Kimberly Andújar 1070543

REPORTE DE PRACTICA IV

MEDIOS DE CULTIVO, METODOS DE SIEMBRA Y MICROBIOTA

NORMAL

ACTIVIDADES:

1. Medios de cultivo más utilizados, explicar sus usos, tipos y clasificación.

-Medios selectivos:

Como dijimos, los medios selectivos son esos caldos o agares que estimulan el incremento de una
o unas especies de bacterias específicas e inhiben el de las demás. O sea, dichos medios selectivos
son los que se aplican una vez que deseamos aprender una muestra en la que comprendemos que
habrá muchas sociedades bacterianas diversas, sin embargo, solo nos atrae recobrar una.
Imaginemos que estamos haciendo un trabajo en un laboratorio de microbiología clínica y nos
llega una muestra de una mucosa de una persona que, presuntamente, tiene una pulmonía. Si
usáramos un medio poco selectivo, en este medio crecería definitivamente todo, o sea, no solo el
patógeno que buscamos, sino además los que componen nuestro microbiota. En este entorno, usar
un medio selectivo que inhiba las bacterias de nuestro microbiota y estimule solo el de la viable
especie patógena (muchas veces, ya sembramos con la intención de hallar una especie concreta,
puesto que la mayor parte de cuadros clínicos permanecen generados casi constantemente por las
mismas especies de gérmenes) es la mejor, por no mencionar la exclusiva elección.

Agar MacConkey

El agar MacConkey es un medio de cultivo que inhibe el aumento de las bacterias gram positivas
y estimula la reproducción de los bacilos gram negativos, los cuales acostumbran estar detrás de
infecciones urinarias, diarreas, patologías gastrointestinales, bacteriemias (bacterias en la sangre),
peritonitis e inclusive el tifus, el cólera o la peste.

Agar sangre

Como su propio nombre sugiere, el agar sangre dispone de sangre en su estructura, la cual
frecuenta ser de ovejas, caballos o, en ocasiones, humanos. Es usado para aprender la funcionalidad
hemolítica de diversos patógenos, o sea, su capacidad para eliminar los eritrocitos (glóbulos rojos)
una vez que transitan por el torrente sanguíneo. Dependiendo de lo cual agreguemos, dejará el
aumento de unas especies específicas, siendo un medio bastante selectivo.
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Agar chocolate

El agar chocolate es el medio de cultivo que se recibe al calentar el agar sangre. Sea como sea, el
más usado es ese en el cual se incorpora vancomicina (un antibiótico) y diversos nutrientes para
excitar el aumento sólo de “Neisseria gonorrhoeae” y “Neisseria meningitidis”, bacterias causantes
de la gonorrea y meningitis, respectivamente.

Agar Sabouraud

El agar Sabouraud es un medio de enriquecimiento y aislamiento de diversas especies de hongos,

levaduras y mohos. Por consiguiente, es eficaz una vez que no deseamos identificar bacterias (de
elaborado, poseen diversos antibióticos para impedir su desarrollo), sino esta clase de
microorganismos, sean patógenos o no.

Caldo tetrationato

El caldo tetrationato es un medio líquido (a diferencia de los agares firmes que hemos ido viendo)
que tiene sales biliares y otras sustancias inhibitorias que impiden el desarrollo de las bacterias
gram positivas y el de varias gram negativas, puesto que solo nos atrae que crezcan las bacterias
que disponen de una enzima definida, que es la tetrationato reductasa (de allí el nombre). Este
medio de cultivo es bastante eficaz, puesto que, para el confinamiento de colonias de “Salmonella”,
responsable de patologías de transmisión alimentaria.

Caldo selenito

El caldo selenito es otro medio de cultivo líquido para la cuarentena de “Salmonella”, aun cuando
en esta situación su procedimiento de acción no se fundamenta en identificar la enzima anterior,
sino en inhibir (mediante el selenito) el aumento de otras bacterias presentes en nuestro tracto
gastrointestinal.

Agar EMB

El agar EMB es un medio de cultivo sólido bastante eficaz para la cuarentena de enterobacterias,
o sea, esas que habitan de manera natural nuestros propios intestinos empero que, frente a
determinadas situaciones, tienen la posibilidad de pasar a actuar como patógenos. “Escherichia
coli” es el claro ejemplo de eso, y, además, este medio posibilita que se observen precisamente sus
colonias, las cuales desarrollan un color brillante negro verdoso.

