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Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680

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Toxicología alimentaria y química

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Revisión de la evaluación toxicológica de D-limoneno, un aditivo alimentario y

cosmético
Chandrakala Ravichandran, Prarabdh C. Badgujar∗, Promita Gundev y Ashutosh Upadhyay
Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Instituto Nacional de Emprendimiento y Gestión de Tecnología de los Alimentos, Sonipat, Haryana 131028, India

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO ABSTRACTO

Palabras clave: R - (+) - limoneno (D-limoneno) es un aditivo de sabor comúnmente utilizado en alimentos, bebidas y fragancias por su agradable olor a
R - (+) - limoneno limón. Teniendo en cuenta sus crecientes aplicaciones, es necesario comprender los efectos toxicológicos y los riesgos asociados con su
Aditivo aromatizante uso. El R - (+) - limoneno se absorbe rápidamente en animales de experimentación y seres humanos tras la administración oral. En los
Alimentos y cosmética
seres humanos, se distribuye al hígado, los riñones y la sangre, lo que resulta en la formación de metabolitos como el ácido perílico,
Metabolitos de limoneno
ácido dihidroperílico, limoneno-1,8-diol y limoneno-1,2 diol. Los efectos tóxicos importantes informados principalmente en roedores son
Estudios de toxicidad
la nefrotoxicidad grave por gotitas hialinas (solo en ratas macho
Farmacocinética
La seguridad
debido a la proteína específica α2u-globulina; sin embargo, este efecto no es válido para humanos), hepatotoxicidad y
Técnicas de procesamiento de alimentos neurotoxicidad. El R - (+) - limoneno no presenta efectos genotóxicos, inmunotóxicos ni cancerígenos. Hay datos sustanciales
disponible sobre la estabilidad del limoneno después del tratamiento con técnicas térmicas y no térmicas de procesamiento de alimentos; sin
embargo, no se dispone de información sobre la toxicidad de los metabolitos formados y sus límites científicos seguros. Además, se desconoce la
toxicidad de los productos de degradación del limoneno formados durante el almacenamiento de jugos de cítricos. Con base en todas las
consideraciones toxicológicas disponibles, el R - (+) - limoneno puede clasificarse como un aditivo de baja toxicidad. Se requieren estudios más
detallados para comprender mejor la interacción del limoneno con las técnicas modernas de procesamiento de alimentos, así como los productos de
degradación generados y la toxicidad derivada de dichos productos.

1. Introducción (75-85%), β-pinenos (hasta 3%), canfeno (4-15%) y R - (+) - limoneno

Químicamente, el limoneno es 1-metil-4- (1-metilfenil) ciclohexeno
que consta de 2 unidades de isopreno que tienen la fórmula molecular como C10Hdieciséis
(Bardana y Fenaroli, 2004). El limoneno es un terpeno monocíclico y es
producido por más de 300 plantas en todo el mundo (Bardana y Fenaroli,
1995). Estas plantas son ricas en isómeros de limoneno {Dlimonenosegún la
terminología reciente, es más conocido como R - (+) - limoneno) y L
-limoneno} que se encuentran en diferentes cantidades y proporciones.
L-limoneno se encuentra en varios aceites de agujas de pino y en la trementina (
Larsen y col., 2000). Los terpenos son compuestos orgánicos derivados del
hidrocarburo isopreno, que son metabolitos secundarios de las plantas
producidos como defensa vegetal para repeler plagas y patógenos y sirven como
hormonas de señalización, atrayendo insectos para el control de herbívoros,
polinización y dispersión de semillas (Keeling y Bohlmann, 2006; Gershenzon y
Dudareva, 2007; Rodríguez et al., 2014; Rodríguez et al., 2018). La trementina (una
fracción oleosa volátil) derivada de la oleorresina a través del proceso de
destilación contiene una mezcla de monoterpenos (R - (+) - limoneno, α-pineno,
canfeno, β-felandreno, terpinoleno, 3-careno) y sesquiterpeno (δ-Selineno, γ
-Humuleno, β-cariofileno) y diterpenos (colofonia). Los principales componentes
volátiles de la trementina son el α-pineno.
(5-15%) (Mercier et al., 2009; Kasanen y col., 1999).
Entre los terpenos, el monoterpeno R - (+) - limoneno es el componente principal de
la mayoría de los aceites cítricos (Malko y Wróblewska, 2016; Iglesias et al., 2007) y
también está presente en aceites de comino, neroli, bergamota, alcaravea (Agencia
Internacional para la Investigación del Cáncer (IARC), 1999). Aceite de cítricos extraído
por destilación al vapor de piel de naranja de especiesCitrus sinensis
contiene predominantemente un 95% de R - (+) - limoneno (Sikdar et al., 2016;
Favela-Hernandez et al., 2016). Kamal y col. (2011)ha investigado la
composición química del aceite esencial de tres especies de cítricos, a saber
C. reticulata, C. paradisii y C. sinensis e informó que C. sinensis El aceite de
cáscara contiene más del 80% de limoneno seguido de β-mirceno y α-
pineno. También se informó que el limoneno está presente en grandes
cantidades en el aceite esencial extraído de la cáscara de la naranja amarga (
Citrus aurantium) (67,90–90,95%), limón (Limón cítrico) (37,63–69,71%),
malta naranja (Citrus sinensis) (81,52-86,43%) y mandarina (Reticulado
cítrico) (51,81–69,00%) (Bourgou et al., 2012).
Debido a su olor a limón y su rico perfil de sabor, el R - (+) - limoneno se ha
utilizado ampliamente por su fragancia y sabor en las industrias de cosméticos y
alimentos y bebidas en productos como perfumes, jabones, alimentos (p. Ej.,
Helados, dulces, productos horneados, pudin y gelatina), masticar

∗ Autor correspondiente.
Correos electrónicos: prarabdh.badgujar@niftem.ac.in, prarabdh.badgujar@gmail.com (PC Badgujar).

https://doi.org/10.1016/j.fct.2018.07.052
Recibido el 24 de febrero de 2018; Recibido en forma revisada el 22 de julio de 2018; Aceptado el 28 de julio de 2018
On-line el 31 de julio de 2018
0278-6915 / © 2018 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.
C. Ravichandran y col.
chicles, bebidas no alcohólicas, etc. Se está utilizando ampliamente en productos
domésticos como detergentes (Knoppel y Schauenburg, 1989), agentes de
limpieza (Wolkoff y col., 1998), ambientadores (Tichenor y Mason, 1988), cera para
pisos (Colombo y col., 1991), etc. Un estudio reciente ha investigado la cantidad
de limoneno en productos cosméticos y aceites esenciales y su exposición diaria
total a partes específicas del cuerpo entre la población francesa (Dornic et al., 2018
). Los resultados del estudio revelaron que entre 280 productos de perfume y 150
desodorantes estudiados, el 95% y el 69% de estos productos contenían
limoneno, respectivamente. Además, se encontró que la exposición agregada de
limoneno era la más alta (248,334 μg / cm2/ d) en la región de la cara y el cuello
entre todas las partes del cuerpo y los que más contribuyeron a esta exposición
fueron los aceites esenciales de cítricos. Entre varios ingredientes aromatizantes,
el R - (+) - limoneno representa un mayor uso con el 92% del volumen anual total
en los EE. UU. (Adams et al., 2011). También se utiliza como disolvente para
limpieza industrial y agentes desengrasantes en lugar de hidrocarburos clorados
y clorofluorocarbonos (CFC). Se puede utilizar en un rango de 30 a 100% en el
desengrasado de metales antes de pintar y como limpiador en las industrias de
impresión y electrónica. Los otros usos del limoneno son como agentes
humectantes y dispersantes en la fabricación de resinas y como control de
insectos (CIIC, 1993). Actualmente, sus aplicaciones también se están explorando
en otras industrias porque este compuesto contiene un esqueleto de carbono que
es similar a la construcción de muchos compuestos biológicamente activos. Esto
incluye la industria médica, la industria agrícola, la industria orgánica (Malko y
Wróblewska, 2016). Además, el R - (+) - limoneno está presente como compuestos
orgánicos volátiles (COV) en ambientes interiores que reaccionan con el ozono
dando lugar a productos de oxidación del limoneno que poseen efectos tóxicos (
Wolkoff et al., 2012).
Aunque el R - (+) - limoneno se usa como un aditivo de sabor común en
una variedad de alimentos, se ha demostrado que induce efectos tóxicos,
especialmente en ratas (Garyflamm y Lehman-Mckeeman, 1991;
Swenberg, 1993). Sin embargo, en forma de revisión elaborada, no hay mucha
información disponible sobre sus efectos tóxicos y farmacocinética. Por lo tanto,
en el presente artículo, hemos revisado los estudios farmacocinéticos y
toxicológicos del R - (+) - limoneno, los peligros y los riesgos asociados con su uso.
Además, hemos presentado ideas sobre las direcciones futuras de la investigación
sobre la seguridad y toxicidad del R - (+) - limoneno, especialmente como aditivo
de sabor y componente de jugos cítricos, considerando el hecho de que el 95% de
su exposición humana es a través de los alimentos.
1.1. Presencia en el entorno y entorno
El limoneno y otros terpenos se liberan al medio ambiente a partir de
fuentes biogénicas y antropogénicas en grandes cantidades. Los radicales
de ozono, hidroxilo y nitrato producidos fotoquímicamente reaccionan con
el limoneno y otros terpenos, se oxidan y dan como resultado la formación
de aerosoles y smog fotoquímico. Las vidas medias calculadas para estas
reacciones son 156, 9 y 37 min, respectivamente (HSDB, 2001). A nivel
mundial, se emiten anualmente entre 147 y 827 millones de toneladas de
monoterpenos biogénicos (OMS, 1998).
En el suelo, el R - (+) - limoneno exhibe una movilidad de baja a muy baja y se
volatiliza rápidamente tanto del suelo húmedo como seco; aunque su fuerte adsorción al
suelo ralentiza este proceso (HSDB, 2001). En el medio acuático, puede bioacumularse en
peces y otros organismos acuáticos y unirse fuertemente a los sedimentos y la materia
orgánica en suspensión. Se espera que se volatilice rápidamente a la atmósfera. La vida
media estimada para la volatilización del limoneno de un río modelo (1 m de
profundidad, flujo de 1 m / sy velocidad del viento de 3 m / s) es de 3.4 h (HSDB, 2001;
OMS, 1998). El limoneno es resistente a la hidrólisis; sin embargo, su biodegradación
puede ocurrir tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas. También se ha
informado que el R - (+) - limoneno es biodegradable en el suelo o puede
descomponerse fotoquímicamente en el aire húmedo bajo la luz solar (OMS, 1998).
1.2. Producción
El limoneno puede ser un subproducto importante de la industria de los cítricos. los
669
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
La recuperación de R - (+) - limoneno como producto comercial tuvo lugar por
primera vez durante la temporada de cítricos de Florida (EE. UU.) 1941–42, donde
se produjo a partir del condensado del evaporador de vapor durante la
producción de melaza de cítricos. Para 1946, la producción comercial en Florida
era común (CIIC, 1993). En 1991, la producción mundial anual de aceite / esencia
de naranja (95% R - (+) - limoneno) y R - (+) - limoneno fue de aproximadamente
45.000 toneladas (Florida Chemical Co., 1991). La producción de limoneno
en Florida en 1971 se estimó en aproximadamente 4500 toneladas (Schulz,
1972) y R - (+) - la producción de limoneno durante 1989 y 1990 fue de 8600
y 6800-7700 toneladas, respectivamente (Anon, 1989). En 1990, la
producción estimada de R - (+) - limoneno en California (EE. UU.) Era de 450
toneladas en comparación con Brasil, que era el mayor productor con una
producción estimada entre 4100 y 8200 toneladas (Topfer, 1990). El
volumen de producción en Japón fue de aproximadamente 40.000
toneladas en 1993 (OMS, 1998). La producción mundial anual de R - (+) -
limoneno supera las 70.000 toneladas (Firdaus et al., 2011). Una estimación
de 1984 indicó que se consumían 254,000 kg de R - (+) - limoneno en los EE.
UU. Y en 1976, que se usaban 68,000 kg como ingrediente de fragancia (
NTP, 1990).
Como se mencionó anteriormente, el limoneno es un componente volátil
principal del aceite de cáscara de cítricos (hasta un 95% de R - (+) - limoneno). El R
- (+) - limoneno puede obtenerse por destilación al vapor de cáscaras y pulpas de
cítricos resultantes de la producción de zumos y aceites prensados en frío o de la
desterpenación de aceites de cítricos. A veces se redestila (Bardana y Fenaroli,
2004). Lopresto y col. (2014)utilizó un método no convencional para extraer
limoneno de cáscaras de limón de desecho utilizando disolvente de hexano en
atmósfera de nitrógeno en un reactor agitador de alta presión y alta temperatura.
Los mayores rendimientos de R - (+) - limoneno (2,97%) se obtuvieron a 150 ° C
durante 30 min, lo que fue mucho más alto que los métodos de extracción
convencionales como la extracción soxhlet (0,95%). Sin embargo, los métodos
convencionales producen limoneno casi puro y una pequeña cantidad de
desechos tóxicos; Considerando que los métodos no convencionales requieren
altas temperaturas y generan cantidades importantes de aguas residuales que
son muy perjudiciales para el medio ambiente (Malko y Wróblewska, 2016).
Los avances recientes en la ingeniería metabólica y la biología sintética han
hecho posible diseñar fábricas de células microbianas para la producción eficiente
de limoneno. La sobreexpresión de enzimas en la vía de biosíntesis de limoneno y
los precursores involucrados en la síntesis de limoneno como geranil difosfato,
geranil pirofosfato, isopentenil difosfato, dimetilalil difosfato son los objetivos
principales de la ingeniería metabólica. Los desechos agrícolas podrían usarse
como sustrato para la producción microbiana de limoneno, haciendo que el
proceso sea económicamente viable.E. coli y S. cerevisiae son los huéspedes
predominantes del limoneno debido a las herramientas de ingeniería genética
bien establecidas disponibles. Además, estos organismos tienen la capacidad de
crecer en alta densidad celular y tienen tolerancia al estrés osmótico y al pH (
Jongedijk et al., 2015;
Alonso-Gutierrez et al., 2013). Jongedijk y col. (2015)han utilizado S.
cerevisiae como huésped microbiano y sobreexpresado con éxito - (-)
limoneno sintasa de Perilla frutescens, (+) -limoneno sintasa de Limón
cítrico, y enzima Erg20 mutante (que aumenta la formación de difosfato de
geranilo, un precursor de la producción de limoneno). Willrodt y col. (2014)
han producido con éxito limoneno a partir de E. coli por sobreexpresión de
dos enzimas vegetales, verbigracia., limoneno sintasa y geranil difosfato
sintasa. Carter y col. (2003)han utilizado limoneno sintasa vegetal para
producir limoneno, pero se encontró que el rendimiento era bajo debido a
la disponibilidad limitada de precursores de E. coli. Se diseñaron múltiples
enzimas para mejorar el flujo de precursores de E. coli para la síntesis de
limoneno (Alonso-Gutierrez et al., 2013).
1.3. Propiedades físicas y químicas
El limoneno es un líquido incoloro a temperatura ambiente. Se produce de
forma natural como R-limoneno y S-limoneno. Sinónimo de R - (+) - limoneno son
(+) - carvene, R-4-isopropenil-1-metil-1-ciclohexeno, (+) -pag-mentha-1,8dieno. Los
sinónimos de S - (-) - limoneno son (-) - carvene, S-4-isopropenil-1metil-1-
ciclohexeno, (-) -pag-mentha-1,8-dieno (Bardana, 1997). los
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en el que se demostró que el limoneno tiene una actividad antioxidante

