugación (7000 g durante 15 min a 5ºC), se lavó dos veces con
agua destilada estéril. Se resuspendió un sedimento celular del cultivo
en una solución estéril de leche desnatada al 10% (p / v). Este medio
basal fue suplementado asépticamente con 15% (p / v) de polvos de
prueba.
verbigracia., almidón esterilizado o malto dextrina por separado a caudal
constante: 2,5 mL. min- 1 con temperaturas de aire estándar. El polvo se
recogió en un separador de un solo ciclón (Boza et al., 2004). Los
productos resultantes se homogeneizaron y almacenaron para estudios
adicionales.
Efecto de la temperatura de la boquilla durante el secado por aspersión
Para estudiar la temperatura óptima, la temperatura de la boquilla varió la
temperatura de secado del aire de salida verbigracia.,
Se ajustaron 90, 100, 110, 120, 130, 140 y 150 ° C en el secador por
pulverización para cada experimento y los productos se secaron por
pulverización. Las muestras secadas por pulverización se recogieron y
enumeraron para estandarizar la temperatura óptima de secado por
pulverización.
Ensayos de viabilidad
Se rehidrató un gramo de producto secado por atomización en 10
mL de solución estéril de leche desnatada (10% p / v) a 25 ° C y se
colocó en un agitador (100 rpm) durante 24 h. La suspensión de células
(1 ml) se sometió luego a diluciones en serie transfiriéndolas a placas de
agar NA y
305
Se incubó durante 36 h. El número total de células viables se expresó como
unidades formadoras de colonias por gramo (UFC.g- 1)
de polvo seco (Morgan et al., 2006).
Enumeración de productos encapsulados en la región de la rizosfera
del suelo.
Se diseñó un experimento de cultivo en macetas para probar y verificar
la capacidad de supervivencia del cultivo bacteriano encapsulado cuando se
inocula en el suelo. Las formulaciones encapsuladas de fosfobacterias
probadas verbigracia., La maltodextrosa secada por pulverización, el almidón
soluble secado por pulverización, el vehículo a base de lignito y la formulación
líquida se consideraron como cada tratamiento. El producto que tiene una vida
útil más alta se utilizó en este experimento de supervivencia del suelo. Se
inoculó un gramo del producto que tenía 109 UFC a 7 kg de suelo estéril en
una maceta plantada con 2 capas de caña de azúcar. Se estudió la vida útil
extrayendo muestras a intervalos mensuales durante un período de cuatro
meses.
Resultados y discusión
En la selección del experimento de temperatura óptima de la boquilla,
90 y 100 ° C no tuvieron formación de polvo.
Tabla 1. Enumeración de Bacillus sp. instarch y maltodextrina antes y
después del secado por atomización
Tratos No. de células viables (CFU. G- 1)
solubilidad en agua
Antes de secar Después de secar
Almidón 2,3 x 10 11 5.3 x10 9 Ligeramente soluble-
formas precipita
Malto 3,6 x 10 11 4,3 x 10 9 Soluble
dextrina
El producto resultante tenía consistencia en suspensión. Se
obtuvieron polvos finos en la cámara de secado solo a 110 ° C.
Cuando el producto secado por aspersión se sometió a su carga
microbiana a 120 ° C, el producto encapsulado de malto dextrosa
resultó con 43.30 x10 9
CFU mL 1 seguido de la temperatura a 110 ° C (34,72 x10 9 CFU
mL 1). Producto encapsulado de almidón soluble registrado 33,12
x10 9 CFUmL- 1 y 30,50 x10 9
CFUmL- 1 a 120 ° C y 110 ° C, respectivamente (Tabla 2). A temperaturas
más altas, se encontró que la carga microbiana disminuía. Silva et al. ( 2005)
ha informado que las células en fase estacionaria son significativamente más
resistentes al secado por aspersión que las células en fase exponencial. Se
obtuvieron resultados similares con L. bulgaricus en leche desnatada a
diferentes temperaturas (Teixeira et al. 1995).
Los productos secados por pulverización resultantes se experimentaron para
determinar la carga de población antes y después del secado por pulverización.
Antes del secado por aspersión, el producto infundido con almidón produjo una carga
poblacional de 2,3 x 10 11
CFU. gramo- 1 y lo mismo después del secado por atomización producido
5,3 x 10 9 CFU.g- 1. El producto de malto dextrosa produjo 3.6 x10 11 CFU.g-
1 y después del secado por aspersión se encontró que el mismo
tratamiento producía 4.3x10 9
CFU.g- 1 ( Tabla 1). Se informó que azúcares como la trehalosa y la
sacarosa exhiben una mayor tolerancia a la desecación en numerosos
organismos durante el secado por aspersión (Rudolph y Crowe, 1985).
En estudios de vida útil, a 150 DAS, el producto encapsulado de
almidón soluble tenía 39,7 x 10 8 CFU. gramo- 1. Al final de 12 th mes el
306

La carga microbiana en encapsulaciones de almidón soluble fue prueba de solubilidad, cuando los dos productos se disolvieron en agua, la
28,0 x 10 9 CFU. gramo- 1 y esto estaba más o menos cerca de la maltodextrosa tuvo una mayor solubilidad que el producto encapsulado en
formulación líquida (27,7 x10 9 CFU. mL- 1). En el almidón.

Tabla 2. Efecto de la temperatura de la boquilla durante el proceso de pulverización y secado Bacillusmegateriumvarphosphaticum.