Agar SS

El agar SS es un medio de cultivo sólido usado para la cuarentena de, además de “Salmonella”,
“Shigella”, una bacteria que comúnmente se transmite por medio de alimentos o agua contaminada
y que causa una infección que cursa con diarrea (la cual frecuenta contener sangre), fiebre y dolor
abdominal.
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Agar Vogel-Johnson

El agar Vogel-Johnson es un medio de cultivo sólido creado para el confinamiento de

“Staphylococcus aureus”, una bacteria que puede provocar varios tipos de infecciones diversas, a
partir de patologías de la dermis (es lo más común) hasta infecciones óseas, pasando por
neumonías, bacteriemias, endocarditis (infección del corazón) e intoxicaciones alimentarias.
Inhibe el incremento de cada una de las gram negativas y el de varias gram positivas.

Agar manitol sal

El agar manitol sal, además conocido como manitol salado, es un medio de cultivo sólido que
todavía es usado para el confinamiento de “Staphylococcus aureus”, aun cuando en esta situación
el poder inhibitorio sobre lo demás de bacterias es más profundo. O sea, es más selectivo que el
anterior.

Agar BCYE

El agar BCYE es un medio de cultivo sólido en especial creado para el confinamiento de

“Legionella” y “Nocardia”, 2 géneros de bacterias causantes de una neumonía grave
(potencialmente mortal) y de una infección pulmonar que puede esparcir, en personas
inmunodeprimidas, a otros órganos (piel, cerebro, corazón…), respectivamente.

Agar BHIEl

Agar BHI es un medio de cultivo sólido que vuelve a servir para el confinamiento de hongos, aun
cuando en esta situación se concentra en la detección de esos que trabajan como patógenos. Otra
vez, dispone de diversos antibióticos para inhibir el incremento de las bacterias.

Agar Baird-Parker

El agar Baird-Parker es un medio de cultivo sólido creado para la cuarentena de “Staphylococcus

aureus”, aun cuando en esta situación posibilita el aumento de otras especies de estafilococos,
continuamente que sean coagulasa positivos, o sea, que dispongan de esta enzima exitosa como
coagulasa.

Caldo EC

El caldo EC es un medio de cultivo líquido creado para permitir el incremento de coliformes, un

conjunto de diversos géneros de bacterias que sirven como indicador de la contaminación fecal
tanto de aguas como de alimentos.

Agar verde brillante

El verde brillante es una sustancia inhibidora que impide el aumento de cada una de las bacterias
ran positivas y de la mayor parte de ran negativas. En este sentido, el agar verde brillante es
un medio de cultivo sólido usado para la cuarentena de diversas especies de “Salmonella”
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Agar TCBS

El agar TCBS es un medio de cultivo sólido que tiene Tiosulfato, Citrato y Sales Biliares. De allí
el nombre. Sea como sea, estas sustancias estimulan el aumento selectivo de diversas especies de
“Vibrio”, un género bacteriano que causa patologías gastrointestinales y donde destaca “Vibrio
cholerae”, responsable del cólera.

Medios diferenciales

Los medios diferenciales son esos en los cuales permitimos el incremento de diversas sociedades
bacterianas, sin embargo, debido a las características del medio, tenemos la posibilidad de
distinguirlas entre ellas. Induciendo a las bacterias presentes en la muestra a desarrollar diversas
actitudes químicas, las cuales se manifestarán con un cambio de color en nuestro medio de cultivo
o con la observación de fenómenos como la movilidad de colonias o la formación de gas. De esta
manera tenemos la posibilidad de distinguir especies de bacterias.

Medio TSI

El medio TSI es un medio de cultivo diferencial en el cual se busca decidir la función de la bacteria
para degradar el sacarosa y conformar gas y sulfuros de hidrógeno. Dependiendo de lo cual
observemos (hay perfiles que nos permiten equiparar y saber frente a qué nos encontramos), vamos
a poder decidir qué bacteria había en la muestra.

Citrato de Simmons

El citrato de Simmons es un medio de cultivo diferencial eficaz para, valga la redundancia,

distinguir entre diversas especies de coliformes. El medio se fundamenta en decidir la función de
las bacterias para usar el citrato como fuente de carbono. Si no es capaz de usarlo, el medio se
mantendrá verde. Empero si es capaz, pasará a ser azul.

Caldo urea

Caldo urea es un medio de cultivo diferencial que posibilita, otra vez, distinguir entre diversas
especies. Se fundamenta en establecer la función de la bacteria de degradar la urea. Si labacteria
tiene la enzima elemental, el color pasará a ser rojo, mientras tanto que si no dispone de ella, se
mantendrá en el color original.

Medio SIM

El medio SIM es un medio de cultivo diferencial que establece la función de la bacteria para
conformar indol (un compuesto químico orgánico), crear sulfuro de hidrógeno y desplazarse.
Dependiendo del perfil obtenido, estaremos frente a una especie u otra.
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2. Describir los métodos de siembra más comunes.