significativamente baja (a una concentración de 2 a 2000 μM) en comparación con el
antioxidante de referencia, trolox (Bacanli et al., 2015).
Murali y Sarvanan (2012) evaluó la eficacia antidiabética del R - (+) - limoneno
en ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina, en las que se encontró que el
R - (+) - limoneno mejora eficazmente la pérdida de peso al reducir la
hiperglucemia y la gluconeogénesis al reducir la actividad de la glucosa-6-
Figura 1. Estructura química del R - (+) - limoneno.
fosfatasa y fructosa 1,6-bisfosfatasa. La capacidad del R - (+) - limoneno para
estimular la secreción de insulina en las células β pancreáticas se ha atribuido a
tabla 1 su efecto beneficioso sobre la diabetes mellitus (Peng y col., 2009). Más lejos,
Propiedades físicas y químicas del R - (+) - limoneno. Bacanli y col. (2017)han demostrado que la administración oral de 28 días de D
Propiedades R - (+) - limoneno Referencias -limoneno a 50 mg / kg de peso corporal protege a las ratas Wistar contra los
efectos diabéticos inducidos por estreptozotocina. Igimi y col. (1991)informó que
número CAS 5989-27-5 (CAPI, 2005)
el R - (+) - limoneno puede usarse clínicamente para disolver cálculos biliares que
Peso molecular 136,24 g / mol (CAPI, 2005)
contienen colesterol debido a sus propiedades solventes para el colesterol.
Estado fisico Líquido o aceite incoloro (Lewis, 2012)
Olor Olor cítrico (Lewis, 2012) También se ha informado que el R - (+) - limoneno tiene otros efectos
Punto de fusion −74 ° C (Haynes, 2014) ( farmacológicos, incluidos los anticancerígenos quimiopreventivos y
Punto de ebullición 177,6 ° C Haynes, 2014) ( quimioterapéuticos (Crowell y col., 1994; Broitman y col., 1996) y efectos
Solubilidad Ligeramente soluble en agua (13,8 Massaldi y
antimicrobianos (Umagiliyage et al., 2017). Se ha informado de actividad
mg / L a 25 ° C) Miscible en etanol y Rey, 1973)
éter; soluble en tetracloruro de (Haynes, 2014) quimiopreventiva contra cánceres de piel mamaria, hígado, pulmón y estómago
carbono Ligeramente soluble en de roedores espontáneos y químicamente inducidos y actividad
glicerina e insoluble en (Lewis, 2012) quimioterapéutica contra tumores mamarios de rata (Crowell y col., 1992). En otro
propilenglicol
estudio, se encontró que el tratamiento conjunto de células de neuroblastoma
Densidad (a 20 ° C) 0,8411 g / cm3 (Haynes, 2014) (
humano SH-SY5Y con limoneno y acetato de linalilo inducía citotoxicidad, pero el
Presión de vapor (a 1,98 mm Hg Pian, 1994)
25 ° C) tratamiento de estas células solo con limoneno no mostró este efecto (Russo et
Punto de inflamabilidad 48 ° C (CAPI, 2005) al., 2013). La citotoxicidad exhibida por la combinación de estos monoterpenos
Autoinflamabilidad 237 ° C (CAPI, 2005) (limoneno y acetato de linalilo) fue comparable a la mostrada por el tratamiento
Índice de refracción a 20 1,4730 (Haynes, 2014)
de la línea celular de neuroblastoma SH-SY5Y con aceite esencial de Bergemot (
grados C / D

Disponibilidad comercial Grado técnico (95% de pureza) Grado (Nielsen et al.,
alimenticio (97% de pureza) Grado de 2013)
lima-limón (70% de pureza)
La forma isomérica predominante de limoneno es R - (+) - Limoneno (Figura 1), que huele
a fruta cítrica y, por lo tanto, se utiliza en productos de calidad alimentaria, productos de
limpieza y productos de belleza; tiempo 'l ' El isómero tiene un olor más agrio parecido a
la trementina mezclada con pino, y se utiliza principalmente como disolvente alternativo
para productos de limpieza. El limoneno es bastante estable a temperatura ambiente
hasta por años. Sin embargo, la manipulación y el almacenamiento pueden causar su
autooxidación según lo informado porKarlberg y col. (1994)en su estudio en el que tras
la exposición al aire de limoneno durante 48 semanas, comenzó a mostrar autooxidación
después de 34 semanas. Incluso con la adición de un conocido antioxidante
butilhidroxitolueno (BHT), el limoneno mostró autooxidación. Además, la formación de
productos de oxidación alergénicos como R - (+) - óxido de limoneno, R - (-) - carvona y R -
(+) - 2-hidroperóxido de limoneno fueron reportados porMatura y col. (2002)en su
estudio sobre el aceite cítrico oxidado (rico en R-limoneno), un sensibilizador cutáneo
frecuente. Sin embargo, si se almacena en la oscuridad, puede ser bastante estable (Zhu
et al., 2015). Las propiedades físicas y químicas del R - (+) - limoneno se resumen en
tabla 1.
2. Importancia farmacológica del R - (+) - limoneno
Los monoterpenos aislados de varias plantas medicinales se utilizan
como medicina tradicional para el tratamiento de la diabetes, el cáncer, los
antihiperlipidémicos, la hipertensión, la inflamación, etc. (Murali y Sarvanan,
2012; Gould, 1997; Kim y otros, 2008; Razavi et al., 2015; Silveira e Sá et al.,
2013). Los estudios han informado que el R - (+) - limoneno que se extrae de
estas plantas medicinales posee una serie de efectos farmacológicos.
Roberto y col. (2010)mostraron potencial antioxidante del limoneno en
linfocitos murinos solo a concentraciones más bajas (0,1, 1, 10 y 50 μg / ml).
El limoneno protegió a las células del estrés oxidativo en
inducida por la adición exógena de peróxido de hidrógeno (H2O2) como lo demuestra la
inhibición del 16-25% de la actividad depuradora de DPPH, mejorando aún más
El uso de limoneno en concentraciones bajas puede proteger a los linfocitos del
ataque del estrés oxidativo. La actividad antioxidante del limoneno se estudió in
vitro mediante el ensayo de capacidad antioxidante equivalente Trolox,
Bergamia cítrica). En este experimento, las células de neuroblastoma humano se
trataron con limoneno, acetato de linalilo, linalol, γ-terpineno, β-pineno y
bergapten en concentraciones citotóxicas (0,02 a 0,03%) equivalentes a las del
aceite esencial de bergemot. Los cambios morfológicos y bioquímicos registrados
incluyeron fragmentación del ADN, activación de caspasa-3, muerte celular
apoptótica, encogimiento celular y alteraciones citoesqueléticas. Los cambios
celulares como la contracción celular, el redondeo, la pérdida de morfología, la
contracción nuclear en los filamentos de actina, el colapso de los microtúbulos se
observaron en la coexposición de limoneno y acetato de linalilo (mostrado en
Figura 2) (Russo et al., 2013). En la actualidad, el R - (+) - limoneno aún se está
sometiendo a más ensayos como agente quimioterapéutico.Del Toro-arrreola et
al., 2005 llevaron a cabo un estudio alimentando ratones BALB / c portadores de
linfoma con una dieta que contenía R - (+) - limoneno. Se evaluó la respuesta
inmune celular a 2,4-dinitrofluorobenceno (DNFB) y subpoblaciones de células T
esplénicas y fagocitosis, actividad microbicida, quimiotaxis en macrófagos
peritoneales después del tratamiento. Sus resultados revelaron que el R - (+) -
limoneno aumenta la supervivencia de los ratones portadores de linfoma, se
mostró una reacción de hipersensibilidad retardada a DNFB y la fagocitosis y la
actividad microbicida fueron evidentes en los macrófagos peritoneales. Además,
en el mismo estudio en un experimento in vitro con R - (+) - limoneno, ácido
perílico y alcohol perilílico, se encontró que el R - (+) - limoneno aumentaba la
producción de óxido nítrico (NO) en los macrófagos peritoneales y había ningún
efecto significativo sobre la proliferación de linfocitos de ratones portadores de
tumores. Por lo tanto,
Las células de neuroblastoma humano se incubaron con medio de
cultivo normal (control), limoneno (750 μM Limo) y limoneno y acetato de
linalilo (Limo (750 μM) + LinAc (375 μM)) y se tiñeron inmunológicamente
para actina (verde) y tubulina. (rojo). Los núcleos celulares se contratiñeron
con DAPI (4′,6-diamidino-2-fenilindol). PhC: contraste de fase
(Reproducido de Russo et al., 2013).
3. Farmacocinética de R - (+) - limoneno
3.1. Absorción
R - (+) - limoneno se absorbe rápidamente en el tracto gastrointestinal

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C. Ravichandran y col.
Figura 2. Contracción celular y alteraciones del citoesqueleto en células SH-SY5Y de neuroblastoma humano.
de animales por difusión. Igimi y col. (1974)en un estudio, se administró R - (+) -
limoneno radiomarcado a ratas Wistar por vía oral y se informó que en 2 h, la
concentración de radiactividad estaba en el pico en la sangre, lo que indica una
absorción máxima. Los niveles tisulares fueron insignificantes después de 48 h,
donde la mayor cantidad de R - (+) - limoneno radiomarcado se excretó en la
orina. Se observó una mala absorción del sistema biliar cuando el limoneno
marcado se infundió en el conducto biliar común de voluntarios (Igimi y col., 1991
). La administración oral a menudo da como resultado una absorción rápida y
completa en el tracto gastrointestinal de los seres humanos (Crowell y col., 1994).
Los estudios de inhalación a corto plazo en humanos indican que la captación
pulmonar fue alta, que es casi el 70% de la cantidad suministrada (Filipsson, 1993
). Los estudios sobre la absorción dérmica en ratones afeitados a través del agua
de baño dieron como resultado una absorción rápida y máxima en 10 minutos (
Schafer y Schafer, 1982). En un estudio in vitro realizado en presencia de
microsomas de hígado de rata macho F344, se encontró que <1% de R - (+) -
limoneno se metabolizaba en 1,2-óxido (Lehmanmckeeman y col., 1990). Cuando
se incubó R - (+) - limoneno con microsomas de hígado de rata, se encontraron
dos metabolitos del limoneno: 1,2-epóxido y 8,9-epóxido (Watabe y col., 1980,
1981).
3.2. Distribución
El R - (+) - limoneno se distribuye rápidamente en varios tejidos corporales y
se metaboliza rápidamente. Los informes existentes revisados no mencionan
nada sobre la participación de proteínas / lipoproteínas en la distribución de R -
(+) - limoneno. Además, si el limoneno es transportado por el
Fig. 3. Oxidación alílica de R - (+) - limoneno.
671
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
sistema linfático o no no se ha mencionado específicamente según la literatura
ADME disponible referida (Igimi y col., 1974; Kodama y col., 1976; Chen y col., 1998
; Adams et al., 2011). Los estudios de exposición por inhalación a corto plazo en
humanos indican que la captación pulmonar fue alta (casi el 70% de la cantidad
suministrada) y su tasa de eliminación de la sangre fue de 1,1 L / Kg / h (Filipsson,
1993). El R - (+) - limoneno administrado por vía intravenosa a ratas macho
Sprague-Dawley mostró una distribución rápida con una vida media inicial
promedio de 12,4 min (Chen y col., 1998). Filipsson (1993) ha mencionado que la
vida media prolongada del R - (+) - limoneno en sangre con eliminación lenta
indica su acumulación en los tejidos adiposos. Se investigó el patrón de
distribución de limoneno en varios tejidos a través de la administración oral en
ratas usando14Compuesto radiactivo marcado con C por Igimi y col. (1974).
Descubrieron que el limoneno se distribuye principalmente al hígado, los riñones
y la sangre sobre la base de una mayor concentración de radiactividad en estos
tejidos. Sin embargo, solo menos del 0,2% de la radiactividad administrada se
encontró en otros tejidos.
3.3. Metabolismo
De acuerdo a Adams y col. (2011), el metabolismo de R - (+) - limo-
nene en ratas se produce en dos pasos.
En el primer paso, se produce la oxidación alilo de grupos metilo exocíclicos para
producir derivados del ácido perílico, que son los principales metabolitos plasmáticos (
Fig. 3).
En el segundo paso, tiene lugar la epoxidación para producir los correspondientes
dioles (Figura 4).
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Figura 4. Epoxidación de R - (+) - limoneno.

Figura 5. Vías metabólicas probables para el R - (+) - limoneno según Kodama y col. (1976).

