BIOLOGÍA MOLECULAR

Parte II

GENES Y TÉCNICAS DE ESTUDIO DE

EXPRESIÓN

José Salvador Montaña Lara

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

Especialización en Ortodoncia

Abril 26 de 2021
   ¿Cómo se transmiten las
características observables
de los individuos de padres
a hijos? (Genética)

 Gregor Mendel, 1865

  Herencia en pequeñas unidades discretas

denominadas FACTORES que se combinan
y recombinan transfiriendose de
generación en generación

CONCEPTO DE GEN

  FACTORES ocurren en diferentes

formas: ALELOS

  La
palabra GEN fue acuñada por
W. Johannsen en 1909

  Un
factor (GEN) puede tener
varios alelos

 ¿Dónde se ubican los

genes?

  En los cromosomas

  Tienen posiciones fijas: la posición

especifica de cada gen se conoce
como LOCUS

Mapas de ligamiento cromosomas

Humanos

 Un gen una enzima

George W. Beadle & Edward Tatum, 1941

Un gen una enzima

  “UN GEN, es una secuencia de DNA

que lleva la información para la
síntesis de una enzima. Las
enzimas catalizan las reacciones
celulares”

 Algunas enzimas son complejos de diferentes

polipéptidos, cada uno producido por
diferentes genes...

GEN: Secuencia de DNA que contiene la información

para la síntesis de un polipéptido

  NO todos los polipéptidos son enzimas o parte

de ellas

  TAMBIEN pueden ser elementos estructurales,

transportadores celulares, componentes
sensoriales y elementos reguladores

Entonces!!

 GEN

Un gen es una secuencia ordenada de

nucleótidos en la molécula de ADN (o ARN en
el caso de algunos virus), que contiene la
información necesaria para la síntesis de una
macromolécula con función celular específica,
normalmente proteínas, pero también ARN

Genes que codifican proteínas

Dogma central de la
biología molecular

Codones: Tripletes de
nucleotidos que la maquinaria
de la célula (ribosomas) utiliza
para determinar la secuencia
de a.a. de un polipéptido

Para la síntesis de un
polipeptido siempre hay un
codón de inicio y uno de
terminación: MARCO DE
LECTURA (ORF)

 Genes que codifican proteínas

  Transcripción de un gen codificante

  produce RNA mensajero (mRNA)

PROMOTOR: Región Reguladora

Colinealidad: La secuencia de nucleótidos del gen corresponde a una

secuencia de A A en la proteína

Estructura gen eucariota

 Genes que codifican

proteínas en eucariotas

El gen contiene regiones que no se encuentra

representadas en la proteínas

Estas regiones son removidas del RNA durante la

expresión del gen

GENES INTERRUMPIDOS O FRACCIONADOS

 Genes que codifican

proteínas en eucariotas

  Exones: Secuencias presentes en el mRNA,

colineales a la proteína

  Intrones: Secuencias presentes en el DNA

que se remueven del RNA mensajero
inmaduro o recién transcrito

  - La eliminación de los intrones es un

proceso conocido como “corte y
empalme” (splicing)

  - Los exones se unen para formar una

estructura colineal con las proteínas. Cada
exón codifica para una subunidad proteica

  - Levaduras no poseen genes interrumpidos

  - Los exones son altamente conservados, los

intrones varían enormemente en longitud y
número

 Corte y Empalme Alternativo

Ensamblaje diferencial de los exones: variedad

de proteínas partiendo del mismo grupo de
exones

 GEN

  GEN: Secuencia de DNA que codifica la

síntesis de un polipéptido (proteina) o un
RNA y que incluye las regiones reguladoras,
así estas no se transcriban y traduzcan. En
eucariotas el gen incluye también los
intrones.

Hallazgos de la era genómica

 El genoma humano

GENOMA HUMANO
Genome overview
 El genoma humano

Distribution of the molecular functions of 26,383 human genes

Timeline of large-scale genomic analyses.
 Genes sobrelapantes

  Genes que contiene las secuencias reguladoras de otros genes.

  Genes que se encuentran en el intrón de otro gen

  Presentes en el genoma mitocondrial

Pseudogenes

  Copias no funcionales de los genes, producto de acumulaciones de

mutaciones.

  Pueden transcribirse pero las proteínas que producen son

truncadas.

  Se originan por duplicaciones.

  Pueden ser el resultado de retrotransposones, que carecen de

promotor (región reguladora)

 Familias Génicas

  Grupo de genes relacionados evolutivamente que

codifican para proteínas con secuencias similares.

  Los miembros de una familia provienen de un

único gen ancestral.

  Las familias se originan a partir de la duplicación

de un gen. Los genes divergen cuando se van
acumulando mutaciones

  Los miembros de una familia génica tienen una

organización común.

 Familias de las alfa y beta - globinas

Todos los genes de las alfa y beta globinas , y de las globinas de

mamíferos, aves y anfibios tienen el mismo número y posición de los
intrones

   Superfamilias génicas

Genes relacionados lejanamente pero que aún se identifica un

ancestro común. Superfamilia de las globinas

Mioglobina: Proteína monomérica, animal. Sólo un gen. Almacena

oxígeno

Leghemoglobina: Proteína monomérica presente en plantas

leguminosas. Presenta tres intrones.

alfa y beta globinas: Proteínas heteroméricas con 3 exones y 2

intrones. Forman la hemoglobina tetramérica. Diferentes
hemoglobinas a lo largo de la vida de un vertebrado.

Técnicas para estudiar los genes y su

Expresión

 Técnicas moleculares para estudiar los

genes, sus cambios y su expresión

PCR

ADN

Southern blot

Técnicas para estudiar

la expresión de genes

RT-PCR (qRT-PCR)

Northern blot

Microarrays
ARN

RNAseq

ELISA

Wester blot

Inmunohistochemistry
PROT