Siembra por inmersión: se sitúa el inóculo en una placa o caja de Petri y sobre el mismo se vierte
el medio de cultivo antes fundido. Este procedimiento se usa para microorganismos aerobios.

Siembra en doble capa: se viene de la misma forma que por inmersión. Una vez solidificado el
medio se vierte una porción extra de medio fundamental para cubrir la capa anterior (generalmente
10 ml. aproximadamente.). Este procedimiento se usa para microorganismos anaerobios
facultativos y microaerofílicos.

Siembra en área: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido, se deja solidificar
y se sitúa sobre el área el inóculo. Con ayuda de una espátula de Drigalsky se alarga el inóculo
hasta su absorción total por el medio de cultivo. Esta clase de siembra se sugiere para
microorganismos aerobios precisos.

Siembra en estría: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido y se deja
solidificar. Siembra volumétrica: Este procedimiento de siembra se basa en plantar una muestra
líquida cuyo volumen no podría ser establecido, a lo largo de cultivo firmes o líquidos.

Siembra masiva: Una vez que se quiere hacer una siembra masiva se puede usar la espátula de
Driglaski. En esta situación la gota de muestra liquida se esparce con la espátula por toda el área
del medio de cultivo sólido imprimiendo un desplazamiento en espiral. La siembra masiva además
se puede hacer con un hisopo grueso embebido de un cultivo líquido, procediendo a su
deslizamiento sobre toda el área de una placa de agar.

Siembra por dilución: Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo sencillo. Se
toma el material a diluir y se siembra en el tubo con la utilización del asa cargada con el material
bacteriológico, se sacude, con movimientos moderados.

Siembra por estrías en área: Se siembra el material en el área del agar inclinado en un tubo de
ensayo, ahí se alarga por toda el área con el asa bacteriológica, anteriormente esterilizada y cargada
con el material a plantar, realizando estrías no bastante amplias, empero tampoco bastante
estrechas. Se inicia por la parte más intensa del área inclinada y se finaliza la estría en la parte más
alrededor de la boca del tubo.

Siembra por punción: Como es obvio, el instrumento de siembra a ocupar va a ser la aguja de
platino y el medio de cultivo sólido, principalmente, en tubo de ensayo. Las manipulaciones y la
observancia de las precauciones de asepsia, son semejantes que una vez que se usa el asa. La
particularidad que tiene este procedimiento, es que la aguja (con el inoculo) debería atravesar
perpendicularmente el medio de cultivo.
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3. Explicar el concepto de microbiota normal, su función y los lugares del
organismo donde habita, 2 ejemplos por zonas.

El concepto “microflora normal” tiene relación con la población de microorganismos que vive en
la dermis y mucosas de los individuos sanas. Se calcula que el número de microorganismos que
viven dentro de las personas (ahora denominados microbiota normal) es 10 veces más grande que
el número de células somáticas y germinativas. Los genomas de dichos simbiontes microbióticos
se llaman en grupo, microbioma. La averiguación demostró que la “microbiota normal” da la
primera línea de protección contra los microorganismos patógenos, ayuda a la digestión, participa
en la degradación de toxinas y auxilia a la maduración del sistema inmunitario. Los cambios en
este microbiota usual, o la inflamación asignada por dichos comensales, producen patologías como
la patología inflamatoria intestinal. Se puede descubrir microbiota común en intestino, pulmón,
boca, piel, vagina, etcétera.

IV.1. DIBUJE Y NOMBRE TODOS LOS MEDIOS DE CULTIVOS

MENCIONADOS EN LA PRÁCTICA. DESCRIBA LAS
CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS IDENTIFICADAS EN SU
CULTIVO.

En la practica realizada en el laboratorio no tuvimos la oportunidad de observar las siembras del

cultivo después de la incubación.
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IV.2. REALICE UNA MATRIZ CON UNA LISTA DE LOS
MICROORGANISMOS QUE CONFORMAN LA MICROBIOTA NORMAL
POR SITIO ANATÓMICO Y CLASIFIQUE SEGÚN LA TINCIÓN DE
GRAM.

MICROBIOTA
LUGAR ANATÓMICO HABITANTE TINCIÓN DE GRAM
Staphylococcus epidermis Positiva

Piel

Lactobacillus Positiva

Genitales

Vibrio Negativa

Gastrointestinales

Nasofaringe Difteroides Negativo

Pseudomonas Negativo
Oido externo

Treponema spp Negativo

Boca

Uretra Difteroides Positivo