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La estructura del ARN y su transcripción

La transcripción del
ADN es un mecanismo
fundamental para el control
celular y para la expresión
de la información genética.
Este mecanismo permite
que la información del ADN
llegue al resto de orgánulos
celulares y salga del núcleo
en el caso de los eucariotas.
Estructura del ARN
1. Está formado por una sola
cadena de polinucleótidos.
2. La molécula de azúcar que
participa en su estructura
es la ribosa.
3. Las bases nitrogenadas que
participan en la estructura
de los nucleótidos son:
adenina, guanina, citosina

y uracilo.
Una célula típica contiene 10
veces más RNA que DNA.
Función del RNA
Dogma Central De La Biología Molecular

Flujo de la información genética:

Por tanto, el mensaje genético se realiza en dos etapas sucesivas,


en las que el ARN es un intermediario imprescindible.
Función del RNA
• Tipos de RNA

– RNAm  su función es copiar el mensaje del DNA y llevarlo hasta los


ribosomas donde se sintetizan las proteínas. El número de nucleótidos
que posee el RNAm depende del tamaño de la proteína que se vaya a
sintetizar.

– RNAt  es el responsable de llevar a los aminoácidos desde el medio


ambiente celular hasta el interior del ribosoma, ubicándolo en el lugar
exacto de acuerdo a la secuencia que dicta el mensaje del RNAm.

– RNAr  se sintetiza en el nucleolo y constituyen el 80% del RNA celular


total; participa en la estructura de los ribosomas y en la formación del
enlace peptídico que ensambla a los aminoácidos durante la síntesis de
proteínas; además, es el responsable de la estructura acanalada del
ribosoma.
RNAm

Lleva el mensaje para la


síntesis de proteínas
ARN mensajero (ARNm)
• Copia de una parte del ADN
• Lleva las instrucciones para hacer una
proteína en particular, desde el ADN en el
núcleo hasta los ribosomas →
• Información utilizada por los ribosomas
para unir los a.a en el orden adecuado y
formar una proteína concreta.
• Vida muy corta.
• 3-5% del ARN celular.
• Las moléculas de ARNm se disponen
según el código contenido en el
ADN
Maduración de ARNm
RNAr

Participa de la
estructura de los
ribosomas
ARN ribosómico (ARNr)

 Forma parte de los ribosomas


(junto con un conjunto de
proteínas básicas).
 También se denomina ARN
estructural.
 Participa en el proceso de unión
de los a.a para sintetizar las
proteínas.
 80-85% del ARN celular total
Maduración de ARNr
Los procariotas → tres
rRNA (16S, 23S y 5S), que
se forman por el corte de
un pre-ARNr.

Los eucariotas → cuatro


ARNr. (el 5S ARNr se
transcribe por separado) y
los otros tres (18S, 28S y
5.8S) se derivan de un
común pre-ARNr.
RNAt

Portador de los aa
durante la traducción o
síntesis de proteínas
ARN transferencia (ARNt)

• Transporta los a.a hasta los


ribosomas.
• Cada molécula de ARNt
transporta un a.a específico.
• 10% ARN celular.
• Forma: 4 brazos, 3 con bucles
en los extremos, en el otro
 extremo 3’
 extremo 5’
Maduración de ARNt

Corte en el extremo 5 'del ARNt,


catalizada por la ribozima RNAasa
P, proteína RNAasa convencional.

 Se añade una terminación CCA


al extremo 3‘ de muchos ARNts en
una etapa de maduración
postranscripcional.

 Se modifican algunas bases en


determinadas posiciones dentro
de la molécula de ARNt.
Transcripción

• Transcripción = síntesis de ARN.


• Ocurre en el interior del núcleo.
• Necesita:
– Una cadena de ADN que actúe como molde.
– Enzimas: ARN-polimerasa.
– Ribonucleótidos trifosfato de A, G, C y U.
• Proceso:
– Iniciación
– Elongación
– Terminación
Transcripción en procariotas

• E. coli:
– Primer ARNm descubierto
– ARN polimerasa fue aislada y
purificada
– Mecanismo básico de transcripción
– Regulación de la expresión génica
posibilita al organismo responder a
cambios en su entorno.
– Fue y sigue siendo la base para los
estudios en eucariotas.
Transcripción en procariotas
(ARN Polimerasa)