Varias rutas metabólicas de R - (+) - limoneno fueron identificadas en
varias especies por Kodama y col. (1976)han sido mostrados en Figura 5.
Encontraron metabolitos como M - I, M - II, M-III, M - IV, M - V y M - VI en la
orina de conejo y otros metabolitos nuevos como M-VII, M-VIII, M-
IX, MX y M-XI en orina de perro y rata. Con referencia al curso del tiempo para la
formación de metabolitos y al tipo de metabolitos, el metabolismo del R - (+) -
limoneno es similar en humanos y ratas. El principal metabolito producido al final
varía de una especie a otra. En el caso de las ratas, el ácido perílico y el ácido
dihidroperílico son los dos principales metabolitos producidos. Para hámsters,
ácido perilil β-D glucopiranosidurónico y para perrospag-mentha 1-on-8,9-diol
son los principales metabolitos. Sin embargo, en los seres humanos, además del
ácido perílico y el ácido dihidroperílico, el limoneno-
También se encontró que se producía 1,8 diol (Crowell y col., 1994).
Crowell y col. (1994), identificado siguiendo los principales meta-
bolitos de R - (+) - limoneno en sangre humana después de la administración oral:
ácido dihidroperílico y ácido perílico presentes en> 35%, limoneno-1,8 diol al 18%
y éster metílico de ácido perílico y ácido dihidroperílico en <5% de la material
derivado de limoneno total en plasma. Se informó que el metabolismo se
producía rápidamente; sin embargo, no se detectó alcohol perilílico en la sangre,
ya que se oxida rápidamente a ácido perílico. En un estudio sobre el metabolismo
del R - (+) - limoneno y la cinética de sus metabolitos tras la administración oral en
humanos,Schmidt y Goen (2016) observaron olor característico en el aire
exhalado, que atribuyeron a la presencia de limoneno o sus metabolitos volátiles
en los pulmones sometidos a eliminación respiratoria. Vigushin y col. (1998)
informó que los metabolitos de la orina humana contienen isómeros de ácido
perílico, cis y trans isómeros de ácido dihidroperílico, limoneno 1,2-diol y
uroterpenol.
Para determinar la disponibilidad sistémica de ácido perílico (un metabolito
principal y biológicamente activo de R - (+) - limoneno en ratas), se realizó un
estudio en individuos sanos mediante la administración de una preparación
cítrica (30-40 oz de limonada de estilo mediterráneo) rica en limoneno Chow y col.
(2002). Descubrieron que 40 oz de limonada contienen 593 mg de R - (+) -
limoneno; mientras que 30 oz contienen 447 mg de R - (+) - limoneno. Además, se
informó que los niveles de ácido perílico en plasma alcanzan una concentración
máxima de 13,98 μM dentro de 1 h después del consumo con un
concentración máxima media de 6,20 μM seguida de un rápido descenso con la
función del tiempo y fue indetectable después de 24 h. Este estudio también
concluyó que el ácido perílico está biodisponible después del consumo oral de
preparaciones cítricas ricas en R - (+) - limoneno. En otro estudio, 7 individuos
sanos fueron alimentados con 40 oz de limonada que contenía 500-600 mg de R -
(+) - limoneno diariamente hasta 4 semanas y los autores observaron
acumulación de R - (+) - limoneno en el tejido adiposo (Miller y col., 2010). La
biopsia de grasa antes y después de la intervención en muestras de plasma se
comparó para evaluar los niveles de R - (+) - limoneno. Los niveles fueron 51 a 195
veces más altos después de la intervención en los tejidos adiposos que en el
plasma, pero no se informaron cambios en el peso corporal, la química sanguínea
o la hematología. Este estudio concluyó claramente que el R - (+) - limoneno
puede depositarse en la mama y causar una alta adiposidad del tejido mamario.
3.4. Excreción
Casi el 60% de los administrados 14C-etiquetado D-se informó limoneno
que se excreta en la orina (lo que indica que la principal vía de eliminación en
animales y seres humanos es la orina), bilis (25%) y en heces (aproximadamente
5%) en las 24 h siguientes a la administración (Igimi y col., 1974). Se encontró que
la excreción se completó dentro de las 24 o 72 h posteriores a la administración
de R - (+) - limoneno. En voluntarios humanos con exposición por inhalación de R -
(+) - limoneno en tres concentraciones diferentes de 10, 225 y 450 mg / m3
durante 2 h, se informó que hasta un 1% de limoneno se excreta en el aire
espirado y casi un 0,003% en la orina. La fase de eliminación se produjo a un
ritmo más lento debido a la larga vida media del limoneno en sangre (Filipsson,
1993). En la exposición oral de 100-130 μg / kg de peso corporal de limoneno en
voluntarios humanos, se observó la concentración máxima de metabolitos en 1 a
2 h después de la exposición, seguida de su rápida eliminación con una vida
media de 0,7 a 2,5 hy entre todos los metabolitos. Se encontró que el limoneno
1,2-diol se eliminaba más lentamente (Schmidt y Goen, 2016). Los estudios en
vacas y ovejas en pastoreo revelaron que el limoneno deja niveles significativos
de residuos (50-100 μg de limoneno / kg de leche en ovejas en pastoreo) en la
leche. Los terpenos en los forrajes consumidos por el ganado mostraron sus
residuos en la leche y la carne (Fernandez et al., 2003; Abilleira et al., 2011).

672
C. Ravichandran y col. Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680

Tabla 2
LD informado50 valores de limoneno.

Especies y sexo Isómero Ruta LD50 (g / Kg de peso corporal) Referencias

Ratón (m / f) R - (+) - limoneno Oral 5,6 / 6,6 Tsuji y col. (1975)

Rata (m / f) R - (+) - limoneno Oral 4.4 / 5.1 Tsuji y col. (1975)
Rata (m / f) R - (+) - limoneno Intraperitoneal 3.6 / 4.5 Tsuji y col. (1975)
Rata (m / f) R - (+) - limoneno Intravenoso 0,125 / 0,11 Tsuji y col. (1975)
Conejo D/Llimoneno Dérmico > 55 Opdyke (1978)
Rata limoneno d / l Oral >5 Opdyke (1978)
Rata R - (+) - limoneno Oral >5 Moreno (1972)
Conejo R - (+) - limoneno Dérmico >5 Moreno (1972)
Conejo R - (+) - limoneno Dérmico >5 IARC (1999)
Ratón (m / f) R - (+) - limoneno Oral, 7 días 5.3 / 6.8 Tsuji y col. (1974)
Ratón (m / f) R - (+) - limoneno Intraperitoneal, 3 días 3,1 / 3,0 Tsuji y col. (1974)
Ratón (m / f) R - (+) - limoneno Intraperitoneal, 10 días 0,59 / 0,50 Tsuji y col. (1974)
Ratón (m + f) R - (+) - limoneno Subcutánea, 7 días > 21,5 Tsuji y col. (1974)

4. Evaluación toxicológica del R - (+) - limoneno ingestas diarias estimadas per cápita de R - (+) - limoneno, para Europa y EE. UU.,
respectivamente (OMS, 2005). Por lo tanto, es importante comprender el efecto
Hemos categorizado los efectos toxicológicos del R - (+) - limoneno y sus metabolitos asociado a la dieta de este compuesto de sabor. Para evaluar los efectos de
de la siguiente manera: toxicidad aguda del R - (+) - limoneno en seres humanos, se administró a cinco
voluntarios sanos una cápsula que contenía 20 g de R - (+) - limoneno (pureza
desconocida). Los síntomas importantes fueron tenesmo y diarrea con
4.1. Toxicidad general
proteinuria leve (Igimi y col., 1976). La toxicidad del limoneno y el 1,2-epóxido de
limoneno se determinó en fibroblastos de pulmón humano y se expresó en
La exposición humana al R - (+) - limoneno es común y puede ocurrir al ingerir
términos de actividad mitocondrial, eficiencia de la siembra en placa y
diferentes alimentos o por inhalación, ya que está presente de forma natural en la
crecimiento celular neto (Rolseth y col., 2002). Se observó que el crecimiento neto
atmósfera. R - (+) - limoneno se considera una sustancia poco tóxica según los
de estas células en condiciones de oxígeno al 50% se inhibía a una concentración
estudios de toxicidad aguda oral realizados en roedores en los que, oral
de limoneno de 200 a 300 µM, mientras que la muerte celular se producía a 350
LD50 Se informó que los valores eran de 5 g / kg en ratas y 6 g / kg para ratones (Tsuji
µM. La toxicidad del limoneno en términos de actividad mitocondrial aumentó
et al., 1974). Adams y col. (2011)informó que LD50 para el limoneno en estudios de
significativamente a 300-500 µM; mientras que se observó una inhibición
toxicidad oral aguda puede variar desde 4400 mg / kg pc para ratas hasta
completa de la actividad mitocondrial por encima de 500 µM. El significado
6600 mg / kg de peso corporal para ratones; mientras que se informó que su
IC50 Se encontró que el valor para el crecimiento celular neto y la actividad mitocondrial
toxicidad crónica NOAEL era <75 y 300 mg / kg / d en ratas machos y hembras por
(condición de aire estándar) era 285 ± 49 μM y 410 ± 61 μM, respectivamente.
sonda oral, respectivamente. Para ratones machos y hembras, la toxicidad crónica
tivamente. Por el contrario, el 1,2-epóxido de limoneno no mostró efectos tóxicos sobre el
NOAEL por vía oral por sonda fue de 250 y 500 mg / kg / d,
crecimiento celular neto y la actividad mitocondrial incluso a concentraciones más altas.
respectivamente (Adams et al., 2011). LD informado50 Los valores de R - (+) -
El IC50 para el crecimiento celular y la actividad mitocondrial del 1,2epóxido
limoneno en varias especies animales y en diferentes estudios se resumen
de limoneno fue 480 ± 173 μM y 1194-1507 μM, que es 1,68 y 2,91
marizado en Tabla 2. El R - (+) - limoneno está registrado como una sustancia
veces más alto que el del limoneno. Con respecto al crecimiento celular neto y la
generalmente reconocida como segura (GRAS) en el Código de Regulación Federal (CFR)
actividad mitocondrial, el limoneno 1,2-epóxido fue menos tóxico que el limoneno. Sin
para aromas sintéticos (FDA de EE. UU., 2012). La exposición dérmica puede ocurrir al
embargo, en el mismo estudio para el experimento de eficiencia de galvanoplastia
entrar en contacto con productos de limpieza domésticos o productos cosméticos que
mide el LD promedio50 en condiciones estándar de aire u oxígeno fue de 253
contienen R - (+) - limoneno como aditivo de fragancia. La exposición dérmica al R - (+) -
± 60 µM para el limoneno; mientras que 149 ± 67 μM para limoneno 1,2-
limoneno en altas concentraciones produce irritación y erupción purpúrica. La propiedad
epóxido que presenta un orden inverso de toxicidad entre el limoneno y el epóxido
irritante de este compuesto varía con la forma
correspondiente. El estudio también confirma que la toxicidad en condiciones de cultivo
(D o l) y el grado de oxidación. Se encontró que el R - (+) - limoneno oxidado posee un
celular es mayormente similar a la situación in vivo, Limonene
alto potencial de sensibilización que su forma no oxidada. Algunos de los productos de
El 1,2-epóxido no es un compuesto activo de toxicidad por limoneno y no hay un
oxidación alergénicos son hidroperóxidos de limoneno, R-carvona y óxido de limoneno (
efecto significativo del oxígeno sobre el limoneno (Rolseth y col., 2002). En otra
Kim et al., 2013). Los otros productos de reacción, como el aerosol orgánico secundario,
evaluación de la toxicidad in vitro del limoneno con ozono en tejido epitelial
se generan cuando el limoneno reacciona con el ozono por oxidación multifase que
diferenciado (MucilAir™) y la línea celular epitelial (A549), el limoneno exhibió una
causa irritabilidad. Los radicales libres generados en estas reacciones pueden tener
proliferación celular disminuida y una producción alterada de citocinas
efectos sensoriales en las vías respiratorias pulmonares (Wolkoff y col., 2008). Aunque
inflamatorias. Los parámetros determinantes para estos cambios incluyen la
las tablas estándar de composición de alimentos no proporcionan datos sobre el
concentración química, la duración de la exposición y el tiempo del punto de
limoneno, se ha estimado que el consumo diario per cápita en EE. UU. Para una persona
muestreo (Anderson y col., 2013).
de 60 kg es
0,27 mg (Asociación de Fabricantes de Aromas y Extractos (FEMA), 1991).
IARC (1999) también ha mencionado la ingesta diaria promedio de R - (+) - limoneno en 4.2. Genotoxicidad
aproximadamente 0,3 mg / kg de peso corporal, que a su vez se ha referido a 1991 de
FEMA reporte. Adams y col. (2011), sin embargo, obtuvieron una cifra diferente de El R - (+) - limoneno y sus metabolitos como el epóxido 1,2 y el epóxido
ingesta diaria per cápita de limoneno, es decir, 27.906 μg / persona por día al considerar 8,9 no mostraron evidencia de genotoxicidad o mutagenicidad en ninguno
parámetros como el volumen de sabor anual informado de limoneno (80%) utilizado, la de los ensayos realizados in vitro e in vivo (Mccann y col., 1975; Watabe y
población "solo para el consumidor" (10% del total Población estadounidense en ese col., 1980; Turner y col., 2001). Basado en esta correlación,Inger y col.
momento), factor de corrección de la encuesta y peso corporal promedio de 60 kg ”. Sin (1980) llevó a cabo la prueba de Ames en 4 histidinas que requerían
embargo, parece haber alguna contradicción con los valores estimados de ingesta diaria mutantes de Salmonella typhimurium cepas TA 98, TA 100, TA 1535 y TA
de limoneno, ya que el Comité Mixto FAO / OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios 1537, con o sin activación metabólica utilizando fracción hepática de ratas
(JECFA) en su 63o informe ha mencionado aproximadamente 40.000 μg y 13.000 μg. inducidas por metilcolantreno. Se descubrió que el limoneno no presentaba
mutagenicidad tras la exposición a las cepas antes mencionadas en un