Temperatura de la boquilla (° C)
Tratos
90 100 110 120 130 140 150

No. de UFC. mL- 1 x10 9 x10 9 x10 9 x 10 9 x 10 8 x 10 8 x 10 7

Sin polvo Sin polvo 34,72 43.30 24,75 20,33 9.60

Malto dextrosa
formación formación (10,54) (10,64) (10,17) (8.09) (7,98)
Sin polvo Sin polvo 30,50 33.12 25,60 18.80 3,63
Almidón soluble
formación formación (10,48) (10,52) (10,19) (7,94) (7,65)

SEd 0,56 2,33 1,63 1,98 0,53

CD (p = 0,05) 0,98 5.53 2,75 3,87 1,78

Se registró una contaminación mínima en la formulación secada La viabilidad celular se logró a partir de rizobios en fase estacionaria y
por aspersión. Mary informó de resultados similares et al. ( 1986), mayores tasas de supervivencia de Sinorhizobio
donde significativamente mayor y Bradyrhizobium se produjeron cuando se tomaron muestras

Tabla 3. Capacidad de supervivencia de las fosfobacterias en encapsulaciones secadas por aspersión / formulación estándar

Días después de la inoculación (CFU.g- 1 / CFU.mL- 1) Contaminación

30 60 90 120 150 365 (%) a 150 DAI

Formulación

x10 9 sobredosis x10 9 sobredosis x10 8 sobredosis x10 8 sobredosis x10 8 sobredosis x10 7 sobredosis

Malto 87,00 0,77 56,33 0.485 30,33 0,257 3.8 0,223 23.21 0,18 12,5 0,133 2.5
dextrosa (9,93) (9,75) (8,48) (8,48) (7.01)

Soluble 89,33 0,93 52,67 0,489 59,33 0.485 3.2 0.401 39,74 0,21 28,0 0,198 3,0
almidón (9,90) (9,42) (8,47) (8.22) (7,22)

A base de lignito 42,23 0,46 39,55 0.362 53,10 0,415 26,61 0,216 8.80 0,19 07.23 - 15,2
transportador (9,12) (9,24) (8,33) (8,18) (8,39) (7,12)

Líquido 85,31 0,77 40,60 0,417 50,88 0,409 43.18 0,425 35.15 0,21 27,7 - 3.1
formulación (9,33) (9,17) (8,51) (8,77) (8,42) (7,33)

discos compactos 0.109 0,099 0.069 0.093 0.076 0.071

en la fase de retraso del crecimiento (Boumahdi et al., 1999). Además, esto A medida que aumentaban los días, se reducía la carga de población y
fue apoyado por Carvalho et al. ( 2004), quienes demostraron que la a los 4 th mes, el resultado fue 11,16 x10 6

suplementación del medio de secado con cuatro carbohidratos diferentes
había mejorado la protección contra la desecación durante el
almacenamiento. Se encontró que todas las formulaciones probadas
sobrevivieron en la región de la rizosfera en el período inicial y la población
máxima se registró en malto dextrosa secada por aspersión (42,00 x 10 7 CFU.
gramo- 1) ( Tabla 4).
CFU. gramo- 1 de suelo seco. Pero se notó un ligero aumento en las
formulaciones de almidón soluble secadas por aspersión a 90 DAI y 120 DAI,
que registraron 21.23 x 10 6 CFU. gramo- 1 y
12,19 x 10 6 CFU. gramo- 1, respectivamente. Formulación líquida producida
09,19 x 10 6 CFU. mL- 1 a 120 DAI. La menor colonización se encontró en
formulaciones a base de lignito a 120 DAI que tenían 02,62 x 10 5 CFU.
gramo- 1 de suelo seco.

Cuadro 4. Enumeración de fosfobacterias en suelo Conclusión

rizosférico
De este experimento se concluye que la temperatura de salida más
Días después de la inoculación (CFU.g- 1 / CFU.mL- 1) adecuada en el secador por aspersión podría ser de 120 ° C tanto para las

30 60 90 120 encapsulaciones de almidón soluble como de maltodextrosa. Los estudios

Formulación
de vida útil indicaron que la formulación encapsulada de almidón soluble
x10 7 x10 6 x10 6 x10 6
podría respaldar la supervivencia de la población hasta 12 meses, con un
Rocío seco 42,00 25,50 18.80 11.16
porcentaje mínimo de contaminación. Además, el producto era muy
maltodextrosa (8.08) (7,19) (7,27) (5,20)
compacto y concentrado con alta carga celular y buena solubilidad. Si los
Rocío seco 34,50 37.20 21.23 12.19
concentrados de células se incrementan hasta 10 15 CFU. gramo- 1 y además,
almidón soluble (8,16) (7,24) (7,33) (5,28)
antes de la pulverización, una mayor población bacteriana dará como
A base de lignito 15.00 20,8 15.40 02.62
resultado el producto final con un porcentaje de supervivencia más alto en
transportador (8,18) (7,30) (7,35) (5,32)
la región de la rizosfera. Por lo tanto, esta nueva formulación podría
Formulación líquida 24.00 27,88 20,4 09.19 recomendarse como un eficaz y floreciente
(8,15) (7,25) (7,31) (5,28)

discos compactos 1,89 2.17 2,40 1,64

 307

sistema de suministro de bioinoculantes que se utilizan actualmente. Este hallazgo Mary, P., D. Ochin y R. Tailliez. 1986. Estado de crecimiento
también podría ayudar en la producción de cultivos ecológicos. de rizobios en relación con su tolerancia a las actividades de aguas
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Recibido: 24 de junio de 2017; Revisado: 26 de julio de 2017; Aceptado: 19 de septiembre de 2017