• No requiere cebadores.
• La transcripción empieza de novo en secuencias especificas al inicio
de los genes.
• RNA polimerasa: Es una enzima compleja compuesta de múltiples
cadenas polipeptidicas compuestas de 6 subunidades:
– 2 Subunidad α
– Subunidad β
– Subunidad β`
– Subunidad σ
Subunidad Gen Número Función
α rpoA 2 Se une a secuencias
reguladoras
β rpoB 1 Forma enlaces fosfodiéster
Β’ rpoC 1 Se une al DNA molde
σ rpoD 1 Reconoce el promotor e inicia
la síntesis
Transcripción en procariotas
Mecanismo…
Iniciación: la subunidad σ70 de la
RNA-polimerasa localiza en el
DNA los centros de iniciación
• Existen dos tramos de
secuencias comunes más allá del
lado 5’ del punto de iniciación.
• Secuencia -10  TATAAT
• Secuencia -35  TTGACA
• Hebra molde (antisentido) Hebra
codificadora (con sentido).
• El DNA debe ser desenrollado
para que sirva de molde.
Mecanismo…

• σ se une específicamente a
la secuencia de las regiones
promotoras -35 y -10.

• La ARN polimerasa se une a


los promotores en una
región de 60 pb (-40 a +20)

• El conjunto formado entre


la polimerasa y el promotor
se denomina complejo
promotor cerrado ADN
enrrollado)
Elongación: La RNA-polimerasa pierde la subunidad σ y se une más
fuertemente al DNA.
• El complejo enzimático continúa añadiendo ribonucleótidos
complementarios al DNA hasta que se llega a señal de terminación.
• La velocidad de síntesis es de unos 50 nucleótidos por segundo.
• la RNApol no contiene actividad reparadora por lo que la fidelidad de
la transcripción es mucho menor que la de la replicación.
Transcripción en procariotas
(elongación)
Terminación:
• Cesa la formación de enlaces
fosfodiéster.
• Se disocia el hibrido DNA-RNA.
• Se rebobina la región separada del
DNA.
• Se libera la RNApol.
• Señales de terminación
• Región palindrómica rica en GC
seguida de una región rica en AT.
• Residuos de poliU.
Terminación:
• Proteína RHOρ  detecta señales de
terminación adicionales que no son
reconocidas por RNApol sola. Esta
enzima rompe la hélice híbrida y libera
al RNA.
Procesamiento del RNAm en eucariotas

SPLICING
Figure 6-21b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Figure 6-21a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
ARN Polimerasas Eucarioticas
• En Bacterias todos los genes se transcriben por medio de una
ARN polimerasa única.
• En Eucariotas hay varias ARN polimerasas distintas que
transcriben distintas clases de genes.
• Además interaccionan con un conjunto de proteínas específicas
para iniciar la transcripción.
• Esta complejidad facilita y posibilita la sutileza en la regulación
génica –necesaria- para dirigir las actividades de células en
organismos pluricelulares !!!!!
ARN Polimerasas Eucarioticas
Tipos de genes transcriptos por ARN polimerasas eucariotas
Tipos de ARN sintetizados ARN polimerasa
ARNm II
miARN II
ARNt III
ARNr 5.8S, 18S, 28S I
ARNr 5S III
snARN II y III
Genes mitocondriales Mitocondriales
Genes cloroplasmáticos Cloroplásticos
Traducción de la información genética

• El ensamblaje de una molécula de proteína de acuerdo con el


código de una molécula de ARNm, se conoce como traducción.

• Está compuesto por ”palabras” de tres letras denominas CODONES.

• Las cuatro bases A, C, G, T, se unen en “palabras” de tres letras (AGC,


CGT y así sucesivamente) y se obtienen 64 grupos o “palabras”
diferentes.

• Las 64 combinaciones son suficientes para codificar los 20 aminoácidos


diferentes.
El código genético
• Las sucesiones de tres bases se
llaman tripletes o codón.

• Cada codón codifica en el ARNm


para un solo tipo de aminoácido.

• La mayoría de los aminoácidos se


codifican por más de un triplete.

• El código genético es universal.

• 64 codones, 1 de iniciación
(AUG), 3 de terminación (UAA,
UAG, UGA) de la traducción y 61
para los 20 aminoacidos.
El código genético
Traducción: Síntesis de proteínas
Las proteínas son los productos finales de la mayoría de las rutas
informativas y su síntesis es uno de los más complejos mecanismos
biosintéticos.