673
C. Ravichandran y col.
concentración de 0,3 a 30 μmol / placa. Además, la prueba de manchas en mamíferos
también reveló que el R - (+) - limoneno no tiene evidencia de mutagenicidad incluso a
una dosis de 215 mg de R - (+) - limoneno / kg de peso corporal en ratones C57BL / 6J
Han en 9-11 días de la gestaciónFahrig, 1982). Los estudios sobre hígado macho de rata
Sprague Dawley o hámster sirio con protocolo de preincubación con y sin Aroclor 1254
se probaron utilizandoSalmonella typhimurium
cepas indicaron resultados negativos en R - (+) - limoneno contra
mutagenicidad (Harworth y col., 1983; Connor y col., 1985). Estudios de
genotoxicidad de R - (+) - limoneno enSalmonella typhimurium
cepas, células L5178Y de ratón y células de ovario de hámster chino (CHO)
mostraron que el recuento de células resistentes a la trifluorotimidina en el
linfoma de ratón no se vio afectado debido al R - (+) - limoneno con o sin hígado
de rata. No hubo intercambios de cromátidas hermanas inducidos por R - (+) -
limoneno en células CHO cultivadas (Anderson y col., 1990; NTP, 1990).
Fernandez-bedmar et al. (2011)investigó el papel de los jugos de cítricos (jugo
de limón y jugo de naranja) con sus compuestos activos hesperidina y limoneno)
sobre la genotoxicidad, antigenotoxicidad, citotoxicidad y longevidad en
Drosophila melanogaster. Descubrieron que todas las sustancias no eran
mutagénicas en concentraciones más bajas y han aumentado la vida útil.
Descubrieron que el limoneno y la hesperidina eran antigenotóxicos.
con diferente porcentaje de inhibición frente al genotóxico H2O2. Dado que el
limoneno está presente en niveles variables en el jugo de naranja y limón, la
Por lo tanto, la toxicidad del jugo de limón en este estudio se atribuyó al
contenido de limoneno.
4.3. Nefrotoxicidad
Aunque el R - (+) - limoneno y su metabolito 1,2 epóxido han mostrado resultados
negativos sobre la mutagenicidad (Mccann y col., 1975; Watabe y col., 1980; Turner y col.,
2001), los estudios han demostrado que el R - (+) - limoneno es propenso a causar
nefrotoxicidad específica en ratas macho llamada nefropatía por gotitas hialinas. Webb y
col. (1989)llevaron a cabo un estudio de toxicidad aguda mediante la administración de
200 mg / kg de R - (+) - limoneno en ratas Fischer 344 hembras y machos adultas
mediante sonda oral. Descubrieron que la gravedad de las gotitas hialinas se encontraba
solo en ratas macho. Incluso en un estudio subcrónico de 13 semanas en ratas macho
alimentadas con 0, 2, 5, 10, 30 y 75 mg / kg de R - (+) - limoneno, los resultados
histopatológicos revelaron cambios en los cilindros granulares en la unión cortico-
medular . Además, los autores encontraron un aumento en los pesos relativos de riñón e
hígado a 35 y 70 mg / kg e informaron NOEL de limoneno como 5 mg / kg / d para
efectos sobre el riñón. La especificidad de estas gotas hialinas en ratas macho se
atribuyó principalmente a
la proteína específica α2u-globulina sintetizada solo en ratas macho que se unen
reversiblemente a cis–1,2-óxido de limoneno que causa acumulación en
lisosomas de los túbulos proximales del riñón (Garyflamm y Lehman-Mckeeman,
1991). Además, en un estudio de carcinogenicidad crónica de dos años en ratas
macho, se informó una mayor incidencia de adenomas renales y
adenocarcinomas. Esto se atribuyó al hecho de que la testosterona en
influencias masculinas para producir α2u-proteína globulina en el hígado y, por lo tanto,
la nefrotoxicidad del R - (+) - limoneno es específica solo de ratas macho (camioneta
Duuren y col., 1963). Sin embargo, el limoneno no muestra evidencia de toxicidad
en el caso de ratones machos, ratones hembras, ratas hembras y en humanos.
Esto también fue confirmado por el hecho de que las ratas excretan 90 veces más
proteína total que los humanos, que se compone principalmente de proteínas de
bajo peso molecular (18 kD); mientras que, predominantemente, se encontró
proteína de alto peso molecular (66 kD) en la orina humana (Olson y col., 1990).
Además del limoneno, también se ha informado que varios otros productos
químicos como el 1,4-diclorobenceno, la isoforona, el pentacloretano, etc., causan
nefropatía en ratas macho (Swenberg, 1993). La disposición renal de R - (+) -
limoneno en ratas y ratones ha revelado que
alrededor del 0.04% de R - (+) - limoneno en ratas macho se unió con α2u- globulina;
mientras que en ratones machos y hembras no hay diferencia de sexo en
se informó la disposición (Lehman-mckeeman y col., 1990). Incluso
aunque los ratones tienen proteína urinaria que es estructuralmente similar a α2u-
globulina, nefropatía por gotitas hialinas no ocurre en el caso de ratones como
esta proteína no se une con epóxido de limoneno como α2u-globulina. Por lo
tanto, a medida que aumenta la dosis de R - (+) - limoneno, la incidencia de
674
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
Se encontró que los tumores renales en ratas macho eran más altos (Hard y
Whysner, 1994). Sin embargo, un estudio reciente en ratas Wistar hembra adultas
reveló que el aceite esencial de cítricos (que es rico en limoneno) tiene un efecto
protector contra el estrés oxidativo inducido por aspirina en dosis altas en el
hígado y el riñón. La disminución del nivel de enzimas antioxidantes como
superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa causada por altas dosis de
aspirina se restauró en el hígado y el riñón de rata, mediante el tratamiento
previo con aceite esencial de cítricos durante 56 días, lo que indica la prevención
del daño renal y hepático (Bouzenna et al., 2016).
4.4. Hepatotoxicidad
El hígado se identificó como un órgano diana de interés después de la
administración oral de R - (+) - limoneno. Dado que el limoneno sufre un
metabolismo hepático rápido y extenso, varios investigadores
documentaron las posibilidades de toxicidad hepática.Ramos y col. (2015)
estudiaron el efecto hepatotóxico potencial del R - (+) - limoneno en ratas
Wistar. Al grupo de tratamiento se le administró 25 y 75 mg / kg / d de R -
(+) - limoneno durante 45 días y 30 días (con un registro de observaciones
durante 30 días más), y análisis bioquímico de fosfato alcalino sérico (ALP). ,
se realizó aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa
(ALT). Descubrieron que las ratas tratadas con 75 mg / kg / día durante 45
días mostraron niveles reducidos de ALT en comparación con el control; sin
embargo, estas pequeñas alteraciones no indican enfermedad hepática. Por
otro lado, la evaluación histopatológica reveló que los grupos tratados con
limoneno desarrollaron lesiones hepatocelulares como degeneración
hidrófoba, estetosis microvesicular, apoptosis y fibrosis estromal. Además,
estas células inflamatorias se pronunciaron principalmente en parénquima,
intermedio,Figura 6. El Programa Nacional de Toxicología (NTP) llevó a cabo
un estudio de toxicidad en ratas F344 / N y ratones B6C3F1 mediante la
administración de R - (+) - limoneno en aceite de maíz por sonda (NTP, 1990
). El estudio de toxicidad crónica se realizó con una dosis de 0, 250 o 500 mg
de limoneno / kg / día durante 103 semanas. Los resultados revelaron que
el hígado de los ratones machos se vio afectado principalmente con un
recuento anormal de núcleos y citomegalia a 500 mg / kg / d. También se
documentó una disminución significativa del peso corporal, la enfermedad
renal y los tumores, así como la mortalidad a la dosis de 500 mg / kg / d.
No obstante, otros estudios han demostrado que el R - (+) - limoneno no
posee un efecto adverso incierto sobre las enzimas metabolizadoras del hígado.
La dosis oral única de 200 a 1200 mg / kg no mostró ningún cambio en los
triglicéridos hepáticos, proteínas microsomales, citocromoB5, y enzimas
metabolizadoras de fármacos. Sin embargo, la dosis oral repetida de 400 mg /
kg / d durante 30 días ha aumentado el peso del hígado, los fosfolípidos
hepáticos, la actividad enzimática y el citocromo P450 y b5 (Ariyoshi y col., 1975).
Impacto del R - (+) - limoneno sobre los hepatocarcinógenos inducidos por N-
nitrosomorfolina (NNM) y sobre la p21 asociada a la membranaras, y el etiquetado
y los índices apoptóticos del hígado fue investigado por Kaji y col. (2001). Aquí, las
ratas se alimentaron con NNM que contenía agua potable hasta 8 semanas y
luego, a partir de la 9ª semana, se administró limoneno a un nivel de 1 o 2% a
través de gránulos de comida hasta 16 semanas. Se informó que al aumentar la
inducción de apoptosis y disminuir la proliferación celular, el limoneno posee la
capacidad de inhibir la hepatocarcinogénesis por NNM. Además, la cantidad de
p21 asociada a la membranaras en los nódulos blancos del hígado tampoco se vio
afectado. De manera similar, en un estudio de ensayo de promoción de inicio de
32 semanas, se administró 0 o 50 ppm de N-etil N-hidroxietilnitrosamina (EHEN) a
ratas macho F344 y NBR en agua potable durante 2 semanas y luego 0 o 150 mg
de limoneno / kg / d se administró aceite de maíz durante 30 semanas por sonda (
Tumores y col., 1991). Descubrieron que el limoneno posee un efecto
quimiopreventivo al reducir significativamente la incidencia de tumores hepáticos
en EHEN y limoneno tratado en ratas F344 que con EHEN solo. Por sus efectos en
el hígado, se ha informado que NOEL es de 10 mg / kg / d en ratas Fischer 344.
Teniendo en cuenta este NOEL,Filipsson y col. (1998)
han propuesto una ingesta diaria tolerable (IDT) de 0,1 mg / kg / d de R - (+) - limoneno
para los seres humanos.
Considerando una TDI de 0,1 mg / kg / d, ingesta diaria tolerable de limoneno
C. Ravichandran y col.
Figura 6. Histopatología del hígado de rata después de la exposición al limoneno.
una. Control; B. Lesiones hepatocelulares; C. Formación de tabiques conectivos; D. Inflamación moderada (reproducida deRamos et al., 2015).
resulta ser de 6 mg / persona, que es mucho más bajo que la ingesta diaria
estimada correcta de limoneno (alrededor de 16 mg, según los informes
0,27 mg / kg / d de ingesta diaria estimada) para un ser humano adulto. Por
tanto, los autores opinan que el IDT derivado deFilipsson y col.
(1998) parece estar basado en la regla general de dividir la dosis de NOEL por 100
factores de incertidumbre y probablemente no fue una buena estimación de TDI.
Nuestro análisis parece estar justificado especialmente si se tienen en cuenta
otros estudios y los informes del JECFA han mencionado la IDA del limoneno
como "no especificada" (JECFA, 1993b). Incluso después de la reevaluación en su
63. ° informe en el año 2004, el JECFA ha asignado "IDA no especificada" para el
limoneno (OMS, 2005). Esto corrobora que el TDI no puede ser inferior a la
ingesta diaria estimada de ningún químico.
4.5. Neurotoxicidad
Se han realizado diferentes estudios para evaluar los efectos tóxicos del
limoneno y el epóxido de limoneno. Voluntarios humanos expuestos a 10, 225 y
450 mg / m3 de R - (+) - limoneno a través del aire inhalado exhibió una captación
del 70% de este compuesto a través de las vías pulmonares junto con su
acumulación en los tejidos adiposos. Aunque no se observaron síntomas
irritantes en el sistema nervioso central, se informó reducción de la capacidad
vital (salud respiratoria) (Filipsson, 1993). La exposición subaguda de ratones con
25, 50 y 75 mg / kg de R - (+) - epóxido de limoneno durante 14 días no afectó el
comportamiento, el patrón de consumo de alimentos y agua y no causó
mortalidad. Sin embargo, cuando se administraron las mismas dosis después de
la administración intraperitoneal (i / p), se informó una disminución de la cría, el
aseo y el cruzamiento en ratones. La inhibición de la coordinación motora y la
alteración de los receptores de tipo benzodiazepina fueron efectos asociados del
limoneno. El estudio concluyó que el epóxido de limoneno y sus propiedades
deben examinarse a fondo antes de usar este compuesto (De Almeida et al., 2012
). Un estudio en ratas y ratones mostró efectos sedantes del limoneno al regular
la liberación de dopamina y la actividad neuronal serotoninérgica, se encontró
que el limoneno inhibe la hiperlocomoción inducida por metanfetamina (METH) (
Yun, 2014). El estudio de la actividad electroencefalográfica humana (ECG)
relacionada con la simulación olfativa de limoneno mostró una alta actividad beta
relativa (RHB) en la región temporal derecha tras la inhalación (concentración del
10%). Estas actividades beta difieren entre hombres y mujeres. El aumento del
valor de RHB muestra la participación del limoneno en el aumento de las etapas
de estrés, tensión y ansiedad de la actividad cerebral (Sowndharajan et al., 2015).
Por diferencias
675
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
en especies animales, así como en la vía de exposición, creemos que el efecto
sedante del limoneno en ratas y ratones puede no extrapolarse a los humanos
como tal o no es necesario realizar estudios lo suficientemente relevantes y
detallados para caracterizar mejor estos efectos. La inhalación prolongada de
estas fragancias puede afectar negativamente al sistema nervioso autónomo al
manipular las condiciones emocionales y mentales (Heuberger y col., 2001). Por
tanto, es importante investigar más a fondo el efecto del limoneno en el sistema
nervioso.
4.6. Inmunotoxicidad
En lugar de participar en la participación de las células T, el R - (+) - limoneno
es capaz de modular la respuesta inmune a través de los macrófagos. La vía de
absorción de R - (+) - limoneno y la respuesta inmune del pulmón fueron
estudiadas porHamada y col. (2002). Descubrieron que inicialmente, el R - (+) -
limoneno es captado por la linfa del conducto torácico y desde aquí se mueve al
pulmón y activa directamente la respuesta inmune de los macrófagos alveolares o
lo activa indirectamente a través de los linfocitos activados. También se ha
documentado que el R - (+) - limoneno posee una acción activadora policlonal en
la que la alimentación intragástrica forzada de ratones BALB / c con R - (+) -
limoneno se asoció con el desarrollo de folículos secundarios, aumento de la
respuesta de anticuerpos y nódulos linfoides prominentes (Evans y col., 1987). Se
solicitan más estudios detallados sobre el R - (+) - limoneno con respecto a su
efecto sobre la inmunomodulación / inmunosupresión para definir el riesgo de
población hipersensible.
4.7. Toxicidad para el desarrollo y la reproducción
Hasta la fecha, no se ha informado en la literatura de evidencia sobre los
efectos teratogénicos y embriotóxicos del R - (+) - limoneno. Hubo varios
hallazgos (Tsuji y col., 1975; Kodama y col., 1997a; B) sugiriendo que el R - (+) -
limoneno cuando se administró a ratas y ratones dio como resultado un aumento
de las muertes acompañadas de una reducción en el aumento de peso, el peso de
órganos como el timo, el bazo y los ovarios en la descendencia entre las madres y
un retraso en la osificación. El resumen general de los estudios de toxicidad
llevados a cabo con R - (+) - limoneno se ha recopilado enTabla 3.
5. Aspectos futuros
Se han realizado numerosos estudios de toxicidad en Dlimoneno
 Tabla 3
Resumen del perfil de toxicidad del R - (+) - limoneno.

Tipo de toxicidad Animales (especies) / Humanos y dosis Ruta Efecto Referencias

Toxicidad aguda y subaguda Ratón (B6C3F1) Oral La dosis de 3300 a 6600 mg / kg provocó la muerte en 3 días NTP (1990)
C. Ravichandran y col.

0, 413, 825, 1650, 3300 o 6600 mg / kg / d durante 16 d Oral

• No se observaron signos clínicos relacionados con el compuesto a 1650 mg / kg Crowell (1994)
Rata (F344 / N) Oral
• Sin efectos histopatológicos relacionados con los compuestos De almedia et al. (2012)
0, 413, 825, 1650, 3300 o 6600 mg / kg / d durante 16 días Intraperitoneal
• La dosis de 3300 y 6600 causó la muerte dentro de los primeros 2 días de exposición. Ariyoshi et al. (1975)
Humanos (5 mujeres, 2 hombres) Oral
• No se observaron signos clínicos relacionados con el compuesto en ratones en el grupo de dosis de 1650 mg / kg
100 mg / kg hasta 1 semana
• Sin efectos histopatológicos relacionados con los compuestos

Ratones, 25, 50 y 75 mg / kg durante 14 d ((+) - epóxido de

Toxicidad subcrónica
• A una dosis de 100 mg / kg, D-limoneno no causó toxicidad graduable
limoneno)
• Efectos sedantes y ansiolíticos de (+) - epóxido de limoneno, que pueden implicar una acción sobre
Rata macho Wistar, 400 mg / kg hasta 30 días
• receptores de tipo benzodiazepina
Aumento del peso relativo del hígado
• Disminución de los niveles de colesterol
Ratón (B6C3F1) Oral
• Dosis de 2000 y 500 mg / kg causaron la muerte. NTP (1990)
0, 125, 250, 500, 1000 o 2000 mg / kg durante 13 semanas Oral
• Cabellos ásperos y actividad disminuida a 1000 o 2000 mg / kg Se Webb y col. (1989)
Rata (F344 / N) Oral
• observó adenoma de células alveolares a 2000 mg / kg Webb y col. (1990)
0, 150, 300, 600, 1200 o 2400 mg / kg Dlimoneno en aceite de Oral
• La dosis de 2400 mg / kg provocó la muerte durante la semana 1 Leroy (1984)
maíz por sonda durante 13 semanas Oral
• Hembras Pelo áspero, letargo, lagrimeo excesivo a dosis de 1200 o 2400 mg / kg. Leroy (1984)
Ratas (macho) Intratraqueal
• Hombres: nefropatía en el riñón en todas las dosis.
0, 2,5, 10, 30, 75 mg / kg pc durante 13 semanas
• Sin cambios relacionados con el tratamiento como lesiones patológicas, aumento de peso corporal, consumo de alimento y
Perro (beagles)
• eficiencia alimenticia

0, 100 o 1000 mg / kg pc • Formación patológica de cilindros granulares en la zona externa de la médula renal.
Rata • Ausencia de histopatología renal, incluida la tríada de lesiones asociadas con hidrocarburos inducidos
0,2 ml D-limoneno semanal hasta 6 semanas nefropatía
para hámster Ausencia de D-lesiones inducidas por limoneno en perros
0,2 ml D-limoneno semanal durante hasta 6 semanas
• Después de 3 semanas, destrucción del epitelio bronquial y bronquiolar con hemorragia alveolar
• Después de 6 semanas: pulmones pálidos agrandados, la mayoría de los animales murieron
•

676
• Destrucción del epitelio bronquial y bronquiolar con hemorragia alveolar Después de 6

• semanas: pulmones agrandados, pálidos y vesiculados

Toxicidad crónica Ratón (B6C3F1) Oral Masculino: el peso corporal medio de la dosis y el control del vehículo fueron similares NTP (1990)
Los ratones machos recibieron Oral
• Mujeres: la disminución de la tasa de supervivencia y los pesos corporales medios fueron entre un 5% y un 15% más bajos que los de

0, 250 o 500 mg / kg durante 2 años

• controles del vehículo después de la semana 28

Los ratones hembra recibieron 0,500 o 1000 mg / kg para ratas de 2
años (F344 / N)
Las ratas macho recibieron 0, 75 o 150 mg / kg durante 2 años Las
ratas hembra recibieron 0, 300 o 600 mg / kg durante 2 años
Genotoxicidad Células de ovario de hámster chino
Salmonella typhimurium
Salmonella typhimurium, 0-20 μmol / placa de células
embrionarias de hámster sirio
Células epiteliales traqueales de rata
No se observaron signos clínicos relacionados con el compuesto.
• Hombres: el peso corporal medio es un 4-7% más bajo que los controles desde la semana 2 hasta el final de los estudios
• Mujeres: el peso corporal medio es un 4-7% más bajo que los controles desde la semana 28 hasta el final de los estudios
• Disminuciones en las tasas de supervivencia para las mujeres a 600 mg / kg / d, pero sin efectos adversos a 300 mg / kg / d
• Hombres: los efectos en el riñón incluyeron aumentos relacionados con la dosis en la incidencia de mineralización e hiperplasia
• epitelial incluso con la dosis más baja probada
- No se induce daño citogenético Anderson y col. (1990)
-
• Sin actividad mutagénica en las cepas TA98, TA100, TA1535, TA1537 o TA1538 de Salmonela Watabe (1980)
• tifimurio Watabe y col. (1981)
D-Limoneno, 4-vinilciclohex-l-ene, y sus epóxidos no fueron mutagénicos hacia Salmonella Oshiro et al. (1998)
• typhimuriurn TA 98, TA 100, TA 1535, TA 1537. y TA 1538 Steele y col. (1990)
α2u-el aumento de globulina en los túbulos contorneados proximales puede causar directamente tumorigénesis renal en
• ratas macho

• Transformación inhibida por BaP

Carcinogenicidad / Ratas hembra Sprague-Dawley Oral • La dosis de 10,000 ppm tuvo una reducción del 72% en los tumores mamarios en comparación con los controles en Elegbede y col. (1984)
Mutagenicidad 0, 1000, 10,000 ppm D-limoneno hasta 27 semanas 18 semanas Fahrig (1984)
Ratón No se evidenció toxicidad en estas ratas, incluso en los niveles más altos. D-dosis de limoneno Dietrich y swenberg
215 mg / kg / d hasta 3 d Rata
• Las ratas de control y todas las tratadas aumentaron de peso al mismo ritmo durante todo el experimento. (1991)
(F344 y NBR) 150 mg / kg / d
• Sin evidencia de carcinogenicidad
hasta 30 semanas
• Aumento del número de túbulos atípicos e hiperplasia.
Neurotoxicidad Rata (Wistar) Oral
• El contenido de GABA (ácido γ-aminobutírico) en el cerebro aumentó significativamente después de la administración de slimoneno Zhou y col. (1990)
0, 5, 25, 50 mg / kg hasta 7 d Inhalación
• Filipsson (1993)
Humano No se encontró ningún efecto sobre los síntomas irritativos o relacionados con el SNC durante esta exposición a corto plazo a D- Russo y col. (2013)
• limoneno
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680

(Continúa en la siguiente página)

C. Ravichandran y col. Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680

tanto in vitro como in vivo, lo que ayuda a realizar una evaluación integral del riesgo de
este aditivo alimentario (aromatizante) de uso común. Además, la investigación existente

Kanerva y col. (1987)

Lehman y col. (1989)

Ariyoshi y col. (1975)

Ramos y col. (2014)
se ha centrado principalmente en el uso de diferentes técnicas de procesamiento de
alimentos (por ejemplo, procesamiento a alta presión, campo eléctrico pulsado,
NTP (1990)
Referencias

procesamiento térmico, enlatado) para aumentar la vida útil de los jugos de cítricos y el
efecto de estas técnicas en la estabilidad del limoneno. . Sin embargo, existe escasez de
información sobre si estas técnicas de procesamiento conducen a la generación de
metabolitos tóxicos o productos de degradación nocivos del limoneno. Entre las técnicas
no térmicas, el procesamiento de campo eléctrico pulsado (PEF) del jugo de naranja ha

No se observaron efectos sobre los triglicéridos hepáticos, la proteína microsomal, el citocromo p-450 y el fármaco.
Hubo un aumento relacionado con la dosis en cilindros granulares en la zona externa de la médula y evidencia de

resultado en un aumento significativo en el contenido de limoneno hasta un 18% (Ayhan

La acumulación de gotitas hialinas se retiene en los riñones de las ratas macho, donde aproximadamente el 40% de la D-

y col., 2002). En comparación con el procesamiento térmico, se informó que la pérdida

de limoneno fue menor en el caso del jugo de naranja tratado con PEF (Min y Zhang,
nefrosis crónica, incluyendo dilatación tubular e hiperplasia de células epiteliales en la zona proximal.

2003; Jia y col., 1999). En caso de tratamiento de ultra alta presión de jugo de naranja a
El peso relativo del hígado y el contenido de fosfolípidos hepáticos aumentaron solo ligeramente 500 MPa durante 15 min, la concentración de limoneno disminuyó hasta un 75% (Jian et
Los pesos relativos de hígado y riñón mostraron un aumento relacionado con la dosis en el grupo de 300 mg / kg / d
La especificidad por sexo y especie de esta toxicidad está relacionada con la presencia de α2u-globulina
Se observó una citotoxicidad significativa cuando las células se trataron conjuntamente con limoneno.

al., 2009). Como tal, el limoneno es menos sensible al tratamiento de alta presión (
Sampedro et al., 2009); sin embargo, al aumentar la presión, también se encontró que la
La actividad necroinflamatoria detectada en el parénquima hepático
Los equivalentes de limoneno se asocian de manera reversible con α2u-globulina.

degradación del limoneno aumentaba significativamente (Pan et al., 2011). El

Solo en los hombres, se encontró un aumento de la nefropatía relacionado con la dosis.

procesamiento térmico a menudo causa la máxima pérdida de compuestos volátiles

como se muestra porMoshonas y Shaw (1989) en su estudio en el que se demostró que
el jugo de naranja comercial envasado asépticamente pierde un 40% de limoneno
durante el almacenamiento. Blair y col. (1950)investigó la degradación del limoneno
Se observaron lesiones hepatocelulares tanto en la dosis

mediante mecanismos de rehidratación de hidratación catalizados por ácido. Se observó

que debido a reacciones químicas en un ambiente ácido (como en el jugo de naranja
enlatado), el limoneno se degradaba a α-terpineol, 1,4-cineol y otros productos que
causaban deterioro del sabor.Perez-Lopez y col. (2006)

estudió el efecto del procesamiento del jugo de mandarina (pasteurización) sobre

volátiles como limoneno, linalol, α-terpineol, terpinen-4-ol, considerando que
estos 4 compuestos denotan criterio de calidad en la industria procesadora de
enzimas metabolizantes

cítricos. El estudio demostró además que en condiciones ácidasD-limoneno se

túbulo contorneado

puede degradar a otros terpenos como el α-terpineol, que es estable y contribuye

al mal sabor durante el almacenamiento. Esto se estudió más a fondo en zumos
de cítricos, modelos y soluciones tampón porHaleva-Toledo et al., 1999.
Encontraron que el primer paso en la formación de α-terpineol a partir deD
Efecto

-limoneno y linalol es por protonación en la que el pH juega un fuerte efecto. A

•
•
•
•
•
•
•
•
•
•

menor pH, mayor fue la formación de α-terpineol. Esto explica la razón detrás de
un mayor contenido de α-terpineol en el jugo de limón que el jugo de naranja y
pomelo (el jugo de limón tiene un pH comparativamente bajo que el jugo de
naranja y pomelo).
Ruta

Oral
Oral
Oral

Oral

Como la mayor parte de la investigación solo se ha centrado en la estabilidad del

limoneno durante el procesamiento, las investigaciones futuras deberían centrarse
principalmente en la concentración de productos de degradación generados a partir del
0, 150, 300, 600, 1200 o 2400 mg / kg Dlimoneno

limoneno y sus efectos tóxicos. La evaluación de la toxicidad del α-terpineol generado

Tratamiento de dosis única a 200, 400, 800 y 1200
Tratamiento repetido durante 2, 3, 15 o 30 días a dosis

durante el almacenamiento de jugo de cítricos debe investigarse exhaustivamente. No

solo se debe estudiar el α-terpineol, sino también la toxicidad de otros productos de
Ratas macho y hembra Sprague-Dawley

degradación del limoneno como el trans y cis 1,8 terpineno, 1,4 o 1,8 cineol, etc. Entre las
14, 41, 136 o 409 mg / kg durante 24 h

técnicas de procesamiento no térmico, el uso de ozono en el procesamiento de jugos de

células de neuroblastoma humano

75, 150, 300 mg / kg de peso corporal durante 27 días

Animales (especies) / Humanos y dosis

25 y 75 mg / kg de peso corporal hasta 40 días

en aceite de maíz por sonda nasogástrica para ratas

frutas ha sido bien documentado (Cullen et al., 2010). Sin embargo, los estudios han
450 y 225 mg / m3 D-limoneno

demostrado que la interacción del limoneno con el ozono (ozonólisis) da como resultado
Fischer (F344) de 13 semanas (macho)

la formación de aerosoles orgánicos secundarios (AOS) que muestran potentes efectos

diarias de 400 mg / kg

tóxicos. La ozonólisis del limoneno produce varios productos reactivos como 3-

Ratas Wistar macho

isopropenil-6-oxoheptanal (IPOH), 4acetil-1-metilciclohexano (4-AMCH) y 4-oxopentanal

Ratas macho Wistar
Rata (F344 / N)

(4-OPA) que causa daño a las células pulmonares (Lipsa et al., 2016). Como el limoneno
está presente en los zumos de frutas en las concentraciones deseadas, cuando se
somete a un proceso de ozonización se somete a una ozonólisis adecuada que da como
resultado la formación de metabolitos oxidativos. Aunque el limoneno y el ozono se
reconocen como GRAS para su uso, es necesario considerar los efectos de
procesamiento asociados con el limoneno para comprender el espectro toxicológico
completo del limoneno en tales condiciones. La investigación sobre los productos de
degradación generados por el limoneno como resultado del tratamiento con ozono es
importante. Por lo tanto, los estudios futuros deberían centrarse en la compatibilidad del
Tabla 3 (continuado)