• Se requiere:
– RNAr, RNAt, RNAm.
– Proteínas ribosómicas.
– Aminoácidos
– Enzimas
– Factores proteicos

• Consume el 90% de la
energía química utilizada
por la célula en todas las
reacciones biosintéticas).
Ribosomas
• Los ribosomas proporcionan
el ambiente adecuado para
controlar la interacción entre
el RNAm y el RNAt.

• El ribosoma se comporta
como una pequeña fábrica
migratoria que viaja a lo largo
del molde.

• Permite la formación de una


cadena polipeptídica a partir
de la información contenida
en un RNAm.
Ribosomas
Ribosomas
En el ribosoma se distinguen tres sitios que están relacionados con la entrada
y salida al mismo tiempo de algunas moléculas que intervienen en el proceso:

• Sitio A (aminoacil): Sitio definido


para la entrada de aminoácidos
que se van añadiendo. Encargado
de reconocer al RNA mensajero y
ubicarse en sitio adecuado para la
traducción

• Sitio P (peptidil): Donde se une la


cadena de polímeros.

• Sitio E (liberación): Es el de
salida.
ARN mensajero
• La secuencia de una cadena codificadora de ADN consta de tripletes de
nucleótidos.
• La secuencia de codones se corresponde con la secuencia de aminoácidos
de la proteína.
• De manera que la información genética se almacena en forma de codones
(ARN) donde cada codón representa un aminoácido (Proteína).
ARN mensajero
Polisistrón - Monosistrón

Los ARNm procariotas son polisistrónicos .

Eucariotas son generalmente monocistrónicos


ARN transferencia
• La secuencia del ARNm es
reconocida por el lazo
anticodón, localizado
en el otro extremo de la
molécula de ARNt plegada,
el cual se une al codón
adecuado por
complementariedad de
bases.

• Los ARNt llevan a los


aminoácidos a los
ribosomas durante la
traducción, para ser
ensamblados en una
cadena polipeptídica.
Traducción: Síntesis de proteínas
– Tres partes
• Iniciación
– Uniòn de la unidad menor y
mayor del ribosoma
– tRNA inicial
– Codón Inicial
•Extensión
– Incorporan los amino ácidos.
– Formaciòn del enlace
péptidicoo
•Terminación
– Codón Final
– Culmina el proceso de
traducción.
Traducción: Síntesis de proteínas
Traducción: Inicio
• La subunidad ribosómica más pequeña se une al extremo 5' de una
molécula de RNAm
• La traducción siempre comienza con el a.a metionina normalmente
codificado por la tripleta AUG
Traducción: Elongación
• Acoplamiento perfecto entre el aminoácido, el anticodón y el
codón.
– Requiere energía
• Proceso envuelve cuatro pasos.
– Unión de tRNA-aa en el sitio A del ribosoma.
– Verificación de que es el tRNA-aa correcto.
– Formación del enlace péptido
– Translocación
• Adelantar el mRNA un codón.
• Mover la cadena peptídica-tRNA del lugar A al lugar P en
el ribosoma.
• Ocurre en la cavidad entre las unidades del ribosoma.
Elongación de la cadena
poli peptídica
Traducción: Terminación

Un codón de terminación (UAA) en el sitio A es reconocido por


factor de liberación en vez de un ARNt, el resultado es la liberación
de la cadena polipetídica completa, seguido de la disociación del
ARNt y ARNm del ribosoma
Traducción en una célula procariota
Traducción en una célula eucariota
Ejercicio
A partir de la siguiente secuencia molde:

3’-TACCCATGGCAATTGCGATGACAAGTCTCAATT-5’

Determine:

• A qué tipo de ácido nucleico pertenece

• Cómo es la secuencia codificadora

• Cuál es la secuencia del RNAm transcrito

• Cuáles son los codones

• Cuáles son los anticodones

• Cómo quedaría el péptido fabricado a partir de ese DNA


ENLACES DE Interés

• Transcripción DNA
– http://www.youtube.com/watch?v=P4MLjyZasJo
• Traducción de Proteínas
– http://www.youtube.com/watch?v=stb1KGHivJo
– http://www.youtube.com/watch?NR=1&feature=endscreen
&v=fC_h0zWM1us

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