Hepatotoxicidad

limoneno con el procesamiento del ozono, el efecto del procesamiento del ozono en la
Nefrotoxicidad
Tipo de toxicidad

oxidación / degradación del limoneno, el tipo de metabolitos formados. Además, los

efectos tóxicos de estos metabolitos (únicos o múltiples) en el sistema del modelo animal,

677
C. Ravichandran y col. Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680

Se estudiarán en detalle los límites de seguridad para estos metabolitos en alimentos y
bebidas. Esto ilustrará la seguridad de los alimentos y bebidas que contienen limoneno.
6. Conclusión
El R - (+) - limoneno es un aditivo ampliamente utilizado para aromas / fragancias en las industrias alimentaria y cosmética. Se cree que la
principal fuente de exposición de los seres humanos al limoneno es la comida (96%) y el 4% restante es el aire ambiente. Los valores estimados de
ingesta diaria de R - (+) - limoneno varían según la fuente consultada. Aunque el R - (+) - limoneno ha sido reconocido como ingrediente GRAS con
efectos quimioterapéuticos en varios estudios, también muestra pocos efectos toxicológicos; especialmente la hepatotoxicidad y la neurotoxicidad son
motivo de gran preocupación. Los estudios de ADME mostraron que el R - (+) - limoneno se absorbe bien a través del tracto gastrointestinal de humanos
y animales. Después de una rápida distribución en varias partes del cuerpo, se metaboliza para formar ácido perílico y ácido dihidroperílico que se
eliminan rápidamente en 24 horas a través de la orina. El órgano diana de los roedores (excepto en ratas macho de algunas especies) es el hígado; en el
que se ha informado que las enzimas hepáticas, su peso, el nivel de colesterol y el flujo de bilis se ven afectados. La neurotoxicidad del R - (+) - limoneno
se ha demostrado en modelos de roedores y líneas celulares humanas. La mayoría de estos estudios no son concluyentes y, por lo tanto, la evaluación
del riesgo neurológico definitivo del R - (+) - limoneno es bastante difícil. No obstante, se requieren más investigaciones para caracterizar mejor los
efectos neurotóxicos del R - (+) - limoneno. Todos los estudios de genotoxicidad han revelado que el R - (+) - limoneno muestra resultados negativos en
la prueba de Ames y no es mutagénico para varias cepas de La neurotoxicidad del R - (+) - limoneno se ha demostrado en modelos de roedores y líneas
celulares humanas. La mayoría de estos estudios no son concluyentes y, por lo tanto, la evaluación del riesgo neurológico definitivo del R - (+) - limoneno
es bastante difícil. No obstante, se requieren más investigaciones para caracterizar mejor los efectos neurotóxicos del R - (+) - limoneno. Todos los
estudios de genotoxicidad han revelado que el R - (+) - limoneno muestra resultados negativos en la prueba de Ames y no es mutagénico para varias
Referencias
Abilleira, E., Virto, M., Nájera, AI, Albisu, M., Pérez-Elortond, FJ, Ruiz de Gordoa, JC,
de Renobales, M., Barron, LJ, 2011. Efectos de los cambios estacionales en el manejo de la
alimentación en pastoreo a tiempo parcial sobre las concentraciones de terpenos de la leche de
oveja. J. Dairy Res. 78, 129-135.
Adams, TB, Gavin, CL, Mcgowen, MM, Waddell, WJ, Cohen, SM, Feron, VJ,
Mamett, LJ, Munro, IC, Portoghese, PS, Rietjens, IM, Smith, RL, 2011. La evaluación FEMA
GRAS de hidrocarburos terpénicos alifáticos y aromáticos utilizados como ingredientes
de sabor. Food Chem. Toxicol. 49 2941–2494.
Alonso-Gutiérrez, J., Chan, R., Batth, TS, Adams, PD, Keasling, JD, Petzold, CJ, Lee,
TS, 2013. Ingeniería metabólica de Escherichia coli para la producción de limoneno y
alcohol perilílico. Metab. Ing. 19, 33–41.
Anderson, BE, Zeiger, E., Shelby, MD, Resnick, MA, Gulati, DK, Ivett, JL, Loveday,
KS, 1990. Resultados de la prueba de aberración cromosómica e intercambio de cromátidas hermanas con 42
sustancias químicas. Reinar. Mol. Mutageno. 16, 55-137.
Anderson, SE, Khurshid, SS, Meade, BJ, Lukomska, E., Wells, JR, 2013. Toxicológico
análisis de productos de reacción de limoneno utilizando un sistema de exposición in vitro. Toxicol.
Vitro 27, 721–730.
Anon, 1989. D-el precio del limoneno es suave; los compradores miran ahora a Brasil. Chem. Mercado. Reps.
236, 24.
Ariyoshi, T., Arakaki, M., Ideguchi, K., Ishizuka, Y., Ide, H., 1975. Estudios sobre la meta-
bolismo de D-limoneno (p -mentha-1,8-dieno) III. Efecto siD-limoneno sobre los lípidos y las enzimas
metabolizadoras de fármacos en hígados de rata. Xenobiotica 5, 33–38.
Ayhan, Z., Zhang, QH, Min, DB, 2002. Efecto del procesamiento de campo eléctrico pulsado y
almacenamiento sobre la calidad y estabilidad del jugo de naranja de concentración única. J. Food Protect.
65-10, 1623-1627.

cepas de La neurotoxicidad del R - (+) - limoneno se ha demostrado en modelos de roedores y líneas celulares humanas. La mayoría de estos estudios no
Bacanli, M., Basaran, AA, Basaran, N., 2015. La propiedad antioxidante y antigenotóxica
erties de cítricos fenólicos limoneno y naringina. Food Chem. Toxicol. 81, 160-170.
son concluyentes y, por lo tanto, la evaluación del riesgo neurológico definitivo del R - (+) - limoneno es bastante difícil. No obstante, se requieren más
Bacanli, M., Gul Anlar, H., Aydin, S., Cal, T., Ari, N., Undeger Bucurgat, U., Ahmet
investigaciones para caracterizar mejor los efectos neurotóxicos del R - (+) - limoneno. Todos los estudios de genotoxicidad han revelado que el R - (+) - Basaran, A., Basaran n, N., 2017. D-limoneno mejora la diabetes y sus complicaciones en
limoneno muestra resultados negativos en la prueba de Ames y no es mutagénico para varias cepas deSalmonella typhimurium a cualquier nivel de ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina. Food Chem. Toxicol. 110, 434–442.
Blair, JS, Godar, EM, Masters, JE, Riester, EW, 1950. Experimentos exploratorios para
dosis estudiado. En el caso de ratas macho, el R - (+) - limoneno es nefrotóxico y causa
identificar las reacciones químicas que causan el deterioro del sabor durante el almacenamiento de jugo de
naranja enlatado. I. Incompatibilidad de los componentes del aceite de piel con el jugo ácido. J. Food Sci. 17,
235–260.
Bourgou, S., Rahali, FZ, Ourghemmi, I., Saidani Tounsi, M., 2012. Cambios en la piel.
nefropatía por gotitas hialinas debido a una proteína específica (α2u-globulina, que se
composición esencial del aceite de cuatro cítricos tunecinos durante la maduración del fruto. Sci. Mundo J.
encuentra solo en ratas macho) en ellos; sin embargo, esta nefrotoxicidad no es aplicable 2012, 528–593.
a humanos. Su toxicidad oral aguda informada LD50 los valores oscilan entre 4400 y 6600 Bouzenna, H., Dhibi, S., Samot, N., Rjeibi, I., Talarmin Elfeki, A., Hfaiedh, N., 2016. El
efecto protector del aceite esencial de Citrus limon sobre la hepatotoxicidad y nefrotoxicidad
mg / kg pc para roedores y los valores NOAEL de toxicidad oral crónica en
inducida por la aspirina en ratas. Biomed. Pharmacother. 83, 1327-1334.
los roedores oscilan entre <75 y 500 mg / kg / d. En lo que respecta a las Broitman, SA, Wilkinson, J., Cerda, S., Branch, SK, 1996. Efectos de los monoterpenos y
agencias reguladoras, la FDA de EE. UU. Y la autoridad europea de mevinolina en tumor de colon murino CT-26 in vitro y sus "metástasis" hepáticas in vivo.
seguridad alimentaria (EFSA) están siguiendo el valor de IDA propuesto por Avances en Medicina y Biología Experimentales 401, 111–130.
Burdock, GA, 1997. Enciclopedia de aditivos alimentarios y colorantes, vol. 1 Prensa CRC, Boca
el JECFA. JECFA en su 41a reunión (JECFA, 1993b) retiró la IDA existente de 0– Raton.
1,5 mg / kg pc / día para R - (+) - limoneno (JECFA, 1993a) y en su lugar Burdock, GA, Fenaroli, G., 1995. Manual de ingredientes de sabor de Fenaroli, tercera ed.
asignó su IDA como "no especificada". Sin embargo, el aumento del Prensa CRC, Boca Raton, Fla.
Burdock, GA, Fenaroli, G., 2004. Manual de ingredientes de sabor de Fenaroli, quinta ed.
consumo de jugos cítricos, específicamente la dieta mediterránea, que es Prensa CRC, Boca Raton, Fla.
rica en R - (+) - limoneno, puede aumentar el consumo per cápita a 1 mg / Carter, OA, Peters, RJ, Croteau, R., 2003. Vía de biosíntesis de monoterpenos
kg de peso corporal. La ingesta oral de limoneno podría aumentarse estructural en Escherichia coli. Fitoquímica 64, 425–433.
Chen, H., Chan, KK, Budd, T., 1998. Farmacocinética de D-limoneno en la rata por
consumiendo limonada o jugo de limón que contiene casi 10 a 20 veces más
Ensayo GC – MS. J. Pharmaceut. Biomed. Anal. 17, 631–640.
limoneno que los jugos de naranja comerciales. Aunque el limoneno es un Chow, HS, Salazar, D., Hakim, IA, 2002. Farmacocinética del ácido perílico en humanos
ingrediente seguro como aditivo alimentario, su consumo y / o exposición (a después de la administración de una dosis única de un preparado cítrico rico en d-limoneno.
Epidemiol del cáncer. Biomark. Prev. 11, 1472-1476.
través de productos cosméticos) durante un período prolongado de tiempo,
Colombo, A., De Bortoli, M., Knoppel, H., Schauenburg, H., Vissers, H., 1991. Small
especialmente en dosis más altas, podría resultar tóxico. Las investigaciones pruebas de cámara y análisis de espacio de cabeza de compuestos orgánicos volátiles emitidos por
futuras deben evaluar en detalle el efecto de las técnicas de procesamiento productos domésticos. Aire interior 1, 13-21.
Connor, HT, Theiss, CJ, Hanna, AH, Moneith, KD, Matney, ST, 1985. Genotoxicidad
de alimentos convencionales y emergentes (como el tratamiento con ozono)
de productos químicos orgánicos que se encuentran con frecuencia en el aire de las casas móviles. Toxicol. Letón. 25, 33–40.
en los productos alimenticios que contienen limoneno, especialmente con
respecto a la generación de nuevos metabolitos del limoneno. Crowell, PL, Kennan, WS, Haag, JD, Ahmed, S., Vedejs, E., Gould, MN, 1992.
Quimioprevención de la carcinogénesis mamaria por derivados hidroxilados de D-
limoneno. Carcinogénesis 13, 1261–1264.
Conflictos de interés Crowell, PL, Elscn, CE, Bailey, HH, Elegbede, A., Haag, JD, Gould, MN, 1994.
Metabolismo humano del agente terapéutico contra el cáncer experimental D-
limoneno. CancerQuimioterapia y Farmacología. 35, 31–37.
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Cullen, PJ, Valdramidis, vicepresidente, Tiwari, BK, Patil, S., Bourke, P., O'Donnell, CP, 2010.
Procesamiento de ozono para la conservación de alimentos: una descripción general de los tratamientos de zumos de frutas.
Ozono: Sci. Ing. 32, 166-179.
Reconocimiento De Almeida, AAC, Costa, JP, De Carvalho, RBF, De Sousa, DP, De Freitas, RM,
2012. Evaluación de la toxicidad aguda de un compuesto natural (+) - epóxido de limoneno y
El primer autor y el tercer autor agradecen al Instituto Nacional de su acción de tipo ansiolítico. Brain Res. 1448, 56–62.
Del Toro-arrreola, S., Flores-Torales, E., Torres-Lozano, C., Toro-arrreola, AD, Tostado-
Emprendimiento y Gestión de Tecnología de Alimentos por
pelayo, K., Ramirez-Duenas, MG, Daneri-Navarro, A., 2005. Efecto de D-limoneno sobre la
proporcionar NIFTEM Ph.D. compañerismo. respuesta inmune en ratones BALB / c con linfoma. En t. Immunopharm. 5, 829–838.
Dietrich, DR, Swenberg, JA, 1991. La presencia de α2u-globulina es necesaria para D-
promoción de limoneno de tumores renales de rata macho. Canc. Res. 51, 3512–3521.
Documento de transparencia Dornic, N., Roudot, AC, Batardiere, A., Nedelec, AS, Bourgeous, P., Hornez, N., Le Caer,
F., Ficheux, AS, 2018. Exposición agregada a compuestos de fragancias comunes:
comparación de la contribución de aceites esenciales y cosméticos mediante métodos
El documento de transparencia relacionado con este artículo se puede encontrar en línea en
probabilísticos y el ejemplo del limoneno. Food Chem. Toxicol. 116 (Parte B), 77–85.
https://doi.org/10.1016/j.fct.2018.07.052.

678
C. Ravichandran y col.
Elegbede, JA, Elson, CE, Qureshi, A., Tanner, MA, Gould, MN, 1984. Inhibición de
Cáncer de mama inducido por DMDA por monoterpeno D-limoneno. Carcinogénesis 5 (5),
661–664.
Evans, DL, Miller, DM, Jacobsen, KL, Bush, PB, 1987. Modulación de la inmunorresistencia.
esponja en ratones por D-limoneno. J. Toxicol. Reinar. Salud 20, 51–66.
Fahrig, R., 1982. Efectos de los aditivos alimentarios en la prueba de manchas en mamíferos. Prog. Clin. Biol.
Res. 109, 339–348.
Fahrig, R., 1984. Modo de acción genético de co-carcinógenos y promotores tumorales en levaduras.
y ratones. Mol. Gineta. Genom. 194, 7–14.
Favela-Hernandez, JM, González-Santiago, O., Ramírez-Cabrera, MA, Esquivel-Ferriño,
PC, Camacho-Corona, MR, 2016. Química y farmacología de. Citrus sinensis.
Moléculas. 21, 247.
Fernandez, C., Astier, C., Rock, E., Coulon, J.-B., Berdague, J.-L., 2003. Caracterización
de leche mediante el análisis de sus fracciones de terpenos. En t. J. Food Sci. Technol. 38, 445–451.
Fernandez-bedmar, Z., Anter, J., La Cruz-ares, SD, Muñoz-serrano, A., Alonso-Moraga,
A., Perez-Guisado, J., 2011. Papel de los jugos cítricos y componentes distintivos en la
modulación de procesos degenerativos: genotoxicidad, antigenotoxicidad, citotoxicidad y
longevidad en Drosophila. J. Toxicol. Reinar. Salud 74, 1052–1066.
Filipsson, AF, 1993. Temas actuales D - Exposición de seres humanos al limoneno por inhalación:
captación, distribución, eliminación y efectos sobre la función pulmonar. J. Toxicol.
Reinar. Salud 38, 77–88.
Filipsson, AF, Bard, J., Karlsson, S., 1998. Evaluación química internacional concisa
Documento 5: Limoneno 5. Organización Mundial de la Salud, Ginebra, págs. 1-36.
Firdaus, M., Montero De Espinosa, L., Meier, MAR, 2011. Renovables a base de terpenos
monómeros y polímeros mediante adiciones de tiol-eno. Macromoléculas 44, 7253–7262.
Asociación de Fabricantes de Aromas y Extractos (FEMA), 1991. Monografía de D-limoneno.
Washington DC. págs. 1–4.
Florida Chemical Co, 1991. Hoja de datos de comercialización: D-limoneno. Lake Alfred, Florida.
Garyflamm, W., Lehman-Mckeeman, LD, 1991. La relevancia humana del tumor renal-
inducir el potencial de D-limoneno en ratas macho: implicaciones para la evaluación de riesgos.
Regul. Toxicol. Pharmacol. 13, 70–86.
Gershenzon, J., Dudareva, N., 2007. La función de los productos naturales terpénicos en el
mundo natural. Nat. Chem. Biol. 3, 408–414.
Gould, MN, 1997. Quimioprevención del cáncer y terapia por monoterpenos. Reinar.
Perspectiva de salud. 105, 977–979.
Haleva-Toledo, E., Naim, M., Zehavi, U., Rouseff, RL, 1999. formación de α-terpineol en
zumos de cítricos, modelos y soluciones tampón. J. Food Sci. 64–5, 838–841.
Hamada, M., Uezu, K., Matsushita, J., Yamamoto, S., Kishino, Y., 2002. Distribución y
respuestas inmunes resultantes de la administración oral de D-limoneno en ratas. J. Nutr.
Sci. Vitaminol. 48, 155–160.
Hard, GC, Whysner, J., 1994. Evaluación de riesgos de D-limoneno: un ejemplo de rata macho
tumorígenos renales específicos. Crit. Rev. Toxicol. 24 (3), 231-254.
Harworth, S., Lawlor, T., Mortelmans, K., Speck, W., Zeiger, E., 1983. Salmonella mu-
resultados de la prueba de tagenicidad para 250 sustancias químicas. Reinar. Mol. Mutageno. 1, 3–142.
Haynes, WM, 2014. Manual de química y física, 95ª edición. Prensa CRC, Boca
Raton, Florida.
Heuberger, E., Hongratanaworakit, T., Bohm, C., Weber, R., Buchbauer, G., 2001. Efectos
de fragancias quirales sobre los parámetros del sistema nervioso autónomo humano y la
autoevaluación. Chem. Sentidos 26, 281-292.
HSDB, 2001. Biblioteca Nacional de Medicina, Base de datos de sustancias peligrosas. D-limoneno.
CASRN-5989-27-5. http://toxnet.nlm.nih.gov/newtoxnet/hsdb.htm.
IARC, 1993. Algunas sustancias naturales: alimentos y constituyentes, hetero-
aminas aromáticas cíclicas y micotoxinas - D-limoneno. En: IARC Monographs on
the Evaluation of the Carcinogenic Risk to Humans 56. pp. 135-162.
IARC, 1999. Algunas sustancias químicas que causan tumores de riñón o vejiga urinaria en
abolladuras y algunas otras sustancias - D-limoneno. En: Monografías de la IARC sobre la
evaluación del riesgo carcinogénico para los seres humanos. L, vol. 73. págs. 307–327.
ICSC, 2005. D-limonene. Tarjetas internacionales de seguridad química. ICSC-0198.
Igimi, H., Nishimura, M., Kodama, R., Ide, H., 1974. Estudios sobre el metabolismo de D-
limoneno (p-mentha-1, 8-dieno): I. La absorción, distribución y excreción de D-
limoneno en ratas. Xenobiotica 4, 77–84.
Igimi, H., Hisatsugu, T., Nishimura, M., 1976. El uso de D-preparación de limoneno como
agente de disolución de cálculos biliares. Soy. J. Dig. Dis. 21-11, 926-939.
Igimi, H., Tamura, R., Toraishi, K., Yamamoto, F., Kataoka, A., Ikejiri, Y., Hisatsugu, T.,
Shimura, H., 1991. Disolución médica de cálculos biliares. Cavar. Dis. Sci. 36, 200–208.
Iglesias, DJ, Cercós, M., Colmenero-Flores, JM, Naranjo, MA, Ríos, G., Carrera, E.,
Ruiz-Rivero, O., Lliso, I., Morillon, R., Tadeo, FR, Talon, M., 2007. Fisiología de la
fructificación de cítricos. Braz. J. Plant Physiol. 19, 333–362.
Inger, F., Rutberg, L., Curvall, M., Enzell, RC, 1980. Detección de humo de tabaco
estimulantes de mutagenicidad utilizando la prueba de ames. Toxicología 18, 219-232.
JECFA, 1993a. Limoneno. En: Evaluación toxicológica de ciertos aditivos alimentarios y
Tóxicos que ocurren naturalmente. Ginebra. Comité Mixto FAO / OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios de la
Organización Mundial de la Salud, págs. 35–79 (Serie 30 de Aditivos Alimentarios de la OMS).
JECFA, 1993b. Limoneno. En: Evaluación toxicológica de ciertos aditivos alimentarios y
Contaminantes. Anexo 4. Organización Mundial de la Salud, Comité Mixto FAO / OMS de Expertos en
Aditivos Alimentarios de Ginebra, págs. 299-301 (OMS, Serie de Aditivos Alimentarios 32).
Jia, M., Zhang, H., Min, DB, 1999. Efectos del procesamiento del campo eléctrico pulsado a favor
compuestos y microorganismos del jugo de naranja. Food Chem. 65, 445–451.
Jian, P., Haixiang, W., Huiming, X., Yi, Y., Qingmei, Z., 2009. Efectos de ultra alta
tratamiento a presión sobre los principales compuestos aromatizantes del zumo de naranja. Trans.
Barbilla. Soc. Agric. Ing.https://doi.org/10.3969/j.issn.1002–6819.2009.5.044.
Jongedijk, E., Cankar, K., Ranzijn, J., van der Krol, S., Bouwmeester, H., Beekwilder, J.,
2015. Captura del monoterpeno olefina limoneno producido en Saccharomyces
cerevisiae. Levadura 32, 159-171.
Kaji, I., Tatsuta, M., Iishi, H., Baba, M., Inoue, A., Kasguai, H., 2001. Inhibición por D-
El limoneno de hepatocarcinogénesis experimental en ratas Sprague-Dawley no
679
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
implican la asociación de la membrana plasmática p21ras. En t. J. Canc. 93, 441–444.
Kamal, GM, Anwar, F., Hussain, AI, Sarri, N., Ashraf, MY, 2011. Rendimiento y sustancia química
composición de los aceites esenciales de cítricos afectados por el pretratamiento de secado de las cáscaras. En t.
comida. Res. J. 18–4, 1275–1282.
Kanerva, RL, Ridder, GM, Lefever, FR, Alden, CL, 1987. Comparación de corto plazo
efectos renales debidos a la administración oral de decalina o D-limoneno en ratas Fischer-344
macho adultas jóvenes. Food Chem. Toxicol. 25, 345–353.
Karlberg, AT, Magnusson, K., Nilsson, U., 1994. Influencia de un antioxidante en el
formación de compuestos alergénicos durante la autooxidación de d-limoneno. Ana.
Ocupar. Hig. 38-2, 199-207.
Kasanen, JP, Pasanen, AL, Pasanen, P., Liesivuori, J., Kosma, VM, Alarie, Y., 1999.
Evaluación de la irritación sensorial de 3-careno y trementina, y niveles aceptables
de monoterpenos en ambientes ocupacionales e interiores. J. Toxicol. Reinar. Health
Part A 57 (2), 89-114.
Keeling, CI, Bohlmann, J., 2006. Genes, enzimas y sustancias químicas de la diversidad terpenoide en
la defensa constitutiva e inducida de las coníferas contra insectos y patógenos. Nuevo
Phytol. 170, 657–675.
Kim, YW, Kim, MJ, Chung, BY, Bang, DY, Lim, SK, Choi, SM, Lim, DS, Cho, MC,
Yoon, K., Kim, HS, Kim, YS, Kwack, SJ, Lee, B., 2013. Evaluación de seguridad y evaluación de
riesgos del d-Limoneno. J. Toxicol. Reinar. Salud Parte B 16, 17–38.
Kim, JS, Yean, MH, Lee, JY, Kim, YJ, Lee, EJ, Lee, SY, Kang, SS, 2008. Un nuevo
glucósido monoterpeno de las raíces de Paeonia lactiflora. Helv. Chim. Acta 91, 85–
89.
Knoppel, H., Schauenburg, H., 1989. Cribado de productos domésticos para la emisión de
compuestos orgánicos volátiles. Reinar. En t. 15, 413–418.
Kodama, R., Yano, T., Noda, K., Ide, H., 1976. Estudios sobre el metabolismo de D-limoneno
(p-menta-1,8-dieno). IV aislamiento y caracterización de nuevos metabolitos y
diferencias de especies en el metabolismo. Xenobiotica 6–6, 377–389.
Kodama, R., Okubo, A., Araki, E., Noda, K., Ide, H., Ikeda, T., 1977a. Estudios sobreD-li-
moneno como solubilizador de cálculos biliares (VII): efectos sobre el desarrollo de fetos y crías de
ratones. Oyo Yakuri 13, 863–873.
Kodama, R., Okubo, A., Sato, Araki E., Noda, K., Ide, H., Ikeda, T., 1977b. Estudios sobreD-
limoneno como solubilizador de cálculos biliares (IX) .Afecta el desarrollo de fetos y crías de
conejos. Oyo Yakuri 13, 885–898.
Larsen, ST, Hougaard, KS, Hammer, M., Alarie, Y., Wolkoff, P., Clausen, PA, Wilkins,
CK, Nielsen, GD, 2000. Efectos Efectos de R - (+) - y S - (-) - limoneno en el tracto
respiratorio en ratones. Tararear. Exp. Toxicol. 19, 457–466.
Lehman-Mckeeman, LD, Rodríguez, PA, Takigiku, R., Caudill, D., Fey, ML, 1989. D-
nefrotoxicidad específica en ratas macho inducida por limoneno: evaluación de la asociación
Entre D-limoneno y α2u-globulina. Toxicol. Apl. Pharmacol. 99, 250-259.
Lehman-mckeeman, LD, Caudill, D., Takigiku, R., Schneider, RE, Young, JA, 1990.
Disposición comparativa de D-limoneno en ratas y ratones: relevancia para la nefrotoxicidad
específica de ratas macho. Toxicol. Letón. 53, 193-195.
Leroy, EP, 1984. Fed. Proc. Abstract 3473, 43–44.
Lewis, RJ, 2012. Propiedades peligrosas de los materiales industriales de Sax, conjunto de 5 volúmenes,
duodécima ed. Wiley e hijos, Hoboken, Nueva Jersey.
Lipsa, D., Lev, P., Barrero-Moreno, J., Coelhan, M., 2016. Efectos inflamatorios inducidos por
productos seleccionados de oxidación de limoneno: 4-OPA, IPOH, 4-AMCH en líneas de células
epiteliales bronquiales humanas (16HBE14o) y alveolares (A549). Toxicol. Letón. 262, 70–79.
Lopresto, CG, Petrillo, F., Casazza, AA, Aliakbarian, B., Perego, P., Calabro, V., 2014. A
método no convencional para extraer D-limoneno de residuos de cáscaras de limón y
comparación con la extracción tradicional de Soxhlet. Separ. Purif. Technol. 137, 13-20.
Malko, MW, Wróblewska, A., 2016. La importancia del R- (+) -limoneno como materia prima
material para síntesis orgánica y para la industria orgánica. Chemik 70, 193–202.
Massaldi, HA, King, CJ, 1973. Técnica simple para determinar solubilidades con moderación
orgánicos solubles. Coeficientes de solubilidad y actividad deD-limoneno, butilbenceno y
acetato de n-hexilo en agua y soluciones de sacarosa. J. Chem. Ing. Data 18, 393–397.
Matura, M., Goossens, A., Bordalo, O., García-Bravo, B., Magnusson, K., Wrangsjö, K.,
Karlberg, AT, 2002. Aceite cítrico oxidado (R-limoneno): un sensibilizador cutáneo frecuente en
Europa. Mermelada. Acad. Dermatol. 47, 709–714.
Mccann, J., Spingam, NE, Kobori, J., Ames, BN, 1975. Detección de carcinógenos como
mutágenos: probador bacteriano Cepas con plásmidos de factor R. Proc. Natl. Acad. Sci. Unidad.
Estados Am. 72–3, 979–983.
Mercier, B., Prost, J., Prost, M., 2009. El aceite esencial de trementina y sus principales volátiles
fracción (α- y β-pinenos): una revisión. En t. J. Occup. Medicina. Reinar. Salud 22 (24), 331–
342.
Miller, JA, Hakim, IA, Chew, W., Thompson, P., Thomson, CA, Sherry Chow, HH,
2010. Acumulación de tejido adiposo de D-limoneno con el consumo de una preparación
de limonada rica en D-contenido de limoneno. Nutr. Canc. 62–6, 783–788.
Min, S., Zhang, QH, 2003. Efectos del procesamiento de campo eléctrico pulsado a escala comercial en
sabor y color del jugo de tomate. J. Food Sci. 68-5, 1600-1606.
Moreno, OM, 1972. Estudios de toxicidad oral aguda de D-limoneno en ratones, ratas y conejos.
Informe no publicado para el Instituto de Investigación de Materiales de Fragancias, Woodcliff Lake,
Nueva Jersey, EE. UU..
Moshonas, MG, Shaw, PE, 1989. Evaluación de sabor y constituyentes favorables volátiles de
zumo de naranja envasado asépticamente. J. Food Sci. 54, 82–85.
Murali, R., Sarvanan, R., 2012. Efecto antidiabético de D-limoneno, un monoterpeno en
ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina. Biomedicina y Nutrición Preventiva.
2, 269-275.
Programa Nacional de Toxicología (NTP), 1990. Estudios de carcinogenicidad y toxicología de D-
limoneno en ratas F344 / N y ratones B6C3F1. NTP-tr-347. Departamento de Salud y Servicios
Humanos de EE. UU. Publicación de los NIH No. 90–2802.
Nielsen, E., Ladefoged, O., Soborg, I., 2013. Evaluación de peligros para la salud por exposición a
D-limoneno y propuesta de un criterio de calidad basado en la salud para el aire ambiente.
Agencia Danesa de Protección Ambiental, Dinamarca.
Olson, MJ, Johnson, JT, Reidy, CAA, 1990. Comparación de rata macho y humana
C. Ravichandran y col.
plroteínas urinarias: implicaciones para la resistencia humana a la nefropatía por gotitas
hialinas. Toxicol. Apl. Pharmacol. 102, 524–536.
Opdyke, DLJ, 1978. Monografías sobre materias primas de fragancias. Food Chem. Toxicol. dieciséis,
809 Número especial IV.
Oshiro, Y., Balwierz, PS, Eurell, TE, Morris, DL, Alden, CL, 1998. Exploración del
potencial de transformación de una proteína de rata macho única α2u-globulina utilizando células
embrionarias de hámster. Toxicol. Pathol. 26, 381–387.
Pan, J., Wang, H., Xie, H., Yang, YI, Zeng, Q., 2011. Efecto de hidrostática ultra alta
presión sobre las concentraciones de limoneno, α-terpineol y carvona en el jugo de naranja navel.
J. Proceso alimentario. Ing. 34, 728–745.
Peng, CH, Ker, YB, Weng, CF, Peng, CC, Huang, CN, Lin, LIY, Peng, RY, 2009.
Bioactividad del secretagogo de insulina de la fruta cidra (Citrus medica L. Var.
Sarcodactylis Hort, Rutaceae). J. Agric. Food Chem. 57, 8812–8819.
Pérez López, AJ, Saura, D., Lorente, J., Carbonell-Barrachina, AA, 2006. Limonene,
linalol, α-terpineol y terpinen-4-ol como parámetros de control de calidad en el procesamiento del
jugo de mandarina. EUR. Comida. Res. Techn. 222, 281–285.
Ramos, CAF, Sa RC, S., Alves, FM, Salete, M., Benedito, BR, de sousa, PD, Diniz,
FM, de F, M., Araujo T, MS, Almeida de, NR, 2015. Evaluación histopatológica y bioquímica de
D-Lesión hepática inducida por limoneno en ratas. Tox. Rep. 2, 482–488.
Razavi, BM, Arasteh, E., Imenshahidi, M., Iranshahi, M., 2015. Efecto antihipertensivo de
auraptene, una cumarina monoterpeno del género Agrios, tras la administración crónica.
Irán. J. Bas. Medicina. Sci 18-2, 153-158.
Roberto, D., Micucci, P., Sebastian, T., Graciela, F., Anesini, C., 2010. Actividad antioxidante
de limoneno en linfocitos murinos normales: relación con la modulación del H2O2 y la
proliferación celular. Clínica básica. Pharmacol. Toxicol. 106, 38–44.
Rodríguez, A., Shimada, T., Cervera, M., Alquézar, B., Gadea, J., Gómez-Cadenas, A., De
Ollas, CJ, Rodrigo, MJ, Zacarías, L., Peña, L., 2014. La regulación negativa de terpenos desencadena
respuestas de defensa en naranja transgénica que conduce a la resistencia contra patógenos
fúngicos. Plant Physiol. 164, 321–339.
Rodríguez, A., Kava, V., Latorre-García, L., da Silva, GJJ, G Pereira, R., Glienke, C.,
Ferreira-Maba, LS, Vicent, A., Shimada, T., Pena, L., 2018. La regulación a la baja de la d-
limoneno sintasa de ingeniería en frutos de naranja induce resistencia contra el hongo
Phyllosticta citricarpa a través de una mayor acumulación de alcoholes monoterpénicos y la
activación de defensa. Mol. Plant Pathol.https://doi.org/10.1111/mpp.12681.
Rolseth, V., Djurhuus, R., Svardal, AM, 2002. Toxicidad aditiva de limoneno y 50%
oxígeno y el papel del glutatión en la desintoxicación de las células pulmonares humanas. Toxicología
170, 75–88.
Russo, R., Ciociaro, A., Berliocchi, L., Valentina Cassiano, MG, Rombola, L., Ragusa, S.,
Bagetta, G., Blandini, F., Corasaniti, MT, 2013. Implicación de limoneno y acetato de linalilo
en la citotoxicidad inducida por aceite esencial de bergamota en células de neuroblastoma
humano. Fitoterapia 89, 48–57.
Sampedro, F., Geveke, DJ, Fan, X., Zhang, HQ, 2009. Efecto de PEF, HHP y térmico
tratamiento sobre la inactivación de PME y la concentración de compuestos volátiles de una bebida a base de
jugo de naranja y leche. Innovat. Ciencia de los alimentos. Emerg. Technol. 10 483–469.
Schafer, R., Schafer, W., 1982. Dieperkutaneresorptionverschiedener Terpene– Menthol,
campher, limonen, isobornylacetat, α-Pinen – ausbadezusätzen. Arzneimittel Forschung -
Investigación sobre drogas 32, 56–58.
Schmidt, L., Goen, T., 2016. Metabolismo del R-Limoneno en humanos y cinética de metabolitos
después de la administración oral. Arco. Toxi. 91-3, 1175-1185.
Schulz, HE, 1972. D-recuperación de limoneno en la industria de los cítricos de Florida. En: Actas de
Sociedad Americana de Ingenieros Mecánicos. Ingeniería Cìtrus. Conferencia, vol. 18. págs.
1–6.
Sikdar, DC, Menon, R., Duseja, K., Kumar, P., Swami, P., 2016. Extracción de aceite de cítricos
de las pieles de naranja (Citrus sinensis) por destilación al vapor y su caracterización. En t.
J. Tech. Res. Apl. 4–3, 341–346.
Silveira e Sá, RC, Andrade, LN, Pergentino de Sousa, D., 2013. A review on anti-in
actividad inflamatoria de los monoterpenos. Moléculas 18, 1227-1254.
Sowndharajan, K., Cho, H., Yu, B., Kim, S., 2015. Efecto de la estimulación olfativa de iso-
compuestos aromáticos meric, (+) - limoneno y terpinoleno sobre la actividad
electroencefalográfica humana. EUR. J. Int. Med 7, 561–566.
Steele, VE, Kelloff, GJ, Wilkinson, BP, Arnold, JT, 1990. Inhibición de la transformación
en células epiteliales traqueales de rata cultivadas por agentes quimiopreventivos potenciales. Canc.
Res. 50, 2068-2074.
Swenberg, JA, 1993. α2u-nefropatía por globulina: revisión de los mecanismos celulares y moleculares
involucrados y sus implicaciones para la evaluación del riesgo humano. Reinar.
Perspectiva de salud. Supl. 101–6, 39–44.
680
Toxicología alimentaria y química 120 (2018) 668–680
Tichenor, BA, Mason, MA, 1988. Emisiones orgánicas de productos de consumo y
materiales de construcción al ambiente interior. The International Journal of Air
Pollution Control and Hazardous Waste Management 38, 264–268.
Topfer, K., 1990. El precio del aceite de naranja desciende a medida que comienza la venta brasileña. Chem. Mercado.
Rep. 238, 21.
Tsuji, M., Fujisaki, Y., Yamachika, K., Nakagami, K., Fujisaka, F., Mito, M., Aoki, T.,
Kinoshita, S., Okubo, A., Watanabe, I., 1974. Estudios sobre D-limoneno, como solubilizante de
cálculos biliares (I): estudios farmacológicos generales. Oyo Yakuri 8, 1439–1459.
Tsuji, M., Fujisaki, Y., Okubo, A., Arikawa, Y., Noda, K., Ide, H., Ikeda, T., 1975. Estudios
sobre D-limoneno, como solubilizante de cálculos biliares (V): efectos sobre el desarrollo de fetos y
crías de ratas. Oyo Yakuri 9, 179–186.
Tumores, K., Dietrich, DR, Swenberg, JA, 1991. La presencia de α2u-la globulina es necesaria para
D-promoción de limoneno de ratas macho. Canc. Res. 13, 3512–3521.
Turner, SD, Tinwell, H., Piegorsch, W., Schmezer, P., Ashby, J., 2001. La rata macho
carcinógenos limoneno y sacarina sódica no son mutagénicos para las ratas macho Big Blue
TM. Mutagénesis 16–4, 329–332.
Umagiliyage, AL, Becerra-Mora, N., Kohli, P., Fisher, DJ, Choudhary, R., 2017.
Eficacia antimicrobiana de los liposomas que contienen D -limoneno y su efecto sobre la
vida útil de los arándanos. Postcosecha Biol. Technol. 128, 130-137.
Administración de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos, 2012. General. 21 CFR §700.http: //
ecfr.gpoaccess. gov / cgi / t / text / text-idx? c = ecfr & sid = 89cf1d1eb4f13f6dd2564e0158a77d48 &
rgn = div5 & view = text & node = 21: 7.0.1.2.10 & idno = 21.
Van Duuren, BL, Nelson, N., Orris, L., Palmes, ED, Schmitt, FL, 1963. Carcinogenicidad
de epóxidos, lactonas y compuestos peroxi. J. Natl. Cancer Inst. 31–1, 41–55.
Vigushin, DM, Poon, K., Boddy, A., inglés, J., Halbert, W., Jarman, M., Charles, R.,
1998. Fase I y estudio farmacocinético de D-limoneno en pacientes con cáncer
avanzado. Canc. Chemother. Pharmacol. 42, 111-117.
Watabe, T., Hiratsuka, A., Isobe, M., Ozawa, N., 1980. Metabolismo de d-limoneno por
microsomas hepáticos a no mutagénicos hacia Salmonella typhimurium. Biochem.
Pharmacol. 29, 1068–1071.
Watabe, T., Hiratsuka, A., Ozawa, N., Isobe, M., 1981. Un estudio comparativo sobre el
tabolismo de D-limoneno y 4-vinilciclohex-1-eno por microsomas hepáticos.
Xenobiotica 11, 333–344.
Webb, DR, Ridder, GM, Alden, CL, 1989. Nefrotoxicidad aguda y subcrónica de D-
limoneno en ratas fischer 344. Food Chem. Toxicol. 27, 639–649.
Webb, DR, Kanerva, RL, Hysell, DK, Alden, CL, Lehman-McKeeman, LD, 1990.
Evaluación de la toxicidad oral subcrónica del D-limoneno en perros. Food Chem.
Toxicol. 28, 669–675.
OMS, 2005. Serie de informes técnicos de la OMS; 928. Evaluación de ciertos aditivos alimentarios:
Sexagésimo tercer informe del Comité Mixto FAO / OMS de Expertos en Aditivos Alimentarios. págs.
64–72.
Willrodt, C., David, C., Cornelissen, S., Buhler, B., Julsing, MK, Schmid, A., 2014.
Ingeniería de la productividad de Escherichia coli recombinante para la formación de limoneno a
partir de glicerol en medios mínimos. Biotechnol. J. 9, 1000–1012.
Wolkoff, P., Schneider, T., Kildesø, J., Degerth, R., Jaroszewski, M., Schunk, H., 1998.
Riesgo en la limpieza: exposición química y física. Sci. Entorno total. 215, 135-156.
Wolkoff, P., Clausen, PA, Larsen, K., Hammer, M., Larsen, ST, Nielsen, DD, 2008.
Efectos agudos en las vías respiratorias de la química del d-limoneno iniciada por el ozono: importancia de los
productos gaseosos. Toxicol. Letón. 181, 171–176.
Wolkoff, P., Clausen, PA, Larsen, ST, Hammer, M., Nielsen, GD, 2012. Efectos en las vías respiratorias
de exposiciones repetidas a productos de oxidación de limoneno iniciados por ozono como modelo
de mezclas de aire interior. Toxicol. Letón. 209, 166-172.
Organización Mundial de la Salud (OMS), 1998. Evaluación química internacional concisa
Documento 5. Limoneno. Programa Internacional de Seguridad Química,
Ginebra, Suiza.http://whqlibdoc.who.int/publications/1998/9241530057.pdf.
Yaws, CL, 1994. The Yaws Handbook of Vapor Pressure. Coeficientes de Antoine. Golfo
Publicaciones profesionales, Houston, Texas.
Yun, J., 2014. El limoneno inhibe la actividad locomotora inducida por la metanfetamina a través de la regulación.
ulación de la función neuronal 5-HT y la liberación de dopamina. Fitomedicina 21,
883–887.
Zhou, W., Yoshioka, M., Yokogoshi, H., 2009. Efectos subcrónicos del s-limoneno en el cerebro
niveles de neurotransmisores y comportamiento de ratas. J. Nutr. Sci. Vitaminol. 55, 367–373.
Zhu, Y., Chen, Z., Yang, Y., Cai, P., Chen, J., Li, Y., Yang, W., Peng, J., Cao, Y., 2015.
Utilizando D-limoneno como disolvente no aromático y no clorado para la fabricación de
diodos emisores de luz poliméricos de alto rendimiento y transistores de efecto de campo.
Org. Electron .: Física, Materiales, Aplicaciones. 23, 193-198.